CN102648416A - 用于评估角蛋白纤维损伤的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了使用阳离子荧光化合物来评估角蛋白纤维损伤的方法以及使用所述阳离子荧光化合物来比较不同角蛋白纤维的损伤的方法，所述阳离子荧光化合物包含阳离子铵基团并且不含羧基和/或磺酰基。所述方法可用于定量和/或定性地评估角蛋白纤维的损伤程度，并且还可用于比较不同来源的纤维、不同部分的纤维和/或用不同的美容处理、化学处理和/或机械处理处理过的纤维损伤。所述方法还可用于支持关于一种组合物和/或处理相对于其它组合物和/或处理的优越性的广告声明。

Description

用于评估角蛋白纤维损伤的方法
发明领域
在第一个方面，本发明涉及使用阳离子荧光化合物来评估角蛋白纤维损伤的方法，所述阳离子荧光化合物包含阳离子铵基团并且不含羧基和/或磺酰基。在第二个方面，本发明涉及使用所述阳离子荧光化合物来比较不同角蛋白纤维的损伤的方法。所述方法可用于定量和/或定性地评估角蛋白纤维的损伤程度，并且还可用于比较不同来源的纤维、不同部分的纤维和/或用不同的美容处理、化学处理和/或机械处理处理过的纤维的损伤。所述方法还可用于支持关于一种组合物和/或处理相对于其它组合物和/或处理的优越性的广告声明。
发明背景
角蛋白纤维，尤其是人的毛发纤维，可能随着时间流逝而损伤。损伤可涉及到所述纤维的外层(即，表皮)和/或内层(即，皮质和髓质)。表皮由重叠的细胞(鳞屑)组成，所述细胞连结到毛发纤维的近端(根端)处，并且它们指向毛发纤维的远端(末端)。当不具有表面损伤时，表皮通常包含平滑的未损伤的鳞屑边缘和鳞屑表面。与之相反，当毛发纤维损伤时，鳞屑边缘损伤了。损伤(尤其是对于表皮的那些损伤)造成毛发纤维更容易受到化学和机械损坏的伤害并影响毛发的表现力和美容的表现力，包括弹性和拉伸变形，弯曲和纤维硬度，以及扭曲和纤维刚度。
损伤可由环境因素引起，包括空气污染，日照、水池和/或雨。损伤还可由施用到所述纤维的梳理(美容)处理、化学处理和/或机械处理引起。通常使用梳理处理，尤其是洗发剂以便清洁毛发。然而，洗发剂可能以不同的方式损伤毛发。它们通过磨蚀和/或侵蚀，并且还通过从毛发上缓慢溶解或移除结构脂质和蛋白质的材料而损伤毛发。化学处理通常涉及改性毛发的结构并且可对毛发纤维造成严重的损伤。例如，这包括使用氧化染料和/或烫发染料还原毛发(例如，烫发处理)、漂白毛发和/或染色毛发。机械处理，尤其是擦拭、梳理、毛巾干燥和吹风干燥可能会通过磨蚀和/或侵蚀而损伤毛发。
可通过进行适宜的处理来防止和/或至少部分地修复损伤。尤其是调理组合物通常被用来防止和/或修复损伤。它们可包含阳离子表面活性剂与长链脂肪醇和/或其它脂质组合物的组合。它们还可包含硅氧烷基化合物。
评估毛发的损伤程度是受关注的，以便理解各种环境因素的影响以及在角蛋白纤维上美容(梳理)处理、化学处理和机械处理的影响。此类评估同样受关注以便展示用于防止和/或修复损伤的处理的功效。已经报道了使用不同的分析方法以用于评估毛发损伤的多种尝试。然而，此类方法通常使用复杂并昂贵的工艺设备来修复，和/或不提供可靠的数据。尤其是，已经报道了使用一些荧光化合物的方法。然而，当比较例如健康的毛发(即，未损伤的)和损伤的毛发时，介于这两者毛发之间获得的所述数据似乎没有显著的不同。
因此需要提供用于评估角蛋白纤维(尤其是人的毛发纤维)损伤的方法。尤其是需要提供用于评估使用美容处理、化学处理和/或机械处理处理过的角蛋白纤维损伤的方法。此外，还需要提供用于评估和比较不同角蛋白纤维的损伤的方法，例如评估和比较未处理的纤维与处理过的纤维、或用不同的处理方法处理过的纤维。至于美容组合物(尤其是调理组合物)是受关注的，需要提供用于评估此类组合物用于防止和/或修复毛发纤维损伤的功效的方法。还需要提供用于比较两种或更多种美容组合物，尤其是调理组合物用于防止和/或处理毛发纤维损伤的功效的方法。最后，需要提供用于支持关于组合物的用于防止和/或修复毛发纤维损伤的功效(或关于该组合物相对于比较组合物的优越性的广告声明)。
发明概述
