CN102631609B - 具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物、制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物，所述组合物由下述重量份配比的原料药组成：槐米20～30重量份、夏枯草15～20重量份、马齿苋10～15重量份、麦冬10～15重量份、百部10～15重量份、虎杖10～15重量份、艾叶10～15重量份、丁香10～15重量份。本发明提供的中药提取物的提取分离方法简便，所得产品纯度较高，产品质量有了很大的改进。所选用的中药组合物具有抵抗紫外线、抑制和消除由于紫外线照射产生的炎症因子、良好的晒后修复等功效。故其提取物可作为天然防晒原料应用于防晒化妆品之中。

Description

具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物、制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，具体说是一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物、制剂及其制备方法。

背景技术

目前市场上的护肤产品很多，但大多是防护类产品，有针对皮肤损伤后的修复的护肤制剂很少。且其功效单一，无法满足皮肤的多种需求。在晒后或干燥环境下可以造成皮肤红肿、灼伤、脱水、褶皱或过敏等症状，此时需要对皮肤应急修复及时缓解及治疗皮肤问题，为后期护肤做好基础。

但目前市售的修复产品往往也仅有单一修复功效，有的目前的防晒剂大多使用化学合成物，如肉桂酸酯、水杨酸酯、二苯甲酮衍生物；物理性防晒剂如二氧化钛和氧化锌等，这类防晒物质或易致皮肤过敏，或太厚重、不易涂抹。随着社会的发展，生活水平的提高，人们对于防晒化妆品的质量和性能要求也越来越高。人们希望出现一系列对人体健康无害，又具有美容保健作用的天然原料制备的防晒护肤化妆品，它一方面能抵抗紫外线对皮肤的伤害，一方面还具有安全、刺激性小、美白祛斑等优势。

本研究利用中医思想，结合生物防晒机理，制备出的中药防晒剂，具有吸收紫外线的功效，也具有抑制和消除由于紫外线照射产生的炎症因子的功效，皮肤在紫外线照射产生炎症因子前，中草药有效成分已经存在于皮肤中，有效阻止紫外对皮肤造成损伤，同时兼有晒后修复的功效。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物。

本发明的再一目的在于提出一种上述中药组合物活性成分的提取方法。

本发明的第三目的在于提出利用上述中药提取物制备的护肤制剂。

本发明的发明思路为：以中医科学理论为基础，以皮肤健康为宗旨，根据君、臣、佐、使的中医组方思想，经过大量的中药筛选及组方实验，并以组方中药提取物为主要功效添加剂，辅以化妆品中常用基质成分配制而成的中药防晒修复护肤制剂。本发明所述中药护肤品天然温和、安全无刺激，并极易被皮肤吸收，具有抵抗紫外线、抑制和消除由于紫外线照射产生的炎症因子、良好的晒后修复及清除过剩自由基的功效，并且对干燥环境造成的皮肤褶皱脱水剖淡等症状有很好的修复功效。

本发明按照中医组方思想，将中草药槐米、夏枯草、马齿苋、麦冬、百部、虎杖、艾叶、丁香组合，并增加五倍子、地丁、金银花、黄芪、黄精组合提取得到中药提取物，具有很好的抵御紫外线照射、安全无刺激，且主要针对晒后修复以及其他皮肤应急修复有很好的疗效。各味药功效简介如下：

槐米：别名白槐、槐花、槐花米、槐籽(中医将槐的花与蕾做相同使用)，性微寒，味苦。功能主治：凉血止血，清肝泻火。用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、衄血、肝热目赤、头痛眩晕。

夏枯草：苦、辛，寒。功能主治：清火明目：治目赤肿痛、头痛。清肝火、降血压：治高血压病、高血脂、高血粘和高血糖。散结消肿：治瘰疬、瘿瘤、乳痈肿痛。

马齿苋：中药名马齿苋、马齿苋子。功能主治：清热解毒、祛湿止带功效，适用于湿热下注、带下色黄、黏稠味臭、小便短黄、口渴口苦、舌红苔黄、脉滑者，亦可用于湿热泄泻、痢疾等。

