CN102435659A - 分析装置及分析方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种分析装置及分析方法。分析装置(100)具备:贮槽部(10)、注入管嘴(20)、注射器(21)、采取管嘴(22)、试样槽(25)、具有两个以上的分离流路(31)的微芯片(30)、检测部(40)、废液槽(58)、控制部及电源部。采取管嘴(22)从收容作为试样(K2)的检体(K1)的试样容器(23)中采取检体(K1),并将检体(K1)移送至试样槽(25)。分离流路(31)分离试样(K2)所包含的特定成分。注入管嘴(20)被从采取管嘴(22)隔离,使试样(K2)从试样槽(25)注入分离流路。检测部(40)检测在分离流路(31)分离出的特定成分。
Description
技术领域
本发明涉及分析装置及分析方法。
背景技术
分析包含于试样的特定成分的浓度或量的分析方法中有一种方法,其具有从试样中分离特定成分的分离工序、和检测分离后的特定成分的检测工序。例如,在使用毛细管电泳法的分析方法中,向截面积较小的分离流路填充电泳液,进而在靠分离流路的一端导入试样。在分离流路的两端施加电压时,例如,产生通过电泳而使电泳液从正极侧向负极侧移动的电渗流。另外,通过施加上述电压,特定成分根据各自的电泳移动度而移动。因此,特定成分根据将电渗流的速度矢量和电泳产生的移动的速度矢量合成后的速度矢量而移动。通过该移动,将特定成分从其它的成分中分离。通过例如光学方法检测该被分离后的特定成分,能够分析特定成分的量和浓度。
在(日本)特开2005-214710号公报中记载有提高电泳分离的效率,而且能够针对每个试样设定分离缓冲液及电泳条件的微芯片处理方法及装置。在该技术中,共通地设置装置的分注部,将分离缓冲液和试样注入微芯片的电泳流路。通过分离缓冲填充、排出部将注入电泳流路的一端的分离缓冲液填充到电泳流路。电泳用高压电源部对各电泳流路单独地施加电泳用电压。对一个电泳流路的分离缓冲液填充及试样注入结束后,转移至向下一个电泳流路的分离缓冲液填充及试样注入,在试样注入结束的电泳流路施加电泳电压,开始电泳分离和萤光测定部进行的检测动作。
(日本)特开2005-214710号公报的微芯片处理方法中,具备多个用于分析处理的流路,依次进行试样的测定,提高电泳分离的效率。但是,由于不考虑包含用于分析的溶液的填充或试样的导入的前处理的时间,所以作为分析处理整体需要时间。
另外,以分析、测定对象为血液检体的情况下,血液检体的粘性较高,清洗可能耗费较长时间。另外,从卫生面管理及安全性提高的问题考虑,在血液检体的处理方面需要注意。
发明内容
本发明是鉴于上述事情而创立的,其目的在于,提供能够缩短包含前处理的工序的分析所需要的时间的分析装置及分析方法。
本发明第一观点的分析装置,其特征在于,具备:
采取部,从检体用容器采取检体,并将采取的该检体移送至将该检体加工成试样的试样槽;
两个以上的流入部,使所述试样流入该流入部;
与所述提取采取部隔离的分注部,使所述试样从所述试样槽注入所述流入部;
处理部,对流入所述流入部的所述试样实施处理;
检测部,检测所述流入部的所述试样所包含的特定成分。
本发明第二观点的分析方法是对试样所包含的特定成分进行分析的分析装置进行的分析方法,其特征在于,包括:
采取步骤,利用采取部从检体用容器采取检体;
加工步骤,将在所述采取步骤采取的检体移送至试样槽,并在该试样槽之中处理该检体而加工成所述试样;
注入步骤,利用与所述采取部隔离的分注部,将所述试样从所述试样槽注入两个以上的流入部;
处理步骤,对在所述注入步骤注入所述流入部的所述试样实施处理;
检测步骤,检测在所述处理步骤实施处理后的所述试样所包含的特定成分。
附图说明
图1是本发明实施方式的分析装置的构成概略图;
图2是图1的分析装置的分离部主体的构成概略图;
图3是表示实施方式的控制部的构成例的框图;
图4A是表示将检体吸入注射器前的状态的图;
图4B是表示将检体吸入注射器后的状态的图;
图4C是表示将检体移送至试样槽的状态的图;
图4D是表示在试样槽将检体加工成试样的状态的图;
图5是表示实施方式的分析方法的工序的一例的流程图;
图6是表示实施方式的分析方法的处理时间的一例的时间图;
图7是表示现有的分析方法的一例的流程图;
图8是表示现有的分析方法的处理时间的一例的时间图;
图9是表示现有的分析方法的变形例的处理时间的一例的时间图。
具体实施方式
(实施方式)
图1是表示本发明实施方式的分析装置的构成概略图。作为一例,说明了分析装置100是通过毛细管电泳法进行分析的分析装置且分离流路为四个的情况。图2是图1的分析装置的分离部主体的构成概略图。在本实施方式中假想分析装置100使用毛细管电泳法进行从生物体采取的血液等检体的分析的情况进行说明。
