CN102816253B - 双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 - Google Patents
双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102816253B CN102816253B CN201210333151.XA CN201210333151A CN102816253B CN 102816253 B CN102816253 B CN 102816253B CN 201210333151 A CN201210333151 A CN 201210333151A CN 102816253 B CN102816253 B CN 102816253B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- trigonella
- enzyme
- under
- substance
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种双酶偶联提取葫芦巴胶的方法,其以葫芦巴种子为原料,经破粉碎后,先利用纤维素酶进行破壁处理,钝化酶活后固液分离,清液中加入脂肪酶进行破乳,钝化酶活后油水分离,水层经浓缩、干燥,得到葫芦巴胶。经测定,葫芦巴胶的收率为8%~10%。本发明工艺简单,反应条件温和,工艺周期短,能耗低,效率高;不使用有机溶剂,安全环保。
Description
技术领域
本发明涉及一种葫芦巴胶的提取方法,尤其涉及一种双酶偶联提取葫芦巴胶的方法。
背景技术
胡芦巴(Trigonellafoenum-graecumL.)为豆科蝶形花亚科胡芦巴属的一种一年生草本植物,广泛分布于亚洲、非洲和欧洲。葫芦巴植物地上部分干后有特殊香气,可防虫灭虱。其种子为中药材,亦作为医药工业的原料。食品工业则广泛用于咖啡、香精等,也用于烟草、糖果。葫芦巴胶是从葫芦巴种子胚乳中提取出的一种多糖胶,主要成分是半乳甘露聚糖。葫芦巴胶是天然高分子,具有较好的水溶性和交联性,较强的增稠能力和悬浮能力,在石油行业中代替化学材料用作压裂液稠化剂和钻井液悬砂剂应用,从而避免了对地层的污染。由葫芦巴胶及其衍生物制成的絮凝剂已经成为塑料***的一种基本成分而作为工业浆状***的重要胶结剂被应用。此外,葫芦巴胶在印刷、农药、森林灭火剂和化妆品行业中有广泛的应用。研究证明葫芦巴胶能有效的控制药物的释放,使药物能安全、无毒副作用的到达病变处,可作为良好的药物载体被应用。
目前,制备葫芦巴胶的主要方法有热水提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等方法,常规热水提取耗时耗力,提取率不高;超声波辅助提取、微波辅助提取往往会使提取物的结构发生改变,使天然产物的生物学活性改变或丧失。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中存在的问题,提供一种纤维素酶-脂肪酶偶联提取葫芦巴胶的方法。
本发明纤维素酶-脂肪酶偶联提取葫芦巴胶的方法,是以葫芦巴种子为原料,经破粉碎后,先利用纤维素酶进行破壁处理,钝化酶活后固液分离,清液中加入脂肪酶进行破乳,钝化酶活后油水分离,水层经浓缩、干燥,得到葫芦巴胶。其具体提取工艺如下:
a:将葫芦巴种子粉碎至粒度为200目以上,充分溶于水中(原料:水=1:50~100 g/mL);搅拌下加入占葫芦巴种子粉干重的0.2%~0.5%的纤维素酶,调PH至3.0~6.0,于30℃~65℃提取2~5h;升温至80~85℃,使纤维素酶灭活;收集提取液,冷却至室温,高速离心分离(在4000~5000转/分钟的转速下进行),收集清液,得物质A;
b:在物质A中加入占葫芦巴种子粉干重的0.6%~1.0%的脂肪酶,调PH至5.0~8.0,于30℃~60℃提取3~4h;升温至65℃~70℃,使脂肪酶灭活;收集提取液,冷却至室温,油水分离,收集水层,得物质B;
c:将物质B在0.07~0.09Mpa下减压浓缩至原体积的1/5~1/7;然后在浓缩液中加入乙醇,使乙醇含量占总体积的80~85%;室温下静置20~24小时;沉淀物在-65℃~-60℃,1~10Pa下冷冻干燥24~36小时,得葫芦巴胶C。
图1为本发明提取的葫芦巴胶的红外光谱。红外光谱显示:在3396-1nm处有O-H的伸缩振动峰,在2939-1nm处出现一宽峰,为C-H键的变角振动引起的,1612-1nm为-COO- 的伸缩振动峰,1060-1nm为-CO的伸缩振动,这些均为多糖的吸收峰,说明提取物的主要成分是多糖,葫芦巴胶提取成功。
本发明相对现有技术具有以下有益效果:
1、本发明利用纤维素酶对葫芦巴种子进行处理,破坏了葫芦巴种子的细胞壁,可较温和地将葫芦巴种子组织分解,使葫芦巴胶能更有效的从种子中释放出来,简化了提取工艺,缩短提取葫芦巴胶的时间;再利用脂肪酶对葫芦巴种子中的游离脂肪具有水解作用,使葫芦巴胶结构变得松散,同时还会结合态的脂肪水解,降低了它们与原料的结合力,有利于葫芦巴胶的浸出,以除去所含的油脂,提高了提取效率。经测定,本发明葫芦巴胶的收率为8~10%。
2、本发明工艺简单,反应条件温和,能耗低;
3、本发明不使用有机溶剂,安全环保。
附图说明
图1为本发明的方法制备葫芦巴胶的工艺流程图;
图2为本发明的方法制备出的葫芦巴胶的红外扫描图。
具体实施例
下面通过实施例对本发明纤维素酶-脂肪酶双酶偶联提取葫芦巴胶的方法详细的说明。
实施例1
