CN102858191A - 6’-唾液酸化乳糖在婴儿和幼儿营养物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了为婴儿和幼儿提供营养的营养组合物，其中应用了合适的6’-SL绝对量以及6’-SL比3’-SL的相对量。
Description
技术领域
本发明属于婴儿和幼儿营养物的领域。
背景技术
唾液酸化低聚糖存在于哺乳动物的乳中并已经被发现具有生物学重要性。已知它们具有益生元活性，并被描述有双歧杆菌生长效应（bifidogenic effect）。已知唾液酸化低聚糖还具有抗粘着效应，从而在抑制或预防由病原体和/或毒素引起的肠道感染中起着重要作用。已知唾液酸化低聚糖在例如牛乳中的浓度很低，然而在人乳中浓度非常高。由于大多数婴儿配方是以牛乳成分制备的，所以与母乳喂养的婴儿相比，配方喂养的婴儿具有较低的唾液酸化低聚糖摄入量。唾液酸化低聚糖的重要成员是3’-唾液酸化乳糖（3’-SL）和6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）。
Martín-Sosa et al(2003)J Dairy Sci 86:52-59进行了一项关于在哺乳期不同阶段中牛乳和人乳的唾液酸化低聚糖含量的对比研究。
Asakuma et al.(2007)Biosci Biotechnol Biochem,71(6):1447-1451研究了在哺乳期前三天中人初乳中的唾液酸化低聚糖浓度的变化。发现3’-唾液酸化乳糖的浓度在第1天明显高于第2天和第3天，并且在产后前三天中3’-SL的平均浓度约为297mg/L。6’-唾液酸化乳糖的水平在第3天高于第1天，在产后前三天中6’-SL的平均浓度为370mg/L。
WO 2009/059996涉及用于预防病毒感染后的继发感染的营养组合物，包括唾液酸化低聚糖，特别是3’-SL和6’-SL。
鉴于为了制备尽可能类似于人乳的婴儿和幼儿食品的目的，本领域已认识到，使这类食物富含含有唾液酸的低聚糖，优选唾液酸化乳糖。考虑到这点，例如在WO 2009/113861中描述了从乳中分离特别是唾液酸化乳糖以便使婴儿营养物富含唾液酸化乳糖的方法。并不区分3’-SL和6’-SL。
发明内容
本发明人惊奇地发现，为了与实际存在于人乳中的6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）数量相一致，需要在婴儿配方中配制比现今所用的更高量的6’-SL。
进一步地，本发明人还发现，与现今应用于婴儿配方的3’-SL和6’-SL的相对量或比例相比，实际存在于人乳中的3’-唾液酸化乳糖（3’-SL）与6’-SL的相对量变为3’-SL占相对较低的比例。
因此，概括来说，本发明人发现，为了尽可能类似于人乳并为了优选地达到唾液酸化低聚糖（优选为6’-SL和3’-SL）的更加最佳的益生元活性、双歧杆菌生长效应和/或抗粘着效应，婴儿配方需要以不同于当前做法进行配制，特别是关于唾液酸化低聚糖（优选为6’-SL和3’-SL）的量。在这样做时，将实现改善的肠道生理和/或健康，优选地实现在抑制或预防由病原体和/或毒素引起的肠道感染方面的改善。
具体实施方式
因此，本发明涉及一种为婴儿提供营养的方法，所述方法包括给予一种包含至少1g/L 6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）的组合物，其中6’-SL:3’-SL的重量比高于2。
本发明还可以表述为，涉及一种包含6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）的组合物用于制备为婴儿提供营养的营养组合物中的用途，所述营养组合物包含至少1g/L 6’-SL，其中6’-SL:3’-SL的重量比高于2。