本发明涉及用于评估角蛋白纤维损伤的方法，所述方法尤其包括以下步骤：用特定的阳离子荧光化合物来标记一种或多种纤维的至少一个样品并且评估标记的纤维的荧光。本发明还涉及用于评估和比较角蛋白纤维损伤的方法，所述方法尤其包括以下步骤：提供一种或多种纤维的至少两个不同的样品，用特定的阳离子荧光化合物来标记它们并且进行评估，然后比较标记的纤维的荧光。这些方法允许评估和比较纤维在暴露于环境照射量和使用美容处理、化学处理和/或机械处理处理之后的损伤程度。这些方法还允许评估用于防止和/或修复毛发损伤的组合物的功效。此外，这些方法允许评估和比较用于防止和/或修复毛发损伤的组合物的功效。
发明详述
在第一个方面，本发明涉及用于评估角蛋白纤维损伤的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的至少一个样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-用所述阳离子荧光化合物来标记所述一种或多种纤维的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估标记的一种或多种纤维的荧光。
发明人已出人意料地发现通过使用荧光显微镜法并且通过仔细地选择待使用的荧光化合物，角蛋白纤维表面损伤的程度可被定性地且定量地评估。实际上，发明人已发现当与发射适当的激发波长的装置联合使用时，包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基的阳离子荧光化合物允许获得适用于评估所述纤维荧光数据并且用一定程度的损伤关联此类荧光。同样地，这些特定的阳离子荧光化合物允许获得适用于比较处理过的纤维与未处理过的纤维，或用两种不同的处理方法处理过的纤维的荧光的数据。不受理论的束缚，据信包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基的阳离子荧光化合物相对于未损伤的纤维与损伤的纤维更显著地相互作用，并且此类相互作用随着所述纤维损伤程度而增加。尤其是，据信包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基的阳离子荧光化合物具体地讲与损伤的鳞屑边缘和表面(典型的损伤的纤维)相互作用，尤其是通过静电吸引的方式。与之相反，它们与光滑的未损伤的鳞屑边缘和鳞屑表面(典型的健康的或未损伤的纤维)显著更小地相互作用，如果存在相互作用的话。
根据本发明的方法包括提供一种或多种角蛋白纤维的至少一个样品(所谓的“提供步骤”)。所述样品可包含一种纤维、两种或多种纤维。当所述样品包含至少两种纤维时，所述纤维可在一个端部，或者在两个端部被彼此捆绑。所述样品通常包含相同来源的纤维(如，得自相同的人和身体的相同区域)，和/或相同的部分(例如，毛发纤维的根端或末端)，和/或已经经受相同的美容、化学和/或机械处理。
所述纤维可为足够长以用于接触阳离子荧光化合物并用于对它们的荧光进行评估。所述纤维具有优选1cm至10cm，更优选1cm至5cm，还更优选2cm至5cm的长度。
所述纤维可选自哺乳动物毛发，优选地选自人的毛发，更优选地选自人类女性的毛发。人的毛发的来源可为白种人、非洲人、亚洲人或任何其它来源。
毛发纤维可得自身体的任何部分，例如腿、臂、躯干、面部或头皮。所述毛发纤维优选地得自头皮。
所述方法还包括提供包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基的阳离子荧光化合物的步骤(所谓的“提供步骤”)。该化合物能够与带负电的一种或多种角蛋白纤维相互作用。该化合物还可被称为阳离子荧光探针。尤其是，所述相互作用可通过介于阳离子荧光化合物带正电的季铵基团与角蛋白纤维带负电的基团之间的静电吸引而发生。发明人已出人意料地发现阳离子荧光化合物和毛发纤维之间的相互作用(并因此所述的荧光强度)与角蛋白纤维的总体负电荷密切相关，所述总体负电荷与损伤程度相关联。因此，使用这些特定的阳离子荧光化合物允许显示荧光强度和角蛋白纤维损伤程度之间清楚的相关性。与之相反，发明人还已发现当使用包含至少一个羧基和/或磺酰基的阳离子荧光化合物时，获得了荧光强度大量变型，尤其是当与未损伤的毛发纤维作用时。此类化合物为例如氯化三甲基铵乙酰肼、N-[9-(2-羧基苯基)-6-(二乙氨基)-3H-呫吨-3-亚基]-N-乙基-，氯化物。此类变型不会使荧光强度和损伤程度之间的相关性变得困难。
阳离子荧光化合物可选自以下阳离子荧光化合物，其包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基并且属于以下类别：吖啶、偶氮、二芳基甲烷、二氨吖嗪、噁嗪酮、噻唑、三芳基甲烷、番红精或它们的混合物。
