CN102911182B - 一种溴酚化合物及其应用 - Google Patents
一种溴酚化合物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102911182B CN102911182B CN201210387080.1A CN201210387080A CN102911182B CN 102911182 B CN102911182 B CN 102911182B CN 201210387080 A CN201210387080 A CN 201210387080A CN 102911182 B CN102911182 B CN 102911182B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- kit
- compound
- receptor
- kinase
- phenolic compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明涉及医药领域,特别涉及一种应用于酪氨酸激酶C-kit(英文名称:receptor tyrosine kinasec-kit,也称为KIT、CD117、干细胞因子受体、肥大细胞生长因子受体)受体抑制剂或恶性肿瘤药物的溴酚化合物,该化合物的结构式为:
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,特别涉及一种应用于酪氨酸激酶C-kit(英文名称:receptor tyrosine kinase c-kit,也称为KIT、CD117、干细胞因子受体、肥大细胞生长因子受体)受体抑制剂或恶性肿瘤药物的溴酚化合物。
背景技术
蛋白质酪氨酸激酶(PTK)是癌症治疗的靶标之一。原癌基因C-kit是HZ4猫科肉瘤病毒kit癌基因的同源物,位于4号染色体长臂上,编码145-165kDa跨膜受体(CD117),具有酪氨酸激酶活性。它的产物是Ⅲ型酪氨酸蛋白激酶生长因子受体,蛋白质酪氨酸激酶(PTK)具有:1)胞外结合区,用于结合生长因子如KIT配体(也称为干细胞因子(SCF)、青灰因子(SLF)或肥大细胞生长因子(MGF));2)跨膜区;和3)胞内部分,作为激酶以将蛋白质内的特异性酪氨酸残基磷酸化。C-kit/CD117是1987年发现的属于受体酪氨酸激酶家族的原癌基因,存在着30多种功能获得性(gain offunction,GOF)突变形式,它们是许多肿瘤发生、发展的直接诱因。C-kit是干细胞因子(stem cell factor,SCF)的受体,c-kit表达产物与其配体SCF结合后,可激发酪氨酸残基磷酸化,从而实现其功能。C-kit的表达及其与SCF的结合,在肿瘤的发生及进展中起着非常重要的调节作用。
C-kit原癌基因在胚胎发生、黑素生成、血细胞生成、和肥大细胞增生病、胃肠肿瘤和其它固体肿瘤、以及某些白血病包括AML的发病机制中很重要。因此,有必要开发出作为C-kit受体抑制剂的新型化合物。
与现阶段利用抑制DNA合成的化合物药物相比,C-kit抑制剂能明显增加疗效,降低毒副作用。抑制DNA合成的化合物药物的作用机理是对于整个细胞,尤其是迅速***的肿瘤细胞有较好的毒性。但是,这类药物不仅对肿瘤细胞有毒性,他们对患者的正常细胞也有广泛的毒性。而对于C-kit受体抑制剂,并不通过抑制DNA合成而起作用,它是将KIT配体结合到KIT酪氨酸激酶,从而会导致受体的同二聚、C-kit酪氨酸激酶活性的激活和随后各种蛋白质底物的磷酸化,其中许多都是细胞内信号转导的效应物。
相关文献报道了在肿瘤细胞内激活C-kit的几种机理,包括:激活突变、受体激酶通过其配体被自分泌和旁分泌激活、蛋白-酪氨酸磷酸酶活性的损失和通过其它激酶交叉激活。通过激活突变引发的转化机理包括形成二聚物和增加激酶区的内在活性,这两者都会导致组成型配体非依赖性激酶的活化,可能会改变底物特异性。超过三十种的Kit蛋白激活突变与人体内的高度恶性肿瘤有关。
因此,已知意识到,酪氨酸激酶C-kit受体的抑制剂能用作哺乳动物癌细胞生长的选择性抑制剂。例如,GleevecTM(也称为甲磺酸伊马替尼,或STI571)是2-苯基嘧啶酪氨酸激酶抑制剂,能抑制BCR-ABL融合基因产物的激酶活性,被美国食品医药管理局批准用于治疗CML。GleevecTM除了能抑制BCR-ABL激酶外,还能抑制C-kit激酶和PDGF受体激酶,但是它并非对C-kit激酶的所有突变同工型都有效。GleevecTM能抑制C-kit配体刺激的MO7e人白血病细胞生长,还能在这些条件下诱导细胞凋亡。相反,GM-CSF刺激的MO7e人白血病细胞生长不受GleevecTM的影响。此外,在用GleevecTM治疗GIST患者的临床研究中,GIST是一种在细胞转化中包括C-kit激酶的疾病,许多患者表现出显著的改善。
这些研究表明C-kit激酶抑制剂如何能治疗其生长依赖于C-kit激酶活性的肿瘤。
虽然抗癌化合物如上述的那些物质对本领域有显著的贡献,但仍然继续需要改进的抗癌药物,希望开发出具有更好选择性或效力、或具有更小毒性或副作用的新型化合物。
