CN103272146B - 一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合物在制备防治酒精性脂肪肝药物中的应用，其中所述药物组合物由下列重量份的原料药为组方配制而成：赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份，还有药用辅料。同时提供一种防治酒精性脂肪肝药物组合物的制备方法，本药物组合物用于治疗酒精性脂肪肝。本发明的效果是该药物组合物克服了汤剂等传统剂型的弊端，采用超微粉碎的方法，保留了组合物中具有临床疗效的有效成分，又保证了临床有效成分的溶出率，保证了其临床疗效，对酒精性脂肪肝的预防和治疗作用明显优于同类药物。

Description

一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，特别是一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法。 

背景技术

酒精性肝病是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。世界卫生组织2007年发表的统计数据显示，在过去30年，全球酒精性肝病患者人数从1000万剧增到1.3亿。世界卫生组织专家预计，到2025年全球酒精性肝病患者将达到2.5亿。随着中国改革开放带来的经济迅速增长，我国人均酒精消耗量也显著增长，饮酒者中高达6.1％的人患有酒精性肝病，酒精性肝病已经成为继病毒性肝炎之后的第二大肝病。我国的一项针对脂肪性肝病抽样调查显示，酒精性脂肪肝患病率已达23.34％，成为中国脂肪肝的首位病因。酒精性脂肪肝的防治不足也成为临床医学、预防医学、社会医学和卫生行政主管部门共同面临的重大课题。 

酒精性肝病(ALD)包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化及酒精性肝硬化。其发病机制较为复杂，目前尚不完全清楚。酒精性脂肪肝多同时伴有酒精性肝损伤，酒精性肝损伤可诱发脂肪性肝炎和肝纤维化。酒精性肝炎是一种比脂肪肝更严重的病变，约50％的酒精性肝炎将发展为肝硬化。肝硬化可不经酒精性肝炎而直接发生，有10％发展为肝细胞癌。慢性嗜酒者中20％～30％发展成肝硬化，发生肝癌者约2％～3％。 

目前酒精性肝病(ALD)的确诊仍以肝穿刺为金指标，而肝穿刺属于有创诊断，不易被患者接受，限制了其临床应用，也不易ALD的早发现、早诊断、早治疗。所以急需寻找一种容易被患者接受的诊断ALD的敏感指标。国内外医 者对ALD除戒酒、对症治疗外，尚无特效规范的疗法，尤其早期酒精性肝损伤无特异性临床表现，国内外还缺少明确的研究范例。据不完全统计，现在我国脂肪性肝病(FLD)患者多数是ALD。ALD对肝脏健康的影响大于非酒精性肝病(NAFLD)。 

大量的研究表明，祖国传统植物药能够有效延缓酒精性脂肪肝的进程，防止酒精性脂肪肝向酒精性肝纤维化发展，促进酒精性肝纤维化逆转。因此开发祖国传统植物药治疗酒精性肝病的优势，尽早对早期酒精性肝损伤的实施干预，减少或阻抑酒精性肝损伤的发展成为当务之急。 

本药物组合物在前期益肝降脂方对脂肪肝使用有效地基础上，提出探讨传统植物药预处理对早期酒精性肝损伤保护作用，按平行对照、盲法设计分组，以对黄嘌呤氧化酶(XO)研究、酒精肝的发病及早期酒精性肝损伤临床标准的界定为阶段性目标，对所有有饮酒史的脂肪肝患者资料留档，采用公认诊断及疗效标准，筛选115例酒精肝患者进行分割处理。通过用黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林-黄嘌呤(XO-HRP-PA-AAP-XAN)反应新体系生成氧化型色素，同批次定量检测血清中黄嘌呤(比色法)并与自身相关酶学指标对比，从循证角度分析了XO是否可作为早期酒精性肝病应激性损伤的敏感指标；是否可联合一氧化氮(NO)、金属基质酶(MMP-9)、血小板衍生生长因子(PDGF-BB)等作为药物预处理的指示指标；针对早期酒精性肝损伤的病机与发病特点，首次提出升清降浊解郁法治疗酒精性肝病，创立本药物组合物实施干预，观察分析对XO、NO、MMP-9、PDGF-BB及常见肝酶指标的影响。 

研究结果证实，脂质过氧化反应是酒精性肝损伤诱发脂肪性肝炎和肝纤维化的重要机制，而黄嘌呤氧化酶(XO)可作为早期酒精性肝损伤应激性损伤的敏感指标，重视黄嘌呤氧化酶与常见肝酶指标联合检测，结合临证方便常规的 血细胞检查便可作为早期ALD的窗口提示依据，用本药物组合物实施干预，即调节ALD的血脂代谢，改善中医症状，抑制黄嘌呤氧化酶(XO)活性，利于肝细胞的能量代谢；还控制酒精性肝病血细胞炎性(GR％)指标，降低血红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板分布宽度(PDW)，不影响血小板计数(PLT)，尤其治疗前后舌象的改善明显，证明本药物组合物预处理能起到类抗氧化剂样效用，明确脂肪肝诊断即可使用，成本低廉，临床疗效显著，为较早、较好地逆转酒精性脂肪肝，防治酒精性肝病提供了可靠的第一手临床资料，具有可操作性及较高的临床实用价值与社会效益。 

