CN102099683B - 用于分离和分析血液的装置和方法 - Google Patents
用于分离和分析血液的装置和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102099683B CN102099683B CN200980127554.5A CN200980127554A CN102099683B CN 102099683 B CN102099683 B CN 102099683B CN 200980127554 A CN200980127554 A CN 200980127554A CN 102099683 B CN102099683 B CN 102099683B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fabp
- blood
- antibody
- blood plasma
- gathering
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
- G01N33/491—Blood by separating the blood components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Ecology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置、用于分析血液中的FABP的存在的方法、以及用于检测来自患者的血液样本中的FABP的方法和成套工具。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于分离血液并分析血液中存在的蛋白质的量的装置。具体地,本发明涉及一种用于分析血液中的脂肪酸结合蛋白质(FABP)的装置和使用所述装置确定血液中的FABP的量的方法。
背景技术
验血能用来确定与正常血像的偏差,根据此偏差,能够确定例如病理异常或致病因素的存在,或者,其至少可指出进一步检查是必须的或可取的。当然,也能够建立健康的血像。
U.S.2003/0175167描述了这样一种装置,通过该装置,能将一定量的血液吸收到腔室中,其中,血液被稀释,然后至少部分血液受压通过过滤器。选择过滤器,使得至少血液中的血浆部分能够通过过滤器并收集在收集空间中,同时,至少血液中的血细胞部分无法通过过滤器并留在腔室中。然后,在腔室与所述收集空间之间的通道中设置密封件,以防止血浆与细胞的交换。然后,通过邮件将该装置发送至实验室,以对血浆进行分析。特别重要的是,要保持血浆与红血球之间的分离,因为,否则的话,血浆对于之后的许多检验来说都没有意义。例如,用光谱分析进行血浆的分析。
U.S.2004/0133146描述了一种装置,由此用薄管抽血,然后在腔室中传递血液,这之后,在活塞的帮助下将其压靠在过滤器上,使得至少迫使血浆通过过滤器,并且,至少红血球留在腔室中。然后,例如,能用光谱分析检验已分离的血浆。
与全血分析相比,这些装置提供不需要使血液离心的好处。这样,抽少量的血液就够用了,并且,可更快速地进行检验。
这些现有技术装置以及其使用的方法,具有这样的缺点:在已抽过血的患者或临床医学家知道检验结果之前,其仍需要相对长的时间周期。毕竟,虽然仅需要抽少量的血液,并且虽然不再需要离心处理,但是必须在实验室中进行分析,使得,对于运输和处理来说,需要相对长的时间周期。此外,患者可能感受到这样一个缺点:其他人会知道检验结果,甚至会在患者自己知道之前就知道。
此外,例如,从U.S.4,477,575中得知一种装置,其中,使用试剂,由此,将一滴血放置在过滤器的顶部上。由毛细管作用和/或重力驱动,引导血浆使其通过过滤层,同时,将红血球留在过滤器上。在过滤层中或其周围,提供能与血浆中的物质反应的试剂。然后,装置的可视表面的目视检查能够(通过变色或出现的线)确定血液中是否存在被分析物。DE 2922958描述了具有用于血液中的不同病理的或其它指示性因素的不同试剂的多层过滤器。
这种装置提供能由患者执行检验或当着他或她的面执行检验的优点,使得能够显著缩短获得检验结果所需的时间。
然而,这种检验仍需要几十分钟或更长时间,这在许多情况中是不受欢迎的。另外,这些检验具有这样的缺点:其非常易于受到例如来自外部的污染,因为装置是开口的,同时,另外,无法足够精确地确定分离的程度以及由此确定所获得的血浆的量。特别是当使用具有不同的试剂的多层过滤器时,此缺点更严重,因为不清楚对过滤器的哪一层提供多少血浆并且不清楚运行时间,因此,直到获得检验结果所需的时间随着过滤层的数量而增加。
本发明旨在提供一种分析血液中是否存在被分析物的装置和/或方法。
具体地,本发明的一个目的是,提供一种至少将血浆和红血球从全血中相对快速地分离,然后至少分析血浆的方法和/或装置。本发明的另一目的是,提供一种用户能够独立地和相对快速地进行验血的方法和/或装置。
本发明的又一目的是,提供一种用于血液的分离和分析的装置和/或方法,其给出关于血液中存在的一种或多种被分析物(尤其是FABP)的阈值或值的指示。
发明内容
在第一方面中,本发明涉及一种用于从患者的血液样本中检测FABP的装置,该装置包括以下元件:
a)分离装置,用于分离血浆与红血球,其中,所述分离装置设置有:
-腔室,用于容纳血液样本并包括用于所述血液样本的稀释液;
-过滤器,来自已稀释的血液样本的血浆和FABP(可选地与抗体复合)能通过该过滤器,但至少红血球不能通过,以及
-加压装置,用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器,以提供分离的血浆,以及
b)收集装置,用于收集已分离的血浆,
其中,所述分离装置和/或所述收集装置提供有以下抗体中的至少一个:
-抵抗FABP的第一抗原决定基的检测抗体,所述检测抗体与可检测的标记物结合,并能够接触已分离的血浆,以及
-抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基的捕获抗体,其中,所述捕获抗体能够以固定形式提供在所述收集装置中,并能够接触已分离的血浆。
这里使用的术语“能够接触”指的是这样的事实:当使用本发明时,抗体与相应的液体(主要是血浆)接触或能够与其接触。
在其中仅提供检测抗体的优选实施例中,有利的是,检测抗体能够在检测反应中与FABP复合,检测反应发生在主要由包含均匀分布的检测抗体的已稀释血浆组成的液相中,由此液相与存在于所述收集装置中的检测表面直接接触,并且,由此能将检测抗体固定在所述检测表面上。
在本发明的装置的一个优选实施例中,所述过滤器设置在能够***所述腔室中的管状元件的端部处或其附近,其中,所述收集装置由所述管状元件的内部形成。
在另一优选实施例中,所述捕获抗体固定在能够***所述收集装置中的***元件处。
在本发明的装置的又一优选实施例中,所述检测抗体被提供在所述稀释液中。
在本发明的装置的另一优选实施例中,所述FABP选自由H-FABP、LFABP、I-FABP、ILBP、B-FABP、A-FABP、E-FABP、T-FABP和M-FABP及其组合组成的组。
在本发明的装置的另一优选实施例中,所述可检测的标记物选自由胶态金或银、抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶、碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标记物和二次抗体,以及这些物质的组合组成的组。
在本发明的装置的又一优选实施例中,收集装置至少是部分透明的,使得从所述收集装置或装置的外部至少能部分地看到所述已固定捕获抗体(的附着位置)。
根据本发明的用于FABP的检测的装置的优点是,现在提供在几分钟内给出检验结果的快速检验。典型地,从将血液样本提供给装置的时间开始,在3分钟内,优选地在2分钟内,读出检验结果。此重要的好处由本装置及其方法的两个重要特征来实现。首先,在优选实施例中,在检测试剂和FABP之间使用检测反应,该反应发生在由包含已溶解的或已悬浮的(均匀分布的)检测试剂的已稀释血液或血浆组成的液相中,其中,所述液体与检测表面直接接触,或使所述液体与检测表面直接接触。液相中的这种检测反应进行地非常快。然后,检测试剂和FABP的反应产物的扩散从液相扩散到检测表面。在检测表面处固定之后,能用眼睛观察到反应产物。在根据本发明的用于FABP的检测的***的一个优选实施例中,此扩散过程是速度限制步骤,该***包括如这里描述的装置的应用。然而,与现有技术***相比,这仍是非常快的。
其次,使用特定***,以产生血浆。然而在现有技术***中用侧向流动原理将血浆与血细胞分离,本***利用具有压力装置的过滤器来实现此效果。这还非常有助于提高本***的速度。由于该***提供第一步骤的事实,在第一步骤中,在使血液受压通过过滤器之前用稀释液稀释血液,所以,无法预料能够以这样的方式实现这种快速检验(大约是传统速度的10倍)。但是,检验的灵敏度足以在临床上检测已稀释血浆中的FABP的相关水平。
在另一方面,本发明涉及一种用于分析血液中是否存在FABP的方法,其中,将(已知)一定量的血液至少分离成血浆和红血球,其中,至少将血浆收集在收集装置中,其中,允许存在于血液中的FABP与至少一种抗体(该抗体具体地与FABP起反应)接触,并且,其中,从收集装置的外部能观察到抗体与FABP之间的结合。
在本发明的方法的一个优选实施例中,从对象或从血液样本取得预定量的血液,并将其放入装置中,其中,将预定量的血液与预定量的稀释液混合以获得期望的稀释物,然后,将已稀释的血液压靠在过滤器上,以便迫使血浆通过过滤器并进入所述收集装置,并且,由过滤器阻止红血球通过。
在本发明的方法的一个优选实施例中,所述血浆与所述收集装置中的所述至少一种抗体接触。
在本发明的方法的另一优选实施例中,用检测抗体抵抗(against)FABP的第一抗原决定基,该检测抗体与可检测的标记物结合,并且,以使得该检测抗体能与已分离的血浆接触的位置将其提供在装置中。
