CN103134872A - 一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法。该方法是取蔗糖脂肪酸酯对照品用四氢呋喃溶解配制成对照品溶液，采用凝胶渗透色谱仪对上述对照品溶液进行分析，根据GPC谱图得出对照品各种酯的色谱峰面积值，用面积归一化法计算出各种酯的组成，对应得出各种酯的保留时间；然后取蔗糖脂肪酸酯样品溶于四氢呋喃配制成样品溶液，采用相同的色谱分析条件分析测定得到样品的GPC谱图，根据对照品中各种酯的保留时间对应得到样品中各种酯的峰面积值，用面积归一化法计算得到蔗糖脂肪酸酯样品中各种酯的分布。本发明具有样品处理方法简单，操作简便，检测时间短，重现性好，精密度高，能同时测定蔗糖脂肪酸酯中各种酯等优点。

Description

一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法

技术领域

本发明属于化学分析技术领域，涉及一种分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法，尤其涉及一种用凝胶渗透色谱法（GPC）分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法。

背景技术

蔗糖脂肪酸酯又名蔗糖酯(简称SE)，系以蔗糖为原料，与C9~C22脂肪酸在适当体系内进行酯化反应而生成的酯，它对水和油有良好的乳化作用，HLB值(亲水亲油平衡值)能在宽范围内进行调节。作为一种优良的非离子表面活性剂，广泛应用于食品、制药、日化等众多领域，具有广阔的发展前景。我国早在 1987 年就颁布了蔗糖酯的标准(GB8272-1987)，规定了蔗糖酯的质量分析标准方法，并在2009 年用新标准(GB8272-2009)代替旧标准，进一步完善了蔗糖酯的质量控制体系。标准对蔗糖酯的外观、成分、酸值和游离糖都规定了测定方法，但主要是传统的容量分析方法，对成分的分析也局限于定性，现代分析仪器的应用和近年新发展的分析方法在标准中未见体现。在蔗糖酯的定性和定量分析中，应用较多的是薄层色谱法（TLC)，但是由于蔗糖酯本身不显色，需用显色剂显色。气相色谱(GC)和气——质联用技术(GC-MS)也被用来定量和定性分析蔗糖酯，但需对蔗糖酯衍生化，过程较繁琐。作为快速的定量方法，高效液相色谱(HPLC)紫外检测和高效液相色谱示差检测都已被用于蔗糖酯的分析，因蔗糖酯的紫外吸收比较弱，而示差检测器不能梯度洗脱。因此建立通用快速的蔗糖酯分析方法，以便进行反应终点控制，优化反应工艺和监控产品的质量，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法。

解决上述技术问题的技术方案是：一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法，包括以下步骤：

（一）对照品溶液的配制

选取1～3个蔗糖脂肪酸酯对照品，用四氢呋喃溶解至浓度为1～10 mg/mL，并用0.35～0.50 μm滤膜过滤；

（二）对照品各种酯的分析

采用凝胶渗透色谱仪，示差折光检测器对上述配制的对照品溶液逐一进行分析，根据GPC谱图得出对照品各种酯的色谱峰面积值，用面积归一化法计算出各种酯的组成，然后对应得出各种酯的保留时间；

色谱分析条件为：色谱柱：硅胶柱、柱长150 mm或300 mm、内径6.0 mm或7.5 mm、硅胶粒径3μm或5 μm；流动相：四氢呋喃；流速：0.2～1.0 mL/min； 柱温：30～45℃；进样量：5～20 μL；

（三）实际样品各种酯分布的分析

将蔗糖脂肪酸酯样品，溶于四氢呋喃，配制成浓度为1～10 mg/mL的样品溶液，并用0.35～0.50 μm滤膜过滤，待仪器稳定后，采用与步骤（二）相同的色谱分析条件直接进行分析测定得到样品的GPC谱图，根据对照品中各种酯的保留时间对应得到样品中各种酯的峰面积值，用面积归一化法计算得到蔗糖脂肪酸酯样品中各种酯的分布。

本发明采用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布，具有样品处理方法简单，操作简便，检测时间短，重现性好，精密度高，能同时测定蔗糖脂肪酸酯中各种酯等优点，是一种通用快速的蔗糖脂肪酸酯分析方法，便于生产过程中进行反应终点控制，对于优化反应工艺和监控产品的质量，具有非常重要的意义。

下面，结合附图和实施例对本发明之一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法的技术特征作进一步的说明。

