CN102094027B

CN102094027B - 稻瘟病抗性基因Pi7及其应用

Info

Publication number: CN102094027B
Application number: CN2010105786332A
Authority: CN
Inventors: 潘庆华; 甘霖; 翟纯; 林菲; 王玲
Original assignee: South China Agricultural University
Current assignee: South China Agricultural University
Priority date: 2010-12-08
Filing date: 2010-12-08
Publication date: 2012-11-14
Anticipated expiration: 2030-12-08
Also published as: CN102094027A

Abstract

本发明公开了一种稻瘟病抗性基因Pi7及其应用。本发明提供了所述水稻稻瘟病抗性基因Pi7的核苷酸序列及其编码的氨基酸多肽序列，该序列包含有2个基因，都属于CC-NBS-LRR抗性基因家族的成员，且皆为组成型表达的基因。本发明还提供了该基因在转化水稻或其它植物培育抗病品种方面的应用以及根据该基因序列产生的分子标记在育种中的应用。

Description

稻瘟病抗性基因Pi7及其应用

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种水稻稻瘟病抗性基因Pi7的克隆及其应用。

背景技术

植物在生长的过程中，常常受到多种病原物的侵害，而植物则采取多种防御策略以保护自身，避免受其侵袭。植物中一个最重要的防御机理就是能够识别专性致病微生物的存在并启动自身的防御应答***。植物对病原菌的识别由抗病基因所介导。因此，对抗病基因产物结构进行分析与研究，是了解植物抗病机制的基础，对于其病害的预防和控制也具有重要的指导意义。

迄今为止，己经从植物中分离了80多个抗病基因。对这些抗病基因的结构和产物的研究发现，虽然寄主植物不同，所对应的病原物也有真菌、细菌、病毒和线虫等差异，但抗病基因的结构和产物却有许多共同的结构特征，如C-端存在富亮氨酸重复序列 (leucine-rich repeat, LRR), N-端存在核苷酸结合位点 (nucleotide binding site, NBS), 亮氨酸拉链 (leucine zipper, LZ), 卷曲螺旋结构域 (coiled-coil, CC), 跨膜结构域 ( transmembrane domain, TM) , 蛋白激酶 (protein kinase, PK), 以及果蝇Toll蛋白及哺乳动物白介素- 1受体 ( Toll and interleukin – 1 receptor, TIR) 等。根据它们所编码蛋白的结构特征, 可将抗病基因分为7类（Hammond-Kosack & Jones, 1997; Dangl & Jones 2001; Iyer & McCouch 2004）。

第一类，毒素还原酶类抗病基因。如玉米抗病基因Hm1，它是第1个被克隆的植物抗病基因，它控制对真菌Cochliobolus carbonum小种1的抗性。Hm1编码的解毒酶能钝化病原真菌所产生的HC毒素，而HC毒素是真菌C. carbonum 小种1产生的致病因子，它决定该病菌只能感染玉米的某些基因型(Johal 等, 1992)。第二类，NBS-LRR类抗病基因。它们编码的蛋白近N端为NBS，而近C端则由LRR组成。如RPS2（Bent et al., 1994）、RPM1（Grant et al., 1995）、I2 （Simon et al., 1998）； RPP5（Parker et al., 1997）、N （Dodd et al., 2001）、L 6 (Lawrence et al., 1995)、Mla1 （Zhou et al., 2001）、Mla6 （Halterman et al., 2001）；水稻的抗病基因如 Xa1（Yoshimura et al., 1998）、Pib（Wang et al., 1999）、Pita (Bryan et al., 2000)等。第三类，PK类抗病基因。如番茄Pto基因，其产物是一种位于细胞内的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶，没有LRR结构域 (Martin et al., 1993)。第四类，LRR-TM 类抗病基因。番茄抗叶霉病不同生理小种的基因 Cf-2（Dixon et al., 1996）、Cf-4（Thomas et al., 1997）、Cf-5（Dixon et al., 1998）、Cf-9 (Jones et al., 1994),以及甜菜抗胞囊线虫的基因 Hs1 ^pro-1(Cai et al., 1997) 等。第五类，LRR-TM-PK类抗病基因，以水稻抗白叶枯病基因 Xa21（Song et al., 1995）为代表。第六类，以拟南芥的 RPW8 为代表，其编码的蛋白仅含有完整的CC和NBS结构域( Xiao et al., 2001 )。第七类，以水稻的 xa5 基因为代表，其编码的蛋白为一个转录因子 (TFIIAγ) (Iyer & McCouch, 2004)。

编码NBS-LRR类抗病蛋白的抗病基因是植物抗病基因中最大的一类抗病基因，根据NBS-LRR类抗病蛋白N末端的结构特点，又可将该类基因分为两大类TIR-NBS-LRR和 CC-NBS-LRR（Meyers et al., 2002; Pan et al., 2000; Cannon et al., 2002; Richly et al., 2002）。TIR-NBS-LRR类抗病基因主要发现在双子叶植物，至今还没有在单子叶植物基因组中发现 (Bai et al., 2002; Meyers et al., 2002)。目前在单子叶植物中鉴定到的抗病基因主要编码CC-NBS-LRR类抗病蛋白，双子叶植物中也存在大量的CC-NBS-LRR类抗病基因，相对而言，单子叶植物中的CC-NBS-LRR类抗病基因比双子叶植物中的更丰富多样 (Cannon et al., 2002)。

研究表明，NBS、CC、TIR结构域可能参与信号传导（Hammond-Kosack & Jones 1997），尽管这类 R 蛋白不具有内在的激酶活性，但NBS可以激活激酶或G蛋白，NBS具有结合ATP或GTP以及水解酶活性(Traut et al., 1994)。TIR结构可能参与植物抗病防卫反应下游的信号传导（Jones et al., 1994）。最近的证据表明，亚麻的L族多样性选择也发生在TIR区域，这个区域与相应的LRR区域共进化形成特异性（Luck et al., 2000）。LRR结构域的功能主要涉及到蛋白质-蛋白质和与配体的相互作用(Jones & Jones, 1996; Kajava et al., 1998)，据推测是抗病基因产物直接和病原菌无毒基因编码的产物或间接产物相互作用的部位(Bent, 1996; Baker et al., 1997)。Jia et al.（2000）通过酵母双杂交证明AVR-Pita编码的蛋白加工为一个176氨基酸的活性蛋白AVR-Pita_l76小种特异性的激发子，传递到植物细胞质特异地与Pita受体的LRD区域结合，从而激活细胞内Pita介导的防卫反应。当Pita中的Ala变为Ser后Av-rPita₁₇₆不能与LRD结合，因而表现感病。这一结果直接证明了LRR结构域可能就是病原菌识别的区域；Pita与AvrPita的互作第一次从分子水平验证了水稻与稻瘟病菌的“基因对基因”关系。

水稻是世界上最重要的粮食作物之一，约有一半以上的人口以稻米为主食。由病原真菌Magnapothe oryzae (无性态：Pyricularia oryzae) 引起的稻瘟病是对水稻生产危害最严重的病害之一，每年都造成严重的粮食损失。从环境保护与农业的可持续发展的观点来看，抗病品种的育成与利用是防治稻瘟病最安全有效的方法。但是，由于稻瘟病菌群体的多样性及易变性，加之人们缺乏对抗性基因的有效利用，以及对抗性机理缺乏充分的了解，以致抗病品种的感病化问题不但没有得到解决，反而因有效抗源基因的缺乏和抗病品种的短命化而成为育种学家最为棘手的问题。因此，发掘、鉴定和克隆抗病基因并合理地应用于抗病育种计划中，已成为农业科研中优先解决的重要问题。

随着分子生物学的快速发展，迄今，至少有80多个水稻稻瘟病主效抗性基因已经被报道，其中60个已经被分子定位。目前，除了水稻的第3染色体上还没有被鉴定到稻瘟病主效抗性基因之外，其余的11条染色体上均被鉴定到有主效抗性基因位点，并且有的染色体上含有多个稻瘟病抗性位点，而且有些基因位点的抗性基因是成簇存在的。目前，在稻瘟病抗性基因的克隆研究方面，正式报道的已有13个抗性基因，Pib (Wang et al., 1999)，Pita (Bryan et al., 2000)，Pi9 (Qu et al., 2006)，Pid2 (Chenet al., 2006)，Piz-t和Pi2 (Zhou et al., 2006b)， Pi36 (Liu et al., 2007a)，Pi37 (Lin et al., 2007)，Pik-m (Ashikawa et al., 2008)，Pit (Hayashi et al., 2009)，Pi5 (Lee et al., 2009)，Pid3 (Shang et al., 2009)和pi21 (Fukuoka et al., 2009)。

克隆抗病基因是对水稻抗性机理深入研究的前提，揭示水稻抗稻瘟病的分子机理可以更好地控制和降低稻瘟病菌对水稻的危害。同时，对克隆的抗病基因进行修饰和改造，可以人为地控制和增加植物的抗病性，拓宽植物的抗谱。这些方面是采用常规植物育种和改良技术所不能达到的。

发明内容

本发明的目的是提供一种水稻稻瘟病抗性基因和包含调控这个基因的启动子的DNA片段。

本发明的另一个目的是提供上述稻瘟病抗性基因所编码的蛋白质。

本发明的另一个目的是提供上述含有上述抗性基因的载体。

本发明的另一个目的是提供上述载体的宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供上述基因在制备转基因植物中的应用。

本发明的进一步目的是提供上述抗性基因产生的分子标记及其在选育对稻瘟病具有抗病性的水稻中的应用。

本发明从水稻品种IRBL7-M中分离得到Pi7基因，包括2个编码NBS-LRR类蛋白的基因Pi7-1和Pi7-2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示，它们分别编码SEQ ID NO.3以及SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，结构如附图9和附图10所示。它们的蛋白都包含2个主要的结构域：NBS和LRR区域，其中Pi7-1 NBS结构域含有保守的kinase 1a：GLPGGGKTTVAR，kinase2:NKKYLIVIDDIW，kinase3a:DLGGRIIMTTRLNSI，GLPL:EDSPCYDIVNMCYGMPLALIW；Pi7-2 NBS结构域含有保守的kinase1a:VLSIVGFGGVGKTTIA，kinase2:LEQLLAEKSYILLIDDIW，kinase3a:GGRIIVTTRFQAV，GLPL:EQVPEEIWKICGGLPLAIV，RNBS-D:CLLYLSIFPKGWK，MHDV:KTFQVHDMVLEYI。而Pi7-1蛋白的C-末端为16个不完整的LRR重复，其亮氨酸含量为14.0%（图9）；Pi7-2蛋白的C-末端为13个不完整的LRR重复，其亮氨酸含量为17.0%（图10）。

