CN102352305A - 一种***优选微流控装置及优选***方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种***优选微流控装置,包括设有缓冲液加样池、样本检测池和样本收集池的载片,以及支撑载片的支撑基片,缓冲液加样池和样本检测池间设有缓冲液连接通道,样本检测池内设有样本作用池,样本检测池和样本作用池间设有一条或者一条以上筛选通道,至少有一条筛选通道设于样本检测池与样本收集池连接的一侧,样本检测池和样本收集池间设有样本收集通道。本发明还公开了一种***优选的方法。本发明通过在样本作用池模拟***与***相互作用的生理状态,利用***的粘滞性,自然筛选出高活力、直线运动速度快的***,避免了离心处理对***的损伤。本发明可作为辅助生殖技术的工具。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于***优选的装置,还涉及一种优选***的方法。
背景技术
研究表明,***不育症的发病率有逐年上升的趋势,在中国***不育症的发病率平均为7%-10%,其中男性因素占到30%,***质量是是影响受孕的关键因素之一。辅助生殖技术为解决这一医学问题提供了一条途径。
然而,实施各种辅助生殖技术的前提是需要从***中获得高质量的***,并且需要将***中的白细胞、上皮细胞等与高质量***分离。判断高质量***的主要要素是***的活力,***的直线运动速度,***的正常形态率以及***的DNA损伤率。目前,常用的***优选方法包括上游法,密度梯度离心法。上游法和密度梯度离心法单纯是依据***的活力或者密度加以分选。上游法和密度梯度离心法虽然可以分选出活力好的***,但是不能模拟生理状态下的***分选过程,并分选过程时间长,需要离心处理,过多的离心步骤易产生氧自由基,导致***DNA过氧化损伤,引起***质量降低,影响辅助生殖技术的成功率。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种***优选装置,其自然筛选出高质量的***,减少在筛选过程中对***DNA损伤。
本发明还提供了上述***优选装置的使用方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种***优选微流控装置,包括载片和支撑载片的基片,在载片设有缓冲液加样池、样本检测池和样本收集池,所述缓冲液加样池和样本检测池间设有缓冲液连接通道,所述样本检测池内设有样本作用池,所述样本检测池和样本作用池间设有一条或者一条以上筛选通道,至少有一条筛选通道设于样本检测池与样本收集池连接的一侧,所述样本检测池和样本收集池间设有样本收集通道。
进一步作为本发明技术方案的改进,所述载片与基片通过封接固定。
进一步作为本发明技术方案的改进,所述载片由聚二甲基硅氧烷材料制成,基片由玻璃或石英玻片或聚二甲基硅氧烷材料制成。
本发明还提供一种使用***优选微流控装置实现优选***的方法,包括以下步骤:
1) 准备***优选微流控装置;
2) 冲洗所述的筛选通道、缓冲液连接通道和样本收集通道,吸尽所述缓冲液加样池、样本检测池、样本作用池和样本收集池中的液体,然后用缓冲液充满上述通道。
3) 先在样本作用池加入***,后加入***,在37℃的条件下恒温3至8分钟后,对样本检测池中的***进行活力检测,15至25分钟后在缓冲液加样池中加入一定量的缓冲液,然后吸取样本收集池中的收集液。
本发明的有益效果:本发明通过在样本作用池加入***和处于***期育龄妇女的***,模拟***与***相互作用的生理状态,利用***的粘滞性将活力稍差的***以及***中的白细胞上皮细胞滞留在样本作用池中,筛选出高活力、直线运动速度快的***,避免了离心处理对***的损伤,提高***的质量。本发明可作为辅助生殖技术的工具。
附图说明
图1是本发明中的***优选微流控装置结构示意图。
具体实施方式