附图说明

图1：本发明用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯对照品（HLB=11）的GPC谱图。

图2：本发明用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯对照品（HLB=15）的GPC谱图。

图3：本发明用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯样品的GPC谱图。

具体实施方式

实施例：一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法，包括以下步骤：

（一）对照品溶液的配制

根据蔗糖脂肪酸酯具有一定范围的HLB值的特点，选取HLB值=11、15的蔗糖脂肪酸酯对照品，用四氢呋喃溶解至浓度为5 mg/mL，并用0.45 μm滤膜过滤。

（二）色谱分析条件的选择

色谱柱：硅胶柱、柱长300 mm、内径7.5 mm、硅胶粒径5 μm；

流动相：四氢呋喃；

流速：0.5 mL/min； 

柱温：38℃；

进样量：10μL；

泵：Isocratic Pump；

检测器：Refractive Index Detector。

（三）对照品各种酯的分析

采用凝胶渗透色谱仪，示差折光检测器对上述配制的日本三菱蔗糖脂肪酸酯对照品溶液逐一进行分析，得到的GPC谱图如图1、图2所示，其中横坐标是保留时间，纵坐标是峰高；根据GPC谱图得出对照品各种酯的色谱峰面积值，用面积归一化法计算出各种酯的组成，然后对应得出各种酯的保留时间，蔗糖脂肪酸酯对照品中的各种酯的保留时间如表1。

蔗糖脂肪酸酯对照品中各种酯的保留时间的具体分析过程如下：以HLB值=11的蔗糖脂肪酸酯对照品为例，根据GPC谱图（图1）计算得出对照品三种酯色谱峰面积值，用面积归一化法计算出三种酯的组成（即三种酯的相对含量），图1中从左至右的三个峰高计算得出的三种酯的组成分别约为：10%，31%，59%；已知HLB值=11的蔗糖脂肪酸酯对照品中三种酯的组成为：三酯10%，二酯31%，单酯59%；对应得出图1中从左至右的三个峰高分别是三酯、二酯、单酯的峰高，对应得出三种酯的保留时间。

表1 蔗糖脂肪酸酯对照品中各种酯的保留时间

酯	保留时间（min）
		单酯	30.6
二酯	29.4
		三酯	28.6

（三）实际样品各种酯分布的分析

称取本公司蔗糖脂肪酸酯样品，溶于四氢呋喃，配制成浓度为5 mg/mL的样品溶液，并用0.45μm滤膜过滤，待仪器稳定后，采用与步骤（二）相同的色谱分析条件直接进行分析测定，得到的GPC谱图如图3所示，其中横坐标是保留时间，纵坐标是峰高，根据表1的各种酯的保留时间对应得出样品中各种酯色谱峰面积值，测得各种酯的峰面积（nRIU*s）分别为：单酯：2.99672×10⁵，二酯：1.73298×10⁵，三酯：6.02544×10⁴，用面积归一化法计算得到蔗糖脂肪酸酯样品中各种酯的分布情况（即单酯、二酯、三酯的相对含量）为：单酯：56.2%，二酯：32.5%，三酯：11.3%。

作为本实施例的一种变换，所述的对照品可以仅选取1个或是选取3个蔗糖脂肪酸酯，对照品还可以用四氢呋喃溶解至浓度为1～10 mg/mL，蔗糖脂肪酸酯样品也用四氢呋喃溶解至浓度为1～10 mg/mL。所述的色谱分析条件还可以为：流速：0.2～1.0 mL/min； 柱温：30～45℃；进样量：5～20μL；色谱柱：柱长150 mm、内径6.0 mm、硅胶粒径3μm。

重现性实验

称取蔗糖脂肪酸酯对照品（HLB值=11、15）用四氢呋喃溶解至浓度为1～10 mg/mL，并用0.45 μm滤膜过滤，分别置于三个样品瓶中，进入进样器，体系稳定后，采用上述步骤（二）所述色谱分析条件进行分析测定。具体数据见表2。

表2

由表2测定的数据，可以看出，测得样品的相对标准偏差RSD＜1.15%，远小于GPC规范中要求的5％，说明该分析方法重现性好、精密度高。

Claims (1)

1.一种用凝胶渗透色谱法分析蔗糖脂肪酸酯中各种酯分布的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（一）对照品溶液的配制

选取1～3个蔗糖脂肪酸酯对照品，用四氢呋喃溶解至浓度为1～10 mg/mL，并用0.35～0.50 μm滤膜过滤；

（二）对照品各种酯的分析

采用凝胶渗透色谱仪，示差折光检测器对上述配制的对照品溶液逐一进行分析，根据GPC谱图得出对照品各种酯的色谱峰面积值，用面积归一化法计算出各种酯的组成，然后对应得出各种酯的保留时间；

色谱分析条件为：色谱柱：硅胶柱、柱长150 mm或300 mm、内径6.0 mm或7.5 mm、硅胶粒径3μm或5 μm；流动相：四氢呋喃；流速：0.2～1.0 mL/min； 柱温：30～45℃；进样量：5～20 μL；

（三）实际样品各种酯分布的分析

将蔗糖脂肪酸酯样品，溶于四氢呋喃，配制成浓度为1～10 mg/mL的样品溶液，并用0.35～0.50 μm滤膜过滤，待仪器稳定后，采用与步骤（二）相同的色谱分析条件直接进行分析测定得到样品的GPC谱图，根据对照品中各种酯的保留时间对应得到样品中各种酯的峰面积值，用面积归一化法计算得到蔗糖脂肪酸酯样品中各种酯的分布。

Images