CN102688287A - 一种用于治疗缺血性中风的中药组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于治疗缺血性中风的中药组合物,其特征是以水蛭、黄芪、益母草依一定比例配比,经提取,浓缩,干燥,加制剂辅料按常规方法制成相应的制剂。本发明药物治疗缺血性中风具有良好效果,高效,无毒,使用方便。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗缺血性中风的中药组合物及其制备方法和用途。属于中药领域。
背景技术
缺血性脑中风是脑血管疾病的主要类型,约85%的脑中风是缺血性的,引起缺血性脑中风的原因主要是脑血管阻塞及脑部血液循环障碍,即脑血管和血液共同作用的结果。缺血性脑中风存活的患者面临的最大的问题是再发作(五年内的平均复发率高达40%以上)和其他缺血性事件的发生。缺血性脑中风是一种危害人民健康,威胁生命,影响劳动力的常见病和多发病,具有发病率高、致残率高、复发率高、死亡率高及并发症多的特点。
西医在缺血性中风疾病的治疗药物主要有降纤溶栓药、钙离子拮抗剂、抗血小板聚集药等。但是传统的抗凝血疗法由于并发症多,临床现今很少应用;溶栓药物如链激酶、尿激酶、重组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)和酰化纤溶酶原链激酶激活剂复合物(APSAC)等,其治疗效果主要取决于治疗的时间窗,主要应用于6h以内的超早期治疗,且其易导致出血并发症,特别是并发颅内出血;钙离子拮抗剂如尼莫地平、西比林和脑益嗪等应用范围较窄,且有不良反应如心律失常、尿潴留等发生;抗血小板聚集药物如阿司匹林可减少微栓子的发生,对预防复发有一定的疗效,但仅无胃溃疡及出血性疾病患者适用,新型药物噻氯吡啶也可引起消化道出血等副反应。中药制剂的应用中降纤、溶栓类药物以蛇类、水蛭和地龙研究得较多,但蛇毒、水蛭素、地龙蚓激酶等提取率均极低,且有极大副反应;扩张血管类药物如银杏叶提取物、葛根素、天麻、当归、川芎嗪、黄芪、丹参、刺五加等虽然有一定的效果,但疗效难以让人满意。
本专利技术以水蛭、黄芪、益母草三味中药组方,为临床常用经验方,现代研究表明,组方的三味中药药效物质明确,结合现代中药理念,本专利采用现代的提取精制手段,提取出各有效组分,更以先进的仿生酶解方法将水蛭中得蛋白酶解为小分子肽,能最大程度的利用药材,增强其药效,提高生物利用度;改善了传统中成药“粗、大、黑”的缺点,处方成分明确,得膏率大大降低,能进一步提高疗效。因此,本专利充分发挥中医药优势,研制安全有效的创新中药以治疗缺血性脑血管疾病,对缺血性脑血管疾病患者有非常重要的现实意义,而且从中医中药中寻求治疗缺血性中风的安全有效的药物和制剂是一种趋势,也符合临床诊治的需要。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种更有效的,副作用小的,价格低廉的,无污染的,具有协同作用的治疗缺血性中风的中药组合物;
本发明的第二目的是提供该药物制剂的制备方法及其治疗缺血性中风的应用。
本发明目的第一目的是这样实现的:
发明人提供一种中药组合物,该药物组合物原料药的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的,各原料药用量在下述范围都有较好的疗效:
水蛭100~300份 黄芪400~600份 益母草100~300份。
经过优选,其最佳配方是由下述重量份的中药原料药制成的药剂:
水蛭200份 黄芪500份 益母草200份。
本发明药物可将这些原料药研成粉末混合均匀冲服或泡服,但为了使该药物各原料药更好的发挥药效,优选对这些原料药进行酶解或醇提,然后浓缩,干燥,采用中药制剂常规方法制备成片剂、胶囊剂或滴丸剂,但是这不能限制本发明的保护范围。
本发明的第二目的是提供上述治疗缺血性中风的中药组合物的制备方法。本领域技术人员可以方便地将本发明配合适当的辅料,制备成各种常规制剂。本发明根据各药材的有效成分的性质,为便于患者服用,减少服用剂量,通过对原料药材采用现代的提取方法提取有效成分,能更好的发挥药效,提高原料药材的生物利用率,更容易被人体吸收。本发明的制备工艺按下述步骤进行:
a、取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约35~45℃,调节pH1.0~3.0,加入0.5~2%胃蛋白酶,保温1~3小时,调节pH7.0~9.0,加入0.5~2%胰蛋白酶,保温3~5小时,煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,干燥;
