CN102631677A

CN102631677A - 一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物

Info

Publication number: CN102631677A
Application number: CN2012101166255A
Authority: CN
Inventors: ***; 李宁; 张华�; 刘原伍; 任立明; 郭英
Original assignee: China Agricultural University
Current assignee: China Agricultural University
Priority date: 2012-04-19
Filing date: 2012-04-19
Publication date: 2012-08-15

Abstract

本发明公开了一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物。该药物组合物由***和雄激素组成，两者的质量比可为1∶1到1∶5，优选1∶3。本发明中所述***具体可为17β-***或雌酮，所述雄激素具体可为二氢睾酮或睾酮。药效试验表明，利用动脉粥样硬化的小鼠模型(ApoE敲除小鼠)雄鼠，小鼠去势后，主动脉的动脉硬化斑块增多；而给予***和雄激素后抑制动脉粥样硬化斑的累积。

Description

一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物。

背景技术

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)性疾病是严重危害人类健康的一大类疾病，其主要临床事件为冠心病和脑卒中。MONICA流行病学调查显示，90年以后大于47.47％死因为心血管疾病，AS是世界范围的第一死亡原因。WHO推测，30年内死于冠心病和脑卒的人分别增加74.6％和75％。因此AS是现在和未来20年人类死亡的头号杀手。新英格兰医学杂志报道：冠心病和脑卒中已位居我国人口死因第一位。据不完全统计，我国AS的发病率接近10％，60岁以上人群AS发病率接近80％。可见，AS已严重影响人们的健康和生活质量。因此，开发一种有效、经济的治疗AS的药物具有重大的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物。

本发明所提供的药物组合物由***和雄激素组成。

其中，所述***和雄激素的质量比可为1∶1到1∶5；优选质量比为1∶3。

本发明中所述***具体可为17β-***(17β-estradiol：E2)或雌酮(estrone)。所述雄激素具体可为二氢睾酮(Dihydrotestosterone：DHT)或睾酮(Testosterone：T)。

本发明的另一个目的是提供所述药物组合物的应用。

本发明所提供的应用是所述药物组合物在制备预防和/或治疗动脉粥样硬化的产品中的应用。所述产品具体可为药品或保健品。

本发明还提供了一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的产品。

本发明所提供的产品，其活性成分为本发明所述的***和雄激素的组合物。

所述产品具体可为药品或保健品。

需要的时候，在上述中药品或保健品还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等，也可加入其它辅助剂如香味剂、甜味剂等。

以***和雄激素的组合物为活性成分制备的药品或保健品可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

药效试验明，利用动脉粥样硬化的小鼠模型(ApoE敲除小鼠)雄鼠，小鼠去势后，主动脉的动脉硬化斑块增多；而给予***和雄激素后抑制动脉粥样硬化斑的累积。

附图说明

图1为实施例1中不同处理组的主动脉进行油红氧染色的结果。

图2为实施例2中SD大鼠肝脏脂肪酸从头合成和β氧化相关基因的变化；其中，(A)半定量RT-PCR显示脂肪酸从头合成基因SREBP1c、FAS、ACC和SCD1的变化；(B)半定量RT-PCR显示脂肪酸β氧化基因PPARα、VLACD、MACD、ACO1、UCP2和CPT1的变化；(C)Western blot检测SD大鼠肝脏UCP2基因表达变化；(D)Western blot检测SD大鼠肝脏CPT1基因表达变化；HFD，高脂饮食；NC，普通饮食对照组；C，高脂饮食对照组。^***，P＜0.001(与高脂饮食对照组比较)。

图3为SD大鼠肝脏TNFα和IL-6表达变化；(A)半定量RT-PCR分析TNFα的表达变化。(B)半定量RT-PCR分析IL-6的表达变化。

图4为SD大鼠不同处理组的肝组织学图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行说明但本发明并不局限于此。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

下述实施例中所用的17β-***(17β-estradiol：E2)、雌酮(estrone)、二氢睾酮(Dihydrotestosterone：DHT)、睾酮(Testosterone：T)都可以从Sigma公司购得。

实施例1、

①ApoE敲除雄性小鼠(即载脂蛋自E基因敲除的雄性小鼠)去势：将ApoE敲除雄性小鼠的睾丸和附睾全部切除，使其失去自发产生雌雄激素的能力。

②AS模型的建立：ApoE敲除去势雄性小鼠(具有C57BL遗传背景)以高脂饲料(基础饲料+10％猪油、2％胆固醇和0.5％胆酸钠)饲喂三个月，产生明显AS。

③雌雄激素替代治疗AS：在高脂料喂养的同时，给予17β-***(E2)和二氢睾酮(DHT)，两者的质量比为1∶3，每天背部皮下注射，E2 1.0mg/kg/day，DHT3.0mg/kg/day。给药时间：90天。

在给药结束后的第二天通过腹腔注射戊巴比妥钠40mg/Kg使小鼠安乐死。

取主动脉(包括：主动脉根部、升主动脉、主动脉弓、降主动脉、腹主动脉等)进行油红氧染色，红色的部分为动脉硬化的斑块。

结果见图1。由图1可知，去势的ApoE小鼠，没有了雌、雄激素的保护，很容易比未去势的ApoE雄鼠诱发动脉硬化，雌、雄激素联合给药三个月的去势ApoE小鼠动脉硬化的斑块比未去势的ApoE雄鼠动脉硬化明显减小。表明，雌雄激素联合用药可用于预防和/治疗AS。

