CN103108657A

CN103108657A - 提高活性强化形式的抗体的效果的方法

Info

Publication number: CN103108657A
Application number: CN2011800443324A
Authority: CN
Inventors: 奥列格·伊里奇·爱泼斯坦
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2010-07-15
Filing date: 2011-07-15
Publication date: 2013-05-15

Abstract

本发明提供用于提高活性强化形式的抗内源性生物分子抗体的效果的方法，所述方法通过将所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体与活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体联合而实现。本发明还提供药物组合物，所述药物组合物包含a）活性强化形式的抗内源性生物分子抗体；以及b）活性强化形式的抗NO合酶抗体。

Description

提高活性强化形式的抗体的效果的方法

技术领域

本发明涉及提高活性强化形式(activated-potentiated form)的抗体的效果的方法；本发明还涉及包含活性强化形式的抗内源性生物分子抗体以及活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体的药物制剂。

背景技术

一氧化氮(NO)是已显示出在不同生物学过程的信号转导中发挥作用的气态分子。内皮衍生的NO是调节血管张力(vascular tone)的关键分子，其与血管病的联系早已被认可。NO对许多已知与动脉粥样硬化斑块(atherosclerotic plaque)形成相关的过程起抑制作用，所述过程包括单核细胞粘着、血小板凝聚以及血管平滑肌细胞增殖。内皮NO的另一重要作用是保护血管壁不受由其自身代谢产物及脂类和脂蛋白的氧化产物诱导的氧化应激(oxidative stress)损害。内皮功能障碍在动脉粥样硬化的很早阶段发生。因此，局部NO利用度不足可能是促进人类动脉粥样硬化形成的最终共路(final common pathway)。除了在血管内皮中的作用以外，NO利用度还已经显出对脂蛋白代谢的调节作用。NO代谢产物的血浆浓度与血浆总胆固醇含量和低密度脂蛋白(LDL)胆固醇含量水平的负相关性已有报道，而高密度脂蛋白(HDL)在高胆固醇血症患者中改善血管功能。NO缺失在疾病发展中具有重要影响。糖尿病与主要由动脉粥样硬化疾病发展加快导致的发病率和死亡率上升有关。并且，报告显示糖尿病患者的肺功能削弱。有人提出胰岛素抵抗可导致气道炎症。Habib等，Nitric Oxide Measurement From Blood To Lungs，Is There A Link？Pak J Physiol2007；3(1)。

一氧化氮是由内皮通过一氧化氮合酶(NO合酶)由L-精氨酸合成的。NO合酶以不同亚型出现，包括组成型(cNOS)和诱导型(iNOS)。组成型NO合酶存在于正常内皮细胞、神经元和其它某些组织中。

Dr.Oleg I.Epshtein已发现了经顺势疗法技术强化的极度稀释形式(或极低形式)抗体(活性强化形式)的治疗效果。U.S.专利号7,700,096公开了顺势疗法强化形式的抗内皮NO合酶抗体。所述顺势疗法强化形式的抗内皮NO合酶抗体在俄罗斯联邦和其它国家以商品名销售。

对于提高活性强化形式的抗体的效果的方法存在持续需求。

发明内容

根据一个方面，本发明提供一种提高活性强化形式的抗内源性生物分子抗体的效果的方法，所述方法包括将所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体与活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体联合。优选地，本发明的方法方面包括将该复合物给予需要利用所述活性强化形式的抗体进行治疗的患者。

在一个变型中，所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体是抗S-100蛋白抗体。在另一个变型中，所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体是抗***特异性抗原抗体。在另一个变型中，所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体是抗胰岛素受体抗体。在另一个变型中，所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体是抗血管紧张素受体II抗体。

根据另一个方面，本发明提供了药物组合物，所述药物组合物包含a)活性强化形式的抗内源性生物分子抗体；以及b)活性强化形式的抗NO合酶抗体。优选地，所述药物组合物包含药学上可接受的固态载体。优选地，所述活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体包含C12、C30和C200顺势疗法稀释液(homeopathic dilutions)的混合物，所述混合物浸渍至所述固态载体上。所述活性强化形式的抗内源性生物分子抗体可以是单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体。优选地，所述抗人胰岛素受体抗体是多克隆抗体。

在考虑之列的是，所述药物组合物包含通过连续的百倍稀释(successive centesimal dilutions)、且每次稀释时伴以振荡而制备的活性强化形式的抗内源性生物分子抗体。同样在考虑之列的是，抗内皮NO合酶抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体。特别优选的是所述抗内皮NO合酶抗体为多克隆抗体。在考虑之列的是，所述活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体通过连续的百倍稀释、且每次稀释时伴以振荡而制备。

附图说明

图1：表示测试制剂对大鼠血浆葡萄糖水平的影响，所述大鼠患有链脲佐菌素(streptozotocin)诱导的糖尿病。

图2：表示在大鼠的葡萄糖耐量测试中，测试制剂在注射第14天时对浓度-时间曲线下面积(AUC)指标(indicator)的影响，所述大鼠患有链脲佐菌素诱导的糖尿病。

图3：表示测试制剂对大鼠血浆葡萄糖水平的影响，所述大鼠患有自发性非胰岛素依赖型糖尿病。

图4：表示在大鼠的葡萄糖耐量测试中，测试制剂在注射第28天时对浓度-时间曲线下面积(AUC)指标的影响，所述大鼠患有自发性非胰岛素依赖型糖尿病。

具体实施方式

参考所附的权利要求书对本发明进行限定。考虑到权利要求书，下述术语汇编提供了有关定义。

本文所使用的术语“抗体”意味着特异性地结合至另一分子的特定空间和极性结构、并因此被定义为与另一分子的特定空间和极性结构互补的免疫球蛋白。权利要求书中所列举的抗体可包括完整的免疫球蛋白或其片段，可为天然抗体、多克隆抗体或单克隆抗体，并可包括多个类及同种型，例如IgA、IgD、IgE、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3、IgM等。免疫球蛋白的片段可包括Fab、Fv和F(ab′)₂以及Fab′等。单数“抗体(antibody)”包括复数“抗体(antibodies)”。

相对于本文所列举的抗体，术语“活性强化形式”或“强化形式”分别用于表示任意的抗体初始溶液的顺势疗法强化产物。“顺势疗法强化”表示利用顺势疗法的方法对有关物质的初始溶液赋予顺势疗法效力(potency)。尽管不限于此，但是“顺势疗法强化”可包括例如结合外部处理、尤其是竖直(机械)振荡的重复的连续稀释。换句话说，根据顺势疗法技术，对抗体的初始溶液进行连续的重复稀释并对每次获得的溶液进行多次竖直振荡。抗体处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的初始溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml。制备各组分(即抗体溶液)的优选过程为：使用抗体初级基质溶液(primary matrix solution)(原始酊剂，mother tincture)分别被稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液(C12、C30和C200)；或者使用抗体初级基质溶液分别被稀释100¹²、100³⁰和100⁵⁰倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液(C12、C30和C50)。在美国专利号7,572,441和7,582,294中描述了顺势疗法强化的实例，以引用的方式将其内容整体并入本文并用于所述目的。同时，术语“活性强化形式”用在权利要求书中，术语“极低剂量”用在实施例中。术语“极低剂量”在通过研究和使用顺势疗法稀释和强化形式的物质而产生的领域中成为行业术语。术语“极低剂量”意味着完全支持权利要求书中所使用的术语“活性强化”形式并与权利要求书中所使用的术语“活性强化”形式基本上同义。

换句话说，当存在三个因素时，抗体处于“活性强化”或“强化”形式。首先，“活性强化”形式的抗体为顺势疗法领域广泛接受的制备方法的产品。其次，“活性强化”形式的抗体必须具备通过现代药物学广泛接受的方法确定的生物活性。第三，“活性强化”形式的抗体所表现出的生物活性不能由顺势疗法方法终产物中的分子形式抗体的存在加以解释。

例如，活性强化形式的抗体可通过使初始的、处于分子形式的分离的抗体经受联合外部作用(如机械振荡)的连续多次稀释而制备。浓度降低过程中的外部处理还可通过例如暴露至超声、电磁或其它物理因素来完成。V.Schwabe，“Homeopathic medicines”，M.，1967，美国专利号7,229,648和4,311,897(以引用的方式将其内容整体并入本文并用于所述目的)描述了顺势疗法领域中广泛接受的顺势疗法强化方法。这一过程使得初始分子形式抗体的分子浓度均匀降低。重复这一过程直至获得期望的顺势疗法效力。对于单独的抗体，可通过将中间稀释液在期望的药理学模型中进行生物测试来确定所需的顺势疗法效力。尽管不限于此，但是“顺势疗法强化”可包括例如与外部处理、尤其是竖直(机械)振荡相结合的重复的连续稀释。换句话说，根据顺势疗法技术，对抗体的初始溶液(initial solution)进行连续的重复稀释并对每次获得的溶液进行多次竖直振荡。抗体处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的初始溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml。制备各组分(即抗体溶液)的优选过程为：使用抗体初级基质溶液(原始酊剂)分别被稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200；或者使用抗体初级基质溶液(原始酊剂)分别被稀释100¹²、100³⁰和100⁵⁰倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C50。例如在美国专利号7,229,648和4,311,897中，也提供了如何获得期望效力的实例，以引用方式将其并入本文用于所述目的。在下文将更加详细地描述适用于本文所述的“活性强化”形式抗体的过程。

关于用顺势疗法对人类受试者进行治疗已有许多争议。虽然本发明依靠已接受的顺势疗法方法来获得“活性强化”形式的抗体，但是其并不仅仅依赖于在人类受试者中进行顺势疗法来证明其活性。本申请的发明人出乎预料地发现、并在已接受的药理学模型中充分证明，由起始分子形式的抗体进行连续多次稀释而最终得到的溶液具有明确的活性，且与痕量分子形式抗体在目标稀释液中的存在无关。将本文所提供的“活性强化”形式的抗体在广泛接受的药理学活性模型中测试其生物活性，所述测试在适当的体外实验或适当动物模型中的体内试验中进行。下文进一步提供的实验提供了在此类模型中的生物活性的证据。人类临床研究同样提供了在动物模型中观测到的活性被充分地转化至人类治疗的证据。人类研究同样提供了本文描述的“活性强化”形式对于治疗特定人类疾病或障碍(disorder)有效的证据，所述疾病或障碍在医学科学中被广泛接受为病理学状况(condition)。

同样，所要求保护的“活性强化”形式的抗体仅涵盖溶液或固体制剂，所述溶液或固体制剂的生物活性不能由初始、起始溶液(startingsolution)中余留的分子形式抗体的存在进行解释。换句话说，虽然“活性强化”形式的抗体可包含痕量的初始分子形式抗体也在考虑之列，但是由于连续稀释后余留的分子形式抗体的浓度极低，因此本领域技术人员不能以任何程度的合理性将在已接受的药理学模型中观察到的生物活性归因于余留的分子形式抗体。虽然本发明并不受任何具体理论的限制，但是本发明的“活性强化”形式抗体的生物活性并不归因于初始分子形式抗体。优选所述“活性强化”形式抗体处于液体形式或固体形式，其中所述分子形式抗体的浓度低于已被接受的分析技术(如毛细管电泳和高效液相色谱)的检测限。特别优选所述“活性强化”形式抗体处于液体形式或固体形式，其中所述分子形式抗体的浓度低于阿伏伽德罗常数。在分子形式治疗物质的药物学中，通常制作剂量-响应曲线，在该曲线中，以药理学响应水平对所给予受试者或在体外进行测试的活性药物的浓度作图。产生任何可检测的响应的药物最低水平被称为阈剂量(thresholddose)。特别在考虑之列并优选的是，“活性强化”形式的抗体以低于所给定生物学模型中的分子形式抗体的阈剂量的浓度包含分子抗体(如果有的话)。

根据本发明这一方面的复合药物组合物可处于液体形式或固体形式。药物组合物中所含的各活性强化形式抗体由初始分子形式抗体通过顺势疗法领域所接受的方法制备。起始抗体可为根据已知方法制备的单克隆抗体或多克隆抗体，所述已知方法例如Immunotechniques，G.Frimel，M.，“Meditsyna”，1987，第9-33页；“Hum.Antibodies.Monoclonal andrecombinant antibodies，30years after”，Laffly E.，Sodoyer R.著，2005，Vol.14.，N1-2.，第33-55页中所述，以引用的方式将其内容并入本文。

单克隆抗体可通过如杂交瘤技术获得。所述方法的初始步骤包括基于已在多克隆抗血清制备过程中开发出的原则进行免疫。工作的进一步步骤包括制备出产生具有相同特异性的抗体克隆的杂交细胞。其各自的分离使用与多克隆抗血清制备情况中相同的方法进行。

多克隆抗体可通过动物的主动免疫获得。为了这一目的，例如使合适的动物(如兔)接受适当抗原(例如NO合酶)的一系列注射。动物的免疫***产生相应的抗体，以已知方法从动物中进行收集。这一过程使得能够制备富含单特异性抗体的血清。

如果需要的话，包含抗体的血清例如可通过使用亲和色谱、盐沉淀分级分离或离子交换色谱进行纯化。可将所得到的经纯化的、富含抗体的血清用作制备活性强化形式抗体的起始材料。所得到的处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的抗体的初始溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml。

制备本发明所述复合药物的各组分的优选过程为：使用抗体初级基质溶液分别被稀释100¹²、100³⁰和100⁵⁰倍的3种水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C50；或者使用抗体初级基质溶液分别被稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍的3种水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200。为制备固体剂型，将固态载体利用通过顺势疗法方法所获得的期望稀释液进行处理。为获得本发明复合物的固体单位剂型，用各稀释液对载体物质进行浸渍。为制备期望的复合剂型，两种浸渍顺序都是适合的。