麦冬：又名沿阶草、书带草、麦门冬，为百合科沿阶草属多年生常绿草本植物。功能主治：养阴生津，润肺清心。用于肺燥干咳。虚痨咳嗽，津伤口渴，心烦失眠，内热消渴，肠燥便秘；咽白喉。治肺燥干咳，吐血，咯血，肺痿，肺痈，虚劳烦热，消渴，热病津伤，咽干口燥，便秘。

百部：性味甘、苦，微温。归肺经。功能主治润肺下气止咳，杀虫。用于新久咳嗽，肺痨咳嗽，百日咳。

虎杖：别名花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙、斑庄、斑杖根、大叶蛇总管、黄地榆。性味微苦，微寒。归肝、胆、肺经。功能主治：清热解毒，利胆退黄，祛风利湿，散瘀定痛，止咳化痰。用于关节痹痛，湿热黄疸，经闭，癓瘕，咳嗽痰多，水火烫伤，跌扑损伤，痈肿疮毒。

艾叶：主治吐血；衄血；吃力血；便血；崩漏；妊娠下血；***；痛经；胎动不安；心腹冷痛；泄泻久痢；霍乱转筋；带下；湿疹；疥癣；痔疮；痈疡。

丁香：性味甘、辛、大热。入胃肾二经。功效暖胃，温肾。主治：治胃寒痛胀、呃逆、吐泻、痹痛、疝痛、口臭、牙痛。

五倍子：五倍子又名百虫仓、百药煎、棓子，性味归经：味酸，涩，性寒。归肺、大肠、肾经。功效：敛肺；止汗；涩肠；固精；止血；解毒。主治：肺虚久咳；自汗盗汗；久痢久泻；脱肛；遗精；白浊；各种出血；痈肿疮疖。

地丁：别名箭头草、羊角子、独行虎、地丁草、如意草。性味苦，寒，归心、肝经。功能主治：清热利湿，解毒消肿。治疔疮，痈肿，瘰疬，黄疸，痢疾，腹泻，目赤，喉痹，毒蛇咬伤。

金银花：处方名二花，双花，金银花。功能主治：抗病原微生物作用，抗炎解热，加强免疫机能。

黄芪：性味甘，微温。归经：归肺、脾、肝、肾经。功效主治：益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。用于治疗气虚乏力，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴，慢性肾炎，蛋白尿，糖尿病等。炙黄芪益气补中，生用固表托疮。

黄精：性味甘，平。归肺，脾，肾经。功能主治：滋肾润肺，补脾益气。

为了实现本发明的目的，本发明采用如下具体技术方案：

一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物，所述组合物由下述重量份配比的原料药组成：

槐米20～30重量份、夏枯草15～20重量份、马齿苋10～15重量份、麦冬10～15重量份、百部10～15重量份、虎杖10～15重量份、艾叶10～15重量份、丁香10～15重量份。

一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物，所述组合物由下述重量份配比的原料药组成：

槐米20～30重量份、夏枯草15～20重量份、马齿苋10～15重量份、麦冬10～15重量份、百部10～15重量份、虎杖10～15重量份、艾叶10～15重量份、丁香10～15重量份、五倍子5～10重量份、地丁5～10重量、金银花5～10重量份、黄芪5～10份、黄精5～10份。

一种所述的中药组合物的制备方法，具体步骤如下：

(1)按照所述重量份称取各原料药；

(2)将原料药于醇溶液中浸泡，浸泡时间为30～120min，原料药与醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶10～1∶20；持续搅拌，加热至50～70℃提取60～120min；

(3)冷却至30～40℃，100～200目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3∶1～4∶1，得浓缩液(浓缩比例为浓缩前的液体与浓缩后的液体的重量比)。

(4)浓缩液中加入10％～20％的丁二醇，加热50～70℃，搅拌均匀，滤液再经滤饼或3～5μm滤纸过滤，取滤液；

(5)灭菌即制备得到中药提取物。

所述步骤(2)中醇溶液为体积百分数为60％～80％的乙醇溶液；原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶10，持续搅拌，加热至50℃提取60min。