应当理解，在不影响蛋白活性的前提下（不在蛋白的活性中心），本领域技术人员可对SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列进行各种取代、添加和/或缺失一个或几个氨基酸获得具有同等功能的氨基酸序列。此外，考虑到密码子的简并性，例如可在其编码区，在不改变氨基酸序列的条件下，或在其非编码区在不影响蛋白表达的条件下，对编码上述蛋白的基因序列进行修改。因此，本发明还包含对编码上述蛋白的基因序列进行的替换、添加和/或缺失一个或多个核苷酸，具有与上述编码基因具有相同功能的核苷酸序列。本发明还包括基于所述基因的正义序列或反义序列，包括含有所述核苷酸序列或其片段的克隆载体或表达载体、含有所述载体的宿主细胞、含有所述核苷酸序列或其片段的转化的植物细胞和转基因植物。

本发明同样包括将Pi7抗性基因的主要结构部分有效地连接上合适的调节序列所形成的嵌合基因，以及在基因组中包含这种基因的植物和这种植物的种子。这种基因可以是天然的或是嵌合的。例如，将包含该基因的片段和一个组成型表达的启动子连接，该启动子可以在任何条件下和细胞发育的任何时期表达。这种组成型表达的启动子包括花椰菜花叶病毒的35S启动子等。另一方面，也可以将该基因和一个组织特异性表达的启动子或发育时期特异性表达的启动子或精确环境诱导的启动子连接，这些启动子称之为诱导型启动子。这样，环境的改变，发育时期的不同都可以改变该基因的表达。同样地，也可以将该基因的表达限定在某一个组织内，使由该基因诱导的抗病反应得到人为的控制。其中环境条件包含病原菌的攻击、厌氧条件和光等，组织和发育时期包括叶、果实、种子和花等。

本发明还进一步克隆得到所述基因的启动子，包含调控该基因的启动子的DNA片段分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

根据本发明提供的Pi7基因序列信息（SEQ ID No.1和SEQ ID No.2），本领域技术人员可以通过以下方法容易地获得与Pi7等同的基因：（1）通过数据库检索获得；（2）以Pi7基因片段为探针筛选水稻或其它植物的基因组文库或cDNA文库获得；（3）根据Pi7基因序列信息设计寡核苷酸引物，用PCR扩增的方法从水稻或其它植物的基因组、mRNA和cDNA中获取；（4）在Pi7基因序列的基础上用基因工程方法改造获得；（5）用化学合成的方法获得该基因。

本发明提供的稻瘟病抗性基因Pi7具有重要的应用价值，其赋予植物对稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）所引起的病害产生特异性的抗病反应。其适用于对所有对该病原菌敏感的植物，这些植物包括单子叶植物和双子叶植物。应用之一是将所述的Pi7基因序列连接到任何一种植物转化载体，用任何一种转化方法将Pi7抗病基因导入水稻或其他植物细胞，可获得表达所述基因的转基因抗病品种，从而应用于生产。本发明所述的基因构建到植物转化载体中，可以对所述基因或其调控序列作适当的修饰，也可以在其转录起始密码子前用其它启动子取代所述基因原有的启动子，从而拓宽和增强植物对病原菌的抗性。

本发明提供的抗性基因的另一个应用是根据所述基因序列信息产生特异性的分子标记，包括但不限于SNP（单核苷酸多态）、SSR（简单序列重复多态）、RFLP（限制性内切酶长度多态）、CAPS（切割扩增片段多态）。用此标记可鉴定水稻或其它植物的抗性基因型，用于分子标记辅助选择育种，从而提高育种的选择效率。

本发明具有明显的优点和效果。将克隆的抗病基因转入感病的植物，有助于产生新的抗病植物。特别是可以用转化技术在植物中累加多个抗病基因，而不会产生传统育种技术中伴随出现的基因组中不良基因的连锁问题，并且可以缩短育种时间。抗病基因的克隆是克服传统育种中不能在植物种间转移抗病基因的问题的前提。

本发明能够进一步提供或应用基于上述DNA片段获得的抗病的转基因植株和相应的种子，以及用本发明的基因或基于该基因的重组体转化的植株或由这类植株获得的种子。可以用有性杂交的方式将本发明的基因转入其他的植株中。

附图说明

图1为水稻稻瘟病抗性基因Pi7的克隆策略图。先前有报导称Pi1（C101LAC）、Pi7（RIL29）以及Pik对来自菲律宾的多个稻瘟病菌菌株表现出相同的反应型（Tsunematsu et al. 2000, Breeding Science 50: 229-234）；Pi1和Pi7事实上是Pik的等位基因或与其完全相同的基因（Campbell et al. 2004, Phytopathology 94: 302-307）。结合本研究室对与上述Pik等位基因具有“基因对基因，gene-for-gene”相互作用的稻瘟病菌无毒基因定位、克隆的结果，从而推测Pi7可能就是Pik新的等位基因。因此，本发明以已公布的Pi7定位的信息（Campbell et al. 2004, Phytopathology 94: 302-307）为基础，构建该目的基因区域的电子物理图谱；采用与Pik等位基因之Pik-m （Ashikawa et al. 2008, Genetics 180: 2267–2276）和Pik（Zhai et al. 2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x）相似的克隆策略来克隆该抗性基因。

图2为Pik簇等位基因对8个稻瘟病菌群体抗谱的比较。图中纵坐标为抗性频率，横坐标为8个稻瘟病菌群体（GD，广东；FJ，福建；HN，湖南；GZ，贵州；SC，四川；LN，辽宁；JL，吉林；HLJ，黑龙江）。5个Pik簇等位基因（IRBLks-S, Pik-s; IRBLk-Ka, Pik; Tsuyuake, Pik-m; IRBLkp-K60, Pik-p; IRBL7-M, Pi7）。由此可以看出，Pi7对广东、湖南、贵州、四川和辽宁的稻瘟病菌群体表现较高的抗性。

图3为目的基因Pi7区域电子物理图谱的构建图。图3A：上述Campbell 等（2004）构建的Pi7区域粗略的遗传图谱；图3B：根据Pik-m （Ashikawa et al. 2008, Genetics 180: 2267–2276）和Pik （Zhai et al. 2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x）的定位信息构建的Pi7与Pik簇等位基因的整合物理图；图3C：选基因区域存在的4个BAC克隆；图3D：Pik基因候选区域（Zhai et al. 2010, New Phytologist 180: 2267–2276）；图3E：Pi7基因位点在日本晴类型基因组上存在的具有NBS-LRR保守结构的6个抗病候选基因；图3F：Pi7基因位点在IRBL7-M/Tsuyuake类型基因组上存在的具有NBS-LRR保守结构的2个抗病候选基因。由此可以看出，在Pi7基因位点上存在两种类型的基因组，彼此之间存在很大的缺失/***；Pi7基因只有2个候选基因（Pi7-1和 Pi7-2）。

图4为水稻稻瘟病抗性基因Pi7 （由Pi7-1和Pi7-2组成）之遗传互补T₀植株的抗性鉴定实物图。图中实线箭头所指的是抗病植株，虚线箭头所指的是感病植株，说明抗性基因Pi7由Pi7-1和Pi7-2组成才能表现功能。

图5为水稻稻瘟病抗性基因Pi7遗传互补的部分T₀转化体的选择标记HPT基因的PCR检测图。图中由左至右，泳道1、15：分子量标记DL2000；泳道2：空载体 (Vector)，阳性对照；泳道3：转化受体品种Q1063，阴性对照；泳道4：供体品种IRBL7-M，阴性对照；泳道5-14：T₀转化体。结果表明，所有抗病的转化体都检测到了选择性标记的PCR扩增产物，而感病的转化体没有检测到选择性标记的PCR扩增产物，说明抗病的转化体是由于转化构建体已经整合到了高感的受体品种Q1063的基因组中获得了表达而恢复了抗性。R：高抗；MR：中抗； MS：中感；S：感病。

图6为水稻稻瘟病抗性基因Pi7遗传互补后代基因型与表现型的共分离分析图。图中由左至右，泳道1、11：分子量标记DL2000；泳道2：空载体 (Vector)，阳性对照；泳道3：转化受体品种Q1063，阴性对照；泳道4-10：T₁转化系的分离后代。结果表明，在T₁转化系的分离后代中，所有抗病的T₁转化体都检测到了选择性标记的PCR扩增产物，而感病的T₁转化体没有检测到选择性标记的PCR扩增产物，说明该T₁转化系后代个体的基因型与表现型共分离，亦即转基因在其分离后代中已经稳定遗传表达。R：高抗；MR：中抗； S：感病。

图7为水稻稻瘟病抗性基因Pi7之RNA干涉（RNAi）F₁植株的抗性鉴定实物图。图中HF4为供体品种IRBL7-M与Pik-h （是Pi7 高度同源的等位基因）之RNAi T₁转化子 kh4i-11 遗传杂交的F₁植株，其接种后的表现病为感病（S），说明Pi7的功能被Pik-h之RNAiT₁转化子所含有的构建体而干涉（破坏）了；HF6为供体品种IRBL7-M与Pik-h 之RNAiT₁转化子 kh4i-26 遗传杂交的F₁植株，其接种后的表现病为感病，说明Pi7的功能被Pik-h之RNAiT₁转化子所含有的构建体而干涉（破坏）了；图中HF10为含有Pia的品种Aichi Asahi与Pik-h （Pia是与Pik-h/Pi7 位置不同的非等位基因）之RNAi T₁转化子 kh4i-9 遗传杂交的F₁植株，其接种后的表现型为抗病（R），说明Pia的抗性功能并没有被Pik-h之RNAiT₁转化子所含有的构建体而干涉（破坏）了，因此，可作为非特异性RNA干涉的对照；IRBL7-M是Pi7的供体品种，其接种后的表现型为抗病（R），说明接种所用的稻瘟病菌株CHL381是合适的。

