CN102600173B - 氨氯地平/贝那普利药物组合物脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂及其制法，通过将活性成分苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利和特定的组合的磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇、去氧胆酸钠制备成脂质体，极大提高了药物的稳定性、溶出度和生物利用度，而且作用平稳持久，疗效显著。本发明制剂提高了制剂的产品质量，减少了毒副作用。

Description

氨氯地平/贝那普利药物组合物脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种氨氯地平/贝那普利的组合的新的固体制剂，具体涉及氨氯地平/贝那普利的组合的脂质体固体制剂及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

心脑血管疾病是当今世界发病率和死亡率最高的疾病之一，是死亡的首要原因，是健康的头号杀手，我国心血管***疾病的发病率基本与世界范围大体相同，呈逐年上升趋势，由六十年代的死亡病因第7位上升到第1位，每年因为心脑血管疾病死亡有300万人，1000万人因心脑血管疾病致残。几乎每个心脑血管病人都有血压升高的临床症状，需要进行降压治疗，降血压药物市场巨大。目前临床实验证据表明，有效降压并减少心血管并发症的常用药物有血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素II受体拮抗剂(ARB)、β受体阻滞剂(BB)。钙通道拮抗剂(CCB)、噻嗪类利尿剂和复方制剂。大规格临床研究发现，α受体阻滞剂可以增加心力衰竭的发病，目前已经不推荐其作为降压药治疗的一线用药，可作为二线降压药物。

贝那普利(Benazepril)作为高血压治疗药物，为一长效、不含巯基的血管紧张素转化酶抑制剂，是一前体药物，在体内水解成活性物苯那普利拉(Benazeprilate)而发挥药效。对血管紧张素转化酶具有较强的选择性抑制而产生降压作用，效果与卡托普利、依那普利相似，对血压正常者的降压和心率几乎没有影响。该化合物以盐酸盐的形式商业出售，临床上盐酸贝那普利的用量为10mg每天，每天最大推荐剂量为40mg，一次或均分为两次服用。

盐酸贝那普利(Benazepril Hydrochloride)，分子式C₂₄H₂₉ClN₂O₅，分子量461.0，结构式为：

盐酸贝那普利，能够抑制血管紧张素转换酶活性，降低血管紧张素II水平，舒张小动脉血管。对多种类型高血压均具有明显的降压作用，并且能够改善充血性心力衰竭患者的心脏功能。其药理作用主要体现在两个方面，(1)降压：本品在肝内水解为苯那普利拉，成为一种竞争性血管紧张素转换酶抑制剂，阻止血管紧张素I转化为血管紧张素II，使血管阻力降低，醛固酮分泌减少，血浆肾素活性增高。苯那普利拉还抑制缓激肽的降解，也使血管阻力降低，产生降压作用。(2)减低心脏负荷：本品扩张动脉与静脉，降低周围血管阻力或心脏后负荷，降低肺毛细血管嵌压或心脏前负荷，也降低肺血管阻力，从而改善心排血量，使运动耐量和时间延长。

氨氯地平为钙离子拮抗剂，阻滞心肌和血管平滑肌细胞外钙离子经细胞膜的钙离子通道进入细胞，直接舒张血管平滑肌，具有抗高血压作用。氨氯地平缓解心绞痛是通过扩张外周小动脉，使外周阻力降低，从而降低心肌耗氧量，另外扩张正常和缺血区的冠状动脉及冠状小动脉，使冠状动脉痉挛病人的心肌供氧量增加。该化合物以马来酸盐或苯磺酸盐的形式商业出售。

苯磺酸氨氯地平，化学名为3-乙基-5-甲基-2-(2-氨乙氧甲基)-4-(2-氯苯基)-1，4-二氢-6-甲基-3，5-吡啶二羧酸酯苯磺酸盐，分子式为：C₂₀H₂₅ClN₂O₅·C₆H₆O₃S，分子量567.05，结构式为：

临床上氨氯地平的推荐初始剂量为5mg，每日一次，最大剂量不超过10mg；

高血压疾病按发病类型可以分为自发性高血压和继发性高血压，其中继发性高血压的血压控制难度更大，尤其是肾性继发性高血压。氨氯地平和贝那普利是两种不同作用机理的药物，组成的复方制剂更适用于不能用于氨氯地平或贝那普利单一药物降压的病人，尤其适用于老年病人、虚弱个体和肝功能不全病人。因此，氨氯地平贝那普利组合药物的研制开发，将为我国提供一个新的特色的防治心绞痛、高血压等心血管疾病的优良药物。目前国内上市药中有氨氯地平贝那普利普通压制片，然而这几种剂型却存在以下问题：由于制备技术等原因，大多数药物的口服制剂服用后均存在着溶散时间长、溶出度低、吸收较差、服药次数多、释药不可控，肝肠首过效应和生物利用度较低等问题，从而影响药效的发挥，也直接影响着治疗效果，所以其生物利用度较低。