本发明还可以表述为，一种用于为婴儿提供营养的包含至少1g/L6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）的组合物，其中6’-SL:3’-SL的重量比高于2。
本发明还涉及一种营养组合物，优选为一种婴儿配方，其包含提供总卡路里的35%-50%的脂质，提供总卡路里的7.5%-12.5%的蛋白质，以及提供总卡路里的40%-55%的消化性碳水化合物，进一步地包含至少1g/L 6’-SL，其中6’-SL:3’-SL的比例高于2。
6’-SL
所述本发明营养组合物优选地包含至少1g/L 6’-SL，更优选地至少1.1g/L。这个浓度更像人乳，通常应用于婴儿乳配方中，并因此是优选的。所述本发明营养组合物优选地包含少于3g/L 6’-SL，更优选地少于2.5g/L，更优选地少于2g/L，更优选地少于1.5g/L 6’-SL，更优选地在1.1g/L到1.5g/L之间，更优选地在1.1g/L到1.4g/L之间，更优选地在1.2g/L到1.4g/L之间。
所述本发明营养组合物进一步优选地包括3’-SL，并且6’-SL:3’-SL的重量比高于2。优选地，6’-SL:3’-SL的重量比高于2.5，优选地高于2.8，优选地高于3，优选地高于3.5，优选地高于4。优选地，6’-SL:3’-SL的重量比低于6。优选地低于5.5，优选地低于5。优选地，6’-SL:3’-SL的重量比在2.5到5.5之间，优选地在3到5之间。
在一个实施方案中，所述本发明组合物包含基于所述组合物总干重计至少0.7wt%的6’-SL，优选地基于所述组合物总干重计在0.7wt%到2.1wt%之间，优选地在0.8wt%到1.5wt%之间，优选地在0.85wt%到1.0wt%之间。
所述本发明营养组合物可以通过制备婴儿乳配方的方法制备，所述方法包括a)添加来自牛乳的非可消化性低聚糖，b)添加6’-SL。
6’-SL是市售可得的并可以从Sigma-Aldrich购买。6’-SL还可以通过经新陈代谢改造的大肠杆菌（E.coli）来合成，所述大肠杆菌表达发光杆菌属（Photobacterium sp.）JT-ISH-224的一种多功能唾液酸转移酶，如Drouillard等人提交给目前在版的Carbohydrate Research中所描述。校正的证据可获自http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6TFF-4YG1M15-1&user=3112367&coverDate=02%2F24%2F2010&rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=1311365313&_rerunOrigin=scholar.***&_acct=C000059787&_version=1&urlVersion=0&userid=3112367&md5=ec8dccad77c1e06a5b102da46d8403b6。
除6’-唾液酸化乳糖和3’-唾液酸化乳糖之外的非可消化性低聚糖
所述营养组合物优选地包括除6’-SL和3’-SL之外的非可消化性低聚糖（NDO，non-digestible oligosaccharides）。优选地，所述除6’-SL和3’-SL之外的NDO刺激双歧杆菌和/或乳酸杆菌的生长，更优选为刺激双歧杆菌的生长。双歧杆菌和/或乳酸杆菌含量的增加刺激健康肠道菌群的形成。所述NDO优选地在肠中不被消化，或者仅部分地被消化，所述消化是通过存在于人上消化道（特别是小肠和胃中）的酸或消化酶的作用而进行，所述NDO通过人肠道菌群发酵。例如，蔗糖、乳糖、麦芽糖和常见的麦芽糖糊精被认为是可消化的。