分析装置100具备贮槽部10、注入管嘴(注入部)20、注射器21、采取管嘴22、试样槽25、微芯片(分离部主体)30、检测部40、废液槽58、控制部70及电源部。微芯片30具备分离流路31、导入孔32、排出孔33、电极34及电极35。图1中为了避免附图复杂,容易理解,省略从控制部70到各部的配线。另外,有时以如下方式说明,即,将分离流路31a、31b、31c、31d总称为分离流路31,将导入孔32a、32b、32c、32d总称为导入孔32,将排出孔33a、33b、33c、33d总称为排出孔33,将电极34a、34b、34c、34d总称为电极34,将电极35a、35b、35c、35d总称为电极35,将检测部40a、40b、40c、40d总称为检测部40。
贮槽部10具备电泳液槽11、净化水槽12及清洗液槽13。电泳液槽11中存有电泳液L1。电泳液L1是作为缓冲液而发挥功能的液体,例如,是100mM苹果酸-精氨酸缓冲液(pH5.0)+1.5%硫酸软骨素C钠。净化水槽12中存有净化水L2。清洗液槽13中存有清洗液L3。电泳液槽11、净化水槽12及清洗液槽13分别具备泵(未图示),使存于内部的液体向流路61、62、63流出。贮槽部10的泵的动作由控制部70控制。
作为贮槽部10的泵,例如也可以是将注射器泵与三通阀51或53连接的构成。该情况下,在三通阀51或53中使注射器泵与各槽连通,利用注射器泵吸入。而且,此次,使三通阀51或53与注射器泵和流路64或65或68连通,使注射器泵进行排出动作,由此可将液体送出到流路64、65或68。
为了切换使各液体从流路61、62、63流向流路64、65、66、68的路径,具备三通阀51、52、53。另外,为了切换从流路67、68、69流向废液槽58的流路,具备三通阀54。三通阀51、52、53、54的路径的切换由控制部70控制。
用于本说明书的检体不限定于特定的物质,可以使用水溶液检体、生物体检体、食品、菌等培养液、植物等的采取液等。作为本说明书的试样所包含的分析对象物,可举出例如蛋白质、生物体内物质、血液中物质等,作为蛋白质的具体例可列举出血红蛋白、白蛋白、球蛋白、酶等。作为血红蛋白可举出糖化血红蛋白、变异血红蛋白、小血红蛋白(minor hemoglobin)、修饰血红蛋白等,更具体地说,可举出血红蛋白A0(HbA0)、稳定型血红蛋白A1c(HbA1c)、不稳定型HbA1c、血红蛋白A2(HbA2)、血红蛋白S(Hb S、镰刀形红细胞血红蛋白)、血红蛋白(Hb F、胎儿血红蛋白)、血红蛋白M(HbM)、血红蛋白C(HbC)、高铁血红蛋白、氨甲酰化血红蛋白、乙酰化血红蛋白等。作为酶具有例如淀粉酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、脂肪酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶。
作为生物体内物质及血中物质等的具体例,可举出胆红素、激素、代谢物质、核苷酸链、染色体、肽链、糖链抗原、糖链、脂质、肿瘤标志物蛋白抗原等。作为激素可举出促甲状腺激素、促肾上腺素皮质激素、绒毛性***、胰岛素、胰高血糖素、肾上腺髓质激素、***、***、醛甾酮、皮质醇等。作为核苷酸链可举出低聚核苷酸链、多聚核苷酸链,作为肽链可举出例如C-肽、血管紧张素I等。作为糖链抗原可举出例如AFP、hCG、转铁蛋白、IgG、甲状腺球蛋白、CA19-9、***特异性抗原、具有癌细胞产生的特殊的糖链的肿瘤标志物蛋白抗原等。除此之外,还有源于微生物的蛋白质或肽或糖链抗原、成为过敏的原因的各种过敏原(例如,源于室内尘埃、螨、柳杉、扁柏/猪草等花粉、虾/蟹等动物、蛋白等食物、真菌、昆虫、药剂、化学物质等的过敏原等)等。
下面,对于包含用于利用分析装置100进行分析的特定成分的样品,分为检体K1和试样K2进行说明。检体K1例如是从生物体收集的状态的检查对象,指未处理的状态的样品。试样K2是指利用规定的方法对检体K1进行加工处理,例如在溶液中稀释或与其它的物质混合等加工处理,使用分析装置100可测定、分析的状态的样品。例如,检体K1为全血。试样K2例如是将作为全血的检体K1通过包含发挥破坏血球膜的溶血作用的溶血成分的溶液稀释为规定的浓度后的试样,测定对象的特定成分可举出血红蛋白的情况。
注射器21从与采取管嘴22连接的孔进行流体的吸入及排出。采取管嘴22是利用注射器21的吸入及排出的动作,吸入、排出检体K1的部分。
采取管嘴22以可贯通试样容器23的盖24的方式形成前端,能够采取处于试样容器23之中的检体K1。采取管嘴22能够不打开试样容器23的盖24,而贯通盖24并采取检体K1。
采取管嘴22为了贯通试样容器23(在此指盖24)而需要具有规定的强度,且为可吸入、排出检体K1的形状,且为可移送的形状。采取管嘴22是用不锈钢等金属或陶瓷、塑料材料形成为细长的筒状的针形状,例如可以使用注射针等。为了使采取管嘴22易贯通试样容器23,优选以在前端设置锥角,或斜着切断前端等方式,形成锐利的形状。另外,为了减小贯通时的摩擦,优选采取管嘴22为光滑的表面特性。
试样容器23的盖24也可以事先加工成在采取管嘴22上易实施贯通处理的状态。盖24例如用弹性橡胶等材料,在不施加外力的情况下,可以内部的液体等***漏的方式维持孔关闭的状态,利用针形成使试样容器23的内部和外部相通的微小的孔。用采取管嘴22穿通该微小的孔,由此能够减小贯通试样容器23时作用的力,可用采取管嘴22对试样容器23容易地实施贯通处理。