所述步骤(3)中冷却到30℃，200目过滤后得到的滤液再经滤板过滤。

所述步骤(5)为90℃保温30min后灭菌；水浴降温至室温，加入防腐剂，即制备得到中药提取物。

一种具有皮肤应急修复功效的外用中药提取物，所述中药提取物由上述的制备方法经制备得到的。

所述的中药提取物在制备具有皮肤应急修复功效的外用护肤制剂或化妆品添加剂中的应用。

所述皮肤应急修复为晒后修复或皮肤失水后修复或皮肤过敏后修复。

根据使用途径不同，本发明组合物制成外用护肤制剂，如外用面霜、乳液、爽肤水等。但不局限于上述剂型，可按照护肤品工业领域中已知的方法，将上述药物组合物按已知方法除菌后制成各种不同的外用制剂。

本发明推荐使用方法：在皮肤受到外界损伤后，如晒后、在干燥环境下时间过长或受到敏感源刺激引发过敏症状后，24小时内涂覆，有很好的治疗和缓解功效，并为后期护肤创建良好的基础，可增加后期护肤效果。

本发明提供的制备中药提取物的方法，提取分离方法简便，所得产品纯度较高，产品质量有了很大的改进。所选用的中药组合物具有抵抗紫外线、抑制和消除由于紫外线照射产生的炎症因子、良好的晒后修复美白等功效。对本发明得到的中药提取物进行功能测试，结果表明该提取物在波长290～400nm下具有良好的吸收能力，透明质酸酶抑制实验表明具有良好的抑制炎症因子抗组胺的功效，同时还具有增强皮肤水分含量、减轻皮肤红斑红肿症状的功效。

附图说明

图1为本发明提供的中药提取物紫外吸收光谱图；

图2为本发明提供的中药提取物透明质酸酶抑制实验；

图3、4为中药提取物修复皮肤屏障保湿测定；

图5为中药提取物防晒效果评价-动物实验结果；

图6为体外美白实验--酪氨酸酶抑制实验结果；

图7为中药提取物清除DPPH自由基实验结果。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；本实施例所用药材均可以从中国药材集团公司购买得到，符合中华人民共和国药典2005版标准。其他原料均为化妆品领域公知原料，可通过市售购买获得。

滤板购自天津市东丽区通达滤材器厂生产。

实施例1制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米30克、夏枯草15克、马齿苋15克、麦冬10克、百部12克、虎杖12克、艾叶10克、丁香15克。

(2)将原料药于体积百分比为60％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为60min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶10；持续搅拌，加热至70℃提取60min；

(3)冷却至50℃，200目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入20％的丁二醇，加热至50℃，搅拌均匀，滤液再经滤饼过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例2制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米20克、夏枯草20克、马齿苋10克、麦冬15克、百部10克、虎杖10克、艾叶12克、丁香12克。原料药最好经粉碎，粒度最佳为60～80目，本实施例中采用80目粒度原料药。

(2)将原料药于体积百分比为80％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为30min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶15；持续搅拌，加热至60℃提取120min；

(3)冷却至30℃，100目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为4∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入10％的丁二醇，加热至70℃，搅拌均匀，滤液再经3～5μm滤纸过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例3制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米25克、夏枯草12克、马齿苋12克、麦冬12克、百部15克、虎杖15克、艾叶15克、丁香10克。原料药最好经粉碎，粒度最佳为60～80目，本实施例中采用60目粒度原料药。

(2)将原料药于体积百分比为70％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为90min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶20；持续搅拌，加热至60℃提取90min；

(3)冷却至40℃，100目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入15％的丁二醇，加热至60℃，搅拌均匀，滤液再经3～5μm滤纸过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例4制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米30克、夏枯草20克、马齿苋10克、麦冬15克、百部15克、虎杖10克、艾叶10克、丁香10克、五倍子10克、地丁10克，金银花10克，黄芪5克、黄精5克。

