CN102948656B - 一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法及其制备的水溶性花粉膏 - Google Patents
一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法及其制备的水溶性花粉膏 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法及其制备的水溶性花粉膏。所述方法是在水中加入花粉并加热混匀后加入糖苷酶、蛋白酶和肽酶，酶解后的花粉液再经离心、过滤、浸提、再离心、再过滤，合并两次的提取液即得花粉中的水溶性成分。进一步地，将提取出的水溶性成分减压浓缩即得水溶性花粉膏。本发明在对花粉进行破壁的同时，能够除去导致口感不好的无效的成分并解决花粉易致敏的问题，制备的水溶性花粉膏口感细腻柔滑，无过敏现象。
Description
技术领域
本发明属于天然保健品和制药技术领域，涉及花粉的破壁及提取，具体涉及一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法及其制备的水溶性花粉膏。
背景技术
花粉是高等植物雄性生殖器官―雄蕊花药中产生的生殖细胞，其个体称为花粉粒。蜂花粉是蜜蜂从被子植物雄蕊和裸子植物小孢子叶上的小孢子囊内采集的花粉粒，经过蜜蜂向其内部加入了花蜜和分泌物混合成不规则扁圆形、上面带有蜜蜂后肢嵌挟痕迹的团状物。蜂花粉是自然界赋予人类的优质营养源，具有低脂肪、高蛋白的特点，常被称为“微型营养库”和“完全营养素”，是21世纪新型的营养源和保健食品。
花粉被包含在坚实的花粉壁中，花粉壁的主要成分为孢粉素、纤维素、类胡萝卜素等，耐酸耐腐蚀，人类和单胃动物的消化液无法将其破坏，花粉的营养成分也就不能释放出来。花粉只有破壁后其内容物的营养成分才能得以充分释放，并利于被机体消化吸收。目前常用的破壁方法主要有：
①温差破壁法：利用热胀冷缩原理，先低温后高温，使花粉壁自然裂开，例子如CN1146292A。该法工艺简单，但是对营养成分破坏较大。
②超临界二氧化碳破壁法：是将花粉放入超临界二氧化碳萃取装置中，在适当压力和温度的超临界二氧化碳流体中作用一定时间，打开排气阀迅速排空二氧化碳，使花粉细胞因内外压差较大发生剧烈膨胀而破裂，例子如CN101268815N。该法的缺点是设备投入较大，操作复杂，生产成本高。
③发酵酶解破壁法：原理是将有益菌如酵母、曲霉、乳酸菌等发酵过程中产生的各种酶加入到花粉中，利用外加酶以及花粉自身含有的酶共同作用，使花粉壁的萌发孔打开，进而溶出内部的营养成分，例子如CN1377654A、CN1452888A、CN1228929A。该法的缺点是操作时间较长，易受杂菌污染。
④机械破壁法：是将花粉用水调成液体，再通过胶体磨、高压均质机、挤压机等机械方式进行破壁，例子如CN1568759A、CN1154804A、CN102462700A、CN101518304A。该法对设备的要求较高，操作复杂。
⑤气流粉碎法：原理是利用压缩空气泵产生高压气流，使空气以音速进入粉碎室，并在低温下经碰撞粉碎花粉，如吕耀奎和蔡立创在《花粉高压气流法的破壁技术》（食品科学，1989，8（9）：17-20）中所述。该法破壁效果明显，但是破壁后内含物完全裸露于环境之中，对于环境的湿度、洁净度等要求极高，操作复杂。
⑥液氮淬冷法：是利用液氮对花粉进行深低温超快速冷冻处理，使花粉壁破裂的方法，例子如CN1378791A。
⑦辐射破壁法：是将花粉装入抗辐射的食品包装材料内，置于辐射源下进行破壁的方法，例子如CN1273784A。该法操作简单，但是所需工艺条件高。
上述方法，有的对于设备的依赖程度高，有的操作复杂，有的处理时间长，有的破壁率和提取率低，均不适合大规模的工业化生产；同时，破壁后释出的花粉内含物普遍存在营养成分含量低、口感差、过敏现象明显等问题。
发明内容
本发明目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，该方法能够在对花粉进行破壁的同时，除去导致口感不好的无效的成分及解决花粉易致敏的问题，并且该方法对设备的依赖程度低，利用现有的中药提取浓缩设备即可，适合大规模工业化生产。本发明目的之二在于提供根据前述方法制备的水溶性花粉膏。
为达到上述目的之一，本发明采用如下技术方案：
一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用。
所述花粉可以为各种来源的单一花粉或任意几种花粉的混合物，本发明适用的常见花粉为：茶花粉、油菜花粉、荷花粉、玉米花粉、荞麦花粉、紫云英花粉、山楂花粉、洋槐花粉、椴树花粉、向日葵花粉、高粱花粉、芝麻花粉等。
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量2-10倍的水，加热至40-70℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液。
所述多功能提取罐是中药、食品、化工行业的常用设备，可进行常压、微压、水煎、温浸、热回流、强制循环渗、芳香油提取及有机溶媒回收等多种工艺操作，具有效率高、操作方便等优点。
所述2-10倍的水，例如可以是2-5、2.7-6、4.2-7.2、8-9、3.5-10、2、2.5、3、3.4、3.9、4、4.3、4.5、5、5.1、5.5、5.7、6、6.2、6.5、6.8、7、7.5、7.6、8、8.05、8.5、8.8、9、9.3、9.5、9.7、10；优选为3-5；最优选为4。
所述40-70℃，例如可以是40-53.5℃、44.7-68℃、55-70℃、40℃、40.8℃、43℃、45.5℃、47.8℃、49℃、50.2℃、52.5℃、53℃、54℃、54.5℃、55℃、55.6℃、56℃、56.5℃、57.5℃、58℃、58.6℃、59.5℃、60℃、61℃、63.7℃、65.1℃、66.2℃、68.4℃、70℃；优选为50-60℃；最优选为55℃。
所述搅拌的速率没有特别要求，只要能够将花粉均匀分散即可，优选为20-30r/min，最优选为25r/min。
（3）向花粉液中加入花粉质量0.01wt%-0.1wt%的糖苷酶、0.05wt%-0.15wt%的蛋白酶和0.10wt%-0.30wt%的肽酶，恒温搅拌下连续酶解2-10h，得酶解花粉液。
