CN102876756B

CN102876756B - 一种低聚木糖联产乳酸的工艺

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Publication number: CN102876756B
Application number: CN201210378326.9A
Authority: CN
Inventors: 勇强; 张丽; 李鑫; 李寒; 余世袁; 欧阳嘉; 徐勇
Original assignee: Nanjing Forestry University
Current assignee: Nanjing Forestry University
Priority date: 2012-09-29
Filing date: 2012-09-29
Publication date: 2014-04-02
Anticipated expiration: 2032-09-29
Also published as: CN102876756A

Abstract

本发明公开了一种低聚木糖联产乳酸的工艺，以玉米芯制备低聚木糖过程中产生的固体废渣为碳源，发酵制备乳酸。该方法包括如下步骤：(1)以经过预处理的玉米芯为原料，以真菌木聚糖酶为初始酶制剂制备低聚木糖；(2)再以步骤(1)生产过程中产生的固体废渣为原料，以真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶为酶制剂，经米根霉发酵制备乳酸。本发明方法通过内切木聚糖酶定向酶解碱抽提玉米芯的半纤维素制备低聚木糖，低聚木糖生产废渣制备乳酸，为微生物酶法低聚木糖制备工艺及乳酸发酵提供了一个低成本的新途径。

Description

一种低聚木糖联产乳酸的工艺

技术领域

本发明属生物化学中的微生物酶解制糖技术和微生物发酵领域，具体涉及利用原料玉米芯生产低聚木糖联产乳酸的工艺。

背景技术

低聚糖，是由2～10个单糖通过糖苷键连接而成的低聚合度糖类。低聚糖分普通低聚糖和功能性低聚糖两类，功能性低聚糖是指具有特殊的生物学功能，尤其能够显著促进人或动物肠道内双歧杆菌增殖，有益于人或动物健康的一类低聚糖，即所谓的双歧因子。除了能够促进肠道内双歧杆菌等有益菌特异性增殖外，功能性低聚糖另一个重要的生物学功能是刺激人或动物体内的免疫***，从而提高人或动物体的免疫力。

低聚木糖又称木寡糖，是功能性低聚糖的一种，由2～7个木糖分子以β-1,4-糖苷键连接而成的聚合物的总称，是目前所有低聚糖中“性能最稳定、增殖双歧杆菌效价比最高”益菌因子，被称为“超强双歧因子”。利用内切木聚糖酶水解木聚糖底物得到的以木二糖、木三糖为主要成分的混合物，因此酶解法的关键在于木聚糖酶对底物的适应性，即选择合适的木聚糖酶。生物酶法降解反应速度易于控制、专一性强且副产物少。酶法制备是目前生产低聚木糖的主要方法，是最具有工业应用前景的方法。

玉米芯经预处理后，抽提液富含半纤维素，半纤维素是一种丰富的取之不尽、用之不竭的再生性的植物资源。半纤维素是由多种糖基（木糖基、葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基、***糖基和鼠李糖基等），糖醛酸基（半乳糖醛酸基和葡萄糖醛酸基等）和乙酰基所组成的，并且分子中往往带有支链的复合聚糖的总称。木聚糖是半纤维素的重要组成部分，是由β-1,4-糖苷键连接β-D-吡喃型木糖单元构成主链，当其来源或分支程度不同时，主链或侧链上则带有多种不同的取代基，因此木聚糖分子的结构变化范围较大。内切β-木聚糖酶主要作用于大分子木聚糖和较长链的低聚糖，主要产物是低聚木糖。低聚木糖成为当今备受关注的功能性食品。

玉米芯经预处理后，半纤维素组分用来制备低聚木糖，低聚木糖生产废渣一般与煤混合，用作燃料，或做成草纸。

乳酸，学名2-羟基丙酸，是世界上公认的三大有机酸之一。由于乳酸与深加工产品应用领域的开拓，已使它在全世界范围内供不应求，市场缺口迅速扩大。L-乳酸除了具备普通乳酸的性质以外，另外还有独特的生化价值，被广泛地应用于食品、医药、化工等行业。人体内只含有L-乳酸脱氢酶，所以人体只能利用L-乳酸。目前发酵法生产L-乳酸得到了迅速推广，其原因之一是生产原料为丰富的葡萄糖、淀粉等。但是用葡萄糖、淀粉为原料生产成本依然较高，限制了L-乳酸的应用，尤其是限制了聚乳酸作为可降解塑料在环保领域的应用。围绕降低L-乳酸生产成本，以选择廉价、广泛的纤维素为原料生产L-乳酸成为研究热点之一。利用低聚木糖生产废渣来制备乳酸，实现了废弃资源的有效利用。

