CN102747119B - 一种制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法 - Google Patents
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Abstract
一种制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,将脱脂扁杏仁粉超微粉碎后,分散于去离子水中,调pH值,加入纤维素酶,酶解反应;调pH值,加入果胶酶,酶解反应,灭酶,微滤膜过滤,得截留物和滤液,截留物备用,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁低聚糖;将截留物分散于去离子水中,调pH值,加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应,调pH值,加入中性蛋白酶,酶解反应,灭酶,微滤膜过滤,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁水解蛋白粉。其优点是:工艺简单,能耗低,生产成本低,制得的扁杏仁水解蛋白粉中蛋白含量高,水溶性好,适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法。
背景技术
低聚糖具有极好的双歧杆菌增殖性,可促进消化道内有益菌的繁殖,抑制有害菌生长,改善微生物菌群平衡,阻断病原菌与宿主细胞受体的结合,刺激免疫***,提高免疫力。扁杏仁蛋白质中含有人体所需的各种氨基酸,且氨基酸组成比例平衡,是一种良好的植物性蛋白质。
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目前,以扁杏仁为原料制备提取低聚糖,尚未有相关报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简单、能耗低、生产成本低、可工业化生产的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法。
本发明的技术解决方案是:
一种制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其具体步骤为:
1)粉碎
将脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
2)酶解制备扁杏仁低聚糖
将粉碎的扁杏仁粉按照料液比为30g/L~100g/L分散于去离子水中,用无机酸调pH值至3.0~5.0,在35℃~55℃下,加入纤维素酶,酶解反应1h~8h,所述纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g;然后用无机酸调pH值至3.5~5.5,在40℃~65℃下,加入果胶酶,酶解反应2h~8h,所述果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为200U/g~800U/g,在85℃~95℃下灭酶20min~30min,微滤膜过滤,得截留物和滤液,截留物备用,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁低聚糖;
3)酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将截留物按照料液比为30g/L~100g/L分散于去离子水中,用无机碱调pH值至8.0~11,在55℃~70℃下,加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应3h~8h,所述碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g,风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g,用无机碱调pH值至6.5~7.5,在45℃~55℃下,加入中性蛋白酶,酶解反应3h~6h,所述中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g~8000U/g,在85℃~95℃下灭酶20min~30min,微滤膜过滤,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁水解蛋白粉。
所述无机酸为盐酸、硝酸或者硫酸。
所述纤维素酶的酶解反应温度为40℃~50℃,时间为3h~6h,酶活性最强,酶解效果好。
所述果胶酶的酶解反应温度为50℃~60℃,时间为3h~6h,酶活性最强,酶解效果好。
所述超滤浓缩是利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的25%~30%,膜分离参数:错流速度为3cm/s~4cm/s,操作表压为0.04MPa~0.06MPa,温度为25℃~30℃。
所述雾化器为离心式或挤压式的喷雾干燥器。
喷雾干燥时,进气压力为0.2 MPa~0.3 MPa,雾化频率为50Hz~60Hz,撞针间隔时间为4s~6s,进风温度为170℃~210℃,进料速度为200mL/h~300mL/h。
所述无机碱为NaOH溶液或KOH溶液。
所述碱性蛋白酶和风味蛋白酶的酶解反应温度为60℃~65℃,时间为4h~6h,酶活性最强,酶解效果好。
所述中性蛋白酶的酶解反应温度为48℃~52℃,时间为4h~5h,酶活性最强,酶解效果好。
本发明的有益效果是:
1、脱脂扁杏仁粉经超微粉碎,扁杏仁组织结构进一步被破坏,随着颗粒的超微化,粒径变小,比表面积增大,酶与底物有效接触面积增大,有利于纤维素酶、果胶酶反应除去束缚蛋白质分子的多糖,提高酶的作用效率。
2、扁杏仁低聚糖及水解蛋白溶液的浓缩均采用膜分离技术,避免高温浓缩过程,能耗低,能有效保持产品功能性质。
3、在扁杏仁低聚糖及水解蛋白的干燥方式上均采用喷雾干燥,干燥效果好,并提高了产品的溶解性。
4、工艺简单,生产成本低,适合工业化生产。