优选地，所述本发明组合物包含DP在2到250范围内，更优选为2到60的非可消化性低聚糖。所述非可消化性低聚糖优选为选自以下成分的至少一种，更优选为至少两种，优选为至少三种：低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚***糖、低聚***糖半乳糖、低聚葡萄糖、低聚壳糖、低聚葡萄糖甘露糖、低聚半乳糖甘露糖、低聚甘露糖、含唾液酸的低聚糖以及糖醛酸低聚糖。低聚果糖的组包括菊粉，低聚半乳糖的组包括反式低聚半乳糖或β-低聚半乳糖，低聚葡萄糖的组包括环糊精、龙胆低聚糖和黑曲霉低聚糖以及非可消化性聚葡萄糖，低聚半乳糖甘露糖的组包括部分水解的瓜尔胶，糖醛酸低聚糖的组包括半乳糖醛酸低聚糖和果胶降解产物。
更优选地，所述本发明组合物包括选自低聚果糖、β-低聚半乳糖和糖醛酸低聚糖中的至少一种，更优选为至少两种，最优选为三种。更优选地，所述组合物包括β-低聚半乳糖。
在一个优选的实施方案中，所述组合物包括菊粉和短链低聚果糖的混合物。在一个优选的实施方案中，所述组合物包括低聚半乳糖和低聚果糖的混合物，其中所述低聚果糖选自短链低聚果糖和菊粉，优选为菊粉。至少两种不同的非可消化性低聚糖的混合物有利地刺激了肠道菌群中的有益细菌达到更大的程度。优选地，在所述两种不同的非可消化性低聚糖（优选为低聚半乳糖和低聚果糖）的混合物中，两者的重量比在25到0.05之间，更优选地在20到1之间。低聚半乳糖（优选为β-低聚半乳糖）更能够刺激双歧杆菌。优选地，所述本发明组合物包括聚合度（DP）为2到10的低聚半乳糖（优选为β-低聚半乳糖）和/或DP为2到60的低聚果糖。
所述低聚半乳糖优选为β-低聚半乳糖。在一个特别优选的实施方案中，所述本发明组合物包括β-低聚半乳糖（[半乳糖]n-葡萄糖；其中n为从2到60的整数，即2、3、4、5、6、....、59、60；优选地n选自2、3、4、5、6、7、8、9和10），其中所述半乳糖单元主要通过β键（linkage）而连接在一起。β-低聚半乳糖也称为反式低聚半乳糖（TOS）。例如，β-低聚半乳糖是以商标Vivinal(TM)(Borculo Domo Ingredients,Netherlands)销售。另一个合适来源是Bi2Munno(Classado)。优选地，所述TOS包括基于总键数计至少80%的β-1,4和β-1,6键，更优选为至少90%。
低聚果糖为包含具有DP或平均DP为2到250，优选为2到100，甚至更优选为10到60的β-连接的果糖单元链的NDO。低聚果糖包括菊粉，果聚糖和/或混合型的多聚果糖。一种特别优选的低聚果糖是菊粉。适合用于所述组合物的低聚果糖也是市售可得的，例如Raftiline
HP(Orafti)。优选地，所述低聚果糖的平均聚DP大于20。
糖醛酸低聚糖优选地从果胶降解产物中获得。因此所述本发明组合物优选包括DP为2到100的果胶降解产物。优选地，所述果胶降解产物从苹果果胶、甜菜果胶和/或柑橘果胶中制备。优选地，所述糖醛酸低聚糖为半乳糖醛酸低聚糖。优选地，所述组合物包括FL以及选自低聚半乳糖和糖醛酸低聚糖中的一种。
除了6’-SL和3’-SL，最优选地，所述组合物包括β-低聚半乳糖、低聚果糖和糖醛酸低聚糖。发现所述结合物与6’-SL和3’-SL协同作用。β-低聚半乳糖：低聚果糖：糖醛酸低聚糖的重量比优选为(20到2):1:(1到20)，更优选为(20到2):1:(1到10)，甚至更优选为(20到2):1:(1到3)，甚至更优选为(12到7):1:(1到2)。最优选地，所述重量比约为9:1:1.1。
优选地，所述营养组合物每100ml包含100mg到4g的非可消化性低聚糖（包括6’-SL和3’-SL），更优选为500mg到3g，甚至更优选为每100ml包含800mg到2g的非可消化性低聚糖。基于干重计，所述组合物优选地包含0.5wt%到25wt%的非可消化性低聚糖（包括6’-SL和3’-SL），更优选为1wt%到15wt%，甚至更优选为5wt%到10wt%。较低量的非可消化性低聚糖在刺激菌群（microbiota）中的有益细菌方面不太有效，然而过高的量将导致胃气胀和腹部不适的副作用。
