CN103333208B

CN103333208B - 阿德福韦酯马来酸盐及其制备方法和组合物

Info

Publication number: CN103333208B
Application number: CN201310220097.2A
Authority: CN
Inventors: 孙朋杰; 鲁瑜茜
Original assignee: Guangzhou Jinglai Medical Technology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Jinglai Medical Technology Co ltd
Priority date: 2013-06-04
Filing date: 2013-06-04
Publication date: 2016-05-11
Anticipated expiration: 2033-06-04
Also published as: CN103333208A

Abstract

本发明公开了阿德福韦酯马来酸盐及其制备方法和组合物。其由阿德福韦酯与马来酸按1:1的摩尔比结合而成。本发明的阿德福韦酯马来酸盐的晶型稳定，常规条件贮存不易分解，且能保持原有的生物利用度，易于制备。本发明方法反应条件温和，易于控制，元素分析和DSC分析结果表明制备的阿德福韦酯马来酸盐的纯度高，杂质含量低。

Description

阿德福韦酯马来酸盐及其制备方法和组合物

技术领域

本发明涉及一种药物新晶型及其制备方法和组合物，特别涉及阿德福韦酯马来酸盐及其制备方法和组合物。

背景技术

阿德福韦酯（adefovir dipivoxil，AD）是阿德福韦（Adefovir）的双新戊酰氧基甲酯，其化学名为9-[2-[双（新戊酰氧基）甲氧基]磷酰甲氧基]乙基腺嘌呤，其分子式为C₂₀H₃₂N₅O₈P，化学结构式如下所示

阿德福韦酯口服吸收后很快被酯酶水解，释放出阿德福韦而发挥药效，因此，阿德福韦酯是阿德福韦的前药。阿德福韦酯是一种新型的口病毒药物，它在人体内能够抑制病毒DNA转录酶和聚合酶，从而能够抑制病毒的复制和转录，对HIV和乙肝病毒均有抑制作用，同时还具有较好的免疫调节作用。

阿德福韦酯由美国Gilead Sciences公司研制，是为改善阿德福韦生物利用度而制成的前药。阿德福韦酯对湿热不稳定，易于水解，且与晶型有关。阿德福韦酯的新晶型及盐类迄今仍为国际上的热点研究。CN1396170公开了E型；CN101139363公开了M型；WO9904774公开了无水结晶型（形态1）、水合物（形态2）、甲醇化物（形态3）、富马酸盐（形态4）、半硫酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、硝酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、α-萘磺酸盐、β-萘磺酸盐、s-樟脑磺酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、抗坏血酸盐、盐酸盐；CN1528766公开了一种草酸盐；专利CN1396107A公开了一种不含水和其它结晶化溶剂的晶体形态；CN1569861A公开了门冬氨酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐、果糖酸盐；CN101544670A公开了糖精共晶；CN102276652A公开了糖精共晶的另一种晶型。

发明内容

本发明的目的在于阿德福韦酯马来酸盐及其制备方法和组合物。

本发明所采取的技术方案是：

阿德福韦酯马来酸盐，由阿德福韦酯与马来酸按1:1的摩尔比结合而成，使用Cu-Kα辐射，其X射线粉末衍射在衍射角度2θ为：5.1±0.2、9.9±0.2、10.2±0.2、11.4±0.2、11.9±0.2、14.3±0.2、15.3±0.2、16.9±0.2、18.4±0.2、21.2±0.2、21.6±0.2、22.8±0.2、25.6±0.2、25.8±0.2、27.6±0.2、30.7±0.2时具有特征峰，其晶胞参数为： α=77.536°，β=84.298°，γ=63.601°，空间群为P2₁/c。阿德福韦酯马来酸盐的元素分析结果为：C(%):47.01,N(%):11.58,H(%):5.79。