图8为水稻稻瘟病抗性基因Pi7之RNA干涉（RNAi）F₁植株的分子鉴定实物图。图中由左至右，泳道M（两侧）：分子量标记DL2000；泳道1：上述IRBL7-M，没有检测到RNAi构建体特异的分子标记（Hpt）, 即不含有构建体; 泳道2：RNAi T₁转化子 kh4i-11，检测到了RNAi构建体特异的分子标记（Hpt），即含有构建体; 泳道3：上述HF4之F₁植株，含有构建体; 泳道4：RNAi T₁转化子 kh4i-26，含有构建体; 泳道5、6：上述HF6之F₁植株，含有构建体; 泳道7：上述Aichi Asahi，不含有构建体; 泳道8：RNAi T₁转化子 kh4i-9，含有构建体; 泳道9、10：上述HF10之F₁植株，含有构建体。以上结果说明，HF4和HF6之F₁植株因为受到等位基因特异性的RNA干涉而使其含有的抗性基因（Pi7）的功能不表达；作为对照，HF10之F₁植株因为受到的是非等位基因特异性的RNA干涉而使其含有的抗性基因（Pia）的功能正常表达。

图9为水稻稻瘟病抗性基因Pi7之组成基因Pi7-1的基因结构及序列图。图9A：图中浅色方框表示5’和3’-UTR；深色方框表示外显子；线条表示内含子；该基因编码区的启动子（ATG）和终止子（TAG）以及各个区域的大小（bp）亦标示于其中。图9B：图中CC结构域带下划线的黑体字表示形成CC motif的氨基酸，NBS区域带下划线的黑体字表示NBS中保守的氨基酸序列。下部分独立列出的氨基酸残基为C-末端LRR区域；带下划线的黑体字表示形成LRR区域的xLDL保守基序；LRR区域后面还带有一段CNL（C端非LRR区域）氨基酸序列。双下线标示的氨基酸序列为Pi7特异的氨基酸替换[substitution，与Pik簇的其他等位基因 (Pik, Pik-s, Pik-p, Pik-m) 相比]。

图10为水稻稻瘟病抗性基因Pi7之另一组成基因Pi7-2的基因结构及序列图。图10A：图中浅色方框表示5’和3’-UTR；深色方框表示外显子；线条表示内含子；该基因编码区的启动子（ATG）和终止子（TAG）以及各个区域的大小（bp）亦标示于其中。图10B：图中CC结构域带下划线的黑体字表示形成CC结构的氨基酸，NBS区域带下划线的黑体字表示NBS中保守的氨基酸序列。下部分独立列出的氨基酸残基为C-末端LRR区域；带下划线的黑体字表示形成LRR区域的xLDL保守基序。双下线标示的氨基酸序列为Pi7特异的氨基酸替换[substitution, 与Pik簇的其他等位基因 (Pik, Pik-s, Pik-p, Pik-m) 相比]。

图11为水稻稻瘟病抗性基因Pi7表达特性的定量RT-PCR检测图。左图为组成基因Pi7-1在不同的接种时间点（0 hr, 12 hr, 24 hr, 72 hr,120hr）的相对表达水平，由此可以看出，该基因的表达类型为，从12 hr—72 hr逐步上调，然后逐步下调。右图为另一个组成基因Pi7-2在不同的接种时间点的相对表达水平，由此可以看出，该基因的表达类型为，12 hr—24 hr逐步上调，然后逐步下调。由此还可以看出，该基因在接种对照（H₂O）和接种病原菌之间表现明显不同的诱导型表达。2个基因都表现为组成型表达，因为接种之前和之后都能检测到2个基因的表达。图中纵坐标为相对表达水平，横坐标表示时间，单位为小时（h），斜纹框图为对照（接种之前），黑框图为接种对照（H₂O），空白框图为病原菌接种。

图12为利用水稻稻瘟病抗性基因Pi7的特异性分子标记的基因型鉴定图。由此可以看出，2个特异性分子标记的组合使用能够将Pi7与其它几个等位基因区分开。图12A为标记T1-795G，该标记可以将抗性品种IRBL7-M的基因型（Pi7/Pi7）与抗性品种IRBLkp-K60（Pik-p/Pik-p）和感病受体品种龙粳24Q1063 （pi7/pi7）区分开；图12B为标记A2-1879G，该标记能将抗性品种IRBL7-M的基因型（Pi7/Pi7）与抗性品种IRBLk-Ka （Pik/Pik）、IRBLkm-Ts（Pik-m/Pik-m）、IRBLks-S（Pik-s/Pik-s）、感病受体品种Q1063 （pi7/pi7）、感病受体品种龙粳24 （pi7/pi7）区分开。图中，M：分子量标记DL2000。

具体实施方式

以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。在本发明的实施例部分，我们阐述了Pi7基因的抗性特征、分离克隆、功能特征以及分子鉴定，分离的Pi7基因能够与适当的载体连接，转入植物体中，使该植物体带有一定的抗性。

实施例1 抗性基因Pik-h的抗性特征

为了比较和明确Pi7与Pik 位点4个等位基因（Pik, Pik-p, Pik-s, Pik-m）的抗谱，利用从广东（60个菌株），福建（40个），湖南（41个），贵州（60个），四川（66个），辽宁（108个），吉林（60个）和黑龙江（63个）收集的总计498个菌株对上述5个等位基因的所持品种（分别是IRBL7-M, IRBLk-Ka, IRBLkp-K60, IRBLks-S和Tsuyuake）进行了抗谱比较分析。结果表明，Pi7对广东、湖南、贵州、四川和辽宁的稻瘟病菌群体表现较高的抗性，由此说明该基因可在上述地区使用（图2）。水稻品种 RBL7-M, IRBLk-Ka, IRBLkp-K60和 IRBLks-S 已在文献（Kobayashi et al. Development of new sets of international standard differential varieties for blast resistance in rice (Oryza sativa L.). JARQ, 2007，41: 31-37）中公开。水稻品种Tsuyuake已在文献（Wang et al. Characterization of rice blast resistance genes in the Pik cluster and fine mapping of the Pik-p locus. Phytopathology，2009，99: 900-905）中公开。

实施例2 水稻稻瘟病抗性基因Pi7的克隆策略及电子物理图谱的构建

先前的定位研究表明Pi7基因定位于与Pik簇基因相同的基因组区域（Campbell et al. Development of co-dominant amplified polymorphic sequence markers in rice that flank the Magnaporthe grisea resistance gene Pi7(t) in recombinanant inbred line 29. Phytopathology，2004，94: 302-307；图3A）；本研究室的抗谱分析显示Pi7基因与Pik簇3个等位基因（除了抗性较弱的Pik-s之外）对大部分测试菌株表现出相同的抗性反应（图2）；本研究室先前的研究表明，与Pi7相对应的无毒基因AvrPi7也是与Pik簇抗性基因对应的无毒基因AvrPik/km/kp是等位的。综合上述三方面的结果，依据植物病害***的“基因对基因”学说，推断Pi7应该也是Pik/km/kp的等位基因。因此，本发明采用了与本研究室克隆Pik等位基因相似的策略和方法，完成了Pi7目标区域电子物理图谱的构建（图1）。亦即，以水稻参考品种日本晴（Nipponbare）的序列信息为基础，通过生物信息学手段，把与Pi7连锁的标记（Campbell et al. 2004；图3A）以及与Pik基因共分离的标记（Zhai et al. 2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x；图3B）进行物理位置整合，并由此构建了目的基因区域的重叠群图（图3C），以及电子物理图（图3D）。

实施例3 水稻稻瘟病抗性基因Pi7候选基因的注释及序列分析

为了确定Pi7的候选基因，申请人利用日本晴的参考序列，通过3种基因预测软件RiceGAAS (http://ricegaas.dna.affrc.go.jp) 、Gramene (http://143.48.220.116/resources/)和Softberry的FGENESH (http://www.softberry.com) 对目的基因区域进行了基因预测及注释分析，初步确定了Pi7的候选抗性基因为6个核苷酸结合位点和富亮氨酸重复（nucleotide binding site - leucine-rich repeat, NBS-LRR）的候选基因（Pi71-NP，Pi72-NP，Pi73-NP，Pi74-NP，Pi75-NP，和Pi76-NP）。

对6个候选基因进行基于基因特异性标记的存在/缺失（presence/absence, P/A）分析，结果表明，与Pik簇3个等位基因一样，在日本晴参考序列存在的4个候选基因（Pi71-NP，Pi72-NP，Pi73-NP，Pi74-NP）在Pi7所持品种IRBL7-M中是不存在的（图3E，3F）。因此，Pi7的候选抗性基因只有Pi7-1和Pi7-2，下一步将通过以下的基因功能互补实验确认其功能。

实施例4 水稻稻瘟病抗性基因Pi7的遗传互补实验及转化子的鉴定

先前的研究表明，Pik簇的2个等位基因Pik-m （Ashikawa et al. 2008, Genetics 180: 2267–2276）和Pik （Zhai et al. 2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x）都是由2个紧密连锁的基因组成的。因此，利用高保真酶phusion结合长片段PCR（long-range PCR, LR-PCR）技术，以IRBL7-M的总DNA为模板，根据或参考Liu et al. (2007, Genetics, 176: 2541-2549)和Zhai et al. (2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x)描述的实验方法和程序，将上述2个候选基因作为一个整体基因进行了扩增、克隆，然后进行了基于遗传互补的功能获得性实验（图1）。结果表明，在遗传互补后代中获得了功能互补的转化体（表1；图4）。

扩增、克隆Pi7-12的引物为：

正向引物：TTTTGGCGCGCCGGTGCGGGAAGAAGACGGGATAAAGA

反向引物：TTTTGGCGCGCCGCCGACGATAGCAACCGACAGGAGTG

利用转化载体中的潮霉素基因（Hpt）标记对转化体进行了PCR检测。检测结果证明目的基因片段已经导入抗病转化体中，而没有导入感病转化体中(图5)。

表1. Pi7 2个组成基因的遗传互补实验分析结果

^a自各个构建体的T₀植株接种对 Pi7无毒性的菌株CHL346。 R，抗病； MR，中抗； MS，中感； S，感病。

^b 功能互补成功率（%）为R+MR/R+MR+MS+S*100%

上述遗传互补的实验结果表明，候选基因Pi7-12就是Pi7的功能基因。水稻品种Q1063以及生物材料载体pCAMBIA1300已在文献（Lin et al.2007, Genetics 177: 1871-1880）中公开；水稻品种Longjing 24（龙粳24）已在文献（Zhai et al. 2010, New Phytologist DOI: 10.1111/j.1469-8317.2010.03462.x）中公开。

为了进一步确认转基因构建体在转化后代的遗传稳定性，选择部分的转化后代T₁株系，进行了抗性表现型/抗性基因型的共分离分析（图6）。结果表明，抗性表现型与抗性基因型完全共分离。亦即，转基因构建体在转化后代中能够稳定遗传、表达。

