CN102327488A - 铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及铁皮石斛的新用途,旨在提供铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用。本发明揭示了铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用,和基于铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物的制备方法。本发明的铁皮枫斗颗粒与养胃舒颗粒对N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)所引起的肠化生均有一定的逆转作用,但以本发明的铁皮枫斗颗粒的效果更为显著。结果表明,掺有西洋参的铁皮枫斗颗粒对临床CAG的肠化生具有潜在的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及铁皮石斛的新的应用,尤其涉及铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用。
背景技术
慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)是一种常见病,多发病,以胃黏膜上皮和腺体萎缩,黏膜变薄,黏膜下肌层增厚及肠化生、不典型性增生为特点,病程迁延,常反复发作,严重影响患者的工作和身心健康。更为重要的是,由于CAG肠化生和不典型性增生极易进一步发展成胃癌,因此,于1978年世界卫生组织(WHO)将CAG的胃黏膜萎缩、肠化生和不典型性增生列为胃癌的癌前病变。据统计,在我国CAG的发病率在7.2%以上,居各种胃病之首,发展成胃癌的占2%-8%。目前,全世界胃癌的发病率和死亡率居恶性肿瘤的第二位,居消化道肿瘤的第一位。
肠化生(肠上皮化生)是指胃粘膜上皮细胞被肠型上皮细胞所代替,即胃粘膜中出现类似小肠或大肠粘膜的上皮细胞,其是胃粘膜常见病变,见于多种慢性胃病。肠上皮化生细胞来自胃固有腺体颈部未分化细胞,这部分细胞是增殖中心,具有向胃及肠上皮细胞分化的潜能。正常时,它不断分化成胃型上皮细胞,以补充衰老脱落的表面上皮;病理情况下,它可分化为肠型上皮细胞,形成肠化生。近来有人进一步研究肠化灶的组织学始发部位主要在胃小沟,微小的肠化灶以胃小沟为中心,可以不同程度地向周围胃小区发展为小灶及大片状肠化灶。
通过病理学的研究,目前对肠上皮化生作了一系列的分类,按化生上皮功能来分肠上皮化生,可分为完全性或不完全性肠上皮化生。前者与小肠粘膜吸收细胞相似,有刷状缘,不分泌粘液,具有潘氏细胞、杯状细胞和吸收细胞,含蔗糖酶、海藻糖酶及亮氨酸基肽酶和碱性磷酸酶;而不完全性肠上皮化生刷状缘不明显,微绒毛发育不全,胞浆内有粘液分泌颗粒,含蔗糖酶,但氨基肽酶和碱性磷酸酶活性低,无海藻糖酶。
通过粘液组化染色把肠上皮化生分为小肠型化生(即完全性肠上皮化生)和结肠型化生(即不完全性肠上皮化生)。小肠型化生,其上皮分化好,是一种常见的粘膜病变,广泛见于各种良性胃病(57.8%),尤其多见于慢性胃炎,随着炎症的发展化生亦加重,故认为小肠型化生可能属于炎症反应的性质;而结肠型化生,其上皮分化差,在良性胃病中检出率很低(11.3%),但在肠型胃癌旁粘膜中检出率很高(88.2%),说明结肠型化生与胃癌的发生有密切关系。一般结肠型化生发生的年龄较小肠型化生为晚,而且均位于较重的小肠化生灶中。两型化生可混合存在,因此结肠型化生可能是在小肠型化生逐渐加重的基础上发生的。
