CN103384535B - 植入材料的制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明的植入材料的制造方法包括：步骤(A)：将具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料设置于容器内任意深度位置的步骤，步骤(B)：用至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体填充所述容器的步骤，和步骤(C)：在沿着所述容器的轴的方向上对所述容器施加离心力的步骤。

Description

植入材料的制造方法

技术领域

本发明涉及植入材料的制造方法、用于该方法的工具以及由所述方法制造的植入材料。 

背景技术

在陶瓷材料中，磷酸钙系陶瓷材料是骨和牙齿的主要成分，其具有优异的生物相容性，并且在安全方面优异。因此，其作为生物材料受到广泛的使用和研究，例如，作为植入活体中的医学或牙科植入材料如人造骨、人造牙根等，用于再生医学等的细胞培养用支架，药物递送***（DDS）用的药物载体等。 

然而，当骨缺损大时，难以用单一的陶瓷材料来修复骨。此外，修复功能比骨低的软骨部分的修复也困难。 

在这样的背景下，正在进行植入材料的开发，该植入材料中，具有组织修复能力的细胞如骨髓来源的间充质干细胞等接种于多孔陶瓷材料上。 

在这样的植入材料中，当将具有组织修复能力的骨髓来源的细胞接种于多孔陶瓷材料上时，需要从骨髓血液中去除组织再生所不需要的红细胞，并仅接种浓缩状态下的有用细胞如干细胞等。 

作为接种有细胞的植入材料的制造方法，已知：（1）滴加含培养细胞的液体的方法，（2）将多孔体浸于含细胞液体中的方法，（3）以活塞等对包含含细胞液体和多孔体的气密容器施加压力的方法，（4）对包含含培养细胞的液体和多孔体的容器施加离心力的方法等。 

例如，专利文献1-4描述了利用离心力的接种方法。在1和4中，接种从患者收集并培养的细胞，而在2和3中，将所有细胞接种到材料上，其中液体中的细胞分布状态不能被控制。 

在专利文献5中，公开了下述方法，其包括将多孔体以与液体共存的状态置于容器中，在容器内表面上滑动活塞以使液体预先渗入多孔体中，并且接种培养细胞。然而，即使该方法也不能控制细胞的分布状态。因此，难以通过常规已知的方法选择性接种浓缩状态下的液体中的细胞。 

[文献列表] 

[专利文献] 

专利文献1：JP-A-2002-282285 

专利文献2：JP-A-2003-319953 

专利文献3：JP-A-2005-137478 

专利文献4：JP-A-2005-40060 

专利文献5：JP-A-2006-25635 

发明简述 

本发明要解决的问题 

本发明是鉴于上述情况而完成的，其要解决的问题是提供植入材料的制造方法，该方法包括将有用细胞接种于多孔陶瓷材料上，同时控制含细胞液体如骨髓血、外周血等中的有用细胞的分布状态（特别是浓缩状态下的含细胞液体中的有用细胞），以将组织（特别是骨组织或软骨组织）快速导入多孔陶瓷材料中，而不用预先收集和培养有用细胞，并提供用以实施该方法的制造植入材料的工具以及制造植入材料的工具包。 

解决问题的方法 

为了解决上述问题，本发明采用下述构成。 

[1]植入材料的制造方法，其包括 

步骤（A）：将具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料设置于容器内任意 深度位置的步骤， 

步骤（B）：用至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体填充所述容器的步骤，和 

步骤（C）：在沿着所述容器的轴的方向上对所述容器施加离心力的步骤。[2]上述[1]的制造方法，其中在步骤（A）中，设置所述多孔陶瓷材料以使所述实质上单向排列的孔的长轴沿着所述容器的轴。 