b、取黄芪、益母草,加水煎煮2~4次,每次1~3小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达50~70%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,干燥;
c、干浸膏粉碎,加入适量辅料,制成相应的制剂。
进一步优选制备工艺为:
a、取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约40℃,调节pH1.5~2.0,加入1%胃蛋白酶,保温2小时,调节pH7.5~8.0,加入1%胰蛋白酶,保温4小时,加热煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,干燥;
b、取黄芪、益母草,加水煎煮3次,每次1小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达60%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,干燥;
c、干浸膏粉碎,加入适量辅料,制成相应的制剂。
以上各组成中,重量是以生药计算的,在本发明中,若重量以克为单位,该组成可制成药物制剂1000剂,所述1000剂指,制成的成品药物制剂1000剂,如制成胶囊制剂1000粒、片剂1000片。
以上组成是按照重量份作为配比的,在生产时可按照相应的比例增大或减少,如大规模生产可以以公斤或以吨为单位,小规模生产也可以以克为单位,重量可以增大或减少,但各组成之间的生药材重量配比比例不变。
以上各组成中的单味中药,可以单独或同时被适当的具有相同药性、功效的中药替换,替换后的中药制剂其药物作用不变。
本发明是在中医经验方的基础上,经过大量的试验所得到的制剂。本发明的优点是组方合理,药物毒副作用低,克服了以往西药的毒副作用大的缺点及中药治疗缺血性中风疗效低或常用虫类药、动物药、毒性较强的植物药的缺点。
本发明中药组合物可以在制备用于治疗缺血性中风的药物中应用。
有益效果
为进一步验证本发明中药组合物对缺血性中风的治疗作用,发明人将本品制备成胶囊剂(蛭血通胶囊)并进行了动物药效学实验:
一、对小鼠全脑缺血的影响
1.动物种属、来源
ICR小鼠,SPF级,雌雄各半,体重18-22g,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,许可证号:SCXK(沪)2008-0016;
2.主要仪器及器械
BS210S精密电子天平(0.1mg~10g),德国赛多利斯(sartorius);
FEJ-200电子天平(0.1~200g),福州富日衡之宝电子有限公司;
CELLtac α型血球分析仪,日本NIHON KOHDEN公司;
Safire2多功能酶标仪,瑞士TECAN公司;
ALC-V8动物呼吸器,上海奥尔科特医疗仪器公司;
T25组织分散器,德国IKA公司;
SYC智能超级恒温水浴,巩义市英峪予华仪器厂;
DHG-9053A型电热恒温干燥箱,上海医用恒温设备厂。
3.剂量设置与分组
ICR小鼠60只,雌雄各半,体重18-22g,随机分为6组,每组10只,分别为:(1)对照组(无菌蒸馏水),(2)阳性药血塞通胶囊0.05g/kg,(3)阳性药活血通脉胶囊0.5g/kg,(4)蛭血通胶囊高剂量0.6g/kg,(5)蛭血通胶囊中剂量0.3g/kg,(6)蛭血通胶囊低剂量0.15g/kg。
4.试验方法
小鼠按上述方案分组连续预防给药7天,最后1次给药30min后,清醒状态下耳后断头,5min取脑,用冰冷的生理盐水制备10%的脑匀浆。按试剂盒说明书测定脑组织中丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平。
5.结果
蛭血通胶囊3个剂量组均可显著降低小鼠全脑缺血后脑组织中LDH水平(P<0.01,P<0.05),同时高、中剂量组也能明显降低脑组织中MDA水平(P<0.01,P<0.05)。(表.1)
表.1蛭血通胶囊对小鼠全脑缺血后脑组织中LDH和MDA水平的影响(N=10,)
#P<0.05,##P<0.01,与对照组比较。
二、对大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的影响
1.剂量设置与分组
SD大鼠106只,雌雄各半,体重180-220g,随机分为7组,分别为:(1)空白对照组(无菌蒸馏水),(2)模型组(无菌蒸馏水),(3)阳性药血塞通胶囊0.04g/kg,(4)阳性药活血通脉胶囊0.4g/kg,(5)蛭血通胶囊高剂量0.4g/kg,(6)蛭血通胶囊中剂量0.2g/kg,(7)蛭血通胶囊低剂量0.1g/kg。对照组10只大鼠,其余各组每组16只大鼠。