实施例5 水稻稻瘟病抗性基因Pi7基于Pik等位基因RNAi植株杂交后代的抗性及分子鉴定

为了进一步确认Pi7的功能，以及Pi7是否就是Pik 簇新的等位基因，申请人进行了基于Pik 等位基因（Pik-h）RNAi 之T₁转化子杂交后代的功能丧失性实验（图1）。结果表明，Pik 等位基因RNAi纯合稳定的2个植株（kh4i-11和kh4i-26）与供体品种IRBL7-M的杂交F₁植株都表现Pi7抗性功能的丧失。亦即，Pi7的抗性功能由于被Pik 等位基因RNAi 之T₁转化子所含有的构建体而干涉（破坏）了（图7中HF4和HF6）。作为非特异性RNA干涉的对照，含有Pia的品种Aichi Asahi与Pik-h （Pia是与Pik-h/Pi7 位置不同的非等位基因）之RNAi T₁转化子 kh4i-9 遗传杂交的F₁植株，其接种后的表现型仍为抗病（图7中HF10），说明Pia的抗性功能并没有被Pik-h之RNAiT₁转化子所含有的构建体而干涉（破坏）。IRBL7-M是Pi7的供体品种，其接种后的表现型为抗病，说明接种所用的稻瘟病菌株CHL381是合适的。

为了确认杂交后代抗性功能的丧失是否与RNAiT₁转化子所含有的构建体相关，对上述3个杂交组合的亲本及其后代进行了基于构建体特异性分子标记的分子鉴定。结果表明，特异性RNA干涉的后代（HF4和HF6）抗性表现型与其分子标记基因型相关（图8 之泳道3、5、6），而非特异性RNA干涉的后代（HF10）抗性表现型与其分子标记基因型不相关（图8 之泳道9、10）。

实施例6 Pi7基因的结构

采用移步法对Pi7的DNA序列进行了测定。利用RACE技术，获得了Pi7的全长cDNA序列并对其进行了测序。Pi7基因DNA长度为16.9 kb （包含Pi7-1和Pi7-2），其中，Pi7-1的全长cDNA序列为3723 bp，含有一个3429 bp的开放读码框，5’和3’非翻译区分别为104 bp和190 bp。通过比较基因组DNA和cDNA序列，发现该基因的开放读码框含有2个内含子和3个外显子（图9 A）。另一个组成基因Pi7-2的全长cDNA为3690 bp，含有一个3066 bp的开放读码框，5’和3’非翻译区分别为380bp和244bp。通过比较基因组DNA和cDNA序列，发现该基因的开放读码框含有1个内含子和2个外显子，而在5’非翻译区内含有一个内含子（图10 A）。

实施例7 Pi7抗性蛋白的结构

Pi7基因包含的2个组成基因编码的蛋白序列如序列表中Pi7 SEQ ID No.3和Pi7SEQ ID No. 4所示。

Pi7-1基因编码1个由1142个氨基酸残基组成的蛋白多肽，分子量为126.60 KD，等电点为6.46。利用COIL分析表明该蛋白多肽具有CC (coiled-coil) 结构域。Pi7-1蛋白属于NBS-LRR蛋白，NBS结构域中保守的kinase 1a （GLPGGGKTTVAR）位于该多肽的第290个氨基酸残基；kinase 2（NKKYLIVIDDIW）位于该多肽的第376个氨基酸残基；kinase 3a （DLGGRIIMTTRLNSI）位于该多肽的第402个氨基酸残基, GLPL (EDSPCYDIVNMCYGMPLALIW) 位于该蛋白多肽461个氨基酸残基。而该蛋白的C-端的610-960个氨基酸残基为16个不完整LRR重复，其亮氨酸含量为14.0%，其C末端还有个非LRR结构（CNL）的氨基酸序列（图9 B）。图中双下线标示的氨基酸序列为Pi7基因特异性的氨基酸替换（substitution），该位点与下述另一个组成基因的基因特异性氨基酸替换位点结合起来，可以鉴别Pi7基因与其他等位基因（Pik, Pik-m, Pik-p, Pik-s）的不同（详见实施例9）。

Pi7-2基因编码1个由1021个氨基酸残基组成的蛋白多肽，分子量为114.57 KD，等电点为8.64。利用COIL分析表明该蛋白多肽没有CC结构域，但是利用更为强大的预测工具Paircoil2分析发现有CC结构域。Pi7-2蛋白属于NBS-LRR蛋白，NBS结构域中保守的kinase 1a （GFGGVGKTTIA）位于该多肽的第211个氨基酸残基；kinase 2（KSYILLIDDIW）位于该多肽的第330个氨基酸残基；kinase 3a （GGRIIVTTRFQAV）位于该多肽的第358个氨基酸残基, GLPL (EQVPEEIWKICGGLPLAIV)位于该多肽的第415个氨基酸残基，RNBS-D（CLLYLSIFPKGWK）位于该多肽的第488个氨基酸残基，MHDV（KTFQVHDMVLEYI）位于该多肽的第553个氨基酸残基。而该蛋白的C-末端的610-960个氨基酸残基为13个不完整LRR重复，其亮氨酸含量为17.0%（图10B）。图中双下线标示的氨基酸序列为Pi7基因特异性的氨基酸替换（substitution），该位点与上述另一个组成基因的基因特异性氨基酸替换位点结合起来，可以鉴别Pi7基因与其他等位基因（Pik, Pik-m, Pik-p, Pik-s）的不同（详见实施例9）。

实施例8 Pi7基因的表达特性分析

利用定量RT-PCR技术对Pi7基因的表达模式进行了分析。在抗病品种IRBL7-M接种后不同的时间点（0 hr, 12 hr, 24 hr, 72 hr, 120h）上采集叶片并提取其总RNA，利用反转录试剂盒SuperScript^TM Reverse Transcriptase II进行反转录cDNA第一条链的合成。RT-PCR的引物为，

RRT5F：GAAGCTCTGATCAACGGTATTCC，

RRT5R：TCTTTGATCATCTTCGGGATACG；

RRT17F：TGAACTTCCACGATTGGATCCAC，

RRT17R：ACATGGTTCTTGAATACATCATGTC 。

定量RT-PCR使用CFX96 Real-time PCR检测***和SYBR Premix Ex Taq试剂盒（宝生物公司），操作按照试剂盒说明进行。图11（左）为组成基因Pi7-1在不同的接种时间点的相对表达水平，由此可以看出，该基因的表达类型为，从12 hr—72 hr逐步上调，然后逐步下调。图11（右）为另一个组成基因Pi7-2在不同的接种时间点的相对表达水平，由此可以看出，该基因的表达类型为，12 hr—24 hr逐步上调，然后逐步下调。由此还可以看出，该基因在接种对照（H₂O）和接种病原菌之间表现明显不同的诱导型表达。2个基因都表现为组成型表达，因为接种之前和之后都能检测到2个基因的表达。

实施例9 Pi7基因序列在分子标记辅助选择育种中的应用

如实施例7所述，在Pi7基因的2个组成基因中分别存在一个基因特异性的氨基酸替换位点，利用这2个位点分别开发基因特异性的分子标记Pi7-SNP-1 (Pi7-SNP-1F: GCAGGTCAGCCAAGCAAT，Pi7-SNP-1R：CAACCGTTGTTTTGCCTCC，扩增产物用限制性内切酶MseI进行酶切)和Pi7-SNP-2 （Pi7-SNP-2F: CGTGGAAGTTCAACAAAAGG，Pi7-SNP-2R：CAGCACCTGTATTATCCCAT，扩增产物用限制性内切酶NdeI进行酶切），二者结合既可用于鉴别Pi7基因与其他等位基因（Pik, Pik-p, Pik-m, Pik-s）的不同（扩增产物的酶切效果不同；图12之泳道1与泳道2-5比较），也可在杂交后代用于鉴定Pi7位点上的各种基因型，即Pi7/Pi7和pi7/pi7的植株（酶切效果不同；图12之泳道1与泳道6-7比较）。这些信息可在分子标记辅助选择育种过程中加以应用，以提高育种的目的性和效率。

实施例10 遗传转化Pi7基因产生的抗性植株的应用

将Pi7基因克隆到pCAMBIA1300等植物转化载体，导入EHA105等农杆菌菌株中，用于转化感病的水稻品种Longjing 24（龙粳24）及Q1063，共获得了285株转化植株，其中155株表现抗性反应（表1）。这说明可以用Pi7基因转化水稻感病品种，经过自交、纯化选择等一系列育种程序之后，即可产生抗病品种而应用于生产中。

序列说明

SEQ ID NO. 1 & 2是Pi7-1和Pi7-2的核苷酸序列；SEQ ID NO. 3 & 4是SEQ ID NO. 1 & 2的编码产物；SEQ ID NO. 5 & 6是带有启动子的Pi7-1和Pi7-2核苷酸序列。SEQ ID NO. 7 & 8是用来扩增Pi7-12的引物对；SEQ ID NO. 9 & 10和SEQ ID NO. 11 & 12分别是引物对RRT5F、RRT5R和RRT17F、RRT17R；SEQ ID NO. 13 & 14是引物对Pi7-SNP-1F和Pi7-SNP-1R；SEQ ID NO. 15 & 16是引物对Pi7-SNP-2F和Pi7-SNP-2R；SEQ ID NO. 17~26分别是Pi7-1的kinase 1a、kinase 2、kinase 3a、GLPL序列以及Pi7-2的kinase 1a、kinase 2、kinase 3a、GLPL、RNBS-D、MHD序列。

序列表

<110> 华南农业大学

<120> 稻瘟病抗性基因Pi7及其应用

<130> *********

<160> 22

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 9101

<212> DNA

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<220>

<221> 5'UTR

<222> (1)..(104)

<220>

<221> CDS

<222> (105)..(668), (819)..(1387), (4160)..(6455)

<220>

<221> 3'UTR

<222> (6456)..(6645)