发明内容

本发明的目的是提供一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法，用于治疗酒精性脂肪肝，并能迅速缓解饮酒后的不适感。本发明的效果是该药物组合物克服了汤剂等传统剂型的弊端，采用超微粉碎的方法，保留了组合物中具有临床疗效的有效成分，又保证了临床有效成分的溶出率，保证了其临床疗效，对酒精性脂肪肝的预防和治疗作用明显优于同类药物。 

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是提供一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法，其中：该药物组合物按重量份由以下药味制成： 

赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入中药砂仁，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、砂仁5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入中药肉豆蔻，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、肉豆蔻5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入葛根、葛花，得到的配方为，赶黄草5-60 份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、葛根5-10份、葛花5-10份。 

同时还提供一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物的制备方法。 

本发明的效果是本药物组合物克服了汤剂等传统剂型的弊端，采用超微粉碎的方法，既保留了组合物中具有临床疗效的有效成分，又最大限度的提高了有效成分的溶出率，保证了其临床疗效，具有扎实的临床基础和良好的临床疗效。该组合物主要针对酒精性脂肪肝及饮酒后的不适感，提出“升清降浊解郁”治法，以天津市高等学校科技发展基金项目(20050320)所研究的益肝降脂方化裁而成，其配伍合理，组方严谨，具有防治酒精性脂肪肝的功效，并能明显缓解饮酒后的不适感。经对本药物组合物治疗酒精性脂肪肝132例临床观察结果表明，其愈显率达80％，患者血清学指标和血小板源性生长因子(PDGF)活力等指标的改善均明显优于对照药易善复，疗效确切，且安全无毒副作用。 

该药物组合物对酒精性脂肪肝的预防和治疗作用明显优于同类药物。 

具体实施方式

结合实施例对本发明的一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法加以详细说明。 

临床前药效学实验研究揭示了本药物组合物预防和治疗酒精性脂肪肝的机理：①本药物组合物能通过降低未酯化脂肪酸的释放，减少肝中TG的堆积，增加脂代谢，从而防治酒精性脂肪肝；②本药物组合物能通过类抗氧化剂样效用，减轻脂质过氧化反应，减轻肝纤维化，从而防治酒精性脂肪肝；③本药物组合物能通过降低血小板生长衍生因子(PDGF)活力，抑制HSC激活转化，防止酒精性脂肪肝向酒精性肝纤维化发展，从而防治酒精性脂肪肝；④本药物组合物能通过降低ALT、AST活性，对酒精所导致的肝损伤起到保护作用，从而防治酒精性脂肪肝；⑤本药物组合物能通过抑制黄嘌呤氧化酶(XO)活性，利 于肝细胞的能量代谢，从而防治酒精性脂肪肝。 

临床疗效结果表明，服用本药物组合物后，中医症候胸闷、胁痛、头晕、气短、面部暗紫、疲乏无力、舌暗苔白滑腻，脉沉涩或弦细等符合酒精性脂肪肝临床表现的诸项指标均具显效；舌质、舌苔、脉象诸项指标组内自身比较均有明显改善；中医证候诸项指标治疗后与对照组比较，治疗组总有效率和愈显率均明显优于对照组；疗后中医证候总有效率和愈显率治疗组明显高于对照组。说明该药物组合物其临床治疗效果明显优于已有同类药物。 

本发明的药物组合物按重量份由以下药味制成： 

赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入中药砂仁，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、砂仁5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入中药肉豆蔻，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、肉豆蔻5-10份。 

该药物组合物组方中还可以加入葛根、葛花，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、葛根5-10份、葛花5-10份。 

本发明的防治酒精性脂肪肝的药物组合物的制备方法，其方法如下： 

a)蒸馏：将上述任意一项中的香薷、杏仁或香薷、杏仁、肉豆蔻两味或三味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用； 

b)水提取：将a)项中的药渣与上述任意一项中除香薷、杏仁或香薷、杏仁、肉豆蔻外的其余药物置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，最佳为8倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，最佳为2小时，沸腾后 蒸汽压力0.03-0.04Mpa，合并煎液，滤过； 

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，最佳为1.02，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃； 

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％，最佳为65％，充分搅拌后，静置8-20小时，最佳为12小时，滤过； 

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，最佳为1.05-1.06，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取物。 

f)颗粒剂的制备： 

a′)将e)步骤中的水提取物平铺于真空干燥箱中，真空干燥。真空度-0.06～-0.09Mpa，温度40-100℃，得干膏； 

b′)干膏粉碎成极细粉，过200目筛； 

c′)干膏粉兑入适量糊精，过筛，混合均匀，混合时间10-50分钟，最佳为30分钟； 

d′)混合后的干膏粉用95％乙醇制粒，制粒时间3-10分钟，最佳制粒时间7分钟； 

e′)将d′)项中所制的湿颗粒平铺于干燥箱中，干燥，铺层厚度约1-4cm，最佳约2cm，干燥温度50-100℃； 

f′)将干燥后的颗粒整粒，用目数为14目的筛网整粒，喷入a)步骤中的挥发油，混合均匀； 

g′)装袋，每袋装0.3-0.5g； 

以上组成中，重量是以生药计算的，份为重量份，若以克为单位，以上组成可制成药物制剂10-35个制剂单位，所述制剂单位指，制成的成品药物制剂， 如制成固体制剂10-35个单位，口服液......毫升等。 