特别地，阳离子荧光化合物可选自以下颜色指数(下文称作“C.I.”)的化合物No.46005、41000、50040、51180、49005、42000、42040、42500、42510、42520、42555、42563、42585、42600、44045、44085、50240或它们的混合物。所述化合物可进一步通过它们的通用名、C.I.名称和/或以下经验式来定义：46005(吖啶橙，碱性橙14，C17H20N3Cl)、41000(金胺O，碱性黄2，C17H22N3)、50040(中性红，碱性红5，C15H17N4Cl)、51180(尼罗蓝，碱性蓝12，C20H18N2O2)、49005(硫黄素T，碱性黄1，C17H19N2SCl)、42000(孔雀绿，碱性绿4，C23H25N2Cl)、42040(亮绿，碱性绿1，C27H34N2O4S)、42500(副玫瑰红，碱性红9，C19H18N3Cl)、42510(玫苯胺，碱性紫14，C20H20N3Cl)、42520(新品红，碱性紫2，C22H24N3Cl)、42555(结晶紫，碱性紫3，C25H30N3Cl)，42563(维多利亚蓝，碱性蓝8，C34H34N3Cl)、42585(甲基绿，碱性蓝20，C26H33N3Cl2)、42600(乙基紫，碱性紫4，C31H42N3Cl)、44045(维多利亚蓝，碱性蓝26，C33H32N3Cl)、44085(夜蓝，碱性蓝15，C38H42N3Cl)、50240(番红精，碱性红2，C20H19N4Cl(二甲基)和C21H21N4Cl(三甲基))。所述阳离子荧光化合物可为任何可供选择的化合物，只要该化合物包含至少一个季铵基团，不含羧基和/或磺酰基，并且能够与带负电的一种或多种角蛋白纤维相互作用。
所述阳离子荧光化合物可使用任何适宜的烷基化试剂(例如碘甲烷)通过包含伯、仲和/或叔铵基团的阳离子荧光化合物的季铵化而获得。例如，所述阳离子荧光化合物可得自选自下列的化合物：C.I.No.(通用名、C.I.名称和/或经验式)21000(俾斯麦棕，碱性棕1，C18H20N8Cl2)、52015(亚甲蓝，碱性蓝9，C16H18N3SCl)、52020(亚甲基绿，碱性绿5，C16H17N4O2SCl)、52020(甲苯胺蓝，碱性蓝17，C15H16N3SCl)。
所述阳离子荧光化合物优选地选自属于噻唑类的化合物的组。在一个优选的实施方案中，所述阳离子荧光化合物为式I的噻唑化合物。
Figure BDA00001736656600051
式I的所述噻唑化合物通常为已知的，并因此被称作硫黄素T。硫黄素T具有318.9的分子量和在400nm至440nm的激发波长下450nm至600nm发射波长的发射荧光。尤其是，硫黄素T发射500nm至560nm发射波长的绿色荧光。可商购获得的式I所述噻唑化合物来源为例如得自Sigma的硫黄素T。提供硫黄素T是尤其有益的，因为发明人已发现该化合物和角蛋白纤维之间的相互作用根据所述角蛋白纤维损伤与否和损伤程度差异而显著不同。因此，硫黄素T尤其是适用于比较不同的来源、得自不同的部分和/或已经受不同的处理的角蛋白纤维之间的损伤程度。
所述阳离子荧光化合物可按任何适当的形式来提供，例如，粉状的、液体或固体形式。所述阳离子荧光化合物优选地以溶液的形式，更优选以水溶液的形式来提供。按所述组合物的总重量计，所述溶液可包含1ppm至3000ppm，优选100ppm至1000ppm，更优选400ppm至600ppm的所述化合物。所述溶液还可包含适宜的含水载体，优选水。
所述方法还包括用阳离子荧光化合物来标记所述纤维样品的步骤(所谓的“标记步骤”)。所述标记步骤可通过采用任何适宜的方法使一个或多个样品接触阳离子荧光化合物，并持续一段限定的时间来实施，所述时段足以使阳离子荧光化合物与一种或多种纤维相互作用。在实施该步骤之后，所述一种或多种纤维在下文中可被称作“标记的一种或多种纤维”。
当所述阳离子荧光化合物以溶液的形式提供时，使一个或多个样品以将所述一个或多个样品浸入溶液中的方式来接触阳离子荧光化合物。
为了确保阳离子荧光化合物具有足够的时间与一种或多种纤维相互作用，使所述一种或多种纤维优选接触阳离子荧光化合物1秒钟至10分钟，更优选1秒钟至1分钟。
