CN102495219A - ***素e2酶联免疫测定试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种***素E2酶联免疫测定试剂盒，其包括：已包被PGE2-牛血清白蛋白连接物酶标；明胶；PGE2标准品；抗体PGE2-IgG；羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物；邻苯二胺；稀释液和底物液。本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性，可有效测定人和动物的血浆、血细胞、体液或组织中的PGE2的浓度。
Description
技术领域
本发明属于酶联免疫测定试剂盒，具体的涉及一种***素E2酶联免疫测定试剂盒。
背景技术
***素E2（以下简称PGE2）是机体很多组织与器官（如神经、胃肠道、呼吸道与泌尿、生殖***）花生四烯酸的主要产物。测定血液、胃液、脑脊液、尿液、***或各种组织的***素E2含量反映出有关的器官或组织的功能。
发明内容
本发明的目的在于提供一种***素E2酶联免疫测定试剂盒。
为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：
本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒，包括：
1）已包被PGE2-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；
2）明胶；
3）PGE2标准品，4℃保存；
4）抗体PGE2-IgG，4℃保存；
5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物，-20℃保存；
6）邻苯二胺；
7）稀释液，用前用蒸馏水作1:20稀释；
8）底物液，用前用蒸馏水作1:5稀释。
本发明的检测原理如下：
抗原（PGE2-BSA）包被固相载体，与游离抗原（标准品或待测样品）竞争性地与一定量得抗体结合，洗涤后加过量酶标抗体，再加底物显色。根据显色程度（OD值）即可从标准曲线上推算出待测样品PGE2含量。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性，可有效测定血液、胃液、脑脊液、尿液、***或各种组织中的PGE2的浓度；
2、本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒合在神经***疾病、哮喘、消化性溃疡、泌尿***疾病、不育症与肿瘤等疾病中的鉴别诊断灵敏度高，可保证良好的线性关系；
3、本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒合在-20℃条件下可可保存6个月。
上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术技术方案，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例。
具体实施方式
一种***素E2酶联免疫测定试剂盒，其包括：
1）已包被PGE2-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；
2）明胶，1g/瓶；
3）PGE2标准品，1600pg/ml，4℃保存；
4）抗体PGE2-IgG，1ml，滴度为1:2000，4℃保存；
5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物（GARIgG-HRP），100ug/ml，-20℃保存；
6）邻苯二胺（OPD），15mg/瓶；
7）稀释液（PBS），0.2M，用前用蒸馏水作1:20稀释；
8）底物液（Buffer2），0.1M，用前用蒸馏水作1:5稀释。
利用本发明的***素E2酶联免疫测定试剂盒的检测步骤如下：
1、一次反应
将PGE2标准品用0.1%明胶倍比稀释成8个浓度：1.25、2.5、5、10、20、40、80和160 pg/0.1ml，用0.1%明胶（PBS配制）将抗PGE2-IgG作1:10稀释。
零标准（B0）孔加稀释液100ul，标准（ST）孔加PGE2标准品100ul，样品（SMP）孔加待测样品100ul。
各孔均加抗体PGE2-IgG100ul（TA孔除外）。
37℃ 2hr或室温下4hr。
tween-PBS稀释液洗板5次。
2、二次反应
用0.1%明胶（稀释液配制）12ml将GARIgG-HRP稀释，各孔均加200ul（TA孔除外）。37℃ 2hr或室温下4hr。
tween-PBS洗板5次。
3、反应测定
用底物液新鲜配制OPD-H2O2基质（OPD浓度1mg/ml，每毫升底物液中加入0.5微升30% H2O2），每孔注入200ul。
37℃放置20min或至显色较好时，用3M硫酸50ul终止反应。
置室温10min，在酶标检测仪上测定OD490，以TA孔调零。
4、计算
以PGE2标准品含量为横坐标，相应的B/B0%值为纵坐标，在半对数纸上作标准曲线，以样品孔B/B0%值从标准曲线上推算其PGE2浓度。
【标本采集与保存】：用2%EDTA-Na2(含0.7%NaCl)1:9抗凝，采血过程需顺利无气泡，防止血小板活化，尿液标本留取需放防腐剂，标本均需立即3000rpm/min，离心15min后，取血浆及待测标本，冻-20℃，可保存3个月。
【试剂适用范围及有效期】:测定人和动物的血浆、血细胞、体液或组织中的PGE2的浓度，本药盒有效期可保存6个月（-20℃）。
以上所述仅为本发明的优选实施案例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1. ***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于，包括：
1）已包被PGE2-牛血清白蛋白连接物酶标板；
2）明胶；
3）PGE2标准品；
4）抗体PGE2-IgG；
5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物；
6）邻苯二胺；
7）稀释液；
8）底物液。
2. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述明胶为1g/瓶。
3. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述PGE2标准品为1600pg/ml。
4. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述抗体PGE2-IgG为1ml，滴度为1:2000。
5. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物为100ug/ml。
6. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述邻苯二胺为15mg/瓶。
7. 根据权利要求1所述的***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：稀释液为0.2M。
8. 根据权利要求1至7中任意一项***素E2酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：底物液为0.1M。
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Publications (1)
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