5、扁杏仁水解蛋白粉中蛋白含量高达79.7%~84.5%,水溶性好,冲调后1min内溶解,溶解度大于97%,沉淀指数小于0.2,在pH在3~9范围内NSI值均超过90%。
附图说明
图1是本发明(对应实施例1)扁杏仁低聚糖相对分子量分布图;
图2是本发明(对应实施例1)扁杏仁低聚糖单糖组成的离子色谱图;
图中: 1-岩藻糖,2-鼠李糖,3-***糖,4-氨基半乳糖,5-半乳糖,6-葡萄糖,7-木糖,8-半乳糖醛酸,9-葡萄糖醛酸。
具体实施方式
实施例1
1)粉碎
将30g脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
2)酶解制备扁杏仁低聚糖
将30g粉碎的扁杏仁粉分散于1L去离子水中,用盐酸调pH至3.0,在35℃下,按照纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g加入纤维素酶,酶解反应1h;然后用盐酸调pH至3.5,在40℃下,按照果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为200U/g加入果胶酶,酶解反应2h,在85℃下灭酶20min,微滤膜过滤,得35.6g截留物和滤液,截留物备用,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的25%,膜分离参数:错流速度为3cm/s,操作表压为0.04MPa,温度为25℃,采用离心式喷雾干燥器喷雾干燥,其中,进气压力为0.2 MPa,雾化频率为50Hz,撞针间隔时间为4s,进风温度为170℃,进料速度为200mL/h,获得扁杏仁低聚糖3.8g;其相对分子量分布图如图1所示,单糖组成的离子色谱如图2所示;单糖摩尔百分率如表1所示:
表1
单糖名称 | 鼠李糖 | ***糖 | 半乳糖 | 木糖 | 半乳糖醛酸 | 葡萄糖醛酸 |
摩尔百分比(%) | 2.17 | 2.48 | 46.30 | 2.74 | 25.06 | 16.66 |
由图1可以看出,扁杏仁低聚糖分子量主要分布在26960Da,2405Da和261Da左右。因多糖分子量一般分布在数万Da,所以由分子量分布图说明,经过酶解,杏仁多糖被降解为小分子量的低聚糖,通过离子色谱分析可以得出杏仁低聚糖主要由半乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成。
3)酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将35.6g截留物分散于1.18L去离子水中,用NaOH溶液调整pH至8.0,在55℃下,按照碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g、风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应3h,用NaOH溶液调pH至6.5,在45℃下,按照中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g加入中性蛋白酶,酶解反应3h,在85℃下灭酶20min,微滤膜过滤,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的25%,膜分离参数:错流速度为3cm/s,操作表压为0.04MPa,温度为25℃,采用离心式喷雾干燥器喷雾干燥,其中,进气压力为0.2 MPa,雾化频率为50Hz,撞针间隔时间为4s,进风温度为170℃,进料速度为200mL/h,获得扁杏仁水解蛋白粉10.5g,其组成成分如表2所示,氨基酸组成如表3所示,分子质量分布如表4所示;扁杏水解蛋白粉冲调后55s溶解,溶解度为97.5%,沉淀指数为0.1,在pH为3~9范围内NSI值为91.5%。
表2 扁杏水解蛋白粉的组成成分
组分 | 蛋白 | 脂肪 | 总糖 | 灰分 | 水分 |
含量(g/100g) | 84.5 | 1.9 | 3.7 | 3.9 | 6 |
表3 扁杏水解蛋白粉的氨基酸组成
氨基酸名称 | 含量(g/100蛋白质) |
Asp | 11.25 |
Glu | 28.23 |
Ser | 4.25 |
His | 2.14 |
Gly | 4.68 |
Thr | 3.02 |
Ala | 9.02 |
Arg | 4.44 |
Tyr | 2.65 |
Cys | 0.55 |
Val | 4.85 |
Met | 0.22 |
Phe | 5.5 |
Ile | 3.58 |
Leu | 6.84 |
Lys | 2.87 |
Pro | 5.91 |
表4 扁杏仁水解蛋白粉的分子质量分布
平均相对分子质量 | 15365 | 7021 | 4025 | 1721 | 636 | 202 | 55 |
比例(%) | 2.36 | 4.25 | 2.02 | 64.32 | 10.42 | 5.60 | 11.01 |
天然扁杏蛋白分子量大概在4万~10万左右,由表3可知,扁杏仁水解蛋白粉所含均为小分子蛋白或肽类,容易吸收。
实施例2
1)粉碎
将100g脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
2)酶解制备扁杏仁低聚糖
将100g粉碎的扁杏仁粉分散于1L去离子水中,用盐酸调pH至5.0,在55℃下,按照纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g加入纤维素酶,酶解反应8h;然后用盐酸调pH至5.5,在65℃下,按照果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为800U/g加入果胶酶,酶解反应8h,在95℃下灭酶30min,微滤膜过滤,得130.8g截留物和滤液,截留物备用,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的30%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.06MPa,温度为30℃,采用离心式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为60Hz,撞针间隔时间为6s,进风温度为210℃,进料速度为300mL/h,获得扁杏仁低聚糖9.6g;