在本发明的方法的另一优选实施例中,用捕获抗体抵抗与FABP的所述抗原决定基不同的第二抗原决定基,其中,可使所述捕获抗体在所述收集装置中处于固定状态,并且,以使得其能与已分离的血浆接触的位置将其提供在装置中。
具体地,提供了一种方法,其中,使用至少两种抗体,每种抗体具体地与FABP的不同抗原决定基反应,即,用可检测的标记物标记的检测抗体和用于将FABP-检测抗体复合物固定在装置中的固体表面上的捕获抗体,其中,可将两种抗体与FABP同时结合,其中,将所述检测抗体添加至所述稀释液,并且,其中,如这里定义的,将所述捕获抗体固定在***元件或杆件处,并使其与已分离的血浆接触。
在另一方面,本发明涉及一种用于检测取自患者的血液样本中的FABP的方法,其包括以下步骤:
-提供如上所述的本发明的装置;
-将已知量的血液引入所述腔室中的所述稀释液中,由此,可选地应用多孔体,在多孔体中可吸收固定量的血液,以在稀释液中提供预定量的血液,并使血液与稀释液混合;
-通过接合该装置的分离装置将红血球与血浆分离;
-在抗体与FABP之间出现特异性结合的条件下,使所述血液或血浆中的FABP与所述检测抗体和捕获抗体中的至少之一接触,以及
-检测所述特异性结合。
例如,特异性结合将在以下条件下出现,其中,在环境温度和压力下,FABP和抗体中的一个或两个处于液体状态,例如磷酸盐或其它一般缓冲剂。注意,本领域技术人员非常了解这些条件,在这些条件中,将出现抗体及其抗原之间的结合。
在本发明的方法的一个优选实施例中,在所述稀释液中提供所述检测抗体,并确保所述捕获抗体以固定状态与所述收集装置中的血浆接触。优选地,这通过在所述血浆中引入一元件(例如,如这里定义的杆件或***元件)来实现,将所述捕获抗体固定在所述元件上。然后,允许将由FABP和检测抗体形成的复合物与捕获抗体结合,其中,具有固定的捕获抗体的所述元件采用检测表面的功能。
在本发明的方法的一个替代优选实施例中,首先允许在液体中(例如,在腔室中的已稀释血液中,或在收集装置中的已稀释血浆中)形成FABP和检测抗体之间的复合物,然后,允许该复合物与所述固定的捕获抗体结合。
在本发明的方法的另一替代优选实施例中,仅将检测抗体提供给从稀释液、已稀释血液和已分离的血浆中选择的液体,并允许在该液体中或在通过使用该装置而形成的后续液体中形成检测抗体-FABP复合物,然后,允许(例如,通过对检测试剂施加顺磁性微珠)将所述复合物固定至面向限定空间27的装置1的任何元件的一侧的空间27(或第一收集装置27)的任何表面,使得捕获抗体能与血浆28直接接触。事实上,在这种实施例中,检测抗体将也是捕获抗体。
在本发明的方法的另一替代优选实施例中,所述FABP选自由H-FABP、LFABP、I-FABP、ILBP、B-FABP、A-FABP、E-FABP、T-FABP、M-FABP及其组合组成的组。
在本发明的方法的另一优选实施例中,从由胶态金或银、抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶、碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标记物和二次抗体,以及这些物质的组合组成的组中选择所述可检测的标记物。
在本发明的另一方面中,提供一种零件套装,包括至少一用于将血液至少分离成血浆和红血球的装置,其中,所述装置包括用于收集已分离的血浆的收集空间,并且与FABP反应的至少一特异性抗体适于被引入所述收集空间中。
优选地,根据本发明的零件套装进一步包括用于吸收和释放预定量的血液的元件,例如海绵。
优选地,根据本发明的零件套装包括如上所述的发明的装置。
优选地,该套装还包括用于执行本发明的方法、用于操作所述装置和/或元件、以及/或用于安全地处理所述所使用的装置和/或摄取元件的说明。
附图说明
为了进一步说明本发明,将基于附图说明根据本发明的装置和方法的实施例。
图1示出了在第一实施例中在使用本发明的装置之前的横截面图;
图2示出了处于部分接合状态中的图1的装置,其中,管状元件部分地插在腔室中;
图3示出了处于完全接合状态中的图1和图2的装置,其中,管状元件完全插在腔室中;
图4A和图4B示出了分别处于初始位置和最终位置的本发明的装置的替代实施例的部分横截面侧视图,;
图4C在横截面侧视图中示意性地示出了用于图4的装置的过滤器;
图5示意性地示出了在本发明的装置中使用的***元件;
图6示出了替代实施例中的图1的装置的***元件。
在此说明书中,相同或相应的元件具有相同或相应的附图标号。并非所有的附图标号都提供在所有附图中。如下所说明的,图4c中的附图标号57与图5中的附图标号57并不相应。
具体实施方式
在第一实施例中,本发明的装置的特征在于,至少包括用于将血浆与红血球分离的分离装置,该分离装置包括用于使至少一部分血液受压通过过滤器的压力装置,其中,至少设置第一收集装置以收集已分离的血浆,并在所述第一收集装置中提供至少一种试剂,或者,可将所述试剂引入所述第一收集装置中,以与存在于所述血浆中的物质或有机体反应。
这种装置提供这样的优点:在压力下使至少血浆与至少红血球分离,使得几乎立刻获得血浆和红血球的期望的分离。此外,至少血浆收集在收集装置中,血浆在收集装置中与至少一种试剂接触或使血浆能够与至少一种试剂接触,使得,能够在非常短的时间内(在几分钟或几秒钟内)确定在某位患者的血液中是否存在特定的物质,或至少超过一定的值或极限值。优选地,使用允许视觉确定是否发生某一反应的试剂,例如通过颜色变化、结构变化,例如凝结、溶解等。
优选地,将血浆收集在第一收集装置中,以与外部环境隔离的空间的形式提供第一收集装置,使得不会出现血浆的污染、玷污或泄漏。优选地,在使用前,给装置提供已知量的稀释液,尤其是在腔室中,同时,在腔室中另外提供已知量的血液,以便精确地得知血液的稀释程度。这确保轻松地获得快速且精确的检验结果。
在第一特别有利的实施例中,将该至少一种试剂供应在第一收集装置中或使之在第一收集装置中可获得,尤其是在其壁部。优选地,所述壁部是至少部分透明的,使得,例如,不需要打开装置,从装置的外部(至少从第一收集装置的外部)能清楚地看到试剂的颜色或结构(texture)的变化。
在一个替代实施例中,该至少一种试剂提供在能***第一收集装置中的元件上、提供在该元件中或在该元件处。这至少提供基本上能通用地执行本装置的优点,其中,始终能根据将执行的检验而选择适当的试剂。
优选地,选择和/或按剂量添加本发明的装置和/或方法中的试剂,使得可确定过渡值,以便至少能确定血液中的特定因素是否高于或低于预定值。
在一个具体实施例中,本装置装配有能够使血液或至少使血浆受压通过滤器的活塞,由此,优选地将第一收集装置设置在活塞内。该至少一种试剂可提供在活塞上或其中。
在根据本发明的装置和方法中,每次可应用一种试剂,而且可提供试剂的组合,以在一个装置中同时进行一系列检验。例如,在第一收集装置的壁部上,可对环或表面提供不同的试剂。如果需要的话,当然也可能在另一聚集条件下提供试剂,例如液体或以固体的形式。
在一个替代实施例中,在分开的容器中或其上提供至少一种试剂,其中,用于特别是在第一收集装置中分离血液的装置装配有注入口,使得在将血浆与红血球分离之后,能将血浆注入到所述容器中或其上的至少所述至少一种试剂处。
优选地从仅指示血浆中的物质或有机体的存在并且不指示其浓度的值的试剂的组中选择该至少一种试剂。优选地,该至少一种试剂本质上是二元的:例如,通过试剂、血浆或其之间的反应的颜色、凝固或其它变化,试剂的反应指示是否超过某一阈值。
这里示出和讨论的实施例总是以血液的分离和分析为基础的。然而,可用相同或相似的装置检验其它生物样本。在实例中给出的装置、方法和试剂的实施例仅为了示意性的目的而示出,并且,不以任何方式限制本发明。
在图1中,提供装置1的部分横截面图,根据本发明,将第一实施例示出为在两个部分中。在图1中,在左侧示出了第一部分2,其由透明的塑料壳3形成,壳在底部由锥形底4封闭并且在相对侧5上是开口的。开口侧5装配有具有外螺纹7的颈部6,帽8拧在外螺纹7上。帽8将垫圈9夹在颈部6处,使得封闭壳3内的内室或腔室10。在腔室10中,提供有预定量的稀释液11。
图1在右侧示出了活塞部分12形式的第二部分20,包括具有开口底部14和相对的开口顶部15的至少部分透明的管状元件13,该开口顶部由凸缘16包围。在底部14的外侧周围,装配有具有外径Db的柔性环17,外径Db以下述方式适应第一部分2的壳3的内径Di。在管状元件13中引入杆件18,其具有外径d1,d1比管状元件13的内径d2小。在杆件18的顶部设置有凸缘部分19,凸缘部分在其顶侧连接至挡板21,挡板向外延伸并装配有内螺纹22,该内螺纹能装配在部分2的外螺纹7上。凸缘部分密封地装配在顶部15中,同时,挡板能紧靠凸缘16的外侧。杆件18和凸缘部分19具有这样的长度,使得,在图1所示的位置中,杆件18的下端24保持在距离管状元件13内的下端14一定距离处。在杆件18的下端24设置有挡块25,其将在下面说明。在管状元件13的底部端14中附接有过滤器26,至少通过血液的任何稀释,至少血浆能通过该过滤器,但是红血球不能通过。在U.S.2003/0175167A1中给出了使用过滤器和稀释物的实例,其通过引证结合于此,并且不应限制性地对其进行解释。
在图2中,示出了处于这样的状态中的第二部分20,其中,将第二部分20部分地引入或接合入第一部分2中,其中,在稀释液中混合一滴已知量的血液。在此位置中,过滤器26位于已稀释的血液上,并用环17密封靠着壳3的内部。从而封闭腔室10。从此位置开始,可将第二部分20在底部4的方向上进一步向下推动。从而,过滤器26将用力压靠已稀释的血液,使得血浆受压向上通过过滤器26,而红血球被阻止并保持在腔室10中。在杆件18、管状元件13、过滤器26以及凸缘部分19之间,形成有环形腔室形式的第一收集装置27,在其中收集有血浆。
在图3中,示出了根据本发明的装置1的横截面侧视图,第二部分20被完全向下压入第一部分2中至这样的程度,使得内螺纹22拧在外螺纹7上,并使得挡块25密封过滤器26上方的管状元件13的开口端部分,以防止血浆28从第一收集装置27回流到腔室中。