从现代药物研究开发的历史可见,很多创新药物的开发应用,首先来自某类新型天然先导化合物的发现,海洋为生命的起源地,生活于海洋中的海藻,往往产生一些结构独特、生理活性显著地次生代谢物质。发明人从一种海洋红藻中得到一个结构新颖的溴酚化合物,活性测试表明其对PTK酶有很强的抑制活性,可用于高表达C-kit受体的恶性肿瘤的防治。
发明内容
本发明针对上述现有技术中的不足,提供一种从海洋红藻(如多管藻属的多管藻或松节藻属的松节藻)中得到结构新颖的对受体酪氨酸激酶C-kit有很强抑制活性的溴酚化合物。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种溴酚化合物,所述溴酚化合物的结构式如下:
上述溴酚化合物可命名为:5R-2,7-二溴-5-甲氧基-3,8-二羟基-5,10-二氢-苯并吡喃并[5,4,3-cde]苯并吡喃。
制备上述溴酚化合物时,将多管藻(或松节藻)在其重量的4~10倍的乙醇(或甲醇)中浸泡12h,然后把溶剂过滤出来,为了提取完全,一般浸提3次左右。然后减压(压力一般是0.1个大气压,温度一般在45摄氏度左右)回收乙醇(或甲醇),得浓缩膏,然后加入水进行充分混悬,先后用氯仿和乙酸乙酯进行萃取,合并氯仿和乙酸乙酯萃取物,上硅胶柱进行色谱层析,先后用氯仿—丙酮和氯仿—甲醇为洗脱剂,并以葡聚糖凝胶Sephadex-LH20进行纯化,从中得到本发明所述溴酚化合物,经核磁共振(NMR)、质谱(MS)、红外光谱(IR)以及晶体X-射线衍射技术进行分析(如图1所示),确定此化合物结构为:
上述溴酚化合物作为酪氨酸激酶C-kit受体抑制剂以及将酪氨酸激酶C-kit受体抑制剂应用于制备恶性肿瘤药物。
本发明具有如下优点:本发明所述的溴酚化合物为一种新化合物,结构新颖,并经分子生物学实验和药理实验证实本发明化合物对酪氨酸激酶C-kit受体有良好的抑制作用,对恶性肿瘤的治疗具有重要的价值。
附图说明
图1为本发明晶体X-射线衍射图;
图2为本发明核磁共振氢谱(1H NMR);
图3为本发明核磁共振碳谱(13C NMR);
图4为为本发明质谱图(MS)。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行具体描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
实施例
本发明通过对海洋生物多管藻(或松节藻)进行提取分离。多管藻(或松节藻)阴凉风干,取10Kg,以体积浓度为95%的乙醇(或甲醇)在室温下浸提3次,每次用乙醇20升,然后合并乙醇(或甲醇)浸提液,在温度≤45℃压力为0.1个大气压下回收乙醇(或甲醇)至无乙醇味,加热适量蒸馏水使之混悬,先后分别用氯仿和乙酸乙酯各萃取4-6次,在温度≤45℃条件下,分别减压回收氯仿和乙酸乙酯,合并氯仿和乙酸乙酯萃取液,得棕褐色浸膏150g。将150g浸膏上硅胶柱,以氯仿:丙酮不同体积比为洗脱剂(100:0,50:1,20:1,10:1,5:1,2:1,0:100)进行洗脱,分别收集,并以薄层板展开进行检测(三氯化铁试液为显色剂)并合并,共分成8个粗分部位(1-8)。取第3个部位(16.0g)上硅胶柱,以氯仿:丙酮=9:1(体积比)为洗脱剂,分成3个流分(3-1、3-2、3-3),取流分3-2(约4g)上硅胶柱,以氯仿:甲醇=20:1(体积比)为洗脱剂得本发明化合物,并以凝胶柱Sephadex-LH20纯化(用甲醇洗脱)得纯化化合物约90毫克。经分析,该化合物可命名为:5R-2,7-二溴-5-甲氧基-3,8-二羟基-5,10-二氢-苯并吡喃并[5,4,3-cde]苯并吡喃,结构式为:
该溴酚化合物具有如下理化特征:
该溴酚化合物为针状晶体,紫外光谱UV(MeOH)λmax(logε)229.1(logε4.87),289.5(logε4.47),320.1(logε3.75)nm;红外光谱IR(KBr)νmax:3490,2920,1614,1501,1416,1341,1241,1092,1017,951,928,874cm-1;低分辨质谱EI-MS:432\430\428([M+4]+\[M+2]+\[M]+:1:2:1),401\399\397(1:2:1);高分辨质谱HREIMS m/z found427.8909(M+),(计算值C15H10 79Br2O5,427.8901);核磁共振氢谱1H NMR(400MHz,acetone-d6):7.22(1H,s,H-6),7.10(1H,s,H-1),6.16(1H,s,H-5),5.35(1H,d,J=13.2Hz,H-10a),5.21(1H,d,J=13.2Hz,H-10b),3.56(3H,s,OCH3);核磁共振碳谱13C NMR(100MHz,acetone-d6)144.6(s,C-8),144.4(s,C-3),140.3(s,C-8a),137.3(s,C-3a),123.9(d,C-6),122.6(d,C-1),121.2(s,C-5a),121.0(s,C-10a),115.3(s,C-10c),115.1(s,C-10b),110.8(s,C-7),110.6(s,C-2),100.2(d,C-5),68.5(t,C-10),56.7(q,OCH3)。
本发明所述溴酚化合物作为酪氨酸激酶C-kit受体抑制剂的应用的活性测试:
采用酶联免疫吸附测定法(ELISA),受体激酶为C-kit,阳性对照药物Glivic(格列卫)。