营养组合物
所述营养组合物不是人乳。所述本发明营养组合物优选经肠内给予，更优选口服给予。
所述本发明营养组合物优选为婴儿配方。所述本发明营养组合物可以有利地用作婴儿的完全营养物。所述本发明组合物优选地包含脂质成分、蛋白质成分和碳水化合物成分，并且本发明组合物优选以液体形式给予。本发明包括干燥食物，优选为粉末，其附有关于将所述干燥食物混合物与适合的液体（优选为水）混合的说明。
所述本发明营养组合物优选地包含脂质、蛋白质和消化性碳水化合物，其中所述脂质成分提供总卡路里的5%到50%，所述蛋白质成分提供总卡路里的5%到50%，所述消化性碳水化合物成分提供总卡路里的15%到85%。有利地，所述脂质成分提供总卡路里的20%到50%，所述蛋白质成分提供总卡路里的5%到30%，所述消化性碳水化合物成分提供总卡路里的30%到70%。优选地，所述脂质成分提供总卡路里的35%到50%，所述蛋白质成分提供总卡路里的7.5%到12.5%，所述消化性碳水化合物成分提供总卡路里的40%到55%。为计算所述蛋白质成分占总卡路里的%，需要考虑由所述蛋白质、肽和氨基酸所提供的总能量。
所述营养组合物优选地包含选自动物脂质（人脂质除外）和植物脂质的至少一种脂质。优选地，所述本发明组合物包括植物脂质与选自鱼油、动物油、藻油、真菌油和细菌油的至少一种油的结合物。所述本发明组合物优选地包括长链多不饱和脂肪酸（LC-PUFA）。LC-PUFA是长度为20-24个碳原子、优选为20或22个碳原子的含有两个或更多个不饱和键的脂肪酸或脂肪酰链。更优选地，所述本发明组合物包含二十碳五烯酸（EPA，n-3），二十二碳六烯酸（DHA，n-3）和/或花生四烯酸（ARA，n-6）。
优选地，所述本发明组合物包括基于总脂质含量计的至少0.1wt%，优选至少0.25wt%，更优选至少0.6wt%，甚至更优选至少0.75wt%的具有20-22个碳原子的LC-PUFA。
因为需要尽可能地模拟人乳，LC-PUFA（特别是具有20-22个碳原子的LC-PUFA）的含量，优选不超过总脂肪含量的6wt%，更优选地不超过总脂肪含量的3wt%。所述LC-PUFA可以作为游离脂肪酸提供，以甘油三酯形式，以甘油二酯形式，以甘油一酯形式，以磷脂形式，或作为以上一种或多种的混合物来提供。所述本发明组合物优选地包含基于总脂肪计的5wt%-75wt%，优选10wt%-50wt%的多不饱和脂肪酸。
所述营养组合物中的蛋白质优选地选自：非人的动物蛋白质（优选为乳蛋白质）、植物蛋白质（优选为大豆蛋白质、豌豆蛋白质和/或水稻蛋白质）、其水解产物、其游离氨基酸及其混合物。所述营养组合物优选地含有酪蛋白、乳清、水解的酪蛋白和/或水解的乳清蛋白。优选地，所述蛋白质包括完整蛋白质，更优选为完整的牛乳清蛋白和/或完整的牛酪蛋白蛋白质。
所述营养组合物优选地含有选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、淀粉和麦芽糖糊精的消化性碳水化合物，更优选为乳糖。
优选地，所述液体食物不具有过度的卡路里密度，但是仍然提供足够的卡路里以喂养婴儿。因此，所述液体食物优选地具有0.1到2.5kcal/ml之间的卡路里密度，甚至更优选为0.5到1.5kcal/ml之间的卡路里密度，最优选为0.6到0.8kcal/ml之间的卡路里密度。
优选地，所述营养组合物包括核苷酸和/或核苷，更优选为核苷酸。优选地，所述组合物包含5’-单磷酸胞苷、5’-单磷酸尿苷、5’-单磷酸腺苷、5’-单磷酸鸟苷和/或5’-单磷酸肌苷，更优选为5’-单磷酸胞苷、5’-单磷酸尿苷、5’-单磷酸腺苷、5’-单磷酸鸟苷和5’-单磷酸肌苷。优选地所述组合物每100克所述组合物干重包含5到100mg，更优选地5到50mg，最优选地10到50mg的核苷酸和/或核苷。
婴儿和幼儿
