CN103045713B - 一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测装置和方法，所述方法步骤包括：首先通过膜分离装置与均质器的配合分离杂质并均质液体，然后通过微生物膜过滤装置进行抽滤富集，最后再经过培养进行检测。通过该装置和方法，方便检测含有多种固体及其他大颗粒杂质，且含有少量微生物的大量液体样品中的微生物检测，检测速度快，排除杂质，准确度好，效率高。

Description

一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测方法
技术领域
本发明涉及一种微生物的检测方法，特别涉及一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测方法。
背景技术
江河湖水、工业用水、海水等其他环境水体通常含有大量固体杂质，少量微生物，在评价其洁净程度或者需其他针对性检测某种微生物时，往往难以很好分离其他杂质，且操作繁琐，容易产生误差。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种多杂质液体样品中微量微生物的装置和方法。
为实现上述目的，本发明采取下述技术方案来实现：
一种多杂质的液体样品中微量微生物检测方法，包括以下步骤：
a.取一定量的待检测液体样品，放入膜分离装置中，然后将膜分离装置置于拍击式均质器中；
b.设置拍击速度和均质时间，分离待测样品中的固体杂质，并使得膜分离装置中的液体样品充分均匀；
c.对微生物膜过滤装置的各部件，包括不锈钢漏斗和漏斗连接件进行灭菌，然后连接管路，关闭不锈钢支架上各阀门，开启真空泵，调节真空度，用消毒后的镊子，将无菌滤膜放置在不锈钢滤膜支撑垫上，吸取分离均质后液体样品，倒入不锈钢漏斗中至相应刻度线，打开相应阀门进行抽滤；
d.抽滤完成后，向一侧轻推不锈钢漏斗，然后向上取出不锈钢漏斗，用消毒后的不锈钢镊子取下无菌滤膜，进行相应检测；
e.将抽滤富集后的无菌滤膜置于已灭菌的含有培养基的培养皿中，按检验标准进行培养，培养后再次进行检测。
进一步，对较少量的液体样品，将定量样品和稀释液同时加入膜分离装置中。
优选的，对微生物膜过滤装置的各部件，包括不锈钢漏斗和漏斗连接件进行火焰灭菌。
一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测装置，包括膜分离装置，拍击式均质器，微生物膜过滤装置。
其中，所述膜分离装置包括两侧面组成的袋体，袋体四边密封，上部为可撕除部分，下部为袋体主体，内部设有滤膜，所述滤膜的底边和上边分别固定于袋体的底边和上边，两侧边分别固定于袋体的两侧面上，滤膜的宽度小于袋体侧面的宽度。
优选的，所述滤膜的两侧边分别固定于袋体两侧面的中间位置。
其中，所述微生物膜过滤装置包括不锈钢支架，至少一个不锈钢滤器，不锈钢真空表，真空抽滤瓶，真空泵，其中真空表和不锈钢滤器通过连接件安装于不锈钢支架之上，不锈钢支架和真空泵之间装有真空抽滤瓶，不锈钢支架和真空抽滤瓶通过连接管连接，所述不锈钢滤器包括不锈钢底座和安装于不锈钢底座之上的不锈钢漏斗。
优选的，所述不锈钢漏斗通过卡嵌的方式连接在不锈钢底座上。
优选的，所述不锈钢底座上设有不锈钢滤膜支撑垫。
本发明具有如下技术效果：通过采用前述方法和装置，分离出液体样品中的固体及其他大尺寸杂质，然后实现样品的充分均匀，通过微生物膜过滤装置进行抽滤富集，最后再经过培养进行检测，方便检测含有多种固体及其他大颗粒杂质，且含有少量微生物的大量液体样品中的微生物检测，检测速度快，排除杂质，准确度好，效率高；
进一步的，对较少量的液体样品，将定量样品和稀释液同时加入膜分离装置中，稀释后，可方便后续的抽滤操作，同时由于进行了均质，无需担心微生物分布不均一，导致结果误差的问题；
进一步的，在进行抽滤之前，对微生物膜过滤装置进行火焰灭菌，快速高效，同时可冷却快，可迅速投入再次使用，节约检测时间，提高检测效率。
附图说明
图1是本发明实施例中一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测方法的流程图。
图2是本发明实施例中微生物膜过滤装置的结构示意图。
图3是本发明实施例中膜分离装置的结构示意图。
图4是本发明实施例中膜分离装置的展开示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明进行详细阐述。
图1是本发明实施例中一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测方法的流程图。如图1所示，该多杂质的液体样品中微量微生物检测方法，包括以下步骤：
a．吸取样品 11，取一定量的待检测液体样品，放入膜分离装置中，然后将膜分离装置置于拍击式均质器中。
本实施例中，如待测液体样品量较多，则可直接放入膜分离装置中，若液体样品量较少时，可将定量样品和稀释液同时加入膜分离装置中，以达到稀释样品的目的。
本发明可以选择适用的多种膜分离装置及均质袋等。图3是本发明较好实施例中采用的膜分离装置的结构示意图，图4是所述膜分离装置的展开示意图，结合图3和图4可以看出，所述膜分离装置包括两侧面组成的袋体，袋体四边密封，上部为可撕除部分31，下部为袋体主体32，内部设有滤膜33，所述滤膜33的底边和上边分别固定于袋体的底边和上边，两侧边分别固定于袋体的两侧面的中间位置上，滤膜33的宽度小于袋体侧面的宽度。
所述滤膜33将膜分离装置分为两个空间，加样时，将待测样品加入其中一个空间内。
b.均质分离12，设置拍击速度和均质时间，分离待测样品中的固体杂质，并使得膜分离装置中的液体样品充分均匀。
根据样品的差异，可以设置适宜的拍击速度和时间，以及拍击间距等。通过拍击式均质器的配合，膜分离装置中的液体样品中的固体杂质及大尺寸颗粒被截留在滤膜一侧最初加样的空间内，而滤膜另一侧的空间内的样品基本除清固体杂质，且样品内微生物分布均匀，可继续进行下一步操作。
c.抽滤富集13，对微生物膜过滤装置的各部件，包括不锈钢漏斗和漏斗连接件进行灭菌，然后连接管路，关闭不锈钢支架上各阀门，开启真空泵，调节真空度，用消毒后的镊子，将无菌滤膜放置在不锈钢滤膜支撑垫上，吸取分离均质后液体样品，倒入不锈钢漏斗中至相应刻度线，打开相应阀门进行抽滤。
本实施例中，可以采用多种膜过滤装置，只要能达到无菌富集微生物的作用即可。图2是较好的实施例中采用微生物膜过滤装置，包括不锈钢支架21，至少一个不锈钢滤器，不锈钢真空表22，真空抽滤瓶23，真空泵24，其中真空表22和不锈钢滤器23安装于不锈钢支架21之上，不锈钢支架21和真空泵24之间装有真空抽滤瓶25，不锈钢支架21和真空抽滤瓶25通过连接管26连接，所述滤器22包括不锈钢底座222和安装于不锈钢底座之上的不锈钢漏斗221。
前述微生物膜过滤装置的过滤装置采用全不锈钢材质，可选择湿热灭菌、干热灭菌、火焰灭菌等多种灭菌方式，尤其是可以选择火焰灭菌，快速高效，而且灭菌后冷却速度快，可迅速投入再次使用。
优选的实施例中，所述不锈钢漏斗通过卡嵌的方式连接在不锈钢底座上，具体的结构为：不锈钢底座设有至少三个不锈钢凸起，不锈钢漏斗压下去时，凸起被压进后弹出，将漏斗卡牢，通过此种卡嵌的方式将不锈钢漏斗固定在不锈钢底座上，便于单手操作滤膜的取放。
优选的，不锈钢底座上设有不锈钢滤膜支撑垫，该不锈钢滤膜支撑垫由不锈钢颗粒压制而成，支撑均匀，保证被截留的微生物在滤膜表面均匀分布，便于随后的微生物培养、计数或颗粒分析等。
d.检测富集后的微生物14，抽滤完成后，向一侧轻推不锈钢漏斗，然后向上取出不锈钢漏斗，用消毒后的不锈钢镊子取下无菌滤膜，进行相应检测。
微生物经过抽滤富集可达到一定浓度，根据实际需要，选择进行计数、检测分析等操作，也可继续进行后续微生物培养。
e.后续培养检测15，将抽滤富集后的无菌滤膜置于已灭菌的含有培养基的培养皿中，按检验标准进行培养，培养后再次进行检测。
本发明虽然已以较佳实施例公开如上，但其并不是用来限定本发明，任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内，都可以利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出可能的变动和修改，因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均属于本发明技术方案的保护。