<400> 1

aaccttgctc taattacact cggagtcgga gagtcaggag gtgagagagt agcactcaac 60

gcaaaagggg atcggccgag ccgccgatcg aggcgcgagt agggatggag gcggctgcca 120

tggccgtaac cgcagccacg ggggccttgg cgcccgtgct agtgaagctg gccgctttgc 180

tggacgacgg ggagtgcaat cttctggagg ggagccggag cgacgcagag ttcatcagat 240

ccgagctgga ggccgttcat tctctcctca ccccaaatat cttggggagg atgggggatg 300

acgatgcggc gtgcaaggat ggcttgattg cggaggtccg ggagctgtcc tacgacctgg 360

atgatgccgt cgacgacttc ttggagctca atttcgagca gcgaagaagc gcaagccctt 420

tcggtgagct caaggcaaga gttgaggagc atgtctccaa tcgcttctct gactggaagc 480

taccggcggc gagccttccg ccgtcgtcgg tacaccgccg agctggcttg ccgccaccag 540

atgcagagct ggtggggatg gacaaacgta tggaagagct caccaaattg ctggaacaag 600

ggagcaatga tgcttcacga tggcgcaagc gaaaaccgca tttcccgctc agaaaaacag 660

ggctaaaggt acggttggat ctcgattctt cacaaatata gcttcctccg atagcagtgc 720

caatgaattt gtttacttct ctcttgattc tttaatttgg aagtactgta taacaaacat 780

ggagggatcg tcatttaact taattttttt tgttgcagca aaaaatcgtg atcaaggttg 840

ccatggaggg caataattgc cgttcaaaag caatggcttt agttgcgagc actggaggag 900

tggactcggt tgcgctcgta ggtgatctaa gagacaagat agaggtggtc ggttatggca 960

ttgaccccat caagctgatc tccgcgctcc ggaagaaggt gggcgatgcg gagttgctgc 1020

aggtcagcca agcaaacaaa gatgtgaagg agacgacgcc gatgcttgcg ccggtgaaat 1080

ccatatgtga atttcacaag gtcaaaacag tttgcatcct tggattgcca ggtggaggca 1140

aaacaacggt tgccagagaa ttatatgacg ccttgggaac gcacttccca tgccgggttt 1200

tcgtgtcagt ctctccaagt tctagtccca gtcccaatct cacaaagact cttgcagaca 1260

ttttcgctca agcacaacta ggagtaaccg atacacttag cacaccatat ggtgggagtg 1320

ggaccgggag agctcttcaa caacatctca tcgacaacat atcagctttc ctcctcaaca 1380

aaaagtaagc aatatcttat atctcttatc tagcttgtcc ttaatccggc ttcccaaatt 1440

aaagtgaaca ggctatatgt ccatataatg ttgggttttt ttttttctgt cctcgatgag 1500

gtatatatca agatatgcca aacttttttt aattagcgtt actttattct acctagtaaa 1560

tagatacaga aatggggcag gcccctcctt tgtgacaggc caatggtttt atgatgtgga 1620

aacaactccc ttatcactga agctcttgct attactcgtg atggtactga tcttgcaaag 1680

gcttgcagta tttgtaaatc cacagggagt ggtcatcttt ttttttttaa gataatgaat 1740

agaaatctgg cctctatata gaaagccaaa ggttacacaa gtgcatacac tccaaatctc 1800

aaagctgaga aacacgaaaa acaaacgacc aaaaagaaaa gacgataaga ttaagtttca 1860

agcttttcct ccttgcttca gaaaacaggg aaatgcagag ctagcccgct cttcccctgc 1920

catgccctct cactgccatt gcaactacca caaaagctcc cctgtttcgc cgtgagcgaa 1980

gggaggggat ggaactagtc tgctgctttg ttgtcgccaa gcactggttt catgctgccc 2040

aaacaaccta tgccccgcta gcgataacga gtctgttgcc gccatgctgt tgtcgctgga 2100

gagcacttgt cgctgctcag ctatgtgtta agtaagctac taacaatctc tccattctct 2160

tgtagactgc ttataaaaga ttgtacttca actttttatt aatgaaatag agttcctgcc 2220

ttacaacaac aagaacgaga gagagagaga gagccaatat cacgagttag cactgtgaag 2280

acttcctgac tgttatgtct tcaagaacag tataaaagca tttgccacta taaaaatatg 2340

atagccctca agatcattaa aaatatgtca tgttctttta ccttcataac aaccagtatc 2400

acaaatatga aaacatttaa aggaaaatca gtatttgcca tttatgtaaa gaaaaactag 2460

actagaactc tgggctttta ttttagtgca cactgtatac atgtgtgttc tttgacgtat 2520

atacttgata ttttttcaaa aacttttggg ggcatatctg taacccatgc cccatgcatc 2580

caaagtagta gtgagacaac tttcgtatca atggacatgt ggcattaaat ttaatcccaa 2640

tatttgttct ctcgaagtcc tgaacatata attggacaaa attatataat ttaattaggc 2700

caattgagcc atatatacac acactataag aaacttctac aaaacaaaca ttcgctcctt 2760

ttaggttttg accagtctat acatgaacca gccaacggtg tgctggtctg actataaatg 2820

tttttttaga gagtaaaggc accttccagt acctctctcg aggacagtaa aaacacccat 2880

gctttaaggt tatgaacaac aaagcataga acaaccacaa gaaaaaaaaa aacaactaga 2940

acaagttctg gaactagtta gggattcggg aagccattgc ttgctggctt gggacaagct 3000

atgcctgcca ttggactatg gtggagactg ggcataaagg atctcaatct cttggagatt 3060

ggcctatgtc ctaggtggcc atggctgact gcaaggagat atatttcttg caacggaaat 3120

tttcattgca aaagctgaaa atcgttgcga tatgtaccta ttgtgacata attgaatcca 3180

ttgggagccg tagcaataaa tcccgtggta ataggctatt gcaatgattt tccgatggtt 3240

gcataaaaag gtgctattac aatggttttg cattgctatt gcaacaactt gatatgtcat 3300

aggtatttat tgcaacagtt tgtaccatgc tgcaataaga tttcgcaaca cagacctatt 3360

cattaaatag cctatttcca cacattcatt tttgtggcaa taattcagtg cgacaagcat 3420

gttctatagc tataacctga tgcaacgggt tagacttgtt gcagtaactt attagcacat 3480

ttaatttttt actaaattta tattgattca actatttcaa catcattcaa tacagtaaat 3540

actggaaaat gcaagcaatc tccaaaaatt caccaataag agaaacgaat taaatcatat 3600

acacaattat ttcacaccgt acagtgcact taagtgtagg aaatataatg ctatatacat 3660

ttccaaccct caatacaggt tctgtaaata atgaaaagaa acatcaattt gatttcttga 3720

ccggtccctc tgagacacac agtgctttcc tcagcaacat cgttgccgat ctatgtaact 3780

tgtaaactcc ttgtgcttaa taaattctgg ccagggttac ttcagcctgc atggcgaaaa 3840

aaaagaactt gttagggaga tcgcaaacaa atgttagctg ccccatttct tctctactga 3900

ccataaaagc tctaggatca ggtcatgaaa acaatgccgt cagaccggaa atactcaaga 3960

ttcagaacac gactcctagg aactgcaagt ttaaatttca acaaaagcaa aatacaacca 4020

gatgacaaac taatatatat cagctgactg ttcatctcaa gtggactcac atctgtgaaa 4080

ttgttagttc tatgcatata tgctaatgta atactaatat gctattgagg cttattactc 4140

ttctcgactt ttataggtat ctcattgtaa tcgatgacat ttggcattgg gaagaatggg 4200

aagtcatcag aaagtccatt cccaagaatg atctgggtgg tagaataatc atgactactc 4260

gtcttaattc aatagctgag aagtgccaca ctgatgacaa tgatgttttt gtctacgaag 4320

ttggggatct agataataat gatgctttgt cgttgtcttg ggggatagca acaaagtctg 4380

gggcaggcaa caggatcgga actggagagg ataatccatg ctatgatatt gtgaacatgt 4440

gttatggtat gcctttagca cttatttggc tgtcgtcagc attggttgga gagatagaag 4500

aattaggtgg tgctgaagtg aaaaaatgta gggatttgag acacatagag gatggtattt 4560

tggacatccc atccttacaa ccattggcgg agagtttatg ccttggttat aaccatcttc 4620

ctctttatct gaggactttg ttgttgtact gtagtgcata ccattggtct aacagaatcg 4680

aaaggggtcg tctggtcagg aggtggattg cggaaggatt tgtgtcggaa gagaaagaag 4740

cagaaggtta ctttggcgag cttattaaca gaggatggat tacgcagcac ggagacaaca 4800

acagttataa ttactatgag atccaccccg tgatgctggc cttcctgaga tgcaagtcca 4860

aggagtacaa ttttttaaca tgcttgggtc tgggatctga tactagtact agtgcatcct 4920

ccccaaggtt gattcgccgg ctgtctcttc agggggggta tccagtggac tgcttgtcaa 4980

gcatgagtat ggatgtgtca cacacttgca gccttgtcgt ccttggtgac gtggcgcgac 5040

ccaagggaat ccccttctat atgtttaagc gcttgcgagt gttggacctt gaagataata 5100

aggatataca ggattctcat ctgcagggca tatgtgaaca gttaagcctc agagtgaggt 5160

accttggtct caagggaacg cggatccgaa agctccctca ggagatgagg aagctgaagc 5220

atttggagat tttgtatgtg gggagcactc ggatcagtga acttccgcaa gagattggag 5280

agctgaagca tctgcggatt ctggacgtga gaaacacgga catcactgag ctcccactgc 5340

agatacggga gctgcagcat ctgcacactc tggacgtgag gaacactcca atcagtgagc 5400

tcccgccgca ggttggcaag ctgcagaatc tcaagattat gtgcgtgagg agcactgggg 5460