采取管嘴22由未图示的驱动机构支承。利用该驱动机构,采取管嘴22可进行向试样容器23的***及拔出,可进行向试样槽25的进入及退出。通过采取管嘴22的驱动动作和注射器21的吸入及排出动作,能够将从试样容器23采取的检体K1移送至试样槽25。注射器21的吸入及排出动作和采取管嘴的驱动由控制部70控制。
试样槽25在槽内可实施在稀释溶液中稀释、或与其它物质混合等规定的处理,具有将检体K1加工成适于分析的状态、即加工成试样K2的功能。试样槽25与贮槽部10一样,具备泵,经由分注管嘴20使内部的试样K2向流路64、67流出。或者,在分注管嘴20具备吸引泵,使试样K2向流路64、67流出。试样槽25或分注管嘴20的泵的动作由控制部70控制。作为试样部25的泵,可构成为例如将注射器泵与三通阀51或54连接。该情况下注射器泵的作用与贮槽部10的情况一样。
微芯片(分离部主体)30是进行使用毛细管电泳法的分析的场所。微芯片30例如以二氧化硅为材质而形成。微芯片30的材质也可以是丙烯等。下面,说明微芯片(分离部主体)30的构成。
图2是图1的分析装置的分离部主体的构成概略图。微芯片30具备分离流路31a、31b、31c、31d。各分离流路31a、31b、31c、31d的构成相同,作为代表对分离流路31a进行说明。
分离流路31a是形成于微芯片30的微细的流路,进行使用毛细管电泳法的分析的分离等。分离流路31a的截面优选为直径为25μm至100μm的圆形,或边长为25μm至100μm的矩形,只要是适于进行毛细管电泳法的形状及尺寸,就不限定于此。另外,在本实施方式中,分离流路31a的长度为30mm左右,但不限定于此。
分离流路31a具备导入孔32a、排出孔33a、电极34a及电极35a。另外,具备与该分离流路31a对应的检测部40a。另外,为了从多个分离流路选择作为分析对象的分离流路31a,而具备夹管阀55a、56a。夹管阀55a、56a的开闭动作由控制部70控制。
在分离流路31a内填充例如电泳液L1等溶液的情况下,首先,进行三通阀52的切换,溶液向流路66流入。根据控制部70的指示,为了仅使与分离流路31a连接的流路连通,开放夹管阀55a。在夹管阀55a开放的同时,处于隔着分离流路31a相对的位置的夹管阀56a也根据控制部70的指示,同时开放。通过开放夹管阀56a,分离流路31a和流路69连通,溶液在流路69流动,经由三通阀54,与废液槽58连接。
为了抑制在各分离流路31a、31b、31c、31d之间作用的负荷不均匀的情况,优选分离流路31a在夹管阀56a和流路69之间设置歧管57。
微芯片30的各分离流路31a、31b、31c、31d由控制部70独立地控制。控制部70在选择成为分析对象的分离流路31a、31b、31c、31d时,以如下方式进行控制:开放所对应的夹管阀55a、55b、55c、55d及夹管阀56a、56b、56c、56d,对于各分离流路31a、31b、31c、31d从各导入孔32a、32b、32c、32d导入试样K2,并从各排出孔33a、33b、33c、33d排出。另外,控制部70根据对各电极34a、34b、34c、34d及各电极35a、35b、35c、35d的电压的施加、在各分离流路31a、31b、31c、31d上的基于电泳的特性成分的分离、及各检测部40a、40b、40c、40d中的特定成分的浓度及量的检测的指示进行控制。
图2表示与各分离流路31a、31b、31c、31d对应地具备各检测部40a、40b、40c、40d的例子。检测部40a、40b、40c、40d至少有一个即可,能够检测在各分离流路31a、31b、31c、31d分离的特性成分即可。例如,也可以设计成如下方式:具备两个检测部40a、40b,检测部40a进行分离流路31a、31b的检测,检测部40b进行分离流路31c、31d的检测等,用一个检测部40进行多个分离流路31的检测。
在分离流路31上形成有导入孔32及排出孔33。导入孔32设置于分离流路31的一端,是从注入管嘴20导入试样K2的部分。另外,在本实施方式中,除试样K2之外,还可导入电泳液L1、净化水L2及清洗液L3。排出孔33设置于分离流路31的另一端,是排出填充于分离流路31的试样K2、电泳液L1、净化水L2及清洗液L3等的部分。
另外,在分离流路31上,在其两端设置有电极34和电极35。在本实施方式中,电极34向导入孔32露出,电极35向排出孔33露出。
检测部40是用于在分离流路31上分析从试样K2分离的特定成分的部分。检测部40在分离流路31中设置于比导入孔32更靠近排出孔33侧的部分。检测部40例如分别具备光源及受光部。将来自光源的光向试样K2照射,利用受光部接收透过试样K2的光,由此测定试样K2的吸光度。而且,根据试样K2的吸光度,可分析特定成分。
分析装置100的上述的各部的动作由控制部70控制。通过一系列的控制进行分析装置100的分析。控制部70由例如CPU、存储器、输入输出接口等构成。
在分析装置100上设置有三通阀51、52、53、54。三通阀51、52、53、54分别具有三个连接口,这些连接口彼此的连通状态及断开状态由控制部70独立地控制。