所述本发明方法可以有利地应用于0-36个月的人类婴儿的幼儿，更优选为0-18个月的人类婴儿，更优选为0-12个月的人类婴儿，甚至更优选为0-6个月的人类婴儿。0-36个月的婴儿包括幼儿。在一个实施方案中，幼儿年龄为大于6个月到36个月，或大于12个月到36个月，或大于18个月到36个月。为了将病原体引起感染的风险降至最小，用根据本发明的6’-SL的量和6’-SL与3’-SL的比例配制婴儿配方是有利的。优选地，用根据本发明的6’-SL的量和6’-SL与3’-SL的比例配制1阶段和2阶段的婴儿配方。优选地，用根据本发明的6’-SL的量和6’-SL与3’-SL的比例配制1阶段的婴儿配方。1阶段配方物用于为优选小于6个月的婴儿提供营养，优选地为优选小于4个月的婴儿提供营养。
实施例
实施例1测定母乳中的6’-SL
材料和方法
血清学试验
产后三天内，在血液取样的当天通过血细胞凝集管试验测定Lewis血型的妇女。使用对应的红细胞悬浮液（3%-5%红细胞悬浮于0.9%NaCl）和单克隆抗Lea和抗Leb抗体（Immucor，
Germanyand BAG，Lich,Germany）检查血细胞凝集作用。在室温孵育15分钟。由于血清学试验和色谱图之间的差异，在产后18-25个月重复了一些血血细胞凝集试验（Thurl et al.1998Milchwissenschaft 53:127-129）。接受试验的妇女那时没有怀孕。
收集样本
所有母亲都签订了书面意见同意参与这项研究，德国德累斯顿大学医院（university hospital of Dresden，Germany）伦理委员会批准了该研究设计。30名高加索妇女居住在德累斯顿地区，她们年龄在20到35岁并已生下健康婴儿，所述婴儿在研究期间为纯母乳喂养。全部的175个母乳样本主要在包括7个主要日子的如下时间间隔进行采集：第3天，产后2-5天；第8天，d6-d9；第15天，d13-d18；第22天，d20-d26；第30天，d28-d33；第60天，d57-d65；第90天，d88-d96。如果母亲们收集了多余一个的对应于上述时间间隔的乳样本，那么所有的样本以低聚糖浓度的算术平均值进行分析。在一次对来自德国法兰克福（Frankfurt/Main）地区的6个高加索妇女的预检查中，在产后第7天和第60天的两个24小时周期内，发明人没有发现任何明显的低聚糖变化（数据未列出）。然而，为了排除即使是很小的白昼效应，该研究中的采样时间固定在上午喂养时。所述乳样本通常在上午6-10点的上午时间使用喂养中（mid-feed）采样技术收集，该技术以前被证实是一种用于碳水化合物分析的适当采样技术。在喂养的中间将大约5-10ml的小份样品手工挤到塑料容器里。将乳样本立即冷冻并储存在-20℃下直到分析。
低聚糖的色谱分析
样本制备包括凝胶渗透色谱纯化，以及按已经描述的方法（Thurl etal.1996Anal Biochem.235:202-206）进行HPAEC分析。简单来说，将人乳样本在70℃下加热30分钟。在1ml人乳中加入0.1ml含有内标物水苏糖和半乳糖醛酸的水溶液。然后将所述样本离心并超滤（MilliporeCentrifree,30kDa截留）。使用Toyopearl HW 40(S)柱（1,6x 80cmTosoHaas,Stuttgart,Germany）通过凝胶渗透色谱将所述蛋白质和脂肪减少的样本分级分离为乳糖、中性低聚糖和酸性低聚糖。将碳水化合物级分用水洗脱（流速1ml/min）并通过折射率检测进行监测。将乳糖级分丢弃；中性和酸性级分用HPAEC-PED分析。酸性低聚糖的洗脱条件为0-8min,100mM NaOH /20mM NaOAc;8-30min,100mM NaOH /20-80mM NaOAc;30-55min,100mM NaOH/80-200mM NaOAc;55-60min,100mM NaOH/200mM NaOAc.