所述糖苷酶即糖苷水解酶，各种能够作用于糖苷或寡糖使之糖苷键水解的酶均可在本发明中使用，优选为里氏木霉来源的β-葡聚糖酶。
所述糖苷酶的加入量为花粉质量的0.01wt%-0.1wt%，例如可以是0.01wt%-0.04wt%、0.02wt%-0.07wt%、0.03wt%-0.09wt%、0.05wt%-0.06wt%、0.08wt%-0.1wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.027wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%；优选为0.02wt-0.08wt%；最优选为0.05wt%。
所述蛋白酶是指各种能够催化肽键水解使蛋白质水解为多肽的酶，例如丝氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶等均可在本发明中使用，优选为解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶。
所述蛋白酶的加入量为花粉质量的0.05wt%-0.15wt%，例如可以是0.05wt%-0.08wt%、0.07wt%-0.11wt%、0.06wt%-0.14wt%、0.08wt%-0.13wt%、0.09wt%-0.15wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.10wt%、0.11wt%、0.12wt%、0.13wt%、0.14wt%、0.15wt%；优选为0.08wt-0.12wt%；最优选为0.10wt%。
所述糖苷酶和蛋白酶的加入主要起到分解纤维素、类胡萝卜素、孢粉素等花粉细胞壁的主要成分的作用，从而达到破壁目的，使内容物充分释放。
所述肽酶是指各种能够催化肽键水解使蛋白质水解为氨基酸的酶，例如氨肽酶、羟肽酶、二肽酶等均可在本发明中使用，优选为米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶。
所述肽酶的加入量为花粉质量的0.10wt%-0.30wt%，例如可以是0.10wt%-0.18wt%、0.13wt%-0.21wt%、0.16wt%-0.24wt%、0.21wt%-0.28wt%、0.17wt%-0.30wt%、0.10wt%、0.11wt%、0.12wt%、0.13wt%、0.14wt%、0.15wt%、0.16wt%、0.17wt%、0.18wt%、0.19wt%、0.20wt%；优选为0.15wt-0.25wt%；最优选为0.20wt%。
所述肽酶主要起到酶切大分子蛋白尤其是致敏蛋白的作用，从而达到脱敏目的。
所述糖苷酶、蛋白酶、肽酶能够分别专一地作用于花粉壁表面及萌发孔处的相应大分子物质，促使萌发孔打开及内容物的释放，因此具有高效性，虽然加入量很少，但是完全可以实现良好的破壁效果并具有优良的脱敏效果。同时，本发明对所使用酶的种类、用量以及酶解的时间和温度是经过大量的前期实验精心设计出来的，能够严格保证花粉中的脂肪成分不会溶出。
本发明中所用酶制剂的种类和来源均符合国家食品添加剂的相关法规要求，其添加量和残留量也符合相关法律法规要求。
所述恒温是指搅拌过程中温度维持恒定，优选为温度恒定在40-70℃；进一步优选为温度恒定在50-60℃；最优选为温度恒定在55℃
所述搅拌的速率没有特别要求，只要能够均匀分散即可，优选为20-30r/min，最优选为25r/min。
所述酶解2-10h，例如可以是2-4h、3.5-6.2h、5-7.5h、6-9h、8.1-10h、2h、2.5h、2.8h、3h、3.2h、3.6h、4h、4.1h、4.5h、5h、5.3h、5.5h、5.7h、6h、6.5h、6.7h、7h、7.4h、7.9h、8h、8.5h、8.8h、9h、9.2h、9.5h、10h；优选为2-6h；最优选为4h。
（4）离心酶解花粉液，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤。
优选地，所述离心在三足式离心机中进行，后者为本领域进行固液二相分离时的常用设备，具有造价低廉，抗震性好，结构简单，操作方便的优点；进一步优选地，所述三足式离心机的滤袋为800目。
优选地，所述离心的转速为4000-10000r/min，例如可以是4000-5000r/min、4217-6080r/min、5570-8340r/min、6050-9050r/min、7001-10000r/min、4000r/min、4050r/min、5000r/min、5080r/min、6000r/min、6005r/min、6075r/min、7000r/min、7050r/min、8000r/min、8113r/min、8050r/min、9000r/min、9036r/min、9068r/min、10000r/min；进一步优选为5000-8000r/min；最优选为6000r/min。
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-10倍的水，浸提，得破壁花粉液。
所述2-10倍，例如可以是2-7倍、3.7-6.5倍、5-7.5倍、8-9倍、4.1-10倍、2倍、2.5倍、2.7倍、3倍、3.5倍、3.6倍、4倍、4.2倍、4.5倍、5倍、5.3倍、5.5倍、6倍、6.5倍、7倍、7.4倍、7.9倍、8倍、8.5倍、8.9倍、9倍、9.1倍、9.5倍、10倍；优选为2-4倍；最优选为3倍。
优选地，所述浸提的时间为0.5-5h，例如可以是0.5-2h、0.7-1.5h、1.3-3.4h、1.9-2.9h、3-5h、0.5h、0.6h、0.8h、1h、1.1h、1.4h、1.7h、1.8h、2h、2.1h、2.4h、2.5h、2.9h、3h、3.2h、3.3h、3.6h、3.8h、4h、4.2h、4.5h、5h；优选为2-4h；最优选为3h。
优选地，所述浸提在常温下进行。
（6）离心破壁花粉液，过滤分离出第二提取液备用。
所述离心的方式、转速均与步骤（4）中相同，此处不赘述。
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
综上所述，本发明优化后的技术方案为：