(2)将原料药于体积百分比为60％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为60min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶10；持续搅拌，加热至70℃提取60min；

(3)冷却至50℃，200目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入20％的丁二醇，加热至50℃，搅拌均匀，滤液再经滤饼过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例5制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米20克、夏枯草15克、马齿苋15克、麦冬10克、百部10克、虎杖15克、艾叶15克、丁香15克、五倍子5克、地丁5克、金银花5克、黄芪10克、黄精10克。原料药最好经粉碎，粒度最佳为60～80目，本实施例中采用80目粒度原料药。

(2)将原料药于体积百分比为80％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为30min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶15；持续搅拌，加热至60℃提取120min；

(3)冷却至30℃，100目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为4∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入10％的丁二醇，加热至70℃，搅拌均匀，滤液再经3～5μm滤纸过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例6制备中药提取物

(1)按照下述配比称取各原料药；

槐米25克、夏枯草18克、马齿苋12克、麦冬12克、百部12克、虎杖12克、艾叶12克、丁香12克、五倍子8克、地丁6克，金银花6克，黄芪8克、黄精8克。原料药最好经粉碎，粒度最佳为60～80目，本实施例中采用60目粒度原料药。

(2)将原料药于体积百分比为70％乙醇溶液中浸泡，浸泡时间为90min，原料药与乙醇溶液的质量体积比(g/ml)为1∶20；持续搅拌，加热至60℃提取90min；

(3)冷却至40℃，100目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3∶1得浓缩液；

(4)浓缩液中加入15％的丁二醇，加热至60℃，搅拌均匀，滤液再经3～5μm滤纸过滤，取滤液；

(5)90℃保温30min，灭菌；水浴降温至室温，加入0.4％LGP液体防腐剂，得到产品。(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS，购自ISP国际特品有限公司)

经检测：提取物为浅红色粘稠液体，pH在5.5～6.5之间，可溶性固形物大于15％。

实施例7本发明霜剂的制备

原料及用量如表1：

表1

制备工艺：

(1)将A、B、C相分别称好并使其分散均匀；

(2)将B相加热到90度左右，C相85度左右；

(3)在均质B相的同时将C相加入，混合均质大约三分钟；

(4)快速搅拌10分钟至均匀，将A相缓慢加入；

(5)搅拌均匀时将D相称取加入，并再均质两分钟左右，即可。

本发明功效实验

1、中药提取物紫外吸收光谱图

将实施例4制备好的中药提取物在防晒光区波长290～400nm下，利用紫外分光光度计进行波长扫描测定。

结果见图1，从图中可知，中药提取物的最大吸收峰在300nm-330nm，在290～400nm防晒光区内都有吸收值，吸收范围宽泛，吸收值大。因此其防晒作用强，可作为防晒剂，添加到防晒护肤品中。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4提取物的实验结果，在此不赘述。

2、中药提取物透明质酸酶抑制实验

(1)实验原理：

本方法采用透明质酸酶体外抑制法测定化妆品原料及化妆品产品的抗过敏功效。透明质酸酶是过敏反应的参与者，分解体内的透明质酸(HA)，使其变成低分子量的酸性刺激源，引起组胺释放，诱导机体产生敏感症状，研究表明透明质酸酶与炎症、过敏有强相关性，许多抗过敏药物有强抑制透明质酸酶活性的作用。

透明质酸酶能够不加选择地水解透明质酸中的β-N-乙酰葡糖胺与D-葡糖醛酸盐之间的1，4-键，而得到β-N-乙酰葡糖胺，β-N-乙酰葡糖胺在碱性条件下可以与乙酰丙酮缩合生成生色原2-甲基-3-二乙酰吡咯衍生物，生色原与对-二甲氨基苯甲醛在浓盐酸乙醇中生色。基本反应方程式：

2-甲基-3-乙酰-吡咯衍生物+P-DAB→生色(结构不明)