[3]上述[1]或[2]的制造方法，其中在步骤（C）中将所述离心力控制在100×g-2000×g。 

[4]上述[1]或[2]的制造方法，其中在步骤（C）中离心所述含细胞液体而形成血沉棕黄层。 

[5]上述[4]的制造方法，其中在步骤（A）中，设置所述多孔陶瓷材料以使其至少一部分与在步骤（C）中产生的血沉棕黄层相接触。 

[6]由上述[1]至[5]中任一项的制造方法获得的植入材料。 

[7]制造植入材料的工具，其包括 

能够容纳至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体、以及多孔陶瓷材料的容器，与 

多孔陶瓷材料定位装置，其具有允许前述含细胞液体中的细胞通过的通孔，该定位装置用于将前述多孔陶瓷材料设置于前述容器内任意深度位置。 

[8]制造植入材料的工具包，其包括 

多孔陶瓷材料， 

能够容纳至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体、以及前述多孔陶瓷材料的容器，以及 

多孔陶瓷材料定位装置，其具有允许前述含细胞液体中的细胞通过的通孔，该定位装置用于将前述多孔陶瓷材料设置于前述容器内任意深度位置。 

[9]上述[8]的工具包，其中所述多孔陶瓷材料为具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料。 

发明效果 

根据本发明，因为可以将对骨组织形成或软骨组织形成有用的细胞浓缩并接种于多孔陶瓷材料内部，因而可以方便且高效地制造特别适合作为骨软骨填 充材料等的植入材料。 

附图简述 

图1是多孔陶瓷材料定位装置的一个实施方式的示意图，其用于本发明植入材料的制造方法，将多孔陶瓷材料设置于容器内任意深度位置。 

图2是通过使用图1的定位装置设置于容器内任意深度位置的多孔陶瓷材料的示意图。 

图3是状态示意图，其中在本发明的植入材料制造方法中，多孔陶瓷材料设置于容器内以使其下端与血沉棕黄层相接触，容器中填充有骨髓血和/或外周血，并且血沉棕黄层通过离心形成。 

图4是图3主要部分的放大视图。 

图5显示了SEM观察的、实施例中所制造材料的横截面图像。 

图6显示了SEM观察的、比较例1中所制造材料的横截面图像。 

图7显示了SEM观察的、比较例2中所制造材料的横截面图像。 

具体实施方式

下面参考其实施方式解释本发明。 

本发明中所使用的多孔陶瓷材料优选为磷酸钙系多孔陶瓷材料。 

磷酸钙系陶瓷的例子包括羟磷灰石、氟磷灰石、氯磷灰石、磷酸三钙、偏磷酸钙、磷酸四钙、磷酸氢钙、磷酸氢钙二水合物等。也可以使用选自这些的两种或更多种的混合物。此外，在本发明的材料中，磷酸钙的Ca成分的一部分可以被选自Sr、Ba、Mg、Fe、Al、Y、La、Li、Na、K、Ag、Pd、Zn、Pb、Cd、H和其他稀土元素中的一种或更多种所取代。此外，（PO₄）成分的一部分可以被选自VO₄、BO₃、SO₄、CO₃、SiO₄等中的一种或更多种所取代。此外，（OH）成分的一部分可以被选自F、Cl、O、CO₃、I和Br中的一种或更多种所取代。 

对于骨形成，磷酸钙优选选自羟磷灰石、氟磷灰石、氯磷灰石、磷酸三钙，更优选为羟磷灰石和/或磷酸三钙。 

本发明中使用的多孔陶瓷材料具有优选40-90%、更优选50-90%、进一步优选60-90%的孔隙率。当孔隙率不低于40%时，许多细胞渗入并粘附至材料上，预计其结果是形成充分的组织，例如骨组织。另一方面，当孔隙率不大于90%时，材料足以用于常规处理并且不会被离心操作破坏。 

根据JISR1634计算孔隙率。具体来说，从多孔陶瓷材料切出6mm直径×8mm高度的圆筒状试验片以进行评估。测量试验片的重量和体积并通过下列公式计算孔隙率。 

松密度=（试验片的重量）/（试验片的体积） 

孔隙率=（1-松密度/理论密度）×100 

本发明中使用的多孔陶瓷材料具有实质上单向排列的孔。“实质上单向排列的孔”是指存在单轴方向上延伸的多个孔，并且例如不少于一半，优选不少于80%的这些孔具有角度不大于30°的长轴方向。此处的“角度”是指各孔长轴在任意平面上的垂直投影所示的夹角。由于多孔陶瓷材料具有实质上单向排列的孔，因此其具有含细胞液体通透性，这允许含细胞液体如血液、骨髓液等借助于通过孔来通过材料内部。此处的“含细胞液体通过孔”是指液体成分（组织液）和含细胞液体中的细胞通过。 