一种药用组合物，由上述的阿德福韦酯马来酸盐与可接受的药用辅料组成。

制备上述阿德福韦酯马来酸盐的方法，包括如下步骤：

1)0～50℃下，将马来酸与阿德福韦酯加入有机溶剂中；或先将马来酸溶于有机溶剂中，之后加入阿德福韦酯；

2)充分搅拌，结晶，收集所得结晶性粉末，减压干燥即得到阿德福韦酯马来酸盐。

优选的，马来酸与阿德福韦酯的摩尔比为（0.5～3）：1。

优选的，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮、乙腈。

优选的，搅拌的时间不少于30min，搅拌的时间为30min～4h。

优选的，结晶时，在不高于40℃的环境下将溶剂蒸发进行结晶。

优选的，有机溶剂的使用量为马来酸与阿德福韦酯总质量的2～5倍。

本发明的有益效果是：

本发明的阿德福韦酯马来酸盐共晶的晶型稳定，常规条件贮存不易分解，并且能保持原有的生物利用度，易于制备。

本发明方法反应条件温和，易于控制，元素分析和DSC分析结果表明制备的阿德福韦酯马来酸盐的纯度高，杂质含量低。

附图说明

图1是阿德福韦酯马来酸盐的实测粉末X射线衍射图。

图2是阿德福韦酯马来酸盐从单晶结构数据模拟的粉末X射线衍射图。

图3是阿德福韦酯马来酸盐的单晶结构图。

图4是阿德福韦酯马来酸盐的三维堆积图。

图5是阿德福韦酯马来酸盐的差示扫描热分析（DSC）图。

图6是阿德福韦酯马来酸盐的热重分析（TG）图。

图7是阿德福韦酯马来酸盐的红外光谱图（IR）。

图8是阿德福韦酯与阿德福韦酯马来酸盐的药动学-时间曲线图。

具体实施方式

实施例1

在50℃下，称取501mg阿德福韦酯与116mg马来酸，加入6mL乙酸乙酯搅拌反应3小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得560mg白色结晶性粉末产率91%。

实施例2

在28℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL乙醇搅拌反应2小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得198mg白色结晶性粉末，产率96%。

实施例3

在30℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL乙酸乙酯搅拌反应3小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得190mg白色结晶性粉末，产率92%。

实施例4

在28℃下，称取39mg马来酸，加入3mL乙醇搅拌溶解后，加入167mg阿德福韦酯搅拌反应1.5小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得186mg白色结晶性粉末，产率90%。

实施例5

在27℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL丙酮搅拌反应2小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得198mg白色结晶性粉末，产率96%。

实施例6

在27℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL乙腈搅拌反应2小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得185mg白色结晶性粉末，产率90%。

实施例7

在27℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL异丙醇搅拌反应2小时，有大量白色沉淀产生，离心分离，固体减压干燥24小时后，得160mg白色结晶性粉末，产率78%。

实施例8

在40℃下，称取167mg阿德福韦酯与39mg马来酸，加入2mL乙酸乙酯搅拌反应3小时，过滤，滤液室温挥发，3天后得结晶性粉末，减压干燥24小时后，得202mg产物，产率98%。

表征数据：

对实施例1制备得到的阿德福韦酯马来酸盐进行了测定和表征，具体如下：

采用Bruker D8Advance衍射仪测定阿德福韦酯马来酸盐的X射线粉末衍射图，测定条件如下：Cu Kα,40kV，40mV为光源，步长0.12°，扫描速度10°/min，扫描范围5～40°，室温下进行。实施例所得X射线粉末衍射值，以布拉格2θ角、晶面间距d和相对强度I（以相对于最强射线的百分数表示）表征如下。实施例1的表征数据见表1，粉末X射线衍射图如图1所示。由表1能清楚得到阿德福韦酯马来酸盐的X射线粉末衍射图谱在2θ值的相应位置对应有特征衍射峰。

表1实施例1晶体的X-射线粉末衍射图的表征数据

另外，使用带有石墨单色器的Agilent Technologies Gemini A Ultra单晶衍射仪在293K下测定阿德福韦酯马来酸盐的晶体结构。用Cu Kα射线()，以ω/2θ扫描方式收集数据。晶体结构使用SHELXS-97程序，由直接法解出，用SHELXL-97程序以全矩阵最小二乘法修正结构，氢原子坐标由理论计算加入。其晶体学参数如下表所示：

*R₁=Σ||F_o|-|F_c||/Σ|F_o|,wR₂=[Σw(F_o ²-F_c ²)²/Σw(F_o ²)²]^1/2,w=[σ²(F_o)²+(0.1(max(0,F_o ²)+2F_c ²)/3)²]^-1

根据单晶结构数据模拟阿德福韦酯马来酸盐的粉末衍射图如图2所示，与实测所制备的阿德福韦酯马来酸盐的粉末衍射图（见图1）的峰一致，证明制备的阿德福韦酯马来酸盐为纯的单一晶型。

阿德福韦酯马来酸盐的单晶结构图如图3所示。

阿德福韦酯马来酸盐的三维结构图见图4。

阿德福韦酯马来酸盐的差示扫描热分析图(DSC)如图5所示，由图可知，其DSC吸热转变峰在约132.6℃。

阿德福韦酯马来酸盐的热重图（TG）如图6所示。

阿德福韦酯马来酸盐的红外光谱图（IR）如图7所示，其IR（KBr，cm^-1）数据为3485、3056、2979、2876、2611、1907、1754、1707、1617、1557、1481、1417、1370、1314、1271、1231、1138、1059、1029、960、880、814、768、717、647、611、586、555523、481。