发明内容

本技术的发明所要解决的技术问题，是提供一种低聚木糖联产乳酸的工艺。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种低聚木糖联产乳酸的工艺，以玉米芯制备低聚木糖过程中产生的固体废渣为碳源，发酵制备乳酸。该方法包括如下步骤：

(1)以经过预处理的玉米芯为原料，以真菌木聚糖酶为初始酶制剂制备低聚木糖；

(2)再以步骤(1)生产过程中产生的固体废渣为原料，以真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶为酶制剂，经米根霉发酵制备乳酸。

步骤(1)，预处理可以是碱抽提等可将半纤维素和纤维素分开的方法，可以采用物理、化学、生物或以上几种方法联合应用的预处理方法，目的是分离出来的半纤维素成分可用来制备低聚木糖，低聚木糖生产废渣用来制备乳酸。

步骤(1)，真菌木聚糖酶可以直接在市场上购买，或者采用里氏木霉（Trichodermareesei）、黑曲霉（Aspergillus niger）、绿色木霉（Trichoderma viride）或康氏木霉(Trichoderma koningii）分泌的木聚糖酶自制。

步骤(1)的具体方法见【徐勇,陈牧,余世袁,等.木聚糖酶水解制取低聚木糖的研究.林产化学与工业.2002,22(2):57-60.】。步骤生产过程中产生的所有固体废渣都可以用于乳酸的发酵。

步骤(2)，具体有两种方法：

方法I，分步糖化和发酵。将步骤(1)生产过程中产生的固体废渣与真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合，加入水，混合至固液重量比为1:5～20，调节pH值为5.0±0.5，于50±5℃下搅拌水解48~96h；再将水解物于40℃下搅拌48~96h经米根霉发酵生产乳酸，再经脱色制得。

其中，所述的水解物可以是水解反应后不经过固液分离的液体和固体的混合物，也可以是水解反应后经过固液分离得到的上清液即酶解葡萄糖溶液。

方法II，同步糖化和发酵。将步骤(1)生产过程中产生的固体废渣与真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合，加入水和菌种米根霉，混合至固液重量比为1:5～20，调节pH值为5.0±0.5，于40℃下搅拌水解48~96h实现同步糖化发酵生产乳酸，再经脱色制得。

方法I和II中，对于每g纤维素，纤维素酶的用量为15FPIU/g，β-葡萄糖苷酶的用量为8IU/g。固体废渣中的纤维素量可以根据美国国家可再生能源实验室（NREL）方法定量分析。

方法I和II中，pH的调节可以使用pH缓冲液或酸，可以是磷酸/磷酸钠缓冲液、醋酸/醋酸钠缓冲液、柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液或硫酸、盐酸等。

方法I和II中，真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶可以直接在市场上购买，或者是由真菌的木霉属（Trichoderma）、曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）和镰孢菌属（Fusarium）分泌的纤维素酶和β-葡萄糖苷酶自制。

方法I和II中，所述的米根霉可以是无载体固定化形成的颗粒。

方法I和II中，所述的乳酸脱色采用活性炭脱色法，可以使用粉末活性炭或者颗粒活性炭。

方法I和II中，搅拌可以用摇床振荡替换。

方法I和II中，发酵生产乳酸的过程中需要添加氮源及发酵所需的无机盐，添加的物质和用量本领域技术人员可根据乳酸发酵的现有技术确定。

本发明的有益效果：本发明方法通过内切木聚糖酶定向酶解碱抽提玉米芯的半纤维素制备低聚木糖，低聚木糖生产废渣制备乳酸，为微生物酶法制备低聚木糖工艺及乳酸发酵提供了一个低成本的新途径。