现有技术中还有一些关于氨氯地平贝那普利制剂技术的报道。例如，CN101272791A公开而来一种苯磺酸氨氯地平和盐酸贝那普利的稳定的组合及其制法，其通过改变制粒方法和压片方法来制备固体制剂，但并不解决生物利用度低的问题；专利CN1939282A公开了一种氨氯地平贝那普利颗滴丸及其制备方法，其由氨氯地平、贝那普利按照一定比例，加入表面活性剂聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯等基质混合均匀，而后制成滴丸。但服用不方便，生物利用度低，制作成本较大；专利CN101137367A公开了一种用于降低心血管发病率的氨氯地平和贝那普利苯磺酸盐酸盐组合及其制备方法.CN101569623A公开了一种左旋氨氯地平和贝那普利的药物组合物，但是其制作成本高昂，对原料的要求很高，其生物利用度低；

然而，上述方法制备的氨氯地平/贝那普利复方制剂，虽然筛选了特定的辅料进行制备，具有一定得优点；但药品的溶出度和生物利用度仍有待提高，且药品的长期稳定性不理想，不利于长期存放。

脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药***的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻***反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

普通脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮***吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

如果能将氨氯地平/贝那普利复方制成脂质体，则有望克服现有的氨氯地平贝那普利制剂存在的一系列问题，提高药物的溶解性和稳定性，延长药物在体内的保留时间，提高生物利用度，降低毒副作用，改进治疗速度和治疗效果。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的氨氯地平贝那普利脂质体是亟待解决的课题。

申请人通过大量的实验发现，采用特定赋形剂制成的氨氯地平/贝那普利复方的脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差的问题，同时提高了药物的溶出度，延缓释放，增加了药物在体内的保留时间。

发明内容

为了形成品质优良的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂，重要的是寻找能与苯磺酸氨氯地平及盐酸贝那普利良好相容从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以便形成品质优良的氨氯地平/贝那普利脂质体，使得该脂质体的溶出性优异且生物利用度高，以及寻找能与氨氯地平/贝那普利脂质体形成固体制剂的药用辅料。

为了实现上述目的，本发明人进行的大量研究和实现，发现特定重量配比的苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇和去氧胆酸钠能制成氨氯地平/贝那普利脂质体，其中，作为药物活性成分的氨氯地平/贝那普利包封率高，溶出性好，所得固体制剂中的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，生物利用度明显提高，疗效明显提高，从而完成本发明。

在本文中，所用术语“氨氯地平/贝那普利脂质体”或““氨氯地平/贝那普利的脂质体””是指本发明中所述的以“苯磺酸氨氯地平”和“盐酸贝那普利”为活性成分所制成的脂质体。

在本文中，所用术语“氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂”或“氨氯地平/贝那普利的脂质体固体制剂”是指本发明中所述的以“苯磺酸氨氯地平”和“盐酸贝那普利”为活性成分所制成的脂质体固体制剂。

一方面，本发明提供一种氨氯地平/贝那普利脂质体，其主要由以下重量配比的成分制成：

优选地：磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1∶1-2∶1。

优选地，本发明提供的氨氯地平/贝那普利脂质体，主要由以下重量配比的成分制成：

优选地：磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1∶1-2∶1。

在本发明提供的氨氯地平/贝那普利脂质体的一个最优选实施方案中，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为2∶1。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，使用的磷脂材料为磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油以重量比2∶1的组合物，其中磷脂酰乙醇胺是一种天然磷脂，二油酰磷脂酰甘油是一种合成磷脂。

作为用于形成脂质体的磷脂，其种类繁多，常用的有天然磷脂和合成磷脂。天然磷脂包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、和大豆磷脂酰肌醇等。合成磷脂包括硬脂酰胺、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油等。

