CN102327310B

CN102327310B - 一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法

Info

Publication number: CN102327310B
Application number: CN201110257194.XA
Authority: CN
Inventors: 桂双英; 王举涛
Original assignee: Anhui University of Traditional Chinese Medicine AHUTCM
Current assignee: Anhui University of Traditional Chinese Medicine AHUTCM
Priority date: 2011-11-04
Filing date: 2011-11-04
Publication date: 2014-03-19
Anticipated expiration: 2031-11-04
Also published as: CN102327310A

Abstract

本发明公开了一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法，取桔梗药粉，加水提取，上大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥；加入乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流提取，收集提取液，浓缩、干燥，即得桔梗总皂苷。本发明所得桔梗总皂苷得率高、纯度高，本发明的制备工艺重现性好，适合工业化生产。

Description

一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法

技术领域

本发明涉及一种桔梗总皂苷的制备方法，属于中药提取物的制备方法。

背景技术

桔梗为常用中药材，其来源于桔梗科植物桔梗Pplatycodon grondiflonm(Jacq.)A.DC的干燥根。其味苦辛，性平，入肺经。具有宣肺利咽，祛痰排脓的功效。现代研究表明，桔梗中含有皂苷、多聚糖、黄酮、聚炔、氨基酸、挥发油等多种成分，具有广泛的药理学活性。桔梗不仅作为药用，也为药食同源物品，可用于食品、保健品、化妆品等原料。

目前桔梗主要有配方用桔梗饮片、桔梗配方颗粒，也作为食品、中成药、保健品等原料，而目前有关桔梗的深度开发产品少。而且桔梗研究和生产中也存在以下问题：①桔梗为多年生植物，其地上部分如茎、叶、花枯死废弃；②鲜药加工中大量边角料如皮、须根等废弃，药材利用率较低。

目前关于桔梗皂苷的提取工艺包括传统溶剂提取法、酸碱提取法、超声波辅助法等。传统溶剂方法纯度低；酸碱法容易造成成分破坏，且腐蚀设备；超声波辅助法具有一定效果，但也存在纯度低、工业化程度有待完善等问题。上述现有的技术提取纯化桔梗总皂苷一般都低于50％。

发明内容

本发明是为避免上述现有技术所存在的不足之处，提供一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法，以获得纯度超过70％的高纯度桔梗总皂苷，并能满足产业化生产的要求。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：

本发明高纯度桔梗总皂苷的制备方法的特点是采用如下步骤：

(1)取桔梗粉置于提取罐中，加水加热提取，得桔梗提取液；

(2)将桔梗提取液进行减压浓缩，滤过；所得滤液上大孔吸附树脂柱；先依次用水、质量分数为0-40％的乙醇溶液洗脱杂质，再用质量分数为40-90％的乙醇溶液洗脱；

(3)收集质量分数为40-90％的乙醇溶液洗脱液，依次经减压浓缩、减压干燥或喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；

(4)取桔梗总皂苷粗粉，加入5-30倍重量乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流1-3次，每次0.5-2小时，收集提取液，减压浓缩，减压干燥或喷雾干燥即得桔梗总皂苷。

本发明高纯度桔梗总皂苷的制备方法的特点也在于：

所述步骤(1)中的桔梗粉包括桔梗的根、茎叶、花及桔梗加工边角料的粗粉。

所述步骤(1)是加入5-30倍重量水提取2-4次，每次0.5-5小时。

所述大孔吸附树脂为D101、AB-8、D-4006、D-4020、NKA或D-3520型。

所述乙酸乙酯甲醇溶液是乙酸乙酯与甲醇的体积比为8∶2-9.5∶0.5的溶液。

与已有技术相比，本发明有益效果体现在：

1、本发明采用水提取、滤过、直接上大孔吸附树脂纯化，然后以有机溶剂提取的方法，制得的桔梗总皂苷纯度高，易于产业化。

2、本发明的有效效益尤其体现在，大孔吸附树脂纯化后，采用有机溶剂提取，进一步除去杂质，有效提高了桔梗总皂苷的纯度，制得的桔梗总皂苷纯度达到70％以上。

附图说明

图1为桔梗皂苷D对照品HPLC图谱。

图2为桔梗皂苷总皂苷HPLC图谱。

具体实施方式

实施例1：

取桔梗药材10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加100L的水加热至沸腾，回流提取3次，每次1.5小时，提取液趁热过滤后放冷，上D101大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用40％乙醇和70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入10倍体积比为9∶1的乙酸乙酯甲醇溶液，加热至沸腾，回流2次，每次1.5小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.52kg。