2.大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制备
各组大鼠连续灌胃给药7天,末次给药后用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(3.5mL/kg.bw),仰卧固定,颈正中切口,分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉,沿颈内动脉向下分离翼颚动脉,根部结扎该分枝。在颈外动脉近端备线,颈内动脉远端及颈总动脉放置动脉夹,颈总动脉分叉处靠颈外动脉侧切口,***尼龙鱼线,其深度为18-20mm,线栓进入颈内动脉,入颅至大脑前动脉,阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹,扎紧备线,用止血钳闭合皮肤。假手术组除不插线外,其余步骤同上。缺血2h后,迅速拔出鱼线再灌注,扎紧血管,缝合皮肤,动物放回笼饲养。
3.结果评价
以大鼠行为评分、脑水肿及脑缺血范围为指标,观察受试药对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。
(1)神经行为评分
于脑缺血再灌注后24h进行行为评分。参考文献,评分标准为:0分:正常,无明显神经损伤症状;1分:不能完全伸展对侧前爪;2分:向外侧转圈;3分:行走时向对侧倾倒;4分:不能自发行走,有意识障碍。
(2)脑组织含水量测定
脑缺血再灌注后24h,神经行为评分完毕,将大鼠快速断头取脑(去掉嗅球、小脑和低位脑干),用滤纸吸干表面残血,称其湿重。待染色观察完毕,将脑组织置120℃烤箱内48小时,恒重后称干重,按以下公式计算脑组织含水量:脑组织含水量(%)=(湿重-干重)/湿重×100%。
(3)脑缺血范围的测定
脑缺血再灌注后24h,将大鼠快速断头取脑(去掉嗅球、小脑和低位脑干),-20℃速冻10min后切成厚约2mm冠状脑片(5~6片),立刻置于1%TTC溶液中,37℃孵育40分钟。缺血区呈现白色,非缺血区呈现红色。根据染色分离缺血区和非缺血区,分别称重,并计算缺血区重量占整个脑组织的百分比(%),计算缺血抑制率(%)[(模型组缺血范围-治疗组缺血范围)/模型组缺血范围*100]。
4.结果
(1)对神经行为的影响
与假手术组相比,模型组动物出现明显的向外侧转圈、行走时向对侧倾倒等神经功能损伤症状,行为评分显著高于假手术组(P<0.01)。与模型组相比,蛭血通胶囊高、中剂量组可明显减轻大鼠的行为评分(P<0.05)。蛭血通胶囊低剂量组虽有部分改善,但作用不显著。由此提示蛭血通胶囊能明显改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经功能症状,结果见表2。
**P<0.01,与假手术组比较;#P<0.05,与模型对照组比较。
(2)对脑组织含水量的影响
与假手术组相比,模型组动物脑组织含水量显著升高(P<0.01),出现明显水肿。与模型组相比,蛭血通胶囊高、中剂量组可明显减轻大鼠的脑组织含水量(P<0.05)。蛭血通胶囊低剂量组虽有部分改善,但作用不显著,结果见表3。
**P<0.01,与假手术组比较;#P<0.05,与模型对照组比较。
(3)对脑缺血范围的影响
染色结果显示,假手术组未见明显梗死区域,模型组动物脑缺血范围百分比为20.8%,与模型组相比,蛭血通胶囊高、中、低剂量组对脑缺血范围的抑制率(%)分别为47.1、41.8和36.1%,改善作用明显(P<0.01,P<0.05)。提示蛭血通胶囊在本试验中对大鼠脑缺血再灌注损伤所致脑细胞坏死有明显的减轻,对神经细胞有一定保护作用。结果见表4。
**P<0.01,与假手术组比较;#P<0.05,##P<0.01,与模型对照组比较。
三、小鼠常压耐缺氧试验
1.剂量设置与分组
ICR小鼠60只,雌雄各半,体重18-22g,随机分为6组,每组10只,分别为:(1)空白对照组(无菌蒸馏水),(2)阳性药血塞通胶囊0.05g/kg,(3)阳性药活血通脉胶囊0.5g/kg,(4)蛭血通胶囊高剂量0.6g/kg,(5)蛭血通胶囊中剂量0.3g/kg,(6)蛭血通胶囊低剂量0.15g/kg。各组连续灌胃给药7天。
2.缺氧试验方法
上述动物分组后,药物稀释成不同浓度,各组分别给予相应药物,给药体积均为0.1ml/10g,空白对照组给予等体积的无菌蒸馏水。给药第7天,取125ml广口玻璃瓶,每瓶内加入50g医用钠石灰,瓶口涂抹凡士林保证密封。末次给药1h后,将动物迅速分别放入玻璃瓶中,密封瓶口,秒表计时,观察记录各只动物的死亡时间。
3.结果
由表5可见,与对照组相比,蛭血通胶囊高、中剂量组均能明显延长常压缺氧小鼠存活时间(P<0.01,P<0.05).