电泳液槽11经由流路61与三通阀51连接。净化水槽12及清洗液槽13经由流路62、63与三通阀53连接。试样槽25经由流路64与三通阀51连接,另外,经由流路67与三通阀54连接。三通阀51经由流路65与三通阀52连接。三通阀53经由流路68与三通阀52、54连接。
在三通阀52的下游侧经由流路66连接有分离流路31。三通阀52通过控制部70控制流路的切换,能够允许或断开向分离流路31的流入。分离流路31经由流路69与三通阀54连接。三通阀54通过控制部70控制流路的切换,独立地控制和分离流路31之间的连通状态及断开状态。在三通阀54的下游侧连接有废液槽58。废液槽58是用于贮藏使用过的液体的装置。废液槽58中也可以具备吸引其内部的气体的泵。通过用泵吸引废液槽58的气体,能够将流路67或68、69的液体吸引到废液槽58。
电源部(未图示)是用于在分离流路31施加用于通过毛细管电泳法进行分析的电压的部分,与正极即电极34及负极即电极35连接。所施加的电压例如是1.5kV左右,正极和负极也可以具备施加相反的极性的功能。
图3是表示实施方式的控制部的构成例的框图。图3表示图1的控制部70的构成。控制部70具备贮槽驱动控制部71、注射器控制部72、试样槽驱动控制部73、三通阀控制部74、夹管阀控制部75、分离/检测控制部76、试样槽清洗控制部77及流路清洗控制部78。
贮槽驱动控制部71控制电泳液槽11、净化水槽12及清洗液槽13的泵,控制在流路61、62、63流动的液体的流量。注射器控制部72控制注射器21的吸入及排出动作、采取管嘴的驱动。试样槽驱动控制部73驱动试样槽的泵,控制从试样槽经由分注管嘴在流路64或67中流动的液体的量。
三通阀控制部74控制三通阀51、52、53、54,切换在流路61~69中流动的液体的路径。夹管阀控制部75分别控制夹管阀55a~55d、56a~56d的开闭动作。
分离/检测控制部76使电泳液槽11、净化水槽12、注射器21及采取管嘴22、试样槽25、三通阀51、52以及夹管阀55a~55d及56a~56d协调动作,向分离流路31导入电泳液L1及试样K2。而且,对电极34及电极35施加电压,控制检测部40,例如,进行试样K2的特定成分的分析。分离/检测控制部76经由贮槽驱动控制部71、注射器控制部72、试样槽驱动控制部73、三通阀控制部74及夹管阀控制部75,使电泳液槽11、净化水槽12、注射器21及采取管嘴22、试样槽25、三通阀51、52以及夹管阀55a~55d及56a~56d动作。
试样槽清洗控制部77使贮槽部10、注射器21及采取管嘴22、试样槽25以及三通阀51、52、53、54协调动作,进行采取管嘴22及试样槽25的清洗。试样槽清洗控制部77经由贮槽驱动控制部71、注射器控制部72、试样槽驱动控制部73、三通阀控制部74及夹管阀控制部75,使贮槽部10、注射器21及采取管嘴22、试样槽25以及三通阀51、52、53、54动作。
流路清洗控制部78使贮槽部10、三通阀51、52、53、54以及夹管阀55a~55d及56a~56d协调动作,进行流路66及分离流路31a~31d的清洗。流路清洗控制部78经由贮槽驱动控制部71、试样槽驱动控制部73、三通阀控制部74及夹管阀控制部75,使贮槽部10、三通阀51、52、53、54以及夹管阀55a~55d及56a~56d动作。
控制部70如上所述,可以由计算机和在其上进行工作的程序构成。控制部70的各部分也可通过逻辑电路构成。下面,对分析及清洗的动作进行说明。
图4A~图4D是表示准备图1的分析装置的试样的工序的概略图。首先,根据控制部70的指示,利用上述的驱动机构(图示略)使采取管嘴22贯通盖24(参照图4A)。然后,将采取管嘴22的前端浸泡在检体K1内,使注射器21做吸入动作(参照图4B)。吸入检体K1后,将采取管嘴22移动至试样槽25,使注射器21做排出动作。将通过采取管嘴22吸入注射器21内的检体K1朝向例如贮存有电泳液L1的试样槽25排出、移送(参照图4C)。之后,在试样槽25内调节为规定的稀释浓度,或充分地混合等,准备试样K2(图4D)。为了混合试样K2,即促进检体K1和电泳液L1的搅拌,优选使注射器21重复执行吸入动作和排出动作。
注入管嘴20可从试样槽25吸入试样K2,注入分离流路31。注入管嘴20是被从采取管嘴22隔离而另备的管嘴,只要能够将试样K2注入分离流路31,对于形状及材质就不用特别关注。
将由注入管嘴20从试样槽25吸入试样K2并注入分离流路31之前的部位总称为分注部。分注部包含流路64、65、66及注入管嘴20。本实施方式中流路64、65及注入管嘴20也用于试样槽25的清洗。狭义地讲,分注部是流路66。
下面,使用图1~图5说明使用分析装置100的分析方法。图5是表示实施方式的分析方法之一例的流程图。分析方法的工序大致分成前处理工序S1和分析工序S2。
在本实施方式中,例如将检体K1设为全血,将试样K2设为在特定成分中稀释包含血红蛋白的全血的溶液。用分析装置100分析的对象的试样K2设为在电泳液L1中将检体K1稀释为规定的浓度的溶液。电泳液L1包含发挥破坏血球膜的溶血作用的溶血成分,试样K2为适于血红蛋白分析的状态。
试样容器23使用真空采血管,盖24是指密封真空采血管的开口部的橡胶塞等。用于贯通盖24的注射器21的采取管嘴22使用不锈钢制的注射针等。