1)称取烘干的葫芦巴种子200g,置于粉碎机中粉碎,过200目筛,加入到10000mL蒸馏水中,搅拌使其充分溶解;加入纤维素酶0.4g,调pH=4.5,控制提取温度为65℃,提取3h,然后升温至85℃使纤维素酶灭活,收集提取液,冷却至室温,在4000转/分钟的转速下离心分离,收集清液,得物质A;
2)物质A中加脂肪酶1.2g,调pH=6.0,控制提取温度在30℃下提取3.5h,然后升温至68℃使脂肪酶灭活,收集提取液,冷却至室温,通过油水分离器分离,收集水层,得物质B;
3)物质B在0.07Mpa下减压浓缩至原体积的1/6,在浓缩液中加入乙醇,使乙醇的含量占总体积的85%;室温下静置24小时,沉淀物在-65℃,1Pa条件下冷冻干燥24小时,得葫芦巴胶C。葫芦巴胶C的得率为10%。
实施例2
1)称取烘干的葫芦巴种子150g,置于粉碎机中粉碎,过200目筛,用10500mL蒸馏水充分溶解;在搅拌下加纤维素酶0.6g,调pH=3.0,控制提取温度为50℃,提取2h,然后升温至80℃使纤维素酶灭活,收集提取液,冷却至室温,在4200转/分钟的转速下离心分离,收集清液,得物质A;
2)物质A中加脂肪酶1.05g,调pH=5.0,控制提取温度为60℃,提取4h;然后升温度至70℃使脂肪酶灭活,收集提取液,冷却至室温,通过油水分离器分离,收集水层,得物质B;
3)物质B在0.08Mpa下减压浓缩至原体积的1/5,在浓缩液中加入乙醇,使乙醇含量占总体积的80%;室温下静置20小时,沉淀物在-65℃,10Pa下的条件下冷冻干燥36小时,得葫芦巴胶C。葫芦巴胶C的得率为8%。
实施例3
1)称取烘干的葫芦巴种子100g,置于粉碎机中粉碎,过200目筛,用蒸馏水10000mL充分溶解,在搅拌下加纤维素酶0.5g,调pH=6,控制提取温度为30℃,提取5h;然后升温至82℃使纤维素酶灭活;收集提取液,冷却至室温,在5000转/分钟的转速下离心分离,收集清液,得物质A;
2)物质A中加脂肪酶1.0g,调pH=8.0,控制提取温度为50℃,提取3h;然后升温至65℃使脂肪酶灭活,收集提取液,冷却至室温,通过油水分离器分离,收集水层,得物质B;
3)物质B在0.09Mpa下减压浓缩至原体积的1/7,在浓缩液中加入乙醇,使乙醇含量占总体积的82%;室温下静置24小时,沉淀物在-62℃,5Pa下的条件下冷冻干燥30小时,得葫芦巴胶C。葫芦巴胶C的得率为9%。
Claims (4)
1.一种双酶偶联法提取葫芦巴胶的方法,以葫芦巴种子为原料,经破粉碎后,先利用纤维素酶进行破壁处理,钝化酶活后固液分离,清液中加入脂肪酶进行破乳,钝化酶活后油水分离,水层经浓缩、干燥,得到葫芦巴胶;具体提取工艺如下:
a:将葫芦巴种子粉碎,充分溶于水中;搅拌下加入占葫芦巴种子粉干重0.2%~0.5%的纤维素酶,调PH至3.0~6.0,于30℃~65℃提取2~5h;升温至80~85℃,使纤维素酶灭活;收提取液,冷却至室温,高速离心分离,收集清液,得物质A;
b:在物质A中加入占葫芦巴种子粉干重0.6%~1.0%的脂肪酶,调PH至5.0~8.0,于30℃~60℃提取3~4h;升温至65℃~70℃,使脂肪酶灭活;收集提取液,冷却至室温,油水分离,收集水层,得物质B;
c:将物质B在0.07~0.09Mpa下减压浓缩至原体积的1/5~1/7;然后在浓缩液中加入乙醇,使乙醇含量占总体积的80~85%;室温下静置20~24小时;沉淀物在-65℃~-60℃,1~10Pa下冷冻干燥24~36小时,得葫芦巴胶C。
2.如权利要求1所述双酶偶联法提取葫芦巴胶的方法,其特征在于:步骤a中葫芦巴种子粉碎至粒度在200目以上。
3.如权利要求1所述双酶偶联法提取葫芦巴胶的方法,其特征在于:步骤a中,葫芦巴种子粉与水的比例为:原料:水=1:50~100g/mL。
4.如权利要求1所述双酶偶联法提取葫芦巴胶的方法,其特征在于:步骤a中,高速离心分离是在4000~5000转/分钟的转速下进行。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210333151.XA CN102816253B (zh) | 2012-09-11 | 2012-09-11 | 双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210333151.XA CN102816253B (zh) | 2012-09-11 | 2012-09-11 | 双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102816253A CN102816253A (zh) | 2012-12-12 |
CN102816253B true CN102816253B (zh) | 2014-04-16 |
Family
ID=47300728
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210333151.XA Expired - Fee Related CN102816253B (zh) | 2012-09-11 | 2012-09-11 | 双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102816253B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104788579B (zh) * | 2014-01-20 | 2017-10-27 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种制备香豆胶稠化剂的方法 |