表.5蛭血通胶囊对常压缺氧小鼠存活时间的影响(N=10,)
#P<0.05,##P<0.01,与对照组比较。
四、对小鼠凝血时间的影响
1.剂量设置与分组
ICR小鼠60只,雌雄各半,体重18-22g,随机分为6组,每组10只,分别为:(1)空白对照组(无菌蒸馏水),(2)阳性药血塞通胶囊0.05g/kg,(3)阳性药活血通脉胶囊0.5g/kg,
(4)蛭血通胶囊高剂量0.6g/kg,(5)蛭血通胶囊中剂量0.3g/kg,(6)蛭血通胶囊低剂量0.15g/kg。各组连续灌胃给药7天。
2.试验方法
各组小鼠末次给药前禁食12h,末次给药1h后,摘去一侧眼球,于载玻片两端各滴1滴直径5mm的血滴,记录从采血开始至挑起血丝为止,所经历时间即为凝血时间,记录各小鼠的凝血时间。
3.结果
由表6可见,与对照组相比,蛭血通胶囊高、中、低剂量组均能显著延长小鼠凝血时间(P<0.01,P<0.05)。
表.6蛭血通胶囊对小鼠凝血时间的影响(N=10,)
#P<0.05,##P<0.01,与对照组比较。
五对血小板功能的影响
1.剂量设置与分组
SD大鼠50只,雌雄各半,体重180-220g,随机分为5组,每组10只,分别为:(1)空白对照组(无菌蒸馏水),(2)阳性药血塞通胶囊0.04g/kg,(3)蛭血通胶囊高剂量0.4g/kg,(4)蛭血通胶囊中剂量0.2g/kg,(5)蛭血通胶囊低剂量0.1g/kg。各组连续灌胃给药7天。
2.检测指标
末次给药后2h,股动脉采血,按下法分别进行血小板粘附和聚集试验:
a)血小板粘附试验
取血2.0ml,置于含有3.13%柠檬酸钠溶液的0.2ml塑料试管中,轻轻混匀。随后取1.0ml抗凝血加入容量为10ml的带塞玻璃试管中。将玻璃试管平放,缓慢滚动旋转15min(约3转/min),使血液与瓶壁充分接触。旋转后从玻璃试管和塑料试管(粘附前)中各取0.5ml血液分别加入到盛有3.13%柠檬酸钠溶液9.5ml的试管中。以塑料膜覆口,反复倾倒3次,使其均匀,在室温下静置2h,取试管上层液体血小板计数。并用以下公式计算血小板粘附率:
血小板粘附率(%)=(粘附前血小板数-粘附后血小板数)/粘附前血小板数×100%
b)血小板聚集试验
取血1ml,分别加入2ml EDTA缓冲液(0.077mol EDTA 3ml+磷酸缓冲液5ml+蒸馏水12ml)和2ml***-EDTA缓冲液(FEDTA:0.077mol 3ml+4%***5ml+pH为7.4的磷酸缓冲液2ml+10ml蒸馏水),每管加入0.5ml。充分混匀后放入塑料试管中,室温(22℃~25℃)下放置10min,以400转/min离心5min,取上清液在显微镜下计数血小板,并用以下公式计算血小板聚集率:
血小板聚集率(%)=(EDTA液中血小板数-FEDTA液中血小板数)/EDTA液中血小板数×100%
3.结果
由表7可见,蛭血通胶囊高、中剂量组可明显降低血小板的聚集率和粘附率(P<0.01,P<0.05),提示本品具有明显的体内抗血小板聚集和粘附作用,低剂量有部分抑制作用,未达统计学显著差异(P>0.05)。
#P<0.05,##P<0.01,与对照组比较。
具体实施方式
下面列举实施例,进一步说明本发明,各实施例仅用于说明本发明,并不限制本发明:
实施例1
水蛭200g 黄芪500g 益母草200g
以上三味,取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约40℃,调节pH1.5~2.0,加入1%胃蛋白酶,保温2小时,调节pH7.5~8.0,加入1%胰蛋白酶,保温4小时,加热煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,喷雾干燥;取黄芪、益母草,加水煎煮3次,每次1小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达50%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,减压干燥,干浸膏粉碎,于水蛭干浸膏粉合并,加入二氧化硅,并加淀粉至总量,混匀,填装胶囊,制成1000粒,即得。
实施例2
水蛭100g 黄芪400g 益母草100g
