CN103513023A - 一种以edta抗凝血进行凝血相关功能检测的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明是一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，本发明属于医学体外诊断行业领域。该发明方法使得EDTA抗凝血不仅可以用于血液分析仪对血液细胞计数，同时还可以用于血小板聚集及其它凝血功能的检测。

Description

一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法
一、技术领域
本发明涉及以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，该发明方法使得EDTA抗凝血不仅可以用于血液分析仪对血液细胞计数分析，同时还可以用于血小板聚集等检测。本发明属于医学体外诊断行业领域。
二、背景技术
EDTA(乙二氨四乙酸二钾)抗凝血是一种常用于临床血样常规检查的抗凝血制备方式，尤其适合血液细胞分析对血样分析，可以获得满意细胞计数效果。国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年将EDTA建议作为血液细胞计数的抗凝剂。但由于EDTA具有较强的对钙离子的螯合作用，使得EDTA抗凝血按照常规操作无法用于血小板聚集功能检测及其它凝血功能检测。本发明方法使得EDTA抗凝血不仅可以用于血液分析仪对血液细胞计数，同时还可以用于血小板聚集及其它凝血功能的检测。
三、发明内容
一般医学凝血试验均采用枸橼酸抗凝剂制备抗凝血样用于凝血相关试验。但是，枸橼酸抗凝血制备的血样在血液分析仪进行血小板计数检测时稳定性较差。为了使同一份抗凝血样既可以用于血细胞计数分析，又可以用于凝血功能检测。本发明设计了一种利用EDTA抗凝血进行凝血相关分析试验的方法。该方法的原理是，由于EDTA制备抗凝血时，EDTA络合了血样中的钙离子，使得血样不具备凝血功能。在将该血样进行凝血功能检测时，预先在血样中加入含钙离子试剂或在加入的诱聚剂或凝血试剂中加入足够的钙离子，使得血样中拥有足够的钙离子，使血样恢复凝血功能，因此可以进行凝血相关试验。
四、具体实施例
具体实施例一：
以血小板计数法检测血小板聚集功能方式为例，该方法的具体操作流程为：在收集新鲜血样时按照常规的比例(每1ml全血加入0.8mgEDTA)制备抗凝血，而后用此EDTA抗凝血进行血小板计数，获得血样中原始的血小板数量，而后在血样中加入含钙离子诱聚剂，加入的氯化钙的最终含量＞2.0mmol/L。正常血样在加入含钙诱聚剂后血样中血小板开始聚集，通过检测聚集后的血小板数量即可做出血小板聚集率判断，而不加钙离子单纯加诱聚剂正常血样则不发生血小板聚集，说明常规EDTA抗凝血在不另加入钙离子条件下血样无聚集功能。使用该EDTA抗凝血进行其它凝血试验也可以参照此方式在血样中加入钙离子，使得血样具有凝血功能。
表1  用EDTA抗凝血样通过检测血小板数量观察凝血功能统计表
Figure BSA00000737218800021
*说明：1.采血为EDTA真空抗凝管，每只采集2ml；
2.含钙诱聚剂主要成份：ADP(二磷酸腺苷)，使用终浓度为5umol；氯化钙，使用最终钙离子浓度大于2.0mmoL/L；PH7.0磷酸盐缓冲液配制；渗透压300mOsm/kg。
3.无钙诱聚剂主要成份：ADP(二磷酸腺苷)，使用终浓度为5umol；氯化钙，使用最终钙离子浓度大于2.0mmoL/L；PH7.0磷酸盐缓冲液配制；渗透压300mOsm/kg。
本试验结果说明，加诱聚剂与原始血小板数变化比例平均值为4.28％，加入含钙诱聚剂后血小板计数与原始血小板数变化比例平均值为64.69％，对比前后的数值得出EDTA抗凝血在加入钙离子后，可以恢复凝血功能。而不加入钙离子的EDTA抗凝血样不具有凝血功能。
具体实施例二：
采得的五份EDTA抗凝血，制备成血浆后每一份同时分成二份成为二组，其中一组加入含氯化钙PT(凝血酶原时间测试)试剂，另一组加入加入等量不含钙PT(凝血酶原时间测试)试剂等。二组样本在加入PT(凝血酶原时间测试)试剂5分钟后观察二组血浆凝固状况。结果统计如下：
表2  用EDTA抗凝血样加PT(凝血酶原时间测试)试剂得血小板数量观察表
  编号   加氯离子组   无钙离子组
  1   凝固   不凝固
  2   凝固   不凝固
  3   凝固   不凝固
  4   凝固   不凝固
  5   凝固   不凝固
*说明EDTA抗凝血浆在加入钙后，可以恢复凝血功能。即EDTA抗凝血在加入钙离子后，可以进行凝血功能相关检测试验。
具体实施例三：
在EDTA抗凝全血中加入钙离子，静止10分钟，血样也全部发生不同程度的凝固。

Claims (5)

1.一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，其特征是：该方法使用EDTA抗凝血为样本，在进行凝血相关试验前或加入其它凝血试剂的同时，向血样中加入一定量的钙离子，可使得血样恢复凝血功能，从而进行凝血功能检测。
2.根据权利要求1所述的一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，其特征是：该血样在进行凝血功能检测时血样中所加入钙离子的浓度大于2.0mmoL/L。
3.根据权利要求1所述的一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，其特征是：该血样可以进行血小板聚集试验，以及其它凝血检测试验(PT凝血酶原时间测试、APTT活化部分凝血活酶时间测试、TT凝血酶时间测试、FIB纤维蛋白元时间测试等)。
4.根据权利要求1所述的一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，其特征是：该血样进行凝血功能试验时加入的钙离子试剂，可以是单独组分或与其它凝血试剂共同加入到血样中，促进凝血过程。
5.根据权利要求1所述的一种以EDTA抗凝血进行凝血相关功能检测的方法，其特征是：该方法可以直接单纯使用钙离子试剂进行凝血功能检测。通过相同钙离子试剂的加入，检测血样的凝固水平、速度等，实现对血样凝血功能的评价。
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