所述方法还包括使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估标记的一种或多种纤维的荧光的步骤(所谓的“评估步骤”)。所述激发波长将取决于所用的阳离子荧光化合物。实际上，每个阳离子荧光化合物具有特定的吸收谱。为了获得在激发态的所述化合物(以便所述化合物将以特定的波长发射光，在下文中被称作“发射波长”)，所述源应提供适当的激发波长。可使用任何可商购获得的提供特定波长的源。
硫黄素T在440nm具有最大吸收并发射(当在激发态时)450nm至600nm“荧光”发射波长(尤其是500nm至560nm绿色荧光)。为了激发硫黄素T，应提供400nm至440nm的激发波长。
评估标记的一种或多种纤维的荧光的步骤可使用任何适用于检测的装置进行，并且如果需要，显示和/或记录由阳离子荧光化合物发射的波长(即，荧光)。检测可使用荧光显微镜来实施。可商购获得的荧光显微镜为例如得自Nikon的Eclipse 80i或得自Partec的Cyscope。对荧光的评估可使用适宜的软件作为辅助。用于观察的可商购获得的软件为例如得自MitaniCorporation的DynamicEye REAL和得自Mitani Corporation的LuminaVision。用于图像分析的可商购获得的软件为例如得自Mitani Corporation的LuminaVision。
一个或多个样品的荧光可通过目测定性地评估，或者通过直接目测，例如通过双目镜观察，或者通过间接目测，例如图片分析。一个或多个样品的荧光还可通过数据分析定量地评估。
所述方法还可包括处理一种或多种纤维的一个或多个样品的步骤(所谓的“处理步骤”)。所述处理步骤优选在提供步骤之后并在标记步骤之前实施。所述处理步骤可通过使用任何适宜的美容组合物处理、化学处理和/或机械处理处理过的一种或多种纤维的一个或多个样品来实施。
该步骤通过将美容组合物施用到角蛋白纤维上来实施。可使用本领域已知的任何适宜的美容组合物，例如一种或多种洗发剂、一种或多种调理组合物、一种或多种毛发洗去型处理剂、一种或多种毛发免洗型处理剂、一种或多种定型组合物。例如，可使用商品名Pantene
Figure BDA00001736656600071
Head & Shoulders
Figure BDA00001736656600072
的任何可商购获得的洗发剂、调理剂、毛发洗去型处理剂和毛发免洗型处理剂。
仅一种组合物可被施用到一种或多种纤维上。作为另外一种选择，两种或多种组合物可被同时或循序地施用。此外，在施用每种组合物之前和/或之后，可将一种或多种纤维进一步润湿、冲洗和/或干燥。在一个实施方案中，所述处理步骤包括用洗发剂处理(洗涤)一种或多种纤维，然后用水冲洗洗涤的一种或多种纤维，然后干燥所述一种或多种纤维。在另一个实施方案中，所述处理步骤包括用洗发剂处理(洗涤)一种或多种纤维，然后用水冲洗洗涤的一种或多种纤维，然后用调理组合物处理一种或多种纤维，然后用水冲洗处理过的一种或多种纤维，然后干燥所述一种或多种纤维。在另一个实施方案中，所述处理步骤包括用洗发剂处理(洗涤)一种或多种纤维，然后用水冲洗洗涤的一种或多种纤维，然后用调理组合物处理所述一种或多种纤维，然后用水冲洗处理过的一种或多种纤维，然后用毛发洗去型处理剂处理至少一次所述一种或多种纤维，然后用水冲洗处理过的一种或多种纤维，然后干燥所述一种或多种纤维。
作为另外一种选择或者互补，该步骤可通过使用化学处理化学地处理一种或多种纤维的一个或多个样品来实施。可使用本领域已知任何适宜的化学处理，例如烫发处理、漂白处理和/或着色染色处理。
作为另外一种选择或者互补，该步骤可通过机械处理一种或多种纤维的一个或多个样品来实施。可使用本领域已知任何适宜的机械处理，例如擦拭、梳理、毛巾摩擦和/或吹干。
所述方法还可包括冲洗掉过量的阳离子荧光化合物的步骤(所谓的冲洗步骤)。所述冲洗步骤可在所述标记步骤之后且评估步骤之前实施。冲洗一种或多种纤维以便移除过量的阳离子荧光化合物—即，未与所述一种或多种纤维相互作用的化合物(所谓的“游离化合物”)—有利于避免所述纤维荧光的评估受游离化合物的存在而被影响。所述纤维可使用水来冲洗。尤其是，该步骤可通过将一种或多种纤维的一个或多个样品浸入水溶液中持续限定的一段时间来实施，该时段足以移除过量的阳离子荧光化合物。水溶液优选地为水，更优选去离子水。所述时段优选地为1秒至10分钟，更优选1秒至1分钟。
