CN103011945A - 荷叶离褶伞固体菌种培养基配方及菌种制作方法 - Google Patents

Abstract

一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方，包括木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20%（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20%（重量百分比）。本发明还公开了一种使用所述培养基配方制作荷叶离褶伞固体菌种的方法。

Description

荷叶离褶伞固体菌种培养基配方及菌种制作方法

【技术领域】

　  本发明涉及食用菌菌种生产技术，更确切地说，涉及一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方及菌种制作方法。

【背景技术】

    荷叶离褶伞，在分类学上属于伞菌目、白蘑科、离褶伞属，是国内外食用菌研究者竞相研究优良野生食用菌的热点。它的肉肥厚细腻、清香扑鼻，味道鲜美，且子实体中富含β-1，3-D葡聚糖与β-1，6-D葡聚糖，是一种食药兼用的名贵食用菌。甘肃河西学院食用菌研究所对其进行了成分测定，子实体含粗蛋白21.4%，粗脂肪1.44%，粗纤维9.52%，碳水化合物53.03%，灰分13.6%；必需氨基酸6.02g/100g，占氨基酸总量（16.82g/100g）的35.78%；含维生素B1 0.068mg、维生素B2 4.26mg、维生素B6 590μg、维生素B12 55.7μg、烟酸21.2mg；1kg子实体含锌50.0mg、铜19.0mg、硒0.013mg、镉1.85mg、汞0.56mg、铅0.75mg、砷0.29mg。河西学院生命科学与工程系利用圆纸片法对荷叶离褶伞多糖进行了抑菌性实验，结果表明荷叶离褶伞多糖提取物对细菌和真菌都有抑制作用，其中对四叠球菌和黑曲霉的抑制作用最强，最小抑菌浓度均为1.094ug／ml。

    荷叶离褶伞在工厂化瓶栽生产过程中，菌种的制作是非常关键的，现有的菌种培养基配方中包括木屑、米糠、麸皮、玉米粉，用这种培养基配方制作菌种存在发菌速度慢、易感染杂菌，菌种外表面易生成老菌皮，不容易观察到瓶内杂菌污染情况等问题。

【发明内容】

    本发明解决的技术问题是提供一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方及菌种制作方法，使用上述培养基配方制作的菌种发菌速度快，污染少，表面没有老菌皮，易观察杂菌污染情况。

    本发明是通过以下技术方案实现的：一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方，包括木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20%（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20%（重量百分比）。

将上述各组分充分混合后补水，使培养原料中含水量为63～67%（重量百分比），调节pH为6～7。

一种使用所述荷叶离褶伞固体菌种培养基配方制作荷叶离褶伞固体菌种的方法，包括如下步骤：

（1）原料混合：将木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20％（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20％（重量百分比）充分混合后补水，使培养原料中含水量为63～67%（重量百分比），调节pH为6～7。

（2）装瓶：使用全自动装瓶流水线进行装瓶，要求装瓶均匀，紧实度适中，使用850cc的原种瓶，单瓶重量控制在580～600克，瓶肩基本无空隙，打孔至瓶底。

（3）压盖：瓶盖自动输送到压盖位置，扣在装完料的瓶上。

（4）灭菌：将待灭菌的瓶框推入高压灭菌锅内，关上门，启动运行按钮，灭菌锅设定为真空抽气3次，121℃灭菌90分钟。

（5）冷却：灭菌结束后，将灭菌车推至冷却室内，冷却室温度设定在18～22℃。

（6）接种：冷却至22℃以下的瓶子通过自动接种机进行接种，接种机放置在充分洁净的接种室内，每瓶原原种接原种30～32瓶，接种后通过输送带输送至培养室。

（7）培养: 培养室温度设定为22～23℃，湿度75～80％，二氧化碳浓度1500～3000PPM之间，培养时间为30～35天。

与现有技术相比，本发明制备的菌种发菌速度快，污染少，菌丝洁白粗壮均一，表面没有老菌皮，易观察杂菌污染，解决了菌种生产过程中发菌速度慢、周期长、污染高的难题。

【具体实施方式】

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，特进一步阐述本发明。

本发明公开一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方，包括木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20%（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20%（重量百分比）。本发明还公开一种使用上述培养基配方制作荷叶离褶伞固体菌种的方法。下面结合具体实施例来进一步说明。

