CN103058930A

CN103058930A - 一种N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法和用途

Info

Publication number: CN103058930A
Application number: CN2012105666503A
Authority: CN
Inventors: 陈河如; 罗军; 郑文华; 王日康; 杨健; 黄照
Original assignee: Jinan University
Current assignee: Jinan University
Priority date: 2012-12-24
Filing date: 2012-12-24
Publication date: 2013-04-24

Abstract

本发明公开了一种N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法和用途，该衍生物具有如通式（I）所示的结构；该衍生物是以京尼平为起始原料，首先选择性地保护羟基，接着在氧化剂作用下转化为内酯，随后内酯与胺类化合物直接反应得到加合物，加合物经酸处理后得到的。本发明的N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法未见文献报道；该衍生物在制备治疗神经退行性疾病药物，尤其是制备治疗老年痴呆药物中的应用为本发明首次报道。本发明的合成方法具有反应条件温和、实验步骤简便、收率高、产品纯度高、经济实用等特点。

通式（I)。

Description

一种N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法和用途

技术领域

本发明属于治疗神经退行性疾病药物领域，具体涉及一种对神经细胞损伤具有保护作用的N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法和在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。

背景技术

老年痴呆症（Alzheimer’s Disease,AD）是一种以进行性认知障碍和记忆力损害为主的中枢神经***退行性疾病。初期的主要临床症状是记忆力和思维能力减退。患者的病情恶化较快，不久就会出现方向识别困难、语言表达障碍、无法辨认亲人，呆滞无欲，最后丧失自理能力。来自世界卫生组织和国际老年痴呆协会2008年度的统计数据显示，目前全世界大约有2000万老年痴呆症患者，预计到2050年，这一数字将过亿。中国和美国都分别有老年痴呆症患者500-600万（各占世界的1/4），且每年以30万的人数在递增。随着人口老年化的加剧，老年痴呆的患者数目还将继续增加。AD不仅给病人带来痛苦，也给家庭和社会带来巨大的负担，已被视为严重威胁人类健康和寿命的“第四大杀手”。

栀子（Gardenia jasminoides Ellis），又名山栀子、黄栀子。为茜草科（Rubiaceae）栀子属（Gardenia）植物。它是我国传统中药材，始载于神农本草经，具有悠久的应用历史，在我国临床用药史达1600年，入选我国***首批药食两用中药材名录。栀子常以果实入药，味苦、性寒，归心、肺三焦经，内服具有泻火除烦，清热利尿、凉血解毒之功效，外用可治疗扭伤、挫伤[中国植物志编委会.中国植物志[M].第71卷.北京：科学出版社,2005]。

在传统中药中，栀子很早就应用于益智开窍，缓解老年痴呆。比如黄连解毒汤，其主要处方为黄连、黄柏、黄芩、栀子；2004年，南京中医药大学药理教研室丁永芳等申请了该处方应用于治疗老年痴呆和血管性痴呆方面的用途专利。他们通过大量的药理学实验证明了其治疗痴呆的作用[丁永芳等.一种用于治疗老年性痴呆和血管性痴呆的新的药用组合物及其制法[P].200410014360.3]。

2008年，浙江省中医药研究院陈勇毅等申请了一项专利：公布了一种治疗血管性痴呆的中药颗粒制剂及其制备方法，该颗粒剂处方为柴胡、白芍药、丹参、栀子、黄芪和三七[陈勇毅等.一种治疗血管性痴呆的中药颗粒制剂及其制备方法[P].200810062443.8]。

北京中医药大学李澎涛等申请的专利称：以栀子和三七总皂苷组成的一种中药组合物可有效阻抑Aβ₄₀和Aβ₄₂的过度产生、阻断淀粉样蛋白沉积、保持钙离子稳态调节、阻抑淀粉样斑块引起的氧化损伤、非特异性炎症反应和代谢毒性物质对神经细胞的继发性损害，从而解除病变的发生和发展，减轻迟发性神经细胞死亡和皮层萎缩，对阿尔茨海默症具有显著的治疗效果[李澎涛等.一种治疗阿尔茨海默症的中药组合物及其制备方法[P].200710062879.2]。