在优选的实施方式中，用于制备包含本发明所述复合物的活性强化形式的起始材料是针对相应抗原(即NO合酶及内源性生物分子)的动物产多克隆抗体。为获得活性强化形式的抗NO合酶多克隆抗体，可将期望的抗原作为免疫原注射入实验动物、优选兔中。抗NO合酶多克隆抗体可使用以下序列的牛NO合酶的整个分子获得：

SEQ ID NO：1

Met Gly Asn Leu Lys Ser Val Gly Gln Glu Pro Gly Pro Pro Cys

1 5 10 15

Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Cys Gly Lys Gln Gly

16 20 25 30

Pro Ala Ser Pro Ala Pro Glu Pro Ser Arg Ala Pro Ala Pro Ala

31 35 40 45

Thr Pro His Ala Pro Asp His Ser Pro Ala Pro Asn Ser Pro Thr

46 50 55 60

Leu Thr Arg Pro Pro Glu Gly Pro Lys Phe Pro Arg Val Lys Asn

61 65 70 75

Trp Glu Leu GLys er Ile Thr Tyr Asp Thr Leu Cys Ala Gln Ser

76 80 85 90

Gln Gln Asp Gly Pro Cys Thr Pro Arg Cys Cys Leu GLys er Leu

91 95 100 105

Val Leu Pro Arg Lys Leu Gln Thr Arg Pro Ser Pro Gly Pro Pro

106 110 115 120

Pro Ala Glu Gln Leu Leu Ser Gln Ala Arg Asp Phe Ile Asn Gln

121 125 130 135

Tyr Tyr Ser Ser Ile Lys Arg Ser GLys er Gln Ala His Glu Glu

136 140 145 150

Arg Leu Gln Glu Val Glu Ala Glu Val Ala Ser Thr Gly Thr Tyr

151 155 160 165

His Leu Arg Glu Ser Glu Leu Val Phe Gly Ala Lys Gln Ala Trp

166 170 175 180

Arg Asn Ala Pro Arg Cys Val Gly Arg Ile Gln Trp Gly Lys Leu

181 185 190 195

Gln Val Phe Asp Ala Arg Asp Cys Ser Ser Ala Gln Glu Met Phe

196 200 205 210

Thr Tyr Ile Cys Asn His Ile Lys Tyr Ala Thr Asn Arg Gly Asn

211 215 220 225

Leu Arg Ser Ala Ile Thr Val Phe Pro Gln Arg Ala Pro Gly Arg

226 230 235 240

Gly Asp Phe Arg Ile Trp Asn Ser Gln Leu Val Arg Tyr Ala Gly

241 245 250 255

Tyr Arg Gln Gln Asp GLys er Val Arg Gly Asp Pro Ala Asn Val

256 260 265 270

Glu Ile Thr Glu Leu Cys Ile Gln His Gly Trp Thr Pro Gly Asn

271 275 280 285

Gly Arg Phe Asp Val Leu Pro Leu Leu Leu Gln Ala Pro Asp Glu

286 290 295 300

Ala Pro Glu Leu Phe Val Leu Pro Pro Glu Leu Val Leu Glu Val

301 305 310 315

Pro Leu Glu His Pro Thr Leu Glu Trp Phe Ala Ala Leu Gly Leu

316 320 325 330

Arg Trp Tyr Ala Leu Pro Ala Val Ser Asn Met Leu Leu Glu Ile

331 335 340 345

Gly Gly Leu Glu Phe Ser Ala Ala Pro Phe Ser Gly Trp Tyr Met

346 350 355 360

Ser Thr Glu Ile Gly Thr Arg Asn Leu Cys Asp Pro His Arg Tyr

361 365 370 375

Asn Ile Leu Glu Asp Val Ala Val Cys Met Asp Leu Asp Thr Arg

376 380 385 390

Thr Thr Ser Ser Leu Trp Lys Asp Lys Ala Ala Val Glu Ile Asn

391 395 400 405

Leu Ala Val Leu His Ser Phe Gln Leu Ala Lys Val Thr Ile Val

406 410 415 420

Asp His His Ala Ala Thr Val Ser Phe Met Lys His Leu Asp Asn

421 425 430 435

Glu Gln Lys Ala Arg Gly Gly Cys Pro Ala Asp Trp Ala Trp Ile

436 440 445 450

Val Pro Pro Ile Ser GLys er Leu Thr Pro Val Phe His Gln Glu

451 455 460 465

Met Val Asn Tyr Ile Leu Ser Pro Ala Phe Arg Tyr Gin Pro Asp

466 470 475 480

Pro Trp Lys GLy Ser Ala Thr Lys Gly Ala Gly Ile Thr Arg Lys

481 485 490 495

Lys Thr Phe Lys Glu Val Ala Asn Ala Val Lys Ile Ser Ala Ser

496 500 505 510

Leu Met Gly Thr Leu Met Ala Lys Arg Val Lys Ala Thr Ile Leu

511 515 510 525

Tyr Ala Ser Glu Thr Gly Arg Ala Gln Ser Tyr Ala Gln Gln Leu

526 530 535 540

Gly Arg Leu Phe Arg Lys Ala Phe Asp Pro Arg Val Leu Cys Met

541 545 550 555

Asp Glu Tyr Asp Val Val Ser Leu Glu His Glu Ala Leu Val Leu

556 560 565 570

Val Val Thr Ser Thr Phe Gly Asn Gly Asp Pro Pro Glu Asn Gly

571 575 580 585

Glu Ser Phe Ala Ala Ala Leu Met Glu Met Ser Gly Pro Tyr Asn

586 590 595 600

Ser Ser Pro Arg Pro Glu Gln His Lys Ser Tyr Lys Ile Arg Phe

601 605 610 615

Asn Ser Val Ser Cys Ser Asp Pro Leu Val Ser Ser Trp Arg Arg

616 620 625 630

Lys Arg Lys Glu Ser Ser Asn Thr Asp Ser Ala Gly Ala Leu Gly

631 635 640 645

Thr Leu Arg Phe Cys Val Phe Gly Leu GLy Ser Arg Ala Tyr Pro

646 650 655 660

His Phe Cys Ala Phe Ala Arg Ala Val Asp Thr Arg Leu Glu Glu

661 665 670 675

Leu Gly Gly Glu Arg Leu Leu Gln Leu Gly Gln Gly Asp Glu Leu

676 680 685 690

Cys Gly Gln Glu Glu Ala Phe Arg Gly Trp Ala Lys Ala Ala Phe

691 695 700 705

Gln Ala Ser Cys Glu Thr Phe Cys Val Gly Glu Glu Ala Lys Ala

706 710 715 720

Ala Ala Gln Asp Ile Phe Ser Pro Lys Arg Ser Trp Lys Arg Gln

721 725 730 735

Arg Tyr Arg Leu Ser Thr Gln Ala Glu Gly Leu Gln Leu Leu Pro

736 740 745 750

Gly Leu Ile His Val His Arg Arg Lys Met Phe Gln Ala Thr Val

751 755 760 765

Leu Ser Val Glu Asn Leu Gln Ser Ser Lys Ser Thr Arg Ala Thr

766 770 775 780

Ile Leu Val Arg Leu Asp Thr Ala Gly Gln Glu Gly Leu Gln Tyr

781 785 790 795

Gln Pro Gly Asp His Ile Gly Ile Cys Pro Pro Asn Arg Pro Gly

796 800 805 810

Leu Val Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Glu Asp Pro Pro Pro Pro

811 815 820 825

Thr Glu Ser Val Ala Val Glu Gln Leu Glu Lys GLys er Pro Gly

826 830 835 840

Gly Pro Pro Pro Ser Trp Val Arg Asp Pro Arg Leu Pro Pro Cys

841 845 850 855

Thr Leu Arg Gln Ala Leu Thr Phe Phe Leu Asp Ile Thr Ser Pro

856 860 865 870

Pro Ser Pro Arg Leu Leu Arg Leu Leu Ser Thr Leu Ala Glu Glu

871 875 880 885

Pro Ser Glu Gln Gln Glu Leu Glu Thr Leu Ser Gln Asp Pro Arg

886 890 895 900

Arg Tyr Glu Glu Trp Lys Trp Phe Arg Cys Pro Thr Leu Leu Glu

901 905 910 915

Val Leu Glu Gln Phe Pro Ser Val Ala Leu Pro Ala Pro Leu Leu

916 920 925 930

Leu Thr Gln Leu Pro Leu Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Val Ser