所述方法还可包括利用所述评估来支持广告声明的步骤(所谓的“广告步骤”)。实际上，本方法使角蛋白纤维损伤程度与所述荧光强度相关联。当广告宣传一种处理时(例如调理组合物)，可使用所述数据和/或使用该方法获得的图片，从而支持和/或展示广告声明，根据所述广告声明，所述处理防止和/或修复纤维损伤。
在第二各方面，本发明涉及包括以下步骤的方法：
-提供至少一种或多种角蛋白纤维的两个不同的样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-用所述阳离子荧光化合物来标记所述一种或多种纤维的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估一种或多种纤维的每个样品的荧光；以及
-比较所述样品之间的荧光。
所述方法包括提供一种或多种角蛋白纤维的至少两个，优选两个至四个，更优选两个不同的样品的步骤。如本文所用，“不同的样品”是指样品在以下方面彼此不同：纤维的来源、纤维的部分和/或对纤维施用的处理。
在一个实施方案中，样品可得自不同的人。作为另外一种选择，样品可得自相同的人，但得自不同的身体部位。
在另一个实施方案中，一个样品可包含一种或多种纤维的顶端部分，且另一个样品可包含相同的一种或多种纤维的根部分。提供和比较不同的部分的相同的一种或多种纤维，尤其是尖端与根，允许评估损伤程度随着所述一种或多种纤维生长、随着时间的差异。
在另一个实施方案中，一个样品可包含未处理的一种或多种纤维，并且另一个样品包含用美容组合物处理过的一种或多种纤维。其它样品可用洗发剂和/或调理组合物，和/或毛发洗去型处理剂，和/或免洗型处理剂，和/或任何其它适宜的美容组合物处理。比较处理过的一种或多种纤维和未处理的一种或多种纤维有益于评估组合物，例如洗发剂在毛发上的损伤效果，与之相反，用于评估组合物，例如调理组合物用于防止和/或修复一种或多种纤维的损伤的有益效果。
在另一个实施方案中，所述样品可用不同的美容组合物来处理。例如且非详尽地，(1)一个样品可用一种洗发剂处理，并且另一个样品用另一种洗发剂处理；(2)一个样品可用一种洗发剂处理，并且另一个样品可用相同的洗发剂处理然后再用一种调理剂处理；(3)一个样品可用一种洗发剂处理然后再用一种调理剂处理，并且另一个样品可用相同的洗发剂处理然后再用另一种调理剂处理，(4)一个样品可用一种洗发剂处理然后再用一种调理剂处理，并且另一个样品可用相同的洗发剂处理，然后再用相同的调理剂处理，然后再用洗去型处理剂处理，(5)一个样品可用一种洗发剂处理，然后再用一种调理剂处理，并且另一个样品可用相同的洗发剂处理，然后再用相同的调理剂处理，然后再用免洗型处理剂处理，(6)一个样品可用一种洗发剂处理，然后再用一种调理剂处理，并且另一个样品可用另一种洗发剂处理，然后再用相同的调理剂处理；(7)一个样品可用一种洗发剂处理一次，并且另一个样品可用相同的洗发剂处理两次或多次；(8)一个样品可用一种调理剂处理一次，并且另一个样品可用相同的调理剂处理两次或多次。比较不同的处理过的一种或多种纤维有益于比较不同的洗发剂的损伤效果(参见(1))；评估调理剂对洗发剂处理剂的减轻效应(参见2))；比较调理组合物用于防止和/或修复所述纤维损伤的有益效果(参见(3))；评估洗去型处理剂对洗发剂处理剂的减轻效应(参见(4))；评估免洗型处理剂对洗发剂处理剂的减轻效应(参见(5))；比较一种调理剂对不同的洗发剂处理剂的减轻效应(参见(6))；比较重复处理对纤维的效应参见(7)和(8))。
在另一个实施方案中，一个样品可包含未处理的一种或多种纤维，并且另一个样品包含被化学处理过的纤维。作为另外一种选择，所述样品可包含用不同的化学处理处理过的一种或多种纤维。
在另一个实施方案中，一个样品可包含未处理的一种或多种纤维，且另一个样品包含被机械处理过的纤维。作为另外一种选择，所述样品可包含用不同的机械处理处理过的一种或多种纤维。
一个或多个提供(阳离子荧光化合物)步骤，任选的/可供选择的一个或多个处理步骤，一个或多个标记步骤，任选的一个或多个冲洗步骤，评估步骤和任选的广告步骤在上文中连同本发明的第一方面所限定。