研究发现，栀子中抗老年痴呆的有效成分为京尼平和京尼平苷[Imakura K etal.京尼平拮抗创伤和东蒗菪碱诱导的小鼠记忆障碍的作用[J].国外医学中西中药分册1998,20(1),42-43]，研究人员用痴呆小鼠模型证实了单一成分的京尼平及其糖苷能改善小鼠的学习记忆能力。

但是，京尼平在生理环境中很不稳定，容易被酸、碱及游离氨基所破坏，这限制了其药效的发挥。

发明内容

为了克服京尼平稳定性差的缺陷，本发明的首要目的在于提供一种N-取代gardenamide A衍生物，该衍生物是以京尼平为结构模板，以化学修饰的方法对京尼平进行改造后得到的；该衍生物稳定性高、神经保护作用活性强。

本发明的另一目的在于提供上述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法。

本发明的再一目的在于提供上述的N-取代gardenamide A衍生物在制备治疗神经退行性疾病，尤其是治疗老年痴呆药物中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种N-取代gardenamide A衍生物，具有如通式（I）所示的结构：

通式（I)

通式（I）中，R是碳原子数为1-8的直链烃基、支链烃基或芳香烃基，或者是羟乙基或羟丙基；

优选地，所述的N-取代gardenamide A衍生物是化合物1-9，化合物1-9的结构如下所示：

上述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，是以京尼平（genipin）为起始原料，首先选择性地保护羟基，接着在氧化剂作用下转化为内酯，随后内酯与胺类化合物直接反应得到加合物，加合物经酸处理后得到如通式（I）所示的N-取代gardenamide A衍生物。

本发明的N-取代gardenamide A衍生物的合成路线如下所示：

通式（I)

优选地，上述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法包括以下步骤：

（1）7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平的合成：取京尼平溶解于二甲基甲酰胺（DMF）中，先后滴入有机碱和二甲基叔丁基氯化硅（TBS-Cl），京尼平与TBS-Cl的摩尔比为1:(1.05-5.0)，有机碱的用量相当于京尼平1.0～5.0倍摩尔量，室温下搅拌1.5小时；然后加入二氯甲烷（DCM），并用水萃取，以除去DMF；收集有机相，干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，残留物经柱层析分离得到白色化合物，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平，收率80-95%；

（2）7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯的合成：取7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平溶解于二氯甲烷中，加入试剂，-80～40°C下搅拌反应2小时。然后加入饱和碳酸氢钠溶液和饱和硫代硫酸钠溶液淬灭反应；接着用二氯甲烷萃取，合并有机相；将有机相干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，残留物经柱层析分离得到白色固体化合物，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯，收率75-85%；

（3）加合物的合成：取7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯溶解于吡啶中，加入胺类化合物，内酯与胺类化合物的摩尔比为1:(1.05～10)，60～130°C下搅拌反应2小时，然后抽干吡啶，得加合物；

（4）N-取代gardenamide A衍生物的合成：取加和物与四氢呋喃和有机酸混合，60-80°C下搅拌反应2小时；然后向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液除去三氟乙酸，并用二氯甲烷萃取，合并有机相；将有机相干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，经RP-HPLC制备得到N-取代gardenamide A衍生物，收率50-70%；

步骤（1）-（2）、（4）所述的干燥是用无水硫酸镁干燥；

步骤（1）所述的有机碱优选咪唑；

步骤（1）所述的柱层析是用石油醚-乙酸乙酯混合溶液洗涤残留物，混合溶液中石油醚与乙酸乙酯的体积比为10:1；

步骤（2）所述的试剂是戴斯-马丁试剂（DMP），或者是DMSO和草酰氯；草酰氯、戴斯-马丁试剂与7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平的摩尔比是(1.05～5.0):1；

