CN102406942A - 一种制备纳豆激酶环糊精包合物的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备纳豆激酶的环糊精包合物的方法,利用β-环糊精和羟丙基-β-环糊精作为包合材料制备纳豆激酶环糊精包合物。其特征在于它包括如下步骤:1)原料的选取:β-环糊精、羟丙基-β-环糊精和纳豆激酶(28000-30000IU/mg);2)纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊精和羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶,常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物;3)鉴定:通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定,测定包合率和包合比。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备纳豆激酶的环糊精包合物的方法,属于生物合成领域。
背景技术
纳豆激酶是纳豆在发酵过程中由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilis/natto)产生的一种丝氨酸蛋白酶,可水解纤维蛋白成小肽和氨基酸,和蚯蚓纤溶酶、蛇毒纤溶酶一样可直接溶解血栓,研究发现,纳豆激酶具有纤溶活性,能够预防和抑制血栓产生与扩增,是治疗血栓和预防血栓病的具有潜在药用价值的物质。
环糊精系淀粉经酶解环合后得到的由6个以上葡萄糖分子连结而成的环状低聚化合物,本身基本无毒、无刺激性,因具有环状中空圆筒状结构而呈现一系列特殊性质,具有疏水性的内腔和亲水性的外表,是药物制剂、食品工业、化妆品工业等方面应用较广的新型包合材料。药物经环糊精包合后,由于其“外壳”的屏障作用,可改善环境因素对药物的降解,包合后不仅有利于溶液型制剂的制备,而且可提高口服制剂的生物利用度,减少服药剂量,药物经包合后提高了其亲脂性,易于通过血脑屏障到达组织,因此提高了纳豆激酶对脑血栓的治疗效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种制备纳豆激酶的环糊精包合物的方法。该方法工艺简单,可提高纳豆激酶的生物利用度、亲脂性和疗效。
本发明的技术方案为:
1)原料的选取:β-环糊精、羟丙基-β-环糊精和纳豆激酶(酶活为28000-30000IU/mg)
2)纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊精和羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000-3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz和60hz,功率是600w。
3)通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定,包合率为92.15%,包合比为6∶1。
本发明的益处:
1、有利于溶液型制剂的制备,而且可提高口服制剂的生物利用度,减少服药剂量;
2、提高了其亲脂性,易于通过血脑屏障到达组织,因此提高了纳豆激酶对脑血栓的治疗
2、提高了其亲脂性,易于通过血脑屏障到达组织,因此提高了纳豆激酶对脑血栓的治疗效果;
3、提高了纳豆激酶的稳定性;
4、提高了纳豆激酶在体内的半衰期,提高了用药安全性,延长了纳豆激酶的作用时间,控制了溶栓速度以防止缺血再灌注损伤的发生。
本发明制备的包合物经动物实验表明:具有明显的溶栓效果,效果明显优于相同剂量的纳豆激酶。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明:
1、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
2、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
3、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为2000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
4、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为2000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
5、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
6、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
7、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
8、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
9、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为2000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
10、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为2000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
11、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率40hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
12、纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物。
所使用的超声条件是:频率60hz,功率是600w。
通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定。
Claims (5)
1.应用环糊精制备纳豆激酶包合物的方法,其特征在于包括如下制备过程:
1)原料的选取:β-环糊精、羟丙基-β-环糊精和纳豆激酶(酶活为28000-30000IU/mg)
2)纳豆激酶包合物的制备:分别配制饱和的β-环糊精和羟丙基-β-环糊***溶液和一定浓度的纳豆激酶(酶活为1000-3000IU/ml),常温下超声振荡,再搅拌1h,过滤,滤液冷冻干燥得纳豆激酶-β-环糊精或纳豆激酶-羟丙基-β-环糊精包合物;
3)鉴定:通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定,测定包合率和包合比。
2.根据权利要求1所述的制备纳豆激酶包合物的方法,其特征在于选择的包合材料是β-环糊精、羟丙基-β-环糊精。
3.根据权利要求1所述的制备纳豆激酶包合物的方法,其特征在于选择的纳豆激酶的酶活为28000-30000IU/mg。
4.根据权利要求1所述的制备纳豆激酶包合物的方法,其特征在于所使用的超声条件是:频率40hz和60hz,功率是600w。
5.根据权利要求1所述的制备纳豆激酶包合物的方法,其特征在于通过差示扫描量热法和X射线衍射法对包合物进行鉴定,包合率为92.15%,包合比为6∶1。
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120411 |