CN102824473A - 黑果枸杞果总黄酮提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于黑果枸杞果总黄酮提取技术领域，特别涉及一种提取黑果枸杞果总黄酮提取物及制备方法。黑果枸杞果总黄酮提取物是用如下方法制得，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得黑果枸杞果总黄酮提取物。优点是首次发现黑果枸杞果中含有总黄酮类化合物，它采用科学合理的提取方法获得了具有十分显著经济效益的黑果枸杞果总黄酮提取物。

Description

黑果枸杞果总黄酮提取物及其制备方法

一、技术领域：本发明属于黑果枸杞果总黄酮及提取物的提取技术领域，特别涉及一种以黑果枸杞果为原料提取的黑果枸杞果总黄酮及提取物及其制备方法。

二、技术背景:

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr.）是茄科枸杞属的多年生耐盐、抗旱植物，分布于我国西北地区，是民族医药中的常用药材。在传统中（藏）药中的主要作用为治疗心热病、心脏病、***、停经，高血压，在民间还被用作滋补强壮和明目药。黑果枸杞的果实简称为黑果枸杞果。

黑果枸杞果总黄酮提取物的药理性质的报道较少。白红进等测定黑果枸杞叶片甲醇提取物对DPPH自由基、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力，黑果枸杞叶片甲醇提取物对DPPH· ，·OH和O2^-·自由基均具有较好的清除作用（时珍国医国药，2008，19(2):326-327）。陶大勇等发现如果将黑果枸杞果实花色苷类物质添加到植物油中，可以增强这些植物油的抗氧化能力（中兽医医药杂志，2007，26(4):15-17）。

目前黑果枸杞果仅用于作为药材使用，尚未发现采用黑果枸杞果为原料提取黑果枸杞果总黄酮及提取物技术的有关报道。

       三、发明内容：

本发明的目的是提供一种以黑果枸杞果为原料提取黑果枸杞果总黄酮提取物和制备方法，把黑果枸杞果中的最有经济和药用价值的黑果枸杞果总黄酮提取物提取出来，大大地发挥黑果枸杞果的经济和社会效益。本发明的提取工艺简单，成本低，提取率高，可充分利用黑果枸杞果原料。

 技术方案为： 本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以黑果枸杞果作原料，采用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物的溶剂作提取溶剂进行提取。提取制备过程包括：用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得黑果枸杞果总黄酮提取物。

       分离纯化方法有三种，它们分别为：①采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物；②采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、0.5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物；③用无机酸将浸膏的pH值调至0.1-3，在0—42℃下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

       上述分离纯化的方法可单独应用得黑果枸杞果总黄酮提取物，也可任意组合应用制得黑果枸杞果总黄酮提取物。所述的黄酮类化合物是指化学结构属于黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、花色素类、黄烷醇类、双苯吡酮类、异黄酮类、查尔酮类、二氢查尔酮类、橙酮类、高异黄酮类的化合物以及它们与单糖或寡糖形成的衍生物。上述方法所得的黑果枸杞果总黄酮提取物中黄酮类化合物的质量之和可为提取物总质量的1-100%，其它物质为非黄酮类化合物，这些总黄酮化合物，可以通过进一步纯化技术进行分离得到，这些纯化方法对本领域的技术人员来说是不言自明的。

本发明的原料黑果枸杞果是干净的干燥黑果枸杞果。因黑果枸杞果总黄酮提取物它易溶于水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物的有机溶剂中，故采用上述这些溶剂作提取溶剂进行提取。无机酸如盐酸、硝酸、硫酸、碳酸、硅酸……，以及它们二至多种的混合物均可。

本发明具有如下优点：1、本发明首次发现黑果枸杞果中含有黑果枸杞果总黄酮类化合物，它采用科学合理的提取方法获得了具有十分显著经济效益的具有降血糖、降血脂和降血压活性的黑果枸杞果总黄酮提取物，一方面可以给有以上病症的病人新的治疗选择，一方面对深入开发黑果枸杞果资源具有重要意义；2、 本发明提供的制备方法具有工序少，操作简便，生产周期短而且可以除去原料中的残留重金属；3、 本发明提供的黑果枸杞果总黄酮提取物具有治疗和/或预防糖尿病、高血脂和高血压的功能，资源得到高效充分利用，经济和社会效益十分显著。

四、具体实施方案：

实施例1：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用水作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂水为1:5的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂水进行混合，再经浸泡、煎熬至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物全部提取后，过滤去渣、浓缩提取液得浸膏，然后对浸膏采用丙酮作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收有机溶剂后，经过真空干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物产品。

实施例2：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水35%的甲醇作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣，把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后对浸膏采用乙酸乙酯作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收溶剂后，经过喷雾干燥再去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物产品。

实施例3：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水率为75%的乙酸乙酯作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1: 30的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后对浸膏采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇各为三分之一的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收溶剂后，经过冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物产品。

实施例4：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是以黑果枸杞果作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8：2的体积比配比混合作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:20的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏采用吸附树脂进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1倍柱体积的水、5倍柱体积的乙醇体积浓度为1%的乙醇水溶液洗涤，再用3倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。 

实施例5：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以黑果枸杞果为原料，用不含水的甲醇、丙酮以4：6体积比配比的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果的黑果枸杞果总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机溶剂得浸膏，然后对浸膏采用吸附树脂进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用5倍柱体积的水、0.5倍柱体积的乙醇体积浓度为99%的乙醇水溶液洗涤，再用10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行喷雾干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。 

实施例6：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水35%的甲醇作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣，把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后用盐酸的无机酸将浸膏的pH值调至0.1，在0℃下静置，再分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

实施例7：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是以黑果枸杞果作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8：2的体积比配比混合作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:20的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏用硝酸和硫酸以1：1体积比配比的混合无机酸将浸膏的pH值调至3，在42℃下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

实施例8：本发明的黑果枸杞果总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以黑果枸杞果为原料，用不含水的甲醇、丙酮以4：6体积比配比的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机溶剂得浸膏，然后用碳酸的无机酸将浸膏的pH值调至1.3，在25℃下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

Claims (8)

1.一种黑果枸杞果总黄酮提取物的制备方法，其特征是以黑果枸杞果作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得黑果枸杞果总黄酮提取物。

2. 根据权利要求1所述的黑果枸杞果总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

3.根据权利要求1所述的黑果枸杞果总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、0.5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

4.根据权利要求1所述的黑果枸杞果总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是用无机酸将浸膏的pH值调至0.1-3，在0—42℃下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

5.一种黑果枸杞果总黄酮提取物，其特征是它由如下制备方法制备而来，其制备方法是以黑果枸杞果作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以黑果枸杞果：提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得黑果枸杞果总黄酮提取物。

6.根据权利要求5所述的黑果枸杞果总黄酮提取物，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

7.根据权利要求5所述的黑果枸杞果总黄酮提取物，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、0.5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。

8.根据权利要求5所述的黑果枸杞果总黄酮提取物的，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是用无机酸将浸膏的pH值调至0.1-3，在0—42℃下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得黑果枸杞果总黄酮提取物。