ttagggagct cccaaaggag attggggagc tgaatcatct acagactctg gacgtgagaa 5520

acacgagggt gagagagctg ccatggcaag ctggccagat ctcccaatcg ttgcgcgtgc 5580

ttgccggtga cagtggcgat ggcgtgcggt tgcccgaagg cgtctgcgaa gctctgatca 5640

acggtattcc aggggctacg cgtgcaaaat gcagggaggt tctgtccatc gcgatcatcg 5700

atcgtttcgg acctcccctt gttgggatat tcaaagttcc cggcagtcat atgcgtatcc 5760

cgaagatgat caaagaccac ttccgcgttc tttcttgcct agacatcagg ctctgccaca 5820

agcttgagga tgatgaccaa aagttcctcg ccgagatgcc caacctgcag acgctcgtgc 5880

tgaggttcga ggccctacca agacaaccca taaccatcaa cggcacaggc ttccagatgc 5940

tggagagctt ccgtgtcgac agccgggtgc caaggatagc cttccatgaa gacgccatgc 6000

ccaacctcaa gcttctcgag ttcaagttct acgccggccc agcaagcaac gatgccatcg 6060

gcatcaccaa cctgaagagc ctccaaaagg tggtctttcg gtgctcgcca tggtacaaga 6120

gcgacgcccc tggcatcagc gccaccattg acgtcgtgaa gaaagaagcc gaggagcatc 6180

ccaaccggcc gatcaccctc ctcatcaatg ctgggtataa ggagatatca actgagtcac 6240

acgggagcag tgaaaacatt gcgggcagca gtgggatcga tactgagcct gcacaggcac 6300

agcatgataa tctccctgct gttcgagatg actacaaggg aaaagggatt cttcttgatg 6360

gcaggtgtcc tacctgcggc cgagcgacta aaattgaaga ggaaacccaa gatcgagtag 6420

cagatattga aattcaaaca gaaactacta gctagctagt accgctgtct aattttattt 6480

gtattaaata ctctccttca tgtaatactc taagtccccg ctcaattttt cttgcctccg 6540

caactctaca tgatactcaa aactgatttc ttacctccct ttgattgtag aaaaaacatg 6600

ggaagtttgg aggatttcaa tcctatgaaa aggactttga gaaacaaatt acggaatcct 6660

atcttttcct ttaaaagata tataatagaa aatcctatag agatttttat aggaaagtta 6720

acaaaagcct caatcttatg gagaattcct gtgtttattt gcatagagga aagtgagact 6780

cacctaatca ggggcggttc tagtgggtgg tccaggtgat ccctggacca ccctaaaatt 6840

tggcccatga gaaccgcccc ccccctcctc ctcccggggt tggtcgaaac cagaaaaaag 6900

gccactgagc taagctaggg ttagggagag gtgtagccat gaactagcca cagcagcacg 6960

catcgctggc tgccgcctcc gcctctgcgt cagcgccagc gtgccgtctc cccggctctc 7020

gactctgcct ccgcctccgc cttggcgccg atgcgtcgcc tcctcggctc ccgcttctac 7080

ctcagcgcca gcgtgccgcc tccgccttag cgccgcctcc tcgcctcctc ccttccccga 7140

ctcctccagt cccccactcc tgtcggttgc tatcgtcggc gggcggcgac caacgcctac 7200

aagccaacta cggctgcctg ggcaagccgg cggccacccc cgcccctgga aagggaaaac 7260

attgccattc cacaggcggc gccaggtccc ctttctctct agctttcttg ttgctcagca 7320

aagttcaaag gtcagtagac atttcttgtt ggttttttgc aatgttgccc tatgcagtag 7380

tgagtagtca gtactcagta gtagtgctag tgaaaaattt ctgccttgag tgtagtgaaa 7440

agcaagctga gaaatagcat gtgtgacaaa ttattaaatg atggtttaat cacatctatt 7500

gagcgggtta ttttctctca agttagcaaa gaagacatta tgcataattt catgtctata 7560

tatgaacgga gagtagaaaa gaagtagggt tttgtaatct tctacttatc tattataaga 7620

tatttgaatg attatgttct aactttcgta acttcaaatt tagatgttgg ttttaagcaa 7680

gttgtgatgt tgtgagatat attgctacat ttcaattata tttttattat ttttgacaca 7740

tttggcttga atttgtaaca atgtgacaat ttggagcatc aagtaggact acccgacgat 7800

tcatgaaacc aatgtgccga tatttagcgg ttcttaatca tactgaggta agaaggcaac 7860

attttgcaaa agtagaattt cttcatgaaa atcaggctta tagctttaat gttcacaaac 7920

tagctaagtt tccttgtacc ttagaggagg ggcatcatgt tcgattctca aatactcctt 7980

gtaatctaag taggaatgta aataatttgg ttgttaatga ataaaatgcc agaattttat 8040

tctaaaagaa tatgtaattc aaattaatat tattctagat gtatcttgaa tagcccatta 8100

gcactggacc agtctttcaa gttgggtcag tggtcggtac cattgcctgg cccatcatgg 8160

aacagaatgg ccatggtctg atcgcaatgg gccgaggcat gacgcgctgc gctttcgaaa 8220

tcacgggcct gagctgtcat gagggctatc ctgggccagg cccgcgagac aagagggtgt 8280

cggacaatgc aacaacaacg agaggcaata agcagagctt atgcattgca cgaccaacaa 8340

agttgtcact tacatccctt attattctca atcttaatac tatctccgtt caaaaaaaag 8400

tagactttta gatacgaatg tgaacaaacg tcctcatcaa tcttgcctgc tgataaagca 8460

accgcagcta ccacgcacta tgcagggatc gatcgatcga tggatggaca tattattact 8520

caacaaagta gaggcattaa tccgcttgca gactaatcag attcaggcga cagcacgcgg 8580

ctgctgattc atcagatggc attgcttcaa attgttcgct ttcaccatgc cctgcaccat 8640

gcatcattta gatatttatt ttactgtact catagtaatt aaccactgaa aattcactct 8700

aggaaatcgt gtgttaactg ttaacctggt agattttgat catgaattgg ttgatgtcgt 8760

cgagcgatat gacgccctcg tacgcggcgt tgaaacggta gctgtcgtca tcgcgtccag 8820

acgccaccag cagcggcggc gcaggcggca gctgctccac gcagctgtac tcgcactcgt 8880

cgtggcactc gccgtcgccg ccgccgccgc cgccgccgtt ctccgccgtg atcgccacct 8940

gcagcgtcag gtgcacctcc agcgtcacga acacgcccac caccttcgcc ggcgacccca 9000

tcgccgtcgg ccgctgcatc ttgtagctcg acatccacga gaatatgtac gccgccatcg 9060

acgacgagac gccgacgatg ttctgcttcc tcaggctgtt c 9101

<210> 2

<211> 7630

<212> DNA

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<220>

<221> 5'UTR

<222> (1)..(1232)

<220>

<221> CDS

<222> (1233)..(2224), (2389)..(4462)

<220>

<221> 3'UTR

<222> (4463)..(4706)

<400> 2

ggcctccgcc caaaagcctc acccccaagg ccccaatctt cccaccgcgc cgctgtcccc 60

cccccccccc ccccccccaa tcttctggcc tggccagctc tggtcggagg agggttcagt 120

tccatgggtg cgccccctgc ccatccctcc acttctactt tcgtcttgag atctcgccgt 180

ttctgatctc cttgccatgg caaccagttg atttggctgc caagatcgtc cgtgctttgc 240

aaaggtgaac aatctttttc ttcttgggct ttcactttgt tgtgttaata gactcagcgc 300

cgtcgcaact tgcaaataaa aaggttcaga tcggaaaatg gaaataccgt acacagtagt 360

ctatagagaa tcgactagta tttcctgact gtaagtaagg aagttgtagg taccatgttc 420

tgatgattat ctttgaagct tggaggggga caaaaagttg ggagagaaac aagaatgtat 480

ttgttcactt gattgggggc agtaggtaaa atctcagcgt taggaatttg cacctcttta 540

ttaagtttga ctaaatttat agaaaaaaat tagcaacact taaaacacca aattagtttc 600

attgaatcca acattgaata tattttgata atatgtttac tttgtgttca aaatgttact 660

atatttttct ataaatttga tcaaatttca ataagtttga ctagaaaaaa aagtcaaacc 720

gacttataat atgaatataa atggagggag tagattataa attatcttta ttataatact 780

ttgagtgtac aaacgaatga ataaagttta caaagttgaa aagttatttt taaatactat 840

tccgataaac ctgtatatag agaacttgtg aaaaaaaaca ccgtttgaaa tgtgtctgtg 900

ataatctata agaggaacgg ggcctaaata tattcctttt ttcctacgaa aatgcaagaa 960

gtattgccta atatattgat agagctgaag ttttaaagta aaatgaaaca tttgcatgag 1020

gcagcactgg acaaaaagcg cttgtgaaaa aaatatgttc caaatattat taattcattc 1080

atggtatggt ctttattttc attttccccc cttatccatg ggcaggacac ggaaattctc 1140

agcaggttcg cgcttgatct gaactgtctg tggctcatac tctcttgtgc ttgcaacagc 1200

tgaaagttgc agtgagaagt acagagaaca agatggagtt ggtggtaggt gcttccgaag 1260

ccaccatgaa atctctcttg ggcaagctgg gcaatcttct agcccaggag tatgctctca 1320

tcagcggtat ccgtggtgac atccagtaca tcaatgacga gcttgccagc atgcaggcct 1380

tcctccgtga tctcagcaac gtgccagagg gtcacagtca tggccaccgg atgaaggact 1440

ggatgaagca gatccgagac atcgcctatg atgttgagga ctgtatcgat gactttgccc 1500

accgcctccc tcaggattcc atcagcgatg ccaaatggtc cttcctactc acaaaaatct 1560

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tacgggcaca acagatcgca gatcgacgta gtagatacgg agtgaacaac ccagaacacc 1680

