CN103141185A - 一种鱼腥草种子繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种鱼腥草种子繁殖方法，涉及植物繁殖和植物生理领域。取成熟鱼腥草的蒴果，置于40℃恒温鼓风干燥箱中，直到蒴果干燥，将脱粒的干种子经过消毒后放入PEG6000溶液处理，然后将种子播种在培养皿上，在光照培养箱中萌发培养25天（25±2℃，光照强度2000Lx，12小时/d的光照），种子萌发率可达90%以上。本发明用PEG6000处理鱼腥草种子，改变种子的生理状态，促进其萌发，生长形成幼苗。本发明的种子繁殖方法不仅是一种简单经济的种子繁殖技术，打破鱼腥草种子休眠，加大繁殖系数，完善了其种子快繁体系；同时还可以避免地下根茎无性繁殖容易将母株的病虫源带到幼苗中，造成大田病虫害发生的问题，同时降低种植成本。

Description

一种鱼腥草种子繁殖方法
技术领域
本发明属于植物繁殖和植物生理领域，具体涉及一种药用植物种子的繁殖方法，特别是一种鱼腥草种子繁殖方法。
背景技术
鱼腥草学名蕺菜，属三白草科蕺菜属，是宿根性多年生草本植物，原产中国，在我国其资源分布很广泛。传统认为鱼腥草具有清热解毒，利尿消肿等功能。现代医学研究和实践进一步表明鱼腥草还具有很多全新的用途：如抗菌作用（鱼腥草的有效成分癸酰乙醛等有抑菌作用）、抗病毒作用（鱼腥草提取物对亚洲甲型病毒有抑制作用，并能延缓孤儿病毒ECH011的致细胞病变）、抗炎、利尿作用（鱼腥草槲皮甙能扩张肾动脉，增加尿液分泌，具有利尿作用）和增强机体免疫功能（鱼腥草可以增强白细胞的吞噬能力，显著提高外周血T淋巴细胞的比例，提高血清溶血水平，增强机体非特异性和特异性免疫能力）。制药企业利用鱼腥草为原料已经生产了鱼腥草注射液、鱼腥草滴眼液、复方鱼腥草口服液、鱼腥草含片等产品。此外，鱼腥草还含有丰富的营养成分。每l00g干品中含蛋白质5.26g、脂肪2.41g，碳水化合物67.5g，此外还含有钙、磷、铁元素，以及维生素C、维生素B2、维生素E和多种氨基酸；此外鱼腥草含有可溶性糖、蔗糖、果糖和鱼腥草素（一种挥发油）等物质以及矿物质等营养成份。目前，鱼腥草作为天然菜、保健药膳（鱼腥草酒、鱼腥草饮料等）和美容食品（鱼腥草袋泡茶等）已走进千家万户。
无论鱼腥草作为药品或蔬菜或保健品开发，已被国家***正式确定为“既是药品，又是食品”的极具开发潜力的资源之一，现在在某些地区已出口创汇，成效可观。如湖南芷江侗族自治县罗旧镇曹家坪村一村民2006年种植1.3公顷鱼腥草，收入13万余元；浙江永康市古山镇农民胡祖根种植4公顷，平均每亩产2000多公斤合每亩7000多元。
鱼腥草作为一种具有独特药效的中药材，历来为野生植物，从上世纪80年代初开始进行人工栽培，以地下茎的无性繁殖为主，长年进行无性繁殖容易造成种茎的退化；而鱼腥草种子体积很小，繁殖难，鱼腥草种子快速繁殖体系至今还没有建立，不利于鱼腥草试验和育种工作的顺利进行。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简便、成本低、有利于培育壮苗且不具有任何潜在风险的鱼腥草种子繁殖方法，该方法处理过的种子发芽率在90%以上，其具体操作复方如下：一种鱼腥草种子的繁殖方法，包括以下步骤：
（1）蒴果的收集与干燥：摘取当年成熟鱼腥草的蒴果进行干燥脱粒；
（2）种子的消毒与处理：将成熟干燥脱粒的种子先经0.1%升汞进行处理60s，然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h，最后在70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗4-5次后，放在10%的PEG6000溶液中，不停搅拌1.5-2小时，用蒸馏水冲洗3-5次，浸泡在蒸馏水中30分钟，再用蒸馏水冲洗3-5次；
（3）种子催芽萌发：将PEG6000处理后的种子均匀播种在已灭菌的铺有吸水纸的培养皿上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为培养温度25±2℃，光照为12小时/d，强度2000Lx；
（4）幼苗培育：待种子培养25天，然后将萌发后的种子再培养7-15天后将鱼腥草种苗从培养皿中取出，移栽至花盆中。
