CN103028113A

CN103028113A - 疫苗

Info

Publication number: CN103028113A
Application number: CN2012105527676A
Authority: CN
Inventors: E.J.哈农; J.斯蒂芬尼
Original assignee: GlaxoSmithKline Biologicals SA
Current assignee: GlaxoSmithKline Biologicals SA
Priority date: 2005-03-03
Filing date: 2006-03-01
Publication date: 2013-04-10
Anticipated expiration: 2026-03-01
Also published as: CY1120347T1; IL185442A0; LTC2281831I2; CY1118629T1; AR107285A2; CN101189254B; LTPA2018012I1; CY1116108T1; GB0504436D0; MX346865B; CN103028113B; TR201809397T4; UA94900C2; PT2301955T; DK1858917T3; JP2013144710A; NL300951I1; DK2281830T3; EP2281830B1; HUE038467T2

Abstract

本发明涉及疫苗，包含VZV gE或其免疫原性片段以及TH-1佐剂的免疫原性组合物在制备用于预防或改善带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛的药物中的应用。还要求保护包含截短的VZV gE抗原以及含有QS21、胆固醇和3D MPL的佐剂的组合物。

Description

疫苗

本申请为申请号200680015245.5的分案申请，要求2005年3月3日的的优先权。

本发明涉及能诱导针对水痘带状疱疹病毒的免疫应答的组合物。

水痘带状疱疹病毒(VZV)是人疱疹病毒，它是水痘和带状疱疹的病原体。初期感染或原发感染导致水痘，通常在幼年时感染上，此时是相对良性的。然而，对于幼年时未接触过水痘的成人，以及有时在免疫受损的个体中VZV可以是致命的。同样地，VZV感染对于新生儿可以是致命的，因为该病毒能穿越胎盘。人们知道，水痘是极易通过直接接触而传播的传染性疾病。

与大多数疱疹病毒一样，VZV趋向于感染某些病毒发育在其中受到抑制的细胞。在一段不同的潜伏期之后，水痘带状疱疹(VZ)病毒可被释放，开始感染其他细胞。这种VZ病毒的重激活每年大约引起5百万例带状疱疹(Plotkin等，Postgrad Med J 61：155-63(1985))。带状疱疹的特征是大脑神经节和外周神经炎症并伴有剧痛。

现已表明，用VZV减毒株接种的人由VZV感染获得了保护性免疫(Arbeter等，J.Pediatr 100886-93(1982)和Brunell等，Lancet ii：1069-72(1982))。特别是VZV的OKA毒株已用于预防带状疱疹和带状疱疹后神经痛的试验。该OKA毒株还已用于制备水痘疫苗多年且得到了充分的描述——例如参见EP651789及其中参考文献。

The New England Journal of Medicine 2005，number 22，Volume352：2271-2284(M.N.Oxman等)已公布了OKA毒株用于带状疱疹适应症的大量临床试验。

仍然需要改良的抗带状疱疹以及诸如带状疱疹后神经痛(PHN)的相关病症的疫苗。

发明内容

第一方面

在第一方面，本发明提供了一种包含与减毒活VZV或全灭活VZV组合的VZV抗原或其免疫原性衍生物的免疫原性组合物。

本发明进一步涉及一种包含与减毒活VZV或全灭活VZV组合的VZV抗原或其免疫原性衍生物的疫苗组合物。

本发明进一步涉及一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛(PHN)和/或减少其严重程度的方法，包括递送给个体包含与减毒活VZV或全灭活VZV组合的VZV抗原或其免疫原性衍生物的免疫原性组合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的方法，该方法包括连续或同时递送给个体VZV抗原或其免疫原性衍生物和减毒活VZV或全灭活VZV。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包含减毒活VZV或全灭活VZV以及与之分离的VZV抗原或其免疫原性衍生物的试剂盒，所述组分适于连续或同时递送，或适于在递送前混合为单一组合物。

本发明还涉及一种制造免疫原性组合物的方法，该方法包括将减毒活VZV或全灭活VZV与VZV抗原或其免疫原性衍生物组合。

本发明进一步涉及减毒活VZV毒株或全灭活VZV以及VZV抗原或其免疫原性衍生物在制备用于预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的免疫原性组合物中的应用。

第二方面

本发明涉及一种包含与TH1-佐剂组合的gE或其免疫原性衍生物或免疫原性片段的免疫原性组合物和/或疫苗。

本发明还涉及包含与TH1-佐剂组合的gE或其免疫原性衍生物或免疫原性片段的组合物在制备用于预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的药物中的应用。

本发明也涉及一种预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的方法，该方法包括递送给有需要的个体包含与TH1-佐剂组合的gE或其免疫原性衍生物或免疫原性片段的免疫原性组合物或疫苗。

附图

图1显示了截短的VZV gE的序列。

图2-4显示了在使用本发明组合物的人临床试验中获得的体液应答。

图5和6显示了在使用本发明组合物的人临床试验中获得的细胞介导的免疫。

详述

在其最主要方面中，本发明涉及本文所述用于激发对VZV的免疫应答的组合物和方案。在一方面，当与没有经历暴露于本发明组合物的个体所获得的免疫应答相比时，暴露于上述组合物所产生的免疫应答适宜地可重现地更高并且是统计显著的。可通过使用任何一种概述如下的技术分析CMI应答和/或抗体应答的任何一个或多个方面，从而评估该免疫应答。

在另一方面，本发明涉及预防和/或减少带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛(PHN)严重程度的方法。为避免产生疑问，在一方面本发明涉及在预防带状疱疹发病率中的应用。在带状疱疹不发生的情况下，与未接种疫苗的对照相比带状疱疹重激活的严重程度适宜地减少(带状疱疹改善)。在另一方面，在带状疱疹发生的情况下，本发明涉及在预防PHN发病率中的应用。在另一方面，在PHN发生的情况下，与未接种疫苗的对照相比PHN的严重程度适宜地减少(PHN改善)。可通过由带状疱疹或PHN所引起的疼痛减少适宜地评估严重程度的减少，例如使用已知的疼痛负荷测量法(如Coplan等J Pain 2004；5(6)344-56)。还可通过其他标准例如带状疱疹或PHN持续时间、受带状疱疹或PHN影响的身体区域的比例；或带状疱疹/PHN的部位评估严重程度的减少。