参照图1,一种***优选微流控装置,包括载片8和支撑载片8的基片9,在载片8设有缓冲液加样池4、样本检测池2和样本收集池5,缓冲液加样池4和样本检测池2间设有缓冲液连接通道6,样本检测池2内部设有样本作用池1,样本检测池2和样本收集池5间设有样本收集通道7。样本检测池2和样本作用池1间设有一条或者一条以上筛选通道3,至少有一条筛选通道3设于样本检测池2与样本收集池5连接的一侧。载片8由聚二甲基硅氧烷材料制成,基片9由玻璃或石英玻片或聚二甲基硅氧烷材料制成,载片8和基片9通过封接方式固定。当然载片8和支撑基片9也可由其它高分子聚合物材料制成而不影响本发明的保护范围。
参照图1,本发明的一种***优选微流控装置优选的一个实施方式,在载片表面上刻蚀圆形的样本作用池1、环状的样本检测池2、筛选通道3、缓冲液加样池4、样本收集池5、缓冲液连接通道6和样本收集通道7。样本作用池1的直径为5毫米,环状的样本检测池2的宽度为4毫米,样本作用池1与样本检测池2之间有7条筛选通道3,筛选通道3的宽度为0.02毫米,深度为0.02毫米,缓冲液连接通道6和样本收集通道7的深度也为0.02毫米。
本发明中样本作用池1、样本检测池2、筛选通道3、缓冲液加样池4、样本收集池5、缓冲液连接通道6和样本收集通道7的直径、宽度或深度也可以为其他数值而不影响本发明的保护范围。
当然,本发明***优选微流控装置中样本作用池1和样本检测池2也可以是矩形或者其他形状而不影响发明的保护范围。
本发明使用时,冲洗所述的筛选通道3、缓冲液连接通道6和样本收集通道7,吸尽所述缓冲液加样池4、样本检测池2、样本作用池1和样本收集池5中的液体,然后用缓冲液充满上述通道,在样本作用池1中加入处于***期育龄妇女的***,然后在样本作用池1上加入***,将***优选微流控装置放入37℃二氧化碳温箱5分钟。由于在生理状态下***与***的相互作用,利用***的无规则游动,活力好的***会通过7条筛选通道3游到样本检测池2中。在样本检测池2中通过计算机辅助***分析***对优选出的***进行活力分析。20分钟后,在缓冲液加样池4中添加一定的缓冲液,由于静水压力的作用下,位于样本检测池2中的***会被液流带到样本收集池5中,吸取样本收集池5中的收集液,这样完成高活力的***的筛选和收集。
当然,本发明创造并不局限于上述实施方式,熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可作出等同变形或替换,这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
Claims (4)
1.一种***优选微流控装置,其特征在于:包括载片(8)和支撑载片(8)的基片(9),在载片(8)设有缓冲液加样池(4)、样本检测池(2)和样本收集池(5),所述缓冲液加样池(4)和样本检测池(2)间设有缓冲液连接通道(6),所述样本检测池(2)内设有样本作用池(1),所述样本检测池(2)和样本作用池(1)间设有一条或者一条以上筛选通道(3),至少有一条筛选通道(3)设于样本检测池(2)与样本收集池(5)连接的一侧,所述样本检测池(2)和样本收集池(5)间设有样本收集通道(7)。
2.根据权利要求1所述的***优选微流控装置,其特征在于:所述载片(8)与基片(9)通过封接固定。
3.根据权利要求1所述的***优选微流控装置,其特征在于:所述载片(8)由聚二甲基硅氧烷材料制成,基片(9)由玻璃或石英玻片或聚二甲基硅氧烷材料制成。
4.一种优选***方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)准备权利要求1至3任一项所述的***优选微流控装置;
2)冲洗所述的筛选通道(3)、缓冲液连接通道(6)和样本收集通道(7),吸尽所述缓冲液加样池(4)、样本检测池(2)、样本作用池(1)和样本收集池(5)中的液体,然后用缓冲液充满上述通道;
3)先在样本作用池(1)加入***,后加入***,在37℃的条件下恒温3至8分钟后,对样本检测池(2)中的***进行活力检测,15至25分钟后在缓冲液加样池(4)中加入一定量的缓冲液,然后吸取样本收集池(5)中的收集液。
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