931 935 940 945

Ser Ala Pro Asn Ala His Pro Gly Glu Val His Leu Thr Val Ala

946 950 955 960

Val Leu Ala Tyr Arg Thr Gln Asp Gly Leu Gly Pro Leu His Tyr

961 965 970 975

Gly Val Cys Ser Thr Trp Leu Ser Gln Leu Lys Thr Gly Asp Pro

976 980 985 990

Val Pro Cys Phe Ile Arg Gly Ala Pro Ser Phe Arg Leu Pro Pro

991 995 1000 1005

Asp Pro Tyr Val Pro Cys Ile Leu Val Gly Pro Gly Thr Gly Ile

1006 1010 1015 1020

Ala Pro Phe Arg Gly Phe Trp Gln Glu Arg Leu His Asp Ile Glu

1021 1025 1030 1035

Ser Lys Gly Leu Gln Pro Ala Pro Met Thr Leu Val Phe Gly Cys

1036 1040 1045 1050

Arg Cys Ser Gln Leu Asp His Leu Tyr Arg Asp Glu Val Gln Asp

1051 1055 1060 1065

Ala Gln Glu Arg Gly Val Phe Gly Arg Val Leu Thr Ala Phe Ser

1066 1070 1075 1080

Arg Glu Pro Asp Ser Pro Lys Thr Tyr Val Gln Asp Ile Leu Arg

1081 1085 1090 1095

Thr Glu Leu Ala Ala Glu Val His Arg Val Leu Cys Leu Glu Arg

1096 1100 1105 1110

Gly His Met Phe Val Cys Gly Asp Val Thr Met Ala Thr Ser Val

1111 1115 1120 1125

Leu Gln Thr Val Gln Arg Ile Leu Ala Thr Glu Gly Asp Met Glu

1126 1130 1135 1140

Leu Asp Glu Ala Gly Asp Val Ile Gly Val Leu Arg Asp Gln Gln

1141 1145 1150 1155

Arg Tyr His Glu Asp Ile Phe Gly Leu Thr Leu Arg Thr Gln Glu

1156 1160 1165 1170

Val Thr Ser Arg Ile Arg Thr Gln Ser Phe Ser Leu Gln Glu Arg

1171 1175 1180 1185

His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro

1186 1190 1195 1200

Asp Thr Pro Gly Pro

1201 1205

抗NO合酶多克隆抗体可使用以下序列的人NO合酶的整个分子获得：

SEQ ID NO：2

Met Gly Asn Leu Lys Ser Val Ala Gln Glu Pro Gly Pro Pro Cys

1 5 10 15

Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Cys Gly Lys Gln Gly

16 20 25 30

Pro Ala Thr Pro Ala Pro Glu Pro Ser Arg Ala Pro Ala Ser Leu

31 35 40 45

Leu Pro Pro Ala Pro Glu His Ser Pro Pro Ser Ser Pro Leu Thr

46 50 55 60

Gln Pro Pro Glu Gly Pro Lys Phe Pro Arg Val Lys Asn Trp Glu

61 65 70 75

Val GLys er Ile Thr Tyr Asp Thr Leu Ser Ala Gln Ala Gln Gln

76 80 85 90

Asp Gly Pro Cys Thr Pro Arg Arg Cys Leu GLys er Leu Val Phe

91 95 100 105

Pro Arg Lys Leu Gln Gly Arg Pro Ser Pro Gly Pro Pro Ala Pro

106 110 115 120

Glu Gln Leu Leu Ser Gln Ala Arg Asp Phe Ile Asn Gln Tyr Tyr

121 125 130 135

Ser Ser Ile Lys Arg Ser GLys er Gln Ala His Glu Gln Arg Leu

136 140 145 150

Gln Glu Val Glu Ala Glu Val Ala Ala Thr Gly Thr Tyr Gln Leu

151 155 160 165

Arg Glu Ser Glu Leu Val Phe Gly Ala Lys Gln Ala Trp Arg Asn

166 170 175 180

Ala Pro Arg Cys Val Gly Arg Ile Gln Trp Gly Lys Leu Gln Val

181 185 190 195

Phe Asp Ala Arg Asp Cys Arg Ser Ala Gln Glu Met Phe Thr Tyr

196 200 205 210

Ile Cys Asn His Ile Lys Tyr Ala Thr Asn Arg Gly Asn Leu Arg

211 215 220 225

Ser Ala Ile Thr Val Phe Pro Gln Arg Cys Pro Gly Arg Gly Asp

226 230 235 240

Phe Arg Ile Trp Asn Ser Gln Leu Val Arg Tyr Ala Gly Tyr Arg

241 245 250 255

Gln Gln Asp GLy Ser Val Arg Gly Asp Pro Ala Asn Val Glu Ile

256 260 265 270

Thr Glu Leu Cys Ile Gln His Gly Trp Thr Pro Gly Asn Gly Arg

271 275 280 285

Phe Asp Val Leu Pro Leu Leu Leu Gln Ala Pro Asp Glu Pro Pro

286 290 295 300

Glu Leu Phe Leu Leu Pro Pro Glu Leu Val Leu Glu Val Pro Leu

301 305 310 315

Glu His Pro Thr Leu Glu Trp Phe Ala Ala Leu Gly Leu Arg Trp

316 320 325 330

Tyr Ala Leu Pro Ala Val Ser Asn Met Leu Leu Glu Ile Gly Gly

331 335 340 345

Leu Glu Phe Pro Ala Ala Pro Phe Ser Gly Trp Tyr Met Ser Thr

346 350 355 360

Glu Ile Gly Thr Arg Asn Leu Cys Asp Pro His Arg Tyr Asn Ile

361 365 370 375

Leu Glu Asp Val Ala Val Cys Met Asp Leu Asp Thr Arg Thr Thr

376 380 385 390

Ser Ser Leu Trp Lys Asp Lys Ala Ala Val Glu Ile Asn Val Ala

391 395 400 405

Val Leu His Ser Tyr Gln Leu Ala Lys Val Thr Ile Val Asp His

406 410 415 420

His Ala Ala Thr Ala Ser Phe Met Lys His Leu Glu Asn Glu Gln

421 425 430 435

Lys Ala Arg Gly Gly Cys Pro Ala Asp Trp Ala Trp Ile Val Pro

436 440 445 450

Pro Ile Ser GLys er Leu Thr Pro Val Phe His Gln Glu Met Val

451 455 460 465

Asn Tyr Phe Leu Ser Pro Ala Phe Arg Tyr Gln Pro Asp Pro Trp

466 470 475 480

Lys Gly Ser Ala Ala Lys Gly Thr Gly Ile Thr Arg Lys Lys Thr

481 485 490 495

Phe Lys Glu Val Ala Asn Ala Val Lys Ile Ser Ala Ser Leu Met

496 500 505 510

Gly Thr Val Met Ala Lys Arg Val Lys Ala Thr Ile Leu Tyr Gly

511 515 510 525

Ser Glu Thr Gly Arg Ala Gln Ser Tyr Ala Gln Gln Leu Gly Arg

526 530 535 540

Leu Phe Arg Lys Ala Phe Asp Pro Arg Val Leu Cys Met Asp Glu

541 545 550 555

Tyr Asp Val Val Ser Leu Glu His Glu Thr Leu Val Leu Val Val

556 560 565 570

Thr Ser Thr Phe Gly Asn Gly Asp Pro Pro Glu Asn Gly Glu Ser

571 575 580 585

Phe Ala Ala Ala Leu Met Glu Met Ser Gly Pro Tyr Asn Ser Ser

586 590 595 600

Pro Arg Pro Glu Gln His Lys Ser Tyr Lys Ile Arg Phe Asn Ser

601 605 610 615

Ile Ser Cys Ser Asp Pro Leu Val Ser Ser Trp Arg Arg Lys Arg

616 620 625 630

Lys Glu Ser Ser Asn Thr Asp Ser Ala Gly Ala Leu Gly Thr Leu

631 635 640 645

Arg Phe Cys Val Phe Gly Leu GLys er Arg Ala Tyr Pro His Phe

646 650 655 660

Cys Ala Phe Ala Arg Ala Val Asp Thr Arg Leu Glu Glu Leu Gly

661 665 670 675

Gly Glu Arg Leu Leu Gln Leu Gly Gln Gly Asp Glu Leu Cys Gly

676 680 685 690

Gln Glu Glu Ala Phe Arg Gly Trp Ala Gln Ala Ala Phe Gln Ala

691 695 700 705

Ala Cys Glu Thr Phe Cys Val Gly Glu Asp Ala Lys Ala Ala Ala

706 710 715 720

Arg Asp Ile Phe Ser Pro Lys Arg Ser Trp Lys Arg Gln Arg Tyr

721 725 730 735

Arg Leu Ser Ala Gln Ala Glu Gly Leu Gln Leu Leu Pro Gly Leu

736 740 745 750

Ile His Val His Arg Arg Lys Met Phe Gln Ala Thr Ile Arg Ser

751 755 760 765

Val Glu Asn Leu Gln Ser Ser Lys Ser Thr Arg Ala Thr Ile Leu

766 770 775 780

Val Arg Leu Asp Thr Gly Gly Gln Glu Gly Leu Gln Tyr Gln Pro

781 785 790 795

Gly Asp His Ile Gly Val Cys Pro Pro Asn Arg Pro Gly Leu Val

796 800 805 810

Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Glu Asp Pro Pro Ala Pro Thr Glu

811 815 820 825

Pro Val Ala Val Glu Gln Leu Glu Lys Gly Ser Pro Gly Gly Pro

826 830 835 840

Pro Pro Gly Trp Val Arg Asp Pro Arg Leu Pro Pro Cys Thr Leu

841 845 850 855

Arg Gln Ala Leu Thr Phe Phe Leu Asp Ile Thr Ser Pro Pro Ser

856 860 865 870

Pro Gln Leu Leu Arg Leu Leu Ser Thr Leu Ala Glu Glu Pro Arg

871 875 880 885

Glu Gln Gln Glu Leu Glu Ala Leu Ser Gln Asp Pro Arg Arg Tyr

886 890 895 900

Glu Glu Trp Lys Trp Phe Arg Cys Pro Thr Leu Leu Glu Val Leu

901 905 910 915

Glu Gln Phe Pro Ser Val Ala Leu Pro Ala Pro Leu Leu Leu Thr

916 920 925 930

Gln Leu Pro Leu Leu Gln Pro Arg Tyr Tyr Ser Val Ser Ser Ala

931 935 940 945

Pro Ser Thr His Pro Gly Glu Ile His Leu Thr Val Ala Val Leu

946 950 955 960

Ala Tyr Arg Thr Gln Asp Gly Leu Gly Pro Leu His Tyr Gly Val

961 965 970 975

Cys Ser Thr Trp Leu Ser Gln Leu Lys Pro Gly Asp Pro Val Pro

976 980 985 990

Cys Phe Ile Arg Gly Ala Pro Ser Phe Arg Leu Pro Pro Asp Pro

991 995 1000 1005

Ser Leu Pro Cys Ile Leu Val Gly Pro Gly Thr Gly Ile Ala Pro

1006 1010 1015 1020

Phe Arg Gly Phe Trp Gln Glu Arg Leu His Asp Ile Glu Ser Lys

1021 1025 1030 1035

Gly Leu Gln Pro Thr Pro Met Thr Leu Val Phe Gly Cys Arg Cys

1036 1040 1045 1050

Ser Gln Leu Asp His Leu Tyr Arg Asp Glu Val Gln Asn Ala Gln

1051 1055 1060 1065

Gln Arg Gly Val Phe Gly Arg Val Leu Thr Ala Phe Ser Arg Glu

1066 1070 1075 1080

Pro Asp Asn Pro Lys Thr Tyr Val Gln Asp Ile Leu Arg Thr Glu

1081 1085 1090 1095

Leu Ala Ala Glu Val His Arg Val Leu Cys Leu Glu Arg Gly His

1096 1100 1105 1110

Met Phe Val Cys Gly Asp Val Thr Met Ala Thr Asn Val Leu Gln

1111 1115 1120 1125

Thr Val Gln Arg Ile Leu Ala Thr Glu Gly Asp Met Glu Leu Asp

1126 1130 1135 1140

Glu Ala Gly Asp Val Ile Gly Val Leu Arg Asp Gln Gln Arg Tyr

1141 1145 1150 1155

His Glu Asp Ile Phe Gly Leu Thr Leu Arg Thr Gln Glu Val Thr

1156 1160 1165 1170

Ser Arg Ile Arg Thr Gln Ser Phe Ser Leu Gln Glu Arg Gln Leu

1171 1175 1180 1185

Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Ser Asp Thr

1186 1190 1195 1200

Asn Ser Pro

1201 1203

为了获得抗NO合酶多克隆抗体，同样能够使用NO合酶的片段，所述片段例如选自以下序列：

SEQ ID NO：3

Pro Trp Ala Phe

1192 1195

SEQ ID NO：4

Gly Ala Val Pro

1189 1192

SEQ ID NO：5

Arg

1185

His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro

1186 1190 1195 1200

Asp Thr Pro Gly Pro

1201 1205

SEQ ID NO：6

Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro

11941195 1200

Asp Thr Pro Gly Pro

1201 1205

SEQ ID NO：7

His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp

1186 1190 11951196

SEQ ID NO：8

His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro

1186 1190 1195 1200

Asp Thr Pro Gly Pro

1201 1205

制备起始抗NO合酶多克隆抗体的示例性过程可描述如下。在采血前7-9天，将期望抗原经1-3次静脉注射至兔，以增高兔血流中的多克隆抗体水平。一旦免疫后，采集血样以测试抗体水平。通常，可溶性抗原免疫反应在抗原第一次注射后40-60天内达到最高水平。第一个免疫周期结束后，兔具有30天的康复期，之后经另外的1-3次静脉注射进行再免疫。

为获得包含期望抗体的抗血清，从兔中收集免疫后的兔血液并置于50ml离心管中。用木质药匙(spatula)将管壁上所形成的产物凝块移除并将棒置于管中心的凝块中。然后将血液放置于冷却器中于40℃的温度下过夜。第二天，将药匙上的血块移除，将剩余液体在13000转/分下离心10min。上清液体为目标抗血清。所获得的抗血清通常为黄色。向抗血清加入20wt％的NaN₃至最终浓度为0.02％并在-20℃的温度下于冷冻状态贮存至使用，或者不加入NaN₃而在-70℃的温度下贮存至使用。为了从抗血清中分离目标抗γ干扰素抗体，下述固相吸附顺序很适合：

将10ml兔抗血清用0.15M的NaCl稀释2倍，之后加入6.26g Na₂SO₄，混合并在4℃下孵育12-16小时。将沉淀物经离心移除，在10ml磷酸盐缓冲液中稀释并使用相同的缓冲液在环境温度下透析过夜。移除沉淀物后，将溶液加样至用磷酸盐缓冲液平衡后的DEAE-纤维素柱。通过在280nm处对洗脱液的光密度进行测量来确定抗体馏分。

使用亲和色谱法，通过将所获得的抗NO合酶抗体附至色谱介质的不溶性基质上、并随后用浓的水性盐溶液洗脱，对所分离出的粗抗体进行纯化。

将所得的缓冲溶液用作顺势疗法稀释方法的起始溶液，以用来制备活性强化形式的抗体。抗原纯化的兔抗NO合酶多克隆抗体的初始基质溶液的优选浓度为0.5-5.0mg/ml，优选2.0-3.0mg/ml。

抗内源性生物分子多克隆抗体可同样通过与上述用于抗内皮NO合酶抗体的方法相似的方法使用佐剂制备。

将所得缓冲溶液用作顺势疗法稀释方法的起始溶液，以用来制备活性强化形式的抗体。

活性强化形式的复合物的各组分可由初始溶液经顺势疗法强化来制备，优选使用通过连续稀释来成比例降低浓度的如下方法并结合外部作用：将1份的各在先溶液(preceding solution)(由初始溶液开始)连续稀释于9份(十倍稀释)、或连续稀释于99份(百倍稀释)、或连续稀释于999份(千倍稀释)的中性溶剂中，用浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml的处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的抗体的初始溶液来起始。所述外部作用优选包括每次稀释时的多次竖直振荡(稀释增效法，dynamization)。优选将单独的容器用于后续各次稀释，直至所需效力水平或稀释系数。这一方法在顺势疗法领域中被广泛接受。参见例如V.Schwabe，“Homeopathic medicines”，M.，1967，第14-29页，以引用的方式将其并入本文用于所述目的。

例如，为了制备第12百倍稀释液(表示为C12)，将1份浓度为3.0mg/ml的抗NO合酶抗体的初始基质溶液稀释于99份中性水溶剂或水-醇溶剂(优选15％乙醇)中，并随后进行多次(10次以上)竖直振荡以制成第1百倍稀释液(表示为C1)。第2百倍稀释液(C2)由第1百倍稀释液C1制备。将这一过程重复11次，从而制得第12百倍稀释液C12。因此，第12百倍稀释液C12表示通过将1份浓度为3.0mg/ml的抗体的初始基质溶液在处于不同容器内的99份中性溶剂中连续稀释12次所获得的溶液，相当于百倍顺势疗法稀释液C12。以相应的稀释系数进行类似过程，获得所需稀释液。可将中间稀释液在期望的生物模型中进行测试以检测活性。包含本发明复合物的优选的活性强化形式抗体为各活性强化形式的C12、C30和C200稀释液。当将活性物质的多种顺势疗法稀释液(主要为百倍稀释液)的混合物用作生物活性液体组分时，组合物的各组分(如，C12、C30、C50、C200)分别根据上述过程制备，直至获得倒数第二份稀释液(例如，分别直至C11、C29和C199)，然后根据混合物组成将1份的各组分加入一个容器中，并与所需量的溶剂(如，用97份以进行百倍稀释)进行混合。

可将活性物质作为多种顺势疗法稀释液、例如十倍和/或百倍稀释液(D20、C30、C100或C12、C30、C50或C12、C30、C200等)的混合物来使用，其效力通过在合适的生物模型、例如本文实施例所述的模型中对稀释液进行测试，从而以实验的方式确定。

在强化和浓度降低的过程中，可将竖直振荡替代为外部暴露至超声、电磁场、或顺势疗法领域中接受的任何类似的外部作用过程。

可通过用活性强化形式的活性组分的水溶液或水-醇溶液的混合物(以1∶1的比例混合并以液体剂型的形式使用)对药学上可接受的固态载体进行浸渍，来制备本发明药物组合物的固体单位剂型。或者，可用各所需稀释液对载体进行连续浸渍。

优选处于固体单位剂型的药物组合物由药学上可接受的载体的颗粒制备，所述颗粒预先用活性强化形式抗体的水稀释液或水-醇稀释液饱和。固体剂型可为药学领域中已知的任何剂型，包括片剂、胶囊、锭剂及其它。作为非活性药物成分，可使用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉、异麦芽糖、异麦芽酮糖醇及制药中使用的其它单糖、寡糖和多糖，还可使用上述非活性药物成分与其它药学上可接受的赋形剂的工艺混合物，所述赋形剂如异麦芽酮糖醇、交联聚维酮、甜蜜素(sodium cyclamate)、糖精钠、无水柠檬酸等，包括润滑剂、崩解剂、粘结剂和着色剂。优选的载体为乳糖和异麦芽酮糖醇。药物剂型可进一步包含标准的药物赋形剂，例如微晶纤维素、硬脂酸镁和柠檬酸。