步骤（2）所述的柱层析是用石油醚-乙酸乙酯混合溶液洗涤残留物，混合溶液中石油醚与乙酸乙酯的体积比为25:1；

步骤（3）所述的胺类化合物优选甲胺盐酸盐、异丙胺、苯胺或乙醇胺；

步骤（3）所述的抽干吡啶，是用冷冻干燥法；

步骤（4）所述的有机酸优选三氟乙酸。

本发明的部分N-取代gardenamide A衍生物的合成收率如表1所示：

表1本发明部分N-取代gardenamide A衍生物的合成收率

利用MTT法检测本发明的N-取代gardenamide A衍生物对6-OHDA诱导损伤的PC12神经细胞的保护作用，结合Morris水迷宫实验，评价本发明的N-取代gardenamide A衍生物在制备抗老年痴呆症药物上的应用前景。结果发现，本发明的N-取代gardenamide A衍生物可以用于制备治疗神经退行性疾病药物，尤其是用于制备治疗老年痴呆症药物。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

本发明的如通式（I）所示的N-取代gardenamide A衍生物及其合成方法未见文献报道；该衍生物在制备治疗神经退行性疾病药物，尤其是制备治疗老年痴呆药物中的应用为本发明首次报道。本发明的合成方法具有反应条件温和、实验步骤简便、收率高、产品纯度高、经济实用等特点。

附图说明

图1是化合物3的¹H NMR谱图。

图2是化合物8的¹H NMR谱图。

图3是本发明的N-取代gardenamide A衍生物对6-OHDA诱导损伤的PC12细胞存活率的影响示意图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

N-甲基gardenamide A（即化合物1）的制备及分离纯化，包括以下步骤：

（1）7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平的制备：将京尼平0.339g（1.5mmol）、0.5mL干燥DMF加入10mL反应瓶中，随后加入咪唑0.204g（3.0mmol)，最后滴加含二甲基叔丁基氯化硅（TBS-Cl）0.27g（1.8mmol）的DMF溶液，室温搅拌反应1h，然后加入100mL DCM萃取，水洗3次（3×100ml），有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，旋蒸浓缩，得淡黄色油状固体，用石油醚-乙酸乙酯(体积比9:1)混合溶液柱层析分离，得白色固体0.453g，收率89.0%。

产物的结构表征数据如下，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.55(s,1H,3-H),5.83(br,1H,1-H),4.80(d,J=12Hz,1H,CH),4.31-4.25(q,J=12,18Hz，2H),3.70(s,3H，-OCH₃),3.31(br,1H,CH),3.18-3.09(q,J=9,18Hz,1H，CH),2.85-2.67(m,1H,CH),2.46-2.41(m,1H,CH),2.05-1.97(m,1H,OH),0.93(s,9H,-SiC(CH₃)₃),0.09(s,3H,-SiCH₃),0.08(s,3H,-SiCH₃);¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:172.37(C-11),156.81(C-3),148.07(C-7),130.02(C-8),114.20(C-4),100.21(C-1),65.70(-SiOCH₂),54.23(-OCH₃),50.79(C-9),42.38(C-6),40.11(C-5),28.95(-SiC-CH₃),21.79(-Si-C),-2.63(-Si-CH₃),-2.68(-Si-CH₃).MW:340,ESI-MS(m/z),[M+Na]⁺:363.3;[M-H]^-:339.2。

（2）7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯的制备：10mL圆底烧瓶中加入7-(O-二甲基叔丁氧)甲基京尼平261.1mg（0.77mmol），加入5mL二氯甲烷溶解，然后向反应瓶中加入戴斯-马丁试剂491.3mg（1.15mmol），室温下搅拌反应2小时。待反应结束，向反应瓶中加入10mL饱和碳酸氢钠溶液和10mL饱和硫代硫酸钠溶液淬灭反应，然后用二氯甲烷萃取3次(3×50mL)，合并有机相，加入无水硫酸镁干燥除水，过滤，减压蒸馏。用石油醚-乙酸乙酯混合溶液（石油醚与乙酸乙酯的体积比是25:1）柱层析分离得到白色化合物208.2mg，收率80%。