所述方法还包括比较所述样品的荧光的步骤(所谓的“比较步骤”)。所述样品的荧光可通过目测定性地比较，或者通过直接目测，例如通过双目镜观察，或者通过间接地目测，例如照片分析。所述样品的荧光还可通过数据分析定量地比较。例如，所述比较步骤有益于比较一种处理对纤维的效应(相对于没有处理的)，比较至少两种不同的处理的损伤效果，比较至少两种不同的处理用于防止和/或修复纤维损伤的功效。
所述方法还可包括利用所述评估和比较来支持广告声明的步骤(所谓的“广告步骤”)。例如，基于两种不同的样品之间的比较结果而实施的广告步骤有益于广告宣传处理用于防止和/或修复对纤维的损伤的功效，和/或广告宣传一种处理相对于另一种处理用于防止和/或修复损伤的优越性。当广告宣传一种处理(例如，调理组合物)相对于另一种处理时，可使用通过该方法获得的数据和/或图片，从而支持和/或展示广告声明，根据所述广告声明，与用于防止和/或修复纤维损伤的另一种处理相比，所述处理提供更高的性能。
在一个具体的实施方案中，本发明涉及用于评估角蛋白纤维损伤的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的至少一个样品；
-用美容处理、化学处理和/或机械处理来处理所述样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-冲洗掉过量的阳离子荧光化合物；
-用所述阳离子荧光化合物来标记所述处理过的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估标记的处理过的样品的荧光；
-任选地，使用所述评估来支持关于用于防止和/或修复纤维损伤的处理的功效和/或性能的广告声明。
在另一个具体的实施方案中，本发明涉及用于评估和比较不同角蛋白纤维的损伤的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的两个不同的样品；
-用美容处理、化学处理和/或机械处理来处理一个样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-冲洗掉过量的阳离子荧光化合物；
-用所述阳离子荧光化合物来标记未处理的样品和处理过的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估标记的未处理的样品(对照物)和标记的处理过的样品的荧光；
-比较两个样品的荧光；
-任选地，使用所述评估和比较来支持关于用于防止和/或修复纤维损伤的处理相对于对照物的性能和/或功效的广告声明。
在另一个具体的实施方案中，本发明涉及用于评估和比较不同角蛋白纤维的损伤的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的两个不同的样品；
-用不同的美容处理、化学处理和/或机械处理来处理两个样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-冲洗掉过量的阳离子荧光化合物；
-用所述阳离子荧光化合物来标记两个处理过的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估两个标记的处理过的样品的荧光；
-比较两个样品的荧光；
-任选地，使用所述评估和比较来支持关于用于防止和/或修复纤维损伤的所述第一处理相对于所述第二处理的优越性的广告声明。
实施例
材料
毛发纤维：25cm长的亚洲女性毛发纤维
阳离子荧光化合物：硫黄素T，得自Sigma
显微镜：Eclipse 80i，得自Nikon
软件：DynamicEye REAL和Lumina Vision，得自Mitani Corporation。
清洁洗发剂：pH=5-7的组合物，包含AE3硫酸铵(51.2%)、十二烷基硫酸铵(36.4%)、椰油酰胺DEA(2.3%)、二甲苯磺酸铵(3.5%)、EDTA(0.1%)、防腐剂(<1%)、水适量至100%。
洗发剂：pH=5-7的组合物，包含月桂基聚氧乙烯醚硫酸铵(8.5%)、十二烷基硫酸铵(1.7%)、椰油酰氨基丙基甜菜碱(1.7%)、N-月桂酰胺基乙基-N-羟乙基乙酸钠(1.7%)、乙二醇二硬脂酸酯(1.5%)、椰油酰胺MEA(0.8%)、脂肪醇(0.6%)、聚二甲基硅氧烷(0.6%)、聚季铵盐-10(0.4%)、氢化的聚癸烯(0.2%)、前维生素(<0.1%)、氨基酸(<0.1%)、防腐剂(0.4%)、前维生素(<0.1%)、水适量至100%。