在图1至图3所示的实施例中,在管状元件13的内部上设置至少一个表面29,该管状元件容纳有用于存在于或可能存在于血浆28中的至少一种成分或被分析物的试剂30。优选地,将试剂30应用为环形平面,使得能从复合装置(composite device)1的外侧的所有侧面看到试剂。如果此被分析物在血浆中存在一定的程度,那么这允许清楚地观察试剂30与所述被分析物的反应,例如,通过颜色变化、结构变化、凝固、溶解等。将显而易见的是,可在必须确定被分析物的存在、浓度、水平等的基础上选择试剂30或多种试剂。如果希望的话,对两个或多个表面29、29A、29B、29C...提供相同的试剂30,但是优选地提供不同的试剂30A、30B、30C...。
在图6所示的一个替代实施例中,在环形表面29的形式的杆件18上提供试剂。这具有这样的优点:根据待确定的所期望的被分析物,例如,可从一组具有不同试剂的杆件18中选择杆件18。实际上,这当然也可用具有不同试剂的各种管状元件13来实现。
在本发明的装置的一个替代实施例中,如图6中示意性地示出的,可提供一系列***元件,例如,(中空的)杆31、环32等,其中,各种***元件承载有不同的试剂30、30A、30B...,这便于,在任何时间,根据所期望的检验,可在管状元件13中提供适当的试剂或适当的试剂组合。例如,环形元件可在杆件18上滑动,以形成如图6所示的杆件18。例如,可将杆或类似物放在杆件18中的槽或开口中,或放在围绕板或腔室的杆件18中,例如空间27或管13,例如宽松地***的。
图5示意性地示出了用于在图1至图3的装置中使用的***元件32的一个替代实施例的透视图。此***元件32基本上由中空圆柱体50形成,其在第一端51包括环形部分52,多个指部53从环形部分52在相对的第二端54的方向上延伸。指部53在第二端54附近具有再生部分(rejuvenation)55,由于每个指部的部分56相对于所述本体50的外表面57向内弯曲。在再生部分55的面向外的表面29上,在每个指部53上提供试剂30。每个指部上的试剂可以是相同的,但是,在不同的指部53上可提供不同的试剂30、30A、30B...,例如,为了执行不同的、不论是否相关的检验。圆柱体50具有外径D3,其与本体13的内径D2基本相等,使得其能够从顶部15***本体13,优选地在端部14的方向上通过指部53***。然后,外表面57能与本体13的内侧临靠,同时表面29保持在距离其一定距离处。这允许试剂30、30A、30B...与收集在空间27中的血浆适当地接触。当然,可以别的方式提供或应用试剂,例如,将试剂直接提供或应用在表面57上,如果使其保持远离本体13的壁部,或者在***元件32的面向内的表面上,在此情况中,当至少指部53的至少位于试剂30的位置处是至少部分透明的时,这是有利的。
图4A和图4B示意性地示出了根据本发明的装置1,在一个替代实施例中,其基础在NL 1016646中描述,该公开物的全部内容通过引证结合于此,至少关于从血液分离血浆的操作通过引证结合于此。
此装置1包括中空圆柱体33,其中,在压力体35的帮助下,第一活塞34能在第一位置(其中,压力体停靠在连接至第一活塞的第一杆件36的一端)与第二位置(例如,沿着杆件36绕着通过本体33的轴线相对于第一位置旋转大约90度的角度)之间密封地移动。在第一位置中,由此可用压力体35在本体33的下端37的方向上推动第一活塞34,直到紧靠接合件(abutment)38。在杆件36周围设置具有杆件46的第二活塞39,并密封杆件以及本体33的内部。例如,第二活塞39是橡胶圈。在第一活塞34与第二活塞39之间,封闭有处理室40,其容积是可变的。处理室可容纳处理液或其它材料,例如缓冲剂11,例如磷酸盐缓冲剂,与图1至图3相似。已经在本体33的壁部44中装配入口42和出口43。可将毛细管44放在入口中,使得毛细管44的内容物能被吸入两个活塞34、39之间的本体,位于处理室40中,如将描述的。过滤器26装配至出口43,至少可迫使处理室40的内容物进入和/或通过过滤器26。
在起始位置中,如图4A所示,活塞34、39定位在本体33中相对较高的位置,并且彼此相对靠近。入口优选地在处理室中精确地打开,处理室40具有相对小的容积。填充有全血45的毛细管44作为样本放在入口42中。通过在本体的下端37的方向上对第一活塞34施压,其通过出口43,同时,处理室40的容积增大,因为第二活塞39将不会,或至少不会完全遵循第一活塞34在最大冲程(即,在压力体35到达第二位置之前,其在下端37的方向上从起始位置能移动的最大距离)的第一部分上的运动。由于处理室40的容积的增加,毛细管的内容物将被吸入处理室,并与处理液11混合。
然后,使压力体相对于杆件36到达第二位置,使得其能在杆件36上在下端37的方向上进一步受压,由此,在第一活塞34的方向上挤压第二活塞39。从而,使处理室的容积回缩,尤其是减到最小,并且,推动处理液和样本的混合物通过出口43,进入和/或通过过滤器26。过滤器可以是任何适当的过滤器,例如,玻璃纤维过滤器。从而,将血液与血浆分离,因为血浆受压通过过滤器,例如红血球和白血球的血液微粒被去除。
根据本发明,在过滤器26中和/或在过滤器26处,提供至少一个检验表面29,如图4C所示,由试剂30形成或包括试剂30,例如以上描述的。因为血浆受压通过过滤器,其与任何检验表面29直接并密集地接触,并由此与任何试剂30接触,从而允许几乎立刻读出检验结果。优点是,不需要将其提供至外部试剂表面,由此能防止血浆和/或试剂的污染。
此外,可将血浆收集在过滤器26中,或至少收集在其壳体47中,由此,能防止环境的污染,特别是环境的玷污。在生物样本(例如,在血液中可能存在致病因子)中使用的情况中,这特别重要。
在图4C中,示出了用于根据图1、图4A和图4B的装置的示意性过滤器26,该过滤器26包括壳体47。壳体47至少部分是透明的,优选地是完全透明的,使得,不需要打开壳体47便能看见被提供有试剂30的过滤器表面48或至少其一部分。这防止了血浆、试剂和/或环境的污染。例如,壳体47可包括两个壳体部分48、49,其彼此附接,同时包括如前所述的过滤器元件57,用于将血浆与血细胞分离。在过滤器元件57上方的第一壳体部分48中,腔室58设置在使用过程中面向出口43的一侧,血细胞保留在那里。在第二壳体部分49中,设置有在其中收集已分离的血浆28的收集室或空间27。在此空间中,提供至少一表面29,在该表面上或其中包括用于与血浆反应的试剂。例如,可在过滤器元件57上,在面向收集室27的一侧,设置此表面29,由此,例如可提供多孔形式的表面,使得在血浆与试剂之间形成密集接触。如图4C所示,也可在壳体47的内部上,在收集室27中,或在这两处地方,设置表面29。在此实施例中,第二壳体部分至少在表面29的位置处是透明的,这里,将表面29设置在块59上,使得,例如,能从壳体47的外部看到由于血浆和试剂30的成分之间或血浆和试剂中的成分之间的反应而产生的块的变色。
本发明决不限制于在附图和说明书中所提供的实施例。在由本发明的权利要求概括的范围内,许多变型都是可行的。
例如,当使用过滤器时,可使用将血浆至少部分地收集于其中的壳体,其中,壳体至少部分是透明的,并且在其中提供有试剂。这提供良好地防止污染和/或玷污的优点。此外,然后可将该装置或至少收集于其中的血浆用于其它检验。例如,可将装置整体或过滤器和/或壳体发送至实验室,在那里可进行其它检验,例如,为了验证或进一步检查通过试剂获得的第一指示。
用该装置检测血液中的被分析物
可对本发明的装置提供用于检测的试剂,即,用于被分析物(例如,血浆中的化学或生物物质或微生物)的定量、半定量或定性存在的确定。例如,血浆中的化学或生物学物质或微生物。
例如,可使用这样的试剂,其可指示幽门螺杆菌的存在,或指示凝血因子的过量或不足。
也可使用这样的试剂,其指示抗原的存在,例如其必须存在的范围或超过极限的程度,例如通过抗原可证明或确信肿瘤的存在。
也可应用这样的试剂,例如,通过该试剂能确定维生素的存在。
可进一步使用这样的试剂,利用该试剂,通过超过或消减(undercutting)阈值或极限值,其能指示出该超过是否会对患者有害。这种试剂可有利地与指示该极限值的超过或消减的试剂组合。可应用其它试剂,通过该试剂,能确定物质的治疗血液水平,例如药物(drug)或毒素,例如,为了最佳的作用,药物取决于由于例如不期望的副作用而可能不被超过的最佳血液水平。而且,可应用如所述的试剂的组合。这些试剂和应用当然仅是示意性的,并且不应限制性地进行解释。
在本说明书中,术语“试剂”或“多种试剂”或类似的措辞,应至少被理解为包括抗体或酶,这意味着可基于抗体或酶进行检验。
可应用几种试剂和其它标记物,例如抗原、化学试剂、酶、化学标记物等。可用试剂和标记物来指示心脏、肝脏、肾脏或其它器官的问题、血糖异常(例如糖尿病)、胆固醇紊乱、一种或多种荷尔蒙或细胞因子的缺陷、一般诊断参数等等、病毒性或细菌性异常(例如流行性感冒、疟疾、肝炎、HIV、炎症、MS、ME)以及其它指标,尤其是用于已存在的和/或潜在的健康问题的指标。应将此内容中的偏差理解为这种偏离于可被期望的正常值的偏差,对于有问题的患者,这些值指示或应该向医生指示进一步检查或干预是必要的,例如,施加药物、流体或营养物,或通过手术干预。
试剂的实例(其决不限制本发明)包括,例如,用于HTLVI和/或II的抗体,用于肾功能(例如心脏或心血管问题)的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C或标记物,心脏病发作(心肌梗塞)和/或中风,单克隆抗体,凝固试剂(例如,狼疮抗凝物敏感或不敏感的试剂),PSA抗原,HBS-1,HLA抗体,血色素测量中的HbA(1c)或GlyHb。
在表面29的实施例的第一实例中,在管状部分13的内部上施加胆固醇试剂,用作试剂30的CHOD-Pap(Boehringer-Mannheim GmbH),其适于证明胆固醇(总胆固醇,HDL或LDL)。在腔室10中,提供一定量的稀释液(缓冲剂)(例如,220微升),在此之后,在其中稀释血液(例如,60微升的血液,将血液有效地稀释4至5倍)。通过将第二部分压入第一部分中,如上所述,在第一空间27中收集220微升的血浆。通过摇动(水平摇动)使此血浆与试剂接触,其结果是,试剂从中性色变成区别颜色,在此情况中是红色,能从外部清楚地看到。借此,发现血液中的胆固醇水平比6.5mmole/L的阈值高。通过静脉采血来抽取并在实验室中检验,以及通过手指刺戳来抽取并在实验室中检验的全血的控制测量,表明血液的确具有高于该阈值的值。