本发明人经过长期认真的研究，经过大量的筛选试验，发现采用一般的磷脂和附加剂为膜材制备的氨氯地平/贝那普利脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％的加速试验下，稳定性和包封率不佳。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的作为天然磷脂的磷脂酰乙醇胺和作为合成磷脂的二油酰磷脂酰甘油以重量比2∶1的组合磷脂能用于形成品质优良的氨氯地平/贝那普利脂质体。通过本发明中提供的方法能形成适当大小、适当结构成分的包封率高的脂质体，而且这些成分，尤其是氨氯地平/贝那普利在所形成的脂质体中不渗漏，并且脂质体中苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利的溶出性优异。如果使用用量比为除了2∶1以外的磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油组合磷脂，或者选用其它磷脂材料如卵磷脂等，则所形成的脂质体的稳定性差、包封率低、溶出性差，不能实现本发明的目的。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，相对于0.5重量份的苯磺酸氨氯地平、1重量份盐酸贝那普利而言，磷脂酰乙醇胺的用量为30-80重量份，二油酰磷脂酰甘油的用量为15-40重量份，磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2∶1。如果磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的用量分别低于30重量份和15重量份，会有大量游离的苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利未被包封，脂质体的载药量低，稳定性也会下降，溶出性也会受到不利影响；反之，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的用量分别高于80重量份和40重量份，则作为药物活性成分的氨氯地平、贝那普利的包封率下降。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，胆固醇和去氧胆酸钠用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。

胆固醇是一种双亲性分子，与磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油相结合，阻止其凝聚成晶体结构。胆固醇掺入磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油形成的双层膜中，类似于“缓冲剂”一样起到调节膜结构“流动性”的作用。当低于相变温度时，胆固醇可以使膜减少有序排列，增加流动性；当高于相变温度时，胆固醇可以增加膜的有序排列，从而降低膜的流动性。胆固醇能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。

本发明人经过研究发现，当磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1∶1-2∶1时，能形成稳定的氨氯地平/贝那普利脂质体。当磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比高于2∶1时，膜稳定性降低；当磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比低于1∶1时，脂质体膜流动性过高，被包裹在脂质体内的苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利易于释放。

此外，研究发现，当磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1∶1-2∶1时，所形成的脂质体溶出性优异。

研究表明，脂质体的稳定性和溶出性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，溶出性越好，生物利用度越高。因此，本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体的稳定性高、溶出性优异，是导致药物生物利用度高的因素之一。

此外，本发明人研究发现，在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，相对于0.5重量份的苯磺酸氨氯地平、1重量份盐酸贝那普利而言，磷脂酰乙醇胺的用量为30-80重量份，二油酰磷脂酰甘油的用量为15-40重量份，磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2∶1，所形成的氨氯地平/贝那普利脂质体的包封率高。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，使用去氧胆酸钠来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。去氧胆酸钠是一种非离子表面活性剂，当用于磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油组合磷脂形成的双层膜中时，不仅能进一步提高苯磺酸氨氯地平、贝那普利的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高氨氯地平/贝那普利脂质体的稳定性。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，相对于0.5重量份的苯磺酸氨氯地平、1重量份盐酸贝那普利而言，去氧胆酸钠的用量为6-20重量份。如果去氧胆酸钠的用量低于6重量份，则由于其用量过低导致对脂质体的稳定性和包封率改进不够，反之，如果去氧胆酸钠的用量高于20重量份，则用于其用量过高而导致脂质体膜易于破坏而泄露活性成分。

在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体中，通过适量配比的胆固醇和去氧胆酸钠的对磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油组合磷脂膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的氨氯地平/贝那普利脂质体，其溶出性优异，缓释效果好，生物利用度高。

另一方面，本发明提供一种氨氯地平/贝那普利脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇、去氧胆酸钠溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(a)中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、甲醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1的为叔丁醇和甲醇体积比为2∶1的混合溶剂。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(c)中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液。

通过上述方法，能制备颗粒小且粒径分布均匀的氨氯地平/贝那普利脂质体，其包封率高，稳定性高，溶出性好，生物利用度高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的氨氯地平/贝那普利脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

再一方面，本发明提供氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂，其由本发明所述的氨氯地平/贝那普利脂质体和其他药用辅料制成，

在本文中，所用术语“其他药用辅料”或“药用辅料”的意思与赋形剂的意思相同，是指为了制备氨氯地平/贝那普利脂质体的固体制剂而使用的除了本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体以外的药用物料。