前处理工序(步骤S1)由前处理器具的清洗工序(步骤S11)、填充工序(步骤S12)、分注工序(步骤S13)及分析器具的清洗工序(步骤S10)构成。前处理器具包括注射器21、采取管嘴22、试样槽25、分注管嘴20及流路64、65。分析器具包括分离流路31。
前处理工序(步骤S1)的前处理器具的清洗工序(步骤S11)、填充工序(步骤S12)及分注工序(步骤S13)由连续的工序构成。前处理工序(步骤S1)的分析器具的清洗工序(步骤S10)独立地构成,由步骤S11~步骤S13构成的连续的工序和步骤S10的工序对彼此的工序不产生影响。因此,步骤S11~步骤S13、步骤S10的工序的执行时间的至少一部分时间也可以重合,可同时执行步骤S11~步骤S13、步骤S10的工序。下面,详细地进行说明。
分析器具的清洗工序(步骤S10)是在分析工序(步骤S2)之前对残存于分离流路31的内部的用于上次分析的试样K2等进行清洗的工序。首先,根据来自控制部70的流路清洗控制部78的指示,切换三通阀53,净化水槽12及清洗液槽13与流路68连通。另外,切换三通阀52,将流路68和流路66连通。另外,切换三通阀54,从流路68连通到废液槽58。在该状态下,在分离流路31内填充净化水L2及清洗液L3,向废液槽58排出,由此清洗分离流路31内。另外,用清洗液L3清洗后,既可以流过净化水L2,也可以多次进行填充、排出这一系列流程。
前处理器具的清洗工序(步骤S11)是在前处理工序(步骤S1)的最开始时进行的工序,是在连续使用分析装置100的情况下,进行上次使用的前处理器具的清洗的工序。首先,根据来自控制部70的试样槽清洗控制部77的指示,切换三通阀51,关闭流路64。切换三通阀54而使流路67与废液槽58连通。然后,将残留于试样槽25的试样K2向废液槽58排出。接着,切换三通阀51、52、53,利用流路68、65、64的路径将净化水槽12及/或清洗液槽13与试样槽25连通。在试样槽25内填充净化水L2及/或清洗液L3。然后,将采取管嘴22***试样槽25的液体内进行几次吸入排出。接着,将试样槽25的液体向废液槽58排出。这样,清洗注射器21、采取管嘴22、试样槽25、分注管嘴20、流路64、65、67。也可以多次进行净化水L2及/或清洗液L3的填充、采取管嘴22的吸入排出及液体的排出。
填充工序(步骤S12)是向分离流路31填充用于实现电泳的电泳液L1的工序。根据来自控制部70的指示,切换三通阀51,使流路61和流路65连通,将流路64与它们断开。三通阀52也进行切换,将流路65和流路66连通,将流路68与它们断开。三通阀54通过切换,从流路68连通到废液槽58。在该状态下,向流路31内填充电泳液L1。
分注工序(步骤S13)是将试样K2从导入孔32分注到分离流路31的工序。另外,本实施方式的分注工序(步骤S13)包含将检体K1加工成试样K2的工序,例如稀释检体K1而形成试样K2,使之成为适于分析的状态的工序。
在分注工序(步骤S13)的稀释检体K1而加工成试样K2,使之成为适于分析的状态的工序中,事先切换三通阀51,使流路61和流路64连通。向试样槽25导入电泳液L1,使用电泳液L1将检体K1稀释成规定的浓度。在稀释时,不限于电泳液L1,也可以使用净化水L2,根据分析条件而异。另外,在试样槽25中,根据分析条件,也可以进行形成适于其它物质的混合、充分的混合、其它分析的状态的工序。
分注工序(步骤S13)的稀释检体K1而加工成试样K2的工序,首先根据控制部70的指示,通过上述的驱动机构(图示略)使采取管嘴22贯通盖24(参照图4A)。然后,将采取管嘴22的前端浸泡在检体K1内,使注射器21做吸入动作(参照图4B)。使注射器21做排出动作,将通过采取管嘴22吸入注射器21内的检体K1例如向贮存有电泳液L1的试样槽25排出、移送(参照图4C)。之后,在试样槽25内,调节为规定的稀释浓度,或充分地混合(图4D)等,进行准备试样K2的这一系列的工序。为了混合试样K2、即促进检体K1和电泳液L1的搅拌,优选使注射器21重复执行吸气动作和排气动作。
接着,用注入管嘴20吸引在试样槽25中稀释的试样K2,使之进入分离流路31的导入孔32,将试样K2导入分离流路31。由此,前处理工序S1结束,成为可利用分离流路31进行分析的状态。
另外,在本实施方式中,分注工序(步骤S13)中含有稀释工序,但在不需要稀释的试样K2为分析对象的情况下、即将检体K1直接用作分析对象的情况下,也可以不经稀释工序而实施分注工序(步骤S13)。另外,将检体K1加工成试样K2时,在需要稀释以外的处理的情况下,根据需要进行加工处理工序而不是稀释工序。在任何一种情况下,采取管嘴22和分注管嘴20都隔离,检体K1的采取和试样K2的分注可并行进行。
完成前处理工序(步骤S1)后,执行分析工序(步骤S2)。分析工序(步骤S2)由分离工序(步骤S21)及检测工序(步骤S22)构成。
分离工序(步骤S21)是在填充于分离流路31的电泳液L1中分离包含于试样K2的特定成分的工序。根据控制部70的指示,从电源部向正极即电极34及负极即电极35施加电压,在电泳液L1中产生从电极34向电极35的电渗流。这时,对于特定成分,根据固有的电泳移动度而从电极34向电极35产生移动。