陶瓷材料中的每个孔的横截面积（即，与孔长轴垂直的截面面积）优选为0.05×10^-3-100×10^-3mm²，更优选0.05×10^-3-50×10^-3mm²。上述范围内的尺寸足够使血液和骨髓液通过，并且引起毛细管现象，该现象使得组织液如血液，骨髓液等容易通过。然而，为解决本发明的问题，并不是完全需要确保材料内的每个孔均具有上述的横截面积。 

本发明中使用的多孔陶瓷材料可以通过已知方法制造。具体例子包括通过发泡剂在陶瓷浆料中形成孔的方法、通过混合烧成时碳化的物质并在烧结过程 中将该物质作为气体如CO2等消除而形成孔的方法、使用在浆料凝固期间产生的冰升华痕迹作为孔的方法等。作为本发明多孔陶瓷材料优选的具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料，可以通过单向冻结陶瓷浆料以形成单向生长的针状冰，并使冰升华，随后烧成来获得。 

图1是用于将多孔陶瓷材料设置于容器内任意深度位置的多孔陶瓷材料定位装置（以下也简称为“定位装置”）的一个实施方式的示意图，而图2是通过使用图1的定位装置设置于容器内任意深度位置的多孔陶瓷材料的示意图。 

多孔陶瓷材料定位装置10由塞11和适配器12构成，并且具有固定的塞11像盖一样附在适配器12上的结构。塞11是在其轴边缘方向的一侧上有顶板的管，而适配器12是与塞11相连、用于调节塞11的顶板1的高度位置的部件。塞11的顶板1的表面是放置多孔陶瓷材料22的表面。 

在塞11的顶板1上形成允许细胞通过的多个通孔2，细胞可以通过该通孔2自由地移动到底部（即适配器12一侧）。通孔2的截面（即垂直于通孔长轴的截面）尺寸仅需要能允许细胞通过。另外，通孔截面形状也没有特别限定，从细胞通透性方面来说，例如，当通孔截面是圆形时，其孔尺寸（直径）优选不小于0.5mm，更优选不小于1.5mm。孔尺寸优选不大于6mm，更优选不大于4mm，以分散和支持作用于顶板上的离心力。此外，每个通孔的尺寸不需要一致，小尺寸的通孔可以配置于大尺寸通孔间的间隙中，以试图增加顶板截面（即与顶板厚度方向垂直的截面）中的通孔的比例（面积比率）。当通孔具有非圆形的截面形状时，通孔截面的尺寸优选对应于直径在上述范围内的圆的面积。 

当塞11顶板1的截面中的通孔2的比例（面积比率）太高时，顶板的强度倾向于降低，而当其太小时，细胞的通过倾向于被抑制。因此，面积比率（[存在于顶板截面中的通孔的总截面面积/顶板截面面积]×100）优选为约50-95%，更优选为约60-90%。尽管顶板的厚度没有特别限定，但其优选为约1-7mm，因为太薄的顶板倾向于显示弱的强度，并且太厚的顶板会降低定位的移动范围。 

适配器12用于将塞11的顶板1配置于容器21的深度方向的中间位置，并在容器21深度方向上可移动地支持顶板11。 

塞11和适配器12以允许塞11的顶板1相对于适配器12的高度（即适配器12上端和顶板1之间的间隔距离）能够改变的方式连接。 

尽管改变塞11的顶板1相对适配器12的高度的装置没有特别限定并可以使用各种装置，但鉴于操作容易性、结构简单性（加工容易性）等，优选为螺旋机构。图1中的定位装置10由通过这种螺旋机构连接的塞11和适配器12构成，其中塞11的内壁和适配器12的外壁螺接在一起。 

重要的是本发明中的多孔陶瓷材料定位装置10（塞11和适配器12）具有耐灭菌性和耐受离心力的强度。例如，其优选由金属如不锈钢等、或树脂如PEEK（聚醚醚酮）等形成。 

当在本发明中制造植入材料时，首先将多孔陶瓷材料设置于容器内任意深度位置（步骤A）。即在步骤（A）中，将多孔陶瓷材料定位装置10（塞11和适配器12）***容器21内，并将多孔陶瓷材料22置于塞11的顶板1上。通过预先将塞11的顶板1相对适配器12的高度设置于所需水平，多孔陶瓷材料22可以设置于容器21内任意深度位置（图2）。 