以上陈述涉及本发明的所有方面。

在本发明第一方面中，在使用减毒活毒株情况下，在一方面，该减毒活VZV毒株为OKA毒株——一种本领域众所周知的毒株，例如在Arbeter等(Journal of Pediatrics，vol 100，No 6，p886ff)、WO9402596及其中的参考文献例如US 3985615中所披露的毒株，所有都在此并入作为参考。任何其他适合的减毒活毒株也可用于本发明。例如，Varilrix ^TM和Varivax^TM毒株都是合适的并且有市售的，可用于本发明。

全灭活VZV毒株例如灭活的VZV OKA也适合用于本发明。

用于本发明的VZV抗原可以是任何适合的VZV抗原或其免疫原性衍生物，适宜地是纯化的VZV抗原。

在一方面，所述抗原或衍生物是一种当与减毒活VZV毒株或全灭活VZV组合同时或连续递送时能引发免疫应答的抗原或衍生物，所述免疫应答与单独使用减毒活毒株/全灭活毒株或VZV抗原所引发的免疫相比是改善的。这样的应答可以是，例如，在免疫应答量级、免疫应答持续时间、应答者数量或％或应答幅度(如所检测到的抗体或T细胞应答范围)的一个或多个方面的改善，或可提供在发病率临床水平上的改善，疼痛或症状的缓解。利用本领域标准技术可通过例如抗体水平或细胞介导免疫(CMI)活性评估免疫应答的改善；利用已知临床标准还可评估在临床水平上的改善。

特别是，在一方面本发明组合物或疫苗所引发的免疫应答显示了以下一种或多种：

●当与单独使用VZV抗原或减毒活毒株/全灭活毒株相比时，与接种疫苗前水平相比，统计学上显著增加的CMI和/或抗体应答；

●当与单独使用VZV抗原或减毒活毒株/全灭活毒株相比时，与接种疫苗前水平相比，改善的多价CMI应答。多价CMI应答考虑到了一系列CM标记，例如(但不限于)IFN γ、IL2、TNF α和CD40L，并且当与单独使用VZV抗原或减毒活毒株/全灭活毒株相比时，在大范围的这样的标记中改善的多价应答诱导了CMI应答或在一个或多个标记中诱导了更高的应答；

●当与单独使用VZV抗原或减毒活毒株/全灭活毒株相比时，与接种疫苗前水平相比，更持久的CMI或抗体应答。在一方面，在1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、12个月、24个月、36个月或48个月之后测得有持久的应答。

在一方面，在老年人群中评估免疫应答的改善，适宜地在超过50岁的人群中进行评估，因为相对于50岁以下人群他们患带状疱疹或PHN的风险是增加的。还可在免疫受损的人群中研究改善的免疫应答。在一方面，对于本发明的任何一个实施方案，这样的人群是目标人群。

在一方面，人群为超过50岁的人群，适宜地为超过60岁、超过70岁、或甚至超过80岁及以上的人群。在一方面，人群为50-70岁的人群。

因此，在一方面，本发明涉及本发明的组合物和方法在超过50岁的人中预防和/或减少带状疱疹或PHN严重程度的应用。

在一方面，本发明涉及本发明的组合物和方法在免疫受损的个体中预防带状疱疹或PHN和/或减少其严重程度的应用，所述免疫受损的个体例如移植患者或HIV阳性的人。

术语‘免疫原性衍生物’包括任何在施用于人之后保留诱导对VZV免疫应答能力的分子。本文中免疫原性化合物能适宜地在免疫测定(例如ELISA或T-细胞刺激测定)中与VZV患者的抗血清和/或T-细胞起可检测的反应。可利用本领域技术人员众所周知的技术进行免疫原活性筛选。例如，可利用诸如Harlow和Lane，Antibodies：ALaboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory，1988中描述的那些方法进行这样的筛选。

适合于产生衍生物的方法是本领域众所周知的，包括在例如Sambrook等[Molecular Cloning：A Laboratory Manual，third edition，2000，Cold Spring Harbor Laboratory Press]中披露的标准分子生物学技术，例如用于添加、缺失、取代或重排氨基酸或对其化学修饰的技术。在一方面，衍生物包括，例如截短形式或其他片段。

在一方面，在本发明上下文中衍生物是包含表位，即实质上负责多肽免疫原性并能引发免疫应答的抗原决定簇的氨基酸序列，在一方面是T细胞表位。

在一方面，免疫原性衍生物的免疫原活性的水平为衍生其的肽的免疫原性的至少约50％，在一方面为至少约70％以及在一方面为至少或大于约90％，适宜地通过上述免疫测定技术进行评估。在本发明的某些方面中，免疫原性部分可确认为具有大于相应的全长多肽的免疫原活性水平，如具有大于约100％或150％或更多的免疫原活性。

在一方面，VZV抗原为糖蛋白，在一方面，为gE抗原(也称为gpl)或其免疫原性衍生物。

该gE抗原、其无锚定(anchorless)衍生物(也是免疫原性衍生物)及其制备描述于EP0405867及其中的参考文献[也参见Vafai A.Antibodybinding sites on truncated forms of varicalla-zoster virus gpI(gE)glycoprotein疫苗199412：1265-9]。EP192902也披露了gE及其制备。

所有引用文件的公开内容在此都并入作为参考。

在一方面，gE是具有本文图1序列的截短的gE，并披露于Virusresearch，vol 40，1996 p199 ff，在此全文并入作为参考。除非上下文另有明示，在下文中所涉及的gE包括截短的gE。

其他适合的抗原包括，例如gB、gH、gC、gI、IE63(如参见Huang等J.Virol.1992，66：2664，Sharp等J.Inf.Dis.1992，165：852，Debrus，JVirol.1995May；69(5)：3240-5及其中的参考文献)、IE62(如参见Arvin等J.Immunol.1991146：257，Sabella J Virol.1993Dec；67(12)：7673-6及其中的参考文献)、ORF4或ORF 10(Arvin等Viral Immunol.200215：507.)。

在此本发明还预期抗原组合可与减毒活VZV或灭活VZV一起使用，以及在一方面gE可包括在任何这样的组合内。在一方面，本发明涉及例如gE与IE63以及gE与IE62的组合。

