CN103142943B - 具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物,所述中药组合物的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。该中药组合物在清热解毒,抗菌消炎的同时,能够提高奶牛的免疫能力,从而提高奶牛的抗应激,抗疾病能力,在治疗奶牛乳腺方面具有疗效好,防复发,无耐药性,无残留,无毒副作用的优势。
Description
技术领域
本发明涉及中药免疫技术领域,尤其涉及一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物。
背景技术
奶牛的乳腺是机体内一个复杂生物反应器,在乳腺内部,众多的保护因子包括细胞因子、抗体、激素、酶和神经递质等一起构建了多条错综复杂的信号通路,这些因子之间的动态平衡是维持乳腺健康的基本条件。当奶牛乳腺发生炎症时,机体抵抗力下降,体内细胞因子及其受体的表达就会发生异常。
奶牛乳腺炎( mastitis) 是指奶牛的乳腺组织内发生了某种类型的炎症,并伴有不同程度乳汁物理、化学及微生物学变化,它是反刍动物发病率最高、最常见的疾病之一,是由于机体代谢和生理状态改变、***损伤以及感染或环境病原微生物等引起的乳腺炎症反应。它通常是由病原微生物感染、饲养管理、环境、奶牛自身及遗传等因素综合作用引起的。乳腺炎的发生不仅使发情配种的时间延长和胎间距拉长,降低了奶牛的生产性能,导致产奶量下降,甚至***坏死,丧失泌乳能力。每年因奶牛乳腺炎造成的经济损失,美国约20 亿美元,英国约 3 亿英镑,我国每年也在数亿人民币,而且还严重地影响了牛奶制品的品质,并间接地危及人类健康。
目前,国内外对奶牛乳腺炎的治疗药物主要是抗生素,抗生素是目前乳腺炎治疗的基本药物,但此类药物的治疗效果常并不令人满意,而其引起的药物残留问题却越来越受到众多的非议。近年来,畜禽产品质量安全问题已成为我国畜牧业发展的一个主要矛盾。奶牛场的大量使用抗生素将对乳品质量安全产生负面影响。我国奶牛业乳腺炎发病率较高,抗生素使用频繁,药物残留量超标现象较严重,严重损害了奶牛业产品的市场竞争力,如何在保障奶牛健康的前提下减少抗生素的使用是奶牛业面临的重要课题。
采用抗生素治疗选择的是单纯抗菌的思路,只重视了对微生物的杀灭,而未重视作为乳腺炎过程中矛盾的另一方面,即奶牛本身的炎症反应和炎症引起的免疫力下降的问题。病理学认为,炎症是机体对不良刺激的一种防御反应,是一个病理过程。当然,微生物感染常是引起炎症的主要刺激因素,但炎症并不单纯地等于感染。乳腺炎是乳腺的炎症,微生物感染和乳腺组织的反应是其矛盾的两个主要方面。由此可见,目前的乳腺炎研究多只重视了微生物感染的问题,而忽视了矛盾的另一个主要方面。适度的炎症反应有利于感染原的清除,但炎症反应强度过大时可造成较重的微循环损伤和障碍,使炎区局部水肿加剧、物质交换受阻、有害代谢产物难于排出。此时,即使感染原已完全或基本清除,局部大量有害产物和炎症介质的蓄积仍导致乳腺组织仍维持炎症状态。同时,组织水肿也阻碍药物进入炎区,降低各种药物的使用效果。可判断发病初期,以微生物感染为主要矛盾,而随着疾病的发展,乳腺内炎症反应加强、感染受到控制,主要矛盾很快转变为炎症引发的免疫力低下,抗病力减弱。在人医临床上,同样,过去一直认为感染性炎症是细菌或病毒引起,只要消除细菌或病毒,炎症自会消退。90 年代以来,各种感染和非感染性疾病中,机体炎性反应过激及其造成的免疫力低下,抗病力减弱己得到较多的重视。
综上所述,乳腺免疫***对临床型乳腺炎的进程有重要影响。而提高免疫***对炎区组织修复也有着根本意义,组织的修复又直接关系到病后泌乳能力的保持。所以,对那些临床症状明显的病例,应改变原有的单纯抗菌的思路,把控制炎症反应本身、改善免疫***作为治疗的要点之一。
中药属于天然药物,具有抗菌、消炎、不易使致病菌产生耐药性和免疫增强的作用,具有安全、高效、低毒、低残留的特点,能克服大量使用抗生素带来的弊端。
中草药具有增强机体免疫机能,提高动物抗应激、抗疾病能力,改善动物生产性能等多种功效,而且无耐药性、无残留、毒副作用小,在畜禽养殖方面显示出独特的优势。
