CN102477053A

CN102477053A - 一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法

Info

Publication number: CN102477053A
Application number: CN201010557777XA
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-11-25
Filing date: 2010-11-25
Publication date: 2012-05-30

Abstract

本发明涉及一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法。工艺步骤包括70％乙醇超声提取，正丁醇萃取，萃取液浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，以正丁醇-乙醇-水为两相溶剂***，将上述粗苷用下相溶解，高速逆流色谱分离，流出物分别减压蒸干，分别将干燥物用正丁醇和乙酸乙酯结晶2-3次，滤出结晶分别干燥即得产品。采用本发明生产莫诺苷和马钱苷，工艺简单、成本低、产品含量高。

Description

一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法

技术领域：

本发明涉及一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的工艺，特别是一种高速逆流色谱分离莫诺苷和马钱苷的工艺。

背景技术：

山茱萸(Fructus Corni)为山茱萸科植物山茱萸Cornus Officinalis Sieb.et Zucc.的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等。是一种滋补类名贵药材，具有补益肝肾、涩精固脱的功效。近年来研究显示，山茱萸具有抗失血性休克、抑制血小板聚集、免疫调节、抗炎、降血糖、抗氧化、抗癌、抗菌等作用。山茱萸主要含环烯醚萜苷、多糖、有机酸、鞣质等成分，以莫诺苷和马钱苷含量最高。

我国自古就有山茱萸应用于糖尿病(中医称“消渴症”)治疗的记载，国内外众多现在药理学研究表明，山茱萸环烯醚萜苷类物质是降糖的主要活性部位，许慧琴等研究了山茱萸环烯醚萜总苷对实验型糖尿病肾病变的保护作用；皮文霞等“正交法优选山茱萸抗衰老有效部位的提取工艺”表明山茱萸环烯醚萜苷类除了具有降血糖及抗糖尿病并发症外，还具有抗衰老作用。

山茱萸中的环烯醚萜类，溶于水、低碳醇，不溶于石油醚，微溶于氯仿，乙酸乙酯。

现有莫诺苷分离方法大都采用水提醇沉和大孔树脂柱吸附。如专利“山茱萸提取物莫诺苷的制备方法和用途”(申请号为200410014771.2)，该专利公开的方法是山茱萸药材用乙醇提取，减压浓缩，浓缩液加水沉淀，上清液用大孔吸附树脂或活性炭进行柱层析，水和稀醇洗去杂质，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩并干燥后，经反相硅胶分离得到粉末状山茱萸提取物莫诺苷，该方法用水和稀醇洗脱杂质，再用乙醇洗脱有效成分，所得产品纯度高，但有效成分损失较多，从而降低了提取率。专利“莫诺苷的制备方法及其新用途”(申请号为200710113824.X)，该专利公开的制备方法是将山茱萸药材水提醇沉，醇沉液调pH至1-3，两次上大孔树脂，水和低浓度乙醇洗脱，洗脱液低温减压干燥，结晶即得产品，该方法虽然操作简单，但醇沉液需加酸调pH，而莫诺苷属于环烯醚萜苷类，对酸较敏感，结构易发生改变。而马钱苷的提取分离方法则很少。

发明内容：

本发明的目的是为了提供一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的工艺。

本发明的目的是这样来实现的：

一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法，其特征在于包括以下几个步骤：

1)提取：将干燥山茱萸粉碎，用6-8倍量的70％乙醇超声提取2-3小时，提取2-3次，合并提取液；

2)萃取：将上述提取液浓缩至无醇，加水分散，加等体积的正丁醇萃取2-4次，正丁醇萃取液浓缩回收正丁醇，至干，得到粗苷；

3)高速逆流色谱分离：以正丁醇-乙醇-水为两相溶剂***，将上述粗苷用下相溶解，以上相为固定相，下相为流动相，流出物分别减压蒸干；

4)结晶：将上述干燥物正丁醇加热溶解，再加5-8倍量乙酸乙酯结晶2-3次，干燥即得产品。

步骤3)中使用的两相溶剂为正丁醇-乙醇-水(4～5∶1～3∶5～7)，色谱仪转速为800～1000r/min，流动相的流速为1～2.5ml/min。

综上所述，本发明存在以下优点：

1)醇溶液常温提取，能耗低。

2)采用HSCCC，分离效果好，溶剂用量小，无需使用载体，减少了过程中的损失。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取1kg干燥山茱萸粉碎，用6L70％乙醇超声提取3小时，提取3次，合并提取液，浓缩无醇，加1L水分散，加等体积的正丁醇萃取4次，正丁醇层浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，取800ml正丁醇、200ml乙醇和1000ml水，超声波振荡混合，转移至分液漏斗，静置分层，分出上下相，以上相为固定相，下相为流动相。上述粗苷用350ml下相溶解，将上相用泵以10ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，开启速度控制器，使螺旋管顺时针方向旋转，当色谱仪转速为950r/min时，以流速为2.5ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为150mg，分别收集莫诺苷成分和马钱苷成分，分别减压蒸干，干燥物分别用200ml正丁醇加热溶解，再加1L乙酸乙酯结晶3次，滤出干结晶燥即得莫诺苷7.3g，含量95.1％，马钱苷6.1g，含量95.3％。