检测工序(步骤S22)是检测被分离的特定成分的量或浓度等的工序。根据控制部70的指示,检测部40在分离流路31的特定的位置,例如从光源照射波长为415nm的光,利用受光部接收该透射光。特定成分通过分离流路31的特定的位置时,由受光部接收的光(吸光度)发生变化,根据该变化,可检测特定成分的浓度及量。进行该分析结果例如存储于存储部(未图示)等处理,完成检测工序(步骤S22)。通过以上的工序,结束前处理工序(步骤S1)及分析工序(步骤S2),完成使用分析装置100的分析。
图6是表示实施方式的分析方法的处理时间之一例的时间图。关于分析方法,参照图5所示的实施方式的分析方法。
对于微芯片30的利用各分离流路31a、31b、31c、31d进行的各处理,用图A表示利用分离流路31a进行的处理的时间,用图B表示利用分离流路31b进行的处理的时间,用图C表示利用分离流路31c进行的处理的时间,用图D表示利用分离流路31d进行的处理的时间。在任一图A、B、C、D中均进行同样的处理,另外,处理耗费的时间大致相等。
对分离流路31为四个的情况进行说明。独立地控制各分离流路31a、31b、31c、31d,但除了从夹管阀55经由各分离流路31a、31b、31c、31d至夹管阀56之间以外的流路61~流路69是共用的。
因此,在分别使用各分离流路31a、31b、31c、31d的情况下,例如,从试样槽25向分离流路31a导入与其它分离流路31b、31c、31d不同的特定的分析试样的情况等情况下,不能同时进行工序,需要错开时间进行处理以使利用各分离流路31a、31b、31c、31d的处理时间不重合。另外,在各分离流路31a、31b、31c、31d使用的分析试样可能混合的情况下,例如,对于利用分离流路31a、31b、31c、31d进行的前处理器具的清洗工序(步骤S11)的情况等,也不能同时进行处理,而需要错开时间进行处理以使处理时间不重合。
作为不需要错开时间进行处理以使处理时间不重合的情况,例如,存在向各分离流路31a、31b、31c、31d填充相同的液体的工序(步骤S12)的情况。在步骤S12中,由于需要用电泳液L1填充各分离流路31a、31b、31c、31d及流路61~流路69,且电泳液L1使用相同的电泳液,所以能够以至少一部分时间重合的方式进行处理,根据情况,也可同时进行处理。
例如,对于一个分离流路31,以图A为例进行说明。可知在连续执行全部的工序的情况下,至工序结束为止需要时间t4。并且可知,与之相对,通过并行进行步骤S11~步骤S13的工序而进行步骤S10的工序,需要时间t3而结束,与时间t4相比,可按步骤S 10耗费的时间的量(时间t2和时间t1的差值)缩短直至工序结束为止的时间。
根据上述的理由,能够以分离流路31a和分离流路31b的前处理工序(步骤S1)的至少一部分时间重合的方式进行处理。另外,对于各分离流路31b和分离流路31c、分离流路31c和分离流路31d也一样,能够以前处理工序(步骤S1)的至少一部分时间重合的方式进行处理。
另外,能够以分离流路31a和分离流路31b的分析工序(步骤S2)的至少一部分时间重合的方式进行处理。另外,对于各分离流路31b和分离流路31c、分离流路31c和分离流路31d也一样,能够以分析工序(步骤S2)的至少一部分时间重合的方式进行处理。
具体而言,对于连续处理分离流路31a(图A)和分离流路31b(图B)的情况进行说明。由于分离流路31a的前处理器具的清洗工序(步骤S11)和分离流路31b的前处理器具的清洗工序(步骤S11)不能同时处理,因此,利用分离流路31a完成前处理器具的清洗工序(步骤S11)前,分离流路31b不能开始工序,而处于待机状态。利用分离流路31a完成前处理器具的清洗工序(步骤S11)后,利用分离流路31b开始前处理器具的清洗工序(步骤S11)。对于其以后的工序、即前处理工序的一部分(步骤S10、步骤S12及步骤S13)及分析工序(步骤S2),即使分离流路31a和分离流路31b的工序的处理时间重合,也能够进行处理。
作为结果,在利用分析装置100的多个分离流路31连续进行处理的情况下,能够以至少前处理工序的一部分、在此为前处理器具的清洗工序(步骤S11)间的时间不重合的方式进行分析。
对于各分离流路31a、31b、31c、31d,能够缩短各分析处理耗费的时间,且能够以各分析处理耗费的时间的至少一部分时间重合的方式进行处理,因此,能够大幅度缩短利用分析装置100进行分析所耗费的时间。
图7是表示现有的分析方法之一例的流程图。分析工序(步骤S2)与本实施方式的分析装置100相同,但前处理工序(步骤S3)包含前处理器具及分析器具的清洗工序(步骤S31)、填充工序(步骤S32)、分注工序(步骤S33)的工序。
可知,这等同于本实施方式的分析装置100的情况下的在前处理器具的清洗工序(步骤S11)之后进行分析器具的清洗工序(步骤S10),并进行填充工序(步骤S12)和分注工序(步骤S13)的情况,在现有的分析方法中,在前处理工序(步骤S3)中需要步骤S10~步骤S13的合计时间。前处理工序(步骤S3)耗费的时间由图6的时间图的、时间t2和时间t1的差值及时间t2之和表示。