以上组成可制成1-6次服用剂量的制剂，如作为片剂，制成18片，每次服用剂量3-18片，共可服用1-6次，如作为颗粒剂，制成6袋，共可服用2-5天。 

以上组成是按重量份配比的，在生产时可按照相应比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤为单位，或以吨为单位，小规模试验生产也可以毫克为单位，重量可以增大或减少，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。 

以上重量的配比是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过300％，药效不变。 

以上组成中的单味中药，尤其是臣药及佐药，也可以被适当的具有相同药性的中药替换，替换后的中药制剂其药物作用不变。 

本发明的药物组合物，是通过将上述配方组成的药物原料经过提取或其它方式加工，制成药物活性物质，随后，以该物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成的，所述活性物质可以通过分别提取植物药原料得到，也可以通过共同提取植物药原料得到，也可以通过其他方式得到，如：粉碎、压榨、煅烧、研磨、过筛、渗漉、萃取、水提、醇提、脂提、层析等方法得到，这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏或流浸膏，根据制剂的不同需要制成不同的浓度。 

本发明的药物组合物中的药物活性物质，其在制剂中所占的重量百分比可以是0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体。本发明的药物组合物，以单位计量形式存在，所述单位计量形式是指制剂的单位，如茶剂的每袋、片剂的每片、胶囊的每粒、口服液的每瓶、颗粒剂的每袋等。 

本发明的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括茶剂、片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、***剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、 注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如茶剂、片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、***剂、颗粒剂、冲剂、散剂等。 

本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。 

适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其他类似的填充剂。适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。 

可通过混合、填充、压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。 

口服液体制剂的形式，例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酊剂，或者可以是一种在使用前可用水或其他适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇-油酸酯或***胶，非水性载体(它们可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏椰子油、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸酯或山梨醇，并且如果需要，可含有常规的香味剂或着色剂。 

对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载体中，再将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这种组合物冰冻，并在真空下将水除去。 

本发明的药物组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。 

本发明的药物组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每次1-20剂，如：1-20袋或粒或片。 

通过以下具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限制。 

实施例1、本发明的药物组合物茶剂的制备 

赶黄草5份、灵芝5份、香薷5份、生薏米5份、杏仁5份。 

将以上处方所述药物粉碎成极细粉，过200目筛，混合均匀，分装，灭菌，外包装，4g/小袋。 

实施例2、本发明的药物组合物茶剂的制备 

赶黄草60份、灵芝15份、香薷10份、生薏米10份、杏仁10份。 

将以上处方所述药物粉碎成极细粉，过200目筛，混合均匀，分装，灭菌，外包装，4g/小袋。 

实施例3、本发明的药物组合物茶剂的制备 

赶黄草30份、灵芝10份、香薷7份、生薏米7份、杏仁7份。 

将以上处方所述药物粉碎成极细粉，过200目筛，混合均匀，分装，灭菌，外包装，4g/小袋。 

实施例4、本发明的药物组合物茶剂的制备 

赶黄草45份、灵芝12份、香薷8份、生薏米9份、杏仁8份。 

将以上处方所述药物粉碎成极细粉，过200目筛，混合均匀，分装，灭菌，外包装，4g/小袋。 

实施例5、本发明的药物组合物茶剂的制备 

赶黄草20份、灵芝8份、香薷6份、生薏米6份、杏仁6份。 

将以上处方所述药物粉碎成极细粉，过200目筛，混合均匀，分装，灭菌，外包装，4g/小袋。 

实施例6、本发明的药物组合物口服液的制备 

赶黄草30份、灵芝10份、香薷7份、生薏米7份、杏仁7份、葛根7份、葛花7份。 

a)蒸馏：将上述的香薷、杏仁两味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用； 

b)水提取：将a)项中的药渣与本实施例所述的赶黄草、灵芝、生薏米、葛根、葛花置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，最佳为8倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，最佳为2小时，沸腾后蒸汽压力0.03-0.04Mpa，合并煎液，滤过； 

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，最佳为1.02，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃； 

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％，最佳为65％，充分搅拌后，静置8-20小时，最佳为12小时，滤过； 