为了监测对特别敏感的唾液酸化低聚糖的可能人工水解降解，游离的N-乙酰神经氨酸（Neu5Ac）与酸性低聚糖一起定量。Neu5Ac浓度相对恒定（在Lewis血型Le(a-b+)的哺乳母亲中平均浓度为0.019g/L）。游离NeuAc的量与已经报告的在同一数量级上，并且在哺乳开始时和三个月后分别对应于大约2%和4%的低聚糖结合的NeuAc。因此，可以排除由唾液酸酶作用或加热处理导致的对酸性低聚糖的明显降解。
统计学分析
通过统计学方法分析的数据由单个低聚糖浓度组成或者由不同碳水化合物的总和的浓度组成。除了总的中性低聚糖和总的酸性低聚糖，如下总的核结构和果糖化的碳水化合物被分别合计：核Lac=Lac+3-FL+2’-FL+LDFT+3’-SL+6’-SL；核LNT=LNT+LNFP I+LNFP II+LNDFH I+LNDFH II+LSTa+LSTb+DSLNT；核LNnT=LNnT+LNFP III+LSTc；核LNH=LNH+2’-F-LNH+3’-F-LNH+2’,3’-DF-LNH;Fucα1-2Gal=2’-FL+LDFT+LNFP I+LNDFH I+2’-F-LNH+2’,3’-DF-LNH;Fucα1-4GlcNAc=LNFP II+LNDFH I+LNDFH II;Fucα1-3Glc=3-FL+LDFT+LNDFHII;Fucα1-3GlcNAc=LNFP III+3’-F-LNH+2’,3’-DF-LNH.
数据集按两因素组织，分别为三个母乳组和七个哺乳时间。另外，由于不同的样本数量，数据集非常不平衡。在母乳组1中（有Lewis血型Le(a-b+)的哺乳母亲）总共109个样品分配到10到21个样本范围的时间中，然而在第2组中（有Lewis血型Le(a+b-)的非哺乳母亲；28个样品）哺乳时间由3-5个样本代表，在第3组中（有Lewis血型Le(a-b-)的哺乳母亲；17个样品）由2-3个样本代表。因此，应用了分析低聚糖浓度平均值的几种方法。在第1组情况中，首先使用单因素方差分析（ANOVA）然后使用Student-Newman-Keuls检验来比较哺乳时间的平均值。使用III型平方和的两因素ANOVA被用于比较三个母乳组的平均值，然后计算最小平方均值。因此，各组平均值没有偏离并完全可以一起比较。平均值的差异用Tukey-Kramer方法在5%的显著性水平上检验。在全部两个变量模型中，每组和每个时间的参与妇女的样本浓度之间差异产生实验误差。通常，来自给定哺乳时间的同一母乳组妇女的母乳中低聚糖浓度是高度可变的。由于这些巨大的个体间差异，尽管表面上有明显差异，在同一情况中均值之间没有显著差异（P>5%）。
用回归分析模拟了哺乳期间的低聚糖浓度趋势。在显著回归系数上进行了简单线性回归以及二次和三次多项式回归的拟合和检验。如果回归系数显著（P<5%）则接受该模型。所有回归分析用单独的数值进行。所有计算使用SAS***完成（SAS Institute Inc.2002-2003SAS/STATrelease9.1SAS Institute Inc.,Cary，NC,USA）。
结果
碳水化合物级分
如表1所示的六种主要非岩藻糖基化的酸性低聚糖，3’-SL、6’-SL、LSTa、LSTb、LSTc、DSLNT，可以用色谱分析测定。这些碳水化合物总和近似代表了人乳中的酸性低聚糖级分。由于Lewis血型***的重要性，这些糖也被按照所述三个母乳组分别地检查。所有三种乳类型的乳样本显示出如上所述的六种酸性低聚糖。所述酸性低聚糖级分的量在三个母乳组中没有明显差别。另外，在研究期间所有母乳组显示了相似的酸性糖浓度的大约三倍下降。