中药具有标本兼治的作用,它可直接抑制或杀灭乳腺炎的病原菌,或通过提高机体的免疫力而抑制或杀灭病原菌,在治疗奶牛乳腺炎方面具有巨大的潜力。因此,开展中草药防治奶牛乳腺炎不但是可持续畜牧业发展的要求,也是人们提高生活质量和对绿色食品消费的要求。
本发明就是在中兽医理论的基础上,提供一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物,其在抗菌消炎、清热解毒的同时能够提高奶牛的免疫力,从而实现从根本上对奶牛乳腺炎的治疗。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物,其在清热解毒,抗菌消炎的同时,能够提高奶牛的免疫能力,从而提高奶牛的抗应激,抗疾病能力,在治疗奶牛乳腺方面具有疗效好,防复发,无耐药性,无残留,无毒副作用的优势。
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物,其原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。
其中,所述中药组合物中各原料药的重量份分别为:路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
其中,所述中药组合物剂型为汤剂、散剂和注射液。
本发明还提供了上述中药组合物汤剂,所述汤剂中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。
本发明还提供了上述中药组合物散剂,所述散剂中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。
本发明还提供了上述中药组合物注射液,所述注射液中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为汤剂,其步骤具体为将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩,获得生药浓度为1g/ml的汤剂。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为散剂时,其步骤具体为将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩除去水,获得干膏,粉碎成粉末,干燥,获得散剂。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为注射液时,其步骤具体为:
第一步,将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入1~2g活性炭,煮沸10~15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至醇浓度为10g/ml~15g/ml的药液;
第二步,取所述药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂。
本发明的有益效果:
本发明提供的中药组合物在清热解毒,抗菌消炎的同时,能够提高奶牛的免疫能力,从而提高奶牛的抗应激,抗疾病能力,在治疗奶牛乳腺方面具有疗效好,防复发,无耐药性,无残留,无毒副作用的优势。
具体实施方式
中兽医传统理论认为,乳腺炎即乳痈,是痰、湿、气、血瘀结不散化而为炎。因饲养管理不善,久卧湿热之地,湿热毒气上蒸,侵害***;或因胃热雍盛,肝郁气滞,乳络失畅以致***气血凝滞,瘀结而生痈肿;或因牛犊吸奶,使乳汁停滞,***胀满等原因而导致本病,基于该理论,本发明提出以清热解毒、痛经活血、消肿止痛为原则,治疗奶牛乳腺炎。
另外,当机体受到细菌、霉菌、病毒等病原微生物感染或寄生虫的侵袭,如埃希氏大肠杆菌、肺炎球菌、结核杆菌等,病菌在宿主体内能分泌一种具有抑制嗜中性白细胞吞噬作用的因子,溶血性巴氏杆菌可分泌一种能杀死机体内巨细胞的物质,如此等等病菌的干扰 ,从而使机体降低和丧失抗感染的能力。