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，最佳为1.05-1.06，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取 物。 

f)口服液的制备：水提取物中加入a)步骤中的挥发油，搅拌均匀，加水至相对密度约为1.01-1.05，最佳为1.03-1.04，搅匀，灌装，灭菌，即得口服液。 

实施例7、本发明的药物组合物口服液的制备 

赶黄草10份、灵芝7份、香薷6份、生薏米6份、杏仁6份、葛根6份、葛花6份。 

按照实施例6所述的制备方法制得口服液。 

实施例8、本发明的药物组合物口服液的制备 

赶黄草50份、灵芝12份、香薷8份、生薏米10份、杏仁8份、葛根8份、葛花10份。 

按照实施例6所述的制备方法制得口服液。 

实施例9、本发明的药物组合物胶囊剂的制备 

赶黄草30份、灵芝10份、香薷7份、生薏米7份、杏仁7份、砂仁7份。 

a)蒸馏：将上述的香薷、杏仁两味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用； 

b)水提取：将a)项中的药渣与本实施例所述的赶黄草、灵芝、生薏米、砂仁置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，最佳为8倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，最佳为2小时，沸腾后蒸汽压力0.03-0.04Mpa，合并煎液，滤过； 

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，最佳为1.02，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃； 

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％， 最佳为65％，充分搅拌后，静置8-20小时，最佳为12小时，滤过； 

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，最佳为1.05-1.06，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取物。 

f)胶囊的制备： 

a′)将e)步骤中的水提取物平铺于真空干燥箱中，真空干燥。真空度-0.06～-0.09Mpa，温度40-100℃，得干膏； 

b′)干膏粉碎成细粉80-120目； 

c′)干膏粉兑入适量糊精，过筛，混合均匀，混合时间10-50分钟，最佳为30分钟； 

d′)混合后的干膏粉用95％乙醇制粒，制粒时间3-10分钟，最佳制粒时间为7分钟； 

e′)将d′)项中所制的湿颗粒平铺于干燥箱中，干燥，铺层厚度约1-4cm，最佳约2cm，干燥温度50-100℃； 

f′)将干燥后的颗粒整粒，用目数为14目的筛网整粒，喷入a)步骤中的挥发油，混合均匀； 

g′)装胶囊，每粒胶囊装0.3-0.5g； 

实施例10、本发明的药物组合物胶囊剂的制备 

赶黄草60份、灵芝12份、香薷8份、生薏米8份、杏仁8份、砂仁10份。 

按照实施例9所述的制备方法制成胶囊。 

实施例11、本发明的药物组合物胶囊剂的制备 

赶黄草15份、灵芝7份、香薷6份、生薏米6份、杏仁6份、砂仁6份。 

按照实施例9所述的制备方法制成胶囊。 

实施例12、本发明的药物组合物片剂的制备 

赶黄草30份、灵芝10份、香薷7份、生薏米7份、杏仁7份、肉豆蔻7份。 

a)蒸馏：将上述的香薷、杏仁、肉豆蔻三味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用； 

b)水提取：将a)项中的药渣与本实施例所述的赶黄草、灵芝、生薏米置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，最佳为8倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，最佳为2小时，沸腾后蒸汽压力0.03-0.04Mpa，合并煎液，滤过； 

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，最佳为1.02，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃； 

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％，最佳为65％，充分搅拌后，静置8-20小时，最佳为12小时，滤过； 

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，最佳为1.05-1.06，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取物。 

f)片剂的制备： 

a′)将e)步骤中的水提取物平铺于真空干燥箱中，真空干燥。真空度-0.06～-0.09Mpa，温度40-100℃，得干膏； 

b′)干膏粉碎成细粉80-120目； 

c′)干膏粉兑入适量糊精，喷入a)步骤中的挥发油，过筛，混合均匀，混合时间10-50分钟，最佳为30分钟； 

d′)制成片剂，每片重0.3-0.5g； 

实施例13、本发明的药物组合物片剂的制备 

赶黄草60份、灵芝15份、香薷8份、生薏米8份、杏仁8份、肉豆蔻10份。 

按照实施例12所述的制备方法制成片剂。 

实施例14、本发明的药物组合物片剂的制备 

赶黄草10份、灵芝6份、香薷5份、生薏米5份、杏仁5份、肉豆蔻5份。 

按照实施例12所述的制备方法制成片剂。 

实施例15、本发明的药物组合物颗粒剂的制备 

赶黄草30份、灵芝10份、香薷7份、生薏米7份、杏仁7份 

a)蒸馏：将上述的香薷、杏仁两味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用； 

b)水提取：将a)项中的药渣与上述的赶黄草、灵芝、生薏米置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，最佳为8倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，最佳为2小时，沸腾后蒸汽压力0.03-0.04Mpa，合并煎液，滤过； 

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，最佳为1.02，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃； 

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％，最佳为65％，充分搅拌后，静置8-20小时，最佳为12小时，滤过； 