(2)实验所需溶液配制：

①.醋酸缓冲溶液(pH＝5.6)：量取1155μL冰乙酸稀释至100mL混匀后取其中4.8mL为A溶液；称取2.72g乙酸钠结晶加水溶解并定容至100mL混匀后取其中45.2mL为B溶液；混合溶液A、B，以水定容至100mL混匀。精密测定其pH值，用溶液A或B调至5.6即可。

②.透明质酸酶溶液：称取透明质酸酶0.0100g置于烧杯中加入4mL醋酸缓冲溶液，最终工作浓度为1250u/mL。

③.0.5mg/mL透明质酸钠溶液：称取透明质酸钠0.0050g置于烧杯中加入10mL醋酸缓冲溶液。

④.埃尔利希试剂(Ehrlich reagent)：称取0.8g对-二甲氨基苯甲醛溶于15mL浓盐酸和15mL无水乙醇中，可保存两个月。

⑤.乙酰丙酮溶液：取乙酰丙酮3.5mL溶于50mL1.0mol/L的碳酸钠溶液中，此溶液在用前配制。

(3)实验步骤：

采用透明质酸酶体外抑制实验Elson-Morgan法进行。取0.1mL0.25mmol/LCaCl₂溶液和0.5mL透明质酸酶液37℃保温培养20min；加入样品液(样品液为实施例4制备得到的中药提取物)0.5mL，继续37℃保温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠液37℃保温30min，常温放置5min；加入0.1mL0.4mol/LNaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释，放置20min显色，用分光光度计测定其吸光度值。

结果见图2，随着中药提取物浓度的增加，透明质酸酶活性抑制率逐渐增大，浓度为5％时，抑制率达到90.6％，表明在低浓度下，中药提取物具有明显的抑制透明质酸酶活性的功效，说明中药提取物抗组胺效果好，能够有效的抑制和消除由于炎症因子。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4提取物的实验结果，均具有较高的透明质酸酶活性抑制率，在此不赘述。

3、中药提取物修复皮肤屏障保湿测定

该方法按照如下文献提供进行：温竹，黄正梅，高艳玲，化妆品保湿功效评价，日用化学品科学，2009年第12期：26-28。

皮肤水分流失TEWL对评估皮肤水分保护层的功能是非常重要的参数，在国际上已经得到了广泛的认可。皮肤水分保护层越完好，皮肤角质层屏障功能越强，水分的含量就会越高，皮肤水分流失TEWL的数值也就越低。MMV(moisture measurementvalue)测定皮肤的水分含量，MMV值越大皮肤角质层水分含量越高。

实验方法：

(1)测试环境

温度：21±1℃，湿度：50±5％，并且进行实时动态监测。

(2)测前准备

用水清洗双手手臂内侧，擦干后标记受测部位，同一手臂可同时标记多个区域，区域间隔1cm，测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上，从左臂至右臂依次编号1-10号，11号不涂抹样品为空白参照。

(3)测试

所采用的实施例4制备的中药提取物溶液的质量浓度为5％。

对三十名志愿者进行人体贴敷实验。清洗二十分钟后测试敷面膜前水分含量值，依次贴敷分别载有0.2ml 1-10号样品(中药提取物质量浓度5％)液面膜，十五分钟后揭去面膜，用湿纸巾擦拭残留在皮肤表面的样品液，再用干纸巾擦干皮肤表面水分，待皮肤吸收二十分钟后，再次检测测试者贴敷处水分含量值(MMV值)和TEWL值。

对皮肤水分含量的测量结果进行统计学分析比较，采用t检验方法进行显著性分析检验，其中p＜0.05表示有显著性差异。估计均数的抽样误差可计算该组数据的标准差或标准误。当个别数据偏差较大时，可根据t检验剔除标准进行筛选，如符合标准则可剔除；当剔除后的受试者人数少于30人时，应增加受试者人数直至符合要求。

该实验结果如图3、4所示，由图可知，5％的中药提取物具有明显降低水分含量散失的功效。5％浓度的中药提取物具有增强皮肤水分含量的功效，恢复受损角质层，修复调整皮肤的正常厚度，使其最大程度的发挥生理功能，可以促进皮肤保持健康的、自然的状态。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4提取物的实验结果，均具有增强皮肤水分含量的功效，在此不赘述。

