CN103141524B - 一种糯米条抗黄瓜花叶病毒剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种以糯米条（Abelia chinensis R.Br.）提取物为有效成分的植物源抗病毒剂及其制备方法。制得的该糯米条抗植物病毒剂以糯米条提取物为主成分并加入助剂加工而成，制剂形态是可溶性液剂、水剂及微乳剂，可用于防治烟草、辣椒、番茄、黄瓜等作物上的黄瓜花叶病毒病（Cucumber mosaic virus，CMV）。本发明的抗植物病毒剂不仅抗黄瓜花叶病毒病效果好，而且对环境、人、畜、害虫天敌及其它有益生物安全。该抗植物病毒剂制备工艺简单，成本低廉，适宜推广应用。

Description

一种糯米条抗黄瓜花叶病毒剂

技术领域

本发明属于植物源农药及其应用领域，具体涉及一种糯米条抗黄瓜花叶病毒剂。

背景技术

植物病毒是一种由核酸和蛋白质组成的具有侵染活性的细胞内寄生病原物，据国际病毒分类委员会(ICTV)的第八次报告，目前全世界发现的植物病毒种类达1122个。植物病毒所引起的植物病害素有“植物癌症”之称，其对农作物的危害程度仅次于真菌病原物，几乎每种农作物都受到2～3种病毒的危害。全世界每年由植物病毒造成的损失约4百亿美元，黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是寄主范围最多、分布最广、最具经济重要性的植物病毒之一。

由于植物病毒对植物细胞具有绝对寄生性，病毒复制所需要的物质和能量场所完全由寄主植物提供，导致病毒和寄主的代谢融为一体；加之植物缺乏完整的免疫***，病毒一旦侵染植物，就可在植物细胞内无限期存活，直至寄主死亡。因此，抑制植物病毒病的药物很难只选择性地攻击病毒而不伤害寄主细胞，导致目前筛选高效、专一、安全的抗病毒制剂研究面临极大的困难。

目前除了采取传统的抗病毒育种、弱毒株系交叉保护、改进栽培技术、杀虫剂控制传毒介体和转基因等方法外，科研人员还研究出了一些植物病毒病害的化学防治方法。但到目前为止，只有一小部分抗植物病毒剂得到实际应用，这些制剂大多以预防为主，且药效多不理想。由于人们对医药或兽药中抗病毒剂研究较早，一些抗植物病毒剂(如农用病毒唑)就是从抗人或动物病毒剂中发展而来。因此，深入探讨抗植物病毒天然物质，有利于抗植物病毒剂的研究、开发及应用。

糯米条(Abelia chinensis R.Br.)属忍冬科，六道木属植物。通常为落叶灌木，某些地方为常绿灌木，例如台湾糯米条。薄叶多分枝灌木，高达2m。嫩枝被微毛，红褐色，老枝树皮纵裂。叶对生，有时3枚轮生；叶柄长1‐5mm；叶片圆卵形至椭圆状卵形，长2‐5cm，宽1‐3.5cm，先端急尖或短渐尖，基部圆形或心形，边缘有稀疏圆锯齿，上面疏被短毛，下面沿中脉及侧脉的基部密生柔毛。聚伞花序生于小枝上部叶腋，由多数花序集合成一圆锥花簇；总花梗被短柔毛，果期光滑；花芳香，具3对小苞片；萼筒圆柱形，被短柔毛，稍扁，具纵条纹，萼檐5裂，裂片椭圆形或倒卵状长圆形，长约5mm，果期弯红色；花冠白色至粉红色，漏斗状。

目前，尚未见糯米条为原料制备抗植物病毒毒剂方面的报道。

发明内容

本发明的目的在于以糯米条(Abelia chinensis R.Br.)为原料，研究出抗植物病毒效果高、无公害、价格低廉的植物源抗植物病毒剂及其制备方法。可用于防治烟草、辣椒、番茄、黄瓜等作物上的黄瓜花叶病毒病(Cucumbermosaic virus，CMV)。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种糯米条抗黄瓜花叶病毒剂，其特征在于，制得的该糯米条抗植物病毒剂以糯米条提取物为主成分并加入助剂加工而成，制剂形态是可溶性液剂、水剂及微乳剂；其中：

