CN102552891A - 热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 - Google Patents
热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102552891A CN102552891A CN2011104478076A CN201110447807A CN102552891A CN 102552891 A CN102552891 A CN 102552891A CN 2011104478076 A CN2011104478076 A CN 2011104478076A CN 201110447807 A CN201110447807 A CN 201110447807A CN 102552891 A CN102552891 A CN 102552891A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cell
- heat shock
- tumor
- apoptosis
- vaccine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 230000035939 shock Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 13
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 208000017815 Dendritic cell tumor Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 24
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 claims description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 claims description 8
- 208000024055 brain glioblastoma Diseases 0.000 claims description 7
- 201000011609 brain glioblastoma multiforme Diseases 0.000 claims description 7
- 230000030833 cell death Effects 0.000 claims description 6
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 4
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 3
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 claims description 3
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 3
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims description 3
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 claims description 3
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 claims description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 claims description 3
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims description 3
- 210000003677 hemocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- 229940029030 dendritic cell vaccine Drugs 0.000 abstract description 13
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 abstract description 11
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 abstract description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 abstract 4
- 101100341519 Homo sapiens ITGAX gene Proteins 0.000 abstract 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000009668 clonal growth Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940126587 biotherapeutics Drugs 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 229940000351 hemocyte Drugs 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004126 nerve fiber Anatomy 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000011450 sequencing therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明提出一种热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，所述法采用先将肿瘤细胞处于热休克状态，诱导细胞高表达热休克蛋白(HSP)，再用化学药物诱导细胞凋亡进而制备成富含热休克蛋白的凋亡细胞抗原，制备好的抗原与未成熟的DC细胞混合培养获得成熟的DC疫苗。热休克脑胶质瘤细胞负载的DC疫苗具有较好的凋亡率，经流式细胞术检测，DC疫苗具有成熟DC的表型特征，DC的公认标志HLA-DR+CD11c+的平均值为90.90％，DC的成熟标志CD11c+CD86+的平均值为73.03％，CD11c+CD83+的平均值为86.04％，高表达CD83、CD86。显示采用热休克法负载制备得到的DC疫苗成熟度高，可用于诱导免疫应答。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法。
