CN102397394A

CN102397394A - 一种清脑降压片的制备方法

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Publication number: CN102397394A
Application number: CN2011103813518A
Authority: CN
Inventors: 王峰; 王琳; 张发成
Original assignee: Suzhou Paiteng Biomedical Technology Co Ltd
Current assignee: Guangxi Shibiao Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2011-11-26
Filing date: 2011-11-26
Publication date: 2012-04-04
Anticipated expiration: 2031-11-26
Also published as: CN102397394B

Abstract

本发明涉及一种清脑降压片的制备方法，由下列步骤组成：取黄芩、槐米，微波萃取，聚酰胺层析柱纯化，得芩槐提取物；取夏枯草、牛膝、当归、地黄、丹参、水蛭、决明子、地龙，CO₂超临界萃取，得超临界萃取物；煅磁石、珍珠母、钩藤，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，压片，包薄膜衣。采用本发明制备的清脑降压片便于服用。

Description

一种清脑降压片的制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物的制备方法，尤其是一种中药的制备方法。

背景技术

清脑降压片是由黄芩、夏枯草、槐米、煅磁石、牛膝、当归、地黄、丹参、水蛭、钩藤、决明子、地龙、珍珠母作为原料药制成，收载于《中华人民共和国药典》2010版一部。平肝潜阳，用于肝阳上亢所致的眩晕，症见头晕、头痛、项强、血压偏高。

现有技术中，尚未有清脑降压片在利胆方面的报道。

现有技术中，清脑降压片的制备采用水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者日用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种清脑降压片的制备方法，使其安全有效，方便服用。

为了解决上述技术问题，本发明提出了下述技术方案。

取黄芩100g、槐米60g，粉碎，混合，加入1.6L的75%乙醇, 投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400-600W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到聚酰胺层析柱上，用60%乙醇洗脱,收集5倍量柱体积洗脱液,减压回收乙醇，浓缩并干燥，得芩槐提取物，备用；取夏枯草60g、牛膝60g、当归100g、地黄40g、丹参40g、水蛭20g、决明子100g、地龙20g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为1-3%，萃取压力20-30MPa，温度50-70℃, CO₂流量1-3ml/g生药·min，萃取时间120-140min，得超临界萃取物，备用；取煅磁石60g、钩藤60g、珍珠母40g，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制粒，加入硬酯酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0.33g。

黄芩、槐米微波萃取功率500W。

聚酰胺选自锦纶66（聚已二酰已二胺）、锦纶6（聚已内酰胺）中的一种。

CO₂超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2%。

CO₂超临界萃取的萃取压力25MPa，温度60℃, CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间130min。

采用上述技术方案制备的清脑降压片，其作为制备利胆药物的应用。

现有技术中，清脑降压片每次需服用4片（相当于3.04g药材），而采用本发明制备而成的清脑降压片每次仅需服用1片（相当于3.04g药材），在降压药理活性相似的情况下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。

试验一不同方法制备的清脑降压片中黄芩苷含量的比较。

1、仪器及试药

清脑降压片（超临界法，以下简称Q-LJ，下同）：按实施例3方法制备。

清脑降压片（传统法Q-CT，下同），按《中华人民共和国药典》2010版一部方法制备，包薄膜衣。

Agilent 1200高效液相色谱仪；METTLER AE240电子分析天平。

黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）。

2、方法

色谱条件 Kromasi C18色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)；甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)流动相；流速1.0mL·min^－1，检测波长278nm。精密量取对照品溶液、供试品溶液各10μL。

溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的对照品溶液。分别取供品10片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.7g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率220W，频率50kHz）60分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3、结果