调理组合物：pH=5-7的组合物，包含二十二烷基三甲基硫酸甲酯铵/异丙醇(2.3%)、脂肪醇(5.2%)、末端氨基的聚二甲基硅氧烷(4.0%)、防腐剂(0.6%)、水适量至100%。
洗去型处理剂：pH=5-7的组合物，包含二十二烷基三甲基氯化铵(2.8%)、末端氨基的聚二甲基硅氧烷(2.0%)、脂肪醇(6.5%)、苄醇(0.4%)、EDTA(0.1%)、前维生素(<0.1%)、氨基酸(<0.1%)、防腐剂(<0.1%)，水适量至100%。
化合物的百分比为每份所述组合物的总重量的重量百分比。
方案
取决于实施的方法，一些步骤可被省略，例如处理步骤。
1.[提供步骤]提供了或者为一个毛发纤维根部分的一个样品(从毛发根“3cm至6cm”-部分)，或者为一个毛发纤维顶端部分样品(从毛发根“14cm至20cm”-部分)。每个样品用清洁洗发剂溶液来洗涤(10%)。
2.[提供步骤]提供了包含500ppm硫黄素T(Sigma)的水溶液-下文被称作“硫黄素T溶液”。
3.[处理步骤]将所述样品通过施用洗发剂，然后施用调理组合物，然后施用洗去型处理剂处理，如下所述。这些样品在下文中被称作“处理过的样品”。
3.1.将每个样品在50%洗发剂溶液中完全浸渍2秒。然后移除样品，并且从发根至发梢摩擦十次。然后用去离子水冲洗样品10秒。
3.2.将每个样品在100%调理组合物中完全浸渍2秒。然后移除样品，并从发根至发梢摩擦两次。然后用去离子水冲洗样品1秒。
3.3.将每个样品在100%洗去型处理剂中完全浸渍2秒。然后移除样品，并从发根至发梢摩擦两次。然后用去离子水冲洗样品1秒。
3.4.将每个处理过的样品在环境温度下干燥过夜。
4.[标记步骤]将每个处理过的样品在硫黄素T溶液中完全浸渍10秒。
5.[冲洗步骤]然后将每个处理过的并且标记的样品完全浸入去离子水中并且搅拌(即，振摇)并持续10秒，以便移除过量的阳离子荧光化合物(即，游离的化合物)。
6.[评估步骤]每个处理过的、标记的样品被用双面的粘合带固定在玻璃一侧。所述荧光的评估通过捕捉荧光图像和在反射模式的正常图像进行，使用在下表I中详述的参数。报道/记录在视图区域整个毛发表面的绿色荧光强度和荧光数据。
Figure BDA00001736656600131
表I-参数和校准
评估和比较毛发纤维顶端部分对毛发纤维根部分的损伤
提供了相同纤维的两个样品(即，顶端部分和根部分)。使所述样品保持为未处理的。根据上文所述的规程评估所述荧光，除了步骤3被省略以外。
  样品   荧光强度和变型
  未处理的顶端部分   对照物
  未处理的根部分   观察到相对于对照物50%的强度下降
表II：荧光强度对对照物(在整个毛发表面的平均绿色荧光强度，n=40)
如在表II提供的数据所示，由未处理的顶端部分发射的荧光比未处理的根部分显著更高(具有成对t检验处于95%置信度水平)。这展示根据本发明的方法适用于关联毛发纤维的荧光强度(通过阳离子荧光化合物与所述纤维的相互作用)与它们的损伤程度。毛发纤维的损伤越重，荧光越强烈。
评估和比较处理过的毛发纤维的顶端部分与未处理过的毛发纤维的顶 端部分以及毛发的不同的处理过的顶端部分的损伤
提供了2组相同纤维的2个样品。每组包含处理过的顶端部分与未处理的顶端部分(对照物1和2)。根据上述的规程评估荧光强度。对于对照物1和2，步骤3被省略了。对于处理过的顶端部分，步骤3如下表II中所述地实施。
Figure BDA00001736656600141
表III：处理过的顶端部分的处理步骤
Figure BDA00001736656600142
表IV：荧光强度(在100%相对于个别的对应的毛发尖端)
如由表IV中提供的数据所示，处理过的顶端部分的荧光强度比未处理的顶端部分的荧光强度显著更低(具有成对t检验处于95%置信度水平)。这显示处理过的损伤的纤维的损伤程度(本文的顶端部分)相对于未处理的损伤的纤维显著地降低。这展示了根据本发明所述的方法适用于评估调理组合物和/或用于修复的洗去型处理剂(并通过延伸防止)对毛发纤维损伤的功效。
同样如由表IV中提供的数据所示，第2组处理过的顶端部分的荧光强度比第1组处理过的顶端部分的荧光强度显著更低(具有成对t检验处于80%置信度水平)。这显示第2组处理剂(包括通过洗去型处理剂的附加处理)比第1组剂处理进一步降低损伤的纤维的损伤程度。这展示了根据本发明所述的方法适用于评估和比较用于修复的两种不同的(并通过延伸防止)对毛发纤维损伤的功效。
