一种鱼腥草种子繁殖方法
技术领域
本发明属于植物繁殖和植物生理领域,具体涉及一种药用植物种子的繁殖方法,特别是一种鱼腥草种子繁殖方法。
背景技术
鱼腥草学名蕺菜,属三白草科蕺菜属,是宿根性多年生草本植物,原产中国,在我国其资源分布很广泛。传统认为鱼腥草具有清热解毒,利尿消肿等功能。现代医学研究和实践进一步表明鱼腥草还具有很多全新的用途:如抗菌作用(鱼腥草的有效成分癸酰乙醛等有抑菌作用)、抗病毒作用(鱼腥草提取物对亚洲甲型病毒有抑制作用,并能延缓孤儿病毒ECH011的致细胞病变)、抗炎、利尿作用(鱼腥草槲皮甙能扩张肾动脉,增加尿液分泌,具有利尿作用)和增强机体免疫功能(鱼腥草可以增强白细胞的吞噬能力,显著提高外周血T淋巴细胞的比例,提高血清溶血水平,增强机体非特异性和特异性免疫能力)。制药企业利用鱼腥草为原料已经生产了鱼腥草注射液、鱼腥草滴眼液、复方鱼腥草口服液、鱼腥草含片等产品。此外,鱼腥草还含有丰富的营养成分。每l00g干品中含蛋白质5.26g、脂肪2.41g,碳水化合物67.5g,此外还含有钙、磷、铁元素,以及维生素C、维生素B2、维生素E和多种氨基酸;此外鱼腥草含有可溶性糖、蔗糖、果糖和鱼腥草素(一种挥发油)等物质以及矿物质等营养成份。目前,鱼腥草作为天然菜、保健药膳(鱼腥草酒、鱼腥草饮料等)和美容食品(鱼腥草袋泡茶等)已走进千家万户。
无论鱼腥草作为药品或蔬菜或保健品开发,已被国家***正式确定为“既是药品,又是食品”的极具开发潜力的资源之一,现在在某些地区已出口创汇,成效可观。如湖南芷江侗族自治县罗旧镇曹家坪村一村民2006年种植1.3公顷鱼腥草,收入13万余元;浙江永康市古山镇农民胡祖根种植4公顷,平均每亩产2000多公斤合每亩7000多元。
鱼腥草作为一种具有独特药效的中药材,历来为野生植物,从上世纪80年代初开始进行人工栽培,以地下茎的无性繁殖为主,长年进行无性繁殖容易造成种茎的退化;而鱼腥草种子体积很小,繁殖难,鱼腥草种子快速繁殖体系至今还没有建立,不利于鱼腥草试验和育种工作的顺利进行。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简便、成本低、有利于培育壮苗且不具有任何潜在风险的鱼腥草种子繁殖方法,该方法处理过的种子发芽率在90%以上,其具体操作复方如下:一种鱼腥草种子的繁殖方法,包括以下步骤:
(1)蒴果的收集与干燥:摘取当年成熟鱼腥草的蒴果进行干燥脱粒;
(2)种子的消毒与处理:将成熟干燥脱粒的种子先经0.1%升汞进行处理60s,然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h,最后在70%酒精浸泡30s,无菌水冲洗4-5次后,放在10%的PEG6000溶液中,不停搅拌1.5-2小时,用蒸馏水冲洗3-5次,浸泡在蒸馏水中30分钟,再用蒸馏水冲洗3-5次;
(3)种子催芽萌发:将PEG6000处理后的种子均匀播种在已灭菌的铺有吸水纸的培养皿上,于光照培养箱中催芽萌发,条件为培养温度25±2℃,光照为12小时/d,强度2000Lx;
(4)幼苗培育:待种子培养25天,然后将萌发后的种子再培养7-15天后将鱼腥草种苗从培养皿中取出,移栽至花盆中。
步骤(1)蒴果干燥的条件为40℃-42℃鼓风干燥保持48~72小时。
步骤(4)完成后,用喷雾器喷施叶面肥一次,长到4-5片真叶,移栽到地里,长成成苗。
通过种子有性繁殖是高等生物进行的一种普遍繁殖方式。在自然界,可能由于鱼腥草无性繁殖方式比较发达,而利用种子萌发进行有性繁殖的方式已经退化。鱼腥草每株可收获几十至上百粒种子,造成其种子难以萌发(未经处理的萌发率﹤2%)的原因目前尚不清楚,可能与种子的休眠有关。在本发明中用PEG6000处理鱼腥草种子,改变了种子的生理状态,促进其萌发,生长形成幼苗;萌发率达到90%以上。本发明的种子繁殖方法不仅是一种简单经济的种子繁殖技术,打破鱼腥草种子休眠,加大繁殖系数,完善了其种子快繁体系;同时还可以避免地下根茎无性繁殖容易将母株的病虫源带到幼苗中,造成大田病虫害发生的问题,同时降低种植成本。
附图说明
图1为不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较;
a为2010年(一年),b为2011年(当年);
图2为不同消毒方法种子污染率的比较;
a从图中可以看出采用本发明消毒方法的污染率为0,b为没有采用本发明方法的种子污染明显;
图3为不同PEG6000处理浓度种子发芽率的比较;
a为5%PEG6000处理,b为10%PEG6000处理,c为15%PEG6000处理,d为20%PEG6000处理,e为25%PEG6000处理;
图4为不同PEG6000浸泡时间种子发芽率的比较;