图8及图9是表示现有的分析方法的处理时间之一例的时间图。关于分析方法,参照现有的分析方法的图7所示的分析方法的流程图。
图8是如下情况的时间图:在各分离流路31a、31b、31c、31d上结束分离流路31a的前处理工序(步骤S3),开始分析工序(步骤S2),并同时开始下一分离流路31b的前处理工序(步骤S3),同样依次进行处理。
如图7中所说明,在前处理工序(步骤S3)中,由于各工序不重复而依次进行,所以各分离流路31a、31b、31c、31d的前处理工序(步骤S3)耗费的时间本身比本实施方式长。另外,各分离流路31a、31b、31c、31d间的处理耗费的时间、即各分离流路31a、31b、31c、31d的待机时间长。因此,可知,与本实施方式的分析装置100的情况相比,整体的处理耗费的时间非常长。
图9是如下情况的时间图:在各分离流路31a、31b、31c、31d上,在结束分离流路31a的前处理工序(步骤S3)的一部分,并开始分析工序(步骤S2)之前,开始下一分离流路31b的前处理工序(步骤S3),同样依次进行处理。
在各分离流路31a、31b、31c、31d上,在前处理工序中重合至少一部分时间进行处理这一点类似于本实施方式的分析装置100的情况。在图9的工序中,能够以前处理工序的一部分、在此为清洗工序(步骤S31)间的时间不重合的方式进行分析。根据图8的情况可知,按照各分离流路31a、31b、31c、31d的待机时间缩短的量,整体的处理耗费的时间相应缩短。
比较图6的本发明实施方式的分析方法和图9的现有的分析方法的情况可知,首先,在各分离流路31a、31b、31c、31d进行观察时,对于各分离流路31的处理时间,在本发明实施方式的分析方法中,处理时间缩短分析器具的清洗工序(步骤S10)的量。
另外,图6的本发明实施方式的分析方法和图9的现有的分析方法均能够以前处理工序的一部分时间不重合的方式进行分析。但是,若比较开始下一分离流路31的工序前的待机时间,则在本发明的实施方式的分析方法中,需要仅待机前处理器具的清洗工序(步骤S11)耗费的时间,与之相对,在图9的分析方法中,需要待机包含前处理器具的清洗工序和分析器具的清洗工序的清洗工序(步骤S31)耗费的时间。步骤S31耗费的时间是分析器具的清洗工序(步骤S10)耗费的时间和前处理器具的清洗工序(步骤S11)耗费的时间之和,因此,在图9的方法中,待机时间多耗费分析器具的清洗工序(步骤S10)的量。在本发明实施方式的分析方法中,开始下一分离流路31的工序前的待机时间缩短分析器具的清洗工序(步骤S10)的量。
作为结果,可知,在使用本实施方式的分析装置100的情况下,待机时间短,且各分离流路31a、31b、31c、31d的处理时间(从前处理工序至分析工序的一系列流程的时间)短,可更高效率地进行整体的处理。
如以上说明,根据本实施方式的分析装置及分析方法,能够以前处理的工序和分析的工序的至少一部分时间重合的方式缩短进行处理分析所需要的时间。
通过使用使采取管嘴和注入管嘴不同的管嘴进行作业,能够以包含准备试样的处理的工序和包含分析试样的处理的工序的至少一部分时间重合的方式进行处理。因此,能够使处理时间重合,缩短从前处理工序至分析工序的分析所需要的整体的处理时间,从而提高效率。另外,由于具备多个分析时的分离流路,从而能够并行进行处理,可以缩短整体的处理时间。
其结果是,在各分离流路上的处理时间缩短的基础上,还能够使各分离流路的处理时间重复,可更高效地进行分析。
另外,由于具备使采取管嘴和注入管嘴不同的管嘴,从而能够选择适于各种功能的材质。例如,优选采取管嘴为注射针那样的硬的原材料,且前端由尖锐的形状形成,另外,注入管嘴不用特别关注材质及形状,只要能够适当地向分离流路注入试样即可。
采取管嘴可贯通试样容器而保持原样地采取试样,因此,省去了打开试样容器的盖的麻烦。另外,在试样为全血且试样容器为真空采血管的情况下,由于用人手直接进行从注射器的真空采血管的试样采取、真空采血管的开封作业,所以可能会产生飞散、血液造成的感染危险等,但这些全部可在分析装置中进行处理,所以安全性提高。另外,由于需要量以外的试样仍残存于试样容器,所以不会飞散,可容易且安全地进行废弃等后处理。
在实施方式中说明了在微芯片上具备的分离流路的数量为四个的情况,但也可以具备更多的分离流路。另外,举例了具备一个作为测定对象的试样的试样槽的情况,但也可以是多个,可以与使用的试样的准备耗费的时间、清洗使用的器具耗费的时间、分离及测定耗费的时间及分离流路的数量等各种条件一致,而任意地设计。
在实施方式中,举例说明了分析装置进行基于毛细管电泳法的分析的分析装置,但不限定于上述的例子。例如,在进行处理的流入部(流入流路),不仅分离包含于试样的特定成分,而且也可以进行混合及采取、或化学反应及免疫反应等的处理。特别优选实施伴随与在微芯片上备置的微细流路上的处理相适应的各种反应的处理。
在本实施方式的分析装置及分析方法中,不限定于上述的例子。本发明的分析装置及分析方法的具体的构成可自如进行各种设计变更。例如有流路的设计及贮槽部的数量、配置各功能部的位置、各功能的形状等,这些可任意地设定。