ttgacagtag cagcagtgcc aggacccgtg ctgtcaatta cgaaattgct gagtatcagg 1740

tcacaagccc tcagatcatt ggtataaagg agcctgtggg gatgaagacg gtcatggagg 1800

agcttgaggt ttggttaact aatcctcaag ctgaaaatgg gcaagctgtt ctgtccatag 1860

tcggttttgg aggtgtggga aagactacca ttgccacagc attgtacaga aaagtcagtg 1920

ataaatttca gtgccgggca tcagtagctg tgtctcagaa ctatgaccaa ggcaaagtcc 1980

tcaatagtat tctgagtcaa gtcagcaatc aggagcaggg cagcagcaca acaattagtg 2040

agaaaaagaa cctcacctca ggcgctaaga gcatgttgaa gacagccctg tcactgctca 2100

gaggtaattg tatatgtcag ccagaaaatg atggaaaccc tgataataca ccaatcaggc 2160

tgcaggaaac aacggacgat gatcaaaacc ccagaaaact ggaacagctc ctggccgaaa 2220

agaggtacct ttttttgtaa ataaaattgc tttgcttatc tgtaaattaa cttactcatc 2280

ccactctaaa tctaatgttt atttccttct atacacagca caactccatc ttttgaatgg 2340

gttttatttt tctcacttgt gctcattttt tttttatcat ctctgcagtt atatcctctt 2400

gattgatgac atttggtctg ccgaaacatg ggagagtatc agatcgattt tgcctaaaaa 2460

taataaaggc ggtagaataa tagtgactac aagatttcaa gctgttggtt caacatgctc 2520

ccctcttgaa actgatcgtt tgcatacagt tgattttctc accgatgacg agtcccaaaa 2580

cttattcaat acaagtattt gtgaatcaaa gataagaaaa gatagcaaca aagtagacga 2640

gcaagtccct gaggaaatat ggaaaatatg tgggggattg cctttggcca tagtcaccat 2700

ggctggtctt gtcgcctgca acccaaggaa agcctgctgc gattggagta aactttgcaa 2760

atcattattt ccagagcaag aaactcctct taccctcgat ggtgttacaa ggatactgga 2820

ttgttgttac aatgatttgc ctgcggatct gaagacttgc ttattgtact tgagtatatt 2880

tccgaagggt tggaaaatta gtaggaaacg tttgtcccgg cgatggatag ctgaaggttt 2940

tgctaatgag aagcaagggt taacccagga aagagttgca gaggcatact ttaatcaact 3000

cacaagaagg aacttagtac gtcccatgga gcatggcagc aatgggaagg taaaaacgtt 3060

tcaagttcat gacatggttc ttgaatacat catgtccaaa tcaatcgaag agaattttat 3120

tactgtggtt ggtggacact ggcagatgac tgcaccaagc aataaagtcc gtcgactgtc 3180

gatgcaaagc agtggatcca atcgtggaag ttcaacaaaa ggcctgaact tggctcaagt 3240

gagatcactg acggtgtttg ggaacctgaa ccatatgcca ttccattcat tcaactatgg 3300

gataatacag gtgctggatc ttgaggactg gaagggtttg aaagagagac atatgacgga 3360

gatatgtcaa atgcttttac tcaagtattt gagcatccga cgaacagaaa tttccaaaat 3420

tccctccaag attcagaaac ttgagtactt ggaaactctt gacataaggg agacatatgt 3480

cagggacctg cctaagtcaa tagtccagct aaaacggatc attagcatac ttggagggaa 3540

taaaaacaca cggaaggggc tgaggttgcc tcaagaaaaa agtaagaagc caattaaaaa 3600

cccgtcgcct caaggaaaaa caaaggagcc cgcaaagaaa ggattcttat cccaagaaaa 3660

aggtaaaggc gcaatgaaag cactccgtgt actgtcaggg attgagattg ttgaggaatc 3720

atcagaagta gctgcaggcc ttcatcagtt gacagggcta aggaagcttg ccatatacaa 3780

gctcaatata acaaagggtg gtgatacctt caaacaatta cagtcctcca ttgagtacct 3840

tggcagctgt ggtctgcaga ctctggccat caatgatgag aattctgaat ttatcaactc 3900

actgggcgac atgcccgcgc ctccaagata tcttgtcgcc cttgagctgt ctggcaagtt 3960

ggagaagcta cccaagtgga tcaccagcat cactactctc aacaagctaa ccatatctgt 4020

aacagttctt aggactgaaa ctttggagat cctccacatt ttaccttcat tgttttccct 4080

caccttcgcc ttttcactta gtgcagcgaa gcaggatcag gacataataa aggacatcct 4140

tgagaataat aaattggaca gtgatgggga aatcgtcatt ccagctgaag gattcaagag 4200

tcttaagctg cttcgcttct ttgcaccttt agtgccgaag ctcagctttt tggacaagaa 4260

tgcaatgcca gcactcgaaa tcattgaaat gcggtttaaa gacttcgaag gtctatttgg 4320

catcgaaatc cttgaaaatc tccgtgaggt gcatctcaaa gttagtgatg gggcagaagc 4380

aataaccaag ttccttgtaa atgatttgaa ggttaatact gagaaaccaa aagtatttgt 4440

tgatggcatc gtcactgcat gagaagtaaa attgctgcaa atcggagaac ttaccaatca 4500

tctgaggctt cccctctatt attactctct tagaatatat tgttattatt gctcaccttg 4560

caaaataaaa tagggatggc atagcatatt gctacaacgt accatggttc catcatagtt 4620

gatttcactt gtcattacag tgtctgttca gttgtgtttt ctattaataa aagggagatc 4680

tccgcaagaa accattatta tacttatatt cggttattga actctataaa tgatgggatt 4740

gctatattta tggtgccaca atttccatga gtgcggtatt tttttttcta gcagttggct 4800

ggtgttaaga tttgtgctgc cattgctcct ctattattgg tgcccaaaat tacgctttgc 4860

actatgttca cagttgtaaa acttacctaa atttcgtgta ttagtactgt aatgttgtga 4920

ttttcgcgtc cagttatatt tttttctttg ccagaagttt gatttcaagg tatatctggt 4980

aagcttcagc cggattcgtt aagtttttag tttaatcagc taaactttta acagtatgca 5040

tgcactagtt tctcccgtta tcttatccaa tataattaat gggctaattg gatctatgcc 5100

attacaaaca tggcaagatt cagaaaaatg ctactacaat ttgtctattc atagctgtgc 5160

tagtgaaatt ttacaaaatt ggaaccgtgc tattgatatc acgttttcca tccatctttt 5220

cttttttttc cttttcttct ttatcccgtc ttcttcccgc accgacgaga ggcgagtggc 5280

ggcgggaccg gcaagcgatg gcaggacctc ggcagctcag tggtggcagc ggcaaaaggg 5340

aaaggggaag gggtaggaga gaacctggcc cgccgacgca agcatgttgg tcgtcgtctt 5400

ccccgaggag cttgagcagt ggcaatggta gaggaatcca aggaggccga ggaggttgag 5460

cggcactaat ggtagaggat gccgaggagg tcgagcatca gcgagcttgc cctgggtggg 5520

cgagtgaggg agagctctcc caagtgtctg cgaagctctc atcttcgttt tcctcatccc 5580

cactttgctc ctcttccact actgctgttg aagctagcgg ccctctctca ccagatctgg 5640

gcggagctca agcgaggcgc caccaccgac gatggagctt cgcgtggacc ccacagcctc 5700

acccgattgc catccctcct accctcatca ctccatctcc aagcccaaat cccacctccc 5760

ccaccggctc ctcctcctca gcccctgccg tggcagccga ggccaccgat gggccaaccc 5820

tcaacatcgt ctcgaagcag ctccgcgcac tgtggaagaa gcacaaccaa atcctccaga 5880

tggaggagtc gctcactggc gggaggaagc tgaacaagga gcaggaggag gtgctccgat 5940

ccaagcccat cgtcatcgcg ctcattgatg agctcgagcg gatgcgtgcc ctgctcgccg 6000

acgccctcgc cgaggagctc tcctcctgcc ccgccccttc cctatctgtc actccctcct 6060

cctccacctc ctccggcgct gatttgtccg tcaaggatct cctcacgctc atctacttcg 6120

gctccctctt cgacgtcaag tcgcagatcg agttcgtcac caccatgctc gcacgctaag 6180

gagctagact gatgcatcac ctacgactat gtccgtcctt gccgcagcac gacttgctac 6240

ggtcccgcct cacgccccgt cgctcgccgg tcccgccgcc acttgcttct catcggtgcg 6300

ggaagaagat gggagaaaga aggaagaaaa cgggaaaaaa agagatggat gaaaaacgtg 6360

acagcaatag cacggttcca atttcgtaaa atttcaatgg caccgctacg aatagaagaa 6420

ttgtagtagc atttttctga atcaacatat ttgtaatggc atggatccaa taaaccccaa 6480

atttatttta tgccaataca aatattggca actggtgtca ttaacgtata aatgggtcgc 6540

ctacataaaa ccttccgcgt ccttcttggt tgaacaggta attaattgca accattttct 6600

gaaaaaattg actggaagtc tgaaaccgtc cctgctactc cctgaatgct ttagttcaat 6660

ctctatgaag ctccatccaa acaaaatctc cagatgatat ttcattaaaa acatcatgtc 6720

cagaactgtc cagtatccaa gaatggctat gatcttttct gaattctgga ctcgggactt 6780

atattacatg tatcaaatcc agttattttc tggagctaca ccagatgaaa tcaccaagta 6840

aaacaattat ataaggatgg tgagttgtta attaattaca gctttgatag accactctgt 6900

ttgttaatgc ctgacaagag ttcacaaaga aaaaaataca caggattaca aaacttttta 6960

gatactatct gatgtgtgtt aattctctca aatactatgt acctgaacaa acaagagaga 7020

acatgttgtg aattgtgatc tcctcatgcg agtgacctga aactctctac agggtcagac 7080

tcctcaagca tcactgcagc ctggaaacaa tcagcagcat cattgatcct cccatcattc 7140

ctgtgaactc tccctaaatg aagccaagcc atcctgttcg taggctcaat tctcagtgca 7200

tcagagagga agcatctcgc tgcagggaga taccttgacc cttgcttgca gagaagtgca 7260

ccaatggcca ccttggatgg aacatgctct agctctatcg agaatgcgtt gacgtaggca 7320

gccagtgcct ccttgttctg atctcgcgcc tcgagcatga aacctgaact tatagcatcc 7380

acgagtcaga ttttgatgtt gaattcagtt gaatgcagag aattgtcatg ttagtgttac 7440

atagaagtgg tgaaagttca agtttagttg agttgatcac cttctgcatg cattgttgca 7500

gccgagtagg attttagggc tctagccttc tgcagacata tctcagcgtc tctccagatt 7560