可通过在本发明实施例中所述的模型体系中使用或通过人临床试验，测试VZV抗原及其衍生物的适合的免疫原活性。一种或多种下列活性指标适合于在免疫原活性评估中考虑：

●增加的对VZV或抗原衍生物的CD4或CD8T细胞应答。

●VZV或抗原衍生物特异性抗体的增加。

●增加的诸如干扰素γ或IL-2或TNF α的细胞因子的产生。

●增加的CD4和CD8T细胞上CD40L的表达。

●降低的带状疱疹发病率，低于同样处于危险中的一般人群的发病率，以及同样地减少的疾病严重程度和/或相关的疼痛，低于同样处于危险中的一般人群发病率。

如上所述的增加或减少相对于诸如同龄不接种疫苗组的适当对照适宜地为统计显著。在一方面，减毒活VZV或灭活VZV和VZV抗原或抗原衍生物并不明显地互相干扰，使得当组合使用时这2种组分仍能提供对VZV的免疫原应答。在一方面，无论这2种组分是作为组合物使用还是连续给药或同时给药，该应答是保护性免疫原应答。然而，应当理解某些干扰是能容忍的，只要与单独使用原有组分相比，总的保护性免疫应答在某些方面(例如量值增加、增加的％应答者或扩大的抗原应答)得到改善即可。

在一方面，本发明涉及gE抗原和OKA毒株的组合用于同时或以任何顺序连续给药。在同时递送的情况下，例如在同一天时将这2种组分递送入不同的注射部位。在一方面，不同的递送途径用于这2种组分，特别是对于诸如OKA的病毒株通过皮下递送，而对于诸如gE的抗原则通过肌内递送。

在所述的所有实施方案中，本发明还覆盖了VZV抗原或衍生物与减毒活VZV毒株或灭活的VZV的组合的应用。在一方面，适合的抗原组合包括gE或其免疫原性衍生物。

组合的组合物、或单种组分或两种组分可额外地包含佐剂或免疫刺激剂，例如但不限于任何来源的去毒脂质A和脂质A的非毒性衍生物、皂苷类和其他能适当地刺激TH1型应答的试剂。

在一方面，组合物包含能刺激TH1型应答的佐剂。

高水平的Th1-型细胞因子趋向于促成诱导对给定抗原的细胞介导免疫应答，而高水平的Th2-型细胞因子则趋向于促成诱导对抗原的体液免疫应答。

Th1和Th2-型免疫应答的差别并不是绝对的。事实上，个体会维持一种称为Th1占优势或Th2占优势的免疫应答。然而，依照Mosmann和Coffman(Mosmann，T.R.和Coffman，R.L.(1989)TH1 and TH2 cells：different patterns of lymphokine secretion lead to different functionalproperties.Annual Review of Immunology，7，p145-173)在鼠CD4+ve T细胞克隆中所述，通常便于判断细胞因子家族。传统上，Th1-型应答与T-淋巴细胞的INF-γ和IL-2细胞因子产生有关。其他通常与Th1-型免疫应答诱导直接有关的细胞因子不是T-细胞产生，例如IL-12。与此相反，Th2-型应答与IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的分泌有关。

促进Th1占优势的应答的适合的佐剂体系包括单磷酰脂质A或其衍生物，特别是3-脱-O-酰化单磷酰脂质A。尽管肠细菌脂多糖(LPS)在佐剂中的应用因其毒性效应而无法实现，但很久以前就已知道其是一种有效的免疫***刺激物。Ribi等(1986，Immunology andImmunopharmacology of bacterial endotoxins，Plenum Publ.Corp.，NY，p407-419)已描述了通过除去中心碳水化合物基团以及从还原端葡萄糖胺除去磷酸酯所产生的一种无毒的LPS衍生物——单磷酰脂质A(MPL)，并具有以下结构：

从二糖主链的3-位上除去酰基链产生了另一种去毒形式的MPL，称为3-O-脱酰单磷酰脂质A(3D-MPL)。其可通过GB 2122204B中教导的方法纯化并制备，该参考文献还披露了二磷酰脂质A及其3-O-脱酰变体的制备。

在一方面，3D-MPL以具有小于0.2μm直径的微粒尺寸的乳剂形式存在，其制造方法披露于WO 94/21292。WO9843670A2中已描述了包含单磷酰脂质A和表面活性剂的含水配方。

可从细菌来源纯化并加工待配制于本发明组合物中的细菌脂多糖衍生的佐剂，或佐剂可以是合成的。例如，在Ribi等1986(同上)中描述了纯化的单磷酰脂质A，以及在GB 2220211和US 4912094中描述了来源于沙门氏菌(Salmonella sp.)的3-O-脱酰单磷酰或二磷酰脂质A。业已描述了其他纯化的和合成的脂多糖(Hilgers等，1986，Int.Arch.Allergy.Immunol.，79(4)：392-6；Hilgers等，1987，Immunology，60(1)：141-6；和EP 0549074 B1)。在一方面，细菌脂多糖佐剂是3D-MPL。

因此，可用于本发明的LPS衍生物是那些在结构上类似于LPS或MPL或3D-MPL的免疫刺激剂。在本发明的另一个实施方案中，LPS衍生物可以是酰化单糖，其是上述MPL结构的亚部分。

皂苷类教导于：Lacaille-Dubois，M和Wagner H.(1996.A review ofthe biological and pharmacological activities of saponins.Phytomedicinevol 2 pp 363-386)。皂苷类是广泛分布在植物和海洋动物界的甾族化合物或三萜糖苷类化合物。皂苷类特点在于在水中形成胶体溶液，在振荡下起泡沫，并导致胆固醇沉淀。当皂苷类接近细胞膜时，它们在膜中形成孔-样结构导致膜破裂。红血球溶解就是该现象的一个例子，其是某些但不是全部皂苷类的特性。

在用于全身给药的疫苗中皂苷类称为佐剂。在本领域中已对佐剂以及个别皂苷类的溶血活性进行了广泛的研究(Lacaille-Dubois和Wagner，同上)。例如，Quil A(来源于南美乔木Quillaja Saponaria Molina的树皮)以及其级分描述于US 5,057,540，以及“作为疫苗佐剂的皂苷类”描述于Kensil，C.R.，Crit Rev Ther Drug Carrier Syst，1996，12(1-2)：1-55；和EP 0362279 B1。包含Quil A级分称为免疫刺激复合物(ISCOMS)的微粒结构是溶血的并已用于疫苗制造(Morein，B.，EP 0109942 B1；WO96/11711；WO 96/33739)。该溶血的皂苷类QS21和QS17(Quil A的HPLC纯化级分)已被描述作为有效的***佐剂，其生产方法描述于US专利号5,057,540和EP 0362279 B1。其他已用于全身接种疫苗研究的皂苷类包括来源于其他植物种例如丝石竹属(Gypsophila)和肥皂草属(Saponaria)的那些(Bomford等，Vaccine，10(9)：572-577，1992)。

在WO 94/00153中披露了一种包含无毒的脂质A衍生物和皂苷衍生物的组合特别是QS21和3D-MPL的组合的增效体系，或在WO96/33739中披露的其中QS21为胆固醇所淬灭的一种反应原性较低的组合物。在一方面，QS21和3D MPL的组合用于本发明。