本文所公开的量纲和值不旨在被理解为严格地限于所述的精确值。相反，除非另外指明，每个这样的量纲是指所引用的数值和围绕该数值的功能上等同的范围。例如，所公开的量纲“40mm”旨在表示“约40mm”。
除非明确排除或换句话讲有所限制，本文中引用的每一个文件，包括任何交叉引用或相关专利或专利申请，均据此以引用方式全文并入本文。对任何文献的引用均不是承认其为本文公开的或受权利要求书保护的任何发明的现有技术、或承认其独立地或以与任何其它一个或多个参考文献的任何组合的方式提出、建议或公开任何此类发明。此外，如果此文献中术语的任何含义或定义与任何以引用方式并入本文的文献中相同术语的任何含义或定义相冲突，将以此文献中赋予那个术语的含义或定义为准。
尽管已用具体实施方案来说明和描述了本发明，但对于本领域的技术人员显而易见的是，在不背离本发明的精神和保护范围的情况下可作出许多其它的改变和变型。因此，随附权利要求书中旨在涵盖本发明范围内的所有这些改变和变型。

Claims (15)

1.一种用于评估角蛋白纤维损伤的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的至少一个样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-用所述阳离子荧光化合物来标记所述一种或多种纤维的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估所述一种或多种纤维的荧光。
2.如权利要求1所述的方法，所述方法用于评估和比较不同角蛋白纤维的损伤，所述方法包括以下步骤：
-提供一种或多种角蛋白纤维的至少两个不同的样品；
-提供阳离子荧光化合物，所述阳离子荧光化合物包含至少一个季铵基团并且不含羧基和/或磺酰基；
-用所述阳离子荧光化合物来标记所述一种或多种纤维的样品；
-使用提供适当的一种或多种激发波长的源来评估一种或多种纤维的每个样品的荧光；以及
-比较所述样品的荧光。
3.如任一项前述权利要求所述的方法，其中所述纤维选自哺乳动物的毛发；优选人的毛发；更优选人类女性的毛发。
4.如任一项前述权利要求所述的方法，其中所述阳离子荧光化合物选自属于下列类别的化合物的组：吖啶、偶氮、二芳基甲烷、二氨吖嗪、噁嗪酮、噻唑、三芳基甲烷、番红精，或它们的混合物，优选地选自属于噻唑类别的化合物的组。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述阳离子荧光化合物为式I的噻唑化合物：
Figure FDA00001736656500011
6.如任一项前述权利要求所述的方法，其中所述阳离子荧光化合物以水溶液的形式提供，所述水溶液包含按所述组合物和含水载体的总重量计1ppm至3000ppm的所述化合物。
7.如任一项前述权利要求所述的方法，其中所述一种或多种纤维的荧光使用荧光显微镜来评估。
8.如权利要求7所述的方法，其中所述样品的荧光通过目测定性地评估和/或其中所述样品的荧光使用软件执行的装置定量地评估。
9.如任一项前述权利要求所述的方法，所述方法还包括采用美容处理、化学处理和/或机械处理来处理所述一种或多种纤维的一个或多个样品的步骤。
10.如权利要求2至9中的任一项所述的方法，其中所述样品在以下方面彼此不同：所述纤维的来源、所述纤维的部分和/或对所述纤维施用的一种或多种处理方法。
11.如权利要求10所述的方法，其中一个样品包含未处理的一种或多种纤维，并且另一个样品包含用一种或多种美容组合物、化学组合物和/或机械组合物处理过的一种或多种纤维。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述样品用不同的美容处理、化学处理和/或机械处理进行处理。
13.如权利要求9至12中的任一项所述的方法，其中所述美容处理选自洗发剂、调理组合物、洗去处理、免洗处理或它们的组合。
14.如任一项前述权利要求所述的方法，所述方法还包括冲洗掉过量的阳离子荧光化合物的步骤。
15.如任一项前述权利要求所述的方法，所述方法还包括以下步骤：利用所述评估和比较来支持关于一种处理相对于对照物的功效和/或关于一种处理相对于其它处理的优越性的广告声明。
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