以下将描述对于用于肾功能、肝脏、心脏病发作和/或中风的标记物的检测来说特别优选的一个实施例。
此特别优选的实施例可特别应用于身体组织或体液的样本中的FABP的定量、半定量或定性检测。脂肪酸结合蛋白质(FABP)是一种已知为用于特定组织的损害的早期标记物的蛋白质,其中,每种组织类型的特征在于其自己的FABP类型。FABP是包括在脂肪酸的胞内结合中的15kDa菌体蛋白质(cytosolic protein),并表示为九种不同的异形体,每种以其第一次在其中被描述的组织命名。
-心脏-FABP(H-FABP或心脏型);
-肝脏-FABP(L FABP或肝脏型);
-肠-FABP(I-FABP或小肠型);
-回肠-FABP(ILBP或回肠型);
-脑-FABP(B-FABP或脑型);
-脂肪细胞-FABP(A-FABP或脂肪细胞型);
-上皮/表皮-FABP(E-FABP或上皮细胞型);
-睾丸-FABP(H-FABP或睾丸型)以及
-髓磷脂-FABP(M-FABP或神经细胞型)。
至今为止,没有能够在少于几分钟内给出结果的对FABP的快速检验。FABP的快速确定可产生组织损伤的快速诊断和适当治疗的及早开始,尤其是在危及生命的状态中,例如心脏病或中风。特定FABP的量的测量可能(在众多因素中,但不是唯一地)应用于以下损伤的诊断:心肌损伤(H-FABP)、骨骼肌损伤(H-FABP)、肝脏损伤(L-FABP)、肾脏损伤(L-FABP和/或H-FABP)、肠损伤(包括I-FABP、ILBP和/或L-FABP)、脑损伤(B-FABP和/或H-FABP),并在以下诊断中使用:脂类代谢的一系列紊乱、糖尿病、发炎性疾病、多发性硬化、动脉硬化症、癌症以及移植之后的组织排斥。
本发明提供用于每个可能出现在动物或人类患者中的异形体中的基本上任何以上FABP的检测,其中,优选地在免疫测定的基础上,并优选地在血液中,执行与期望的特异性有关的检测。
用于FABP的检测的免疫测定在原则上对技术人员来说是已知的,并且,这种化验适于在本发明中使用。可用的免疫测定的一个实例采用夹心酶联免疫吸附试验的形式(Pelser MMAL.2004.“作为用于组织损伤的血浆标记物的脂肪酸结合蛋白质(Fatty acid-binding protein as plasma markerfor tissue injury)”马斯特里赫特大学论文,荷兰ISBN 90-9018161-X,第3章,第43至第51页;Wodzig KWH,Pelser MMAL,van der Vusse GJ,Roos W,Glatz JFC.用于血浆脂肪酸结合蛋白质的一步式酶联免疫吸附试验(One-step enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)for plasma fattyacid-binding protein)。Ann Clin Biochem 1997;34:263-8)。此化验(总持续时间是45分钟)是最快的,最特效的,并是敏感的H-FABP ELISA,其可在商业上获得。此化验利用两种不同的单克隆抗体,每个涉及H-FABP的不同抗原决定基。这些单克隆抗体中的一个用作捕获抗体,并附接至检测表面。另一抗体与辣根过氧物酶(HRP)结合,并用作检测抗体。在别的地方更详细地描述了在此化验中应用的单克隆抗体(参见Pelser MMAL.2004,上述第3章,第43至第51页和第4章,第53至第67页;Roos W,Eymann E,M Symannek,Duppenthaler J,Wodzig KWH,Pelser MMAL,Glatz JFC.“对人心脏脂肪酸结合蛋白质的单克隆抗体(Monoclonalantibodies to human heart fatty acid-binding protein)”免疫学方法期刊1995;183:149-53)。在捕获抗体/H-FABP/检测抗体复合物的形成之后,可通过使用HRP-特异酶基质来检测所述检测,例如色原四甲基联苯胺(TMB),其在由HRP转化之后提供蓝色反应产物,通过测量在450nm处的吸收,可用分光光度法检测该反应产物。
本领域的技术人员将理解,可在本发明的各方面中使用关于以上检测原理的许多变型。
因此,除了H-FABP以外,抵抗其它FABP类型的抗体可用来检测此蛋白质的其它异形体。而且,可对抗体与FABP之间的结合应用其它抗原决定基。抵抗特定FABP(对抗原决定基的抗体已经可用于此FABP)的其它抗原决定基的抗体的开发,或者表现出与其它FABP异形体的特异性结合的抗体的开发,在本领域技术人员的理解范围内,在这里不需要详细描述。
在本发明的各方面中,可用作试剂的抗体可以是多克隆或单克隆抗体。优选地,使用单克隆抗体。抗体可包括全部的免疫球蛋白或其片段,其中,可从不同的类和同种异型中选择免疫球蛋白,例如,IgA、IgD、IgE、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3、IgM等。其片段可包括Fab、Fv和F(ab’)2、Fab’等。此外,可适当地应用免疫球蛋白或其片段的凝聚物、聚合物和结合物(conjugate),只要保持用于给定的FABP的结合亲和力。
这里通常被称做试剂30的成分将通常由捕获抗体形成。可将此捕获抗体固定至限制空间27(或第一收集装置27)的装置1的任何元件的表面,并且,该表面朝着空间27面向内部,使得捕获抗体与血浆28直接接触或能够与血浆28直接接触。因此,可将捕获抗体应用于杆件18(至少其一部分)、管状元件13(的至少一部分)、或至少如这里描述的表面29。而且,如以下实例中描述的,可将捕获抗体固定至多孔元件,该多孔元件固定在限制空间27(或第一收集装置27)的装置1的任何元件的表面上或其中,并且,该表面朝着空间27面向内部,使得在捕获抗体与血浆之间能产生改进的接触。例如,通过生物素-亲和素抗生物素蛋白连接(biotin-(strept)avidin link),可实现捕获抗体至固体表面的粘附。可以可选地对捕获抗体提供顺磁性标记物,使得能从液体中收集其,并在通过磁吸引进行的反应的过程中的任何时间将其固定至固相。
杆件(18)优选地是这样的形式,其允许***压力装置的管状元件中。该杆件可以是管状的,这意味着内部是中空的,杆件可以是实心的,并且在横截面中可以是圆的、椭圆的、正方形的、三角形的或长方形的。杆件可包括这样的元件,试剂在元件上或者可对元件施加试剂。这种元件可以是多孔的或实心的。优选地,含有试剂的元件由于其多孔特性而支持从收集装置吸收已稀释的血浆。优选地,含有试剂的元件能够吸收多于来自收集装置27的已分离的血浆的10%,优选地多于20%、30%、40%或50%。结果,基本上缩短了捕获抗体与存在于液相中的FABP之间的扩散距离,其中,所述FABP优选地存在于这样的形式中,其中,其与检测抗体复合。非常优选地,含有试剂的元件支持毛细流动,由此,在毛细力的影响下,血浆被吸入多孔的含有试剂的元件中,毛细力作用的结果是使其与已固定试剂(即,已固定捕获抗体)接触。
优选地,本发明的检验是夹心酶联免疫吸附试验的形式,其中,检测抗体进一步用于FABP至捕获抗体的结合的检测。检测抗体至FABP的结合原则上可在FABP至捕获抗体的结合之前、之中或之后发生。优选地,首先允许检测抗体结合至存在于身体样本中的FABP,然后允许此复合物结合至已固定的或将要固定的捕获抗体。为了实现此效果,可将检测抗体非常适当地添加至本发明的装置的腔室10中的稀释液11。在一个替代实施例中,可将抗体添加至(多孔)元件,通过该元件将已知量的血液引入稀释液11中。这种元件可采用海绵的形式,其中,存在检测抗体,使得,能在将整个海绵放入稀释液11中以将血液和检测抗体从海绵转移至稀释液11之前,该检测抗体与所采样的血液直接混合。
在另一替代实施例中,可在之后将抗体添加至该空间,或者,抗体可在将血浆收集于空间27中之前就已经存在于该空间中。重要的是,在发生至FABP的结合或者此结合是可能的条件下,将检测抗体与血液或血浆均匀地混合。在一个实施例中,其中,施加将要固定的或首先允许与液相中的FABP反应的捕获抗体,还可在血浆在空间27中分离之后,将此捕获抗体添加至稀释液11、添加至抽血元件或血液收集元件或添加至血浆。事实上,每种可能的组合或顺序都是可能的,只要最终结果提供捕获抗体-/-FABP-/-检测抗体的固定复合物。
检测抗体可标记有任何适当的检测标记物,例如胶态金或银、抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶、碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标记物、二次抗体,或任何其它适当的标记物,通过所述标记物能建立成功结合的检测。可选的二次抗体可包括任何以上标记物。
优选地,使用胶态金,因为不需要清洗步骤,并可获得简单的一步式检验。胶态金由具有10nm至100nm的直径和非常高的消光系数的离散的红色颗粒组成。当集中在固体表面时,胶态金会非常容易地从视觉上被看成是红色。优选地,由此将捕获抗体以可识别的形式施加至限制空间27的装置1的任何元件的表面,并且该表面朝着空间27面向内,使得捕获抗体与血浆28直接接触,并且,从装置的外部至少能观察到该表面的一部分。
本领域的技术人员将理解,在本发明中可以想象到侧向流动应用。本领域的技术人员还将理解,可与主要检验一起或并行地执行辅助检验,通过该辅助检验或者检测第二FABP,或者通过该辅助检验提供控制反应。
可在根据本发明的检验中使用的身体样本原则上不限于血液。可检验其它身体样本,例如组织样本,或尿、粪便、唾液、泪液、粘液、痰、***、宫颈分泌物、脑脊髓液、呕吐物、鼻分泌物、汗液、羊膜液或母乳样本。
在另一方面中,本发明提供一种零件套装,优选地将其部件包装在一起。根据本发明的套装优选地包括:
-具有稀释液的管(装置1的第一部分2,根据如图1所示的发明,包括腔室10,其具有如上所述的稀释液11,并优选地具有如附图所示的外螺纹7);
-可选地,海绵(未在图中示出),其提供用于采样已知量的血液以将其引入装置1的腔室10中的稀释液11中的可能性。可应用此元件,以将已知量的血液样本引入装置的腔室中的稀释液(典型地是大约60μL的血液,但是此量可能变化),由此在稀释液中稀释血液成分;
-血液过滤器(活塞部分12,其包括具有开口下端14的至少部分地透明的管状元件13,其中,设置至少血浆能通过但是红血球不能通过的过滤器26,并且,该活塞部分能被引入腔室10中并能朝着底部4沿着腔室10的壁部密封地滑动);
-帽(如图1所示的具有杆件18的凸缘部分19,由此在杆件18的下端24上设置有挡块25,其能在过滤器26上方密封管状元件13的开口端,如图3所示,从而防止血浆28从第一收集装置27返回,并且,其中,凸缘部分19在顶部上并连接至挡板21,该挡板向外延伸并设置有内螺纹22,该内螺纹能够装配在装置1的第一部分2的外螺纹7上,根据如图1所示的发明);
-捕获抗体,能特异地结合至FABP(试剂30)的第一抗原决定基。该捕获抗体可有利地是这样的形式:其中,其被固定在限制空间27的元件的面向空间27的一侧的表面中或该表面上,并且从装置的外面能观察到该捕获抗体。适于用作用来检测H-FABP的捕获抗体的抗体是抗人类单克隆抗体H-FABP 67D3(例如,可从荷兰Uden的Hycult生物技术公司(Biotechnology BV)获得的)。适当的表面是具有毛细管作用的多孔部分,例如,可在侧向流动检测中应用此毛细管作用。
-可选地,能够与FABP的第二抗原决定基特异性结合的检测抗体,第二抗原决定基与第一抗原决定基不同,并且,其中,两种抗体本质上不会以有害方式影响彼此与FABP的结合。有利地,可在稀释液中提供检测抗体。稀释液中的检测抗体的适当浓度是5至20μg/L。适于用作用于检测H-FABP的检测抗体的抗体是抗人类单克隆抗体H-FABP 66E2(例如,可从荷兰Uden的Hycult生物技术公司获得的)。
根据本发明的装置和检测***的应用提供即时的(POC)快速检验,即,由全科医生在救护车中、在医院中使用的快速检验,或作为检测血浆中的FABP的家用检验。
检测来自患者的血液样本中的FABP的方法优选地包括以下步骤:
-提供如上所述的本发明的装置;
-将已知量的血液引入所述腔室中的所述稀释液中,由此,可选地,施加多孔体,在多孔体中可吸收固定量的血液,以将预定量的血液提供到稀释液中,并使血液与稀释液混合;
-通过接合装置的分离装置使红血球与血浆分离;
-在其中发生在抗体与FABP之间的特异性结合的条件下,使所述血液或血浆中的FABP与所述检测抗体和捕获抗体中的至少一个接触,以及
-检测该特异性结合。
在上面详细说明了此过程的实施例中的不同变型。
现在将通过以下决不限制本发明的实例来举例说明本发明。
实例
开发即时的(POC)快速检验(用于在全科医生的办公室中、在救护
车中、在医院中使用的检验,或作为检测血浆中的FABP的家用检验)
该检验提供用于在血浆中存在的浓度增加(>6μg/L)的心脏型脂肪酸结合蛋白质(H-FABP)的免疫化学测定,并与如这里描述的装置结合。血液样本的采集与获得检验结果之间的时间小于90秒。
本实施例详细描述了如上所述的并由发明人所设计的零件套装。此实施例包括:
-刺血针(手指刺针),用于刺破指尖以提供血液样本;
-管(腔室),包括稀释液(100mM HEPES EDTA(pH 7.4)和0.9%NaCl);
-海绵,用于收集限定量的血液;
-血液过滤器,用于在管状元件的尖端分离血浆和血细胞;
-帽,装配有具有挡块的杆件,通过挡块可分别密封腔室(帽)的顶侧和通过血液过滤器(挡块)的回流。
稀释液提供有用直接抵抗人类心脏型FABP的鼠单克隆抗体66E2(可从荷兰Uden的Hycult生物技术公司获得)(此单克隆抗体叫做“第一抗体”,mAb检测),并且,稀释液与胶态金或其它适当颜色指示剂结合。mAb检测在稀释液中的适当浓度是5至20μg/L。
应用海绵,以将大约60μL的血液从血液样本引入装置的腔室中的稀释液中,血液在腔室中被稀释。存在于血液样本中的FABP将基本上立刻与存在于稀释液中的金结合单克隆抗体mAb检测结合,以形成FABP-mAb检测-金复合物。例如,平均摇动腔室的内容物40秒,有助于将血液溶解在稀释液中并通过mAb检测与FABP完全结合。
然后,将血液过滤器放在腔室中,并在腔室底部的方向上向下缓慢挤压血液过滤器。用力将血液过滤器压靠在包含血液-FABP-mAb检测-金复合物的已稀释血液上,使得血浆与FABP-mAb检测-金复合物一起受压向上通过血液过滤器,同时将红血球阻止并保留在腔室中。将血浆和FABP-mAb检测-金复合物一起收集在管状元件的内部空间中的血液过滤器的另一侧。在放在管状元件中之后,密封装配有杆件的密封帽,杆件在管状元件的位于血液过滤器上方的开口端具有挡块,以防止通过血液过滤器的回流。同时,用帽在顶部处密封腔室。
在本实施例中,以中空管的形式提供将挡块连接至帽的杆件,该中空管具有至少部分透明或在大约10mm的长度上为开口的的壁部。杆件的壁部的透明或开口部分优选地从离杆件下端2-3mm处开始,并优选地延伸至离杆部下端大约12-13mm。用多孔部分填充杆件的中空管,该多孔部分对液体具有毛细活性,并且,借助杆件的至少部分地透明或开口的壁部,可从装置的外部看到该多孔部分。在距离杆件下端大约5mm的距离处,多孔部分包括固定至其上的一定量的200ng的单克隆抗体67D3(荷兰Uden的Hycult生物技术公司),其直接抵抗人类心脏-FABP类型(其叫做“第二抗体”,mAb捕获),并且,该抗体识别与由mAb检测识别的抗原决定基不同的人类心脏型FABP上的抗原决定基。
类似地,处于距离杆件下端大约10mm距离处的多孔部分包括固定至其上的直接抵抗另一蛋白质(例如,控制或参考或第二检验蛋白质)的单克隆抗体。多孔部分的总长和体积(即尺寸)优选地是这样的,使得在多孔部分中吸收已稀释的血浆样本的绝大部分(大约100μL)。
在将血浆吸入多孔部分之后,在色带的形成下,FABP-mAb检测-金复合物将结合至固定于其上的第二单克隆抗体mAb捕获,可通过杆件的透明或开口的壁部看到色带。此色带的色度将随着血液样本中的FABP的浓度而增加。在原始血液样本中的FABP浓度<6μg/L的情况中,将看不到色带。
类似地,存在于血液中的另一蛋白质将与如上所述在离杆件下端10mm的距离处固定在多孔部分上的特异性抗体结合,并且,如果对稀释液还提供抵抗该蛋白质的另一抗原决定基的金结合抗体,那么,当多孔部分上的色带处于离杆件下端10mm的距离处时,将看到此复合物。此反应可用作对检验中血浆的存在的控制,并由此用作适当执行的控制。
Claims (22)
1.一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置,所述装置包括以下元件:
a)分离装置,用于将血液分离成血浆和红血球,其中,所述分离装置设置有:
-腔室,用于容纳血液样本并包括用于所述血液样本的稀释液;
-过滤器,来自已稀释的血液样本的血浆和FABP能够通过所述过滤器,但至少红血球不能通过,以及
-加压装置,用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器,以提供分离的血浆,以及
b)收集装置,用于收集已分离的血浆,
并且,其中,所述收集装置设置有:
(i)抵抗FABP的第一抗原决定基的检测抗体,所述检测抗体与可检测的标记物结合,并能够接触已分离的血浆,以及
(ii)抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基的捕获抗体,其中,所述捕获抗体能够以固定形式提供在所述收集装置中,并能够接触已分离的血浆,
其中,所述检测抗体和所述捕获抗体提供在所述收集装置中,其中,至少所述捕获抗体被固定在所述收集装置中。
2.根据权利要求1所述的装置,其中,所述过滤器设置在能够***所述腔室中的管状元件的端部处或该端部附近,并且其中,所述收集装置由所述管状元件的内部形成。
3.根据权利要求1或2所述的装置,其中,所述捕获抗体被固定在能够***所述收集装置中的***元件上或***该***元件中。
4.根据权利要求3所述的装置,其中,所述检测抗体被提供在所述稀释液中。
5.根据权利要求1或2所述的装置,其中,所述FABP选自由H-FABP、L FABP、I-FABP、ILBP、B-FABP、A-FABP、E-FABP、T-FABP及M-FABP组成的组。
6.根据权利要求1或2所述的装置,其中,所述可检测的标记物选自由胶态金或胶态银、抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、过氧化物酶、磷酸酶、发色标记物、荧光标记物、化学发光标记物及二次抗体组成的组。
7.根据权利要求6所述的装置,其中,所述过氧化物酶是抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)。
8.根据权利要求6所述的装置,其中,所述磷酸酶是碱性磷酸酶(AP)。
9.根据权利要求6所述的装置,其中,所述化学发光标记物是磷光标记物。
10.根据权利要求6所述的装置,其中,所述微球体是乳胶微珠。
11.根据权利要求1或2所述的装置,其中,所述收集装置至少是部分透明的,使得从所述装置的外部至少能部分地看到已固定的捕获抗体的附着位置。
12.一种用于分析血液中的FABP的存在的装置,其中,所述装置设计成用于执行这样的方法,在该方法中,将一定量的血液至少分离成血浆和红血球,所述装置包括:
-过滤器,来自已稀释的血液样本的血浆和FABP能够通过所述过滤器,但至少红血球不能通过,以及
-加压装置,用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器,以提供分离的血浆,并且
其中,至少将所述血浆收集在收集装置中,其中,允许存在于血液中的FABP与至少一种抗体接触,所述抗体具体地与FABP起反应,并且,其中,从所述收集装置的外部能观察到所述抗体与所述FABP之间的结合,