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，最佳为1.05-1.06，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取 物。 

f)颗粒剂的制备： 

a′)将e)步骤中的水提取物平铺于真空干燥箱中，真空干燥。真空度-0.06～-0.09Mpa，温度40-100℃，得干膏； 

b′)干膏粉碎成极细粉，过200目筛； 

c′)干膏粉兑入适量糊精，过筛，混合均匀，混合时间10-50分钟，最佳为30分钟； 

d′)混合后的干膏粉用95％乙醇制粒，制粒时间3-10分钟，最佳制粒时间为7分钟； 

e′)将d′)项中所制的湿颗粒平铺于干燥箱中，干燥，铺层厚度约1-4cm，最佳约2cm，干燥温度50-100℃； 

f′)将干燥后的颗粒整粒，用目数为14目的筛网整粒，喷入a)步骤中的挥发油，混合均匀； 

g′)装袋，每袋装0.3-0.5g； 

实施例16、本发明的药物组合物颗粒剂的制备 

赶黄草55份、灵芝5份、香薷5份、生薏米5份、杏仁5份 

按照实施例15所述的制备方法制成颗粒剂。 

实施例17、本发明的药物组合物颗粒剂的制备 

赶黄草10份、灵芝15份、香薷10份、生薏米10份、杏仁10份 

按照实施例15所述的制备方法制成颗粒剂。 

实施例18、本发明的药物组合物颗粒剂的制备 

赶黄草60份、灵芝15份、香薷5份、生薏米5份、杏仁5份 

按照实施例15所述的制备方法制成颗粒剂。 

实施例19、本发明的药物组合物颗粒剂的制备 

赶黄草5份、灵芝5份、香薷10份、生薏米10份、杏仁10份 

按照实施例15所述的制备方法制成颗粒剂。 

以上以实施例3、6、9、12、15为最佳实施方案 

通过以下实验进一步说明本发明的药物组合物的治疗效果。 

1. 材料及方法： 

1.1 材料及仪器 

体重为180±20g的SPF级SD大鼠75只(购白中国人民解放军军事医学科学院实验室，动物许可证：SCXK-(军)2007-004)；高脂高营养饲料(购自中科院放射研究所动物中心)配比：1％胆固醇、8％蛋黄粉、0.3％胆酸钠、10％猪油、80.7％基础饲料；56°牛栏山二锅头(北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂生产)；HE染料(天津中医药大学病理实验室配制)；天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(中生北控201205)；甘油三酯(TG)及胆固醇(CHO)测定试剂盒(分别为中生北控201205，201204)；黄嘌呤氧化酶(XO)及丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成20120718)；PDGF测定试剂盒；离心机(北京雷勃LDZ5-2型)；半自动生化分析仪(microlab300，荷兰图威)；分光光度计(上海722RS型)。 

1.2. 方法 

1.2.1 动物模型的建立 

采用酒精灌胃法建立酒精性脂肪肝模型，75只SPF级成熟SD雄性大鼠经一周适应性饲养(普通基础饲料，自由进食饮水，少量生理盐水灌胃)后随机分为3组，即对照组(n＝25)，中药组(n＝20)，西药组(n＝30)。按每周测得体重每天分早晚2次(早晚时间相差8h以上)给予1.5ml/100g酒精灌胃，酒精体积分数初起为40％(4.8g.kg-1.d-1)并持续至第4周末，后增加酒精体积分数至45％ (5.4g.kg-1.d-1)至第8周末，乙醇体积分数加为50％(6.0g.kg-1.d-1)时维持体积分数不变至实验末(实验持续12周，适应性饲养不计入实验周)。 

1.2.2 给药情况及取材 

各组均在以上酒精性脂肪肝造模基础上，中药、西药及模型组酒精灌胃不变于第9周起，第1次酒精灌胃半小时后，中药组予本药物组合物2ml(浓度1.33g/ml)灌胃，西药予易善复混悬液2ml(多烯磷酸酯胆碱浓度4.56mg/ml)灌胃，对照组予等剂量的生理盐水2ml灌胃。 

由于期间大鼠死亡较多，实验第10周2次酒精灌胃减为1次至实验末。各组大鼠实验期间均饲以高脂高营养饲料，自由进食饮水。 

对照组大鼠分别于第4周随机选取4只，第8周随机选取5只，禁食水12小时后称重，***麻醉眼眶取血，脱颈处死后即取出肝脏，称肝湿重并取右肝叶以10％甲醛溶液固定，切片以石蜡包埋，HE染色后于光镜下行病理学观察。 

实验其余各组大鼠第12周末取材，禁食水12h后称体重，***麻醉后眼眶采集血液样本2ml，脱颈处死后即取出肝脏，称肝湿重并取右肝叶以10％甲醛溶液固定，切片以石蜡包埋，HE染色后于光镜下行病理学观察，左肝叶取约1×1cm肝组织块以锡纸包裹存放于-70℃冰箱备份。所有血液样本经3000r/min离心取血清用于测定生化酶学指标及ELISA检测。 

