CN103141420A - 一种贝类人工软泥及其制备方法 - Google Patents

一种贝类人工软泥及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种贝类人工软泥及其制备方法，特点是将栀子蓝色素或菠菜色素添加到浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液后，再添加一定量的抗生素即可，其制备方法如下：将琼脂剪细后加入水中配置成质量体积浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液，将琼脂溶液加热至琼脂全部溶解且溶液呈透明澄清状，再将琼脂溶液用若干层纱布过滤后，在琼脂溶液中添加质量分数为琼脂溶液0.05～0.3%的栀子蓝色素或菠菜色素搅拌均匀；待溶液冷却但未凝固时添加体积为琼脂溶液的体积0.01%的抗生素，于4℃下静置12小时即可，优点是透明、无毒，且不影响贝类在其中的活动，能较好地适用于埋栖性贝类的活动观察。

Description

一种贝类人工软泥及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种人工软泥，尤其是涉及一种贝类人工软泥及其制备方法。
背景技术
埋栖性贝类，如泥蚶、青蛤、文蛤、缢蛏等，喜栖息在风浪较小，潮流畅通，有淡水注入的海口内湾或河口潮间带的软泥滩涂上，多埋居在中低潮区交界处，埋居深度从几厘米至几十厘米不等，以泥表面及水中的硅藻类和有机碎屑为食。为了更好地开展埋栖性贝类的人工养殖生产，以及更合理地开发和利用埋栖性贝类的生物资源，亟需更详细地观察埋栖性贝类在软泥环境中的行为方式和活动表现，了解其规律特征。采用现有的普通泥土做实验时，由于贝类的埋栖特性（常钻潜入泥中），无法详细观察到其摄食、活动、交配、生殖等活动和行为。因此无法观察埋栖性贝类在软泥环境中的行为方式和活动表现。
中国专利名称为凝胶体养殖蚂蚁装置（授权公告号为CN2843061）公开了一种凝胶体养殖蚂蚁装置，该装置由透明容器、软塞和凝胶体组成，在透明容器内灌注凝胶体，在透明容器的上面开设圆孔，在圆孔处设置带有小细孔的软塞。该装置的优点是结构简单，便于包装与携带，外形美观，无须人工喂养，又便于观察饲养蚂蚁的生活状态和行为活动，但该装置并不适用于水体环境及水生生物的活动观察使用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种透明、无毒，且不影响贝类在其中的活动，能较好地适用于埋栖性贝类的活动观察的贝类人工软泥及其制备方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种贝类人工软泥，将栀子蓝色素或菠菜色素添加到浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液后，再添加一定量的抗生素即可，其中所述的栀子蓝色素或菠菜色素的添加量为琼脂溶液的0.05～0.3%，所述的抗生素的添加体积为琼脂溶液体积的0.01%。
所述的琼脂溶液的浓度为1.4～2.6mg/ml。
所述的栀子蓝色素的添加量为琼脂溶液的0.15～0.25%。
所述的抗生素的由以下原料和质量体积浓度组成：庆大霉素0.05～0.12g/L、利福平0.5～2.0g/L和放线菌酮0.1～0.3g/L。
所述的抗生素的由以下原料和质量体积浓度组成：氯霉素0.1～0.25g/L和放线菌酮0.2～0.3g/L。
一种贝类人工软泥的制备方法，具体步骤如下：将琼脂剪细后加入水中配置成质量体积浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液，将琼脂溶液加热至琼脂全部溶解且溶液呈透明澄清状，再将琼脂溶液用若干层纱布过滤后，在琼脂溶液中添加质量分数为琼脂溶液0.05～0.3%的栀子蓝色素或菠菜色素搅拌均匀；待溶液冷却但未凝固时添加体积为琼脂溶液的体积0.01%的抗生素，于4℃下静置12小时即得到贝类人工软泥。
所述的琼脂溶液的浓度为1.4～2.6mg/ml。
所述的栀子蓝色素的添加量为琼脂溶液的0.15～0.25%。
所述的抗生素的由以下原料和质量体积浓度组成：庆大霉素0.05～0.12g/L、利福平0.5～2.0g/L和放线菌酮0.1～0.3g/L。