试验结果见表1，结果表明采用本发明制备的清脑降压片中黄芩苷的含量(13.9mg/片 )是采用传统法(3.4mg/片)的4.1倍。

表1 不同方法制备的清脑降压片中黄芩苷的含量

样品	含量（mg/片）
		Q-LJ	13.9
Q-CT	3.4

试验二不同方法制备的清脑降压片药效学比较。

1、对自发性高血压大鼠血压的影响

1.1材料

药品清脑降压片（超临界法，以下简称Q-LJ）：按实施例3方法制备。

清脑降压片（传统法，简称Q-CT），按《中华人民共和国药典》2010版一部方法制备，包薄膜衣。

动物自发性高血压大鼠(SHR，上海斯莱克实验动物有限责任公司) , 体重180g-220g , 清醒尾动脉收缩压≥160mmHg，雌雄兼用。

仪器小型动物血压测量仪(淮北正华生物仪器设备有限公司) 、八道生理记录仪(RM-6000，日本)。

数据处理数据以mean±s表示，用SPSS11.0软件进行分析。记量资料用单因素方差分析进行统计学显著性分析，计数资料用卡方检验。

1.2方法与结果

取SHR 若干只，体重180g～220g。用间接测压法测其基础血压，按测得的基础血压进行分组, 以保证每组之间平均血压无显著差异，每组10 只, 雌雄兼用。空白对照组给予相应量的生理盐水；Q-CT组（给药剂量0.32g/kg，相当于人临床用量，即9.12g生药/日）；Q-LJ低、中、高剂量组（给药剂量分别为0.04 g/kg、0.08 g/kg、0.16g/kg，其中中剂量组相当于人临床用量，即9.12g生药/日）。将SHR用50mg/kg戊巴妥钠麻醉, 固定, 切开颈部皮肤, 分离气管并插管, 分离右侧颈总动脉并插管, 用直接测压法通过八道生理记录仪测定血压和心率, 记录动脉血压。分离股静脉并插管补充液体，切开上腹，分离十二指肠，留作给药，手术完毕后将大鼠稳定20min，开始记录给药前血压。然后进行十二指肠给药, 并观察、记录给药后10 、20 、30 、60 、90 、120 、240、360min时的血压变化(以上实验在室温25℃中进行) 。

对SHR大鼠动脉收缩压的影响试验结果（见表2）表明，给药前，各组与空白组相比，无差异。给药后，与空白组相比，Q-LJ高剂量组从20min开始降低SHR大鼠动脉收缩压，并维持至6h以后，作用显著（P<0.05、0.01）；与空白组相比，Q-LJ低、中剂量组，Q-CT组从30min开始降低SHR大鼠动脉收缩压，并维持至6h以后，作用显著（P<0.05、0.01）。Q-CT组与Q-LJ中剂量组相比无显著性差异（P>0.05），表明在相应剂量下（均相当于人临床用量），两者降压作用相当。

表2 不同方法制备的清脑降压片对SHR大鼠动脉收缩压的影响(n=10，单位pKA)

Figure 2011103813518100002DEST_PATH_IMAGE001

与空白组比较：*P<0.05 ，**P<0.01。

对SHR大鼠动脉舒张压的影响试验结果（见表3）表明，给药前，各组与空白组相比，无差异。给药后，与空白组相比，Q-LJ高剂量组从20min开始降低SHR大鼠动脉舒张压，并维持至6h以后，作用显著（P<0.05、0.01）；与空白组相比，Q-LJ低、中剂量组，Q-CT组从30min开始降低SHR大鼠动脉舒张压，并维持至6h以后，作用显著（P<0.05、0.01）。Q-CT组与Q-LJ中剂量组相比无显著性差异（P>0.05），表明在相应剂量下（均相当于人临床用量），两者降压作用相当。

表3 不同方法制备的清脑降压片对SHR大鼠动脉舒张压的影响(n=10，单位pKA)

Figure 2011103813518100002DEST_PATH_IMAGE002

2、对大鼠胆汁分泌及胆红素的影响

2.1材料

动物 SD大鼠。由上海斯莱克实验动物有限公司提供。

数据及统计数据以mean±s表示，用SPSS11.0软件进行分析。记量资料用单因素方差分析进行统计学显著性分析，计数资料用卡方检验。

2.2 方法和结果

雄性SD大鼠，体重180-220克, 随机均分为5组：空白对照组；Q-CT组（给药剂量0.32g/kg，相当于人临床用量，即9.12g生药/日）；Q-LJ低、中、高剂量组（给药剂量分别为0.04 g/kg、0.08 g/kg、0.16g/kg，其中中剂量组相当于人临床用量，即9.12g生药/日）。禁食12小时(自由饮水)后，腹腔注射乌坦(1g/kg)麻醉，背位固定，于剑突下3cm开腹，分离胆总管，结扎近十二指肠端，在胆总管上作V形剪口，***胆汁引流管见淡黄色胆汁流出后，固定引流管，关闭腹腔，稳定0.5小时后先收集0.5小时胆汁为药前对照。尔后各组分别经十二指肠给予不同药物，分别收集药后30、60、120、180分钟内胆汁流量。收集的各动物各时段胆汁合并，测定胆红素含量。

结果（见表4）表明，与空白对照组相比，Q-LJ低、中、高剂量组均能显著促进大鼠胆汁的分泌量（p<0.05、0.01），增加胆红素含量（p<0.05、0.01）。表明利胆素片具有明显的利胆作用。Q-CT组与Q-LJ中剂量相比，胆汁分泌量、胆红素含量均显著性差异（p<0.05），表明在相应剂量下（相当于人临床用量，即6.3g生药/日），采用本发明制备的清脑降压胶囊在利胆方面的药理活性优于采用传统方法制备者。