附图说明

图1为米根霉利用低聚木糖生产废渣酶解液分步糖化发酵制备乳酸；乳酸得率（%）=乳酸浓度/(初始糖浓度-残糖浓度)*100%。

图2为米根霉利用低聚木糖生产废渣带渣酶解液分步糖化发酵制备乳酸；乳酸得率（%）=乳酸浓度/(初始糖浓度-残糖浓度)*100%。

图3为米根霉利用低聚木糖生产废渣同步糖化发酵制备乳酸；乳酸得率（g/g）=乳酸浓度/(绝干*纤维素含量)。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。

实施例提及的产木聚糖酶、纤维素酶、β-葡萄糖苷酶微生物及由产木聚糖酶微生物发酵制备木聚糖酶的方法，产纤维素酶微生物发酵制备纤维素酶的方法，产β-葡萄糖苷酶微生物发酵制备β-葡萄糖苷酶的方法均为本领域技术人员公知的技术。

实施例1：

纤维素酶的制备：

1.里氏木霉菌丝体培养基成分（g/L）：葡萄糖10.0；蛋白胨1.0；硫酸铵1.4；尿素0.3；磷酸二氢钾2.0；无水氯化钙0.3；七水硫酸镁0.3；七水硫酸亚铁0.005；七水硫酸锰0.0016；七水硫酸锌0.0014；氯化钴0.002。培养基用1mol/L的柠檬酸缓冲液调节pH值至4.8。

2.里氏木霉纤维素酶合成培养基成分（g/L）：葡萄糖1.0；纸浆10.0；蛋白胨1.0；硫酸铵1.4；尿素0.3；磷酸二氢钾2.0；无水氯化钙0.3；七水硫酸镁0.3；七水硫酸亚铁0.005；七水硫酸锰0.0016；七水硫酸锌0.0014；氯化钴0.002。培养基用1mol/L的柠檬酸缓冲液调节pH值至4.8。

3.里氏木霉菌丝体的培养：50mL菌丝体培养基置于250mL三角瓶中，于121℃下灭菌15min，冷却至室温，接入适量保藏于试管斜面的里氏木霉孢子，摇瓶置于恒温摇床中于30±1℃、170r/min条件下培养36h后备用。

4.里氏木霉纤维素酶的制备：培养基于121℃下灭菌15min，冷却至室温，接入上述培养36h的里氏木霉菌丝体，置于恒温摇床中于170r/min条件下培养，培养温度第一天控制在30±1℃，以后控制在28±1℃。

5.培养4天，用离心机在3000r/min条件下离心10min将培养液中的固体物质（菌体和未被利用的纸浆纤维）分离除去，即得纤维素酶酶液。

β-葡萄糖苷酶的制备：

1.黑曲霉种母培养基成分（g/L）：葡萄糖1.0；蛋白胨5。每瓶加入微量元素0.05ml，Mandels营养盐浓液5ml，吐温802滴。培养基用1mol/L的柠檬酸缓冲液调节pH值至4.8。

2.黑曲霉产β-葡萄糖苷酶培养基成分（g/L）：玉米芯35；麸皮15；葡萄糖1.0；磷酸二氢钾2.0；氯化钙0.3；硫酸镁0.3；硫酸铵2.11；尿素1.9；蛋白胨5。每瓶加入微量元素0.05mL，吐温802滴。每个三角瓶接5mL种母，1mL氮源。培养基用1mol/L的柠檬酸缓冲液调节pH值至4.8。

3.黑曲霉菌丝体培养条件：50mL菌丝体培养基置于250mL三角瓶中，于121℃下灭菌15min，冷却至室温，接入适量保藏于试管斜面的黑曲霉孢子，摇瓶置于恒温摇床中于30±1℃、170r/min条件下培养36h后备用。

4.黑曲霉β-葡萄糖苷酶的制备：培养基于121℃下灭菌15min，冷却至室温，接入上述培养36h的黑曲霉菌丝体，置于恒温摇床中于170r/min条件下培养，培养温度第一天控制在30±1℃，以后控制在28±1℃。

5.培养10天，用离心机在3000r/min条件下离心10min将培养液中的固体物质（菌体和未被利用的玉米芯、麸皮）分离除去，即得β-葡萄糖苷酶酶液。

滤纸酶活力的测定：采用国际理论和应用化学协会（IUPAC）推荐的标准方法测定。实验条件：底物Whatman No.1滤纸50mg，加入适当稀释倍数的酶液和缓冲液，使反应体系pH值为4.8，于50℃、振荡频率80r/min的往复式恒温振荡器中反应60min，测定反应生成的葡萄糖量。一个滤纸酶活力的单位（FPIU）定义为标准反应条件下每分钟生成1μmol葡萄糖的酶量。