表1.该研究中测定的酸性乳低聚糖的结构
3’-SL，3’-唾液酸化乳糖；6’-SL，6’-唾液酸化乳糖；LSTa-c，唾液酸化乳糖-N-四糖a-c(Sialyllacto-N-tetraoses a-c)；DSLNT，二唾液酸化乳糖-N-四糖(Disialyllacto-N-tetraose)。
酸性唾液酸化低聚糖
该研究中测定的所述六种酸性低聚糖的平均浓度显示在表2中。在数量上6’-SL是目前所有乳中最重要的酸性碳水化合物。检测到了中等数量的3’-SL、LSTc和DSLNT，然而LSTa和LSTb的浓度水平不超过0.1g/L。单独酸性糖的平均浓度，虽然在一些情况下在统计学上不相同，在三个母乳组中没有在很大程度上变化，因而证实了关于整个碳水化合物级分的结果。
类似地，显示在表2中母乳组1的时间效应与其他母乳组（数据未列出）的趋势相似。6’-SL的浓度在第8天的过渡期母乳中达到峰值，直至分娩后第90天下降了至少3倍。LSTc，也含有Neu5Acα2-6Gal-键，在研究期间以类似的方式下降了大约5倍。3’-SL在哺乳期第1阶段明显下降后，在成***乳中以相对恒定的水平表达。LSTa，具有Neu5Acα2-3Gal-键的次要酸性糖，其浓度在产后一周下降，以至于在一个月后的几个母乳样本中没有检测到。相比之下，具有Neu5Acα2-6GlcNAc-键的LSTb的浓度在第一个月中增加并在之后保持相对恒定。DSLNT，所分析的唯一的二唾液酸化的碳水化合物，一种介于LSTa和LSTb之间的混合结构，显示出最高的时间曲线。
表2.酸性低聚糖1)的浓度（g/L）
1)有相同字母的均值没有明显不同；Student-Newman-Keuls检验用于组1内比较，Tukey-Kramer检验用于1-3组的最小平方均值（作为不平衡数据的结果）的比较。
讨论
酸性低聚糖
该研究测定的六种酸性低聚糖在三个母乳组中没有显示出重大的差异。这并不意外因为这些糖缺少岩藻糖部分。本研究中主要的酸性糖，6’-SL的浓度超出自其他组所报道的量至少两倍，然而DSLNT的浓度相对较低（Coppa et al.,1999Acta Paediatr.Suppl.430:89-94;Martin-Sosa et al.,2003J Dairy Sci.86:52-59;Asakuma et al.,2007Biosci Biotechnol Biochem.71:1447-1451;Bao et al.,2007AnalBiochem.370:206-214）。3’-SL、LST a、LSTb和LSTc的量与Asakuma等人所检测的量在近似范围内，低于Coppa等人所报道的浓度，高于Bao等人所发现的数值。虽然来自不同研究（包括本研究）的定量结果显示了巨大的差异，但是在哺乳期第一个月内通常都发现了酸性糖级分整体及大多数单独的糖的明显下降。
6’-SL和LSTc以相似的方式下降，这个事实支持如下假说：单一的唾液酸转移酶，可能是ST6Gall，唯一接受的2型结构参与这些碳水化合物的生物合成。LSTc的更显著的下降可以用LSTc的前体——核LNnT的下降解释，然而6’-SL的前体——乳糖的量在产后一周后保持恒定。研究期间小程度下降的3’-SL可以由ST3Gal IV或ST3Gal VI合成（两种α2,3-唾液酸转移酶，优先地对2型结构起作用），并且本发明人发现次要酸性糖LSTa下降非常多，在2和3个月后不能或只能部分检测到。本发明人猜测优先对1型结构起作用的2,3-唾液酸转移酶ST3GallⅢ参与LSTa以及DSLNT的生物合成。LSTb是在产后第一个月内增加的唯一的酸性糖，这证实了之前的结果。所谓的ST6GlcNAc可以转移唾液酸部分至近端的GlcNAc，产生LSTb和DSLNT（一种显示α2,6-连接的和α2,3-连接的神经氨酸的低聚糖）。