1.2.3 观察指标及测定方法 

1.2.3.1 动物表现 

包括精神状况、皮毛、活动度、进食情况、大小便及染毒情况，并每周测体重2次。 

1.2.3.2 肉眼观察 

包括肝脏的外形、大小、色泽、质地、边缘情况并称重量。 

1.2.3.3 生化指标测定 

测定大鼠ALT、AST、TG、TC指标。 

1.2.3.4 ELISA测定 

测定PDGF-bb活力。 

1.2.3.5 病理学观察 

石蜡包埋，HE染色后观察大鼠肝脏的病理学改变(肝细胞变性、坏死、炎细胞浸润等)，根据《2010版酒精性肝病诊疗指南》标准判断脂肪变性程度及酒精性肝炎炎症活动度。 

1.3 统计学处理 

应用SPSS18.0通用软件进行分析，实验数据以±S表示，采用方差分析及秩和检验。 

2. 结果 

2.1 一般情况 

各实验组大鼠均在酒精灌胃15分钟后轻者行走不稳、拖地行走，重者眼球充血、嗜睡，约5h后恢复常态，并于灌胃后第四周逐渐出现精神萎靡，毛发光泽度差，活动较少，中药组大鼠在给予中药灌胃后大便偏软色深呈黑色，其余组大鼠大便干燥，对照组大鼠进食量较中药组及西药组少，精神萎靡，活动更少。 

表1 各组大鼠体重、肝指数(肝脏湿重/大鼠重量×100％)、肝湿重对比 

注：因实验操作及大鼠消化道损伤问题，实验过程中各组大鼠均有死亡，对照组大鼠死亡4只，中药组死亡数为5只，西药组共死亡11只。 

从体重来看，总体比较差异有统计学意义(P＝0.000)，4W组与12W组及 中、西药组，8W组与12W组及中、西药组差异有统计学意义(P均为0.000)，随时间进展及高脂饲料摄入量累积，大鼠体重持续增加，从表1中看出，中药组及西药组体重明显高于对照组大鼠，中药组体重最高，表明药物干预在一定程度上减轻大鼠肝脏损伤，并保护大鼠消化道改变，促进食欲，从而增加体重。 

从肝指数来看，采用方差分析总体P值＜0.05，但组间比较无差异，各组间肝湿重比较差异无意义(P＞0.05)。 

2.2 肉眼观察 

对照组大鼠肝脏色泽较正常肝脏色暗淡，棕黄色或红褐色，质地偏硬，被膜与周围组织粘连，边缘稍钝；中药组大鼠肝脏色泽较对照组浅，呈红褐色，质地稍软，肝脏被膜与周围组织有轻度粘连，边缘稍钝；西药组大鼠肝脏色泽较中药组相近，呈红褐色，质地稍软，肝脏被膜与周围组织有粘连，边缘钝。 

2.3 生化指标的测定 

表2 

(1)从ALT来看，各组间差异有统计学意义(P＝0.001＜0.05)。组间差异表现为中药组与对照组12W之间，且差异有统计学意义(P均＜0.05，P为0.001)，且中药组肝损伤程度明显低于对照组12W、西药组，中药组干预肝损伤程度最明显。 

(2)从AST来看，中药组与对照组及西药组差异均有统计学意义(P均＜0.05，分别为(0.002、0.015)，肝损伤程度明显减轻。 

(3)从TG来看，各组间差异有统计学意义(P＝0.001＜0.05)。组间差异表 现为对照组12W与中药组、西药组之间及西药组与中药组之间，且差异均有统计学意义(P均＜0.05，分别为0.000、0.011、0.03)，表示西药组、中药组2组药物均有明显效果，且根据均值比较，中药组效果最好。 

(4)从TC来看，各组间差异有统计学意义(P＝0.001＜0.05)。组间差异表现为①对照组8W与对照组12W、西药组、中药组之间，且差异均有统计学意义(P均＜0.05，分别为0.004、0.001、0.000)；②对照组4W与中药组之间，且差异均有统计学意义(P＝0.007＜0.05)；③中药组与西药组之间，且差异均有统计学意义(P＝0.007＜0.05)。说明西药组、中药组药物均有明显效果，且根据均值比较，中药组效果最好，西药组次之，但中药组与西药组之间差异无统计学意义(P＝0.153＞0.05)。 

当肝细胞损伤时，ALT和AST即从细胞内逸出，释放入血。血清中ALT和AST活性升高，在一定程度上反映了肝细胞受损程度。从表2中可以看出，不同时间段对照组的ALT及AST活性均高于中药组及西药组，提示对照组肝损伤程度较严重，本药物组合物及西药易善复可降低ALT、AST活性，对酒精所导致的肝损伤起到保护作用。TG，TC各组均有差异，当胃肠道长期大量摄取的脂肪超出机体热量的消耗时，肝内脂肪释放出过量的未酯化脂肪酸(NEFA)。NEFA是TG的前驱物，它的增加导致肝内合成TG增加。若肝内合成TG的速度超过了组合为极低密度脂蛋白及分泌入血流的速度时，便出现了肝中TG的堆积，新药组的TG值最低，可能与降低未酯化脂肪酸的释放有关。 

从表2可看出，对照组不同时间段各酶学指标出现上升后继而下降的变化趋势，第4周至第8周，AST及ALT均明显升高，酒精灌胃早期损伤较严重，可能出现免疫耐受，其机制有待于进一步研究。 