a为PEG6000处理1h,b为PEG6000处理1.5h,c为PEG6000处理2h;d为PEG6000处理2.5h,e为PEG6000处理3h;
图5为不同培养温度种子发芽率的比较;
a为20±2℃,b为25±2℃,c为30±2℃;
图6为移栽至花盆中的鱼腥草种苗;
图7为移栽到大田中生长的鱼腥草。
具体实施方式
以下结合实施例旨在进一步说明本发明,而非限制本发明。
实施例1:鱼腥草种子繁殖方法包括如下步骤:
(1)不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较
分别将2010年(一年)和2011年(当年)9月收获的成熟鱼腥草种子(100粒)经过消毒后,采用10%PEG6000处理1.5h的方法于2011年10月在光照培养箱中进行种子萌发试验(光照强度2000Lx,12小时/d的光照),结果表明(表1):当年收获的种子在培养了25天后,其种子发芽率即可达到100%,而一年的种子在培养了35天后,其种子发芽率仍然为0%。
表1不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率比较
(2)不同消毒方法种子污染率的比较
处理1的消毒方法为将鱼腥草种子先经0.1%升汞进行处理60s,然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h,最后在70%酒精浸泡30s,无菌水冲洗4-5次;处理2的消毒方法为将鱼腥草种子先经0.1%升汞进行处理60s,然后在70%酒精浸泡30s,无菌水冲洗4-5次。结果表明:处理1的污染率为0%而处理2的污染率高达39%,如图2。
(3)不同PEG6000处理浓度和时间种子发芽率的比较
①PEG6000浓度处理:试验设计PEG浓度分别为5%、10%、15%、20%和25%五个处理,另设对照(CK,即种子不做任何处理)。每个处理100粒种子,样品随机取样,重复4次,浸种1h。
②PEG6000浸泡时间处理:选取上一试验结果中的最适浓度浸泡处理鱼腥草种子,设计浸泡时间分别为1h、1.5h、2h、2.5h、3h五个处理,另设对照(CK,即种子不做任何处理)。每个处理100粒种子,样品随机取样,重复4次。
③萌发试验:将各处理后的种子置于内垫两层滤纸的培养皿上,用蒸馏水润湿滤纸后,把培养皿放入恒温箱内,培养条件为培养温度25±2℃,光照为12小时/d,强度2000Lx,每天观察其发芽情况,待其生长稳定后测量相关数据。
表2结果表明:经过PEG6000处理的鱼腥草种子在发芽率、发芽势、发芽指数均高于不经过任何处理的(对照),且差异极显著;10%PEG6000浓度处理的,在发芽率、发芽势、发芽指数均表现最佳,与其他处理间呈不同程度的差异。
表2不同浓度PEG6000处理间鱼腥草生理指标的多重比较
表3结果表明:经PEG6000浸泡的鱼腥草种子在发芽率、发芽势、发芽指数均高于不经过任何处理的(对照),且差异极显著;处理1.5和2.0h的鱼腥草种子,在发芽率、发芽势、发芽指数均表现最佳,与其他处理间呈不同程度的差异。
表3不同PEG6000浸泡时间处理间鱼腥草生理指标的多重比较
综上所述,鱼腥草种子发芽率和生理指标,在不同PEG6000浓度处理间表现出不同程度的差异,结合处理浓度和浸泡时间,本发明认为最佳处理为10%PEG6000处理1.5-2h。
(4)不同培养温度种子发芽率的比较
不同培养温度设置了20±2℃、25±2℃和30±2℃三个处理。结果表明:100粒成熟鱼腥草种子在培养了25天后(光照强度2000Lx,12小时/d的光照),不同处理间种子发芽率的差异显著,最佳培养温度为25±2℃。
实施例2
经过实施例1条件摸索后,选择各步骤最优化条件进行种子繁殖
(1)蒴果的收集与干燥:摘取当年成熟鱼腥草的蒴果40℃鼓风干燥保持48~72小时;
(2)种子的消毒与处理:将成熟干燥脱粒的种子先经0.1%升汞进行处理60s,然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h,最后在70%酒精浸泡30s,无菌水冲洗4-5次后,放在10%PEG6000溶液中,不停搅拌1.5-2小时,用蒸馏水冲洗3-5次,浸泡在蒸馏水中30分钟,再用蒸馏水冲洗3-5次;
(3)种子催芽萌发:将PEG6000处理后的种子均匀播种在已灭菌的培养皿上,于光照培养箱中催芽萌发,条件为培养温度25±2℃,光照为12小时/d,强度2000Lx;
(4)幼苗培育:待种子培养25天,然后将萌发后的种子再培养7天将鱼腥草种苗从培养皿中取出,移栽至花盆中。
(5)将花盆中的幼苗用喷雾器喷施叶面肥一次,长到4-5片真叶,移栽到地里,可长成成苗。