CN113974202B (zh) * | 2021-10-25 | 2023-09-01 | 深圳市真味生物科技有限公司 | 一种环保型电子雾化液增稠剂及其制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1122818A (zh) * | 1995-09-12 | 1996-05-22 | 国内贸易部南京野生植物综合利用研究设计院 | 胡芦巴籽制胶工艺及其生产线 |
CN1456570A (zh) * | 2003-02-18 | 2003-11-19 | 何昌义 | 胡芦巴种子中提取皂甙的方法 |
CN1733055A (zh) * | 2005-08-25 | 2006-02-15 | 吉林大学 | 胡芦巴提取物及其制备方法和应用 |
CN102060934A (zh) * | 2010-12-11 | 2011-05-18 | 中国计量学院 | 一种黑木耳多糖的酶法提取方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8372609B2 (en) * | 2008-11-20 | 2013-02-12 | E I Du Pont De Nemours And Company | Process for producing a sugar solution by combined chemical and enzymatic saccharification of polysaccharide enriched biomass |
-
2012
- 2012-09-11 CN CN201210333151.XA patent/CN102816253B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1122818A (zh) * | 1995-09-12 | 1996-05-22 | 国内贸易部南京野生植物综合利用研究设计院 | 胡芦巴籽制胶工艺及其生产线 |
CN1456570A (zh) * | 2003-02-18 | 2003-11-19 | 何昌义 | 胡芦巴种子中提取皂甙的方法 |
CN1733055A (zh) * | 2005-08-25 | 2006-02-15 | 吉林大学 | 胡芦巴提取物及其制备方法和应用 |
CN102060934A (zh) * | 2010-12-11 | 2011-05-18 | 中国计量学院 | 一种黑木耳多糖的酶法提取方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102816253A (zh) | 2012-12-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102766530B (zh) | 一种从南极磷虾中提取富含磷脂的磷虾油的方法 | |
CN104673497B (zh) | 一种植物精油、多糖和黄酮的提取工艺 | |
CN107488515B (zh) | 一种提取液及采用该提取液提取茶树花精油的方法 | |
CN103265645A (zh) | 一种超声波辅助提取海藻多糖的装置及方法 | |
CN102492538A (zh) | 一种从南极磷虾中提取高磷脂含量磷虾油的方法 | |
CN102492537A (zh) | 南极磷虾提取磷虾油的方法 | |
CN104207134B (zh) | 一种玛咖提取物的制备方法 | |
CN105963328A (zh) | 一种从香榧假种皮中连续提取香榧黄酮和精油的方法 | |
CN102887963A (zh) | 一种黄芪多糖的提取方法 | |
CN102001946A (zh) | 一种同时提取和分离金银花中绿原酸与金银花精油的新方法 | |
CN104072627B (zh) | 一种独角莲多糖提取物的制备方法 | |
CN104173231A (zh) | 墨角藻提取物的提取方法及其在抗衰老化妆品中的应用 | |
CN103039931A (zh) | 一种胡椒油树脂及其制备方法 | |
CN102816253B (zh) | 双酶偶联提取葫芦巴胶的方法 | |
CN102816638A (zh) | 一种从南极磷虾中提取富含磷脂的磷虾油的方法 | |
CN106467855A (zh) | 牡丹籽油超临界二氧化碳萃取工艺 | |
CN103393787A (zh) | 超临界二氧化碳连续萃取樱花有效成分的方法 | |
CN104928034A (zh) | 一种柳叶腊梅叶挥发油的提取方法 | |
CN102511569A (zh) | 一种从大蒜中提取大蒜素油的生产方法 | |
CN102028060A (zh) | 一种油溶性茶叶提取物的制备方法 | |
CN101524099A (zh) | 超临界co2萃取技术制备原生态椰子油的方法 | |
CN103146469A (zh) | 一种水酶法提取蓖麻油的方法及装置 | |
CN102657694A (zh) | 甘草提取物的高电压脉冲电场快速生产工艺 | |
CN108084290A (zh) | 一种微波辅助提取薇菜中多糖的方法 | |
CN103980384A (zh) | 一种柚子白囊水溶性果胶的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140416 Termination date: 20140911 |
|
EXPY | Termination of patent right or utility model |