在整个***组织中,***管是乳腺组织的第一道天然屏障,其角质层可阻挡病原体的入侵;其上皮细胞可分泌具有杀菌作用的角蛋白,而且导管近端可以产生局部抗体和细胞因子。病原微生物只有突破这道防线后,才能感染乳腺组织。当***局部血液循环障碍时,乳腺黏膜***受损免疫能力降低 ,乳腺上皮细胞产生铁离子结合蛋白、细胞因子化学增活素、宿主防卫肽、精氨基琥珀酸代谢产物等炎性介质能力降低;自分泌和旁分泌减少,诱导中性粒细胞和淋巴细胞向感染部位移行作用减弱;效应 T 淋巴细胞分泌效应因子减少,细胞毒作用减弱。乳腺抵抗外源微生物感染的化学屏障作用降低。与此同时,固有层中含有的大量淋巴样细胞,例如肥大细胞、B 淋巴细胞、T 淋巴细胞等数量减少;辅助型 T淋巴细胞对B 细胞分泌的调节作用减弱,导致 IgA分泌量不足,无法阻止金黄色葡萄球菌和链球菌等病原菌与乳腺上皮细胞的结合;IgG2 对中性粒细胞的吞噬能力的增强作用减弱 ,吞噬细胞数减少,无法抑制细菌与腺体上皮细胞的结合激活补体。而血液循环障碍又使免疫活性细胞难以进入乳腺组织,血清溶菌酶活性降低。最终,激素-细胞因子-免疫平衡遭到破坏,乳腺的免疫机能降低,造成致病菌大量入侵、增殖引发炎症,因此,本发明提供的中药组合物还要起到提高免疫功能的作用。
综上所述,本发明提供的中药组合物以清热解毒、通经活血、消肿止痛、免疫增强为原则,所述中药组合物的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参。
优选,所述中药组合物仅由上述原料药构成。
所述中药组合物中各原料药的重量份分别为:
路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
所述中药组合物中各原料药的重量份优选分别为:
路路通18重量份~22重量份、甘草33重量份~37重量份、黄精63重量份~67重量份、紫花地丁23重量份~27重量份、白头翁38重量份~42重量份、珠子参58重量份~62重量份、杜仲43重量份~47重量份、大青叶58重量份~62重量份、没药23重量份~27重量份、牡丹皮38重量份~42重量份、枇杷叶18重量份~22重量份、黄连53重量份~57重量份、首乌藤38重量份~42重量份、白芍33重量份~37重量份、姜黄33重量份~37重量份、黄芪83重量份~87重量份、白术53重量份~57重量份、广枣23重量份~27重量份、五味子43重量份~47重量份和北沙参33重量份~37重量份。
所述中药组合物中各原料药的重量份最优选分别为:
路路通20重量份、甘草35重量份、黄精65重量份、紫花地丁25重量份、白头翁40重量份、珠子参60重量份、杜仲45重量份、大青叶60重量份、没药25重量份、牡丹皮40重量份、枇杷叶20重量份、黄连55重量份、首乌藤40重量份、白芍35重量份、姜黄35重量份、黄芪85重量份、白术55重量份、广枣25重量份、五味子45重量份和北沙参35重量份。
各原料药的药理具体为:
路路通:味苦,性平,归肝,肾经,具有祛风活络,利水通经的功效,用于关节痹痛,麻木拘挛,水肿胀满,乳少经闭等证。
甘草:味甘,性平,入十二经,有清热解毒,调和药性,祛痰止咳的作用,并能健脾和中,缓急止痛,主要用于脾胃虚弱之腹胀纳呆,乏力;能缓解腹中拘挛性疼痛,缓和某些药物的烈性和毒性,减轻药物对机体的毒副作用或对胃肠道的刺激,通过加入甘草能起到补气中和,调和各组分的作用。
黄精:味甘,性平,入肺、脾、肾经,具有滋肾润肺,补脾益气的作用,用于阴虚肺燥,干咳痰少,消渴多饮,脾胃虚弱,脾气虚或脾阴不足,肾虚精亏,腰膝酸软,须发早白等证。
紫花地丁:味苦、辛,性寒,入心、肝经,具有清热解毒、凉血消肿的作用,主要用于治疗疔痈疮疖的治疗,对急性结膜炎、麦粒肿等也具有较好疗效,紫花地丁对黄金色葡萄球菌、肺炎杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌、流感杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、白色葡萄糖球菌、白色念珠菌有不同程度的抑制作用。