实施例2婴儿配方
婴儿配方每100ml（干重13.9g）包含：
1.4g蛋白质（乳清和酪蛋白）
7.3g消化性碳水化合物（包括乳糖）
3.6g脂肪（植物性脂肪、鱼油）
1.03g非可消化性低聚糖，其中有120mg 6’-SL、30mg 3’-SL、80mg 2’-岩藻糖基乳糖、720mg β-低聚半乳糖和80mg低聚果糖
进一步包括：胆碱、肌醇、牛磺酸、矿物质、微量元素和本领域已知的维生素。
实施例3幼儿乳组合物
幼儿乳组合物（为1-3岁婴儿设计）每100ml（67kcal；干重15.1g）包括：
1.5g蛋白质（乳清蛋白/酪蛋白1/1w/w）
8.5g消化性碳水化合物（其中有6.0g乳糖、1.1g麦芽糖糊精）
3.0g脂肪（植物性脂肪）
1.23g非可消化性低聚糖，其中有120mg 6’-SL、30mg 3’-SL、80mg 2’-岩藻糖基乳糖、900mg β-低聚半乳糖和100mg低聚果糖
矿物质、微量元素、本领域已知的维生素、包括胆碱和牛磺酸。
Claims (12)
1.一种包含6’-唾液酸化乳糖（6’-SL）的组合物用于制备为婴儿提供营养的营养组合物的用途，所述营养组合物包含至少1g/L 6’-SL，并且其中6’-SL:3’-SL的比例高于2。
2.根据权利要求1的用途，其中所述6’-SL的浓度至少为1.1g/L。
3.根据权利要求1或2的用途，其中所述6’-SL:3’-SL的比例高于3。
4.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述6’-SL:3’-SL的比例高于4。
5.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物进一步包括选自低聚果糖和低聚半乳糖的非可消化性低聚糖。
6.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物进一步包括选自半乳糖醛酸低聚糖和果胶降解产物的糖醛酸低聚糖。
7.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述组合物包括提供总卡路里的35%-50%的脂质，提供总卡路里的7.5%-12.5%的蛋白质，以及提供总卡路里的40%-55%的可消化性碳水化合物。
8.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物用于向0-36个月的婴儿提供营养。
9.根据前述权利要求任一项的用途，其中所述营养组合物用于向0-6个月的婴儿提供营养。
10.一种营养组合物，包括提供总卡路里的35%-50%脂肪，提供总卡路里的7.5%-12.5%蛋白质，以及提供总卡路里的40%-55%可消化性碳水化合物，并进一步包括1-3g/L的6’-SL，其中6’-SL:3’-SL的比例在2.5到5.5之间。
11.根据权利要求10的营养组合物，进一步包括β-低聚半乳糖、低聚果糖和糖醛酸低聚糖。
12.根据权利要求10或11的营养组合物，其是1阶段婴儿配方。
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