背景技术
脑恶性胶质瘤是中枢神经***原发性恶性肿瘤中最常见的肿瘤。因生长速度快且沿神经纤维浸润性生长，致使手术难以完全切除；同时对化疗和放疗仅为中度敏感。因此，目前现有的国际公认的常规手术、放疗、化疗的序贯治疗方案，难以根治脑恶性胶质瘤。免疫治疗是通过调整、提高机体免疫***功能，清除残留的肿瘤细胞，达到真正的治愈的目的。目前，以DC为基础的细胞疫苗治疗是一种主动免疫治疗，正成为研究的热点。DC是体内最强大的抗原提呈细胞(antigen presenting cell APC)，其抗原提呈能力可为其他提呈细胞的数百倍，能有效刺激静息的T细胞诱发初次免疫应答，其在T细胞对肿瘤抗原的识别过程中起着重要的作用，DC能通过血脑屏障进入靶向区，从而发挥特异性抗肿瘤效应。DC的体外培养在目前已经是一项常用的生物治疗技术，国内外动物和临床试验研究的常用方法可分为四类：1)特异性肿瘤抗原肽负载DC。肿瘤抗原肽可以通过人工合成、弱酸洗脱肿瘤表面的MHC-I类抗原肽获得；2)肿瘤细胞抗原负载DC。利用超声波破碎、反复冻融或放射线辐照肿瘤细胞等方法获取肿瘤细胞性抗原，然后致敏DC制备的疫苗；3)肿瘤细胞-DC融合体疫苗。DC与肿瘤细胞融合后的杂交细胞可获得双亲本细胞的表型特性；4)肿瘤细胞RNA或cDNA负载DC。如何选择一种高效、安全的DC疫苗制备法是主动细胞免疫治疗成败的关键，对于临床推广价值意义重大。本方法属于第二类，先将肿瘤细胞处于热休克状态，诱导细胞高表达热休克蛋白(heat shock proteins HSP)，再用化学药物诱导细胞凋亡进而制备成富含热休克蛋白的凋亡细胞抗原，制备好的抗原与未成熟的DC细胞混合培养制备成熟的DC疫苗。
发明内容
为实现本发明的目的，本发明的热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法采用先将肿瘤细胞处于热休克状态，诱导细胞高表达热休克蛋白(HSP)，再用化学药物诱导细胞凋亡进而制备成富含热休克蛋白的凋亡细胞抗原，制备好的抗原与未成熟的DC细胞混合培养获得成熟的DC疫苗。热休克脑胶质瘤细胞负载的DC疫苗具有较好的凋亡率，经流式细胞术检测，DC疫苗具有成熟DC的表型特征，DC的公认标志HLA-DR+CD11c+的平均值为90.90％，DC的成熟标志CD11c+CD86+的平均值为73.03％，CD11c+CD83+的平均值为86.04％，高表达CD83、CD86。显示采用热休克法负载制备得到的DC疫苗成熟度高，可用于诱导免疫应答。
具体的，所述的方法包括如下步骤：
S1.热休克凋亡脑胶质瘤细胞的制备和检测：
人脑胶质瘤细胞株U251引自美国ATCC，按常规方法传代培养。用RPMI 1640培养基调整细胞浓度至106/ml，将细胞置于40℃，5％CO2培养箱中3h，取出细胞培养瓶，加入白桦酯酸至终浓度为10μg/ml，将细胞培养瓶移至37℃，5％CO2培养箱继续培养诱导细胞凋亡。收获凋亡细胞，加入无菌PBS洗涤4次，获得凋亡肿瘤细胞抗原。
肿瘤细胞经40℃处理3h后用FITC-Annexin-V和PI双标细胞后进行流式检测计算凋亡率结果。
软琼脂克隆法检测细胞抗原体外成瘤能力，结果显示凋亡细胞中无肿瘤细胞克隆生长；内毒素检测按《中华人民共和国药典》2005版第三部规定的方法进行；取制备抗原进行内毒素检测。
S2.DC肿瘤疫苗的制备和检测
采集3个自愿者外周血，采用人工肝素抗凝采集的外周血，置于冰上运输至实验室，2,000r/min，10min，20℃获得血细胞，稀释2倍后，Ficoll分离法分离血细胞获取一次新鲜的外周血单个核细胞。用培养基重悬新鲜制备的PBMC后铺于六孔细胞培养板中，放置于37℃，5％CO2培养箱中90min后，洗去未贴壁细胞，于培养板内加入含100ng/mL GM-CSF，50ng/mL IL-4的RPMI 1640完全培养基，第3d进行换液，第5d收获未成熟DC(imDC)，加入凋亡肿瘤细胞抗原(DC与靶细胞抗原的 比例为3∶1)，至37℃，5％CO2培养箱共同培育48h，收获DC细胞，苔盼蓝染色进行细胞计数与表型检测。
附图说明
通过下面结合附图的详细描述，本发明前述的和其他的目的、特征和优点将变得显而易见。其中：
图1所示为本发明的热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法的步骤流程示意图。
具体实施方式
如图1所示的本发明的热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法的步骤流程示意图，所述实施例的具体步骤如下：
S1.热休克凋亡脑胶质瘤细胞的制备和检测：
人脑胶质瘤细胞株U251引自美国ATCC，按常规方法传代培养。用RPMI1640培养基调整细胞浓度至106/ml，将细胞置于40℃，5％CO2培养箱中3h，取出细胞培养瓶，加入白桦酯酸至终浓度为10μg/ml，将细胞培养瓶移至37℃，5％CO2培养箱继续培养诱导细胞凋亡。收获凋亡细胞，加入无菌PBS洗涤4次，获得凋亡肿瘤细胞抗原。
肿瘤细胞经40℃处理3h后用FITC-Annexin-V和PI双标细胞后进行流式检测计算凋亡率结果显示，凋亡率平均值为66.23％。
软琼脂克隆法检测细胞抗原体外成瘤能力，结果显示凋亡细胞中无肿瘤细胞克隆生长。内毒素检测按《中华人民共和国药典》2005版第三部规定的方法进行。取制备抗原进行内毒素检测。
S2.DC肿瘤疫苗的制备和检测