其中,检测抗体和捕获抗体提供在所述收集装置中,其中,至少所述捕获抗体被固定在所述收集装置中。
13.根据权利要求12所述的装置,其中,从血液样本中取得预定量的血液,并将其引入装置中,其中,将所述预定量的血液与预定量的稀释液混合以获得期望的稀释物,然后,使已稀释的血液压靠在过滤器上,以便迫使血浆通过所述过滤器并进入所述收集装置,并且,红血球被所述过滤器阻止。
14.根据权利要求12或13所述的装置,其中,所述血浆与所述收集装置中的所述抗体接触。
15.根据权利要求12或13所述的装置,其中,用检测抗体抵抗FABP的第一抗原决定基,并且,其中,所述检测抗体与可检测的标记物结合并能够接触所述分离的血浆。
16.根据权利要求15所述的装置,其中,用捕获抗体抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基,其中,所述捕获抗体能够固定在所述收集装置中并能够接触所述分离的血浆。
17.一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置,所述装置设计成用于执行以下步骤:
-将预定量的血液引入腔室中的稀释液中,使用多孔体进行该引入,在所述多孔体中能够吸收预定量的血液,然后将所述预定量的血液提供到所述腔室中的所述稀释液中,并使所述血液与所述稀释液混合;
-通过接合所述装置的分离装置,用过滤将红血球与血浆分离,所述分离装置包括:
-过滤器,来自已稀释的血液样本的血浆和FABP能够通过所述过滤器,但至少红血球不能通过,以及
-加压装置,用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器,以提供分离的血浆,以及
-在抗体与所述FABP之间出现特异性结合的条件下,使所述血浆中的FABP与检测抗体和捕获抗体中的至少之一接触,以及
-检测所述特异性结合,
其中,所述检测抗体和所述捕获抗体提供在收集装置中,其中,至少所述捕获抗体被固定在所述收集装置中。
18.根据权利要求17所述的装置,其中,在所述稀释液中提供所述检测抗体,并且,其中,所述捕获抗体能够以固定状态与所述收集装置中的血浆接触。
19.根据权利要求17或18所述的装置,其中,形成检测抗体-FABP复合物,然后允许所述检测抗体-FABP复合物结合至已固定的捕获抗体。
20.根据权利要求17或18所述的装置,其中,所述FABP选自由H-FABP、L FABP、I-FABP、ILBP、B-FABP、A-FABP、E-FABP、T-FABP及M-FABP组成的组。
21.一种零件套装,包括至少一根据权利要求1或17所述的用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置,其中,所述装置包括用于收集已分离的血浆的收集空间,并且与FABP反应的至少一特异性抗体适于被引入所述收集空间中。
22.根据权利要求21所述的套装,进一步包括用于吸收和释放预定量的血液的元件。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US12768808P | 2008-05-14 | 2008-05-14 | |
US61/127,688 | 2008-05-14 | ||
NL2001577 | 2008-05-14 | ||
NL2001577A NL2001577C2 (nl) | 2008-05-14 | 2008-05-14 | Inrichting en werkwijze voor scheiden en analyseren van bloed. |
PCT/NL2009/050260 WO2009139632A1 (en) | 2008-05-14 | 2009-05-14 | Device and method for separating and analyzing blood |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102099683A CN102099683A (zh) | 2011-06-15 |
CN102099683B true CN102099683B (zh) | 2015-03-25 |
Family
ID=39875138
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200980127554.5A Expired - Fee Related CN102099683B (zh) | 2008-05-14 | 2009-05-14 | 用于分离和分析血液的装置和方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9182417B2 (zh) |
EP (1) | EP2283360B1 (zh) |
JP (1) | JP5345677B2 (zh) |
CN (1) | CN102099683B (zh) |
AU (1) | AU2009247039B2 (zh) |
BR (1) | BRPI0912731A2 (zh) |
CA (2) | CA2987495A1 (zh) |
NL (1) | NL2001577C2 (zh) |
RU (1) | RU2503009C2 (zh) |
WO (1) | WO2009139632A1 (zh) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL1033365C2 (nl) * | 2007-02-09 | 2008-08-12 | Medavinci Dev B V | Inrichting en werkwijze voor scheiden en analyseren van bloed. |
JP4961029B2 (ja) * | 2010-05-31 | 2012-06-27 | 株式会社シン・コーポレイション | 検査用キット |
US20130233062A1 (en) * | 2010-10-07 | 2013-09-12 | Donald A. Funk | Fluid analysis tool |
CN102466581B (zh) * | 2010-11-09 | 2015-09-30 | 艾博生物医药(杭州)有限公司 | 一种装置 |
JP2012239441A (ja) * | 2011-05-23 | 2012-12-10 | Seiko Epson Corp | 反応容器 |
CN103890163B (zh) | 2011-06-19 | 2016-09-14 | 阿博根公司 | 用于样品采集的装置、溶液和方法 |
ITPD20120102A1 (it) | 2012-04-02 | 2013-10-03 | Leader Medica S R L | Contenitore a camere separabili per il trattamento di tessuti biologici mediante separazione centrifuga |
ES2635596T3 (es) | 2012-06-20 | 2017-10-04 | Fabpulous B.v | Dispositivo y método de prueba rápida |
CN103575575A (zh) * | 2012-07-23 | 2014-02-12 | 艾博生物医药(杭州)有限公司 | 一种装置 |
WO2014018751A1 (en) * | 2012-07-27 | 2014-01-30 | Emory University | Cell filtration device |
CN105247366A (zh) * | 2013-01-31 | 2016-01-13 | 普瑞威尔公司 | 测试设备 |
JP6442858B2 (ja) | 2014-04-17 | 2018-12-26 | ソニー株式会社 | 血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法、および該方法をコンピューターに実現させるための血液状態解析プログラム |
JP6579100B2 (ja) | 2014-04-17 | 2019-09-25 | ソニー株式会社 | 血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法、及び該方法をコンピューターに実現させるための血液状態解析プログラム |
CN103901216B (zh) * | 2014-04-22 | 2015-10-21 | 上海科华生物工程股份有限公司 | 人h-fabp胶体金检测试纸及其制备方法 |
CN106461518B (zh) * | 2014-05-14 | 2021-09-10 | Dna吉诺特克股份有限公司 | 用于收集、运输及存储来自生物样品的生物分子的装置 |
JP6397939B2 (ja) | 2014-06-09 | 2018-09-26 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | アッセイ装置及び標的分析種の検出方法 |
JP6334371B2 (ja) * | 2014-11-18 | 2018-05-30 | 日本光電工業株式会社 | フィルタ組立体、およびチューブ組立体 |
US20190154672A1 (en) | 2016-06-30 | 2019-05-23 | Randox Laboratories Ltd. | Measurement of fabp for diagnosis |
JP6789106B2 (ja) | 2016-12-28 | 2020-11-25 | 富士フイルム株式会社 | 血液分析方法及び血液検査キット |
JPWO2019188907A1 (ja) * | 2018-03-29 | 2021-04-08 | 富士フイルム株式会社 | 採血用ランセット及び血液検査キット |