所述的微乳剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物：20％～40％，有机溶剂：30％～60％，表面活性剂：5％～30％，防冻剂：5％～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％；

所述的可溶性液剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物：20％～40％，有机溶剂：30％～60％，表面活性剂：5％～30％，原料的重量百分比之和为100％；

所述的水剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物：10％～30％，有机溶剂：30％～40％，表面活性剂：5％～30％，防冻剂：5％～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％。

上述有机溶剂为乙酸乙酯，环己酮、油酸甲酯、乙醇，甲醇，丙酮，二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物；

所述的乳化剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、斯潘系列、吐温、农用阴离子‐磷酸酯中的一种或几种的混合物；

所述的表面活性剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

所述的防冻剂为乙二醇或丙三醇。

上述糯米条抗植物病毒剂的制备方法，其特征在于：

所述的微乳剂的制备方法是：

A、将糯米条地上部分用植物组织粉碎机粉碎至1～5mm的粗粉碎物。

B、将步骤A所得的粗粉碎物用溶剂浸提，浸提采用的溶剂为乙醇，乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一种或几种；提取温度为50～80℃，提取时间为6～12小时得糯米条浸提物，经真空浓缩至相当于1kg干粉/kg浓缩液。

C、将步骤B所得的浓缩液和溶剂、表面活性剂、防冻剂以及水按比例于混配釜中(混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟)搅拌均匀后即得微乳剂。

所述的可溶性液剂的制备方法是：

A～B步骤同微乳剂的制备步骤；

C、将步骤B所得的浓缩液和溶剂、表面活性剂按比例于混配釜中(混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟)，搅拌均匀后即得可溶性液剂。

所述的水剂的制备方法是：

A～B步骤同微乳剂的制备步骤；

C、将步骤B所得的糯米条浓缩液、溶剂、表面活性剂、防冻剂和水按比例于混配釜中(混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟)搅拌均匀后即得水剂。

本发明所制成的糯米条抗黄瓜花叶病毒剂具有以下优点：

1.抗植物病毒活性显著，可用于烟草、辣椒、番茄、黄瓜等作物上防治黄瓜花叶病毒病(Cucumber mosaic virus,CMV)；

2.对人、畜、害虫天敌及其它有益生物安全，环境兼容性好；

3.生物源农药，使用后无残留毒害；

4.资源丰富、制备方法简单、成本低廉、适宜推广使用。

具体实施方式

为了更好的理解发明的实质，下面结合实施例来详细说明发明的技术内容，但发明并不局限于这些实施例。

本发明的糯米条抗植物病毒剂是以糯米条地上部分为原料，经传统的溶剂法浸提得到糯米条浸提物，加入一定比例助剂，经一定的加工过程，制成环保型可溶性液剂、水剂或微乳剂。

所述的微乳剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物：20％～40％，有机溶剂：30％～60％，表面活性剂：5％～30％，防冻剂：5％～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％；

所述的可溶性液剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物：20％～40％，有机溶剂：30％～60％，表面活性剂：5％～30％，原料的重量百分比之和为100％；

所述的水剂由以下原料按重量百分比配制：

糯米条提取物10％～30％，有机溶剂：30％～40％，表面活性剂：5％～30％，防冻剂：5％～10％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％；

所述的有机溶剂为乙酸乙酯，环己酮、油酸甲酯、乙醇，甲醇，丙酮，二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合物；

所述的乳化剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、斯潘系列、吐温、农用阴离子‐磷酸酯中的一种或几种的混合物；

所述的表面活性剂为烷基苯磺酸盐类、烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚类及其类似物质、蓖麻油与环氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中一种或几种的混合物；

所述的防冻剂为乙二醇或丙三醇。

上述可溶性液剂、水剂或微乳剂的制备方法是：

A、将糯米条地上部分用植物组织粉碎机粉碎至1～5mm的粗粉碎物。

B、将步骤A所得的粗粉碎物用溶剂法浸提，浸提采用的溶剂为乙醇，乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一种或几种；提取温度为50～80℃，提取时间为6～12小时得糯米条浸提物，经真空浓缩至相当于1kg干粉/kg浓缩液；