采集3个自愿者外周血，采用人工肝素抗凝采集的外周血，置于冰上运输至实验室，2,000r/min，10min，20℃获得血细胞，稀释2倍后，Ficoll分离法分离血细胞获取一次新鲜的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell PBMC)。用RPMI 1640培养基重悬新鲜制备的PBMC后铺于六孔细胞培养板中，放置于37℃，5％CO2培养箱中90min后，洗去未贴壁细胞，于培养板内加入含100ng/mL GM-CSF，50ng/mL IL-4的RPMI 1640完全培养基，第3d进行换液，第5d收获未成熟DC(imDC)，加入凋亡肿瘤细胞抗原(DC与靶细胞抗 原的比例为3∶1)，至37℃，5％CO2培养箱共同培育48h，收获DC细胞，苔盼蓝染色进行细胞计数与表型检测。进行流式检测HLA-DR+CD11c+、CD11c+CD86+、CD11c+CD83+。经流式细胞仪FACS分析显示，DC的公认标志HLA-DR+CD11c+的平均值凋亡组为90.90％，DC的成熟标志CD11c+CD83+的平均值凋亡组为73.03％，DC的成熟标志CD11c+CD86+的平均值凋亡组为86.04％。
本研究方法采用先将肿瘤细胞处于热休克状态，诱导细胞高表达热休克蛋白(HSP)，再用化学药物诱导细胞凋亡进而制备成富含热休克蛋白的凋亡细胞抗原，制备好的抗原与未成熟的DC细胞混合培养获得成熟的DC疫苗。热休克脑胶质瘤细胞负载的DC疫苗具有较好的凋亡率，经流式细胞术检测，DC疫苗具有成熟DC的表型特征，DC的公认标志HLA-DR+CD11c+的平均值为90.90％，DC的成熟标志CD11c+CD86+的平均值为73.03％，CD11c+CD83+的平均值为86.04％，高表达CD83、CD86。显示采用热休克法负载制备得到的DC疫苗成熟度高，可用于诱导免疫应答。
本发明并不局限于所述的实施例，本领域的技术人员在不脱离本发明的精神即公开范围内，仍可作一些修正或改变，故本发明的权利保护范围以权利要求书限定的范围为准。
Claims (1)
1.一种热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，其包括如下步骤：
S1.热休克凋亡脑胶质瘤细胞的制备和检测，包括：
采用的人脑胶质瘤细胞株U251引自美国ATCC，按常规方法传代培养；用RPMI1640培养基调整细胞浓度至106/ml，将细胞置于40℃，5％CO2培养箱中3h，取出细胞培养瓶，加入白桦酯酸至终浓度为10μg/ml，将细胞培养瓶移至37℃，5％CO2培养箱继续培养诱导细胞凋亡；收获凋亡细胞，加入无菌PBS洗涤4次，获得凋亡肿瘤细胞抗原；
肿瘤细胞经40℃处理3h后用FITC-Annexin-V和PI双标细胞后进行流式检测计算凋亡率结果；
软琼脂克隆法检测细胞抗原体外成瘤能力；取制备抗原进行内毒素检测；
S2.DC肿瘤疫苗的制备和检测，包括：
采集人体外周血，采用人工肝素抗凝采集的外周血，置于冰上运输至实验室，2,000r/min，10min，20℃获得血细胞，稀释2倍后，Ficoll分离法分离血细胞获取一次新鲜的外周血单个核细胞；
用RPMI 1640培养基重悬新鲜制备的PBMC后铺于六孔细胞培养板中，放置于37℃，5％CO2培养箱中90min后，洗去未贴壁细胞，于培养板内加入含100ng/mL GM-CSF，50ng/mL IL-4的RPMI 1640完全培养基，第3d进行换液，第5d收获未成熟DC(imDC)，加入凋亡肿瘤细胞抗原，至37℃，5％CO2培养箱共同培育48h，收获DC细胞，苔盼蓝染色进行细胞计数与表型检测；
进行流式检测HLA-DR+CD11c+、CD11c+CD86+、CD11c+CD83+。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011104478076A CN102552891A (zh) | 2011-12-27 | 2011-12-27 | 热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011104478076A CN102552891A (zh) | 2011-12-27 | 2011-12-27 | 热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102552891A true CN102552891A (zh) | 2012-07-11 |
Family
ID=46400343
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2011104478076A Pending CN102552891A (zh) | 2011-12-27 | 2011-12-27 | 热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102552891A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104491853A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-08 | 深圳市赛欧细胞生物科技有限公司 | 一种人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 |
| CN111334471A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-26 | 郑州鲲鹏健康科技有限公司 | Pbmc体外3d琼脂糖水凝胶培养基及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101052709A (zh) * | 2004-10-25 | 2007-10-10 | 贝勒研究院 | 装载热激黑素瘤细胞体的树突细胞 |
| CN101918544A (zh) * | 2007-12-10 | 2010-12-15 | 因斯布鲁克医科大学 | 提高免疫反应性的方法 |
-
2011
- 2011-12-27 CN CN2011104478076A patent/CN102552891A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101052709A (zh) * | 2004-10-25 | 2007-10-10 | 贝勒研究院 | 装载热激黑素瘤细胞体的树突细胞 |