2.4 肝组织MDA、XO活性及ELISA测定血清PDGF-bb活力测定。 

表3 

肝组织MDA各组间差异均无统计学意义(P＝0.219＞0.05)。 

肝组织XO各组间差异均无统计学意义(P＝0.125＞0.05)。 

血清PDGF各组间差异均无统计学意义(P＝0.502＞0.05)。 

测定血肝组织匀浆中丙二醛的含量可了解体内脂质过氧化作用的程度，对于研究肝损伤是一项有意义的指标，从表3可以看出，各组间变化不显著，但中药组及西药组均高于对照组，表明药物干预可抑制脂质过氧化，保护肝脏受损，黄嘌呤氧化酶是酒精性肝损伤的敏感指标之一，其活性的高低反应出肝脏损伤程度，肝脏受损越严重，活性越高，本实验中对照组活性高于中西药组，提示损伤较药物组重，药物在一定程度上降低肝损伤，但中药组稍高于西药组，可能实验中药浓度较低的原因。PDGF数值虽无统计学意义，但可以看出中药组PDGF最低，中药在降低血小板生长衍生因子活性方面优于西药组。 

2.5 病理学观察 

2.5.1 中药组 

新药组肝小叶结构改变，肝细胞边界稍模糊，弥漫性水样变性明显，中央静脉周围出现明显点灶状坏死及细胞碎屑，脂肪变程度较明显(F2-3级)，部分标本出现组织间红细胞积聚现象。 

2.5.2 西药组 

西药组肝小叶结构改变，肝细胞边界稍模糊，弥漫性水样变性较明显，中央静脉周围出现明显的点灶状坏死及细胞碎屑伴汇管区炎细胞浸润，脂肪变性与中药组差别不大，多数为轻度脂肪变性(F1-2级)，未观察到明显的脂肪变(F3及以上)，个别标本出现组织间红细胞积聚现象，其原因有待进一步考证。 

2.5.3 对照组 

对照组4周细胞水肿较明显，8周其水样变性进一步加重，部分肝细胞呈气球样变，中央静脉周围可见碎屑状细胞坏死，12周小叶结构改变，肝细胞边界不清，点灶状坏死及细胞碎屑仍多聚集于中央静脉周围，并出现脂肪小滴，且脂肪变性较其他组稍明显，部分标本出现大面积脂肪空泡(F3级)，个别标本出现纤维化轻度增生长入肝小叶内及组织间红细胞积聚现象。 

从总体变化趋势上看，对照组的脂肪变性处于持续进展状态，中药组及西药组的脂肪变性较对照组轻且变化不明显，但细胞水肿较明显，其中西药组中央静脉周围点灶状坏死及细胞碎屑伴汇管区炎细胞浸润较中药组明显，对照组细胞也可见较明显的细胞水样变性，部分呈气球样变，汇管区中性粒细胞浸润，多处坏死灶，考虑发生并存在急性损伤，点灶状坏死，随着酒精刺激时间延长，出现弥漫性水样变性，点灶状坏死灶增多，汇管区炎细胞浸润加重，肝损伤呈加重趋势。 

该药物组合物的毒性试验 

1、急性毒性试验： 

药物组合物浸膏按100g/kg给小鼠灌胃给药，无死亡发生，未见活动异常。相当于临床用量的3次/日，4g/次，每人按50kg计算的800多倍。药物组合物浸膏按60g/kg给大鼠灌胃给药，无死亡发生，亦未见活动异常。相当于临床用量的400多倍。 

2、长期毒性试验： 

药物组合物浸膏以36、16、8g/Kg/日给大鼠连续灌胃给药3个月，对血液学指标无明显影响；对血液生化指标亦无明显影响；脏器系数、病理组织学检查亦未发现明显的病理改变。 

以下对用上述药物组合物治疗酒精性脂肪肝的临床应用加以说明。 

通过实施国家食品药品监督管理局批复的临床试验方案，对酒精性脂肪肝 患者进行了胸闷、胁痛、头晕、气短、面部暗紫、疲乏无力、中医证候积分、中医证候单项指标、总疗效、中医证候疗效、起效时间、抗病毒、抑菌等项的临床观察，研究中用该药物组合物与对照药易善复进行比较，按照国际通行的疗效评价标准对其评价，结果显示该药物组合物是治疗酒精性脂肪肝的有效而安全的内服药物制剂。 

采用随机双盲分层对照法，临床观察酒精性脂肪肝患者132例，其中治疗组70例，用本药组合物每次4g，每日3次，服用3个月，对照组62例，服用易善复，每次5mg，每日2次，服用3个月。观察患者胸闷、胁痛、头晕、气短、面部暗紫、疲乏无力、综合功能以及舌质、舌苔、脉象诸项指标的治疗前后变化情况，结果显示： 

1、患者胸闷治疗后恢复到0分和1分者为61例，占87％；胁痛治疗后恢复到0分和1分者为60例，占85.7％；头晕治疗后恢复到0-2分者为62例，占88.6％；气短治疗后恢复到0-2分者占82％；面部紫暗治疗后恢复到0-2分者占78％；疲乏无力治疗后恢复到0-2分者占83.0％； 