C、将步骤B所得的浓缩液和溶剂、表面活性剂、防冻剂和水按比例于混配釜中，混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟，搅拌均匀后即得糯米条抗植物病毒微乳剂；

D、将步骤B所得的浓缩液和溶剂、表面活性剂按比例于混配釜中，混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟，搅拌均匀后即得糯米条抗植物病毒可溶性液剂；

E、将步骤B所得的浓缩液和溶剂、表面活性剂、防冻剂和水按比例于混配釜中，混配釜温度为35‐60℃，搅拌时间为30分钟，搅拌均匀后即得糯米条抗植物病毒水剂。

经发明人的试验证明，采用本发明制备的30％糯米条微乳剂、30％糯米条可溶性液剂和20％糯米条水剂对黄瓜花叶病毒(CMV)具有良好的防治效果。

以下是发明人给出的实施例。

实施例1：30％糯米条微乳剂的配制

称取糯米条浓缩液30kg，溶解于45kg乙酸乙酯中，再加入15kg十二烷基苯磺酸钙，5kg苯乙烯酸聚氧乙烯醚，乙二醇5kg，在高速搅拌下混和，加热至40℃左右；高速搅拌下滴加去离子水30kg，控制水的滴加速度，使温度保持在40℃左右；水滴加完毕，升温至50℃，搅拌1小时，制得20％糯米条微乳剂100kg。制剂的稳定性、外观等符合商品制剂的要求。

实施例2：30％糯米条可溶性液剂的配制

称取糯米条浓缩液30kg，溶解于45kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，1kg烷基多糖苷A，乙醇补齐至100Kg，混合均匀后，以搅拌速度800～1000转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得糯米条可溶性液剂100kg。制剂的稳定性、外观等符合商品制剂的要求。

实施例3：20％糯米条水剂的配制

称取糯米条浓缩液20kg，溶解于30kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，1kg烷基多糖苷A，5kg乙二醇，水补齐至100Kg，混合均匀后，以搅拌速度800～1000转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得糯米条水剂100kg。制剂的稳定性、外观等符合商品制剂的要求。

实施例4：3种糯米条抗病毒剂对CMV的室内生物测定

(1)对CMV体外钝化效果

采用半叶枯斑法测定，选取生长旺盛、长势一致的5～6叶期苋色藜为枯斑寄主。以叶脉为界，左半叶接种药液与病毒等体积混合液，右半叶接种蒸馏水与病毒等体积混合液作对照，病毒接种浓度为10μg/mL，钝化时间为5min，接种后立即用清水冲洗接种叶片表面。每处理接种4片叶子，试验重复3次，3d后统计枯斑数，计算抑制率。

抑制率(％)＝(对照枯斑数-处理枯斑数)/对照枯斑数×100％

测定结果见表1。

表1：3种糯米条抗病毒剂对CMV体外钝化作用

注：表中数据为3次重复之平均值；“防效”栏中，同数列标后不同字母是指在α＝0.05水平上呈显著差异。下表同。

(2)对CMV初侵染的抑制效果

采用半叶枯斑法，选取长势一致、健康的5～6叶期苋色藜为枯斑寄主，在涂抹药液6h、12h、24h后接种病毒，空白对照为清水处理，每个处理接种4片叶子，重复3次，3d后统计枯斑数，计算抑制率。结果见表2。

表2：3种糯米条抗病毒剂对CMV初侵染的抑制效果

(3)对CMV增殖的抑制效果

采用半叶枯斑法，选取长势一致、健康的5～6叶期苋色藜为枯斑寄主，在接种病毒6h、12h、24h后涂抹药液，空白对照为清水处理，每个处理接种4片叶子，重复3次，3d后统计枯斑数，计算抑制率。结果见表3。