分离流路的条数不限定于四条。分离流路的构成不限于所谓直线型的构成,例如也可以是两条流路交差的十字注射型的构成。作为试样,不限定于以全血为代表的包含血红蛋白的试样,也可以为包含例如DNA、RNA(核糖核酸)、蛋白质的试样。
利用本发明的分析工序进行的分析不限定于使用毛细管电泳法,也可以使用例如微量液体层析法。该情况下,在分离工序中实施柱的分离、溶出、反应等,在检测工序中进行反应生成物的检测。
另外,作为本发明的优选的变形,包含以下的构成。
对于本发明的第一观点的分析装置,其特征在于,优选具备:
清洗上述采取部及上述试样槽的第一清洗部;
清洗上述分注部及上述流入部的第二清洗部。
该分析装置的特征在于,优选,上述第一清洗部在与上述分注部将上述试样注入上述流入部的时间、用上述处理部对上述试样实施处理的时间及用上述检测部检测包含于上述试样的特定成分的时间的一部分时间重复的时间内清洗上述采取部及上述试样槽。
该分析装置的特征在于,优选,上述第二清洗部在与上述采取部将上述检体移送至上述试样槽的时间及在上述试样槽将上述检体加工成试样的时间的至少一部分时间重复的时间内清洗上述分注部及上述流入部。
该分析装置的特征在于,优选,上述检体用容器密封成上述检体***漏,上述采取部包含采取管嘴,该采取管嘴贯通该检体用容器的一部分而采取上述检体。
该分析装置的特征在于,优选,上述检体用容器为真空采血管,上述采取管嘴贯通该真空采血管的密封部而采取上述检体。
该分析装置的特征在于,优选,上述流入部是具有流路的微芯片。
该分析装置的特征在于,优选,上述处理部包含将上述试样所包含的特定成分分离的分离部,
上述检测部检测用上述分离部分离出的特定成分。
该分析装置的特征在于,优选,上述流入部包含上述分离部,该分离部进行电泳。
对于本发明的第二观点的分析方法,其特征在于,优选包括:
清洗上述采取部及上述试样槽的第一清洗步骤;
清洗上述分注部及上述流入部的第二清洗步骤。
该分析方法的特征在于,优选,进行上述第一清洗步骤的时间和进行上述注入步骤、上述处理步骤及上述检测步骤的时间的至少一部分时间重合。
该分析方法的特征在于,优选,进行上述第二清洗步骤的时间、进行上述采取步骤及上述加工步骤的时间的至少一部分时间重合。
该分析方法的特征在于,优选,上述流入部包含将上述试样所包含的特定成分分离的分离部,
上述处理步骤包含用上述分离部从注入上述流入部的上述试样将该试样所包含的特定成分分离的分离步骤。
该分析方法的特征在于,优选,上述分离步骤使用电泳将上述试样所包含的特定成分分离。
Claims (10)
1.一种分析装置,其特征在于,具备:
采取部,从检体用容器采取检体,并将采取的该检体移送至将该检体加工成试样的试样槽;
两个以上的流入部,使所述试样流入该流入部;
与所述提取采取部隔离的分注部,使所述试样从所述试样槽注入所述流入部;
处理部,对流入所述流入部的所述试样实施处理;
检测部,检测所述流入部的所述试样所包含的特定成分。
2.如权利要求1所述的分析装置,其特征在于,具备:
第一清洗部,清洗所述采取部及所述试样槽;
第二清洗部,清洗所述分注部及所述流入部。
3.如权利要求2所述的分析装置,其特征在于,
所述第一清洗部在与所述分注部将所述试样注入所述流入部的时间、利用所述处理部对所述试样实施处理的时间及利用所述检测部检测所述试样所包含的特定成分的时间的至少一部分时间重复的时间内清洗所述采取部及所述试样槽。
4.如权利要求2所述的分析装置,其特征在于,
所述第二清洗部在与所述采取部将所述检体移送至所述试样槽的时间及在所述试样槽将所述检体加工成试样的时间的至少一部分时间重复的时间内清洗所述分注部及所述流入部。
5.如权利要求1所述的分析装置,其特征在于,
所述检体用容器密封成使所述检体***漏,所述采取部包含采取管嘴,该采取管嘴贯通该检体用容器的一部分而采取所述检体。
6.如权利要求5所述的分析装置,其特征在于,
所述检体用容器为真空采血管,所述采取管嘴贯通该真空采血管的密封部而采取所述检体。
7.一种分析方法,是对试样所包含的特定成分进行分析的分析装置进行的分析方法,其特征在于,包括:
采取步骤,利用采取部从检体用容器采取检体;
加工步骤,将在所述采取步骤采取的检体移送至试样槽,并在该试样槽之中处理该检体而加工成所述试样;
注入步骤,利用与所述采取部隔离的分注部,将所述试样从所述试样槽注入两个以上的流入部;
处理步骤,对在所述注入步骤注入所述流入部的所述试样实施处理;
检测步骤,检测在所述处理步骤实施处理后的所述试样所包含的特定成分。
8.如权利要求7所述的分析方法,其特征在于,包括:
第一清洗步骤,对所述采取部及所述试样槽进行清洗;
第二清洗步骤,对所述分注部及所述流入部进行清洗。
9.如权利要求8所述的分析方法,其特征在于,
进行所述第一清洗步骤的时间和进行所述注入步骤、所述处理步骤及所述检测步骤的时间的至少一部分时间重合。
10.如权利要求8所述的分析方法,其特征在于,
进行所述第二清洗步骤的时间和进行所述采取步骤及所述加工步骤的时间的至少一部分时间重合。
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