产物的结构表征数据如下，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.61(s,1H,3-H),5.89-5.85(br，1H),4.40-4.52(m,2H),3.77(s,3H,-OCH₃),3.67-3.73(m,1H),3.56-3.47(br,1H,CH),2.96-2.88(m,1H,CH),2.23-2.17(m,1H,CH),1.56(s,2H),0.92(s,9H,-SiC(CH₃)₃),0.09(s,3H,-SiCH₃),0.08(s,3H,-SiCH₃);¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:166.45(C-1),166.08(C-11),148.42(C-3),140.96(C-7),127.51(C-8),113.30(C-4),61.44(-SiOCH₂),51.87(-OCH₃),45.91(C-9),39.24(C-6),36.18(C-5),25.90(-SiC-CH₃),18.35(-Si-C),-5.37(-Si-CH₃),-5.42(-Si-CH₃)。

（3）加合物的合成：在耐压管中加入7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯68.1mg（0.2mmol），并加入适量干燥吡啶溶解样品，然后加入甲胺盐酸盐28.2mg（0.42mmol），升温至110°C，搅拌反应2小时，待反应完毕，用冷冻干燥法将吡啶抽干，得加合物，直接用于下步反应。

（4）N-甲基gardenamide A（化合物1）的制备：将上述所得加合物溶于2mL四氢呋喃溶液，滴加0.2mL三氟乙酸，升温至80°C，搅拌反应2小时。待反应完毕，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液除去三氟乙酸，并用二氯甲烷萃取3次(3×50mL)，合并有机相，加入无水硫酸镁干燥除水，过滤，减压蒸馏除去溶剂。用RP-HPLC制备得产物25.2mg,收率53.1%。

产物的结构表征数据如下，为化合物1。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.18(s,1H),5.81(d,J=1.2Hz,1H),4.37-4.26(q,J=13.5Hz,2H),3.75(s,3H,-OCH₃),3.67(d,J=11.1Hz,1H),3.58-3.48(m,1H),3.17(s,3H,-NCH₃),2.94-2.85(m,1H),2.28-2.17(m,1H);¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:170.83(C-11),166.74(C-1),141.17(C-3),138.25(C-8),129.15(C-7),111.12(C-4),60.97(C-10),51.63(-OCH₃),50.15(C-9),40.19(-NCH₃),37.42(C-6),35.52(C-5);ESI-MS(m/z):260.5[M+Na]⁺。证明产物的结构如化合物1。

实施例2

N-异丙基gardenamide A（即化合物3）的制备及分离纯化，步骤和原料均同实施例1，仅在步骤3中以异丙胺0.1ml（1.2mmol）替代甲胺盐酸盐，最后经HPLC分离纯化得白色固体化合物20.7mg，收率52%。

产物的结构表征数据为：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.29(s,1H),5.81(s,1H),4.90-4.81(m,1H),4.37-4.27(m,2H),3.76(s,3H,-OCH₃),3.64(d,J=11.1Hz,1H),3.51-3.45(m,1H),2.91-2.83(m,1H),2.25-2.16(m,1H),1.21(t,J=6.9Hz,6H); ¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:169.96(C-11),166.89(C-1),141.30(C-3),132.58(C-8),129.27(C-7),111.57(C-4),60.99(C-10),51.60(-OCH₃),50.65(-NCH),45.25(C-9),40.00(C-6),36.82(C-5),21.06(-CH(CH₃)₂),20.54(-CH(CH₃)₂);ESI-MS(m/z):288.2[M+Na]⁺。¹H NMR谱图见图1，证明产物结构如化合物3。

实施例3

N-苯基gardenamide A（即化合物6）的制备及分离纯化，步骤和原料均同实施例1，仅在步骤3中以苯胺0.1ml（1.1mmol）替代甲胺盐酸盐，最后经HPLC分离纯化得白色固体化合物27.4mg，收率61%。

产物的结构表征数据为：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.47-7.37(m,4H,Ar-H),7.27-7.24(m,1H,Ar-H),7.24(s,1H),5.88(s,1H),4.36(q,J=13.5Hz,2H),3.89(d,J=11.1Hz,1H),3.76(s,3H,-OCH₃),3.70-3.61(m,1H),3.04-2.94(m,1H),2.43-2.33(m,1H);¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:170.27(C-11),166.71(C-1),141.21(C-3),139.78(C₆H₅),137.91(C-8),129.38(C₆H₅),129.14(C-7),128.25(C₆H₅),126.36(C₆H₅),111.34(C-4),60.88(C-10),51.64(-OCH₃),50.45(C-9),40.11(C-6),37.34(C-5);ESI-MS(m/z):300.2[M+H]⁺。证明产物结构如化合物6。