在本文中，所用术语“其他药用辅料的量”是指上述药用辅料的重量之和。

各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述稀释剂选自淀粉、乳糖、糖粉、可压性淀粉、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选微晶纤维素。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、干淀粉中的一种或几种，优选干淀粉。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、***胶、黄原胶中的一种，优选为聚维酮K30。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润湿剂为10-80％的乙醇溶液，优选40％的乙醇溶液。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、月桂醇硫酸钠、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为微粉硅胶。

本发明提供的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂是口服制剂，优选为片剂。

在实践中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的优选实施方案中，复方制剂的规格为每单位制剂苯磺酸氨氯地平5mg、盐酸贝那普利10mg；苯磺酸氨氯地平2.5mg、盐酸贝那普利10mg。

再一方面，本发明提供上述氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)氨氯地平/贝那普利脂质体的制备：将苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇和去氧胆酸钠一起制备成脂质体粉末；

(2)氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的制备：将步骤(1)制得的脂质体粉末和其他药用辅料混合制备氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂。

其中，所述药用辅料选自稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在氨氯地平/贝那普利质体固体制剂的制备方法的一个优选实施方式中，步骤(1)氨氯地平/贝那普利质体的制备包括以下子步骤：

(a)将苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇、去氧胆酸钠溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂制备方法的一个更优选的实施方案中，子步骤(a)中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、叔丁醇、甲醇、正丁醇、甲醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1的为叔丁醇和甲醇的混合溶剂。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂制备方法的一个更优选的实施方案中，子步骤(c)中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液。

在本发明氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(2)氨氯地平/贝那普利质体固体制剂的制备包括以下子步骤：

(e)将步骤(d)制得的脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制剂，干燥；

(f)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

(g)压片，制得本发明所述的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

作为本发明的具体实施方案之一，本发明所述的氨氯地平/贝那普利的脂质体的固体制剂，主要由以下重量配比的成分制成：

本发明先通过活性成分苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利与磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇、去氧胆酸钠的特定重量的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂产品质量高，粒径均匀，稳定性高，包封率高，溶出性好，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著，降低了毒副作用。

本发明提供的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，设备简单，易于操作，且方法简单，适合于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量计。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1苯磺酸氨氯地平的释放曲线

图2盐酸贝那普利的释放曲

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1 氨氯地平/贝那普利脂质体片

采用以下生产工艺制备氨氯地平/贝那普利脂质体片：

(1)精确称取5g苯磺酸氨氯地平、10g盐酸贝那普利、300g磷脂酰乙醇胺、150g二油酰磷脂酰甘油、450g胆固醇、60g去氧胆酸钠，溶解于1000ml体积比为2∶1的叔丁醇和甲醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去叔丁醇和甲醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入1000ml pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

(5)将氨氯地平/贝那普利脂质体粉末和500g微晶纤维素、100g干淀粉和20g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入80ml的40％的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

(6)将干颗粒和10g微粉硅胶混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片的片剂。

实施例2 氨氯地平/贝那普利脂质体片剂

采用以下生产工艺制备氨氯地平/贝那普利脂质体片剂：

(1)精确称取2.5g苯磺酸氨氯地平、10g盐酸贝那普利、300g磷脂酰乙醇胺、150g二油酰磷脂酰甘油、450g胆固醇、60g去氧胆酸钠，溶解于1000ml体积比为2∶1的叔丁醇和甲醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去叔丁醇和甲醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入1000ml pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

(5)将氨氯地平/贝那普利脂质体粉末和500g微晶纤维素、100g干淀粉和20g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入80ml的40％的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

(6)将干颗粒和10g微粉硅胶混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片的片剂。

实施例3 氨氯地平/贝那普利脂质体片剂

采用以下生产工艺制备氨氯地平/贝那普利脂质体片剂：

(1)精确称取5g苯磺酸氨氯地平、10g盐酸贝那普利、700g磷脂酰乙醇胺、350g二油酰磷脂酰甘油、525g胆固醇、200g去氧胆酸钠溶解于1200ml体积比为2∶1的叔丁醇和甲醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去叔丁醇和甲醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入1200ml pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

(5)将氨氯地平/贝那普利脂质体粉末和2000g微晶纤维素、200g干淀粉和100g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入120ml的40％的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

(6)将干颗粒和50g微粉硅胶混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片的片剂。

对比例1-3

将如下表1中所示的对比例1-3中的原辅料成分，分别采用与实施例1相同的生产工艺，制成对比例1-3。

对比例4是采用实施例1的工艺制成，不同点在于，步骤(4)为将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，直接喷雾干燥制得脂质体粉末。