一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量2-10倍的水，加热至40-70℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.01wt%-0.1wt%的糖苷酶、0.05wt%-0.15wt%的蛋白酶和0.10wt%-0.30wt%的肽酶，40-70℃的恒温下搅拌，连续酶解2-10h，得酶解花粉液；
（4）离心酶解花粉液，所述离心的转速为4000-10000r/min，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-10倍的水，浸提0.5-5h，得破壁花粉液；
（6）离心破壁花粉液，所述离心的转速4000-10000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
本发明进一步优化后的技术方案为：
一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量3-5倍的水，加热至50-60℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.02wt%-0.08wt%的β糖苷酶、0.08wt%-0.12wt%的蛋白酶和0.15wt%-0.25wt%的肽酶，50-60℃的恒温下搅拌，连续酶解2-6h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为5000-8000r/min，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-4倍的水，常温下浸提2-4h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为5000-8000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
本发明最优化的技术方案为：
一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量4倍的水，加热至55℃，加入花粉，以25r/min的速率搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.05wt%的里氏木霉来源的β-葡聚糖酶、0.10wt%的解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶和0.20wt%的米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶，55℃的恒温下以25r/min的速率搅拌，连续酶解4h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为6000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量3倍的水，常温下浸提3h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为6000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
为达到上述目的之二，本发明采用如下技术方案：
一种水溶性花粉膏，根据前述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法制备而成，具体的制备步骤为：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏。
优选地，所述减压浓缩的温度为50-80℃，例如可以是50-75℃、58-62℃、64-73℃、65-79℃、71.5-80℃、50℃、53.5℃、55℃、56.4℃、60℃、61.3℃、66℃、69.7℃、70℃、72.5℃、74℃、77℃、78.6℃、80℃；进一步优选为60-70℃；最优选为65-70℃。
优选地，所述减压浓缩的压力为0-0.09Mpa，例如可以是0-0.05Mpa、0.02-0.07Mpa、0.04-0.09Mpa、0Mpa、0.01Mpa、0.02Mpa、0.03Mpa、0.04Mpa、0.05Mpa、0.06Mpa、0.07Mpa、0.08Mpa、0.09Mpa。
优选地，所述减压浓缩在真空环境中进行，所述真空环境进一步优选真空度为0.03-0.08Mpa，例如可以是0.03-0.06Mpa、0.02-0.05Mpa、0.04-0.08Mpa、0.03Mpa、0.04Mpa、0.05Mpa、0.06Mpa、0.07Mpa、0.08Mpa。
综上所述，本发明优化后的技术方案为：
一种水溶性花粉膏，根据如下步骤制备而成：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度50-80℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
本发明进一步优化后的技术方案为：
一种水溶性花粉膏，根据如下步骤制备而成：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度60-70℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
本发明最优化的技术方案为：
一种水溶性花粉膏，根据如下步骤制备而成：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度65-70℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
本发明提供的水溶性花粉膏，主要成分即天然花粉的水溶性成分和水，其比重大于1.25，以干物质折算，水溶性成分的提取率在60%以上。经成分分析得知，本发明的花粉膏中水溶性蛋白质的含量大于15wt%，游离氨基酸的含量大于3.5wt%，还原糖的含量大于40wt%。
本发明提供的水溶性花粉膏可于稀释后直接饮用，也可作为饮料、口服液的原料，还可与其它干粉混合后造粒或者压片等，制成多种产品形式。经大量人群测试，本发明的水溶性花粉膏口感细腻柔滑，服用后有明显的润肠通便和养颜美容功效。
与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：