实施例4

N-羟乙基gardenamide A（化合物8）的制备及分离纯化，步骤和原料均同实施例1，仅在步骤3中以乙醇胺0.1ml（1.67mmol）替代甲胺盐酸盐，最后经HPLC分离纯化得白色固体化合物45.5mg，收率68%。

产物的结构表征数据为：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.29(s,1H),5.84(s,1H),4.30(q,J=13.2Hz,2H),3.81-3.79(m,2H),3.76(s,3H,-OCH₃),3.74-3.73(m,2H,-NCH₂),3.71-3.70(m,1H),3.59-3.50(m,1H),2.94-2.86(m,1H),2.32-2.22(m,1H);¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ:171.21(C-11),166.88(C-1),140.87(C-3),138.28(C-8),129.57(C-7),110.86(C-4),60.86(C-10),60.70(-CH₂OH),51.65(-OCH₃),50.52(-NCH₂),50.27(C-9),39.95(C-6),37.29(C-5);ESI-MS(m/z):290.3 [M+Na]⁺。¹H NMR谱图见图2，证明产物结构如化合物8。

实施例5

N-取代gardenamide A的神经毒性保护作用

主要实验材料：PC12细胞，胰蛋白酶、MTT（碧云天生物技术有限公司）；Neurobasal培养基、胎牛血清、B27 supplement、6-OHDA、DMEM（GIBICO公司）；多聚赖氨酸、L-谷氨酰胺、双抗（青霉素、链霉素）（Sigma公司）；DMSO（BBI）；PBS（磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠）；96孔细胞培养板（美国corning公司）。

主要实验仪器：酶标仪，细胞培养箱，超净台，微量可调移液器。

本实施例所用实验方法：

1.PC12细胞经消化后，悬于含10%新生牛血清的DMEM低糖培养液中。

2.以3×10⁴cells/ml的密度将PC12细胞接种于96孔培养板上，接种体积为100μl/孔，置于含5%CO₂的37°C恒温培养箱内培养。

3.PC12细胞培养24小时后，将各组的培养液均换成新鲜DMEM培养液。

4.在给药组中加入相应浓度的N-取代gardenamide A衍生物(10μl/well)，正常对照组和6-OHDA损伤组加入空白溶剂(10μl/well)作为对照。

5.孵育2小时后，在给药组与6-OHDA损伤组中分别加入3mM 6-OHDA(10μl/well)，终浓度为300μM。

6.继续培养24小时后，加入5mg/ml MTT(10μl/well)，进行活细胞染色。

7.孵育3小时后，弃去培养液，加入100%DMSO(100μl/well)，并在摇板机上振摇使之充分溶解。

8.490nm的波长下测定各组的OD值。

实验结果见图3。正常对照组存活率设为100%，其余各组为与正常组相比的百分值。P<0.01相比于正常对照组，^*P<0.05相比于6-OHDA损伤组。以京尼平为阳性对照。

化合物1-9对于6-OHDA诱导的PC12神经细胞损伤均有保护作用，保护作用最为显著的是化合物3和化合物8。

从图3可以看出，化合物3和化合物8显示出对6-OHDA诱导损伤的PC12神经细胞有显著的保护作用，而且呈剂量依赖关系。其中，化合物3随剂量增大，活性增加，至浓度为3μg/ml，活性仍未见降低；而化合物8在浓度为0.3μg/ml时其神经保护作用最大，其后随浓度增加，活性有所下降。实验结果具有统计学差异。