内切葡聚糖酶活力的测定：内切葡聚糖酶活力通常用羧甲基纤维素酶活力表示。实验条件：底物1%（w/v）的羧甲基纤维素悬浮液，加入适当稀释倍数的酶液和缓冲液，使反应体系pH值为4.8，于50℃、振荡频率80r/min的往复式恒温振荡器中反应30min，测定反应生成的葡萄糖量。一个羧甲基纤维素酶活力的单位（IU）定义为标准反应条件下每分钟生成1μmol葡萄糖的酶量。

β-葡萄糖苷酶活力的测定：采用对硝基苯基-β-D-葡萄糖苷（pNPG）为底物测定。0.1mL适当稀释的酶液与0.9mL 5mmol/L的pNPG溶液（由0.05mol/L、pH值为4.8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液配制）混合后，于50℃、振荡频率80r/min的往复式恒温振荡器中反应10min后立即加入2mL 1mol/L的Na₂CO₃溶液终止反应，再加入10mL蒸馏水，摇匀。于400nm下测定吸光度。以0.1mL蒸馏水代替酶液作空白对照。每个样品做2～3个平行样，取平均值。一个β-葡萄糖苷酶活力单位（IU）定义为标准反应条件下每分钟生成1μmol对硝基苯酚所需的酶量。

也可以用木霉属（Trichoderma）、曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）和镰孢菌属（Fusarium）的菌种采用相似的方法制备获取纤维素酶、β-葡萄糖苷酶。

内切木聚糖酶的制备及分离纯化见已有专利。

实施例2：低聚木糖生产及纤维素原料的获取。

玉米芯提取木聚糖后的残渣，主要成分为纤维素，其含量为71.87%（干基），水分含量为72.94%，是一种很好的纤维素资源。同时，玉米芯碱抽提木聚糖的过程实际上也是一个纤维质原料碱预处理的过程。因此，玉米芯经碱抽提后，无需再预处理就可以作为乳酸生产的原料，直接进行纤维素酶的水解。其原料的获取过程如下：

1.称取50gNaOH充分溶解于702mL蒸馏水中，加入粉碎粒度为0.5～1cm的风干玉米芯112g（绝干100g），于90℃下反应3h。

2.上述反应物真空抽滤除去木聚糖抽提液，用500mL水抽滤洗涤，弃去洗涤液。木聚糖抽提液用来制备低聚木糖。

3.上述滤渣中加入300mL蒸馏水，用72%（w/v）的硫酸中和至pH值5.0±0.5，真空抽滤，并用900mL蒸馏水分3次洗涤、抽滤，得到低聚木糖生产废渣。

该低聚木糖生产废渣就是本技术所需要的乳酸生产原料；预处理的目的是抽提出木聚糖，同时提高纤维质原料中纤维素对纤维素酶的可及度，可以采用物理、化学、生物或以上几种方法联合应用的可以将半纤维素、纤维素有效分离的预处理方法。

实施例3：分步糖化发酵制备乳酸。

1.米根霉利用实施例2的低聚木糖生产废渣分步糖化发酵制备乳酸。低聚木糖生产废渣放置在4℃冰箱平衡水分两天，测水分、抽提后测三素。分别称取实施例2的低聚木糖生产废渣18.48g（绝干重5g，其中纤维素3.59g，水分13.48g）于250mL三角瓶中，加入纤维素酶液0.45g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.08g（酶加量8IU/g纤维素），加入缓冲液和蒸馏水，控制体系固液重量比为1:20、即水分体积为100g、pH5.0±0.5，置于150r/min的摇床中于温度50±5℃条件下酶解48h。

2.取样1mL，在100℃水浴中灭活5min，10000r/min下离心5min，取上清液适当稀释后测定其中的可发酵糖的浓度。

3.酶解液离心取酶解清液。

4.发酵基础培养基(g/L)：葡萄糖50；硫酸铵3；碳酸钙10（单独灭菌）；磷酸二氢钾0.30；七水硫酸镁0.75；七水硫酸锌0.20；自然pH。取一新鲜的斜面活化菌种，向斜面培养基加入10mL无菌水（分两次），用接种环刮下孢子，制成孢子悬浮液。250mL的三角瓶装入50mL发酵基础培养基，接入孢子悬浮液5mL，置于30℃、170r/min的摇床培养12h。