按C-kit试剂盒的说明,将化合物样品稀释成一定浓度(1μg/ml)加入到96孔板中,除空白孔外,分别加入100μl血清标本,再加入生物素化抗体工作夜50μl,混匀后于25℃孵育60min,洗板4次,分别于各孔(包括空白孔)加入辣根过氧化酶标记的亲和素100μl,于25℃孵育30min,在各孔中分别加底物显色液(OPD)100μl,避光室温孵育15min后,每孔加终止液(1.8N硫酸)100μl,并立即于检测仪中测定490nm的吸光度来检测底物磷酸化。
表1对受体酪氨酸激酶C-kit活性的抑制率(%)
实验结论:本发明化合物对蛋白质酪氨酸激酶有较好的抑制作用,可用于高表达C-kit受体的恶性肿瘤的防治。
本发明所述溴酚化合物在恶性肿瘤药物中的应用的测试:
1、实验材料
瘤株:鼠源性B16Fo黑色素瘤细胞株,山东医学科学院药物研究所药理室提供。
实验动物:C57BL/6J小鼠,40只,雌雄各半,体重15±2g,SPF级,饲养于25℃,相对湿度为50%左右的SPF环境中,按SPF级条件饲养。由青岛市实验动物中心提供。
2、试验方法
(1)荷瘤鼠造模:将B16黑色素瘤细胞悬浊液浓度调为1.0×107个细胞/ml,在每只小鼠左侧背部皮下注射B16Fo黑色素瘤细胞悬浊液0.1ml(1.0×106个细胞),整个操作过程30min内完成;24h后随机分为4组,10只/组,雌雄各半,分笼喂养。
(2)分组与给药
受试组:本发明化合物,用体积浓度30%的二甲基亚砜(DMSO)溶解,按照150mg/kg剂量稀释成相应的给药浓度;
空白对照组:体积浓度30%的二甲基亚砜(DMSO);
阳性对照组:60mg/kg的氮烯咪胺
从接种第五天开始,连续每天腹腔注射(i.p)给药,观察小鼠生长情况,共给药14天,末次给药24h后,取瘤块称重,计算肿瘤生长的抑制率(抑瘤率)。
(3)检测指标
抑瘤率(%)=(空白对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/(空白对照组平均瘤重)×100%
结果见表2,动物实验结果显示,本发明化合物组平均瘤重、阳性对照组均明显低于空白对照组,统计分析结果表明,差异有显著性。表中“*”表示与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05)。
表2小鼠瘤重及抑瘤率(±S,n=10)
注:P<0.05
应用例1
取上述实施例制备的化合物1克,加入赋形剂药用淀粉29克,混合均匀,制颗粒,整粒压片,制得片剂100片,每片含化合物10毫克。
应用例2
取上述实施例制备的化合物2克,加入到蒸馏水1998克,加入矫味剂和防腐剂适量,制成口服液,每毫升含化合物10毫克。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种溴酚化合物,其特征在于,所述溴酚化合物的结构式如下:
2.如权利要求1所述的溴酚化合物用于制备恶性肿瘤药物的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210387080.1A CN102911182B (zh) | 2012-10-12 | 2012-10-12 | 一种溴酚化合物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210387080.1A CN102911182B (zh) | 2012-10-12 | 2012-10-12 | 一种溴酚化合物及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102911182A CN102911182A (zh) | 2013-02-06 |
CN102911182B true CN102911182B (zh) | 2014-12-10 |
Family
ID=47609783
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210387080.1A Expired - Fee Related CN102911182B (zh) | 2012-10-12 | 2012-10-12 | 一种溴酚化合物及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102911182B (zh) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020155443A1 (en) * | 2000-01-25 | 2002-10-24 | Kerwin Sean M. | Metal binding DNA interactive compounds |
CN101342158A (zh) * | 2007-07-13 | 2009-01-14 | 中国科学院海洋研究所 | 两种溴酚类化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
CN101342157A (zh) * | 2007-07-13 | 2009-01-14 | 中国科学院海洋研究所 | 海洋溴酚化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