2、治疗前后患者综合功能水平比较，病人综合功能水平治疗后恢复到0-2分水平者为80％； 

3、治疗前后患者舌象、脉象积分比较，舌质、舌苔和脉象三证治疗后有显著性恢复，尤其是舌象恢复极为良好； 

4、治疗后患者总疗效比较，治疗后的总有效率为91.3％，而显效率为82％； 

5、治疗后患者中医证候疗效比较治疗后的总有效率为97.1％，愈显率为80％； 

6、治疗后患者治疗组与对照组中医证候疗效比较见表1： 

表1 两组治疗后中医症候总有效率疗效比较[例(％)] 

7、治疗前后病人安全性指标无显著性差异(P＞0.05)，治疗过程中及治疗后均未发生不良反应。 

以上各项指标与对照组比较，该药物组合物的各项指标和临床疗效均优于对照药，治疗后病人各项指标和症状改善情况明显优于同类药物。 

8、本说明书所述药物组合物治疗酒精性脂肪肝典型病例一例： 

患者：孟某，男，52岁，天津红桥人，主因“胁痛、疲乏无力3天”，2012年8月9日入院。 

患者于3天前出现胁痛、疲乏无力，胸闷、头晕、气短、面部暗紫等酒精性脂肪肝的症状，苔腻，脉右沉涩左弦。实验室检查：ALT：212U/L，AST：278U/L，MDA：4.36umol/L，XO：21.54umol/L，PDGF：48.98umol/L，TG：0.98umol/L，TC：3.41umol/L。 

诊断： 

    中医诊断：肝郁气滞，湿浊内蕴 

    西医诊断：酒精性脂肪肝 

治疗： 

    用升清降浊解郁法 

方药： 

使用本说明书所述药物组合物治疗3个月，胁痛消失，疲乏无力基本消失，胸闷、头晕症状消失，气短显著好转，面部紫暗明显转红润，舌淡苔白，脉象平和，精神、饮食、二便正常。实验室检查：ALT：44U/L，AST：47U/L，MDA：264umol/L，XO：12.38umol/L，PDGF：24.63umol/L，TG：0.44umol/L，TC：1.97umol/L。 

Claims (10)

1.一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物，其特征是：所述药物组合物按重量份由以下药味制成，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是：所述药物组合物组方中还可以加入中药砂仁，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、砂仁5-10份。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是：所述药物组合物组方中还可以加入中药肉豆蔻，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、肉豆蔻5-10份。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是：所述药物组合物组方中还可以加入葛根、葛花，得到的配方为，赶黄草5-60份、灵芝5-15份、香薷5-10份、生薏米5-10份、杏仁5-10份、葛根5-10份、葛花5-10份。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过降低未酯化脂肪酸的释放，减少肝中TG的堆积，增加脂代谢，从而防治酒精性脂肪肝。

6.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过类抗氧化剂样效用，减轻脂质过氧化反应，减轻肝纤维化，从而防治酒精性脂肪肝。

7.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过降低血小板生长衍生因子(PDGF)活力，抑制HSC激活转化，防止酒精性脂肪肝向酒精性肝纤维化发展，从而防治酒精性脂肪肝。

8.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过降低ALT、AST活性，对酒精所导致的肝损伤起到保护作用，从而防治酒精性脂肪肝。

9.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过抑制黄嘌呤氧化酶XO活性，利于肝细胞的能量代谢，从而防治酒精性脂肪肝。

10.一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

a)蒸馏：将上述权利要求1-4任意一项所述的药物组合物中的香薷、杏仁或香薷、杏仁、肉豆蔻两味或三味药物水蒸气蒸馏，收集挥发油、蒸馏液、药渣，备用；

b)水提取：将a)项中的药渣与上述权利要求1-4任意一项所述的药物组合物中除香薷、杏仁或香薷、杏仁、肉豆蔻外的其余药物置水提取罐中，按重量计加入所述药物组合物的6-10倍量水，煎煮2次，每次1-4小时，沸腾后蒸汽压力0.03-0.04MPa，合并煎液，滤过；

c)浓缩：将a)步骤中的蒸馏液和b)步骤中的水提取滤液置浓缩罐中，浓缩至相对密度为1.01-1.03，温度50℃的清膏，浓缩温度50-100℃；

d)醇沉：浓缩液置醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇使其含醇量达50％-75％，充分搅拌后，静置8-20小时，滤过；

e)回收乙醇：滤液置减压回收罐中，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.04-1.07，温度45℃的稠膏，浓缩温度40-100℃，得水提取物；

f)颗粒剂的制备：

a′)将e)步骤中的水提取物平铺于真空干燥箱中真空干燥，真空度-0.06～-0.09MPa，温度40-100℃，得干膏；

b′)干膏粉碎成极细粉，过200目筛；

c′)干膏粉兑入适量糊精，过筛，混合均匀，混合时间10-50分钟；

d′)混合后的干膏粉用95％乙醇制粒，制粒时间3-10分钟；

e′)将d′)项中所制的湿颗粒平铺于干燥箱中干燥，铺层厚度1-4cm，干燥温度50-100℃；

f′)将干燥后的颗粒整粒，用目数为14目的筛网整粒，喷入a)步骤中收集的挥发油，混合均匀；

g′)装袋，每袋装0.3-0.5g。