步骤（1）蒴果干燥的条件为40℃-42℃鼓风干燥保持48～72小时。
步骤（4）完成后，用喷雾器喷施叶面肥一次，长到4-5片真叶，移栽到地里，长成成苗。
通过种子有性繁殖是高等生物进行的一种普遍繁殖方式。在自然界，可能由于鱼腥草无性繁殖方式比较发达，而利用种子萌发进行有性繁殖的方式已经退化。鱼腥草每株可收获几十至上百粒种子，造成其种子难以萌发（未经处理的萌发率﹤2%）的原因目前尚不清楚，可能与种子的休眠有关。在本发明中用PEG6000处理鱼腥草种子，改变了种子的生理状态，促进其萌发，生长形成幼苗；萌发率达到90%以上。本发明的种子繁殖方法不仅是一种简单经济的种子繁殖技术，打破鱼腥草种子休眠，加大繁殖系数，完善了其种子快繁体系；同时还可以避免地下根茎无性繁殖容易将母株的病虫源带到幼苗中，造成大田病虫害发生的问题，同时降低种植成本。
附图说明
图1为不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较；
a为2010年（一年）,b为2011年（当年）；
图2为不同消毒方法种子污染率的比较；
a从图中可以看出采用本发明消毒方法的污染率为0，b为没有采用本发明方法的种子污染明显；
图3为不同PEG6000处理浓度种子发芽率的比较；
a为5%PEG6000处理，b为10%PEG6000处理，c为15%PEG6000处理，d为20%PEG6000处理，e为25%PEG6000处理；
图4为不同PEG6000浸泡时间种子发芽率的比较；
a为PEG6000处理1h，b为PEG6000处理1.5h，c为PEG6000处理2h；d为PEG6000处理2.5h，e为PEG6000处理3h；
图5为不同培养温度种子发芽率的比较；
a为20±2℃，b为25±2℃，c为30±2℃；
图6为移栽至花盆中的鱼腥草种苗；
图7为移栽到大田中生长的鱼腥草。
具体实施方式
以下结合实施例旨在进一步说明本发明，而非限制本发明。
实施例1：鱼腥草种子繁殖方法包括如下步骤：
（1）不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较
分别将2010年（一年）和2011年（当年）9月收获的成熟鱼腥草种子（100粒）经过消毒后，采用10%PEG6000处理1.5h的方法于2011年10月在光照培养箱中进行种子萌发试验（光照强度2000Lx，12小时/d的光照），结果表明（表1）：当年收获的种子在培养了25天后，其种子发芽率即可达到100%，而一年的种子在培养了35天后，其种子发芽率仍然为0%。
表1不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率比较
Figure BDA00002946224300031
（2）不同消毒方法种子污染率的比较
处理1的消毒方法为将鱼腥草种子先经0.1%升汞进行处理60s，然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h，最后在70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗4-5次；处理2的消毒方法为将鱼腥草种子先经0.1%升汞进行处理60s，然后在70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗4-5次。结果表明：处理1的污染率为0%而处理2的污染率高达39%，如图2。
（3）不同PEG6000处理浓度和时间种子发芽率的比较
①PEG6000浓度处理：试验设计PEG浓度分别为5%、10%、15%、20%和25%五个处理，另设对照(CK，即种子不做任何处理)。每个处理100粒种子，样品随机取样，重复4次，浸种1h。
②PEG6000浸泡时间处理：选取上一试验结果中的最适浓度浸泡处理鱼腥草种子，设计浸泡时间分别为1h、1.5h、2h、2.5h、3h五个处理，另设对照(CK，即种子不做任何处理)。每个处理100粒种子，样品随机取样，重复4次。
③萌发试验：将各处理后的种子置于内垫两层滤纸的培养皿上，用蒸馏水润湿滤纸后，把培养皿放入恒温箱内，培养条件为培养温度25±2℃，光照为12小时/d，强度2000Lx，每天观察其发芽情况，待其生长稳定后测量相关数据。
