CN102246742B - 生物组织固定剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生物组织固定剂及其制备方法,其组分及其重量百分比为:甲醛1%~10%,琼脂1%~10%,甘油0.5%~5%,NaH2PO40.2%~1%,Na2HPO40.5%~2%,余量为水;本发明的生物组织固定剂呈凝胶状,克服了液态固定剂的不足,方便携带及远程邮寄,在不密闭的容器中也不会出现渗漏,组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分,用于穿刺活检组织的固定,组织结构保存完好,细胞形态清晰,固定效果好;本发明制备方法简单,成本低廉,有效期长达一年以上。
Description
技术领域
本发明涉及一种保存组织和生物样品的固定剂组合物及其制备方法。
背景技术
组织标本离体后用固定剂固定,制成病理切片,进行医学病理学诊断。在医院病理科、外科手术室中最常用的固定剂是***,***用于病理组织标本的固定,以防止组织自溶、结构破坏、细胞变性。但***呈液态,不方便携带及远程邮寄,且在不密闭的容器中容易渗漏,组织放于其中还会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种生物组织固定剂及其制备方法,该固定剂配制简单,成本低廉,固定效果好,克服液态固定剂的不足,易于携带,不会渗漏。
本发明的生物组织固定剂,该固定剂按重量百分比计含有1%~10%的甲醛和1%~10%的琼脂。
进一步,该固定剂按重量百分比计还含有0.5%~5%的甘油;
进一步,该固定剂还含有缓冲液;
进一步,所述缓冲液为NaH2PO4、Na2HPO4和水配制成的磷酸盐缓冲液;
进一步,该固定剂的组分及其重量百分比为:
甲醛 1%~10%;
琼脂 1%~10%;
甘油 0.5%~5%;
NaH2PO4 0.2%~1%;
Na2HPO4 0.5%~2%;
余量为水。
本发明的生物组织固定剂的制备方法为:首先取水总量的10%~40%加热至沸腾,加入琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充剩余水,加入其余组分,搅拌均匀至完全冷却。
因甲醛能与蛋白质的氨基结合,使蛋白质凝固,因此在医药上可作为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等;本发明中,甲醛用于病理组织标本的固定,以防止组织自溶、结构破坏、细胞变性;制备本发明的生物组织固定剂时,甲醛可以***(质量分数为30-40%的甲醛溶液)的形式加入。
琼脂,学名琼胶,英文名agar,又名洋菜、冻粉、燕菜精、洋粉、寒天、大菜丝,是由石花菜或江篱(属红藻)经加热至溶化后,加以冷却凝固而成的海藻精华;用藻类制成的琼脂是半透明、无定形的粉末、薄片或颗粒,其具有凝固性,稳定性,能与一些物质形成络合物;琼脂可用作增稠剂、凝固剂、悬浮剂、乳化剂、保鲜剂和稳定剂,广泛用于制造粒粒橙及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、羹类食品、凉拌食品等等;琼脂在化学工业、医学科研中可作培养基、药膏基及其他用途。本发明中,琼脂用作凝固剂加入固定剂中,使固定剂呈凝胶状,方便携带及远程邮寄,在不密闭的容器中也不会出现渗漏,组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分。
甘油,化学名为丙三醇,有甜味,为无色透明粘性液体,是化工生产的产品,有良好的吸水性;本发明优选的方案为在固定剂中加入甘油,由于甘油有保湿及强大的保水性,因而能够提供持续的水分,使得组织不会干涩,固定更加充分。
缓冲***对维持生物的正常pH值和正常生理环境起到重要作用,多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。本发明优选的方案为在固定剂中加入缓冲液,以保持pH值在一定范围内的相对稳定,使本发明的生物组织固定剂更适合做免疫组化检查。所述缓冲液优选为磷酸盐缓冲液,由于磷酸缓冲液近中性,恰在生理性pH范围缓冲力最强,且成本相对较低,成为生命科学领域应用最广、最普及的无机盐缓冲液,也是免疫学、细胞生物学和分子生物学实验室必备的常用缓冲液之一。
本发明的有益效果在于:
1、本发明的生物组织固定剂呈凝胶状,克服了液态固定剂的不足,方便携带及远程邮寄,在不密闭的容器中也不会出现渗漏,组织放于其中不会出现组织漂浮或贴壁等导致的固定不充分;
2、本发明用于穿刺活检组织的固定,组织结构保存完好,细胞形态清晰,固定效果好;
3、加入缓冲液,使固定剂呈中性,固定的组织抗原破坏较少,更有利于后期免疫组化染色;
4、本发明制备方法简单,成本低廉;
5、本发明的固定剂有效期长,经实验验证,有效期长达一年以上。
具体实施方式
以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述。
实施例1
首先取水10 g加热至沸腾,加入1g琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充83.8 g水,加入质量分数为40%的甲醛溶液2.5g、NaH2PO4 0.2g、Na2HPO4 2g及甘油0.5g,搅拌均匀至完全冷却,制得本实施例的生物组织固定剂。
实施例2
首先取水20g加热至沸腾,加入3g琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充51g水,加入质量分数为35%的甲醛溶液20g、NaH2PO4 0.5g、Na2HPO4 1.5g及甘油4g,搅拌均匀至完全冷却,制得本实施例的生物组织固定剂。
实施例3
首先取水26g加热至沸腾,加入5g琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充54.5g水,加入质量分数为35%的甲醛溶液10g、NaH2PO4 0.5g、Na2HPO4 1g及甘油3g,搅拌均匀至完全冷却,制得本实施例的生物组织固定剂。
实施例4
首先取水30g加热至沸腾,加入8g琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充39g水,加入质量分数为30%的甲醛溶液20g、NaH2PO4 0.3g、Na2HPO4 0.7g及甘油2g,搅拌均匀至完全冷却,制得本实施例的生物组织固定剂。
实施例5
首先取水30g加热至沸腾,加入10g琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充28.5 g水,加入质量分数为40%的甲醛溶液25g、NaH2PO4 1g、Na2HPO4 0.5g及甘油5g,搅拌均匀至完全冷却,制得本实施例的生物组织固定剂。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述,但本领域的普通技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。
Claims (2)
1.一种生物组织固定剂,其特征在于:该固定剂按重量百分比计含有1%~10%的甲醛和1%~10%的琼脂,所述固定剂还含有缓冲液和按重量百分比计0.5%~5%的甘油,所述缓冲液为NaH2PO4、Na2HPO4和水配制成的磷酸盐缓冲液;
所述固定剂的组分及其重量百分比为:
甲醛 1%~10%;
琼脂 1%~10%;
甘油 0.5%~5%;
NaH2PO4 0.2%~1%;
Na2HPO4 0.5%~2%;
余量为水。
2.权利要求1所述的生物组织固定剂的制备方法,其特征在于:首先取水总量的10%~40%加热至沸腾,加入琼脂不停搅拌,直至完全溶解,然后停止加热,补充剩余水,加入其余组分,搅拌均匀至完全冷却。
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