实施例2：

取1kg干燥山茱萸粉碎，用8L 70％乙醇超声提取3小时，提取2次，合并提取液，浓缩无醇，加800ml水分散，加等体积的正丁醇萃取3次，正丁醇层浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，取700ml正丁醇、400ml乙醇和1000ml水，超声波振荡混合，转移至分液漏斗，静置分层，分出上下相，以上相为固定相，下相为流动相。上述粗苷用300ml下相溶解，将上相用泵以10ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，开启速度控制器，使螺旋管顺时针方向旋转，当色谱仪转速为900r/min时，以流速为2ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为250mg，分别收集莫诺苷成分和马钱苷成分，分别减压蒸干，干燥物分别用300ml正丁醇加热溶解，再加2.4L乙酸乙酯结晶2次，滤出干燥即得莫诺苷7.8g，含量92％，马钱苷7.0g，含量93.6％。

实施例3：

取2kg干燥山茱萸粉碎，用15L 70％乙醇超声提取2小时，提取3次，合并提取液，浓缩无醇，加1.5L水分散，加等体积的正丁醇萃取2次，正丁醇层浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，取1600ml正丁醇、500ml乙醇和1800ml水，超声波振荡混合，转移至分液漏斗，静置分层，分出上下相，以上相为固定相，下相为流动相。上述粗苷用700ml下相溶解，将上相用泵以12ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，开启速度控制器，使螺旋管顺时针方向旋转，当色谱仪转速为950r/min时，以流速为1ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为150mg，分别收集莫诺苷成分和马钱苷成分，分别减压蒸干，干燥物分别用250ml正丁醇加热溶解，再加1.5L乙酸乙酯结晶2次，滤出干燥即得莫诺苷18.5g含量95.5％，马钱苷18.4g，含量93.8％。

实施例4：

取2kg干燥山茱萸粉碎，用14L 70％乙醇超声提取3小时，提取3次，合并提取液，浓缩无醇，加1.8L水分散，加等体积的正丁醇萃取3次，正丁醇层浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，取1600ml正丁醇、800ml乙醇和2400ml水，超声波振荡混合，转移至分液漏斗，静置分层，分出上下相，以上相为固定相，下相为流动相。上述粗苷用600ml下相溶解，将上相用泵以12ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，开启速度控制器，使螺旋管顺时针方向旋转，当色谱仪转速为1000r/min时，以流速为2.5ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为150mg，分别收集莫诺苷成分和马钱苷成分，分别减压蒸干，干燥物分别用500ml正丁醇加热溶解，再加3乙酸乙酯结晶2次，滤出干燥即得莫诺苷17.5g，含量96％，马钱苷15.7g，含量96.2％。

实施例5：

取5kg干燥山茱萸粉碎，用40L70％乙醇超声提取3小时，提取3次，合并提取液，浓缩无醇，加3L水分散，加等体积的正丁醇萃取3次，正丁醇层浓缩回收正丁醇至干，得到粗苷，取3.2L正丁醇、1.6L乙醇和5.6L水，超声波振荡混合，转移至分液漏斗，静置分层，分出上下相，以上相为固定相，下相为流动相。上述粗苷用1.5L下相溶解，将上相用泵以20ml/min的流量灌满色谱柱，将柱的首端与进样阀相接，开启速度控制器，使螺旋管顺时针方向旋转，当色谱仪转速为800r/min时，以流速为1.5ml/min泵入流动相，并通过进样阀进样，每次进样量为200mg，分别收集莫诺苷成分和马钱苷成分，分别减压蒸干，干燥物分别用1.5L正丁醇加热溶解，再加10L乙酸乙酯结晶3次，滤出干燥即得莫诺苷39.1g，含量95.2％，马钱苷36.7g含量为94.1％。

Claims

1.一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法，其特征在于包括以下几个步骤：

2.如权利要求1所述的从山茱萸中提取莫诺苷的方法，其特征在于步骤3)中使用的两相溶剂为正丁醇-乙醇-水(4～5∶1～3∶5～7)，色谱仪转速为800～1000r/min，流动相的流速为1～2.5ml/min。