（1）利用酶解技术进行破壁，在温和的反应条件下，加入少量的糖苷酶、蛋白酶、肽酶使之分别专一地作用于花粉壁表面及萌发孔处的相应大分子物质，促使萌发孔打开以及花粉破壁，比之现有技术中的发酵酶解破壁法花粉破壁率大大提高，可达90%以上，而营养物质损失小且活性保存完好。
（2）内容物释放充分，水溶性成分的含量大幅提高，增加率达60%-100%。
（3）肽酶对大分子蛋白质的酶切使之分解成小分子的多肽和游离氨基酸，不仅更利于人体吸收，而且对于过敏蛋白的分解实际上相当于进行了脱敏处理，使得提取到的水溶性成分不会引起过敏，服用后亦无胃部不适现象。
（4）过滤去除了不能被人体吸收利用的纤维素、孢粉素等，因此口感更加柔滑细腻，味道更好。
（5）在水溶性成分的提取过程中严格控制所使用酶的种类、用量以及酶解的时间和温度，使脂肪成分不溶出，克服了现有技术中花粉产品脂肪含量高、不易做成液体制品的缺陷，本发明提供的水溶性花粉膏可以制成多种液体产品，澄清不浑浊。
附图说明
图1是本发明方法的工艺流程图。
下面结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案，但下述的实例仅仅是本发明的简易例子，并不代表或限制本发明的权利保护范围，本发明的权利范围以权利要求书为准。
具体实施方式
为更好地说明本发明，便于理解本发明的技术方案，本发明的典型但非限制性的实施例如下：
实施例1：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的油菜花粉50kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入500L水，加热至60℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.05wt%的里氏木霉来源的β-葡聚糖酶、0.10wt%的解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶和0.20wt%的米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶，60℃的恒温下搅拌，连续酶解5h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为10000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量4倍的水，常温下浸提1.5h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为10000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.3的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度70℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏35kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸4.0%，还原糖40.2%，总糖41.6%，水溶性总蛋白15.0%，菌落总数3100cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
实施例2：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的茶花粉和椴树花粉各25kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中200L水，加热至55℃，加入花粉，以25r/min的速率搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.05wt%的里氏木霉来源的β-葡聚糖酶、0.10wt%的解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶和0.20wt%的米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶，55℃的恒温下以25r/min的速率搅拌，连续酶解4h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为6000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量3倍的水，常温下浸提3h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为6000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.28的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度65℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏34kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸4.1%，还原糖40.1%，总糖41.5%，水溶性总蛋白16.0%，菌落总数3105cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
实施例3：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的荷花粉20kg、洋槐花粉、向日葵花粉各15kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中250L水，加热至50℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.08wt%的糖苷酶、0.08wt%的蛋白酶和0.25wt%的肽酶，50℃的恒温下搅拌，连续酶解6h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为8000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2倍的水，常温下浸提4h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为8000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.26的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度80℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏35.5kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸4.3%，还原糖40.1%，总糖41.5%，水溶性总蛋白16.5%，菌落总数3105cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