如下所述，由于容器21填充有含细胞液体如骨髓血、外周血等，因此重要的是由透明材料形成容器以使含细胞液体中的细胞分布状态可以被目视观察。例如，其优选由树脂如聚丙烯、聚苯乙烯、丙烯酸类树脂等、玻璃等形成。 

尽管容器21的形状没有特别限定，但如下所述在离心机中对容器21施加离心力。因此，优选使用圆柱形的容器以便于设置于离心机中。此外，由于多孔陶瓷材料定位装置10如上所述***到容器21内，其中塞11的顶板1相对适配器12的高度可变，容器21中对应于塞11的至少可移动范围的部分优选具有相同的横截面形状和尺寸。 

本发明中使用的含细胞液体基本上包括骨髓血和/或外周血。所用的骨髓血和外周血是来自人或动物（特别是哺乳动物）的骨髓血和外周血。 

此外，含细胞液体可以是外周血和/或骨髓血与其他新细胞或其他含细胞液体的混合物。新添加细胞液体的例子包括脐带血；从骨髓血、外周血、脂肪、脐带血、胚胎、松质骨、骨膜等中收集的干细胞；分化的干细胞等。此外也可以向含细胞液体中加入抗凝血剂如肝素、柠檬酸等以防止纤维蛋白凝固。 

如上所述，本发明中使用的多孔陶瓷材料22具有实质上单向排列的孔。如图2中所示，设置多孔陶瓷材料22以使实质上单向排列的孔22a的长轴沿着容器21的轴L，由此容器21中填充的含细胞液体中的细胞在下述步骤（C）中在离心力的作用下通过孔。“实质上单向排列的孔22a的长轴沿着容器21的轴L”是指不少于一半（优选60%或更多，更优选70%或更多）实质上单向排列的孔的主轴与容器轴的夹角（孔主轴和容器轴在任意平面上的垂直投影的夹角）在30°以内，其中夹角越小则越优选。 

在步骤（B）中，将含细胞液体填充到步骤（A）中获得的容器21中，其中多孔陶瓷材料22设置于该容器内任意深度位置。容器21的***开口（入口）装有例如由聚乙烯等制成的可移除的盖4以密封容器21，以便在从步骤（A）转移至步骤（B）和/或从步骤（B）转移至下述步骤（C）的过程中防止外来物质如灰尘等进入容器。 

在步骤（C）中，对步骤（B）中获得的填充有含细胞液体并以盖4密封的容器21施加离心力。可以使用一般的离心分离器（离心力施加装置）来施加离心力，其中离心分离器的转动部分旋转，以对容器21施加朝向深度方向的离心力（即沿容器21轴L方向的离心力（图3中箭头F））。这种情况下离心力优选为100×g-2000×g，更优选为100×g-1500×g。 

当用上述范围内的离心力对含细胞液体如骨髓血、外周血等进行离心时， 含细胞液体被离心形成血沉棕黄层。已知血沉棕黄层含有具有分化为骨和软骨的能力的成核细胞如干细胞、血小板、可用于组织修复的细胞因子等的浓缩物。另一方面，红细胞几乎不参与骨和软骨的组织修复。 

图3为示意图，其显示了在填充含细胞液体如外周血、骨髓等并以上述范围内的离心力离心容器21之后，容器21内的优选状态。含细胞液体被离心，从容器21的底部至上部形成红细胞层31，血沉棕黄层32和血清层33。尽管血清层33不含如血沉棕黄层32中一样高浓度的成核细胞和细胞因子，但其含有对细胞粘附、生长和分化有用的蛋白质、细胞因子等。 

尽管离心时间根据容器21的尺寸、使用的含细胞液体等而变化，但其通常为1-20min，优选5-15min。当离心时间短于1min时，细胞和组织液倾向于不能充分分离，而当其长于20分钟时，对细胞的破坏倾向于增加。离心期间容器中含细胞液体的温度优选为3-6℃。 

由于容器21中的多孔陶瓷材料22和定位装置10（塞11的顶板1）都具有允许含细胞液体中的细胞通过的孔（孔22a，通孔2），当对填充有含细胞液体的容器21施加离心力时，含细胞液体被离心，以与对没有多孔陶瓷材料22和定位装置10的容器（容器21仅填充有含细胞液体）施加离心力时相同的方式形成血沉棕黄层。 