3)酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将130.8g截留物分散于1.31L去离子水中,用NaOH溶液调整pH至11.0,在70℃下,按照碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g、风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应6h,用NaOH溶液调pH至7.5,在55℃下,按照中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为8000U/g加入中性蛋白酶,酶解反应6h,在95℃下灭酶30min,微滤膜过滤,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的30%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.06MPa,温度为30℃,采用离心式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为60Hz,撞针间隔时间为6s,进风温度为210℃,进料速度为300mL/h,获得扁杏仁水解蛋白粉33.8g,其组成成分如表5所示;扁杏水解蛋白粉冲调后50s溶解,溶解度为97.5%,沉淀指数为0.1,在pH为3~9范围内NSI值为91.2%。
表5扁杏水解蛋白粉的组成成分
组分 | 蛋白 | 脂肪 | 总糖 | 灰分 | 水分 |
含量(g/100g) | 79.7 | 2.3 | 4.5 | 5.1 | 8.4 |
实施例3
1)粉碎
将50g脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
2)酶解制备扁杏仁低聚糖
将50g粉碎的扁杏仁粉分散于1L去离子水中,用盐酸调pH至4.0,在40℃下,按照纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为300U/g加入纤维素酶,酶解反应3h;然后用盐酸调pH至4,在50℃下,按照果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为400U/g加入果胶酶,酶解反应3h,在90℃下灭酶25min,微滤膜过滤,得62.9g截留物和滤液,截留物备用,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的27%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.05MPa,温度为28℃,采用挤压式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为55Hz,撞针间隔时间为5s,进风温度为180℃,进料速度为240mL/h,获得扁杏仁低聚糖5.2g;
3)酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将62.9g截留物分散于1.2L去离子水中,用NaOH溶液调整pH至9,在60℃下,按照碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为300U/g、风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为300U/g加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应4h,用NaOH溶液调pH至7.5,在48℃下,按照中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为3000U/g加入中性蛋白酶,酶解反应4h,在90℃下灭酶25min,微滤膜过滤,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的27%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.05MPa,温度为28℃,采用挤压式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为55Hz,撞针间隔时间为5s,进风温度为180℃,进料速度为240mL/h,获得扁杏仁水解蛋白粉18.2g,其组成成分如表6所示,蛋白粉冲调后50s溶解,溶解度为97.8%,沉淀指数为0.1,在pH为3~9范围内NSI值为92.8%。
表6扁杏水解蛋白粉的组成成分
组分 | 蛋白 | 脂肪 | 总糖 | 灰分 | 水分 |
含量(g/100g) | 82.4 | 2.1 | 4.1 | 4.5 | 6.9 |
实施例4
1)粉碎
将70g脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
2)酶解制备扁杏仁低聚糖
将70g粉碎的扁杏仁粉分散于1L去离子水中,用盐酸调pH至4.0,在50℃下,按照纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为600U/g加入纤维素酶,酶解反应6h;然后用盐酸调pH至4.5,在60℃下,按照果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为600U/g加入果胶酶,酶解反应6h,在90℃下灭酶25min,微滤膜过滤,得93.6g截留物和滤液,截留物备用,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的27%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.05MPa,温度为28℃,采用挤压式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为55Hz,撞针间隔时间为5s,进风温度为180℃,进料速度为240mL/h,获得扁杏仁低聚糖7.3g;