实施例4：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的荞麦花粉10kg、高粱花粉40kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中150L水，加热至60℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.01wt%的β糖苷酶、0.05wt%的蛋白酶和0.3wt%的肽酶，60℃的恒温下恒温搅拌，连续酶解2h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为5000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量10倍的水，常温下浸提2h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为5000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.31的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度50℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏36kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸4.5%，还原糖40%，总糖41.2%，水溶性总蛋白16.8%，菌落总数3090cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
实施例5：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的荷花粉、洋槐花粉、紫云英花粉、椴树花粉各12.5kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中100L水，加热至40℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.1wt%的糖苷酶、0.15wt%的蛋白酶和0.10wt%的肽酶，40℃的恒温下搅拌，连续酶解10h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为4000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量8倍的水，常温下浸提0.5h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为4000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.29的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度75℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏34.5kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸3.9%，还原糖40.4%，总糖41.7%，水溶性总蛋白15.6%，菌落总数3095cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
实施例6：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的山楂花粉、玉米花粉、芝麻花粉、高粱花粉、椴树花粉各10kg作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中150L水，加热至70℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.06wt%的β糖苷酶、0.1wt%的蛋白酶和0.2wt%的肽酶，70℃的恒温下搅拌，连续酶解2h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为7000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量5倍的水，常温下浸提5h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为7000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分；
（8）将步骤（7）的水溶性成分减压浓缩成比重为1.27的花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度55℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa，得到水溶性花粉膏35.2kg。
对本实施例获得的水溶性花粉膏的各项指标分析结果如下：游离氨基酸4.2%，还原糖40.3%，总糖41.5%，水溶性总蛋白15.5%，菌落总数3100cfu，大肠菌群<3MPN/g，霉菌和酵母<10cfu。