在一方面，用于本发明的佐剂包括QS21和包含胆固醇和3D MPL的脂质体配方。

一种包含处于水包油型乳剂中的QS21和3D-MPL的特别有效的佐剂配方描述于WO 95/17210，其也适用于本发明。

因此，在本发明的一个实施方案中，提供了包含用去毒脂质A或无毒的脂质A衍生物作为佐剂的本发明的VZV抗原或衍生物的组合物。在一方面，该组合物用单磷酰脂质A或其衍生物作为佐剂。

在一方面，该组合物额外包含皂苷，在一方面其为QS21，在另一方面为WO 96/33739中所披露的用胆固醇淬灭的QS21。

本发明的免疫原性组合物任选地包含水包油型乳剂，其可与诸如上述披露的QS21和/或3D MPL的其他佐剂组合。包含水包油型乳剂的佐剂配方披露于WO9911241和WO9912565，在此并入作为参考。

一种可供选择的佐剂是未甲基化的CpG二核苷酸(“CpG”)。CpG是核酸中存在的胞嘧啶-鸟苷二核苷酸基序的缩写。CpG寡核苷酸披露于WO 96/02555和EP 468520。

在一方面，本文所述的任何本发明佐剂的组合(QS21或胆固醇淬灭的QS21+3DMPL，任选地具有水包油型乳剂)和gE或其免疫原性衍生物一起使用，用于与减毒活VZV或全灭活VZV同时或连续给药。

本发明还提供了一种生产适合于诱导抗带状疱疹的免疫应答的试剂盒的方法，该方法包括混合本发明的VZV抗原制剂和佐剂或佐剂组合，并在试剂盒中与减毒活VZV结合。

VZV抗原的量选择在典型的疫苗中诱导免疫保护性应答而无明显不良副作用的量。这样的量可随所使用的特异性免疫原以及其所存在的方式的改变而改变。一般而言，可以预计每一剂可包含1-1000μg蛋白，例如2-100μg或5-60μg。在使用gE的情况下，在一方面，在人中可使用25-100μg gE，例如40-100μg gE可用于人，在一方面，为约25μg、约50μg或约100μg gE，适当地为25μg、50μg或100μg gE。对于OKA毒株，例如，适合的剂量为500-50000pfu/0.5ml，例如2000-6000pfu/0.5ml，对于GSK Varilrix OKa毒株适合的剂量例如为6000-25,000/剂，例如10,000pfu/剂。可以使用更高的剂量例如30,000pfu、40000pfu、50,000pfu、60,000pfu、70000pfu、80000pfu、90000pfu或甚至100000pfu。

可通过标准的研究方法确定对于特定疫苗的最适量，包括观察受试者中适合的免疫应答。在最初接种疫苗后，受试者可接受一次或几次适当间隔的加强免疫。

本发明的组合物可配制用于任何适当的给药方式，包括例如，局部、口服、鼻内、粘膜、静脉内、真皮内、腹膜内、皮下和肌内给药。在一方面，通过皮下递送OKA毒株。

本发明的免疫原性组合物可用于疫苗组合物，任选地与佐剂和/或(其他)合适的载体组合。

本发明的VZV抗原和减毒VZV可一起用于组合物中以激发对VZV的免疫应答，或单独使用——在激发加强方案中同时或连续使用。可以任何顺序同时或连续递送可使用的疫苗组分。在一个实施方案中，在递送减毒活VZV或全灭活VZV后递送VZV抗原或其免疫原性衍生物。在另一个实施方案中，在递送VZV抗原或其免疫原性衍生物后递送减毒活VZV或全灭活VZV。

本发明进一步涉及一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的方法，包括递送给处于带状疱疹危险中的个体包含减毒活VZV和VZV抗原的免疫原性组合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的方法，包括连续或同时递送给处于带状疱疹危险中的个体减毒活VZV和VZV抗原。

在一方面，本发明涉及一种激发加强方案，其中在一方面首先递送VZV抗原——一种辅以佐剂的抗原，在此之后通过递送减毒VZV加强免疫***。

在一方面，人激发加强方案包括用QS21(例如如上所述的用胆固醇抑制的QS21)和3D-MPL作为佐剂的25-100μg gE，在一方面为40-100μg gE，例如50或约50μg gE，或其免疫原性衍生物激发，并用VZV的OKA毒株加强。

在利用激发加强方案情况下，或在利用多次接种方案的情况下，可使用2、3、4或更多次免疫接种。适合于激发加强的方案包括在每次免疫接种之间间隔1、2、3、4、5或6个月。

在一方面，激发加强程序表包括在第0个月递送VZV抗原或其免疫原性衍生物，适当地递送辅以佐剂的VZV抗原或衍生物，并在第2个月用减毒活VZV加强。

在一个可选的递送程序表中，在第0和2个月同时递送两种单独的组分(VZV抗原或衍生物和减毒活VZV)。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种包含减毒活VZV或灭活全VZV和VZV抗原的试剂盒。

本发明还涉及一种制造免疫原性组合物的方法，该方法包括组合减毒活VZV/全灭活VZV和VZV抗原。

本发明进一步涉及减毒活VZV毒株在制备用于预防带状疱疹的带有VZV抗原的组合疫苗中的应用，以及VZV抗原在制备用于预防带状疱疹的带有减毒活VZV毒株的组合疫苗中的应用。

在本发明的第二方面，gE抗原或其免疫原性衍生物或免疫原性片段可与佐剂一起使用以提供一种免疫原性组合物或疫苗。也就是说，在不存在减毒活毒株或全灭活毒株的情况下，gE抗原或其免疫原性衍生物或免疫原性片段可用于接种疫苗程序表中。

因此，本发明的第二方面涉及一种包含与TH1-佐剂组合的gE或其免疫原性衍生物或免疫原性片段的免疫原性组合物或疫苗。

本发明还特别涉及包含与TH1-佐剂组合的gE或其免疫原性衍生物或免疫原性片段的组合物在制备用于预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的药物中的应用。

就gE而言，术语“免疫原性衍生物”以及获得诸如gE片段的这样的衍生物的方法如上所述。如本文所述的免疫原性片段为在施用于人之后保留诱导对VZV的免疫应答能力的免疫原性衍生物。

在本发明的一方面，使用gE具有C末端截短的gE截短物。

在一方面，该截短物在羧基末端除去了4-20％的总氨基酸残基。

在一方面，gE缺少羧基末端锚定区(适宜地大致为野生型序列的氨基酸547-623)。

在一方面，gE为具有本文图1序列的截短的gE，并披露于Virusresearch，(Haumont等Vol 40，1996p 199-204)，其全文在此并入作为参考。