3)酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将93.6g截留物分散于1.4L去离子水中,用NaOH溶液调整pH至10,在65℃下,按照碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为600U/g、风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为600U/g加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应6h,用NaOH溶液调pH至7,在52℃下,按照中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为6000U/g加入中性蛋白酶,酶解反应5h,在90℃下灭酶25min,微滤膜过滤,利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的27%,膜分离参数:错流速度为4cm/s,操作表压为0.05MPa,温度为28℃,采用挤压式喷雾干燥器,其中,进气压力为0.3MPa,雾化频率为55Hz,撞针间隔时间为5s,进风温度为180℃,进料速度为240mL/h,获得扁杏仁水解蛋白粉22.5g,其组成成分如表7所示,蛋白粉冲调后45s溶解,溶解度为98.2%,沉淀指数为0.1,在pH为3~9范围内NSI值为92.3%。
表7扁杏水解蛋白粉的组成成分
组分 | 蛋白 | 脂肪 | 总糖 | 灰分 | 水分 |
含量(g/100g) | 81.7 | 2.2 | 4.3 | 4.8 | 7.0 |
实施例5
用盐酸代替硫酸,NaOH溶液代替KOH溶液,其他同实施例1~实施例4。
实施例6
用盐酸代替硝酸,NaOH溶液代替KOH溶液,其他同实施例1~实施例4。
Claims (10)
1.一种制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:
1.1粉碎
将脱脂扁杏仁粉超微粉碎至过200目筛;
1.2酶解制备扁杏仁低聚糖
将粉碎的扁杏仁粉按照料液比为30g/L~100g/L分散于去离子水中,用无机酸调pH值至3.0~5.0,在35℃~55℃下,加入纤维素酶,酶解反应1h~8h,所述纤维素酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g;然后用无机酸调pH值至3.5~5.5,在40℃~65℃下,加入果胶酶,酶解反应2h~8h,所述果胶酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为200U/g~800 U/g,在85℃~95℃下灭酶20min~30min,微滤膜过滤,得截留物和滤液,截留物备用,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁低聚糖;
1.3酶解制备扁杏仁水解蛋白粉
将截留物按照料液比为30g/L~100g/L分散于去离子水中,用无机碱调pH值至8.0~11,在55℃~70℃下,加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶,酶解反应3h~8h,所述碱性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g,风味蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为100U/g~1000U/g,用无机碱调pH值至6.5~7.5,在45℃~55℃下,加入中性蛋白酶,酶解反应3h~6h,所述中性蛋白酶的酶活力与扁杏仁粉的质量比为1000U/g~8000U/g,在85℃~95℃下灭酶20min~30min,微滤膜过滤,滤液超滤浓缩,采用雾化器喷雾干燥,获得扁杏仁水解蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述无机酸为盐酸、硝酸或者硫酸。
3.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述纤维素酶的酶解反应温度为40℃~50℃,时间为3h~6h。
4.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述果胶酶的酶解反应温度为50℃~60℃,时间为3h~6h。
5.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述超滤浓缩是利用聚砜超滤膜浓缩滤液至原体积的25%~30%,其中,膜分离参数,错流速度为3cm/s~4cm/s,操作表压为0.04MPa~0.06MPa,温度为25℃~30℃。
6.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述雾化器为离心式或挤压式的喷雾干燥器。
7.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:喷雾干燥时,进气压力为0.2 MPa~0.3 MPa,雾化频率为50Hz~60Hz,撞针间隔时间为4s~6s,进风温度为170℃~210℃,进料速度为200mL/h~300mL/h。
8.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述无机碱为NaOH溶液或KOH溶液。
9.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述碱性蛋白酶和风味蛋白酶的酶解反应温度为60℃~65℃,时间为4h~6h。
10.根据权利要求1所述的制备扁杏仁低聚糖及速溶水解蛋白粉的方法,其特征是:所述中性蛋白酶的酶解反应温度为48℃~52℃,时间为4h~5h。
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