表4不同方法制备的清脑降压片对大鼠胆汁分泌及胆红素的影响（n=6）

Figure 2011103813518100002DEST_PATH_IMAGE003

注：与空白对照组相比，*p<0.05、**p<0.01；与Q-LJ中剂量相比，^△p<0.05。

上述研究表明，采用本发明制备的清脑降压片，有效成分含量是传统法制备的清脑降压片的4.3倍。在服用量减少3/4的情况下，两者在降压方面的药理活性相当。而前者在利胆方面的活性明显优于后者。前者可以在制备利胆药物中应用。

为了更好的说明本发明的技术方案，下文将对其具体实施方式做进一步的表述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取黄芩100g、槐米60g，粉碎，混合，加入1.6L的75%乙醇, 投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到锦纶6聚酰胺层析柱上，用60%乙醇洗脱,收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得芩槐提取物，备用；取夏枯草60g、牛膝60g、当归100g、地黄40g、丹参40g、水蛭20g、决明子100g、地龙20g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为1%，萃取压力20MPa，温度50℃, CO₂流量1ml/g生药·min，萃取时间120min，得超临界萃取物，备用；取煅磁石60g、钩藤60g、珍珠母40g，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制粒，加入硬酯酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0.33g。

经检测，成品中黄芩苷的含量13.3mg/片。

成品抗高血压的药理作用见表5。

表5 对SHR大鼠动脉收缩压的影响(n=10，单位pKA)

组别	剂量g/Kg	给药前	药后30min
				空白组	-	31.3±2.6	31.5±2.1
实施例1	0.08	31.5±2.5	27.6±2.4**

与空白组比较：*P<0.05 ，**P<0.01。

实施例2

取黄芩100g、槐米60g，粉碎，混合，加入1.6L的75%乙醇, 投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到锦纶6聚酰胺层析柱上，用60%乙醇洗脱,收集5倍量柱体积洗脱液,减压回收乙醇，浓缩并干燥，得芩槐提取物，备用；取夏枯草60g、牛膝60g、当归100g、地黄40g、丹参40g、水蛭20g、决明子100g、地龙20g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为3%，萃取压力30MPa，温度70℃, CO₂流量3ml/g生药·min，萃取时间140min，得超临界萃取物，备用；取煅磁石60g、钩藤60g、珍珠母40g，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制粒，加入硬酯酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0.33g。

经检测，成品中成品中黄芩苷的含量13.2mg/片。

成品抗高血压的药理作用见表6。

表6 对SHR大鼠动脉收缩压的影响(n=10，单位pKA)

组别	剂量g/Kg	给药前	药后30min
				空白组	-	31.3±2.6	31.5±2.1
实施例2	0.08	31.6±2.4	27.4±2.5**

与空白组比较：*P<0.05 ，**P<0.01。

实施例3

取黄芩100g、槐米60g，粉碎，混合，加入1.6L的75%乙醇, 投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到锦纶66聚酰胺层析柱上，用60%乙醇洗脱,收集5倍量柱体积洗脱液,减压回收乙醇，浓缩并干燥，得芩槐提取物，备用；取夏枯草60g、牛膝60g、当归100g、地黄40g、丹参40g、水蛭20g、决明子100g、地龙20g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2%，萃取压力25MPa，温度60℃, CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间130min，得超临界萃取物，备用；取煅磁石60g、钩藤60g、珍珠母40g，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制粒，加入硬酯酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0.33g。

Claims

1.一种清脑降压片的制备方法，由黄芩100g、夏枯草60g、槐米60g、煅磁石60g、牛膝60g、当归100g、地黄40g、丹参40g、水蛭20g、钩藤60g、决明子100g、地龙20g、珍珠母40g作为原料药制成，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取黄芩、槐米，粉碎，混合，加入1.6L的75%乙醇, 投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400-600W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到聚酰胺层析柱上，用60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得芩槐提取物，备用；取夏枯草、牛膝、当归、地黄、丹参、水蛭、决明子、地龙，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为1-3%，萃取压力20-30MPa，温度50-70℃, CO₂流量1-3ml/g生药·min，萃取时间120-140min，得超临界萃取物，备用；取煅磁石、珍珠母、钩藤，粉碎成细粉，混匀，加入上述芩槐提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制粒，加入硬酯酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0.33g。

2.根据权利要求1所述一种清脑降压片的制备方法，其特征在于所述黄芩、槐米微波萃取功率500W。

3.根据权利要求1所述一种清脑降压片的制备方法，其特征在于所述聚酰胺选自锦纶66、锦纶6中的一种。

4.根据权利要求1所述一种清脑降压片的制备方法，其特征在于所述CO₂超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2%。

5.根据权利要求1所述一种清脑降压片的制备方法，其特征在于所述CO₂超临界萃取的萃取压力25MPa，温度60℃, CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间130min。