以桔梗皂苷D为对照，采用HPLC法进行进行鉴别，由HPLC鉴定图可以看出，桔梗总皂苷在桔梗皂苷D的保留时间(t_R＝11.340)处有相对应的色谱峰(t_R＝11.239)，且分离度大于1.5。

以桔梗皂苷D为对照，采用香草醛-浓硫酸比色法测定，具体测定方法为：精密量取桔梗皂苷D对照品溶液0.4ml，桔梗总皂苷供试品溶液0.4ml，分别置具塞试管中，水浴挥干，冷却，加10％香草醛溶液0.5ml，加60％浓硫酸5ml，摇匀，60℃水浴保温15min，取出，冰水浴冷却，随行试剂做空白，在474nm波长处分别测定吸光度，计算含量。实验所得桔梗总皂苷中总皂苷含量为78％。

测定方法按常规方法为：

1、对照品溶液的制备

精密称取桔梗皂苷D对照品4.03mg，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度(0.403mg/ml)，作为对照品溶液。

2、供试品溶液的制备

称取桔梗总皂苷5mg，精密称定，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度作为供试品溶液。

3、样品含量测定

精密量取对照品溶液0.4ml，供试品溶液0.4ml，分别置具塞试管中，水浴挥干，冷却，加10％香草醛溶液0.5ml，加60％浓硫酸5ml，摇匀，60℃水浴保温15min，取出，冰水浴冷却，随行试剂做空白，在474nm波长处分别测定吸光度，计算含量。

实施例2：

取桔梗药材加工边角料(皮、须根等)10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加180L的水加热至沸腾，回流提取2次，每次1.5h，提取液趁热过滤后，放冷，上D101大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用40％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入8倍体积比为9.5∶0.5的乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流2次，每次1小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.65kg。

以桔梗皂苷D为对照，采用香草醛-浓硫酸比色法测定，上述实验所得桔梗总皂苷中总苷含量为84％。

实施例3：

取桔梗药材10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加80L的水加热至沸腾，回流提取3次，每次1h，提取液趁热过滤后，放冷，上AB-8大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用20％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入8倍体积比为8.5∶1.5的乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流2次，每次1小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.54kg。

以桔梗皂苷D为对照，采用香草醛-浓硫酸比色法测定，上述实验所得桔梗总皂苷中总苷含量为75％。

Claims

1.一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法，其特征是按如下过程进行：取桔梗药材10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加100L的水加热至沸腾，回流提取3次，每次1.5小时，提取液趁热过滤后放冷，上D101大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用40％乙醇和70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入10倍体积比为9:1的乙酸乙酯甲醇溶液，加热至沸腾，回流2次，每次1.5小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.52kg。

2.一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法，其特征是按如下过程进行：取桔梗药材加工边角料10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加180L的水加热至沸腾，回流提取2次，每次1.5h，提取液趁热过滤后，放冷，上D101大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用40％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入8倍体积比为9.5:0.5的乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流2次，每次1小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.65kg。

3.一种高纯度桔梗总皂苷的制备方法，其特征是按如下过程进行：取桔梗药材10kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中，加80L的水加热至沸腾，回流提取3次，每次1h，提取液趁热过滤后，放冷，上AB-8大孔吸附树脂柱，用水充分洗脱至流出液为澄清且无还原糖反应后，再依次用20％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥制得桔梗总皂苷粗粉；加入8倍体积比为8.5:1.5的乙酸乙酯甲醇溶液，加热回流2次，每次1小时，收集提取液，减压浓缩，喷雾干燥，即得桔梗总皂苷0.54kg。