除非上下文另有明示，在下文中所涉及的gE包括截短的gE，或gE的其他片段或衍生物。

在本发明的另一方面，该组合物包含全长gE。

在另一方面，gE或其衍生物或片段是冻干的。在另一方面，gE或其衍生物或片段在递送前于含有佐剂(例如含有QS21、胆固醇和3D MPL的佐剂)的溶液中重配。

在一个实施方案中，该组合物或疫苗包含gE和TH-1佐剂，但不包含IE63抗原或其部分。在一个实施方案，该组合物或疫苗包含gE和TH-1佐剂，但不包含任何其他VZV抗原。在一个实施方案中，该组合物或疫苗包含gE和TH-1佐剂，但不包含任何其他病毒抗原。

在一方面，gE或其免疫原性片段不以融合蛋白的形式存在。

在一方面，该组合物或疫苗基本上由QS21、截短的VZV gE抗原以及包含胆固醇和3D-MPL的脂质体组成。

在一方面，该组合物或疫苗由3D-MPL、QS21、截短的VZV gE抗原、包含胆固醇的脂质体以及药学上可接受的载体组成。

该组合物可用于制备用于预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的药物。

该组合物或疫苗适宜地用于50岁或大于50岁的人群。适宜的人群为那些大于55、60、65、70、75、80或大于80岁的人群。适宜地人群为50-70岁的人群。

在一方面，个体人群是那些已患有水痘或已接种活水痘疫苗的那些人群。

因此，本发明涉及上述组合物在制备用于在50岁或以上的人群中预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的药物中的应用。

因此，本发明还涉及一种预防或改善带状疱疹重激活和/或带状疱疹后神经痛的方法，该方法包括递送给需要个体本发明的组合物。

在一方面，本发明第一和第二方面的组合物用于那些其中水痘带状疱疹没有重激活的个体。

该组合物可依据上述本发明第一方面所提出的剂量和递送途径使用。具体来说，gE抗原的量选择在典型的疫苗中诱导免疫保护应答性而无明显不良副作用的量。这样的量可随所使用的特异性免疫原以及其所存在的方式的改变而改变。一般而言，可以预计每一剂可包含1-1000μg蛋白，例如2-100μg或5-60μg。在使用gE的情况下，适宜地使用25-100μg gE，在一方面，为40-100μg gE，例如为约25μg、50μg或约100μg gE，适宜地为25μg、50μg或100μg gE。可通过标准的研究方法确定对于特定疫苗的最适量，包括观察受试者中适合的免疫应答。在最初接种疫苗后，受试者可接受一次或几次适当间隔的加强免疫。

在一方面，gE和佐剂组合物或疫苗用于一剂递送方案中。在一方面，gE和佐剂组合物或疫苗用于两剂递送方案中。

在一方面，本发明的组合物或疫苗用于2剂方案中，每剂间隔2个月。

在一方面，TH-1佐剂是任何上述本发明第一方面所确定的佐剂。特别是，可以使用3D MPL和QS21的组合，例如在WO94/00153中所披露的组合，或在WO 96/33739和US6846489中披露的其中QS21为胆固醇所淬灭的一种反应原性较低的组合物。一种如WO 95/17210中所披露的可供选择的佐剂包含了处于水包油型乳剂中的QS21和3D-MPL。

在一方面，配方包含了与3D MPL和QS21组合的C末端截短的VZVgE抗原，例如图1所给出的。

在另一方面，本发明涉及一种试剂盒，包含适合于临时制备疫苗组合物的上述分离的组分TH-1佐剂和gE抗原或其免疫原性片段。在一方面，这两种组分都是液体。在一方面，一种组分是冻干的，并适合于与另一种组分重配。在一方面，该试剂盒包含具有图1序列的gE抗原以及包含QS21和含有胆固醇及3D MPL的脂质体的佐剂。

疫苗制剂通常描述于New Trends and Developments in Vaccines，Voller等(编)，University Park Press，Baltimore，Maryland，1978。

本发明的方面包括：

A 一种包含与减毒活VZV或全灭活VZV组合的VZV抗原或其免疫原性衍生物的免疫原性组合物。

B 一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛(PHN)和/或减少其严重程度的方法，包括递送给个体包含与减毒活VZV或全灭活VZV组合的VZV抗原或其免疫原性衍生物的免疫原性组合物。

C 一种预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的方法，该方法包括连续或同时递送给个体VZV抗原或其免疫原性衍生物和减毒活VZV或全灭活VZV。

D 一种根据段落C的方法，其中在递送减毒活VZV前递送VZV抗原。

E 一种根据段落C的方法，其中在递送减毒活VZV后递送VZV抗原。

F 一种根据段落C的方法，其中VZV抗原与减毒活VZV同时递送，优选每种组分递送给患者不同的臂。

G 一种包含减毒活VZV或全灭活VZV以及与之分离的VZV抗原或其免疫原性衍生物的试剂盒，所述组分适于连续或同时递送，或适于在递送前混合为单一组合物。

H 一种制造免疫原性组合物的方法，该方法包括组合减毒活VZV或全灭活VZV和VZV抗原或其免疫原性衍生物。

I 减毒活VZV毒株在制备用于预防和/或减少带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛严重程度的免疫原性组合物中的应用，其中将减毒活VZV毒株和VZV抗原或其免疫原性衍生物组合使用。

J 全灭活VZV毒株在制备用于预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的免疫原性组合物中的应用，其中将全灭活VZV毒株和VZV抗原或其免疫原性衍生物组合使用。

K VZV抗原或其免疫原性衍生物在制备用于预防带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛和/或减少其严重程度的免疫原性组合物中的应用，其中将VZV抗原与减毒活VZV毒株或全灭活VZV毒株组合使用。

L 根据段落I-K任一段的应用，其中在激发加强方法中，在递送VZV毒株前递送抗原或其衍生物。

M 根据段落I-K任一段的应用，其中在激发加强方法中，在递送VZV毒株后递送抗原或其衍生物。

N 根据段落I-K任一段的应用，其中抗原或其衍生物与VZV毒株同时递送。

O 根据段落I-K任一段的应用，其中抗原或其衍生物与VZV毒株混合递送。

P 一种根据任一前述段落的应用、方法、试剂盒或组合物，其中减毒活VZV毒株为OKA毒株。

Q 一种根据任一前述段落的应用、方法、试剂盒或组合物，其中VZV抗原为gE抗原或其免疫原性衍生物。

R 一种根据任一前述权利要求的应用、方法、试剂盒、组合物或疫苗，其中VZV抗原与能刺激TH1型应答的佐剂一起递送。

本发明以下列非限制性实施例来进行说明。

实施例1

设立3个实验组来研究本发明的两个方面：

方案

1 50μg gE+佐剂AS1

0，2个月

2 OKA毒株(VarilrixTM)约10,000pfu/剂0，2个月

3 同时施用50μg gE+AS1组(如1中的)和0，2个月Varilrix^TM(如2中的)