胃黏膜肠化生和不典型性增生是胃癌的癌前病变,也是CAG最为严重的不良预期。因此,研究开发逆转胃黏膜肠化生和不典型性增生已成为CAG研究之中最为关切的重点。近年来研究发现叶酸(folic acid)对胃黏膜萎缩、胃黏膜肠化生和不典型性增生有一定的改善和逆转作用,但作用不强;维甲酸(retinoic acid,RA)是治疗白血病的有效药物,能有效促进血液异常癌细胞的分化。有研究报道,RA可使胃黏膜上皮细胞发生正常凋亡,逆转或阻止胃癌的发生。RA以及诱导分化剂丁酸钠对于实验性大鼠胃黏膜癌前病变有阻断作用。以上所有逆转胃黏膜肠化生和不典型性增生尚无大规模临床验证报道,需进一步深入研究。
近十年来,中医从辨证、治则、方药等方面对CAG进行了广泛而卓有成效的研究。中医药通过保护胃黏膜,改善胃黏膜血液循环,增强胃黏膜上皮细胞的再生和修复功能,不仅可以逆转萎缩的腺体,而且可使胃黏膜肠化生及异型增生逆转。如三九胃泰、胃复春等。但大多中成药的组方以理气健脾、消导药居多,特别是对胃黏膜肠化生有较好疗效的有待研究发现。
综上所述,如何有效逆转胃黏膜肠化和不典型性增生,降低CAG向胃癌转化,将是该领域未来重要研究方向。
发明内容
本发明要解决的问题是,克服现有技术中的不足,提供一种铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用。为解决技术问题,本发明的解决方案是:
提供一种铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用。
本发明所述的药物是掺有西洋参的铁皮枫斗颗粒,该药物通过下述方法制备获得:
(1)将铁皮石斛炮制为铁皮枫斗后与西洋参备用,备用的铁皮枫斗与西洋参重量比为0.67~1.50∶1;
(2)将铁皮枫斗用30倍温水浸泡半小时后热提取3次,每次提取8小时,每次提取后均将提取液离心、过滤,合并3次滤液得提取液;将提取液减压浓缩为60~70℃下时相对密度为1.00~1.20的浓缩液,备用;
(3)将西洋参用70%乙醇回流提取3次,每次3小时,合并提取液;减压回收乙醇,减压浓缩为20~25℃下时相对密度为1.00~1.15的浓缩液,备用;
(4)将上述铁皮枫斗提取浓缩液和西洋参提取浓缩液合并、混匀,将葡萄糖置于沸腾床上,喷雾制粒,得到铁皮枫斗颗粒;所述葡萄糖为辅料,其在铁皮枫斗颗粒中的含量为药学上可接受的辅料用量。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明的铁皮枫斗颗粒与养胃舒颗粒对N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)所引起的肠化生均有一定的逆转作用,但以本发明的铁皮枫斗颗粒的效果更为显著。结果表明,掺有西洋参的铁皮枫斗颗粒对临床CAG的肠化生具有潜在的应用前景。
具体实施方式
石斛为兰科植物,它分铁皮、金钗、马鞭、黄草、铜皮等几十种。同为石斛,同科同属但不同种,其药效和市场价格也往往有着天壤之别。石斛中以铁皮石斛最为稀有名贵,它因外表呈深绿色或铁青色而得名,中药界有“北有人参,南有枫斗”的说法。谚语称:“野山人参壮阳气,像太阳;铁皮石斛滋***,似月亮”。
新鲜石斛不能久存,经整理、烘焙、加箍、干燥四个步骤将其炮制成螺旋状的干品,即枫斗。铁皮石斛(其幼茎粗壮、粘汁浓厚、纤维较少)加工后被称为铁皮枫斗。铁皮枫斗的外观饱满、坚实,外表光亮、耐泡,由于铁皮石斛多糖分子量较其它品种的石斛高得多,因而滋阴效果最佳,价格也最贵。