    1.1供试菌株

    荷叶离褶伞菌株来源于上海丰科生物科技股份公司

    1.2培养基

    PDA培养基：马铃薯(去皮)200g ，葡萄糖20g，琼脂20g， 水1000mL，pH值自然。

    原原种配方：木屑65%（重量百分比），麸皮10%（重量百分比），米糠10%（重量百分比），大豆皮15%（重量百分比）。

    1.3 制作方法

    1.3.1 母种的制作

    将组织块在无菌条件下接入PDA试管中，发满后转接1次，备用。

    1.3.2原原种的制作

    将木屑65%（重量百分比），麸皮10%（重量百分比），米糠10%（重量百分比），大豆皮15%（重量百分比）混合均匀，加水至含水量63%-67%（重量百分比），分装在850ml的塑料瓶中，每瓶装湿料500g，121℃灭菌90分钟后取出，冷却到20℃后将母种菌丝块接入塑料瓶培养基中，用封口膜封口，放在20℃-24℃的恒温培养箱中培养30天后备用。

1.3.3原种的制作

（1）原料混合：将木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20％（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20％（重量百分比）充分混合后补水，使培养原料中含水量为63%～67%（重量百分比），调节pH为6～7。

（2）装瓶：使用全自动装瓶流水线进行装瓶，要求装瓶均匀，紧实度适中，使用850cc的原种瓶，单瓶重量控制在580～600克，瓶肩基本无空隙，打孔至瓶底。

（3）压盖：瓶盖自动输送到压盖位置，扣在装完料的瓶上。

（4）灭菌：将待灭菌的瓶框推入高压灭菌锅内，关上门，启动运行按钮，灭菌锅设定为真空抽气3次，121℃灭菌90分钟。

（5）冷却：灭菌结束后，将灭菌车推至冷却室内，冷却室温度设定在18～22℃。

（6）接种：冷却至22℃以下的瓶子通过自动接种机进行接种，接种机放置在充分洁净的接种室内，每瓶原原种接原种30～32瓶，接种后通过输送带输送至培养室。

（7）培养: 培养室温度设定为22～23℃，湿度75%～80％，二氧化碳浓度1500～3000PPM之间，培养时间为30～35天。

与现有的配方相比，发菌周期缩短了5-8天，污染率在1%以下，比现有的配方降低1%-2%，菌丝洁白均一，瓶身无老菌皮。

以上描述仅为本发明的实施例，谅能理解，在不偏离本发明构思的前提下，对本发明的简单修改和替换皆应包含在本发明的技术构思之内。

Claims (3)

1.一种荷叶离褶伞固体菌种培养基配方，其特征在于：包括木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20%（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20%（重量百分比）。

2. 如权利要求1所述的荷叶离褶伞固体菌种培养基配方，其特征在于：将上述各组分充分混合后补水，使培养原料中含水量为63～67%（重量百分比），调节pH为6～7。

3. 一种使用权利要求1所述的培养基配方制作荷叶离褶伞固体菌种的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）原料混合：将木屑50%～70%（重量百分比）、米糠10%～20％（重量百分比）、麸皮10%～20%（重量百分比）、大豆皮10%～20％（重量百分比）充分混合后补水，使培养原料中含水量为63%～67%（重量百分比），调节pH为6～7；

（2）装瓶：使用全自动装瓶流水线进行装瓶，要求装瓶均匀，紧实度适中，使用850cc的原种瓶，单瓶重量控制在580～600克，瓶肩基本无空隙，打孔至瓶底；

（3）压盖：瓶盖自动输送到压盖位置，扣在装完料的瓶上；

（4）灭菌：将待灭菌的瓶框推入高压灭菌锅内，关上门，启动运行按钮，灭菌锅设定为真空抽气3次，121℃灭菌90分钟；

（5）冷却：灭菌结束后，将灭菌车推至冷却室内，冷却室温度设定在18～22℃；

（6）接种：冷却至22℃以下的瓶子通过自动接种机进行接种，接种机放置在充分洁净的接种室内，每瓶原原种接原种30～32瓶，接种后通过输送带输送至培养室；

（7）培养: 培养室温度设定为22～23℃，湿度75～80％，二氧化碳浓度1500～3000PPM之间，培养时间为30～35天。