表2结果表明：经过PEG6000处理的鱼腥草种子在发芽率、发芽势、发芽指数均高于不经过任何处理的（对照），且差异极显著；10%PEG6000浓度处理的，在发芽率、发芽势、发芽指数均表现最佳，与其他处理间呈不同程度的差异。
表2不同浓度PEG6000处理间鱼腥草生理指标的多重比较
Figure BDA00002946224300041
表3结果表明：经PEG6000浸泡的鱼腥草种子在发芽率、发芽势、发芽指数均高于不经过任何处理的（对照），且差异极显著；处理1.5和2.0h的鱼腥草种子，在发芽率、发芽势、发芽指数均表现最佳，与其他处理间呈不同程度的差异。
表3不同PEG6000浸泡时间处理间鱼腥草生理指标的多重比较
Figure BDA00002946224300042
综上所述，鱼腥草种子发芽率和生理指标，在不同PEG6000浓度处理间表现出不同程度的差异，结合处理浓度和浸泡时间，本发明认为最佳处理为10%PEG6000处理1.5-2h。
（4）不同培养温度种子发芽率的比较
不同培养温度设置了20±2℃、25±2℃和30±2℃三个处理。结果表明：100粒成熟鱼腥草种子在培养了25天后（光照强度2000Lx，12小时/d的光照），不同处理间种子发芽率的差异显著，最佳培养温度为25±2℃。
实施例2
经过实施例1条件摸索后，选择各步骤最优化条件进行种子繁殖
（1）蒴果的收集与干燥：摘取当年成熟鱼腥草的蒴果40℃鼓风干燥保持48～72小时；
（2）种子的消毒与处理：将成熟干燥脱粒的种子先经0.1%升汞进行处理60s，然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h，最后在70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗4-5次后，放在10%PEG6000溶液中，不停搅拌1.5-2小时，用蒸馏水冲洗3-5次，浸泡在蒸馏水中30分钟，再用蒸馏水冲洗3-5次；
（3）种子催芽萌发：将PEG6000处理后的种子均匀播种在已灭菌的培养皿上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为培养温度25±2℃，光照为12小时/d，强度2000Lx；
（4）幼苗培育：待种子培养25天，然后将萌发后的种子再培养7天将鱼腥草种苗从培养皿中取出，移栽至花盆中。
（5）将花盆中的幼苗用喷雾器喷施叶面肥一次，长到4-5片真叶，移栽到地里，可长成成苗。

Claims (3)

1.一种鱼腥草种子的繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）蒴果的收集与干燥：摘取当年成熟鱼腥草的蒴果进行干燥脱粒；
（2）种子的消毒与处理：将成熟干燥脱粒的种子先经0.1%升汞进行处理60s，然后再在0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h，最后在70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗4-5次后，放在10%的PEG6000溶液中，不停搅拌1.5-2小时，用蒸馏水冲洗3-5次，浸泡在蒸馏水中30分钟，再用蒸馏水冲洗3-5次；
（3）种子催芽萌发：将PEG6000处理后的种子均匀播种在已灭菌的铺有吸水纸的培养皿上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为培养温度25±2℃，光照为12小时/d，强度2000Lx；
（4）幼苗培育：待种子培养25天，然后将萌发后的种子再培养7-15天后将鱼腥草种苗从培养皿中取出，移栽至花盆中。
2.根据权利要求1所述的鱼腥草种子的繁殖方法，其特征在于：
步骤（1）蒴果干燥的条件为40℃-42℃鼓风干燥保持48～72小时。
3.根据权利要求1所述的鱼腥草种子的繁殖方法，其特征在于：步骤（4）完成后，用喷雾器喷施叶面肥一次，长到4-5片真叶，移栽到地里，长成成苗。
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