表1 对比例1-3中所用原辅料成分

其中，“/”表示未使用。

试验例1 包封率的测定

量取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤(4)中所得的脂质体粉末0.5g溶于10ml水中，得混悬液，取混悬液0.5mL，加于SephadexG-50凝胶柱顶部，以磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/min，收集4～11mL洗脱液(含脂质体)，用氮气吹至体积约0.5ml，加无水乙醇破乳并定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，进样，测定峰面积，计算脂质体重包封的苯磺酸氨氯地平和盐酸贝那普利的总含量；另精密量取上述混悬液0.5ml，用无水乙醇定容至10mL，摇匀。精密吸取10ul溶液，测定脂质体混悬液中苯磺酸氨氯地平和盐酸贝那普利的总量。计算包封率，结果示于下表2中：

表2 包封率的测定结果

由表2可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的实施例的脂质体的包封率远远优于对比例。

通过比较实施例1-3与对比例1-3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，本发明脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类和含量直接相关。当使用本发明所用成分以外的成分时以及当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得脂质体的包封率明显低于本发明。

通过比较实施例1-3与对比例4可知，本发明的另一个创新点“反复冻融三次”对于本发明的脂质体的包封率也有明显提高作用。

试验例2 脂质体粒径的大小及粒度分布

为了了解本发明所得脂质体准确的粒径参数及粒度分布，取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤(4)中所得的适量脂质体粉末，直接用激光粒度分析仪(Easysizer20，欧美克公司)观察其外光，并测定粒径，用动态光散射处理软件处理，测量其直径并计算粒子直径的分布，结果示于下表3中：

表3 脂质体粒径

由表3可知，本发明实施例1-3中所得脂质体的平均粒径比对比例1-4中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一，外观更好。

通过比较实施例1-3与对比例1-3可知，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，本发明脂质体的粒径与用于形成脂质体的成分种类和含量直接相关。当使用本发明所用成分以外的成分时以及当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得氨氯地平/贝那普利脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。

通过比较实施例1-3与对比例4可知，本发明的另一个创新点“反复冻融三次”对于本发明的脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质具有明显的提高作用。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环***内的停留时间越长(参见药物新剂型，第一版，第十八章，408-468页，朱盛山主编，化学工业出版社)。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3 稳定性和溶出度考察

将以上实施例和对比例制备的样品与上市的氨氯地平/贝那普利片(成都地奥制药集团有限公司，批号20100731)在高温40℃，相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4。

表4 稳定性和溶出度测定结果

由表4可知，上市及对比例的氨氯地平/贝那普利片溶出度低，加速6月时含量降低明显，有关物质升高；而本发明实施例1-3中制备的样品溶出度高，加速6个月后含量和有关物质均无显著变化。充分说明了本发明在提高稳定性和溶出度方面的优越性。

试验例4 体外释放研究

精密称取对比例1-4和实施例1的脂质体粉末各10mg溶于10ml水中，取混悬液各5ml置于透析袋中扎紧，释放介质为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液(含0.25％的吐温20)100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于0.5、1、2、4、6、8、12、18、24h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1和附图2中所示。

结果表明，本发明实施例1中所得氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂释药缓慢，达到了更好的缓释效果。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (8)

1.一种氨氯地平/贝那普利脂质体，其特征在于主要由以下重量配比的成分制成：

其中，磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2:1，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

2.一种氨氯地平/贝那普利脂质体，其特征在于主要由以下重量配比的成分制成：

其中，磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2:1，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

3.一种制备权利要求1或2任一项所述的氨氯地平/贝那普利脂质体的方法，该方法包括以下步骤：

（a）将苯磺酸氨氯地平、盐酸贝那普利、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰甘油、胆固醇、去氧胆酸钠溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；其中，所述的有机溶剂选自体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合溶剂；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入pH值为6.5的醋酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得氨氯地平/贝那普利脂质体粉末。

4.一种氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂，其由权利要求1或2任一项所述的氨氯地平/贝那普利脂质体和其他药用辅料制成。

5.根据权利要求4所述的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂，其特征在于优选为片剂。

6.一种苯磺酸氨氯地平/盐酸贝那普利脂质体固体制剂，其特征在于由以下重量配比的成分制成：

其中，磷脂酰乙醇胺与二油酰磷脂酰甘油的重量比为2:1，磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰甘油的重量之和与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

7.权利要求1或2任一项所述的氨氯地平/贝那普利脂质体在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用。

8.权利要求4所述的氨氯地平/贝那普利脂质体固体制剂在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用。

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