CN102305852B - 一种体外诊断医疗器材所用的染色剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种体外诊断医疗器材所用的染色剂,特别是一种化学氧化还原反应后产生的一种色素,可用以定量检测血液中的生物化学物质.染色剂的前驱体容易与芳香胺或醇类结合,在过氧化氢和氧气环境中产生稳定的色素,所产生的色素在特定波长内不会受血红素干扰。
Description
技术领域
本发明涉及一种体外诊断医疗器材所用的染色剂(3-乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙)(EMBH)的合成方法,特别是一种化学氧化还原反应后产生的一种色素,可用以定量检测血液中的生物化学物质。
背景技术
不同种类的氧化还原有机染料已经应用在医院的临床诊断。但是在医院实验室常用的染料大多数不适合用在小型或自用的医疗器材。只有少数特殊配方的染料成功地使用在个人医疗器材。
通常情况下,染料或染料的前体与待测量的生理化学物质配对的电子受体混合配方,例如血糖测量使用葡萄糖氧化酶为电子受体。血糖和葡萄糖氧化酶与氧气经过电子交换后,产生过氧化氢。过氧化氢与辣根过氧化物进一步氧化染料或染料的前体。由此产生的染料浓度与待测量的生理化学物质成正比。
个人诊断医疗器材最常用的方法是使用两种染料。这种方法的优点是可调整这两种染料的成份比例耒调节加强所产生色素的深浅度和稳定性,目前最常用的一种染料是3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐水合物(3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone hydrochloride hydrate,MBTH).这染料应用范围广泛,能够和各种芳香胺和醇耦合氧化产生不同颜色的染料。
Phillips等人。在美国专利第4734360,5059394和5304468中使用MBTH与DMAB二甲氨基苯甲醛(p-dimethylaminobenzaldehyde)混合用以测量血浚液中葡萄糖的含量。由于MBTH容易升华,在高温下MBTH升华而降低含量,改变了最初的染料比例。在中性或碱性pH值,MBTH会在水溶液中沉淀出来,所以不适合应用在高pH值的溶液。举例说,测定血液中胆固醇的含量应在pH8左右进行,在这pH值,没有染料能与MBTH共用产生色素。
Yu等人,在美国专利号5453360,发表了一个新的MBTH衍生物的合成方法,此MBTH衍生物比MBTH在酸性和碱性水溶液的溶解度较高并在高温中较为稳定。但是,此MBTH衍生物在固态粉状时对光线敏感,很容易被氧化而降解。此外,小分子有机溶剂,如丙酮,会残留在晶体中,导致干扰染料的耦合反应。
Nikolyukin等。在美国专利第5710012号。发表了一个在MBTH染料的苯环第六位加入一个羧基基团.这衍生物具有良好的热稳定性。但是,它的溶解度在pH值4到5间非常低,不适用于血糖测量。
Douglas等人,在美国专利第5776719号发表了一个MBTH的磺酸基衍生物,这衍生物具有良好的热稳定性和溶解度,但由于磺酸基有强力亲电子的特点,产生的色素移向红光光谱。从而被血液中的血红素干扰测量结果.此外,此衍生物具有过高的水溶性,影响到测量结果的不稳定。
本发明提供一种染料***,在任何pH值都有良好的水溶性,具有良好的热稳定性,容易与各种芳香胺和醇生产蓝色到蓝绿色的色素,不受血红素干扰。
发明内容
一技术原理:
体外血液检测的主要困难是血红素干扰,药剂的稳定性和溶解度,本发明的染料***采用3-乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙(EMBH)和一氧化酶和过氧化物酶,这三种主要试剂经过特殊配方,与常用的粘结剂,螯合剂,缓冲剂混合成一种血液病原的检测药物染料,具有广泛的溶解度,高温稳定性,和不受血红素干扰.
二合成方法:
1)2-氨基-3-乙醇-6-甲基苯并噻唑。
在一个100毫升圆底烧瓶加入10克2-氨基-6-甲基苯并噻唑,20毫升甲氧基乙醇,和5毫升2-碘乙醇。慢慢加热到85度,同时搅拌6小时,让其冷却到室温,过滤和风干后获得理想的产品约5克。
2)3乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙(EMBH)。
将10克2-氨基-3-乙醇-6-甲基苯并噻唑,20毫升的蒸馏水,1毫升肼的混合物加热至60度1小时,过滤后所产生的浅黄色溶液冷却后得到5克的黄色粉末。
3-乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙(EMBH)的合成方法见附图1.
附图2是EMBH和MBTH产生的吸收光谱比较,血红素的吸收峰在550nm左右,与MBTH产生的吸收交叉重叠,但与EMBH产生的吸收光谱分离较远.
三、技术指标:
EMBH的光谱吸收峰在600-620nm之间,
EMBH的质谱分析分子量在206-208之间
EMBH的元素分析为C10H13N3S
附图说明
附图1:3-乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙(EMBH)的合成方法
附图2:EMBH和MBTH与DMAB(二甲氨基苯甲醛)氧化耦合产生的吸收光谱比较.
具体实施方式
在一块大约有1.2微未平均孔径的尼龙膜均匀涂上生物酶,放在50摄氏度烘箱烘干10分钟,然后涂上染料,根据上述同样的程序烘干。切成0.5平方英寸,夹在两片0.005英寸厚具有一个0.25平方英寸开口的聚酯薄膜中,将一滴葡萄糖溶液滴在尼龙膜上,然后用反射光学议测量。EMBH的吸收峰在607nm,MBTH的吸收峰在596nm。
Claims (2)
1.一个化学试剂用来测量人体或动物的生物液的生理分析物的用途,所述生物液包括血液、血清及尿液,所述生理分析物包括血糖、胆固醇和甘油三脂,此化学试剂包括3乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙。
2.一个化学试剂用来测量人体或动物的生物液的生理分析物的用途,所述生物液包括血液、血清及尿液,所述生理分析物包括血糖、胆固醇和甘油三脂,此化学试剂包括3乙醇-6-甲基苯并噻唑啉-(2)-腙,氧化酶和/或过氧化酶的配方组合。
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