白头翁:味苦,性寒,入胃、大肠经,有清热解毒、凉血止痢的作用,主要用于肠胃有湿热积滞之发热腹痛,下痢脓血,里急后重等症状的治疗,对大肠血热之热痢下血效果较好,白头翁对痢疾杆菌、伤寒杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黄金色葡萄球菌均有一定的抑制作用。
珠子参:味苦、甘,性微寒,入肝、肺、胃经,具有补肺养阴,散瘀止血,消肿止痛的作用,用于气阴两虚、烦渴口渴、虚劳咳嗽,各种出血症,如吐血、咳血、便血、尿血、崩漏,跌打伤肿,风湿关节痛、胃痛,风火牙痛,咽喉肿痛,疮痈肿毒等证。
杜仲:味甘、微辛,性温,入肝、肾经,具有降血压、补肝肾,强筋骨,安胎气的作用,用于肝肾亏虚、证见眩晕、腰膝酸痛、筋骨痿弱;肾气不固、尿频或尿有余沥、阴下湿痒、阳痿、孕妇体弱、胎动不安或腰坠痛;慢性关节疾病、骨结核、痛经、功能失调性子宫出血、慢性***等证,杜仲的叶和皮含有蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等营养成分。
大青叶:味苦、性大寒,归心、肝、胆、胃经,具有清瘟解毒,凉血化斑,退黄的功效,既能清气分之实热,又能解血分之热毒,主要用于瘟病热病所致之高热汗出,烦渴引饮;火毒炽盛之发斑发狂,吐血等症状;麻疹之高热神昏,疹色紫暗;肝胆湿热蕴蒸之黄疸;肝胆火升之耳聋耳鸣;火郁热毒所致之咽痛、口舌生疮、肝炎等证。
没药:味辛、苦,性平,归心、肝、脾经,具有散瘀定痛,消肿生肌的功效,主治胸痹心痛,胃脘疼痛,痛经闭经,风湿痹痛,跌打损伤,痈肿疮疡等证。
牡丹皮:味苦、辛,性微寒,入心、肝、肾经,具有清热凉血、活血散瘀的作用,主要用于治疗温热病热入血分、发斑、吐衄,热病后期热伏阴分发热、阴虚骨蒸潮热、血滞经闭、痛经、痈肿疮毒、跌扑伤痛、风湿热痹等证。
枇杷叶:味苦,性微寒,归肺,胃经,具有清肺止咳,降逆止呕的功效,本品苦寒,能清肺热,降肺气以止咳,常用于治疗肺热咳嗽、痰多色黄,可降胃气而止呕逆,用于胃热引起的呕逆,治疗口干消渴,肺风面疮,粉刺
黄连:味苦、性寒,入心、肺、胆、胃、大肠经,有清热燥湿、泻火解毒、凉血明目的作用,长于泻心胃之火,兼有止呕消痞之功,可用于治疗心火旺所致之心烦不眠,及温热病之壮热神昏、心烦、口渴;还可用于湿热所致之痢疾、里急后重;热毒疮痈、湿疹、口舌生疮、暴发火眼等证。
首乌藤:味甘,性平,归心、肝经,具有养血安神,祛风通络的功效,主治失眠多梦,血虚身痛,风湿痹痛;皮肤瘙痒等证,首乌藤能够活血、通经、扩张血管、促进血液循环、下乳消肿。
白芍:味苦、酸,性凉,归肝、脾经,具有养血柔肝,缓中止痛,敛阴收汗的功效,主治胸腹胁肋疼痛,泻痢腹痛,自汗盗汗,阴虚发热,***,崩漏,带下等证。
姜黄:味苦、辛,性温,入肝经,具有破血行气,通经止痛的功效,用于胸胁剌痛,闭经,症瘕,风湿肩臂疼痛,跌扑肿痛等证,姜黄具有抗炎作用。
黄芪:味甘,性温,入脾、肺经,有补益脾土,升举阳气、固表止汗,托疮生肌的功效,主治脾肺气虚所致之乏力食少便溏,心悸气短,中气下陷之脏器下垂,气不摄血之崩漏便血,久泻脱肛;表虚不固之自汗盗汗,气血不足等证。黄芪使心脏收缩能力增强,能改善全身的血液循环,能扩张冠状动脉、肾血管及拳参末梢血管、使皮肤血液循环旺盛;能提高机体的非特异免疫力,有保肝和降低血糖的作用,对葡萄球菌、血溶性链球菌、肺炎双球菌、痢疾杆菌等有抑制作用,黄芪可显著影响脾淋巴细胞信息传导,实现免疫调节作用。
白术:味甘、苦,性温,入脾、胃经,有补脾利气,燥湿利水,固表止汗,运脾润燥的作用,主要用于脾失健运、气不化水所致之痞满腹泻,痰饮水肿;中气不足之心烦懒言,崩中漏下,久痢脱肛;脾虚气弱之奏里不固、虚汗自汗等证。
广枣:味甘、酸,性平,具有行气活血,养心,安神,抗心肌缺血,保护心功能等功效,主治气滞血瘀,胸痹作痛,心悸气短,心神不安等证。
五味子:性温,味酸、甘,归肺、心、肾经,具有收敛固涩,益气生津,补肾宁心的功效,用于久嗽虚喘,梦遗滑精,遗尿尿频,久泻不止,自汗,盗汗,津伤口渴,短气脉虚,内热消渴,心悸失眠等证。
北沙参:味甘、微苦,性微寒,具有养阴清肺,益胃生津的作用,用于肺热燥咳、劳嗽痰血、热病津伤口渴等证,黄精和北沙参结合使用可用于治疗脾胃阴虚、饥不欲食、脘腹不舒、口燥咽干,舌红少津等症。