4、中药提取物防晒效果评价——动物实验结果

实验方法：取豚鼠18只，300±50g雌雄各半，分为3组，豚鼠背部两侧剃毛，剃毛面积约4cm²。

分为样品组：涂抹含中药提取物10％浓度的防晒霜(实施例7制备)，1次/2h，30mg/4cm²。

阳性对照组：涂抹欧珀莱SPF15防晒霜，1次/2h，30mg/4cm²。

阴性对照组(空白)：涂抹去离子水，1次/2h，30mg/4cm²。

实验步骤：利用红黑色素仪(Mexamaeter，德国CK电子公司)，检测血红色素水平，记录原始数值。利用GS2004/2006多波段日光防护系数人体测定***，给予豚鼠剃毛区域一定量剂量紫外线照射，然后用红黑色素仪检测血红色素变化值。

实验结果见图5，从图中可以看出，阳性对照组(防晒霜组)红色素水平在UV照射前后基本没有变化；阴性对照组红色素水平在UV照射前后变化最大，增加幅度最高；样品组红色素水平在UV照射前后相比阳性对照组稍有上升，但明显小于阴性对照组，表明含有中药提取物防晒霜具有一定的防晒功效，并且大大降低刺激性和安全性的隐患。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的中药提取物分别替换实施例7中的实施例4中药提取物制备成霜剂，重复上述实验，结果与实施例7结果相同，表明本发明中药提取物制备得到的霜剂具有防晒功效。

5、体外美白实验——酪氨酸酶抑制实验

黑色素的形成过程中，酪氨酸酶起了关键酶的作用，黑色素产生的多少与酪氨酸酶的活性有直接的关系。因此，皮肤美白剂就是通过作用于皮肤黑色素生成，代谢过程中，抑制黑色素生成且符合安全规范的物质。L-酪氨酸酶与其底物L-酪氨酸可以发生催化反应。当在实验体系中添加了有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂后，对催化反应可以产生抑制作用，通过测定添加试剂前后于475nm处的吸光光度，来评价试剂对L-酪氨酸酶活性的抑制率。

实验所需溶液配制：

a：准确称取17.91g十二水磷酸氢二钠溶于蒸馏水中，用500mL容量瓶定容；

b：准确称取7.8g二水磷酸二氢钠溶于蒸馏水中，用500mL容量瓶定容；

c：取a中溶液92.6mL，b中溶液107.4mL，配成200mL pH＝6.8PBS缓冲溶液。

d：0.05％L-酪氨酸溶液：准确称取0.05g L-酪氨酸，先用少量0.1mol/L的盐酸溶解，待其溶解后用pH＝6.8的磷酸缓冲溶液(PBS)定容至100mL。

样品采用实施例4制备得到的中药提取物。

表2美白功效检测实验配制表

注：C1和T1加入0.5mL酪氨酸酶，酶活为100U/mL。

实验步骤：

(1)C2管配好摇匀后，在37℃水浴锅中水浴加热10min，波长475nm下调零。

(2)C1管溶液配好摇匀，37℃水浴10min后，加酪氨酸酶0.5ml，继续水浴10分钟，测定C1吸光度值。

(3)按(1)(2)同样方法，以T2调零测定T1吸光度值。

(4)计算样品对酪氨酸酶的活性抑制率T(％)。

公式：T(％)＝(C1-T1)/C1×100％

酪氨酸酶抑制实验的结果见图6，随着提取液浓度的增加，酪氨酸酶活性抑制率逐渐提高，说明该组方提取物防晒的同时也具有一定的美白功效。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4提取物的实验结果，均具有美白功效，在此不赘述。

6、清除DPPH自由基实验

该DPPH法按照如下文献提供的方法进行：郑大贵，叶青，叶红德，余衍文，DPPH法评价Vc、异Vc及其衍生物的抗氧化性能，食品工业科技，2008年第04期：113-115。