Claims (6)

1.一种多杂质的液体样品中微量微生物检测方法，是一种用于非治疗和诊断目的的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：取一定量的待检测液体样品，放入膜分离装置中，然后将膜分离装置置于拍击式均质器中；
设置拍击速度和均质时间，分离待测样品中的固体杂质，并使得膜分离装置中的液体样品充分均匀；
对全不锈钢的微生物膜过滤装置的各部件，包括不锈钢漏斗和漏斗连接件进行火焰灭菌，然后连接管路，关闭不锈钢支架上各阀门，开启真空泵，调节真空度，用消毒后的镊子，将无菌滤膜放置在不锈钢滤膜支撑垫上，吸取分离均质后液体样品，倒入不锈钢漏斗中至相应刻度线，打开相应阀门进行抽滤，不锈钢滤膜支撑垫由不锈钢颗粒压制而成；
抽滤完成后，向一侧轻推不锈钢漏斗，然后向上取出不锈钢漏斗，用消毒后的不锈钢镊子取下无菌滤膜，进行相应检测；
将抽滤富集后的无菌滤膜置于已灭菌的含有培养基的培养皿中，按检验标准进行培养，培养后再次进行检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，对较少量的液体样品，将定量样品和稀释液同时加入膜分离装置中。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对微生物膜过滤装置的各部件，包括不锈钢漏斗和漏斗连接件进行火焰灭菌。
4.一种多杂质的液体样品中微量微生物的检测装置，用于非治疗和诊断目的的检测，其特征在于，包括膜分离装置，拍击式均质器，和微生物膜过滤装置；所述膜分离装置包括两侧面组成的袋体，袋体四边密封，上部为可撕除部分，下部为袋体主体，内部设有滤膜，所述滤膜的底边和上边分别固定于袋体的底边和上边，两侧边分别固定于袋体的两侧面上，滤膜的宽度小于袋体侧面的宽度；所述微生物膜过滤装置包括不锈钢支架，至少一个不锈钢滤器，不锈钢真空表，真空抽滤瓶，真空泵，其中真空表和不锈钢滤器通过连接件安装于不锈钢支架之上，不锈钢支架和真空泵之间装有真空抽滤瓶，不锈钢支架和真空抽滤瓶通过连接管连接，所述不锈钢滤器包括不锈钢底座和安装于不锈钢底座之上的不锈钢漏斗；所述不锈钢底座上设有不锈钢滤膜支撑垫，不锈钢滤膜支撑垫由不锈钢颗粒压制而成。
5.根据权利要求4所述的装置，其特征在于，所述滤膜的两侧边分别固定于袋体两侧面的中间位置。
6.根据权利要求4所述的装置，其特征在于，所述不锈钢漏斗通过卡嵌的方式连接于不锈钢底座之上。
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