这些中药原料药组分中含有多糖类、苷类、生物碱、有机酸、挥发性油脂、植物色素等多种功效成分,具有增强机体免疫功能、提高动物抗病力、促进动物生长及改善动物生产性能等作用。
本发明提供的中药组合物以清热解毒、通经活血、消肿止痛、免疫增强为原则,既能抗菌消炎、活血止痛,又能提高患病奶牛的免疫机能,从而达到标本兼治、祛邪固本的效果,该药物为内用药物。
采用中药灌服汤剂灌服治疗奶牛乳腺炎,虽有较好的治愈效果,但对奶牛的刺激较大,而且因为口服给药的肝脏首过效应和胃肠道的代谢,还降低了药物的有效成分,因而用药剂量大,治疗成本较高;而拌料散剂喂食,因药物气味影响,常常引起奶牛采食量下降,从而影响治疗效果。本发明还采用***灌注方法,采用该方法可以避免上述给药方式的缺点,使药物直接作用于患处,在乳腺内达到较高的药物浓度,发挥抗菌消炎,提高免疫机能的治疗作用。
因此,本发明的中药组合物剂型为汤剂、散剂和注射液。
本发明将上述中药组合物通过注射治疗,可以刺激淋巴细胞的增殖,并通过抗体及补体等成分的作用使嗜中性粒细胞的吞噬力进一步增强,显著提高了患病奶牛的嗜中性粒细胞的吞噬能力,从而提高其免疫力。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为汤剂时,具体为:
将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩,获得生药浓度为1g/ml的汤剂。
本发明制备的汤剂直接灌胃给奶牛服用。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为散剂时,具体为将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩除去水,获得干膏,粉碎成粉末,干燥,获得散剂。
本发明制备的散剂拌入饲料中,供奶牛服用。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法,当所述中药组合物的剂型为注射液时,具体为:
第一步,将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入1~2g活性炭,煮沸10~15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至醇浓度为10g/ml~15g/ml的药液;
第二步,取所述药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂。
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式,借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题,并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
实施例1 中药注射液1
将路路通20g、甘草35g、黄精65g、紫花地丁25g、白头翁40g、珠子参60g、杜仲45g、大青叶60g、没药25g、牡丹皮40g、枇杷叶20g、黄连55g、首乌藤40g、白芍35g、姜黄35g、黄芪85g、白术55g、广枣25g、五味子45g和北沙参35g混合,搅拌粉碎,加入5.2kg水,煎煮4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入2.5kg水,再次煎煮4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入2g活性炭,煮沸15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至醇浓度为15g/ml的药液,取该药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂1。
实施例2 中药注射剂1的毒性试验