所使用的gE可以是如图1所披露的截短的gE。

Varilrix^TM是一种市售OKA毒株。

根据上述实验设计，可选择人志愿者(例如，50个人员的群体——健康的50-70岁)进行接种疫苗，并可例如分别通过细胞内染色(ICS，Roederer等2004 Clin.Immunol.110：199)或ELISA技术测定细胞介导免疫和抗体应答来评估结果，这些技术是本领域众所周知的。

可以通过例如将患者PBMC与水痘带状疱疹病毒提取物以及特异性VZV抗原或肽gE、IE63和IE62进行体外温育，以评估特异性细胞介导免疫。可在以下水平上进行分析，例如：

a 淋巴组织增生(数据表示为刺激指数[SI])：GM、GM增加倍数和应答者的百分比

b 通过ICS(细胞内细胞因子染色)分析CD4和CD8细胞的IFNγ或IL2或TNFα或CD 40L表达：GM、GM增加倍数和应答者的百分比：

可通过与接种疫苗前水平相比，检查CMI和/或抗体应答的显著增加来评估有效性。

可利用这些技术或类似技术，并比较接种疫苗前后水平来评估其他抗原或方法的有效性。

实施例2

在不同年龄的人志愿者中进行实施例1的实验，如下：

接种疫苗程序表如下：

佐剂AS1包含3D MPL和以用胆固醇淬灭的形式存在的QS21，并如WO9633739所述进行制备，在此并入作为参考。特别是，基本上如WO9633739的实施例1.1制备AS1佐剂。该佐剂包含：脂质体，其又包含二油酰基磷脂酰胆碱(DOPC)、胆固醇和3D MPL[以1000μgDOPC、250μg胆固醇和50μg 3D MPL的量存在，给出了大约每一剂疫苗的每一值]，QS21[50μg/剂]，PBS和水至0.5ml体积。

在生产包含MPL的脂质体的方法中，将DOPC(二油酰基磷脂酰胆碱)、胆固醇和MPL溶解于乙醇中。通过在真空下蒸发溶剂形成脂质膜。添加pH 6.1的磷酸盐缓冲液或PBS(9mM Na₂HPO₄，41mM KH₂PO₄，100mM NaCl)并对混合物进行预匀浆，接着在15,000psi下进行微流化(20个循环)。在无菌(100级)区，将所产生的脂质体通过0.22μm膜进行无菌过滤。然后将无菌制品分配到无菌玻璃容器中并贮藏在冷室中(+2至+8℃)。以此方法，所生产的脂质体在膜内含有MPL(WO9633739的“MPL in”实施方案)。

利用标准技术在CHO K1细胞中表达图1的截短的gE，并依次使用阴离子交换层析、疏水相互作用层析、离子交换层析、渗滤以及超微过滤，并接着通过0.22μm滤器灭菌来纯化。

特别是，在gE纯化中使用了下列步骤：

第一阶段：阴离子交换层析

直接在细胞悬液澄清后或在4℃解冻后，纯化含有gE(约30mg/l)的培养物上清液。在转移到20升的酸瓶中后，调节上清液pH至6

在含有Q Sepharose XL树脂的层析柱上于室温下进行捕捉阶段。

在用氢氧化钠消毒后，用捕捉缓冲液(哌嗪20mM pH 6)处理柱子。然后，将上清液加载在柱子上并用平衡缓冲液和哌嗪20mM+NaCl 150mM pH 6的溶液洗涤柱子。

接着，用哌嗪20mM+NaCl 250mM pH 6的溶液洗脱含有gE的级分。

第二阶段：疏水相互作用层析

在Toyopearl丁基-650M树脂(Tosoh Biosep)上于室温下进行该层析阶段。

在硫酸铵中让在Q Sepharose XL阶段中用20mM哌嗪+250mMNaCl洗脱的级分达到1M，并调节至pH 7.5。

在用氢氧化钠消毒后，并在加载该级分前，用捕捉缓冲液(50mMKH₂PO₄+1M硫酸铵pH 7.5)处理柱子。在加载后，用50mM KH₂PO₄+100mM(NH₄)₂SO₄pH 7.5的缓冲液洗涤柱子。用50mM KH₂PO₄+25mM(NH₄)₂SO₄pH 7.5的缓冲液洗脱gE。

第三阶段：固定化金属离子上的亲和层析

在螯合的Sepharose Fast Flow树脂上于室温下进行该层析阶段。通过施用硫酸镍溶液(1％)在金属离子(Ni)中饱和该树脂，并通过洗涤除去过量的未结合离子(Ni)。让在疏水相中于50mM KH₂PO₄+25mM(NH₄)₂SO₄pH 7.5下洗脱的gE级分达到0.5M NaCl，并调节至pH 7.5。

在消毒后，在捕捉缓冲液(50mM KH₂PO₄+0.5M NaCl pH 7.5)中平衡柱子。将gE溶液加载到柱子上，然后用50mM KH₂PO₄+0.5M NaClpH 5.6的溶液洗涤。接着，用50mM醋酸钠+0.5M NaCl pH 5缓冲液洗脱gE，并用Tris 1M溶液pH 9.5中和。

第四阶段：渗滤

通过切向超滤进行缓冲液交换以及由在前一阶段中于pH 5下洗脱的gE级分中脱盐。该阶段全部在+4℃下进行。

使用装备有置于Pellicon2小型盒式外壳(产品目录XX42PMINI)中，具有限制标称分子量以及0.1m²表面积的10kDa Pellicon2再生纤维素微膜(产品目录：P2C010C01)的Millipore Proflux M12***进行超滤。

在用水漂洗并用氢氧化钠消毒后，用2升调整的PBS缓冲液(＝8.1mM Na₂HPO₄2H₂O，1.47mM KH₂PO₄，137mM NaCl，2.68mM KCL pH7.2)漂洗装有膜的整个***，然后用2升相同的缓冲液平衡直至在渗透中pH值达到7.2。