【实施例1】铁皮枫斗颗粒(P)的制备
(1)按处方比例称取铁皮枫斗1670g,西洋参1330g,备用。
(2)将铁皮枫斗药材用30倍温水浸泡半小时,热提取3次,每次提取8小时。每次提取后提取液离心、过滤,合并3次滤液,得提取液。提取液减压浓缩,浓缩至相对密度为1.00-1.20(60-70℃)的浓缩液,备用。
(3)将西洋参置于多功能提取罐中,用70%乙醇回流提取3次,每次3小时,合并提取液,减压回收乙醇,减压浓缩至相对密度为1.00-1.15(20-25℃)浓缩液,备用。
(4)将上述铁皮枫斗提取浓缩液和西洋参提取浓缩液合并,混匀,将适量葡萄糖置于沸腾床上,喷雾制粒,制成1000g颗粒,即得。
【实施例2】铁皮枫斗颗粒(L)的制备
(1)按处方比例称取铁皮枫斗1200g,西洋参1800g,备用。
(2)将铁皮枫斗药材用30倍温水浸泡半小时,热提取3次,每次提取8小时。每次提取后提取液离心、过滤,合并3次滤液,得提取液。提取液减压浓缩,浓缩至相对密度为1.00-1.20(60-70℃)的浓缩液,备用。
(3)将西洋参置于多功能提取罐中,用70%乙醇回流提取3次,每次3小时,合并提取液,减压回收乙醇,减压浓缩至相对密度为1.00-1.15(20-25℃)浓缩液,备用。
(4)将上述铁皮枫斗提取浓缩液和西洋参提取浓缩液合并,混匀,将适量葡萄糖置于沸腾床上,喷雾制粒,制成1000g颗粒,即得。
【实施例3】铁皮枫斗颗粒(H)的制备
(1)按处方比例称取铁皮枫斗1800g,西洋参1200g,备用。
(2)将铁皮枫斗药材用30倍温水浸泡半小时,热提取3次,每次提取8小时。每次提取后提取液离心、过滤,合并3次滤液,得提取液。提取液减压浓缩,浓缩至相对密度为1.00-1.20(60-70℃)的浓缩液,备用。
(3)将西洋参置于多功能提取罐中,用70%乙醇回流提取3次,每次3小时,合并提取液,减压回收乙醇,减压浓缩至相对密度为1.00-1.15(20-25℃)浓缩液,备用。
(4)将上述铁皮枫斗提取浓缩液和西洋参提取浓缩液合并,混匀,将适量葡萄糖置于沸腾床上,喷雾制粒,制成1000g颗粒,即得。
以下通过试验实施例证明本发明所述药物铁皮枫斗颗粒在治疗肠化生中的应用,这些实施例包括临床前动物药效学试验和临床疗效观察试验。
【试验例1】铁皮枫斗颗粒对动物肠化生影响的实验研究:
(1)实验样品:铁皮枫斗颗粒(P)、铁皮枫斗颗粒(L)、铁皮枫斗颗粒(H)由浙江天皇药业有限公司提供;养胃舒颗粒合肥神鹿双鹤药业有限公司产品;N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)东京化成工业株式会社产品。
(2)实验动物:Wistar大鼠,上海史莱克动物中心提供。
(3)实验方法:
分组:实验用6周龄的雌雄各半Wistar大鼠160只,体重180-200g,随机分正常对照组,模型组,铁皮枫斗颗粒(P)高、中、低剂量组,铁皮枫斗颗粒(L)组,铁皮枫斗颗粒(H),养胃舒颗粒对照组,共8组,每组20只。
造模:除正常对照组外,在饮水中加入MNNG。每星期先用蒸馏水配成1g/L浓度的储存液,避光冷藏保存。同时配成167ug/ml蒸馏水浓度的饮用液,装入动物专用饮水瓶内,瓶外用黑色塑料袋包裹,每日更换,供大鼠自由饮用。2星期后胃黏膜可出现糜烂,炎症变化、萎缩和异型增生等变化,逐渐加重,18周可成模。