所述的抗生素的由以下原料和质量体积浓度组成：氯霉素0.1～0.25g/L和放线菌酮0.2～0.3g/L。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明一种贝类人工软泥及其制备方法，该人工软泥的主体材料为琼脂，纯天然色素构建背景（选择栀子蓝色素或菠菜色素），适于埋栖性生物的***0.5-1%+放线菌酮0.1g/L（或用氯霉素0.1g/L+放线菌酮0.1g/L），针对短期（5-7天）试验；高浓度配方：选用庆大霉素（硫酸庆大霉素盐）用量0.12g/L+利福平2.0%+放线菌酮0.3g/L（或用氯霉素0.25g/L+放线菌酮0.3g/L），针对如生长、活动、摄食等中长期试验（30天）。该人工软泥适于泥蚶、缢蛏等贝类在泥里的活动习性等观察，效果良好。
综上所述，本发明贝类人工软泥及其制备方法，采用人工配制的透明、无毒软泥来观察贝类在泥中的活动状况和行为方式，能确保对贝类的活动状况和行为方式进行有效观察与记录。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例一
琼脂配比的筛选
1、将琼脂条用剪刀剪碎，并用电子天平分别称取0.1g、0.2g、0.4g、0.6g和0.8g的琼脂各三份。取15只250ml的烧杯，将上述琼脂分别放入烧杯中，每个梯度三个平行。在每只烧杯中加入200ml的海水，并进行加热搅拌，直至琼脂全部溶解。
2、待溶液冷却凝固后，在每个烧杯中放入1只泥蚶（体重3.2136±0.173g），观察其在不同硬度琼脂上的活动及挖穴状况。
3、实验结果，如下表1中可以看出，2龄泥蚶在不同硬度的琼脂表面的活动行为不同，浓度大于3mg/ml或小于1mg/ml对泥蚶的活动都有影响。
表1不同浓度琼脂溶液凝固后的软硬程度（用24h泥蚶挖穴深度表示）
Figure BDA00002908026600031
4、重新调整琼脂浓度，设1.2mg/ml、1.4mg/ml、1.6mg/ml、1.8mg/ml、2.0mg/ml、2.2mg/ml、2.4mg/ml、2.6mg/ml、2.8mg/ml梯度，每梯度两重复，其余同上。观察泥蚶的活动情况，由如下表2可见琼脂浓度在1.4-2.6mg/ml基本上能更适合泥蚶的活动。
表2不同浓度琼脂溶液凝固后的软硬程度（用24h贝类挖穴深度表示）
Figure BDA00002908026600032
Figure BDA00002908026600041
综上所述，人工软泥中的琼脂浓度，经试验：浓度大于3mg/ml时，配制的人工泥土过硬，不利于贝类的下潜；而当琼脂浓度小于1mg/ml时，人工泥土过软，贝类稍一活动就会造成陷入过深，影响贝类的日常活动。经进一步实验发现，琼脂浓度在1.4～2.6mg/ml之间时，人工泥土的软硬度较为适宜。
实施例二
背景色泽的选择
1、选择天然色素（柠檬黄、番茄红素、菠菜色素、栀子蓝色素）等四种色素加到实施例1的琼脂凝固体（浓度为1～3mg/ml）中，使其呈现黄、红、绿、蓝等不同的色泽，再在各个色泽的烧杯中加入泥蚶，观察泥蚶的活动方式。在24h内，泥蚶仅在绿色（菠菜色素）及蓝色（采用栀子蓝色素）的琼脂凝固体中有行动（挖穴及贝壳开合），而在黄及红色的基本无挖穴活动，仅有贝壳开合动作。可认为红色、黄色背景对泥蚶不合适。而深蓝色及深绿色等色泽基本不影响试验贝类与日常活动等。
2、设定栀子蓝色素的添加量分别为琼脂凝固体重量的0.05%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%等梯度，试验2周，观察泥蚶、缢蛏的生长及活动情况。经试验发现，各浓度下的贝类都有生长，但观察其行为发现，低浓度下贝类的行为略有差异，推测可能是色泽偏浅光线过强，对行为略有影响；而0.3%浓度处理中，有微量的色素在贝类的活动下，有一点量进入到上面的水中，可能会造成一定的影响。因此，栀子蓝色素的最佳添加量为琼脂凝固体重量的0.15-0.25wt%。该色素可以高温加入，且耐酸碱，有较好的稳定性，且不溶出到上覆水中。
综上所述，人工软泥中的色素采用深蓝色及深绿色基本不影响试验贝类（泥蚶、缢蛏）的生长与日常活动等。栀子蓝色素的最佳添加量为琼脂凝固体重量的0.15-0.25wt%。，可高温加入，耐酸碱有较好的稳定性，且不溶出到上覆水中。
实施例三
人工软泥中抗生素的选择
在上述2周的试验中发现有些烧杯中有菌斑等出现，需要添加抗生素类进行抑菌，确保人工软泥在使用过程中的不长菌斑、不变质。