测定膜的渗透性以进行校验。通过在渗滤阶段前和结束时，让***增压至1巴对膜进行完整性测试。如果膜两次使用之间间隔一周，则完整性应测试3次(在每次超滤前进行一次，在第二次过滤后进行一次)。如果过5分钟所记录的压力损失小于0.1巴，则认为膜是完整的。

通过在280nm处测定光密度评估在亲和层析阶段于pH 5下洗脱的gE级分的浓度。利用microBCA将280nm处吸光度与gE蛋白浓度的相关性定为1OD₂₈₀＝1.75mg/ml。

将含有gE的溶液对10体积调整的PBS缓冲液(＝8.1mMNa₂HPO₄2H₂O，1.47mM KH₂PO₄，137mM NaCl，2.68mM KCL pH 7.2)渗滤。设定压力条件，使得渗滤时间为约1¹/₂-2小时(渗透流速大约60ml/min)。然后，回收渗滤残留物并在基线OD₂₈₀的基础上，用调整的PBS漂洗膜以给出大约0.4mg/ml的终浓度。

第五阶段：超微过滤

该后续阶段使得除去所残留的直径大于15nm的病毒成为可能。该阶段全部在+4℃下进行。

在PLANOVA 15N滤器(平均孔径15nm；过滤表面积0.12m²(ASAHI产品目录：15NZ-120))上进行超微过滤。在0.45巴的恒压下，在膜上过滤gE溶液并在另一侧回收除去病毒的溶液。

用NaOH 0.5M溶液对管道和外壳(柱XK50)消毒2小时。然后用调整的PBS缓冲液(与用于渗滤相同的缓冲液)漂洗整个柱子并中和直至达到7.2的pH值。

在外壳下固定超微过滤膜PLANOVA 15N(加料侧)后，用调整的PBS溶液漂洗并平衡滤器。

在PLANOVA 15N上于0.45巴恒压下超微过滤前，让含有gE溶液的渗滤残留物首先通过0.22μm(mini kleenpak OU Acropak20，取决于待过滤的体积)进行预过滤。

超微过滤结束时，用足够量的调整的PBS漂洗滤器以给出均为约0.3mg/ml的终浓度。

到结束时，用50ml调整的PBS洗涤膜。经残留物出口回收溶液。

接着对PLANOVA 15N膜完整性测试，如下：

-第一次测试包括对膜加压(1.0kg/cm²)并观察气泡形成。该测试检测任何大裂纹。

-第二次测试：滤过金粒子(PARTICORPLANOVA-QCVAL4)检验膜结构(大孔和毛细管的适当分布)。

疫苗组合物

疫苗的gE组分包含50μg gE及赋形剂氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和注射用水以及AS1佐剂。无机盐的作用是保证等渗性和生理pH。

在无菌玻璃容器中混合注射用水、浓缩的磷酸盐缓冲盐水和gE抗原以达到如下的成分浓度：

混合溶液30-40分钟。检查pH并用HCl或NaCl或适当的物质调节至7.2±0.1，并额外搅拌10分钟。将最终产物于-20℃下贮藏于聚丙烯瓶中并转移到GSK Bio进行填充。将疫苗充入3ml无菌硅化处理的玻璃管形瓶(0.25ml/管形瓶)，瓶口用灰色氯化丁基橡胶塞盖上并用中心可撕下的铝帽密封。然后将该已检查、验收的管形瓶贮藏于-20℃下。

疫苗递送

通过在注射前立即混合液体抗原制剂和液体AS1佐剂(最多在注射前1小时)，获得用于给药的gE-AS1疫苗。根据厂商技术说明书，OKA(Varilrix^TM)是市售分批配制的。

疫苗配方如下：

通过肌内注射施用gE AS1组分。

通过皮下注射施用Varilrix组分。

结果分析

概述了在临床试验过程中所要进行的研究类型，在准备临床试验过程中提交的临床试验的实验设计如下：

a 淋巴组织增生(数据表示为刺激指数[SI])：在用VZV裂解液刺激后GM、GM增加倍数以及应答者的百分比。

b 通过ICS(细胞内染色)测量的IFNγ和/或IL2、TNF α、CD40L、CD4和CD8应答：在用VZV裂解液和gE、IE62和IE63肽刺激后，GM、GM增加倍数和应答者的百分比。

淋巴组织增生

如果与其相应的抗原一起温育，可在体外再刺激外周血抗原-特异性淋巴细胞以增殖。因此，可通过计数氚化胸苷掺入法估计抗原特异性淋巴细胞的量。在本研究中，VZV抗原或衍生自VZV蛋白的肽应作为抗原使用以再刺激VZV-特异性淋巴细胞。结果表示为刺激指数(SI)，其相应于抗原特异性和背景淋巴组织增生之间的比值。

细胞因子流式细胞术(CFC)

如果与其相应的抗原一起温育，可在体外再刺激外周血抗原-特异性CD4和CD8T细胞以表达CD40L、IL-2、TNF α和IFNγ。因此，可在细胞表型常规免疫荧光标记以及胞内细胞因子产生后，通过流式细胞术计数抗原-特异性CD4和CD8T细胞。在本研究中，VZV抗原或衍生自VZV蛋白的肽应作为抗原使用以再刺激VZV-特异性T细胞。结果表示为CD4或CD8T细胞亚群中细胞因子-阳性CD4或CD8T细胞的频度。

特异性抗体(抗-VZV和抗-gE)

使用经典ELISA测定法测定抗VZV和gE的抗体水平。

实验结果以表格形式显示。图2-6以图解形式显示了抗体(图2-4，参见表1.1a-c)以及CMI应答(图5和6-参见使用gE抗原或Varilirix的表C1/“CD4全部两次(all doubles)”测试，中值)的结果。

体液免疫应答

表I.1a 对于VZV IGG抗体，血清阳性率和GMTs

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.1b 对于VZV.GE抗体，血清阳性率和GMTs

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.1c 对于IFA抗体，血清阳性率和GMTs

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.2b 在每一接种疫苗后时间点，对于gE抗体效价，血清转化率

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.3a 在每一接种疫苗后时间点，对于VZV抗体效价，疫苗应答

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.3b 在每一接种疫苗后时间点，对于gE抗体效价，疫苗应答

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.3c 在每一接种疫苗后时间点，对于IFA抗体效价，疫苗应答

(对于免疫原性，ATP队列)……………………

表I.1a对于VZV IGG抗体，血清阳性率和GMTs(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

GMC＝对所有受试者计算得到的几何平均抗体浓度

N＝具有有效结果的受试者数目

n/％＝数目/具有在特定范围内浓度的受试者百分数

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

MIN/MAX＝最小值/最大值

PRE＝接种疫苗前第1剂

PI(M1)＝接种疫苗后第1剂(第1个月)