RU191794U1 (ru) * | 2019-04-17 | 2019-08-22 | Общество с ограниченной ответственностью "Абактум" | Закручивающаяся крышка-держатель пробозаборника с функцией быстрого надевания |
CN110318092B (zh) * | 2019-06-27 | 2022-01-18 | 江苏省沙钢钢铁研究院有限公司 | 一种电解抛光用辅助装置及其使用方法 |
CN115112463A (zh) * | 2022-06-15 | 2022-09-27 | 安徽九陆生物科技有限公司 | 一种微量血液过滤装置及其在血液营养元素检测中的应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0508010A1 (en) * | 1991-04-10 | 1992-10-14 | La Mina Ltd. | Biological fluids testing membrane module and method of conducting same |
CN1952664A (zh) * | 2005-08-26 | 2007-04-25 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 表面脂肪酸结合蛋白e-fabp的应用 |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3481477A (en) * | 1965-03-02 | 1969-12-02 | Andrew F Farr | Apparatus for filtering out clear liquid from suspended solids |
US3931018A (en) * | 1974-08-09 | 1976-01-06 | Becton, Dickinson And Company | Assembly for collection, separation and filtration of blood |
JPS587332Y2 (ja) * | 1978-06-06 | 1983-02-08 | 富士写真フイルム株式会社 | 多層血液化学分析材料 |
DE3029579C2 (de) | 1980-08-05 | 1985-12-12 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und Mittel zur Abtrennung von Plasma oder Serum aus Vollblut |
US4458020A (en) * | 1982-11-15 | 1984-07-03 | Quidel | Integrated single tube plunger immunoassay system having plural reagent chambers |
US4918025A (en) * | 1987-03-03 | 1990-04-17 | Pb Diagnostic Systems, Inc. | Self contained immunoassay element |
ZA948564B (en) | 1993-11-19 | 1995-07-26 | Bristol Myers Squibb Co | Liquid separation apparatus and method |
US6506167B1 (en) * | 1997-12-24 | 2003-01-14 | I-Design Co., Ltd. | Blood-collecting tubes |
US6171870B1 (en) * | 1998-08-06 | 2001-01-09 | Spectral Diagnostics, Inc. | Analytical test device and method for use in medical diagnoses |
US6379708B1 (en) * | 1999-11-20 | 2002-04-30 | Cytologic, Llc | Method for enhancing immune responses in mammals |
US6969367B2 (en) * | 2000-02-02 | 2005-11-29 | Xepmed, Inc. | Extracorporeal pathogen reduction system |
US7470245B2 (en) * | 2000-02-02 | 2008-12-30 | Xepmed, Inc. | Extracorporeal pathogen reduction system |
AU5828201A (en) * | 2000-03-10 | 2001-09-17 | Univ Geneve | Diagnostic assay for transmissible spongiform encephalopathies |
US6632681B1 (en) * | 2000-07-24 | 2003-10-14 | Ey Laboratories | Reagent delivery device and method of use |
NL1016646C2 (nl) | 2000-11-17 | 2002-05-29 | Best Quality B V | Inrichting voor het met behandelflu´dum behandelen van een vloeistofachtig monster, zoals volbloed, gebruik van een dergelijke inrichting,alsmede kit omvattende een dergelijke inrichting. |
NO314206B1 (no) | 2001-04-30 | 2003-02-10 | Erling Sundrehagen | Kvantitativt kjemisk analysemetode, anordning/innretning, samt anvendelse av nevnte metode og analysesett |
JP3931069B2 (ja) | 2001-08-22 | 2007-06-13 | 協和メデックス株式会社 | 採血用具、これを用いた定量用溶液調製方法、定量用溶液調製器具及びその使用方法並びに定量用溶液を用いた定量方法 |
US7323144B2 (en) | 2002-03-18 | 2008-01-29 | Leisure, Inc. | Apparatus for separating biological sample and separating method of the same |
US20050202513A1 (en) * | 2002-03-29 | 2005-09-15 | Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. | Method of judging cardiotoxicity of anthracycline-type anticancer chemical therapeutic by detecting human h-fabp and reagent therefor |
US7108993B2 (en) * | 2002-07-19 | 2006-09-19 | Bayer Healthcare Llc | Use of dual conjugated labels in the elimination of serum interference in immunochromatographic assays |
GB2392854A (en) | 2002-09-14 | 2004-03-17 | Secr Defence | Apparatus for isolating a filtrate from a sample |
CA3171720C (en) * | 2002-12-26 | 2024-01-09 | Meso Scale Technologies, Llc. | Methods for conducting electrochemiluminescence measurements |
DE10330981B4 (de) * | 2003-07-09 | 2010-04-01 | Medion Diagnostics Ag | Vorrichtung und Verfahren zur simultanen Durchführung von Blutgruppenbestimmung, Serumgegenprobe und Antikörpersuch-Test |
CA2507323A1 (en) * | 2005-05-13 | 2006-11-13 | Chromedx Inc. | Diagnostic whole blood and plasma apparatus |
WO2007002579A2 (en) * | 2005-06-23 | 2007-01-04 | Bioveris Corporation | Assay cartridges and methods for point of care instruments |
AU2006299417A1 (en) * | 2005-10-03 | 2007-04-12 | Biosite Incorporated | Methods and compositions for diagnosis and/or prognosis in Systemic Inflammatory Response Syndromes |