治疗:出现肠化生不典型性增生后开始口服给药,每天1次,连续给药10周。实验结束后处死实验大鼠,取胃,包埋、切片,常规HE染色和AB染色。
检测指标:给药治疗10周后处死动物,取胃,并沿胃大弯剪开,用10%甲醛固定,然后沿胃长轴剪出6条宽2-4mm的组织,石蜡包埋,切片,常规HE染色和AB/PSA粘液组化染色,光镜下观察肠化腺体数量及粘液分泌情况。
病理诊断与分级参照全国胃癌研究协作组病理组制定的标准进行分析和统计。胃粘膜肠上皮化生腺体计量分析方法:每例胃标本切出8块组织块,这8块组织块各制备1张组织切片,行AB/PSA粘液组化染色,光镜下对每张片组织中肠化腺体进行计数,该8张切片上肠化的腺体总数(幽门及胃底腺分别计数)即为该例胃标本肠化的腺体总数。统计分析方法:计数资料用检验x2分析,计量资料用t检验分析。
(4)结果:
肠上皮化生分级诊断标准:分轻度、中度和重度三级。视野中肠腺化生在1/3以下者为轻度;1/3以上至2/3者为中度;2/3以上者为重度。
异型增生分级诊断标准:亦分轻度、中度和重度三级。轻度为肠管的形状不规则,排列稍有紊乱和疏密不均,主要分布在粘膜浅表部位;中度为肠腺管的结构不规则,形状大小不整,呈分支状,多达粘膜深层,并在深层常见囊状扩张的腺管;重度为腺管的结构紊乱,腺管的形状及大小不整,常常达到粘膜全层。
铁皮枫斗颗粒对胃粘膜肠化生逆转作用的影响:每组动物于造模18周,各组取3只动物处死,行病理检查,每组这3只动物的胃组织,除正常对照组、铁皮枫斗颗粒(H)和养胃舒颗粒组各有1例未出现肠化生外,其余各动物胃组织均出现不同程度肠化生;在整个实验过程中,正常组于实验第5周死亡1只动物;模型对照组于实验第10、14周各死亡1只,第21周死亡2只,第26周死亡1只;铁皮枫斗颗粒(P)高剂量组于实验第7、16、25周各死亡1只;铁皮枫斗颗粒(P)中剂量组于实验第12、15周各死亡1只;铁皮枫斗颗粒(P)低剂量组于实验第8、14、19周各死亡1只;铁皮枫斗颗粒(L)组于实验第12、13、22、26周各死亡1只;铁皮枫斗颗粒(H)组于实验第9、11、23周各死亡1只;养胃舒颗粒组于实验第6、10、21、23、27周各死亡1只;实验结束时,各组存活动物数及肠化生逆转率见表1。
表1.各处理组对胃粘膜肠化生的影响
注:*与模型组比较,p<0.05;**与模型组比较,p<0.01。
研究结果显示,在本研究中,包括铁皮枫斗颗粒各种配方在内的所有治疗均能有效逆转MNNG所引起的胃粘膜肠化生及异型增生,其中以铁皮枫斗颗粒(P)高剂量组效果最为显著(p<0.01)。
对胃粘膜肠化生腺体数量的影响:
研究发现,经10周治疗后,铁皮枫斗颗粒各种配方均能显著减少大鼠胃幽门部、胃底部由MNNG所引起的肠化腺体数,而且该作用与剂量呈一定的相关性。养胃舒颗粒也有相似作用,结果见表2。
表2.各处理组对胃粘膜肠化生腺体数量的影响
注:*与模型组比较,p<0.05;**与模型组比较,p<0.01。
(5)结论:各种配方的铁皮枫斗颗粒与养胃舒颗粒对MNNG所引起的肠化生均有一定的逆转作用,其中,以铁皮枫斗颗粒优化配方的效果最为显著。结果表明,铁皮枫斗颗粒系列产品对临床CAG的肠化生具有潜在的应用前景。
【试验例2】铁皮枫斗颗粒对肠化生临床疗效观察:
1.试验方法:
1.1实验设计及分组:共收集气阴两虚证CAG受试者80例,采用随机平行对照,将收集病例随机分为:铁皮枫斗颗粒组40例,对照组(养胃舒颗粒组)40例。
1.2诊断标准:
1.2.1气阴两虚证诊断标准:
参照《中医临床诊疗术语》第3页(国家标准GB/T16751.2-1997);
1.2.2CAG诊断标准、病情分度、分级标准:
参照《中药新药临床研究指导原则》2002年5月第1版125~127页。
1.3治疗方案:
铁皮枫斗颗粒组服用铁皮枫斗颗粒:3g/包,2包/次,3次/日,温开水冲服;对照组服用养胃舒颗粒:10g/袋,1袋/次,2次/日,温开水吞服。治疗观察12周为一疗程,疗程内每2周随诊1次,做好记录和必要的检查。治疗期间,禁止使用影响疗效评价的药物。
1.4观察指标:
行胃镜检查、病理组织学检查,观察比较治疗前后肠化生和胃粘膜萎缩变化等。
1.5统计分析:计数资料用X2检验。计量资料两组比较用t检验。等级资料用Ridit检验。
2、结果:
2.1对肠化生临床疗效:
在胃镜活组织检查中,治疗前,铁皮枫斗颗粒组38例中有17例伴有肠化生,肠化生比例占44.76%;治疗12周后发现,铁皮枫斗颗粒组CAG伴有肠化生的病例仅有9例,逆转率47.06%,而养胃舒颗粒对照组逆转率仅为8.33%,铁皮枫斗颗粒组显著优于对照组(p<0.05),结果见表3。
表3.铁皮枫斗颗粒及养胃舒颗粒对CAG肠化生临床疗效比较
经X2检验,铁皮枫斗颗粒组对CAG肠化生临床疗效显著优于养胃舒颗粒对照组(p<0.05)。
2.2对CAG胃粘膜萎缩改善情况:胃镜复查粘膜慢性炎症明显好转达轻度,病理组织学检查证实腺体萎缩、肠上皮化生和异型增生恢复正常和消失;胃镜复查粘膜慢性炎症好转,病理组织学检查证实腺体萎缩、肠上皮化生和异型增生恢复正常或减轻2个级度;
胃镜复查粘膜病变范围缩小1/2以上,病理组织学检查证实慢性炎症减轻1个级度以上,腺体萎缩、肠上皮化生和异型增生减轻。以上情况均定义为胃粘膜萎缩改善。
12周治疗后胃镜检查发现,铁皮枫斗颗粒对CAG的粘膜萎缩改善率达57.89%,养胃舒颗粒对照组为20.51%;活组织病理检查发现,铁皮枫斗颗粒对CAG的粘膜萎缩改善率达65.79%,养胃舒颗粒对照组为46.15%;铁皮枫斗颗粒组显著优于对照组(p<0.05)结果见表4。
表4.铁皮枫斗颗粒与养胃舒颗粒对CAG胃粘膜萎缩临床疗效比较
经X2检验,铁皮枫斗颗粒组对CAG胃粘膜萎缩临床改善率显著高于养胃舒颗粒对照组(p<0.05)。
3、结论
铁皮枫斗颗粒对CAG肠化生有逆转作用,逆转率达47.06%,且疗效亦明显优于养胃舒颗粒。
Claims (2)
1.铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛在制备治疗肠化生的药物中的应用,其特征在于,所述的药物是掺有西洋参的铁皮枫斗颗粒,该药物通过下述方法制备获得:
(1)将铁皮石斛炮制为铁皮枫斗后与西洋参备用,备用的铁皮枫斗与西洋参重量比为0.67~1.50∶1;
(2)将铁皮枫斗用30倍温水浸泡半小时后热提取3次,每次提取8小时,每次提取后均将提取液离心、过滤,合并3次滤液得提取液;将提取液减压浓缩为60~70℃下时相对密度为1.00~1.20的浓缩液,备用;
(3)将西洋参用70%乙醇回流提取3次,每次3小时,合并提取液;减压回收乙醇,减压浓缩为20~25℃下时相对密度为1.00~1.15的浓缩液,备用;
(4)将上述铁皮枫斗提取浓缩液和西洋参提取浓缩液合并、混匀,将葡萄糖置于沸腾床上,喷雾制粒,得到铁皮枫斗颗粒;所述葡萄糖为辅料,其在铁皮枫斗颗粒中的含量为药学上可接受的辅料用量。
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