实施例2、

①雄性SD大鼠去势：将雄性SD大鼠的睾丸和附睾全部切除，使其失去自发产生雌雄激素的能力。

②AS模型的建立：雄性SD去势大鼠以高脂饲料(基础饲料+10％猪油、2％胆固醇和0.5％胆酸钠)饲喂三个月，产生明显AS。

③雌雄激素替代治疗AS：在高脂料喂养的同时，给予17β-***(E2)和二氢睾酮(DHT)、或单独给予E2或DHT，同时给药时，E2和DHT两者的质量比为1∶3，每天背部皮下注射，E2 1.0mg/kg/day，DHT 3.0mg/kg/day；单独给予E2或DHT时，每天背部皮下注射，E2 1.0mg/kg/day或DHT 3.0mg/kg/day。给药时间：90天。

在给药结束后的第二天通过腹腔注射戊巴比妥钠40mg/Kg使大鼠安乐死。

1)血清生物化学因子、血脂谱等是重要指标，本实验对不同处理组血清中生物化学因子、血脂谱及雌、雄激素水平等进行了检测。结果见表1。数据显示，高脂饮食处理组大鼠血清ALT水平较普通饮食处理组大鼠显著性升高，E2或E2+DHT处理组血清ALT水平较高脂饮食对照组显著性降低。高脂饮食对照组血清总胆固醇、TG和LDL-c较普通饮食对照组显著性升高，HDL-c较普通饮食对照组显著性降低。与高脂饮食对照组相比，E2或E2+DHT处理组血清TG水平显著降低，HDL-c水平显著升高；DHT或E2+DHT处理组血清LDL-c水平显著性降低；E2、DHT或E2+DHT处理组血清总胆固醇和ApoB100水平显著降低，而且E2+DHT处理具有叠加效应，总胆固醇和ApoB100水平下降最显著。结果表明，雌、雄激素联合给药可抑制脂类和胆固醇的合成，降低血中脂质积累的危险。证明了雌、雄激素的协同效应。

表1去势SD大鼠血清生物化学因子、血脂谱及雌、雄激素水平

2)同时，测量了大鼠肝脏内脂类从头合成关键脂肪酸棕榈酸、棕榈油酸及油酸的水平。结果见表2。数据显示，高脂饮食对照组大鼠肝脏内棕榈酸、棕榈油酸及油酸水平较普通饮食对照组大鼠肝脏显著性升高。与高脂饮食对照组相比，E2、DHT或E2+DHT处理显著减少了肝脏内棕榈酸、棕榈油酸及油酸的水平。本研究数据暗示了雌、雄激素减少体内脂肪酸的从头合成。

表2去势SD大鼠肝脏内脂类从头合成关键脂肪酸水平(mg/g组织)

大鼠去势，喂养普通料(n＝10)和高脂料(n＝30)，统计学差异显著性由各组不同的字母上标表示(p＜0.05)；E2、DHT和E2+DHT组与高脂料对照组比较。

3)激素和雄激素调节肝脏中脂肪酸从头合成和β氧化关键基因的表达

组织病理学分析、血清学分析和肝脏脂质谱及游离脂肪酸水平数据说明，雌、雄激素可能作用于脂类从头合成和脂肪酸β氧化过程。RT-PCR分析表明：所有处理组，脂肪酸从头合成过程关键基因固醇调节元件结合蛋白1c(Sterol regulatory elementbinding protein-1c，SREBP-1c)和硬脂酰辅酶A脱氢酶1(Stearoyl-Coenzyme A desaturase1，SCD1)表达没有显著性变化。然而与高脂饮食对照组相比，E2、DHT或E2+DHT处理显著降低了脂肪酸合成酶(Fatty acid synthases，FAS)的表达。与普通饮食对照组相比，高脂饮食处理组乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase，ACC)的表达显著性升高，然而与高脂饮食对照组比较，E2、DHT或E2+DHT处理组ACC的表达没有显著性变化(图2)。

4)***和雄激素通过改善TNFα和IL-6抑制炎性因子

组织病理学分析表明：雌、雄激素处理显著减轻动脉硬化。由于炎症因子在AS形成过程中起到重要作用，肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis factorα，TNFα)和白介素6(Interleukine 6，IL-6)的水平与动脉损伤程度密切相关，本实验通过半定量RT-PCR和免疫荧光分析了TNFα和IL-6的表达情况。RT-PCR结果显示，与普通饮食对照组相比，高脂饮食对照组显著升高了TNFα和IL-6的表达；与高脂饮食对照组相比，E2、DHT或E2+DHT处理显著降低了TNFα和IL-6的表达(图3)。因此，雌、雄激素能够改善大鼠模型中的炎症反应。

5)对SD大鼠不同处理组的肝组织学图进行分析。结果见图4。图4中A1-3为正常的肝组织学图，B1-3高脂饲料在对照组引起脂肪在肝细胞的积累；E2作用在肝的3区图C1-3，表明***保护肝脏的3区，抑制脂肪在3区肝细胞的积累；DHT组作用在肝的1区图D1-3，雄激素保护肝脏的1区，抑制脂肪在1区肝细胞的积累，E2和DHT联合作用，参见图E1-3，可抑制脂肪在1，2，3区肝细胞的积累。

Claims

1.一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物组合物，由***和雄激素组成。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述***和雄激素的质量比为1∶1到1∶5。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：所述***和雄激素的质量比为1∶3。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于：所述***为17β-***或雌酮；所述雄激素为二氢睾酮或睾酮。

5.权利要求1-4中任一项所述的药物组合物在制备预防和/或治疗动脉粥样硬化的产品中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述产品为药品或保健品。

7.一种预防和/或治疗动脉粥样硬化的产品，其活性成分为权利要求1-4中任一项所述的药物组合物。