PI(M2)＝接种疫苗后第1剂(第2个月)

PII(M3)＝接种疫苗后第2剂(第3个月)表I.1b对于VZV.GE抗体，血清阳性率和GMTs(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

GMC＝对所有受试者计算得到的几何平均抗体浓度

N＝具有有效结果的受试者数目

n/％＝数目/具有在特定范围内浓度的受试者百分数

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

MIN/MAX＝最小值/最大值

PRE＝接种疫苗前第1剂

PI(M1)＝接种疫苗后第1剂(第1个月)

PI(M2)＝接种疫苗后第1剂(第2个月)

PII(M3)＝接种疫苗后第2剂(第3个月)

表I.1c对于IFA抗体，血清阳性率和GMTs(对于免疫原性，ATP队列)血清阳性率

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

GMC＝对所有受试者计算得到的几何平均抗体浓度

N＝具有有效结果的受试者数目

n/％＝数目/具有在特定范围内浓度的受试者百分数

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

MIN/MAX＝最小值/最大值

PRE＝接种疫苗前第1剂

PI(M1)＝接种疫苗后第1剂(第1个月)

PI(M2)＝接种疫苗后第1剂(第2个月)

PII(M3)＝接种疫苗后第2剂(第3个月)

表I.2b在每一接种疫苗后时间点，对于gE抗体效价，血清转化率(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝在第0天血清阴性受试者数目

n/％＝数目/在接种疫苗后特定时间点最***清阴性受试者变成血清阳性的百分数

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

表I.3a在每一接种疫苗后时间点，对于VZV抗体效价，疫苗应答(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝在第0天血清阳性受试者数目

n/％＝数目/在接种疫苗后特定时间点最***清阳性受试者具有四倍增加的百分数

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

表I.3b在每一接种疫苗后时间点，对于gE抗体效价，疫苗应答(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝在第0天血清阳性受试者数目

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

表I.3c在每一接种疫苗后时间点，对于IFA抗体效价，疫苗应答(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝在第0天血清阳性受试者数目

95％Cl＝95％置信区间；LL＝下限，UL＝上限

以下给出了CMI应答的分析

列表

表C.1 细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD4 T

细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)………………

补充表C.1 细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD8 T

细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)………………

表C.2 细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD4 T

细胞的推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总

的接种疫苗队列)………………

补充表C.2 细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD8 T

细胞的推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗

队列)………………

表C.3 细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD4 T

细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)………………

补充表C.3 细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD8 T

细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)………………

表C.4 细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD4 T

细胞的推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总

的接种疫苗队列)………………

补充表C.4 细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD8 T

细胞的推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗

队列)………………

表C.1细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD4 T细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

SD＝标准差

Min，Max＝最小值，最大值

Q1，Q3＝第一，第三四分位数

补充表C.1细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD8 T细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

SD＝标准差

Min，Max＝最小值，最大值

Q1，Q3＝第一，第三四分位数

表C.2细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD4 T细胞的推论

统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗队列)

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

补充表C.2细胞内细胞因子染色(ICS)：在每个时间点对CD8 T细胞的

推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗队列)

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

表C.3细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD4 T细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

SD＝标准差

Min，Max＝最小值，最大值

Q1，Q3＝第一，第三四分位数

补充表C.3细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD8 T细胞的描述性统计(总的接种疫苗队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁；gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁；gE/E＝gE-AS1/50-70岁；gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目；N miss.＝丢失结果的受试者数目

SD＝标准差

Min，Max＝最小值，最大值

Q1，Q3＝第一，第三四分位数

表C.4细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD4 T细胞的推论

统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗队列)

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

补充表C.4细胞内细胞因子染色(ICS)：在POST-PRE对CD8 T细胞的

推论统计：来自Kruskal-Wallis检验的P-值(总的接种疫苗队列)

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

淋巴组织增生表格

列表页

表L.1 对于淋巴组织增生，对刺激指数的描述性统计(对

于免疫原性，ATP队列)……………………

表L.2 淋巴组织增生：几何平均值(对于免疫原性，ATP

队列)……………………

表L.3 淋巴组织增生：对刺激指数的推论统计(对于免疫

原性，ATP队列)……………………

表L.4 淋巴组织增生：几何平均值(GMR)增加倍数(对于

免疫原性，ATP队列)……………………

表L.1对于淋巴组织增生，对刺激指数的描述性统计(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

SD＝标准差

Min，Max＝最小值，最大值

Q1，Q3＝第一，第三四分位数

表L.2淋巴组织增生：几何平均值(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

GMT＝几何平均效价

LL，UL＝95％置信区间的下限，上限

Min，Max＝最小值，最大值

表L.3淋巴组织增生：对刺激指数的推论统计(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

表L.4淋巴组织增生：几何平均值(GMR)增加倍数(对于免疫原性，ATP队列)

gE/Y＝gE-AS1/18-30岁

gEVAR/Y＝gE-AS1+Varilrix/18-30岁

VAR/E＝Varilrix/50-70岁

gE/E＝gE-AS1/50-70岁

gEVAR/E＝gE-AS1+Varilrix/50-70岁

N＝具有有效结果的受试者数目

N miss.＝丢失结果的受试者数目

GMR＝几何平均比

LL,UL＝对于GMR，95％置信区间的下限，上限

Min，Max＝最小值，最大值

结论

与单独使用OKA毒株所获得的应答相比，使用gE AS1疫苗以及同时递送gE AS1和OKA毒株都激发了有效的免疫应答。

Claims

1.包含截短以除去羧基末端锚定区的VZV gE抗原以及TH-1佐剂的免疫原性组合物在制备用于预防或改善带状疱疹和/或带状疱疹后神经痛的药物中的应用，其中所述gE不是融合蛋白的形式，所述佐剂包含QS21、3D-MPL和含有胆固醇的脂质体。

2.根据权利要求1的应用，其中3D-MPL包含于脂质体中。

3.根据权利要求1的应用，其中所述VZV gE抗原由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成。

4.根据权利要求1的应用，用于大于50岁的个体的人群。

5.根据权利要求1的应用，用于免疫受损个体的人群。

6.一种免疫原性组合物或疫苗，包含以下物质：与包含QS21、3DMPL以及含有胆固醇的脂质体的佐剂组合的、截短以除去羧基末端锚定区的VZV gE抗原，其中所述gE截短物不是融合蛋白的形式，并且由SEQ ID NO：1的氨基酸序列组成。