| CN101918544A (zh) * | 2007-12-10 | 2010-12-15 | 因斯布鲁克医科大学 | 提高免疫反应性的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 徐杰等: "热休克诱导凋亡的脑胶质瘤细胞负载树突状细胞及其激发T细胞的体外试验", 《苏州大学学报(医学版)》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104491853A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-08 | 深圳市赛欧细胞生物科技有限公司 | 一种人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 |
| CN111334471A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-26 | 郑州鲲鹏健康科技有限公司 | Pbmc体外3d琼脂糖水凝胶培养基及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103627672B (zh) | Nk细胞体外培养方法 | |
| CN109294985A (zh) | 一种用于nk细胞体外扩增的培养基体系及nk细胞体外扩增的方法 | |
| CN105950560A (zh) | 人源化pd-l1肿瘤细胞系及具有该细胞系的动物模型与应用 | |
| TW201814041A (zh) | 用於病毒專一性t細胞之活化及增生的平台 | |
| CN101824400B (zh) | 一种放大增殖抗原特异性t细胞的方法 | |
| CN101481677B (zh) | 体外刺激树突状细胞成熟的方法 | |
| JP6263559B2 (ja) | 従来型樹状細胞によるｉｆｎ‐ラムダの産生及びその使用 | |
| CN102600462A (zh) | 人树突状细胞肿瘤疫苗及其制备方法和应用 | |
| CN103800898A (zh) | 一种肿瘤特异性杀伤细胞制剂及其制备方法 | |
| CN103255105A (zh) | 一种使用dc细胞刺激cik细胞快速增殖的方法 | |
| CN103301449A (zh) | 一种大规模培养树突状细胞疫苗的制备方法及其应用 | |
| CN104498434A (zh) | 一种大量树突状细胞的制备方法、所得树突状细胞 | |
| CN105112371A (zh) | 脐带血单个核细胞来源的dc-cik细胞制取方法及制剂 | |
| CN104894072A (zh) | 一种自体自然杀伤细胞增殖的制备方法及其应用 | |
| CN102746381B (zh) | 一种幽门螺杆菌抗原hla限制性免疫显性表位肽及其制备方法和应用 | |
| CN102552891A (zh) | 热休克凋亡脑胶质瘤负载树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法 | |
| CN107158367A (zh) | 结直肠癌干细胞疫苗制备方法及应用 | |
| US20220177839A1 (en) | Composition, culture medium and method for inducing and/or amplifying tscm in vitro | |
| CN104017770B (zh) | 一种利用糖脂制备cik细胞的方法 | |
| CN102559598A (zh) | 热休克凋亡脑胶质瘤细胞的制备与检测方法 | |
| CN103013906B (zh) | 一种生物膜及其制备方法和应用 | |
| CN107574149B (zh) | 一种树突状细胞的促成熟方法及其用途 | |
| CN104434973A (zh) | 一种强化细胞因子诱导的杀伤细胞功能的方法 | |
| CN106047810A (zh) | 一种新型DC‑CTLs细胞培养体系及其培养方法 | |
| Sjaastad et al. | Reduced T Cell Priming in Microbially Experienced “Dirty” Mice Results from Limited IL-27 Production by XCR1+ Dendritic Cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: JIANGSU MAIJIAN BIO-TECH. DEVELOPMENT CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: LU HUA Effective date: 20130725 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Lu Hua Inventor after: Chang Jing Inventor before: Lu Hua |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 214000 WUXI, JIANGSU PROVINCE TO: 214043 WUXI, JIANGSU PROVINCE Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: LU HUA TO: LU HUA CHANG JING |
|
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20130725 Address after: 214043, Jiangsu, Wuxi province Beitang District No. 401 North Hing Yuen Road, north science and Technology Park, room 836 Applicant after: Jiangsu Maijian Bio-tech Development Co.,Ltd. Address before: 214000 Jinshan north science and Technology Industrial Park, No. 888 Jianghai West Road, Jiangsu, Wuxi Applicant before: Lu Hua |
|
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120711 |