二苯代苦味酰肼自由基(DPPH·)是一种稳定的有机自由基，在可见光区最大吸收峰为517nm，在乙醇溶液中，每个DPPH分子在溶液中可生成一个稳定的含氮自由基，具有典型紫色，当它与提供1个电子的自由基清除剂作用时，生成无色产物，使溶液的典型紫色变浅。其褪色程度与配对电子数成化学计量关系。因而可用分光光度法进行定量分析，来检测自由基清除情况，从而评价样品的抗氧化能力。其能力用清除率来表示，清除率越大，则表明其抗氧化能力越强。

实验方法：取等体积的样品液与2×10^-4mol/L的DPPH溶液加入同一试管中混匀(各取4ml)，30min后用95％乙醇作参比，在517nm下测其吸光度A₃；同时测定2×10^-4mol/L的DPPH溶液与等体积95％乙醇混合后的吸光度A₁以及测定待测液与等体积95％乙醇混合液的吸光度A₂。样品液采用实施例4制备得到的中药提取物。

DPPH清除率＝[1-(A₃-A₂)/A₁]×100％

(A₃-A₂)消除了料液自身颜色造成的误差，其与A₁的比值就是未被清除的自由基所显现出来的颜色深浅程度，用1减去该比值即得到料液对DPPH的清除率。

实验结果见图7，从图中看出，中药提取物随着浓度的增加，DPPH清除率也在逐渐增大，这也从侧面看出中药提取物具有一定的清除过剩自由基的能力，使紫外线对皮肤的伤害减小，起到减缓治疗的作用。发明人利用实施例1、2、3、5、6制备的提取物重复上述实验，结果同实施例4提取物的实验结果，均具较高的DPPH清除率，在此不赘述。

Claims (9)

1.一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物，其特征在于，所述外用中药组合物由下述重量份配比的原料药组成：

槐米20～30重量份、夏枯草15～20重量份、马齿苋10～15重量份、麦冬10～15重量份、百部10～15重量份、虎杖10～15重量份、艾叶10～15重量份、丁香10～15重量份。

2.一种具有皮肤应急修复功效的外用中药组合物，其特征在于，所述外用中药组合物由下述重量份配比的原料药组成：

槐米20～30重量份、夏枯草15～20重量份、马齿苋10～15重量份、麦冬10～15重量份、百部10～15重量份、虎杖10～15重量份、艾叶10～15重量份、丁香10～15重量份、五倍子5～10重量份、地丁5～10重量、金银花5～10重量份、黄芪5～10份、黄精5～10份。

3.一种权利要求1或2所述的外用中药组合物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）按照权利要求1或2所述重量份称取各原料药；

（2）将原料药于醇溶液中浸泡，浸泡时间为30～120min，原料药与醇溶液的质量体积比g/ml为1：10～1：20；持续搅拌，加热至50～70℃提取60～120min；

（3）冷却至30～40℃，100～200目过滤，过滤液浓缩，浓缩比例为3：1～4:1，得浓缩液；

（4）浓缩液中加入10%～20%的丁二醇，加热50～70℃，搅拌均匀，滤液再经滤饼或3～5μm滤纸过滤，取滤液；

（5）灭菌即制备得到中药提取物。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中醇溶液为体积百分数为60%～80%的乙醇溶液；原料药与乙醇溶液的质量体积比g/ml为1:10，持续搅拌，加热至50℃提取60min。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中冷却到30℃，200目过滤后得到的滤液再经滤板过滤。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）为90℃保温30min后灭菌；水浴降温至室温，加入防腐剂，即制备得到中药提取物。

7.一种具有皮肤应急修复功效的中药提取物，其特征在于：所述中药提取物由权利要求3至5中任意一项所述的制备方法经制备得到的。

8.权利要求7所述的中药提取物在制备具有皮肤应急修复功效的外用护肤制剂或化妆品添加剂中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述皮肤应急修复为晒后修复或皮肤失水后修复或皮肤过敏后修复。

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