将 50 只小白鼠随机分为5组,每组 10 只,并且保证雌雄各半。给药途径为腹腔注射,通过预试试验得出黄连蒲注射液 0%和 100%动物死亡的剂量范围在 4000~12000mg/kg 体重,分成四个剂量组和一个对照组,组间剂量比为 1∶0.8。口服用药量分别为 7680mg/kg、9600mg/kg、12000mg/kg、15000mg/kg,腹腔注射用药量分别同口服用药量,对照组腹腔注射剂量(0.4mL)的生理盐水。试验期为 7d,观察动物临床表现和死亡情况。
给药后,各组小白鼠外观毛色光亮,行为活动正常,无异常病理性神经反射出现,七天中进食良好,末见其它异常表现,体重变化与水对照组相比无明显差异且无一动物死亡,无法测出试验小白鼠的LD50,LD50大于 5000mg/kg 为实际无毒物质,说明本中药组合物安全性高。
实施例3 中药注射液2
将路路通15g、甘草30g、黄精60g、紫花地丁20g、白头翁35g、珠子参55g、杜仲40g、大青叶55g、没药20g、牡丹皮35g、枇杷叶15g、黄连50g、首乌藤35g、白芍30g、姜黄30g、黄芪80g、白术50g、广枣20g、五味子40g和北沙参30g混合,搅拌粉碎,加入5kg水,煎煮4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入2.5kg水,再次煎煮4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入2g活性炭,煮沸15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至醇浓度为15g/ml的药液,取该药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂2。
实施例4 中药注射液3
将路路通25g、甘草40g、黄精70g、紫花地丁30g、白头翁45g、珠子参65g、杜仲50g、大青叶65g、没药30g、牡丹皮45g、枇杷叶25g、黄连60g、首乌藤35重量份~45g、白芍40g、姜黄40g、黄芪90g、白术60g、广枣30g、五味子50g和北沙参40g混合,搅拌粉碎,加入6kg水,煎煮4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入2.5kg水,再次煎煮4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入2g活性炭,煮沸15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至醇浓度为10g/ml的药液,取该药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂3。
实施例5 中药汤剂1
将路路通20g、甘草35g、黄精65g、紫花地丁25g、白头翁40g、珠子参60g、杜仲45g、大青叶60g、没药25g、牡丹皮40g、枇杷叶20g、黄连55g、首乌藤40g、白芍35g、姜黄35g、黄芪85g、白术55g、广枣25g、五味子45g和北沙参35g混合,搅拌粉碎,加入5.2kg水,煎煮4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入2.5kg水,再次煎煮4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩,获得生药浓度为1g/ml的汤剂。
实施例6 中药散剂1
将路路通20g、甘草35g、黄精65g、紫花地丁25g、白头翁40g、珠子参60g、杜仲45g、大青叶60g、没药25g、牡丹皮40g、枇杷叶20g、黄连55g、首乌藤40g、白芍35g、姜黄35g、黄芪85g、白术55g、广枣25g、五味子45g和北沙参35g混合,搅拌粉碎,加入5.2kg水,煎煮4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入2.5kg水,再次煎煮4个小时,煎煮液过滤,加热浓缩除去水,获得干膏,粉碎成粉末,干燥,获得散剂1。
实施例7 动物试验 试验动物分组及用药