图4是图3主要部分的放大视图。当步骤（A）中容器21内多孔陶瓷材料22的深度位置（容器深度方向上的位置）设定为使得至少一部分多孔陶瓷材料22与步骤（C）中产生的血沉棕黄层32相接触（重叠）时，如图4中所示，血沉棕黄层32进入并被包封在多孔陶瓷材料22的孔22a中，而血沉棕黄层成分附于多孔陶瓷材料22的孔22a的内表面。血沉棕黄层成分含有成核细胞、细胞因子等的浓缩物，其非常有效地作用于骨组织和软骨组织的再生。此处，由于血沉棕黄层成分附于多孔陶瓷材料22的孔22a的内表面，因此在被植入体内之前，其不会轻易从植入材料上脱落。图4显示了容器中多孔陶瓷材料22的设置位置的优选实施方式，其中多孔陶瓷材料22的下端与血沉棕黄层32相接触（重 叠），而余下的多孔陶瓷材料22与血清层相接触（重叠），这使得作用于骨组织和软骨组织的再生的血清层成分也附于多孔陶瓷材料22。当使用与血沉棕黄层32具有同等厚度的多孔陶瓷材料22时，可以获得仅含有源自血沉棕黄层成分的成核细胞、细胞因子等的浓缩物并附于其内部的多孔陶瓷材料。上述多孔陶瓷材料22的下端是指多孔陶瓷材料22中与定位装置10接触一侧的末端。 

尽管步骤（C）中形成的血沉棕黄层32的位置根据收集含细胞液体如骨髓血、外周血等的来源个体而变化，但可以通过在仅没有多孔陶瓷材料22时（即在定位装置10被***容器21中，并且容器填充有含细胞液体的状态下）施加离心力来预先确定。 

通过进行上述步骤来制造植入材料，其中含细胞液体中有用的细胞被浓缩并接种于多孔陶瓷材料22上。 

由此得到的本发明植入材料可用作骨移植材料、骨软骨移植材料或者再生医学用材料等。 

此外，为了更有效地再生骨组织和软骨组织，可以在培养已接种细胞的操作后使用本发明的植入材料。此外，可以将具有促进组织例如骨组织和软骨组织生长作用的物质，如转化生长因子（TGF-β）、骨形态发生蛋白（BMP）等浸渗、吸附或固定于本发明的植入材料。 

能够容纳含细胞液体和多孔陶瓷材料的上述容器21与多孔陶瓷材料定位装置10构成用于制造本发明植入材料的工具。此外，通过与该植入材料制造用工具一起提供前述多孔陶瓷材料22，构成了用于制造本发明植入材料的工具包。实施例 

下面参考实施例更详细地解释了本发明，但本发明不受下面所描述实施例的限制。 

[血沉棕黄层位置的确认] 

在（圆柱形）聚丙烯离心管（内径14mm，容积15mL，GreinerGmbH（德国）制造）的容器21中设置PEEK制造的管外径13mm的塞11（顶板厚度：5mm，通孔：直径2mm的圆形通孔，通孔面积比率：60%）和以螺旋机构与所述塞连接的圆柱形适配器12（内径：7mm）。将兔心血填充至容器的8mL刻度处并于4℃以1500×g离心10min。离心后取出容器，目视确定血沉棕黄层的位置，其位于容器的5.0mL-5.1mL刻度处。 

[实施例1] 

使用与上述血沉棕黄层位置确认试验中所用的容器21、塞11和适配器12相同的容器、塞和适配器，通过塞11和适配器12的螺旋机构将塞11的顶板的上表面的位置调整到容器21的5mL刻度位置。随后，将包含羟磷灰石的多孔陶瓷材料（孔隙率75%，孔的平均横截面积18.6×10^-3mm²，直径：11mm、高：10mm的圆柱形状，含有一个方向（材料高度方向）排列的孔）设置于塞11的顶板上，以使孔排列的方向垂直于顶板。用兔心血填充容器21至容器21的8mL刻度处。此时，血液由于毛细管作用而快速渗入多孔陶瓷材料中。此后，血液于4℃以1500×g离心10min。 

[比较例1] 