应该注意到并理解，在不脱离后附的权利要求所要求的本发明的精神和范围的情况下，能够对上述详细描述的本发明做出各种修改和改进。因此，要求保护的技术方案的范围不受所给出的任何特定示范教导的限制。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的原料配比及制备步骤，但本发明并不局限于上述配比及制备步骤，即不意味着本发明必须依赖上述制备步骤才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (12)
1.一种花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量2-10倍的水，加热至40-70℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.01wt%-0.1wt%的糖苷酶、0.05wt%-0.15wt%的蛋白酶和0.10wt%-0.30wt%的肽酶，恒温搅拌下连续酶解2-10h，得酶解花粉液；
所述糖苷酶为里氏木霉来源的β-葡聚糖酶，所述肽酶为米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶；
（4）离心酶解花粉液，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-10倍的水，浸提，得破壁花粉液；
（6）离心破壁花粉液，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述花粉为茶花粉、油菜花粉、荷花粉、玉米花粉、荞麦花粉、紫云英花粉、山楂花粉、洋槐花粉、椴树花粉、向日葵花粉、高粱花粉、芝麻花粉中的任意一种或至少两种的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤（3）中
所述蛋白酶为解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤（4）和步骤（6）中所述离心在三足式离心机中进行。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述三足式离心机为滤袋为800目的三足式离心机。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量2-10倍的水，加热至40-70℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.01wt%-0.1wt%的糖苷酶、0.05wt%-0.15wt%的蛋白酶和0.10wt%-0.30wt%的肽酶，40-70℃的恒温下搅拌，连续酶解2-10h，得酶解花粉液；
（4）离心酶解花粉液，所述离心的转速为4000-10000r/min，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-10倍的水，浸提0.5-5h，得破壁花粉液；
（6）离心破壁花粉液，所述离心的转速4000-10000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量3-5倍的水，加热至50-60℃，加入花粉，搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.02wt%-0.08wt%的糖苷酶、0.08wt%-0.12wt%的蛋白酶和0.15wt%-0.25wt%的肽酶，50-60℃的恒温下搅拌，连续酶解2-6h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为5000-8000r/min，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量2-4倍的水，常温下浸提2-4h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为5000-8000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）挑选干净、无霉变、无虫蛀的花粉作为原料备用；
（2）在多功能提取罐中加入花粉质量4倍的水，加热至55℃，加入花粉，以25r/min的速率搅拌均匀，得花粉液；
（3）向花粉液中加入花粉质量0.05wt%的里氏木霉来源的β-葡聚糖酶、0.10wt%的解淀粉芽孢杆菌来源的中性蛋白酶和0.20wt%的米曲霉来源的内切和外切混合氨基肽酶，55℃的恒温下以25r/min的速率搅拌，连续酶解4h，得酶解花粉液；
（4）在三足式离心机中离心酶解花粉液，所述离心的转速为6000r/min，离心机的滤袋为800目，过滤分离出第一提取液备用，滤出的破壁花粉进行下一步骤；
（5）向步骤（4）的破壁花粉中加入其质量3倍的水，常温下浸提3h，得破壁花粉液；
（6）在三足式离心机中离心破壁花粉液，所述离心的转速为6000r/min，过滤分离出第二提取液备用；
（7）合并步骤（4）的第一提取液和步骤（6）的第二提取液，即提取出花粉中的水溶性成分。
9.一种水溶性花粉膏，其特征在于，根据权利要求1-8之一所述的方法制备而成，具体的制备步骤为：
（1）按照权利要求1-8之一所述的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏。
10.根据权利要求9所述的水溶性花粉膏，其特征在于，具体的制备步骤为：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度50-80℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
11.根据权利要求10所述的水溶性花粉膏，其特征在于，具体的制备步骤为：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度60-70℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
12.根据权利要求11所述的水溶性花粉膏，其特征在于，具体的制备步骤为：
（1）按照所述花粉破壁、脱敏、水溶性成分提取的方法提取出花粉中的水溶性成分；
（2）将水溶性成分减压浓缩成花粉膏，所述减压浓缩的工艺参数为：温度65-70℃，压力0-0.09Mpa，真空度0.03-0.08Mpa。
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