制备固体单位剂型的实例于以下阐述。为制备固体口服剂型，将乳糖的100-300μm颗粒用活性强化形式的抗组胺抗体、活性强化形式的抗NO合酶抗体及活性强化形式的抗内源性生物分子抗体的水溶液或水-醇溶液、以1kg抗体溶液对5kg至10kg乳糖(1∶5至1∶10)的比例进行浸渍。为了实现浸渍效果，使乳糖颗粒在沸腾床设备(如，Hüttlin GmbH的“Hüttlin Pilotlab”)中的流化沸腾床中接受饱和灌洗(saturationirrigation)，随后经由加热的空气流在低于40℃的温度下进行干燥。将用活性强化形式抗体饱和的估计量的干燥颗粒(10-34重量份)置于混合器内，并与25-45重量份的“非饱和”纯乳糖(用于在不降低治疗功效的情况下，降低成本、简化和加速工艺方法的目的)、以及0.1-1重量份的硬脂酸镁和3-10重量份的微晶纤维素一起进行混合。将所获得的片状物质进行均匀混合，并通过直接干压成型(如，在Korsch-XL400压片机中)进行压片，从而形成150-500mg、优选300mg的圆丸。压片后，获得300mg的丸剂，所述丸剂用活性强化形式抗体的复合物的水-醇溶液饱和(3.0-6.0mg/丸)。用于对载体进行浸渍的复合物的各组分处于百倍顺势疗法稀释液的混合物的形式，优选为百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物的形式。

尽管本发明并不受任何具体理论限制，但是认为，本文所述的活性强化形式抗体并不包含足够具有归因于此类分子形式的生物活性的量的分子形式抗体。本发明复合药物(复合物、药物组合物)的生物活性在所附的实施例中得以充分说明。

优选地，为了治疗目的，本发明复合物优选每日给药1-4次，优选每日给药2次，每次给药包括1-2单位复合剂型。

参考所附的非限制性实施例对本发明进行进一步的说明。

实施例

实施例1

使用放射性配体方法，研究了复合制剂及其组分在体外对标准配体[³H]戊唑辛(pentazocine)与人重组σ1受体的结合的作用，所述复合制剂包含极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)和抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)，上述活性强化形式抗体由对初始基质溶液(浓度：2.5mg/ml)进行超级稀释(super-dilution)(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(比例为1∶1)(ULD抗S100+抗eNOS)；所述复合制剂的组分指极低剂量(ULD)的活性强化形式的经抗原亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)，其通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物；所述复合制剂的组分还指极低剂量的活性强化形式的兔抗内皮NO合酶多克隆抗体(ULD抗eNOS)，其通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物。使用强化的蒸馏水(顺势疗法稀释液C12+C30+C200的混合物)作为测试制剂的对照。

Sigma-1(σ1)受体为细胞内受体，位于中枢神经***细胞、大部分外周组织细胞与免疫活性细胞中。受体显示出由许多精神药物引发转移的独特能力。σ1受体的动力学与作用至σ1受体的制剂所产生的各种影响直接相关。这些影响包括对活性通道、胞吐(ecocytosis)、信号传导、质膜重塑(脂筏(raft)的形成)以及脂类转运/代谢作用的调节。这些全都能够促进脑中神经元的可塑性。存在证据表明σ1受体对全部主要的神经介质***都具有调节作用：去甲肾上腺素***、血清素***、多巴胺***、胆碱能***以及NMDA可调节的谷氨酸效应。σ1受体在神经退行性疾病(例如阿尔茨海默病和帕金森病)、精神和情感障碍(psychiatricand affective disorders)以及中风的病理生理学中起重要作用；σ1受体还参与学习和记忆过程。就此而言，药物影响配体与σ1受体相互作用效力的能力表明了在其药理学活性范围中的神经保护、抗缺血、抗焦虑、抗抑郁和抗虚弱组分的存在，所述药理学活性允许将这些药物作为尤其用于治疗脑血管疾病的有效制剂纳入考虑。

在测试(以测定总结合)期间，将20μl的复合制剂(ULD抗S100+抗eNOS)、或10μl的ULD抗S100抗体、或10μl的ULD抗NOS抗体转移至培养基中。因此，测试复合制剂时，转移至测试盘(test basin)中的ULD抗S100+抗eNOS的量与作为单一制剂测试的ULD抗S100抗体和ULD抗NOS抗体的量相同，这也允许将制剂的效力与其各单独的组分相比较。将20μl与10μl的强化水转移至培养基中。

此外，还转移了160μl(大约200μg蛋白质)的Jurkat细胞系的细胞膜匀浆(人白血病T淋巴细胞系)；以及最终转移了20μl氚标记的放射性配体[³H]戊唑辛(15nm)。

为了测量非特异性结合，将20μl未标记的配体氟哌啶醇(10μM)转移至培养基中，代替制剂或强化水。

在50mM的Tris-HCl缓冲液(pH＝7.4)中于22℃下孵育120分钟、并使用玻璃纤维过滤器(GF/B，Packard)过滤之后，使用闪烁计数器(Topcount，Packard)和闪烁混合物(Microscint0，Packard)测量放射性。特异性结合(测试或对照中)由总结合(测试或对照中)与非特异性结合的差异计算得出。

结果以对照(使用蒸馏水作为对照)中特异性结合抑制的百分比表示(表1)。

表1.

制剂和强化水对标准配体[³H]戊唑辛与人重组σ1受体的结合的影响

注意：对照中特异性结合的％＝(测试组中的特异性结合/对照组中的特异性结合)*100％；

对照中特异性结合抑制的％＝100％-(测试组中的特异性结合/对照组中的特异性结合)*100％。

测试化合物的结果反映出50％以上的抑制表示显著性影响；25％-50％的抑制表示轻度-中度影响；测试化合物低于25％的抑制被认为是非显著性影响，并属于背景水平的范畴。

因此，这一测试模型的情况显示ULD抗S100+抗eNOS复合制剂相比其各单独的组分(ULD抗S100和ULD抗eNOS)在抑制标准放射性配体[³H]戊唑辛与人重组σ1受体的结合方面更为有效；转移至测试盘的10μl的ULD抗S100抑制了标准放射性配体[³H]戊唑辛与人重组σ1受体的结合，但影响强度次于ULD抗S100+抗eNOS复合制剂；转移至测试盘的10μl的ULD抗eNOS对标准放射性配体[³H]戊唑辛与人重组σ1受体的结合没有影响；转移至测试盘的10μl或20μl的强化水对标准放射性配体[³H]戊唑辛与人重组σ1受体的结合没有影响。

实施例2

阿尔茨海默病(AD)是以认知机能下降、记忆退化、意识混淆和情绪变化为特征的神经退行性疾病。虽然这一病理的主要原因现今认为是β淀粉样蛋白(beta amyloid)的累积，导致在脑组织中形成β淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结；AD同样伴有胆碱能***的缺乏。这是在胆碱能***拮抗剂莨菪碱(scopolamine)的帮助下在动物中建立AD模型这一最通常方式的基础。向实验动物(通常为大鼠或小鼠)中注射莨菪碱能阻断学习能力，并导致记忆退化。

使用了各种方法以评价大鼠和小鼠的认知机能，包括Morris水迷宫。这一测试的本质为将动物在不同点释放入具有浑水(cloudy water)的容器，所述动物被迫寻找隐藏的固定平台。这一方法的优点在于其允许研究者监控动物训练的过程(关于平台空间校准概念的形成，不论动物在何处被放于水中)，以便于评定记忆强度(为此，在移去平台时进行测试)。

研究了本发明的复合药物组合物在患有莨菪碱健忘症(Scopolamineamnesia)的大鼠中的影响，所述组合物包含极低剂量(ULD)的活性强化形式的经抗原亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)以及抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)，其通过对贮存储备液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍得到，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200(ULD抗S100+抗eNOS)。

在ULD抗S100+抗eNOS药物对患有莨菪碱健忘症的大鼠(阿尔茨海默病的模型)的效力的研究中，使用了48只Rj:Wistar(Han)系雄性大鼠(重180-280g)。在4天内，向所述大鼠皮下注射生理盐水(n＝12，正常的(intact))或剂量为0.5mg/kg的莨菪碱(n＝36)(莨菪碱诱导的健忘症)。患有莨菪碱诱导的健忘症的大鼠被分为三组，并胃内给予蒸馏水(7.5ml/kg，n＝12，对照组1)、或ULD抗S100(7.5ml/kg，n＝12，组2)或ULD抗S100+抗eNOS(7.5ml/kg，n＝12，组3)9天(注射莨菪碱前4天，莨菪碱背景下4天以及最后一次莨菪碱注射后1天)。

Morris水迷宫中的训练在注射莨菪碱的4天内，在测试药物注射60分钟后，以及莨菪碱给药30分钟后进行(4次序贯测试(sequential tests)，相隔60秒)。Morris迷宫为圆形容器(直径150cm，高45cm)，以水填充至30cm处(26-28℃)。在距容器边缘18cm处有隐藏平台(直径15cm)，埋于水位以下1.5cm处。通过加入非毒性染料(例如，奶粉)制成的浑水使得平台不可见。对于每一测试，将动物于初始点之一放入迷宫，所述初始点与隐藏平台距离相等，并且允许动物找到平台。如果动物在120秒内无法找到平台，则将动物置于平台上，放置60秒，并重启测试。在四次随机顺序的测试期间，动物从各起点开始通过迷宫两次。测试记录于录像带上并随后分析各实验中用于寻找平台的距离以及寻找平台的潜伏期。在第5天进行如下测试：从迷宫中移去平台，并给予大鼠60秒的自由浮动。记录花费在平台曾在之处的时间。

给予莨菪碱显著恶化了动物的学***台上的时间和动物寻找平台游泳的距离显著增加(表2及表3)。所述测试显示对照组中动物的记忆恶化：与正常动物相比，这一组中动物在平台曾经位于的地方花费时间更少(表4)。给予ULD抗S100并不导致研究参数的改善(表2、表3、表4)。给予ULD抗S100+抗eNOS导致学***台寻找时间的潜伏期(表2)和覆盖距离(表3)缩短，并导致反映为在平台曾经位于的地方花费时间增加的记忆改善(表4)。

表2.平台寻找的潜伏期，秒

^＊＊＊-与正常组的差异具有显著性，p＜0.05

表3.寻找平台需要的距离，cm

^＊＊＊-与正常组的差异具有显著性，p＜0.05

表4.花费在平台曾在处的时间，秒

^＊＊＊与正常组的差异具有显著性，p＜0.05

因此，在阿尔茨海默病的模型中，给予复合ULD抗S100+抗eNOS与给予ULD抗S100和媒介物(vehicle)相比更为有效。

实施例3

对极低剂量(ULD)的活性强化形式的经抗原亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)以及抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)在大鼠中治疗由前额叶脑皮质光栓(prefrontal cerebrocorticalphotothrombosis)导致的缺血性中风进行了临床前研究，所述活性强化形式抗体通过对初始基质溶液(浓度：2.5mg/ml)进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(比例为1∶1)(ULD抗S100+抗eNOS)。

急性脑血管疾病(脑中风)在发达国家的致命病因中排名第三，并且是人类残疾的主要原因之一(Gusev E.I.，2003；Janardhan V.，QureshiA.I.，2004)。

光诱导的血栓形成模型符合局灶脑缺血(focal cerebral ischemia)实验模型的几乎所有要求。由Watson(Watson B.等，1985)建立的方法基于波长为560nm的光对引入血流中的光敏色素孟加拉玫瑰红(Bengalrose)的作用。产生活性氧形式，使得内皮细胞和血小板粘性增加，并形成凝块闭塞血管腔。通过光诱导的血栓形成诱导缺血脑损伤的方法在技术上是简单的，并接近缺血性脑中风的临床形式。这一模型的很大优点在于它是非侵入性的，即不需要穿颅术(craniotomy)，并因此更精确地复制脑血栓形成的临床表现。

将37只雄性Wistar大鼠(重：150-180g；年龄：2-3个月)用于如下研究：ULD抗S100+抗eNOS在患有由前额叶脑皮质光栓导致的缺血性中风的大鼠中的作用。通过光化学血栓形成方法诱导大鼠前额叶脑皮质的双侧局灶缺血性损伤，所述方法由Waston(Watson B.D.等，1985)建立并由I.V.Viktorov(Romanova G.A.等，1998)改进。将孟加拉玫瑰红(3％溶液)注射入麻醉大鼠的颈静脉(n＝37)(麻醉：水合氯醛300mg/kg，腹腔内)。使用光纤束(直径3cm)将光束从卤素灯(24V，250W)传导至左右大脑半球前额皮质(frontal cortex)上方的颅骨表面以诱导光栓。假手术(sham-operated)的大鼠(n＝6)以同样程序操作，只是并不给予孟加拉玫瑰红，也不暴露于卤素灯光。正常组包括6只大鼠。

在诱导中风5天以前和9天以后，给予患有光栓的大鼠以下制剂：蒸馏水(对照-光栓组，每天5ml/kg，n＝12)、ULD抗S100(每天5ml/kg，n＝7)或ULD抗S100+抗eNOS(每天5ml/kg，n＝6)。在手术(或假手术)后第8天，进行条件被动回避反射(CPAR)测试，以评价大鼠的学习能力和记忆。将大鼠置于由照明点和相连的暗箱组成的装置中，所述暗箱中动物被施加0.45mA的足底电击(electric foot-shock)，因此通常优先选择的暗箱变得危险。在第二天测试条件被动回避反射的发展。而且，将大鼠置于照明箱中。记录首次进入暗箱的潜伏期。如果大鼠长期避免进入暗箱，则得出如下结论：该大鼠记得所述危险(电击)。进入暗箱的潜伏期越长，记忆就越好。