表3：3种糯米条抗病毒剂对CMV增殖的抑制效果

由表1、2、3可知，3种糯米条抗病毒剂对CMV的钝化，初侵染、增殖抑制作用良好，明显高于对照药剂吗啉胍.乙铜。

实施例4：3种糯米条抗病毒剂对CMV的盆栽试验

(1)对黄瓜的保护作用

选择5‐6叶期，长势一致、健壮的黄瓜(Cucumis sativus Linn.)供试。试验设预防组(施药3次后接种CMV)和对照组(只接种不施药)2组。用3种糯米条抗病毒剂200倍液喷雾，对照药剂吗啉胍.乙铜500倍液喷雾处理黄瓜苗，每5d施药一次，共施药三次。最后一次施药24h后接种CMV，接种浓度为1：20(W/V)。接种后14d、21d检查发病情况，统计病情指数及防治效果。每处理60株黄瓜苗，试验重复3次。计算防效。

发病率＝(各处理发病株数/处理总株数)×100％

病情指数＝∑(病级数×病株数)/(最高病级×各处理总株数)×100

病情指数增长率＝(喷药后病指—喷药前病指)/喷药前病指×100％

防治效果＝(对照病指—处理病指)/对照病指×100％

保护作用测定结果如表4所示。

表4：3种糯米条抗病毒剂对黄瓜的保护作用测定结果

(2)对黄瓜的治疗作用

选择5‐6叶期，长势一致、健壮的黄瓜(Cucumis sativus Linn.)供试。试验设治疗组(接种CMV后施药3次)和对照组(只接种不施药)2组。接种毒源CMV，接种浓度为1：20(W/V)，接种后每5d施药一次，共施药三次。药剂为3种糯米条抗病毒剂200倍液喷雾，对照药剂吗啉胍.乙铜500倍液喷雾。分别于最后一次施药的14d、21d时检查发病情况，统计病情指数及防治效果。每处理60株黄瓜苗，试验重复3次。计算防效。治疗作用测定结果如表5所示。

表5：3种糯米条抗病毒剂对黄瓜的治疗作用测定结果

盆栽试验结果表明(表4、表5)，3种糯米条抗病毒剂对黄瓜花叶病毒病表现出良好的预防和治疗效果，其预防和治疗效果均好于对照药剂，相对防效高于对照药剂10％左右。

实施例5：3种糯米条抗病毒剂对CMV的田间小区药效试验

小区作物为黄瓜，小区试验为随机排列，重复3次，小区面积视实际情况而定，但是面积不能小于30m²，试验地选择要求肥力均匀、作物种植和管理水平一致，病情发生及危害程度比较均匀；各处理间及试验区周围要设保护行。用3种糯米条抗病毒剂100、200、400倍液进行叶面常量喷雾，以20％的吗啉胍.乙铜可湿性粉剂500倍液为对照药剂进行叶面常量喷雾，并设清水对照；所有供试药剂必须进行二次稀释。自发病初期开始喷药，后每隔7d喷1次，共3次。第一次喷药前及最后一次喷药后的10d调查发病率和统计病情指数，计算防效，结果见表6。

表6：3种糯米条抗病毒剂防治黄瓜病毒病田间小区药效试验

从上表可知，3种糯米条抗病毒剂对黄瓜花叶病毒具有良好的防治效果，在稀释100、200倍的情况下明显优于药剂对照20％吗啉胍.乙铜可湿性粉剂，防效差异显著。

Claims (1)

1.一种糯米条抗黄瓜花叶病毒剂，其特征在于，制得的该糯米条抗黄瓜花叶病毒剂以糯米条提取物为主成分并加入助剂加工而成，制剂形态是可溶性液剂及水剂；其中：

所述的可溶性液剂由以下原料配制：称取糯米条浓缩液30kg，溶解于45kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，1kg烷基多糖苷A，乙醇补齐至100Kg，混合均匀后，以搅拌速度800～1000转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得可溶性液剂；

所述的水剂由以下原料配制：称取糯米条浓缩液20kg，溶解于30kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，1kg烷基多糖苷A，5kg乙二醇，水补齐至100Kg，混合均匀后，以搅拌速度800～1000转/分钟搅拌10～30分钟，即可制得水剂；

所述的糯米条浓缩液的制备方法是：

A、将糯米条地上部分用植物组织粉碎机粉碎至1～5mm的粗粉碎物；

B、将步骤A所得的粗粉碎物用溶剂法浸提，浸提采用的溶剂为乙醇，乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一种或几种；提取温度为50～80℃，提取时间为6～12小时得糯米条浸提物，经真空浓缩至相当于1kg干粉/kg浓缩液。