在某牛场选取173头年龄4~6岁,产后4~5个月,经CMT检测患有***炎的奶牛, 随机分为治疗组和对照组,治疗组奶牛113头,西药对照组奶牛50头,另10头患牛作为空白对照组,不采用任何药物治疗,西药对照组采用青、链霉素***注入治疗,青霉素钠80万单位,链霉素50万单位肌注,每日3次,疗程为7天,治疗组在患处都灌注本发明实施例1制备的注射液 40 ml,2 次/ d,用药 7d,每日2次,早晚各一次,疗程为7天,三组均由专人饲养,统一基础日粮标准,每日饲喂3次,自由饮水、运动。
样品的采集
血样
颈静脉采集治疗组和对照组奶牛的血液( 采样前消毒取血部位) ,每头牛约取 15 ml,室温下静止。
乳样
选择实验组和治疗组的奶牛,从 6: 00 开始,每隔 5 h 采集乳汁,共取 3 次,每次20 ml( 采样前对乳区进行清洗,然后用 70% 乙醇消毒乳区,弃掉头 2 把乳汁) 。
样品的处理和测定
血样
将采集的血液置于室温下( 一般要求不超过20℃) 自然凝固1~2h,冰 浴30min,3000 r/min离心 10 min 分离血清,4 ℃保存,待测。
如检测时间较长,要将样品置于-80℃冰箱中保存,备用。采用北京华英生物技术研究所生产的 IL-8和 TNF-α 放免试剂盒测定血样。
乳样
将采集的乳汁于3000 r /min 离心5 min; 除去上层乳脂,置于 16000 r /min 高速离心机中离心 10 min; 取上清液 4 ℃ 保存( 如检测时间较长,要将样品置于-80 ℃ 冰箱中保存) ,待测。采用北京华英生物技术研究所生产的 IL-8 和 TNF-α放免试剂盒测定乳样。
免疫功能检测
***炎患牛在试验前、后分别于晨饲前进行颈静脉采血,以3 000r/min离心10min后,-20℃保存待测。测定的免疫指标有IgA、IgG和IgM。
***炎检验
测试试剂:上海亚临床***炎快速诊断液(SMT原液),上海市奶牛研究所,由上海奶牛中心提供;
使用方法:弃去前几把乳汁,将乳汁挤入诊断盘;诊断盘倾斜 45℃以弃去多余乳汁,使诊断盘中存留奶样 2m1 左右;每样品加 2m1 上海亚临床***炎快速诊断液;持诊断盘作水平顺时针摇动;再倾斜摇动 50 秒后观察。
指标判定标准:
-:反应物均质,流动无异常,颜色呈淡黄色。相应乳中体细胞数 0-20 万/ml。
±:倾斜诊断盘,反应物流过时盘底有薄絮层出现,颜色多为黄色或稍有绿色,判为可疑,相应相应乳中体细胞数 20-50 万/ml。
+:摇动可见反应物不均质,倾斜诊断盘时化合物有明显絮状(相应乳中体细胞数50~80万/ml),或摇动时反应物中间有厚絮,停止摇动后又可分开,(相应乳中体细胞数 80~150万/ml),反应物颜色呈黄绿色,该乳区判断为隐性***炎。
++:摇动诊断盘时反应物呈黏稠状、挂于盘底,颜色为黄绿色,相应乳中体细胞数150~500 万/ml。
+++:摇动诊断盘,反应物呈胶冻状,边缘半透明,颜色呈浅绿或深绿色,相应乳中体细胞数 500 万/ml 以上。
疗效评价标准
治愈:临床症状消失,直观乳汁无异常,奶产量基本恢复,SMT 法检测结果低于“++”为治愈。
好转:临床症状减轻或消失,乳汁中有少量絮状物,但乳汁色泽无异常。产量未能恢复正常,SMT 法检测结果仍高于“++”。
无效:判断标准中的各临床症状未减轻或加剧。
数据分析
利用 SPSS13. 0 统计软件进行分析,数据用平均值±标准差表示。
结果
各组患牛血液和乳汁中IL-8、TNF-α含量比较,结果见表1。
表1 各组患牛血液和乳汁中IL-8、TNF-α含量比较
在乳腺炎的发病过程中,随着炎症的加剧IL-8、TNF-α均显著增加,通过本发明治疗组和对照组的比较,可以看出本发明中药组合物能够明显降低IL-8 和 TNF-α的含量差异有统计学意义(P<0.01),证明,对乳腺炎炎症的消除具有显著效果。
各组患牛血液中免疫指标的影响,结果见表2。
表2 各组患牛血液中免疫指标的影响
从表2可以看出,采用本发明的中药组合物能够明显提高免疫指标,与对照组相比,IgM、IgA、IgG差异有统计学意义(P<0.05)。
两组治疗疗效比较,结果见表3。
表3 两组治疗疗效比较
从表3可以看出,本发明在治疗奶牛乳腺炎方面的效果要好于西药对照组。