在第9天，从形态学上评价部分实验组大鼠的中风损伤体积(volumeof the stroke lesion)。

在对照大鼠中，光栓致使形成大量中风区域，并因此导致记忆削弱：CPAR再现与正常大鼠相比恶化了9.6％，与假手术大鼠相比恶化了22.9％(表5)。与对照-光栓组相比，给予ULD抗S100减少了42.2％的中风体积，并改善了14.0％的记忆。与对照-光栓组相比，给予ULD抗S100+抗eNOS更为有效：中风体积减少了44.0％，条件反射再现提高了33.4％。

因此，与单一组分制剂ULD抗S100相比，给予ULD抗S100+抗eNOS复合制剂更为有效。

表5

实施例4

将组合物在高血压模型的SHR大鼠中进行了研究，所述组合物为“活性”强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)以及活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的组合物。

将溶液形式的组合物在高血压模型的SHR大鼠中进行了研究，所述组合物为“活性”强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)以及活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的组合物。对40只患有高血压的SHR系雄性大鼠(重350±50g，年龄4.5-5个月)进行研究，所述大鼠被分成4组，每组各10只动物。

在28天内，将动物作以下处理。组1：2.5ml/kg的活性强化形式的抗人血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(水稀释液C12、C30和C200的混合物)伴以2.5ml/kg的蒸馏水；组2：2.5ml/kg的活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(水稀释液C12、C30和C200的混合物)伴以2.5ml/kg的蒸馏水；组3：5ml/kg的复合药物组合物(各组分的水稀释液C12、C30和C200的混合物)；以及组4：5ml/kg的蒸馏水。

每周一次以及最后一次给予药物9小时后，借助于尾动脉间接法(使用细带(cuff))测量醒着的大鼠的收缩压(SBP)。

全部测试组合物都显示具有降压效果(p＜0.05)：在第28天，与初始水平相比，组1中的收缩压(SBP)降低了20.6％；组2中降低了14.4％；组3中降低了27.6％。在对照组4中，SBP与初始值相比变化为1.6％。这些结果显示出复合药物组合物具有明显的协同降压作用。

实施例5

将组合物在高血压模型中的NISAG大鼠中进行了研究，所述组合物为活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)以及活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的组合物。

将溶液形式的组合物在高血压模型中的NISAG大鼠中进行了研究，所述组合物为活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)以及活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的组合物。对50只患有遗传性应激敏感动脉高血压(hereditarystipulated stress-sensitive arterial hypertension)的NISAG系雄性大鼠(重300g，年龄4个月)进行研究，所述大鼠被分成5组，每组各10只动物。

在28天内，通过口服，每天一次，向动物给予以下药物：组1：2.5ml/kg的活性强化形式的抗人血管紧张素II AT1受体C-末端片段抗体(稀释液C12、C30和C200的混合物)伴以2.5ml/kg的蒸馏水；组2：2.5ml/kg的活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(稀释液C12、C30和C200的混合物)伴以2.5ml/kg的蒸馏水；组3：5ml/kg的复合药物组合物(各组分的顺势疗法水稀释液C12、C30和C200的混合物)；组4：5ml/kg(10ml/kg剂量)的对比药物(losartan，氯沙坦)；以及组5：5ml/kg的蒸馏水。

每周两次、在给予ULD抗体和氯沙坦后2-6小时，通过尾动脉间接法(使用细带)对收缩压(SBP)进行测量。表6显示通过间接法测得的NISAG系大鼠中收缩压的变化动态(dynamics)。

表6

实施例6

实验研究对极低剂量的经抗原亲和纯化的抗胰岛素受体β亚基C-末端片段抗体(ULD抗IR)、极低剂量的经抗原亲和纯化的抗内皮NO合酶抗体(ULD抗eNOS)、以及极低剂量的抗胰岛素受体β亚基C-末端片段抗体和极低剂量的抗内皮NO合酶抗体复合物(ULD抗IR+ULD抗eNOS)的效果进行了研究，所述ULD抗IR通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)得到，所述ULD抗eNOS通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)得到。

在研究中，使用了150只雄性Wistar大鼠(研究开始时重250-300g，年龄3.5-4个月)。10只大鼠为正常的。对其余大鼠以50mg/kg的剂量进行链脲佐菌素静脉注射(糖尿病实验模型)。注射链脲佐菌素72小时后，选择血浆葡萄糖水平不低于12mmol/l的大鼠，分成7组(每组各20只大鼠)，在21天内根据如下方式分别给予各制剂：蒸馏水(5ml/kg/天，每天一次，胃内给药)、胰岛素

(8单位/kg/天，皮下给药)、罗格列酮(Rosiglitazone)

(8mg/kg/天，每天两次，胃内给药)、ULD抗IR(5ml/kg/天的量中，2.5ml/kg/天，每天一次，胃内给药)、ULD抗IR+ULD抗eNOS(5ml/kg/天，每天一次，胃内给药)、以及罗格列酮和胰岛素

共同给药、或ULD抗IR+ULD抗eNOS与胰岛素

正常大鼠接受同样体积的蒸馏水。在大鼠注射制剂第7天、第14天和第21天时，利用“葡萄糖FKD”试剂盒(俄罗斯)，以酶法(葡萄糖氧化酶法)对空腹血浆葡萄糖水平进行测量。

在研究第14天(给予制剂的第14天)，根据标准方法(Du Vigneaud和Karr，1925)进行口服葡萄糖耐量测试(OGTT)。使大鼠断水18小时。测试前60min最终给予其测试物质。正常大鼠接受同样体积的蒸馏水。通过口服50％w/w葡萄糖水溶液(1g/kg大鼠重量)的方式给予葡萄糖。使用“葡萄糖FKD”试剂盒(OOO“Pharamaceutical and clinicaldiagnostics”，俄罗斯，www.fkd.ru)对尾静脉血样中的血清葡萄糖进行测量，所述测量在0、30、60、90、120min时进行。计算了血糖浓度对时间的平均曲线下面积(AUC)。

注射链脲佐菌素导致大鼠的血浆葡萄糖浓度与正常动物相比显著增长(18mmol/l对3.5mmol/l，p＜0.05)。在ULD抗IR组中，在注射制剂的第7、14、21天，葡萄糖水平与对照组相比平均降低了22％-28％；然而，差异并未达到统计显著性水平。ULD抗IR与ULD抗eNOS复合物更为有效：葡萄糖水平在实验的第14天和第21天各自下降了47％和42％(与对照组相比p＜0.05)。参考制剂罗格列酮同样在实验的第14天和第21天降低了葡萄糖水平；然而，效果仅在实验第14天达到了统计显著性(36％，与对照组相比p＜0.05)。

注射有效剂量(初步研究中选定)的1/2的胰岛素在全部观察期间最有效地降低了葡萄糖水平(降至正常对照组水平)(图1)。应该纳入考虑的是，在研究中使用了短效胰岛素制剂，并且在其注射后1小时对血浆葡萄糖进行测量，这也影响了1/2胰岛素剂量对血糖水平的效果。鉴于这一背景，不能完全确定联合使用胰岛素和罗格列酮或胰岛素和ULD抗IR+抗eNOS复合物的效果如何。

葡萄糖耐受失调(Glucose tolerance disturbance)(机体对葡萄糖的利用降低)是诊断和治疗糖尿病最重要的指标之一。在正常动物中，在口服葡萄糖耐量测试中(注射制剂第14天)，单独给药时，复合制剂ULD抗IR+ULD抗eNOS和胰岛素最有效地增强了葡萄糖耐量。罗格列酮也降低了浓度对时间曲线下面积(增强了葡萄糖耐量)；然而，其效力与对照组相比并无统计显著性(图2)。

实施例7

实验研究对极低剂量的经抗原亲和纯化的抗胰岛素受体β亚基C-末端片段抗体(ULD抗IR)、极低剂量的经抗原亲和纯化的抗内皮NO合酶抗体(ULD抗eNOS)以及极低剂量的抗胰岛素受体β亚基C-末端片段抗体和极低剂量的抗内皮NO合酶抗体复合物(ULD抗IR+ULD抗eNOS)的效果进行了研究，所述ULD抗IR通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)得到，所述ULD抗eNOS通过对初始基质溶液进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)得到。

在研究中，使用了36只雄性Goto-Kakizaki大鼠(研究开始时重250-280g，年龄10-12周)。这一品系的大鼠特征在于自发性非胰岛素依赖型糖尿病。动物被分为3组(各12只大鼠)并在28天内接受如下制剂：蒸馏水(5ml/kg，每天一次，胃内给药)、或ULD抗IR(2.5ml/kg，每天一次，胃内给药)、或ULD抗IR+ULD抗eNOS(5ml/kg，每天一次，胃内给药)。借助于葡萄糖分析器(Beckman，Fullerton，California，美国)，在开始注射制剂前、以及注射制剂的第4、8、12、16、20、24、28天时对血浆葡萄糖水平进行测量。在第28天，进行葡萄糖耐量测试(葡萄糖p.o.，1g/kg)。

注射ULD抗IR导致大鼠血浆葡萄糖水平显著(p＜0.05)下降；然而，使用ULD抗IR+ULD抗eNOS复合物更为有效(与对照组相比p＜0.001)(图3)。

所述结果由注射制剂28天时进行的葡萄糖耐量测试数据得以证实(图4)。注射ULD抗IR导致葡萄糖耐量提高(与对照组相比，AUC降低了44％，非统计显著性)。同时，由注射ULD抗IR+ULD抗eNOS复合物引起的这一参数(AUC)的降低为62％，且其与对照组相比为统计显著性的(p＜0.05)。

实施例8

使用了以下制剂：以水-醇溶液浸渍的300mg片剂(3mg/片)，所述水-醇溶液为活性强化形式的经抗原纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体的水-醇溶液，所述抗体处于极低剂量(ULD抗S100)，通过对初始溶液(浓度为2.5mg/ml)进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物；以含有药物组合物的水-醇溶液浸渍的300mg片剂(6mg/片)，所述水-醇溶液为活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)以及抗eNOS多克隆抗体(抗eNOS)的水-醇溶液，所述抗体处于极低剂量(ULD)，通过对初始溶液(浓度为2.5mg/ml)进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(ULD抗S100+ULD抗eNOS)；以水-醇溶液浸渍的300mg片剂(3mg/片)，所述水-醇溶液为活性强化形式的经抗原纯化的兔抗eNOS多克隆抗体，所述抗体处于极低剂量(ULD抗eNOS)，通过对初始溶液(浓度为2.5mg/ml)进行超级稀释(100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍)获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物；以及作为安慰剂的300mg片剂，该片剂含有赋形剂：267mg乳糖(乳糖一水合物)、30mg微晶纤维素、3mg硬脂酸镁。

在晕动病(kinetosis)模型或运动疾病/运动病(motion diseases/motionsickness)(由多种前庭植物性障碍引起)中，对研究药物治疗头晕(眩晕)以及其它运动病症状的效果进行评价。头晕是前庭分析器(vestibularanalyzer)损伤的典型迹象，所述损伤有多种起源，包括前庭神经和耳蜗***的机能障碍、椎基底***的循环障碍、中枢神经***(CNS)的病理等。头晕作为晕动病的表现，伴有其它前庭植物性障碍，包括三种类型的反应：前庭-运动反应(眼球震颤(nystagmus)以及偏斜反应(reactionof deviation))、前庭-感觉反应(除头晕以外，眼球震颤(或旋转后反应)、防御性动作)以及植物性反应(恶心、呕吐、流汗、心悸、热感以及脉搏和血压波动)。

为了测试各种组合物的抗运动病性能，在平行组中进行双盲安慰剂对照(Double blind placebo controlled)的比较研究，所述组由15名身体健康的受试者组成：具有轻度(n＝5；33％)或中度(n＝10；67％)运动病抵抗力的、年龄为15-60岁(平均年龄33.3±0.75岁)的男性和女性。向组1给予ULD抗S100+抗eNOS、组2给予ULD抗S100、组3给予抗eNOS。

为了模拟运动病的状况并评价研究药物的效果，使用了最合适也最受认可的晕动病模型-以连续累积效应的Coriolis加速度(continuouscumulative effect of accelerations by Coriolis，CCEAC)进行测试。所有研究受试者对CCEAC测试的初始耐受性不超过5分钟。使用多种诊断方法对由动力学效应(kinetic effect)(CCEAC)引起的前庭植物性障碍进行记录，所述诊断方法包括受试者的检查、前庭植物性障碍敏感度的定量评价(Halle量表)、心率变异性(HRV)分析、以及机能状况(WBAM-幸福感(well-being)、活跃性(activity)和情绪(mood))的自我评价。作为所进行的治疗的效力标准，对动力学效应的耐受性和回复期程度的动态进行了评价，并评价了感觉-运动反应(眼球震颤)指标迹象、HRV指标(利用Biocom Wellness扫描***，由AWS、LLC根据欧洲心脏病专家协会和北美电生理学协会的国际标准开发)和WBAM数据的变化。安全标准为治疗期间内与摄入药物有关的可能的副作用(AE)出现的特征、迹象和期限(term)；研究药物对中枢神经***(CNS)功能的特征性指标(运动目标的反应(RMO))、简单运动的反应时间(TSMR)的影响；身体和功能因素的动态(心率(HR)、收缩压和舒张压(SBP，DBP)、Stange测试；运动耐受性(exercise tolerance)(Harvard台阶测试(step-test)的指标))。在利用ULD抗S100和ULD抗eNOS复合物进行单剂量给药后、以及进行7天时程给药(course administration)后评价安全性。