选择常规的用于抗细菌、抗放线菌及抗真菌的抗生素。考虑到有上覆水及贝类活动可能导致一定量的抗生素流失到上覆水中。因此，针对不同时间的试验采用不同的抗生素添加量。针对如行为观察的短期（5-7天）试验，可采用低浓度配方（表3、表4），针对如生长、活动、摄食等长期（30天）试验，可采用高浓度配方（表3、表4），以下配方中所用的溶剂为蒸馏水。
其中低浓度配方：选用庆大霉素（硫酸庆大霉素盐）用量0.05g/L+利福平0.5-1g/L+放线菌酮0.1g/L；或用氯霉素0.1g/L+放线菌酮0.1g/L。在人工软泥冷却后，抗生素溶液配成5mL加到500mL人工软泥中，在4℃下过12小时后，即可加上覆水开始试验。用该配方养殖泥蚶、缢蛏观察贝类的昼夜节律活动及挖穴、摄食等活动效果良好，7天内不长菌斑。
高浓度配方：选用庆大霉素（硫酸庆大霉素盐）用量0.12g/L+利福平2.0g/L+放线菌酮0.3g/L；或用氯霉素0.25g/L+放线菌酮0.3g/L。同上，在人工软泥冷却后，抗生素溶液配成5mL加到500mL人工软泥中，在4℃下过12小时后，即可加上覆水开始试验。用该配方养殖泥蚶、缢蛏观察贝类的生长、饵料等环境因素对其生长的影响等活动效果良好，30天内不长菌斑。
表3抑菌试验人工软泥中不同抗生素用量的抗菌效果（庆大霉素组）
Figure BDA00002908026600051
Figure BDA00002908026600061
注：+表示人工软泥上长菌斑，—表示无菌斑。
表4抑菌试验人工软泥中不同抗生素用量的抗菌效果（氯霉素组）
Figure BDA00002908026600071
注：+表示人工软泥上长菌斑，—表示无菌斑。
当然，上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种贝类人工软泥，其特征在于：将栀子蓝色素或菠菜色素添加到浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液后，再添加一定量的抗生素即可，其中所述的栀子蓝色素或菠菜色素的添加量为琼脂溶液的0.05～0.3%，所述的抗生素的添加体积为琼脂溶液体积的0.01%。
2.根据权利要求1所述的一种贝类人工软泥，其特征在于：所述的琼脂溶液的浓度为1.4～2.6mg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种贝类人工软泥，其特征在于：所述的栀子蓝色素的添加量为琼脂溶液的0.15～0.25%。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的一种贝类人工软泥，其特征在于：所述的抗生素的由以下原料和质量比组成：庆大霉素0.05～0.12g/L、利福平0.5～2.0g/L和放线菌酮0.1～0.3g/L。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的一种贝类人工软泥，其特征在于：所述的抗生素的由以下原料和质量比组成：氯霉素0.1～0.25g/L和放线菌酮0.2～0.3g/L。
6.一种根据权利要求1所述的贝类人工软泥的制备方法，其特征在于具体步骤如下：将琼脂剪细后加入水中配置成质量体积浓度为1～3mg/ml的琼脂溶液，将琼脂溶液加热至琼脂全部溶解且溶液呈透明澄清状，再将琼脂溶液用若干层纱布过滤后，在琼脂溶液中添加质量分数为琼脂溶液0.05～0.3%的栀子蓝色素或菠菜色素搅拌均匀；待溶液冷却但未凝固时添加体积为琼脂溶液的体积0.01%的抗生素，于4℃下静置12小时即得到贝类人工软泥。
7.根据权利要求6所述的一种贝类人工软泥的制备方法，其特征在于：所述的琼脂溶液的浓度为1.4～2.6mg/ml。
8.根据权利要求6所述的一种贝类人工软泥的制备方法，其特征在于：所述的栀子蓝色素的添加量为琼脂溶液的0.15～0.25%。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的一种贝类人工软泥的制备方法，其特征在于：所述的抗生素的由以下原料和质量比组成：庆大霉素0.05～0.12g/L、利福平0.5～2.0g/L和放线菌酮0.1～0.3g/L。
10.根据权利要求6-8中任一项所述的一种贝类人工软泥的制备方法，其特征在于：所述的抗生素的由以下原料和质量比组成：氯霉素0.1～0.25g/L和放线菌酮0.2～0.3g/L。
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