阿德福韦酯与阿德福韦酯马来酸盐的药动学-时间曲线如图8所示。

晶体稳定性实验

取实施例1所制备的阿德福韦酯马来酸盐进行晶体稳定性测试实验。具体方法为：分别取5份原料样品与5份阿德福韦酯马来酸盐的样品（各50mg）置于烧杯中铺平，置于40℃，75%RH条件下的恒温恒湿箱，每1、2、3、4、6个月取出其中一份测PXRD，同时用HPLC测试阿德福韦酯的残余率。采用Shimadzu高效液相色谱仪（日本岛津公司，SPD-20A检测器，LC-20AD泵）测定，以Inertsil ODS-3柱（4.6mm×150mm,5μm）为色谱柱；以甲醇0.02mol/L磷酸盐缓冲液（pH=6）=65:35为流动相，检测波长为260nm，流速为1mL/min进样量为10μL。结果如下：

由此可见，阿德福韦酯马来酸盐的稳定性优于原料晶型。

晶体生物利用度实验

取实施例1所制备的阿德福韦酯马来酸盐进行生物利用度研究。

由于阿德福韦酯是阿德福韦的前体药，即阿德福韦酯在体内完全分解为阿德福韦而发挥药效，血中检测不到前体药和单酯，因此血中阿德福韦的含量即反应了阿德福韦酯的生物利用度。

生物利用度实验方法：将样品混悬于0.5%（w/w）的CMC-Na溶液，制备成浓度为5mg/mL混悬液，以50mg/kg（按阿德福韦计）为给药剂量，灌胃给药后分别于10、20、40、60、120、180、240、360、480、720min取血0.5mL置于含肝素的离心管中，8000rpm离心5min分离血浆，置于-20℃冷藏备用。

血浆样品预处理：用移液枪精确移取100μL血浆，加入400μL甲醇，涡旋10min，离心10min，取上清液，减压抽干后用100μL流动相复溶，涡旋5min，离心5min，取上清液进行HPLC分析。

HPLC分析方法的建立：HPLC定量测试条件为甲醇：0.1%甲酸溶液=0.03：0.47，

流速：0.5mL/min，进样量为20μL。

数据处理方法：药动学数据均采用DAS2.0软件进行计算。

阿德福韦酯及阿德福韦酯马来酸盐在大鼠体内的平均血药浓度时间曲线如图8所示（阿德福韦酯（■），阿德福韦酯马来酸盐（●）），说明12小时内，阿德福韦酯马来酸盐与阿德福韦酯的吸收情况相似，其相关的药动学参数表如下，阿德福韦酯马来酸盐的生物利用度是阿德福韦酯的0.89倍。

阿德福韦酯及阿德福韦酯马来酸盐药动学参数表（n=5）

此外，经检测，实施例2-8制备的阿德福韦酯马来酸盐与实施例1制备的阿德福韦酯马来酸盐相同。可见，本发明方法的重复性很好，可获得稳定的阿德福韦酯马来酸盐。

Claims

1.阿德福韦酯马来酸盐，由阿德福韦酯与马来酸按1:1的摩尔比结合而成,其X射线粉末衍射在衍射角度2θ为：5.1±0.2、9.9±0.2、10.2±0.2、11.4±0.2、11.9±0.2、14.3±0.2、15.3±0.2、16.9±0.2、18.4±0.2、21.2±0.2、21.6±0.2、22.8±0.2、25.6±0.2、25.8±0.2、27.6±0.2、30.7±0.2时具有特征峰，其晶胞参数为：a = 9.5949 Å，b = 10.1010 Å, c = 17.5958 Å, α = 77.536°， β = 84.298°，γ = 63.601°，空间群为P2₁/ c 。

2.一种药用组合物，由权利要求1所述的阿德福韦酯马来酸盐与可接受的药用辅料组成。

3.制备权利要求1所述的阿德福韦酯马来酸盐的方法，包括如下步骤：

1) 0～50 ℃下，将马来酸与阿德福韦酯加入有机溶剂中；或先将马来酸溶于有机溶剂中，之后加入阿德福韦酯；

2) 充分搅拌，结晶，收集所得结晶性粉末，减压干燥即得到阿德福韦酯马来酸盐；

其中，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮、乙腈。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：马来酸与阿德福韦酯的摩尔比为（0.5～3）:1。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：搅拌的时间不少于30 min。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：搅拌的时间为30 min～4 h。

7.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：有机溶剂的使用量为马来酸与阿德福韦酯总质量的2～5倍。