CN102246742B - 生物组织固定剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种生物组织固定剂及其制备方法，其组分及其重量百分比为：甲醛1%～10%，琼脂1%～10%，甘油0.5%～5%，NaH₂PO₄0.2%～1%，Na₂HPO₄0.5%～2%，余量为水；本发明的生物组织固定剂呈凝胶状，克服了液态固定剂的不足，方便携带及远程邮寄，在不密闭的容器中也不会出现渗漏，组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分，用于穿刺活检组织的固定，组织结构保存完好,细胞形态清晰，固定效果好；本发明制备方法简单，成本低廉，有效期长达一年以上。

Description

生物组织固定剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种保存组织和生物样品的固定剂组合物及其制备方法。

背景技术

组织标本离体后用固定剂固定，制成病理切片，进行医学病理学诊断。在医院病理科、外科手术室中最常用的固定剂是***，***用于病理组织标本的固定，以防止组织自溶、结构破坏、细胞变性。但***呈液态，不方便携带及远程邮寄,且在不密闭的容器中容易渗漏，组织放于其中还会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种生物组织固定剂及其制备方法，该固定剂配制简单，成本低廉，固定效果好，克服液态固定剂的不足，易于携带，不会渗漏。

本发明的生物组织固定剂，该固定剂按重量百分比计含有1%～10%的甲醛和1%～10%的琼脂。

进一步，该固定剂按重量百分比计还含有0.5%～5%的甘油；

进一步，该固定剂还含有缓冲液；

进一步，所述缓冲液为NaH₂PO₄、Na₂HPO₄和水配制成的磷酸盐缓冲液；

进一步，该固定剂的组分及其重量百分比为：

甲醛       1%～10%；

琼脂       1%～10%；

甘油       0.5%～5%；

NaH₂PO₄  0.2%～1%；

Na₂HPO₄    0.5%～2%；

余量为水。

本发明的生物组织固定剂的制备方法为：首先取水总量的10%～40%加热至沸腾，加入琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充剩余水，加入其余组分，搅拌均匀至完全冷却。

因甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此在医药上可作为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等；本发明中，甲醛用于病理组织标本的固定，以防止组织自溶、结构破坏、细胞变性；制备本发明的生物组织固定剂时，甲醛可以***（质量分数为30-40%的甲醛溶液）的形式加入。

琼脂，学名琼胶，英文名agar，又名洋菜、冻粉、燕菜精、洋粉、寒天、大菜丝，是由石花菜或江篱(属红藻)经加热至溶化后，加以冷却凝固而成的海藻精华；用藻类制成的琼脂是半透明、无定形的粉末、薄片或颗粒，其具有凝固性，稳定性，能与一些物质形成络合物；琼脂可用作增稠剂、凝固剂、悬浮剂、乳化剂、保鲜剂和稳定剂，广泛用于制造粒粒橙及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、羹类食品、凉拌食品等等；琼脂在化学工业、医学科研中可作培养基、药膏基及其他用途。本发明中，琼脂用作凝固剂加入固定剂中，使固定剂呈凝胶状，方便携带及远程邮寄，在不密闭的容器中也不会出现渗漏，组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分。

甘油，化学名为丙三醇，有甜味，为无色透明粘性液体，是化工生产的产品，有良好的吸水性；本发明优选的方案为在固定剂中加入甘油，由于甘油有保湿及强大的保水性，因而能够提供持续的水分,使得组织不会干涩,固定更加充分。 

缓冲***对维持生物的正常pH值和正常生理环境起到重要作用，多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。本发明优选的方案为在固定剂中加入缓冲液，以保持pH值在一定范围内的相对稳定，使本发明的生物组织固定剂更适合做免疫组化检查。所述缓冲液优选为磷酸盐缓冲液，由于磷酸缓冲液近中性，恰在生理性pH范围缓冲力最强，且成本相对较低，成为生命科学领域应用最广、最普及的无机盐缓冲液，也是免疫学、细胞生物学和分子生物学实验室必备的常用缓冲液之一。

本发明的有益效果在于：

1、本发明的生物组织固定剂呈凝胶状，克服了液态固定剂的不足，方便携带及远程邮寄，在不密闭的容器中也不会出现渗漏，组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分；

2、本发明用于穿刺活检组织的固定，组织结构保存完好,细胞形态清晰，固定效果好；

3、加入缓冲液，使固定剂呈中性，固定的组织抗原破坏较少，更有利于后期免疫组化染色；

4、本发明制备方法简单，成本低廉；

5、本发明的固定剂有效期长，经实验验证，有效期长达一年以上。

具体实施方式

以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述。

实施例1

首先取水10 g加热至沸腾，加入1g琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充83.8 g水，加入质量分数为40%的甲醛溶液2.5g、NaH₂PO₄ 0.2g、Na₂HPO₄ 2g及甘油0.5g，搅拌均匀至完全冷却，制得本实施例的生物组织固定剂。

实施例2

首先取水20g加热至沸腾，加入3g琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充51g水，加入质量分数为35%的甲醛溶液20g、NaH₂PO₄ 0.5g、Na₂HPO₄ 1.5g及甘油4g，搅拌均匀至完全冷却，制得本实施例的生物组织固定剂。

实施例3

首先取水26g加热至沸腾，加入5g琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充54.5g水，加入质量分数为35%的甲醛溶液10g、NaH₂PO₄ 0.5g、Na₂HPO₄ 1g及甘油3g，搅拌均匀至完全冷却，制得本实施例的生物组织固定剂。

实施例4

首先取水30g加热至沸腾，加入8g琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充39g水，加入质量分数为30%的甲醛溶液20g、NaH₂PO₄ 0.3g、Na₂HPO₄ 0.7g及甘油2g，搅拌均匀至完全冷却，制得本实施例的生物组织固定剂。

实施例5

首先取水30g加热至沸腾，加入10g琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充28.5 g水，加入质量分数为40%的甲醛溶液25g、NaH₂PO₄ 1g、Na₂HPO₄ 0.5g及甘油5g，搅拌均匀至完全冷却，制得本实施例的生物组织固定剂。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims (2)

1.一种生物组织固定剂，其特征在于：该固定剂按重量百分比计含有1%～10%的甲醛和1%～10%的琼脂，所述固定剂还含有缓冲液和按重量百分比计0.5%～5%的甘油，所述缓冲液为NaH₂PO₄、Na₂HPO₄和水配制成的磷酸盐缓冲液；

所述固定剂的组分及其重量百分比为：

甲醛       1%～10%；

琼脂       1%～10%；

甘油       0.5%～5%；

NaH₂PO₄  0.2%～1%；

Na₂HPO₄    0.5%～2%；

余量为水。

2.权利要求1所述的生物组织固定剂的制备方法，其特征在于：首先取水总量的10%～40%加热至沸腾，加入琼脂不停搅拌，直至完全溶解，然后停止加热，补充剩余水，加入其余组分，搅拌均匀至完全冷却。