实施例6

N-取代gardenamide A衍生物对Aβ25-35诱导的小鼠脑损伤的保护作用

实验动物：昆明种雄性小鼠，25±2g。

药物：化合物3和8；Aβ25-35（Sigma公司），1mg加生理盐水1ml溶解。

仪器：DM5-Z型Morris水迷宫仪，中国医学科学院药物研究所制造。

方法：Aβ25-35在37°C中老化96h。使之成为毒性凝胶状Aβ。动物随机分为5组：假手术组，模型组、加药组（三种剂量：1mg/kg、5mg/kg、25mg/kg）。假手术组小鼠侧脑室注射生理盐水3μl，其它四组小鼠小脑侧注射凝聚态Aβ25-35 3μl。加药组在Aβ25-35注射后1h开始每日腹腔注射不同剂量的待测药物溶液，连续给药20天，假手术组和模型组每天腹腔注射等量生理盐水。小鼠侧脑室注射Aβ25-35后第16天开始对小鼠进行Morris水迷宫测试，连续5天，每天训练两个时限。实验时温度保持在24-25°C。Morris水迷宫中加入奶粉2公斤，用热水冲开，再用水加至高过安全平台1cm，务使***中不能见到安全平台，并使水迷宫保持在22°C。

表2 N-取代gardenamide A对Aβ25-35诱导的小鼠脑损伤的保护作用

*与Aβ25-35比较

结果：利用Morris水迷宫测定小鼠定向学***台的潜伏期。结果发现，在1-4天训练期，给药组与假手术组、模型组间无明显差异。然而，第五天后各组表现出的差异相当明显，加药组的潜伏期随给药剂量的增加，逐渐接近对照组；其中，给药化合物8组的表现略优于给药化合物1组。显然N-取代gardenamide A类化合物对Aβ25-35诱导小鼠脑损伤呈现明显的保护作用，且呈剂量依赖关系。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种N-取代gardenamide A衍生物，其特征在于具有如通式（I）所示的结构：

通式（I)

通式（I）中，R是碳原子数为1～8的直链烃基、支链烃基或芳香烃基，或者是羟乙基或羟丙基。

2.根据权利要求1所述的N-取代gardenamide A衍生物，其特征在于：所述的N-取代gardenamide A衍生物是化合物1～9，化合物1～9的结构如下所示：

3.权利要求1或2所述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：以京尼平为起始原料，首先选择性地保护羟基，接着在氧化剂作用下转化为内酯，随后内酯与胺类化合物直接反应得到加合物，加合物经酸处理后得到如通式（I）所示的N-取代gardenamide A衍生物。

4.根据权利要求3所述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）7-(O-二甲基叔丁氧)甲基京尼平的合成：取京尼平溶解于二甲基甲酰胺中，先后滴入有机碱和二甲基叔丁基氯化硅，京尼平与二甲基叔丁基氯化硅的摩尔比为1:(1.05-5.0)，有机碱的用量相当于京尼平1.0～5.0倍摩尔量，室温下搅拌1.5小时；然后加入二氯甲烷，并用水萃取；收集有机相，干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，残留物经柱层析分离得到白色化合物，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平；

（2）7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯的合成：取7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平溶解于二氯甲烷中，加入试剂，-80～40°C下搅拌反应2小时，然后加入饱和碳酸氢钠溶液和饱和硫代硫酸钠溶液淬灭反应；接着用二氯甲烷萃取，合并有机相；将有机相干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，残留物经柱层析分离得到白色固体化合物，为7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平内酯；

（4）N-取代gardenamide A衍生物的合成：取加和物与四氢呋喃和有机酸混合，60-80°C下搅拌反应2小时；然后向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液除去三氟乙酸，并用二氯甲烷萃取，合并有机相；将有机相干燥、过滤、减压蒸除溶剂后，经RP-HPLC制备得到N-取代gardenamide A衍生物；

步骤（2）所述的试剂是戴斯-马丁试剂，或者是二甲基亚砜和草酰氯；草酰氯、戴斯-马丁试剂与7-(O-二甲基叔丁基硅氧)甲基京尼平的摩尔比是(1.05～5.0):1。

5.根据权利要求4所述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，其特征在于：步骤（1）所述的有机碱为咪唑。

6.根据权利要求3或4所述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，其特征在于：所述的胺类化合物为甲胺盐酸盐、异丙胺、苯胺或乙醇胺。

7.根据权利要求4所述的N-取代gardenamide A衍生物的合成方法，其特征在于：步骤（4）所述的有机酸为三氟乙酸。

8.权利要求1或2所述的N-取代gardenamide A衍生物在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用。

9.权利要求1或2所述的N-取代gardenamide A衍生物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。