5.发酵培养基(g/L)：以低聚木糖生产废渣酶解液为碳源；硫酸铵2；碳酸钙30（单独灭菌）；磷酸二氢钾0.30；七水硫酸镁0.75；七水硫酸锌0.20；自然pH。发酵0h后加入碳酸钙（研磨）。上述培养基均在0.1MPa，121℃条件下灭菌15min。250mL的三角瓶装入100mL发酵培养基，每瓶接入5mL发酵基础培养基，置于40℃、170r/min的摇床培养48h。将发酵液取1mL于1.5mL的离心管中，100℃水浴中灭活5min，取下后加入100μl的72%的硫酸，在10000rpm下离心5min，然后取上清液用蒸馏水稀释，再用注射器通过0.22μm的膜打入色谱瓶中，酶解液中可发酵糖浓度、乳酸用高效液相色谱法（HPLC）进行检测。色谱条件如下：色谱仪：Agillent1100高效液相色谱仪；色谱柱：Bio-Rad Aminex HPX-87H；流动相：0.005mol/L硫酸，流速：0.6mL/min；柱温：55℃；检测器：示差折光检测器；进样量：10μL。外标法测定。以经过固液分离后得到上清液即酶解葡萄糖溶液为碳源分步糖化发酵制备乳酸结果见图1。以不经过固液分离的带渣酶解液为碳源分步糖化发酵制备乳酸结果见图2。

实施例4：分步糖化发酵制备乳酸。

米根霉利用实施例2的低聚木糖生产废渣分步糖化发酵制备乳酸。低聚木糖生产废渣放置在4℃冰箱平衡水分两天，测水分、抽提后测三素。分别称取实施例2的低聚木糖生产废渣36.95g（绝干重10g，其中纤维素7.19g，水分26.95g）于250mL三角瓶中，加入纤维素酶液0.90g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.16g（酶加量8IU/g纤维素），加入缓冲液和蒸馏水，控制体系固液重量比为1:10、即水分体积为100g、pH5.0±0.5，置于150r/min的摇床中于温度50±5℃条件下酶解60h。

可发酵糖、乳酸测定方法及发酵基础培养基、发酵培养基组成见实施例3。

实施例5：分步糖化发酵制备乳酸。

米根霉利用实施例2的低聚木糖生产废渣分步糖化发酵制备乳酸。低聚木糖生产废渣放置在4℃冰箱平衡水分两天，测水分、抽提后测三素。分别称取实施例2的低聚木糖生产废渣73.91g（绝干重20g，其中纤维素14.37g，水分53.91g）于250mL三角瓶中，加入纤维素酶液1.80g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.32g（酶加量8IU/g纤维素），加入缓冲液和蒸馏水，控制体系固液重量比为1:5、即水分体积为100g、pH5.0±0.5，置于150r/min的摇床中于温度50±5℃条件下酶解96h。

实施例6：同步糖化发酵制备乳酸。

以低聚木糖生产废渣为碳源同步糖化发酵（SSF）制备乳酸，发酵基础培养基如实施例3，称取低聚木糖生产废渣18.48g（绝干重5g，其中纤维素3.59g，水分13.48g）于250mL三角瓶中，每个三角瓶中加入1mol/L柠檬酸缓冲液控制pH 5.0±0.5，加入营养盐、蒸馏水。营养盐（g/L）：硫酸铵2；碳酸钙30（单独灭菌）；磷酸二氢钾0.30；七水硫酸镁0.75；七水硫酸锌0.20；发酵12h后加入碳酸钙（研磨）。0.1MPa，121℃条件下灭菌15min后同时加入纤维素酶液0.45g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.08g（酶加量8IU/g纤维素）和发酵基础培养基，控制体系固液重量比为1:20，使液体总体积为100g。充分搅拌均匀后，置于40℃，170r/min的摇床中SSF 48h。乳酸测定方法如实施例3。结果见图3。