使用与实施例1中所用的容器21相同的容器以及与实施例1中所用相同的多孔陶瓷材料，不使用塞11和适配器12，将多孔陶瓷材料设置于容器21的内侧底部上，将兔心血填充至容器21中至8mL刻度处，使容器静止10分钟以允许兔心血渗入多孔陶瓷材料中。 

[比较例2] 

使用与实施例1中所用的容器21、塞11和适配器12相同的容器、塞和适配器，通过塞11和适配器12的螺旋机构将塞11的顶板的上表面的位置调整到容器21的5mL刻度位置。随后，将包含羟磷灰石的多孔陶瓷材料（孔隙率55%，孔的平均横截面积43.2×10^-3mm²，直径：11mm、高度10mm的圆柱形状，具有三维网孔结构（孔间无连通））设置于塞11的顶板上。用兔心血填充容器21至 容器21的8mL刻度处。此时，没有观察到血液由于毛细管作用渗入多孔陶瓷材料。此后，血液于4℃以1500×g离心10min。 

图5显示了SEM观察的、实施例1中所制备材料的横截面图像。图5（A）是上部的观察图像而图5（B）是下部的观察图像。在显示上部的图5（A）中几乎不含细胞，然而在显示下部的图5（B）中可以确认存在成核细胞。在图5（A）和图5（B）中，组织再生所不需要的红细胞数量都很小。 

图6显示了SEM观察的、比较例1中所制备材料的横截面图像。图6（A）是上部的观察图像而图6（B）是下部的观察图像。在显示上部的图6（A）和显示下部的图6（B）中，都可以确认有许多细胞，但其大多数为组织再生所不需要的红细胞。 

实施例1和比较例1的比较表明本发明的方法消除了红细胞，使对于组织修复有用的细胞浓缩并将其附着于多孔陶瓷。 

图7显示了SEM观察的、比较例2中所制备材料的横截面图像。图7（A）是上部的观察图像而图7（B）是下部的观察图像。尽管上部和下部均主要含有通过离心操作进入内部的、组织再生所不需要的红细胞，但其数量在显示上部的图7（A）中比在显示下部的图7（B）中要高。 

产业实用性 

本发明提供植入材料的制造方法，特别是在骨科领域的骨缺损或软骨缺损的再生中，其在不使用添加剂如药物等的情形下，同时实现了骨组织和软骨组织的高修复效果以及制备的便利性。 

本申请基于在日本提交的专利申请2010-262538号，其内容在此处完全并入本发明。 

[符号说明] 

1    顶板 

2    通孔 

10   多孔陶瓷材料定位装置 

11   塞 

12   适配器 

12a  适配器上端 

21   容器 

22   多孔陶瓷材料 

22a  孔 

31   红细胞层 

32   血沉棕黄层 

33   血清层 

Claims (7)

1.植入材料的制造方法，其包括

步骤(A)：将具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料设置于容器内任意深度位置的步骤，

步骤(B)：用至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体填充所述容器的步骤，和

步骤(C)：在沿着所述容器的轴的方向上对所述容器施加离心力的步骤，

其中，在步骤(C)中离心所述含细胞液体而形成血沉棕黄层，并在步骤(A)中，设置所述多孔陶瓷材料以使其至少一部分与在步骤(C)中产生的血沉棕黄层相接触。

2.根据权利要求1的制造方法，其中在步骤(A)中，设置所述多孔陶瓷材料以使所述实质上单向排列的孔的长轴沿着所述容器的轴。

3.根据权利要求1或2的制造方法，其中在步骤(C)中将所述离心力控制在100×g-2000×g。

4.由根据权利要求1至3中任一项的制造方法获得的植入材料。

5.制造植入材料的工具，其包括

能够容纳至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体、以及多孔陶瓷材料的容器，与

多孔陶瓷材料定位装置，其具有允许所述含细胞液体中的细胞通过的通孔，用于将所述多孔陶瓷材料设置于所述容器内任意深度位置。

6.制造植入材料的工具包，其包括

多孔陶瓷材料，

能够容纳至少含骨髓血和/或外周血的含细胞液体、以及所述多孔陶瓷材料的容器，与

多孔陶瓷材料定位装置，其具有允许所述含细胞液体中的细胞通过的通孔，用于将所述多孔陶瓷材料设置于所述容器内任意深度位置。

7.根据权利要求6的工具包，其中所述多孔陶瓷材料为具有实质上单向排列的孔的多孔陶瓷材料。