以上三味,取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约45℃,调节pH2.5~3.0,加入2%胃蛋白酶,保温3小时,调节pH9.0,加入2%胰蛋白酶,保温5小时,煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,备用;取黄芪、益母草,加水煎煮2次,每次2小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达70%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,减压干燥,干浸膏粉碎,于水蛭干浸膏粉合并,加入聚乙二醇适量,制成滴丸剂1000粒。
实施例3
水蛭300g 黄芪600g 益母草300g
以上三味,取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约35℃,调节pH2.0~2.5,加入0.5%胃蛋白酶,保温1小时,调节pH7.5,加入0.5%胰蛋白酶,保温3小时,煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,备用;取黄芪、益母草,加水煎煮4次,每次1小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达60%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,减压干燥,干浸膏粉碎,于水蛭干浸膏粉合并,加入二氧化硅、微晶纤维素适量,制成片剂1000片。
实施例4
本处方来源于山东中医药大学附属医院心脑血管病专家、享受国家政府特殊津贴、博士生导师邵念方教授,该方为邵教授多年临床应用的经验方的核心。邵念方教授主持以本方治疗46例缺血性中风急性期病人,并与44例基础治疗(抗血小板,应用阿司匹林肠溶片)+尼莫地平+胞二磷胆碱组进行对照试验,结果显示:治疗组46例中,基本痊愈26例,显效8例,有效9例,无效3例,愈显率为73.91%,总有效率93.48%。对照组44例中,基本痊愈13例,显效6例,有效22例,无效3例,愈显率43.18%,总有效率为93.18%。两组愈显率比较有显著性差异(P<0.01),总有效率比较无显著性差异(P>0.05),说明治疗组降低致残率优于对照组。
Claims (7)
1.一种中药组合物,其特征在于它是由下述重量配比的中药原料药制成的:
水蛭100~300份黄芪400~600份益母草100~300份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于它是由下述重量配比的中药原料药制成的:
水蛭200份 黄芪500份 益母草200份。
3.根据权利要求1或2所述的中药组合物,其特征在于制备成胶囊剂、片剂、滴丸剂。
4.根据权利要求1或2所述的中药组合物,其特征在于其制备方法包含如下步骤:
a、取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约35℃~45℃,调节pH1.0~3.0,加入0.5%~2%胃蛋白酶,保温1~3小时,调节pH7.0~9.0,加入0.5%~2%胰蛋白酶,保温3~5小时,煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,干燥;
b、取黄芪、益母草,加水煎煮2~4次,每次1~2小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达50%~70%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,干燥;
c、干浸膏粉碎,加入适量辅料,制成相应的制剂。
5.根据权利要求4所述的中药组合物的制备方法,其特征在于包含如下步骤:
a、取水蛭,粉碎,加水煮沸,待冷至约40℃,调节pH1.5~2.0,加入1%胃蛋白酶,保温2小时,调节pH7.5~8.0,加入1%胰蛋白酶,保温4小时,加热煮沸,滤过,滤液浓缩成浸膏,干燥;
b、取黄芪、益母草,加水煎煮3次,每次1小时,滤过,滤液浓缩,加乙醇使含醇量达60%,静置,滤过,滤液回收乙醇并浓缩成浸膏,干燥;
c、干浸膏粉碎,加入适量辅料,制成相应的制剂。
6.权利要求1或2中任一所述的中药组合物在制备用于抗凝、溶栓药物中的应用。
7.权利要求1或2中任一所述的中药组合物在制备用于治疗缺血性中风药物中的应用。
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Title |
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