实施例7：同步糖化发酵制备乳酸。

以低聚木糖生产废渣为碳源同步糖化发酵（SSF）制备乳酸，发酵基础培养基如实施例3，称取低聚木糖生产废渣36.95g（绝干重10g，其中纤维素7.19g，水分26.95g）于250mL三角瓶中，每个三角瓶中加入1mol/L柠檬酸缓冲液控制pH 5.0±0.5，加入营养盐、蒸馏水。营养盐（g/L）：硫酸铵2；碳酸钙30（单独灭菌）；磷酸二氢钾0.30；七水硫酸镁0.75；七水硫酸锌0.20；发酵12h后加入碳酸钙（研磨）。0.1MPa，121℃条件下灭菌15min后同时加入纤维素酶液0.90g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.16g（酶加量8IU/g纤维素）和发酵基础培养基，控制体系固液重量比为1:10，使液体总体积为100g。充分搅拌均匀后，置于40℃，170r/min的摇床中SSF 60h。乳酸测定方法如实施例3。

实施例8：同步糖化发酵制备乳酸。

以低聚木糖生产废渣为碳源同步糖化发酵（SSF）制备乳酸，发酵基础培养基如实施例3，称取73.91g（绝干重20g，其中纤维素14.37g，水分53.91g）于250mL三角瓶中，每个三角瓶中加入1mol/L柠檬酸缓冲液控制pH 5.0±0.5，加入营养盐、蒸馏水。营养盐（g/L）：硫酸铵2；碳酸钙30（单独灭菌）；磷酸二氢钾0.30；七水硫酸镁0.75；七水硫酸锌0.20；发酵12h后加入碳酸钙（研磨）。0.1MPa，121℃条件下灭菌15min后同时加入纤维素酶液1.80g（酶加量15FPIU/g纤维素），β-葡萄糖苷酶0.32g（酶加量8IU/g纤维素）和发酵基础培养基，控制体系固液重量比为1:5，使液体总体积为100g。充分搅拌均匀后，置于40℃，170r/min的摇床中SSF 96h。乳酸测定方法如实施例3。

实施例9：无载体固定化。

以低聚木糖生产废渣为碳源进行分步糖化发酵，酶解和发酵步骤如实施例3，发酵一轮后，菌种采用48h后纱布过滤得到的米根霉颗粒，加入低聚木糖生产废渣的酶解液作为新鲜培养基，重复发酵多轮制备乳酸。

实施例10：乳酸脱色。

分步糖化发酵和同步糖化发酵制备的乳酸脱色，脱色条件为在50℃80r/min下反应30min，添加颗粒活性炭、粉末活性炭或者漆酶进行脱色。固液重量比为1:20的体系发酵制备乳酸的脱色效果见表1、2。

表1 分步糖化发酵乳酸脱色的研究

表2 同步糖化发酵乳酸脱色的研究

注：A为脱色前在420nm的吸光度；B为脱色后在420nm吸光度；C为脱色前乳酸浓度；D为脱色后乳酸浓度。

Claims

1.一种低聚木糖联产乳酸的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(2)再以步骤(1)生产过程中产生的固体废渣为碳源，以真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶为酶制剂，经米根霉发酵制备乳酸；

步骤(2)，具体方法为将步骤(1)生产过程中产生的固体废渣与真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合，加入水和米根霉，混合至固液重量比为1:5～20，调节pH值为5.0±0.5，于40℃下搅拌水解48～96h实现同步糖化发酵生产乳酸，再经脱色制得。

2.根据权利要求1所述的低聚木糖联产乳酸的方法，其特征在于，对于每g纤维素，纤维素酶的用量为15FPIU/g，β-葡萄糖苷酶的用量为8IU/g。

3.根据权利要求1所述的低聚木糖联产乳酸的方法，其特征在于，真菌纤维素酶和β-葡萄糖苷酶是由真菌的木霉属（Trichoderma）、曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）和镰孢菌属（Fusarium）分泌的纤维素酶和β-葡萄糖苷酶。

4.根据权利要求1所述的低聚木糖联产乳酸的方法，其特征在于，所述的米根霉是无载体固定化形成的颗粒。

5.根据权利要求1所述的低聚木糖联产乳酸的方法，其特征在于，所述的乳酸脱色采用活性炭脱色法。