所有受试者在参与研究前的一个月内未摄入任何药物。在对受试者进行筛选之后，将其随机分入4个组内(组1：ULD抗S100+抗eNOS；组2：ULD抗S100；组3：ULD抗eNOS；以及组4：安慰剂)。

在研究第1天(访问1)时，对受试者的初始功能和心理-生理状态进行记录，随后给予受试者5片相应的ULD抗体片剂，并随后给予CCEAC测试。对测试持续时间进行记录；借助于多种诊断检查对涉及运动病的AE和前庭植物性障碍进行检测。在接下来的2-6天内，每天给予受试者1片规定的药物片剂三次。在第7天(访问2)时，给予受试者与第1天(访问1)相同的剂量。在CCEAC测试之前和之后进行多种诊断研究。所述研究以这样一种方式进行：研究组只对一个受试者进行工作。所述研究平行地在上半天进行，通常为每天4人参与，各人给予药物或安慰剂。之后三周为清洗期(washout period)，在清洗期结束时，依照规定向各组中的受试者给予新的药物或安慰剂；重复研究周期(访问1、药物的时程摄取；访问2)。因此，在研究中每个受试者参与4个研究周期。亦即，参与每个组的各受试者在各周期之间具有三周的清洗期。这就允许了研究者拉平(level)测试人的个体特性对治疗效果的影响。根据研究方案，对完成了摄取研究药物全部过程的所有测试受试者(n＝15)的数据进行了药物效力分析。

在单天摄取研究药物的背景下，动力学效应(CCEAC)后的运动病症状的迹象因素(evidence factors)(眩晕、恶心、无活跃性、皮肤苍白、出汗等等)表明，所有研究受试者都出现了大致相同的运动病状态，而由医师-研究者根据Halle量表评定的植物性机能障碍的症状迹象在所有组中都不具有显著性差异(表7，访问1)。然而，产生相似运动病症状的动力学效应在四个组中并不相同，并依赖于研究受试者所摄取的药物(表8，访问1)。ULD抗S100+抗eNOS制剂的1天摄入导致最明显的抗运动病效果，其表现为：不仅在CCEAC测试中耐受时间显著更长(104.10±13.14秒；相比而言，ULD抗S100组为68.50±6.57秒；ULD抗eNOS组为75.00±6.79秒；安慰剂组为61.30±3.15秒)；而且眼球震颤时间最短(分别为9.90±1.20秒、13.50±1.51秒、16.10±1.68秒以及13.30±1.12秒)；以及快速回复最大(分别为96.90±13.54秒、194.20±18.45秒、202.50±21.72秒以及241.70±38.41秒)。

在接受一段时程的药物后的访问2中记录了大致相似的指标。为了达到与运动病相似的症状(表7，访问2)，将最长的动力学效应时间施加于已接受ULD抗S100+抗eNOS组合物(表8，访问2)7天的受试者。ULD抗S100+抗eNOS组合物最为明显的抗运动病效果表现为眼球震颤时间(9.50±1.38秒，p＜0.01)和回复期持续时间(117.90±15.65秒；p＜0.01)的显著缩短。与安慰剂组相比，单一组分制剂ULD抗S100的抗运动病作用表现为如下指标更好：CCEAC测试耐受性、眼球震颤时间以及回复时间(表8，访问1和访问2)，然而ULD抗S100的效力次于ULD抗S100+抗eNOS组合物。由于CCEAC测试和后续回复期的结果与安慰剂组相比不具有显著性差异，单一组分制剂ULD抗eNOS并未显示出抗运动病效果(表8，访问1和访问2)。对摄取药物1天的ULD抗S100+抗eNOS组和ULD抗S100组的CCEAC测试指标所进行的比较分析显示，ULD抗eNOS的加入使得对动力学效应的耐受性提高了52％、眼球震颤时间降低了27％、并且使得动力学效应结束后的回复期缩短了50％，其中包括头晕持续时间缩短了49％。然而，ULD抗eNOS组分最大的贡献在于将复合制剂(ULD抗S100+抗eNOS组合物)的效果引入了药物的时程摄入中，其表现为：与ULD抗S100组的结果相比，在动力学效应的耐受性和眼球震颤持续时间方面(每一参数中)超出30％。另外，与单一组分制剂ULD抗S100相比，在摄入ULD抗S100+抗eNOS组合物时，在访问2时的效果与访问1的数据相比增加程度更大(所述增加通过CCEAC测试耐受性和眼球震颤持续时间这两个指标的变化表示)，分别为30％和4％的增加(ULD抗S100组则分别为21％和0％)。在评价药物抗运动病性能的效果时，特别注意到药物可能影响自主神经***(ANS)的稳定性，尤其是改变交感神经和副交感神经分***的平衡。由于这一目的，在各访问时，在静止状态下以及进行功能性测试(呼吸和直立测试)时都对HRV参数进行分析。

表7.进行CCEAC测试后依据应用的制剂的Halle量表指标

表8.依据应用的制剂的CCEAC测试的指标动态

注意：

¹使用了Kruskal-Wallis检验以确定组间显著性差异。如果组间的比较显示出p＜0.05的显著性差异，则使用Mann-Whitney检验。

*与安慰剂比较具有显著性差异，p＜0.05；

**与安慰剂比较具有显著性差异，p＜0.01；

***与安慰剂比较具有显著性差异，p＜0.001。

^×与ULD抗S100+抗eNOS比较具有显著性差异，p＜0.05；

^××与ULD抗S100+抗eNOS比较具有显著性差异，p＜0.01；

^×××与ULD抗S100+抗eNOS比较具有显著性差异，p＜0.001。

在CCEAC测试之前与之后，静止状态下(坐姿)的HRV分析(表9)检出在接受研究药物的受试者中具有SDNN增强的倾向，表明由于副交感神经对心脏节奏的影响，导致心率变异性增加。在所有治疗组中，作为对动力学效应的响应，表征自主调节的副交感神经组件的活性的RMS-SD值增大。在接受ULD抗S100+抗eNOS组合物以及ULD抗S100的组中，显示HF增加，同样表明自主平衡向副交感神经链的移动。因此，在所有组中进行CCEAC测试后，副交感神经对心率的影响都有所提升。

表9.实验参与者在动力学行为前后静止时的HRV参数

注意：*与安慰剂比较具有显著性差异，p≤0.05；

#与基线参数比较具有显著性差异，p≤0.05。

对处于过渡态(transition states)的HRV进行的分析显示，与ULD抗S100和安慰剂相比，ULD抗S100+抗eNOS组合物的1天摄入增加了反应时间(13.9±1.14；p≤0.05)和稳定时间(24.2±1.28；p≤0.05)。相同因素超出了安慰剂组的值与在动力学效应后的值，这证明了联合用药在ANS的反应性方面具有积极作用(对躯***置变化的耐受性增强)。在呼吸测试中，最高心率和最低心率之间最小的差异证实了ANS的两个分***在接受一天的ULD抗S100+抗eNOS组合物后获得更好的平衡(25.1±2.66心跳/min，p≤0.05)。在一周的时程治疗结束时，在接受ULD抗S100+抗eNOS组合物的组中，同样注意到CCEAC测试(直立测试和呼吸测试)后ANS平衡的稳定效应(表10和表11)。

表10.动力学行为前后进行的直立测试中研究参与者的HRV参数

注意：*与安慰剂比较具有显著性差异，p≤0.05；

×与ULD抗S100比较具有显著性差异，p≤0.05。

表11.动力学行为前后进行的呼吸测试中研究参与者的HRV参数

注意：*与安慰剂比较具有显著性差异，p≤0.05

由研究参与者所进行的受试者机能状态(幸福感、活跃性和情绪)的自我评价结果显示所有组中的受试者对于每一参数都给出了“平均”得分(表12)，所述自我评价由研究参与者在治疗开始和结束时、在运动病模拟(CCEAC测试)后进行。因此，在药物摄入的背景下，CCEAC耐受性是满意的。与安慰剂组的数据相比，在摄入第7天结束时，在ULD抗S100+抗eNOS组合物组中观测到最高的增长率(高于10％)。

表12.研究参与者机能状况(幸福感-活跃性-情绪)的自我评价参数动态

安全性分析包括源自所有参与研究的受试者的数据。在观察期间注意到对研究制剂具有良好的耐受性。并未鉴定出与给药相关的副作用。各研究组中的所有受试者都完成了研究方案指定期限内的治疗；没有人提前退出。

根据身体检查(包括心率、收缩压和舒张压的指标)的结果，以及根据Harvard台阶测试数据，所述受试者在研究期间并未记录到任何反常(表13)。所有检测到的变化都不超过正常范围。这种情况下，所有受试者都在主观上报告满意的幸福感。

表13.动力学行为前后研究参与者的身体参数和运动耐受性的动态

除血液动力学参数以外，为了评估研究药物的安全性及对中枢神经***可能的消极影响，在受试者中对以下生理参数进行检查：RMO(运动目标反应)、SMRT(简单运动反应时间)、RA(注意范围(range ofattention))、注意广度(attention span，AS)以及注意力稳定系数(ASF)。此外，进行了Stange测试以评价缺氧耐受性。

根据得到的结果(表14)，1天摄入或时程摄入对于所评估的参数都不具有显著性影响。两次访问时，在CCEAC测试前后，感觉运动协调(SMRT，RMO)与安慰剂组的结果相比都没有区别。对于注意力的量和稳定性这类复杂功能的研究数据显示在CCEAC测试前后，研究药物都未改变集中程度，并且注意力的改变与安慰剂组相比没有区别。

闭气标准运动测试的分析显示受试者的缺氧耐受性具有增强的倾向(表14)。在屏住呼吸时，摄入所有研究药物后Stange测试的持续时间都延长了。然而，只有ULD抗S100+抗eNOS复合组合物的摄入才在动力学效应后显示出显著较长的闭气时间(基线处68.1±18.8秒以及CCEAC测试后91.7±27.4秒；p＜0.05)。在使用Gench测试(Stange测试)(呼气时闭气，p＞0.05)时，同样注意到了缺氧耐受性的增强。

表14.动力学行为前后研究参与者心理-生理状态参数的动态

因此，使用实验性运动病的研究证明了ULD抗S100+抗eNOS复合组合物和单一组分制剂ULD抗S100的效力。研究药物增强了受试者在模拟运动病的临床和生理效果后对动力学效应的稳定性，使得受试者的运动病表现为更为轻微的临床进展、并使受试者在治疗停止后更快恢复。此外，表明复合组合物(ULD抗S100+抗eNOS组合物)的抗运动病效果提高了单一组分的效力。在实验性运动病中，ULD抗S100+抗eNOS复合组合物在控制机体的前庭自主性和感觉反应中的效果在时程摄入中有所增强。应当注意到单一制剂形式的ULD抗eNOS对运动病不具有保护效果，然而当与ULD抗S100联合时能显著提高后者抗运动病的效果，这在药物的1天摄入和短时程摄入中得以证实。在ULD抗S100+抗eNOS组合物中，观测到在调节影响ANS的副交感神经和交感神经部分的反应性以及ANS在运动病状态下的适应能力(增强对躯***置突然变化的耐受性)的瞬时过程(transient processes)方面最好的能力，这也是药物抗运动病性能的重要部分。在用作抗运动病的制剂时，包括执行操作功能(operator function)时，ULD抗S100+抗eNOS组合物和ULD抗S100单一组分制剂是安全的，且对身体和心理-生理参数没有不利影响。

ULD抗S100+抗eNOS复合组合物以及ULD抗S100可推荐用于在具有轻度和中度稳定性的人中预防和缓解运动疾病中的晕动病(包括晕船、晕机和晕车)。所述复合组合物安全性高，并对职业活动的质量没有副作用。

实施例9

为了对本申请的复合药物组合物用于治疗精神器质性综合症(psychoorganic syndrome)的性能进行研究，使用了重300mg的片剂。所述片剂以包含药物组合物的水-醇溶液浸渍(6mg/片)，所述水-醇溶液为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)和抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)的水-醇溶液，其通过将初始溶液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(“ULD抗S100+抗eNOS”)。

对照组患者接受300mg以包含药物组合物的水-醇溶液浸渍的片剂(6mg/片)，所述水-醇溶液为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)的水-醇溶液，其通过将初始溶液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍获得。

该研究包括被诊断患有外伤引发的精神器质性综合症的患者。精神器质性综合症的特征在于以下三联征(triad)：记忆薄弱、智力下降(loopof intelligence)和情感失控(Walther Buel三联征)。

研究为开放标签随机比较平行组临床试验，测试对患有外伤引发的精神器质性综合症的患者的治疗效力和安全性(第一组患者摄入ULD抗S100制剂，第二组患者摄入ULD抗S100+抗eNOS制剂)。

研究包括6名诊断患有精神器质性综合症的、年龄为35岁-90岁的患者(平均年龄70.83±21.95岁)。

遵循下列纳入和排除标准对患者依从性进行了核查：

纳入标准：

1.由病史、神经学检查和医疗记录确认的诊断患有具有精神器质性综合症的外伤性脑病或者患有具有精神器质性综合症的复杂病因的脑病(血管性和外伤性)的患者。

2.在访问1前至少一个月内伴随治疗(concomitant therapy)无变化的患者。

3.在整个观察期内伴随治疗无需变化。

4.在接下来的6个月内不需要免疫调节药物处方。

5.具有足以与研究者和研究协调者充分交流的教育水平的患者。

6.由研究者评价为可靠并做好准备执行在方案中规定的所有临床访问、测试和程序的患者。

7.拥有有效家庭地址的患者。

排除标准：

1.在病史中有任何脑外科手术。

2.急性心肌梗死。

3.出血性中风。

4.在病史中诊断患有精神病、双相障碍或***情感性障碍。

5.根据简明国际神经精神访谈(MINI)的抑郁症模块中的标准的重度抑郁障碍。

6.在研究者看来可能影响研究中的患者的测试结果的医学因素/状况或其它特征。

7.在Beck抑郁问卷中第“I”节答案为“2A”、“2B”、“2C”或“3”(具备某种实施意向而不具备具体计划的活跃的***观念，或者具备具体计划和意向的活跃的***观念)。