-
2012
- 2012-10-12 CN CN201210387080.1A patent/CN102911182B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020155443A1 (en) * | 2000-01-25 | 2002-10-24 | Kerwin Sean M. | Metal binding DNA interactive compounds |
CN101342158A (zh) * | 2007-07-13 | 2009-01-14 | 中国科学院海洋研究所 | 两种溴酚类化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
CN101342157A (zh) * | 2007-07-13 | 2009-01-14 | 中国科学院海洋研究所 | 海洋溴酚化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Xiuli Xu,等.Dibenzyl Bromophenols with Diverse Dimerization Patterns from the Brown Alga Leathesia nana.《J. Nat. Prod.》.2004,第67卷(第10期),第1661-1666页. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102911182A (zh) | 2013-02-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107929276A (zh) | 一种紫杉醇和cdks激酶抑制剂联合用药物组合物 | |
CN103304635B (zh) | 一种环肽类化合物抗肿瘤的应用及其制备方法 | |
CN101342158B (zh) | 两种溴酚类化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 | |
CN101591322B (zh) | 细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂黄芩黄酮有机胺衍生物及其制法和用途 | |
CN101342157A (zh) | 海洋溴酚化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 | |
CN102911182B (zh) | 一种溴酚化合物及其应用 | |
CN115590914B (zh) | 一种红大戟提取物及其在制备抗乳腺癌药物中的应用 | |
CN102532154B (zh) | 隆萼当归线型呋喃香豆素化合物及其应用 | |
CN107383150B (zh) | 一种具有抗肝损伤活性的化合物及其制备方法和用途 | |
CN104147033A (zh) | 一种含有米氏海参皂苷a的组合物及制备和用途 | |
CN111217825B (zh) | 4-o-氨丙基土甘草a衍生物及其制备及应用 | |
CN101283998B (zh) | 溴酚类化合物在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 | |
Fu et al. | Design, synthesis, and activity assays of cyclin-dependent kinase 1 inhibitors with flavone scaffolds | |
CN101289453B (zh) | 鞣花酸化合物的制备方法 | |
CN105732736B (zh) | 一种苯丙素类化合物的制备方法 | |
CN102276683B (zh) | 一种菝葜皂苷化合物 | |
CN108619145A (zh) | 化合物在***中的应用 | |
CN103880793B (zh) | 含呋喃亚胺类化合物及其制备方法和用途 | |
CN103467479A (zh) | 螺环化合物、其组合物、其制备方法和用途 | |
CN103833766B (zh) | 阿格拉滨二甲胺富马酸盐及其在药物制备中的用途 | |
CN111909119B (zh) | 雷公藤来源化合物及其应用和制备方法、药物组合物、杀虫剂 | |
CN108721260B (zh) | 海桐花苷a1在制备治疗人肝癌的药物方面的应用 | |
CN109172553B (zh) | 海桐花苷a1用于制备治疗人结肠癌的药物的用途 | |
CN108721261B (zh) | 海桐花苷a1或海桐花苷a2在制备治疗乳腺癌的药物中的应用 | |
CN102160868B (zh) | 黄芪皂苷ⅳ在制备抗肝癌药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20141210 Termination date: 20151012 |
|
EXPY | Termination of patent right or utility model |