WO2007049286A1 (en) * | 2005-10-27 | 2007-05-03 | Tata Memorial Centre | A system for ex-vivo separation of apoptotic chromatin particles from blood or plasma |
ES2433377T3 (es) * | 2006-02-21 | 2013-12-10 | Nexus Dx, Inc. | Procedimientos y composiciones para la detección de analitos |
WO2008094198A2 (en) * | 2006-07-28 | 2008-08-07 | Biosite Incorporated | Devices and methods for performing receptor binding assays using magnetic particles |
WO2009086203A2 (en) * | 2007-12-27 | 2009-07-09 | Aethlon Medical, Inc. | Method and apparatus for increasing contaminant clearance rates during extracorporeal fluid treatment |
-
2008
- 2008-05-14 NL NL2001577A patent/NL2001577C2/nl not_active IP Right Cessation
-
2009
- 2009-05-14 JP JP2011509429A patent/JP5345677B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-05-14 EP EP09746809.4A patent/EP2283360B1/en active Active
- 2009-05-14 CN CN200980127554.5A patent/CN102099683B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-05-14 BR BRPI0912731A patent/BRPI0912731A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-05-14 WO PCT/NL2009/050260 patent/WO2009139632A1/en active Application Filing
- 2009-05-14 CA CA2987495A patent/CA2987495A1/en not_active Abandoned
- 2009-05-14 CA CA2724243A patent/CA2724243C/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-05-14 US US12/992,262 patent/US9182417B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-05-14 RU RU2010150907/15A patent/RU2503009C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-05-14 AU AU2009247039A patent/AU2009247039B2/en not_active Ceased
-
2015
- 2015-10-13 US US14/882,377 patent/US20160103134A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0508010A1 (en) * | 1991-04-10 | 1992-10-14 | La Mina Ltd. | Biological fluids testing membrane module and method of conducting same |
CN1952664A (zh) * | 2005-08-26 | 2007-04-25 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 表面脂肪酸结合蛋白e-fabp的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BRPI0912731A2 (pt) | 2017-05-23 |
EP2283360B1 (en) | 2013-08-14 |
US20160103134A1 (en) | 2016-04-14 |
US9182417B2 (en) | 2015-11-10 |
NL2001577C2 (nl) | 2009-11-17 |
AU2009247039A1 (en) | 2009-11-19 |
RU2010150907A (ru) | 2012-06-20 |
CN102099683A (zh) | 2011-06-15 |
AU2009247039B2 (en) | 2015-11-19 |
CA2724243A1 (en) | 2009-11-19 |
CA2987495A1 (en) | 2009-11-19 |
JP2011521226A (ja) | 2011-07-21 |
WO2009139632A1 (en) | 2009-11-19 |
EP2283360A1 (en) | 2011-02-16 |
RU2503009C2 (ru) | 2013-12-27 |
CA2724243C (en) | 2018-01-09 |
JP5345677B2 (ja) | 2013-11-20 |
US20110165589A1 (en) | 2011-07-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102099683B (zh) | 用于分离和分析血液的装置和方法 | |
EP2676606B1 (en) | Quick test device and method | |
KR102489679B1 (ko) | 바이러스 및 박테리아 감염의 복합 검출을 위한 방법 및 장치 | |
US20070059682A1 (en) | Method to increase specificity and/or accuracy of lateral flow immunoassays | |
WO2006088904A2 (en) | Fecal sample test device and methods of use | |
US11156618B1 (en) | Rapid measurement of total vitamin D in blood | |
US20200345286A1 (en) | Cassette device for quick test of diagnosis, method for detecting a ligand in a biological sample and kit | |
EP3640644B1 (en) | Target marker gp73 for detecting steatohepatitis and detection application method | |
EP2049903A2 (en) | An immunochromatography device for the diagnosis of diseases in a sample | |
US20040224373A1 (en) | Kit and method for detecting food allergies | |
CN115190888A (zh) | 检测肠道屏障功能障碍和/或肝硬化 | |
CN1828298A (zh) | 具有免疫层析检测指示功能的卫生用品 | |
CN113848319B (zh) | 免疫法检测冠状病毒的横向流动检测装置 | |
CN105705948B (zh) | 用于生物分析的装置和方法 | |
EP3816629A1 (en) | Kit for tracking and diagnosing degree of progressive chronic hepatitis and liver fibrosis by measuring asialo a1-acid glycoprotein as hepatocellular injury marker and use thereof | |
US20150004716A1 (en) | Detection of Exposure to Chemical Warfare Nerve Agents with Lateral Flow Assays | |
WO2014137862A2 (en) | Detection of exposure to chemical warfare nerve agents with lateral flow assays | |
OA20775A (en) | Detecting gut barrier dysfunction and/or cirrhosis. | |
WO2020243159A2 (en) | Targets and methods of diagnosing and monitoring lyme disease | |
WO2013144615A1 (en) | Biological reagent |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150325 Termination date: 20190514 |