8.病史中有自身免疫性疾病。

9.肝急性损伤或严重肝硬化(依Child-Pugh为C类)。

10.未校正的甲状腺机能障碍。

11.病史中有失代偿性动脉高血压。

12.严重的或失代偿性的心血管疾病、肝病、肾病、新陈代谢疾病、呼吸疾病或血液疾病、有症状的外周血管疾病或其它在研究者看来可能影响患者参与研究或可能导致研究期间住院延长或重新入院的医学或精神病学状况。

13.在研究人员看来可能阻止患者参与研究的疾病和状况。

14.在参与研究之前已经摄入包含ULD抗eNOS的药物或包含ULD抗S100的药物。

15.摄入任何类型的抗抑郁药(包括植物性和顺势疗法制剂)。

16.摄入任何类型的抗焦虑药(包括植物性和顺势疗法制剂)。

17.摄入免疫调节剂(包括植物性和顺势疗法制剂)。

18.访问0前1个月内接受过全身类固醇治疗。

19.在参与包含ULD抗eNOS的药物或包含ULD抗S100的药物的研究中，若患者摄入至少一剂量制剂。

20.在加入这一研究之前1个月内参与过其它临床研究。

21.在研究期间及最后一次摄入研究药物后1个月内妊娠、哺乳、不能充分避孕。

22.对任何药物组分存在过敏/不耐性，包括乳糖不耐。

23.患者摄入***和安定药、患有乙醇依赖或精神疾病。

24.患者为直接涉及所进行的研究的中心的职员、和/或患者为与所进行的研究直接相关的研究中心职员的家庭成员。所述“家庭成员”为丈夫(妻子)、父母、子女和兄弟(姐妹)。

25.在研究者看来参与试验或可能收取赔偿或者参与司法程序。

在对符合上述纳入和排除标准的患者进行确定之后，将所述患者随机分入两个研究组：接受ULD抗S100的患者组(3名患者，女性为33.33％，男性为66.66％，平均年龄为71.33±16.25岁)；以及接受ULD抗S100+抗eNOS的患者组(3名患者，女性为66.66％，男性为33.33％，平均年龄为70.33±30.66岁)。

在这一研究过程中进行了5次访问，治疗阶段从访问1持续至访问4，平均耗时84±5天。访问4(第84±5天)为研究的第一终点，之后还有追踪观察。追踪阶段从访问4持续至访问5(平均168±5天)。

在安全性分析中，包括了所有参与研究的患者(n＝6)的数据。在研究过程中记录了药物良好的耐受性。没有记录到副作用。所有研究组的患者都完成了根据方案的治疗；无人中途退出。

评价了ULD抗S100+抗eNOS制剂对如下方面的效果：精神器质性综合症的主要临床迹象和症状(NPI神经精神调查表，强度部分(intensitysection))、护理患者的人员伴随的痛苦的强度(NPI神经精神调查表，痛苦部分(distress section))以及患者认知功能(简易精神状态检查表，MMSE)。在访问4时，在精神器质性综合症的关键症状中发现了改善，例如NPI神经精神调查表的强度部分存在统计显著性降低(由91.0±15.13降至69.0±6.24，p＜0.05)、NPI神经精神调查表的痛苦部分分数减少(由44.33±17.78降至36.33±3.21，p＜0.05)(表15)。

在仅接受ULD抗S100的患者组中并未记录到临床上的改善。

而且，治疗结束时，患者组之间在NPI神经精神调查表强度部分的总分数上的差异是统计显著性的，p＜0.05。

表15.

*-与基线比较p＜0.05；#-与对照比较p＜0.05

因此，在进行的临床研究中观测到ULD抗S100+抗eNOS复合药物组合物对精神器质性综合症的主要临床迹象和症状具有积极效果，并倾向于影响精神器质性综合症的认知功能。另外还证实了具有好的药物耐受性。并未记录到与药物相关的副作用。

实施例10

为了对本申请的复合药物组合物用于治疗阿尔茨海默病的性能进行研究，使用了重300mg的片剂。所述片剂以包含药物组合物的水-醇溶液浸渍(6mg/片)，所述水-醇溶液为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)和抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)的水-醇溶液，其通过将初始溶液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(比例为1∶1)(“ULD抗S100+抗eNOS”)。

对照组患者接受300mg以包含药物组合物的水-醇溶液浸渍的片剂(3mg/片)，所述水-醇溶液为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)的水-醇溶液，其通过将初始溶液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物。

该研究包括被诊断患有阿尔茨海默病的患者。阿尔茨海默病的特征在于痴呆(获得性痴呆、认知活跃性的稳定损害伴以先前获得的知识和实际技能一定程度的损失、难以或不能获取新知识)。

研究为开放标签随机比较临床试验，在2个平行组(ULD抗S100制剂和ULD抗S100+抗eNOS制剂)中测试对患有轻度至中度阿尔茨海默病的患者的治疗效力和安全性。

研究包括6名诊断患有轻度至中度阿尔茨海默病的、年龄为55-64岁的患者(平均年龄59.0±3.58岁)，。

遵循下列纳入和排除标准对患者依从性进行了核查：

纳入标准如下：

1.由病史、神经学检查和医疗记录确认的患有轻度至中度阿尔茨海默病的患者。

2.在访问1前至少一个月内伴随治疗无变化的患者。

3.在整个观察期内伴随治疗无需变化。

4.在接下来的6个月内不需要免疫调节药物处方。

7.拥有有效家庭地址的患者。

排除标准如下：

1.在病史中有任何脑外科手术。

2.急性心肌梗死。

3.出血性中风。

4.在病史中诊断患有精神病、双相障碍或***情感性障碍。

8.病史中有自身免疫性疾病。

9.肝急性损伤或严重肝硬化(依Child-Pugh为C类)。

10.未校正的甲状腺机能障碍。

11.病史中有失代偿性动脉高血压。

13.在研究人员看来可能阻止患者参与研究的疾病或状况。

15.摄入任何类型的抗抑郁药(包括植物性和顺势疗法制剂)。

16.摄入任何类型的抗焦虑药(包括植物性和顺势疗法制剂)。

17.摄入免疫调节剂(包括植物性和顺势疗法制剂)。

18.访问0前1个月内接受过全身类固醇治疗。

20.在加入这一研究之前1个月内参与过其它临床研究。

22.对任何药物组分存在过敏/不耐性，包括乳糖不耐。

23.患者摄入***和安定药、患有乙醇依赖或精神疾病。

在对符合上述纳入和排除标准的患者进行确定之后，将所述患者随机分入两个研究组：接受ULD抗S100的患者组(3名患者，女性为100％，男性为0％，平均年龄为59.0±3.6岁)以及接受ULD抗S100+抗eNOS的患者组(3名患者，女性为66.66％，男性为33.33％，平均年龄为59.0±4.36岁)。

评价了ULD抗S100+抗eNOS制剂对如下方面的效果：阿尔茨海默病的主要临床迹象和症状(NPI神经精神调查表，强度部分)、护理患者的人员伴随的痛苦的强度(NPI神经精神调查表，痛苦部分)以及患者认知功能(简易精神状态检查表，MMSE)。在访问4时，在阿尔茨海默病的关键症状中发现了改善，例如NPI神经精神调查表的强度部分存在统计显著性降低(由24.33±4.73降至12.0±3.46，p＜0.05)(表16)。

还发现了护理患者的人员痛苦降低的趋势，以及在治疗结束时患者日常生活的活跃性降低的趋势(然而并无任何统计显著性差异，可能是由于参与研究的患者数目较小)。

此外，发现了认知功能改善的趋势，这可以从MMSE分数由23.66±3.21提高至26.66±1.53分证实，然而，所述差异在治疗结束时同样未能达到统计显著性的值，可能也与样本量较小有关。

在接受ULD抗S100的患者组中，在相同终点并未显示出改善倾向，仅有统计非显著性的MMSE分数的改善：由22.66±0.58提高至23.33±0.58分。

而且，治疗结束时，患者组之间在MMSE总分数上的差异是统计显著性的，p＜0.05。

表16.

*-与基线比较p＜0.05；#-与对照比较p＜0.05

因此，在进行的临床研究中观测到ULD抗S100+抗eNOS复合药物组合物对阿尔茨海默病的主要临床迹象和症状具有积极效果，并倾向于影响阿尔茨海默病的认知功能。另外还证实了具有好的药物耐受性。并未记录到与药物相关的副作用。

实施例11

组1-活性药物组：给予300mg以水-醇溶液浸渍的片剂(6mg/片)，所述水-醇溶液为如下物质的水-醇溶液：极低剂量(ULD)的活性强化形式的经抗原纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(抗S100)和抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)(“ULD抗S100+ULD抗eNOS”)，通过对初始溶液(浓度为2.5mg/ml)超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物。

组2-比较组：给予300mg以水-醇溶液浸渍的片剂(3mg/片)，所述水-醇溶液为如下物质的水-醇溶液：极低剂量(ULD)的活性强化形式的经抗原纯化的兔抗脑特异性蛋白S-100多克隆抗体(ULD抗S100)，通过对初始溶液超级稀释100¹²、100³⁰和100⁵⁰倍获得，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C50的混合物。

组3-对照组(安慰剂)：给予300mg含有赋形剂(267mg乳糖一水合物、30mg微晶纤维素以及3mg硬脂酸镁)的片剂。

对活性药物ULD抗S100+抗eNOS在治疗注意力不足过动症(ADHD)患者方面的效果进行比较双盲安慰剂-对照研究，所述研究在146名6-12岁的儿童(平均年龄9.3±0.24岁)中进行，所述儿童随机分入三个进行不同治疗的组。在12周内，组1的患者(n＝46)接受ULD抗S100+抗eNOS组合物，每天两次，每次2片；比较组2的成员(n＝50)接受ULD抗S100，每天两次，每次2片；对照组3的成员(n＝50)每天接受两次，每次2片。研究中包括的所有患者都具有临床上显著的ADHD表现，这在ADHD症状评价量表(ADHDRS-IV-家庭版)的高分数上得到证实：组1中为33.80±0.92；组2中为32.5±1.14；以及组3中为33.6±0.91。多数儿童的特征在于根据CGI-ADHD-严重度问卷的中等严重度的ADHD。这一量表的总分数为：组1中为4.0±0.02分、组2中为4.0±0.03分以及组3中为4.0±0.00分。因此，在起始阶段，三个组的患者具有可比的ADHD严重度指标。根据在研究登记时的神经学、临床-实验室和器械检查的结果，任何患者都未检出异常。在12周的治疗中，患者由医生探访6次。这一过程中，医师-研究者记录了ADHD临床表现的强度动态(ADHDRS-IV-家庭版量表的总分数)以及疾病严重度(基于CGI-ADHD-严重度)，监督处方、给予治疗并评价治疗的安全性。

对12周治疗在三个组中的效果进行的分析显示，在以ULD抗S100+抗eNOS组合物治疗的儿童中，ADHDRS-IV-家庭版量表的总分数与初始分数相比下降超过25％的儿童为75％(n＝36)；这一数值在以ULD抗S100治疗的患者中是66％(n＝33)、在接受安慰剂的儿童中是56％(n＝28)。考虑到状况改善的三个水平梯度(ADHDRS-IV量表总分数与基线相比降低值为＜25％、25-49.9％或≥50％)，将显示出更多详细评价的各组之间的效力差异示于表17中。在摄入ULD抗S100+抗eNOS的组1中注意到，52％的儿童与基线相比总分数降低了50％以上，产生了显著改善；在摄入ULD抗S100的组2中注意到34％的儿童(相比而言，在摄入安慰剂的组3中仅有8％的患者)。

与初始状态相比ADHD临床意义(clinical implications)的显著性降低(p＜0.001)在治疗2周后已在所有三个观测组中发生。在组1和组2的患者中，由于不仅关于筛选(screening)访问，而且当与摄入安慰剂的组3的指标相比时，ADHDRS-IV-家庭版总分数之间的显著性差异已得到认定，因此其中的积极动态更加显著。在随后几周的治疗中，以ULD抗S100+抗eNOS组合物和单一组分制剂ULD抗S100治疗的效力开始增长，在活性药物组中最为显著(p＜0.05)。在摄入ULD抗S100+抗eNOS的组1的儿童中的ADHDRS-IV-家庭版量表总分数降低值为16.5分，在摄入ULD抗S100的组2的患者中为12.4分(相比之下，摄入安慰剂的组3中为6.3分)。作为12周治疗的结果，与基线相比，ADHD临床意义上的强度在以ULD抗S100+抗eNOS组合物治疗的儿童中降低了几乎一半(-48.8％)，而在以ULD抗S100的患者中降低了多于三分之一(-38.2％)。

摄取ULD抗S100+抗eNOS组合物或ULD抗S100影响ADHD的两类症状，这已由ADHDRS-IV-家庭版量表两部分评价的动态证实。另外，与单一制剂ULD抗S100治疗的效果相比，ULD抗S100+抗eNOS组合物的治疗在意义强度(intensity of implications)和注意力不足以及过动/冲动方面的影响程度显著更高。