所有上述的首要实施这一知识产权,并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息,上述内容修改,以实现类似的执行情况。但是,所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (8)
1.一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参;
所述中药组合物中各原料药的重量份分别为:路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物剂型为汤剂、散剂和注射液。
3.一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物汤剂,其特征在于:所述汤剂中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参;
所述中药组合物汤剂中各原料药的重量份分别为:路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
4.一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物散剂,其特征在于:所述散剂中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参;
所述中药组合物散剂中各原料药的重量份分别为:路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
5.一种具有免疫功能的用于治疗奶牛乳腺炎的中药组合物注射液,其特征在于:所述注射液中的原料药包括路路通、甘草、黄精、紫花地丁、白头翁、珠子参、杜仲、大青叶、没药、牡丹皮、枇杷叶、黄连、首乌藤、白芍、姜黄、黄芪、白术、广枣、五味子和北沙参;
所述中药组合物注射液中各原料药的重量份分别为:路路通15重量份~25重量份、甘草30重量份~40重量份、黄精60重量份~70重量份、紫花地丁20重量份~30重量份、白头翁35重量份~45重量份、珠子参55重量份~65重量份、杜仲40重量份~50重量份、大青叶55重量份~65重量份、没药20重量份~30重量份、牡丹皮35重量份~45重量份、枇杷叶15重量份~25重量份、黄连50重量份~60重量份、首乌藤35重量份~45重量份、白芍30重量份~40重量份、姜黄30重量份~40重量份、黄芪80重量份~90重量份、白术50重量份~60重量份、广枣20重量份~30重量份、五味子40重量份~50重量份和北沙参30重量份~40重量份。
6.权利要求1或2所述中药组合物的制备方法,其特征在于:当所述中药组合物的剂型为汤剂,其步骤具体为将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩,获得生药浓度为1g/ml的汤剂。
7.权利要求1或2所述中药组合物的制备方法,其特征在于:当所述中药组合物的剂型为散剂时,其步骤具体为将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加热浓缩除去水,获得干膏,粉碎成粉末,干燥,获得散剂。
8.权利要求1或2所述中药组合物的制备方法,其特征在于:当所述中药组合物的剂型为注射液时,其步骤具体为:
第一步,将各原料药按比例混合,搅拌粉碎,加入相对于原料药质量之和5~8倍水,煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,滤渣再次加入相对于原料药质量之和2~4倍水,再次煎煮2~4个小时,煎煮液过滤,将过滤液合并,加入1~2g活性炭,煮沸10~15分钟,自然冷却后,经离心、抽滤,得到滤液,加热浓缩至生药浓度为10g/ml~15g/ml的药液;
第二步,取所述药液20ml,在其中依次加入0.75ml吐温-80、100mg亚硫酸钠,混合均匀后加注射用水至100ml,并用氢氧化钠调pH值至7.5,最后分装于西林瓶中,经沸水浴加热灭菌后,即得注射剂。
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