活性药物ULD抗S100+抗eNOS以及比较药物ULD抗S100的积极治疗效果在ADHD严重度评价量表(CGI-ADHR-严重度)的患者治疗结果评价中显示(表17)。在3个月的治疗后，ULD抗S100+抗eNOS组中几乎四分之一的患者的疾病严重度由中度降至轻度甚至最小限度，这已由CGI-ADHR-严重度量表的平均值下降了15％得以证实(由4.0±0.02降至3.4±0.06；p＜0.001)。以单一制剂ULD抗S100治疗3个月的效果略低，在CGI-ADHR-严重度量表中显示为-10％(相比之下，安慰剂组中为5％)。安全性分析包括了所有参加研究的患者的数据。在整个监测阶段，活性药物ULD抗S100+抗eNOS和比较制剂ULD抗S100都具有可与安慰剂相比的耐受性。在摄入ULD抗S100的组中的一名患者中(头痛，在研究第四周减弱)以及安慰剂组中的一名患者中(梦游，观测第二个月期间)报道了副作用。这些副作用与治疗并无联系。另外，在治疗过程中观察到了一例急性呼吸***疾病，也与治疗无关。研究组中的所有患者都按照研究方案制定的计划完成了治疗；无人提前退出。在患者身体检查和实验室参数的重复分析过程中并无病理变化，这也证实了所研究的治疗的安全性。

根据患者的身体检查结果(心率、SBP、DBP、体温)，治疗期间未记录到任何病理变化。根据访问的分析量表中以及在比较组中的差异并未达到统计显著性，也并未超出生理学的容许偏差(allowable deviation)的限度。高的治疗依从性(adherence to therapy)也进一步表明了研究制剂的有效性和安全性。在治疗第三个月结束时，所述依从性在摄入ULD抗S100+抗eNOS的组1和摄入ULD抗S100的组2中各自为99.8±1.15％和99.8±2.25％(相比之下，摄入安慰剂的组3中为74.6±2.54％)。

因此，研究证明了ULD抗S100+抗eNOS组合物以及单一组分制剂ULD抗S100在治疗患有ADHD的儿童方面的效力和安全性。在12周的过程中，在复合药物(ULD抗S100+抗eNOS)中观测到最显著的治疗效果，这通过大多数(75％)儿童中临床症状的积极动态得以证实。ULD抗S100+抗eNOS组合物对ADHD的两类症状都具有矫正作用，并且因此注意到在ADHD患者中注意力障碍和过动都显著降低。

表17.在12周的治疗结束时ADHDRS-IV-家庭版量表的总分数动态

与安慰剂组比较具有显著性差异：

^##p＜0.01。

表18.ADHDRS-IV-家庭版量表的ADHD临床意义的迹象动态

注意：与基线参数比较具有显著性差异：

*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。

与安慰剂组比较具有显著性差异：

^#p＜0.05，^##p＜0.01，^###p＜0.001。

与ULD抗S100组比较具有显著性差异：

^&p＜0.05。

表19.由CGI-ADHD-严重度量表表示的ADHD严重度水平动态

与基线参数比较具有显著性差异：**p＜0.01，***p＜0.001。

实施例12

在慢性心力衰竭人类患者中对如下制剂进行双盲、安慰剂-对照临床研究，以对CHF病理的关键参数进行评价：活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)与活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的复合物。

在为期6个月的研究中，将80名患者(功能分级(FC)为II-IV级的CHF，左心室射血分数(LVEF)不到40％)4等分为治疗组和对照组。不停止背景治疗(比索洛尔β-阻断剂，ACE抑制剂依那普利，阿司匹林(除非有禁忌)；仍允许利尿剂、硝酸酯/盐和地高辛的给予)。组1接受活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)(3片/天，n＝20)。组2接受活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)(3片/天，n＝20)。组3接受同时包含活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)和活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)的复合药物组合物(3片/天，n＝20)。组4接受安慰剂(3片/天，n＝20)。所述组在如下初始研究参数方面具有可比性：年龄和性别，以及疾病的严重度(CHF和LVEF分级)和持续时间。

在治疗前和治疗后，评价在患者中所给予的药物对血管重建和内皮功能障碍的影响(对CHF进程和进展很重要)。通过动脉的颈-股动脉(CF)(弹性动脉)段和颈-桡动脉(CR)(肌性动脉)段的脉搏波速度(pulsewave velocity)(PWV)(“Colson”***)对所述药物在血管重建进程中的影响进行评价。

表20示出了动脉的颈-股动脉(CF)(弹性动脉)段和颈-桡动脉(CR)(肌性动脉)段的脉搏波速度的动态。

表20

(^)表示初始值；

(&)表示给药开始后6个月；

(*)表示与初始值比较具有在p值＜0.05时可以检验的差异；

(#)表示与接受ULD抗血管紧张素II AT1受体C末端片段Ab的组比较具有在p值＜0.05时可以检验的差异；

($)表示与接受ULD抗内皮NO合酶Ab的组比较具有在p值＜0.05时可以检验的差异；

(1)ULD表示极低剂量；

(2)Ab表示抗体。

在6个月的治疗后，在肌性动脉的刚度(stiffness)方面，仅组3显示出所要求保护的药物组合物的已被证实了的影响。接受ULD抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体的组1和接受本发明的复合药物组合物的组3在弹性动脉的刚度方面显示出已被证实了的增加。

实施例13

在慢性心力衰竭人类患者中对如下制剂进行双盲、安慰剂-对照临床研究，以对生活质量的关键度量进行评价：活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)与活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(处于顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物中)的复合物。

在为期6个月的研究中，将80名患者(功能分级(FC)为II-IV级的CHF，左心室射血分数(LVEF)不到40％)4等分为治疗组和对照组。不停止背景治疗(比索洛尔β-阻断剂，ACE抑制剂依那普利，阿司匹林(除非有禁忌)；仍允许利尿剂、硝酸酯/盐和地高辛的给予)。组1接受活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)(3片/天，n＝20)。组2接受活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)(3片/天，n＝20)。组3接受同时包含活性强化形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)和活性强化形式的抗内皮NO合酶抗体(顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物)的复合药物组合物(3片/天，n＝20)。组4接受安慰剂(3片/天，n＝20)。所述组在如下初始研究参数方面具有可比性：年龄和性别，以及疾病的严重度(CHF和LVEF分级)和持续时间。在治疗前和治疗后，对患者的生活质量(明尼苏达问卷和堪萨斯问卷)、心脏的形态学参数和体力运动耐受性进行评价。

表21以治疗效力基础参数动态的形式示出了研究结果。

在6个月的治疗后，组1病人(用ULD抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体治疗)显示出生活质量的显著改善、左心室收缩功能的改善以及体力运动耐受性的提高。组2显示出在生活质量方面焦虑和抑郁水平的已被证实了的降低(使用堪萨斯问卷进行评价)。该研究证实用本发明的复合药物组合物结合标准CHF治疗(在研究中，向组3中所有参数都显示为已被证实了的阳性动态的患者给予)获得了最优的治疗效果。

在本发明的药物组合物(复合药物)中，活性(强化)形式的抗血管紧张素II AT1受体C末端片段抗体和抗内皮一氧化氮合酶(NO合酶)抗体的复合物提供了预料不到的协同治疗效果，这意味着增强了对血管重建和内皮功能障碍的影响，这对于CHF进程和进展很重要；还增强了对患者生活质量改善的影响；以及增强了对心脏的形态学参数和体力运动耐受性的影响，这已由临床试验证实。

结果列于表21中。

表21

*，**，***-p值分别＜0.05，0.01和0.001；

#-表示与接受ULD抗血管紧张素II AT1受体C末端片段Ab的组比较具有在p值＜0.05时可以检验的差异；

$，$$-表示与接受ULD抗内皮NO合酶Ab的组比较分别具有在p值为0.05和0.01时可以检验的差异；

(1)-ULD表示极低剂量；

(2)Ab意思是抗体；

(3)“明尼苏达”表示明尼苏达问卷；

(4)“堪萨斯”表示堪萨斯问卷；

(5)HADS表示HADS总分数；

(6)FC CHF表示慢性心力衰竭患者的功能分级；

(7)FF LV表示左心室功能分数。

实施例14

为了研究提议的药物组合物在治疗良性***增生患者方面的性质，使用了300mg以包含药物组合物的水-醇溶液饱和的丸剂(6mg/丸)，所述药物组合物为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗***特异性抗原多克隆抗体(抗PSA)以及抗内皮NO合酶多克隆抗体(抗eNOS)，通过对初始基质溶液超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍制造，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(ULD抗PSA+抗eNOS)；以及300mg以包含药物组合物的水-醇溶液饱和的丸剂(3mg/丸)，所述药物组合物为极低剂量(ULD)的活性强化形式的亲和纯化的兔抗***特异性抗原多克隆抗体(抗PSA)，通过对初始基质溶液超级稀释100¹²、100³⁰和100²⁰⁰倍制造，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200的混合物(ULD抗PSA)。

良性***增生(BPH)是男性中最常出现的障碍之一(BruskewitzR.C.，2003；Rosen R.，2003)：一方面，在俄罗斯进行的流行病学研究指出BPH的频率从在40-49岁人中的11.3％逐渐增加到80岁人中的81.4％(Gorilovskiy L.M.，1999)；另一方面，由WHO进行的人口统计学研究证实了60岁以上人群中的显著增长，超过了任何其它年龄组的增长。

良性***增生的主要症状为下尿路症状，可导致显著的不适及生活质量降低(Bruskewitz R.C.，2003；Lepor H.，O′Leary M.P.，2005)。在严重情况下，该疾病可伴有并发症，例如急性尿潴留、***、红尿症(erythruria)和肾衰竭(Stepanov V.N.，1999；Jacobsen S.J.，1997；Lepor H.，2004)。BPH还与患者***机能障碍有关(Bruskewitz R.C.，2003；Daly MP，2005)。

对含有ULD抗PSA+ULD抗eNOS的药物组合物和含有ULD抗PSA的药物组合物在改善良性***增生(BPH)导致的排尿紊乱方面的治疗效力和安全性进行开放标签比较平行组研究，所述研究包括40名根据纳入/排除标准选定的患者。将患者随机分为2组，一组患者(n＝21)在12周的期间接受每天三次1丸的ULD抗PSA+抗eNOS，另一组(n＝19)在12周的期间接受每天三次1丸的ULD抗PSA。两组间在年龄、BPH症状严重度、泌尿参数和***体积上是可比的。

研究包括的患者年龄在45岁以上、具有BPH病史，其中，下尿路的相应症状不少于6个月、IPSS≥13、***体积根据直肠超声检查≥30cm³、最大尿流速度≥4ml/s并≤15ml/s、以及最小残余尿液体积等于125ml、PSA水平≤4ng/ml。必要的纳入标准为医疗记录中未曾摄入以下药物：在纳入研究前6个月内为非那雄胺(finasteride)、度他雄胺(dutasteride)、或其它实验性药物；在纳入研究前4周内为α1-肾上腺素受体阻断剂(adrenoreceptor blocker)以及草药(herbal medication)；在纳入研究前4周内为任何磷酸二酯酶5型抑制剂以及其它***机能障碍治疗。

研究不包括下列患者：曾经历侵入性方法治疗BPH，包括经尿道***切除术、温热疗法(thermotherapy)、经尿道针刺消融术(transurethralneedle ablation)、支架成形术及其它；患有恶性肿瘤疾病、急性尿潴留、膀胱结石、尿道狭窄、Marion氏病、活性炎症期的泌尿生殖***感染及其它。

药物组合物的临床效力通过下尿路临床症状的改善进行评估，所述评估使用IPSS问卷(国际***症状评分)、泌尿参数(最大和平均尿流速度、排尿体积、残余尿液体积)和基于经尿道超声(TU)数据得出的***体积进行评价；并且***机能基于IIEF问卷(国际***机能指数)获得的数据进行评价。研究结果在表22和表23中显示。

表22.

¹-分子为显示出改善的患者数(n)，分母为研究中的总患者数(N)。

表23.IPSS问卷的问题7以及梗阻性和刺激性症状分量表动态

*-与基线相比p＜0.05；**-与基线相比p＜0.01；***-与基线相比p＜0.001

##-与ULD抗PSA相比p＜0.01

²-显示了与基线相比的下降％，组平均值

给出的数据证实ULD抗PSA和ULD抗PSA+ULD抗eNOS都能有效治疗下尿路症状、提高平均和最大尿流速度、改善患者的生活质量(表22)。治疗时程不长(12周)，因此任何研究组中都未观测到***体积的减小。ULD抗PSA并未影响排尿体积，其仅在52.6％的患者中增大，与基线值相比，该组平均显示出排尿体积一定程度地非统计显著性地减少11.8ml(5.4％)。同时，以ULD抗PSA+ULD抗eNOS治疗的患者中有71.4％显示出排尿体积的增加，且与基线相比平均体积增加值为48.3ml(23.7％)。

根据IPSS分量表进行的梗阻性和刺激性症状以及夜尿迹象(IPSS的问题7)动态的分析显示，两种药物组合物都有助于减少梗阻性和刺激性症状以及夜尿症状。同时，与ULD抗PSA相比，ULD抗PSA+抗eNOS在减少下尿路刺激性症状(28.2％对40.3％，p＜0.05)和夜晚尿急(2.0％对37.7％)方面更为有效。

应当注意，与ULD抗PSA相比，ULD抗PSA+ULD抗eNOS在改善患者***机能方面同样更为有效。在ULD抗PSA+ULD抗eNOS组中，患者的总IIEF(国际***机能障碍指数)分数提高了19％(在ULD抗PSA组中提高了10.5％)，在ULD抗PSA+ULD抗eNOS组中IIEF分数提高的平均值为8％，相比而言，在ULD抗PSA组中为4.5％。

所述药物组合物显示出优异的安全性能，在研究过程中没有观察到与所给予的药物相关的副作用。

因此，与ULD抗PSA相比，ULD抗PSA+ULD抗eNOS在治疗由良性***增生引起的泌尿问题方面显示出更好的效力。另外，与ULD抗PSA相比，ULD抗PSA+ULD抗eNOS在患者***功能方面显示出更大的积极效果。