gagagactgg agtacaggtt tgcaagtcct tgccatattt caaactcact tacactgtca 7620

ttctgtccct 7630

<210> 3

<211> 1142

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 3

Met Glu Ala Ala Ala Met Ala Val Thr Ala Ala Thr Gly Ala Leu Ala

1 5 10 15

Pro Val Leu Val Lys Leu Ala Ala Leu Leu Asp Asp Gly Glu Cys Asn

20 25 30

Leu Leu Glu Gly Ser Arg Ser Asp Ala Glu Phe Ile Arg Ser Glu Leu

35 40 45

Glu Ala Val His Ser Leu Leu Thr Pro Asn Ile Leu Gly Arg Met Gly

50 55 60

Asp Asp Asp Ala Ala Cys Lys Asp Gly Leu Ile Ala Glu Val Arg Glu

65 70 75 80

Leu Ser Tyr Asp Leu Asp Asp Ala Val Asp Asp Phe Leu Glu Leu Asn

85 90 95

Phe Glu Gln Arg Arg Ser Ala Ser Pro Phe Gly Glu Leu Lys Ala Arg

100 105 110

Val Glu Glu His Val Ser Asn Arg Phe Ser Asp Trp Lys Leu Pro Ala

115 120 125

Ala Ser Leu Pro Pro Ser Ser Val His Arg Arg Ala Gly Leu Pro Pro

130 135 140

Pro Asp Ala Glu Leu Val Gly Met Asp Lys Arg Met Glu Glu Leu Thr

145 150 155 160

Lys Leu Leu Glu Gln Gly Ser Asn Asp Ala Ser Arg Trp Arg Lys Arg

165 170 175

Lys Pro His Phe Pro Leu Arg Lys Thr Gly Leu Lys Gln Lys Ile Val

180 185 190

Ile Lys Val Ala Met Glu Gly Asn Asn Cys Arg Ser Lys Ala Met Ala

195 200 205

Leu Val Ala Ser Thr Gly Gly Val Asp Ser Val Ala Leu Val Gly Asp

210 215 220

Leu Arg Asp Lys Ile Glu Val Val Gly Tyr Gly Ile Asp Pro Ile Lys

225 230 235 240

Leu Ile Ser Ala Leu Arg Lys Lys Val Gly Asp Ala Glu Leu Leu Gln

245 250 255

Val Ser Gln Ala Lys Lys Asp Val Lys Glu Thr Thr Pro Met Leu Ala

260 265 270

Pro Val Lys Ser Ile Cys Glu Phe His Lys Val Lys Thr Val Cys Ile

275 280 285

Leu Gly Leu Pro Gly Gly Gly Lys Thr Thr Val Ala Arg Glu Leu Tyr

290 295 300

Asp Ala Leu Gly Thr His Phe Pro Cys Arg Val Phe Val Ser Val Ser

305 310 315 320

Pro Ser Ser Ser Pro Ser Pro Asn Leu Thr Lys Thr Leu Ala Asp Ile

325 330 335

Phe Ala Gln Ala Gln Leu Gly Val Thr Asp Thr Leu Ser Thr Ser Tyr

340 345 350

Gly Gly Ser Gly Thr Gly Arg Ala Leu Gln Gln His Leu Ile Asp Asn

355 360 365

Ile Ser Ala Phe Leu Leu Asn Lys Lys Tyr Leu Ile Val Ile Asp Asp

370 375 380

Ile Trp His Trp Glu Glu Trp Glu Val Ile Arg Lys Ser Ile Pro Lys

385 390 395 400

Asn Asp Leu Gly Gly Arg Ile Ile Met Thr Thr Arg Leu Asn Ser Ile

405 410 415

Ala Gly Lys Cys His Thr Asp Asp Asn Asp Val Phe Val Tyr Glu Val

420 425 430

Gly Asp Leu Asp Asn Asn Asp Ala Leu Ser Leu Ser Trp Gly Ile Ala

435 440 445

Thr Lys Ser Gly Ala Gly Asn Arg Ile Gly Thr Gly Glu Asp Ser Pro

450 455 460

Cys Tyr Asp Ile Val Asn Met Cys Tyr Gly Met Pro Leu Ala Leu Ile

465 470 475 480

Trp Leu Ser Ser Ala Leu Val Gly Glu Ile Glu Glu Leu Gly Gly Ala

485 490 495

Glu Val Lys Lys Cys Arg Asp Leu Arg His Ile Glu Asp Gly Ile Leu

500 505 510

Asp Ile Pro Ser Leu Gln Pro Leu Ala Glu Ser Leu Cys Leu Gly Tyr

515 520 525

Asn His Leu Pro Leu Tyr Leu Arg Thr Leu Leu Leu Tyr Cys Ser Ala

530 535 540

Tyr His Trp Ser Asn Arg Ile Glu Arg Gly Arg Leu Val Arg Arg Trp

545 550 555 560

Ile Ala Glu Gly Phe Val Ser Glu Glu Lys Glu Ala Glu Gly Tyr Phe

565 570 575

Gly Glu Leu Ile Asn Arg Gly Trp Ile Thr Gln His Gly Asp Asn Asn

580 585 590

Ser Tyr Asn Tyr Tyr Glu Ile His Pro Val Met Leu Ala Phe Leu Arg

595 600 605

Cys Lys Ser Lys Glu Tyr Asn Phe Leu Thr Cys Leu Gly Leu Gly Ser

610 615 620

Asp Thr Ser Thr Ser Ala Ser Ser Pro Arg Leu Ile Arg Arg Leu Ser

625 630 635 640

Leu Gln Gly Gly Tyr Pro Val Asp Cys Leu Ser Ser Met Ser Met Asp

645 650 655

Val Ser His Thr Cys Ser Leu Val Val Leu Gly Asp Val Ala Arg Pro

660 665 670

Lys Gly Ile Pro Phe Tyr Met Phe Lys Arg Leu Arg Val Leu Asp Leu

675 680 685

Glu Asp Asn Lys Asp Ile Gln Asp Ser His Leu Gln Gly Ile Cys Glu

690 695 700

Gln Leu Ser Leu Arg Val Arg Tyr Leu Gly Leu Lys Gly Thr Arg Ile

705 710 715 720

Arg Lys Leu Pro Gln Glu Met Arg Lys Leu Lys His Leu Glu Ile Leu

725 730 735

Tyr Val Gly Ser Thr Arg Ile Ser Glu Leu Pro Gln Glu Ile Gly Glu

740 745 750

Leu Lys His Leu Arg Ile Leu Asp Val Arg Asn Thr Asp Ile Thr Glu

755 760 765

Leu Pro Leu Gln Ile Arg Glu Leu Gln His Leu His Thr Leu Asp Val

770 775 780

Arg Asn Thr Pro Ile Ser Glu Leu Pro Pro Gln Val Gly Lys Leu Gln

785 790 795 800

Asn Leu Lys Ile Met Cys Val Arg Ser Thr Gly Val Arg Glu Leu Pro

805 810 815

Lys Glu Ile Gly Glu Leu Asn His Leu Gln Thr Leu Asp Val Arg Asn

820 825 830

Thr Arg Val Arg Glu Leu Pro Trp Gln Ala Gly Gln Ile Ser Gln Ser

835 840 845

Leu Arg Val Leu Ala Gly Asp Ser Gly Asp Gly Val Arg Leu Pro Glu

850 855 860

Gly Val Cys Glu Ala Leu Ile Asn Gly Ile Pro Gly Ala Thr Arg Ala

865 870 875 880

Lys Cys Arg Glu Val Leu Ser Ile Ala Ile Ile Asp Arg Phe Gly Pro

885 890 895

Pro Leu Val Gly Ile Phe Lys Val Pro Gly Ser His Met Arg Ile Pro

900 905 910

Lys Met Ile Lys Asp His Phe Arg Val Leu Ser Cys Leu Asp Ile Arg

915 920 925

Leu Cys His Lys Leu Glu Asp Asp Asp Gln Lys Phe Leu Ala Glu Met

930 935 940

Pro Asn Leu Gln Thr Leu Val Leu Arg Phe Glu Ala Leu Pro Arg Gln

945 950 955 960

Pro Ile Thr Ile Asn Gly Thr Gly Phe Gln Met Leu Glu Ser Phe Arg

965 970 975

Val Asp Ser Arg Val Pro Arg Ile Ala Phe His Glu Asp Ala Met Pro

980 985 990

Asn Leu Lys Leu Leu Glu Phe Lys Phe Tyr Ala Gly Pro Ala Ser Asn

995 1000 1005

Asp Ala Ile Gly Ile Thr Asn Leu Lys Ser Leu Gln Lys Val Val

1010 1015 1020

Phe Arg Cys Ser Pro Trp Tyr Lys Ser Asp Ala Pro Gly Ile Ser

1025 1030 1035

Ala Thr Ile Asp Val Val Lys Lys Glu Ala Glu Glu His Pro Asn

1040 1045 1050

Arg Pro Ile Thr Leu Leu Ile Asn Ala Gly Tyr Lys Glu Ile Ser

1055 1060 1065

Thr Glu Ser His Gly Ser Ser Glu Asn Ile Ala Gly Ser Ser Gly

1070 1075 1080

Ile Asp Thr Glu Pro Ala Gln Ala Gln His Asp Asn Leu Pro Ala

1085 1090 1095

Val Arg Asp Asp Tyr Lys Gly Lys Gly Ile Leu Leu Asp Gly Arg

1100 1105 1110

Cys Pro Thr Cys Gly Arg Ala Thr Lys Ile Glu Glu Glu Thr Gln

1115 1120 1125

Asp Arg Val Ala Asp Ile Glu Ile Gln Thr Glu Thr Thr Ser

1130 1135 1140

<210> 4

<211> 1021

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 4

Met Glu Leu Val Val Gly Ala Ser Glu Ala Thr Met Lys Ser Leu Leu

1 5 10 15

Gly Lys Leu Gly Asn Leu Leu Ala Gln Glu Tyr Ala Leu Ile Ser Gly

20 25 30

Ile Arg Gly Asp Ile Gln Tyr Ile Asn Asp Glu Leu Ala Ser Met Gln

35 40 45

Ala Phe Leu Arg Asp Leu Ser Asn Val Pro Glu Gly His Ser His Gly

50 55 60

His Arg Met Lys Asp Trp Met Lys Gln Ile Arg Asp Ile Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Val Glu Asp Cys Ile Asp Asp Phe Ala His Arg Leu Pro Gln Asp Ser

85 90 95

Ile Ser Asp Ala Lys Trp Ser Phe Leu Leu Thr Lys Ile Tyr Glu Leu

100 105 110

Trp Thr Trp Trp Pro Arg Arg Val Ile Ala Ser Asn Ile Ala Gln Leu

115 120 125

Lys Val Arg Ala Gln Gln Ile Ala Asp Arg Arg Ser Arg Tyr Gly Val

130 135 140

Asn Asn Pro Glu His Leu Asp Ser Ser Ser Ser Ala Arg Thr Arg Ala

145 150 155 160

Val Asn Tyr Glu Ile Ala Glu Tyr Gln Val Thr Ser Pro Gln Ile Ile

165 170 175

Gly Ile Lys Glu Pro Val Gly Met Lys Thr Val Met Glu Glu Leu Glu

180 185 190

Val Trp Leu Thr Asn Pro Gln Ala Glu Asn Gly Gln Ala Val Leu Ser

195 200 205

Ile Val Gly Phe Gly Gly Val Gly Lys Thr Thr Ile Ala Thr Ala Leu

210 215 220

Tyr Arg Lys Val Ser Asp Lys Phe Gln Cys Arg Ala Ser Val Ala Val

225 230 235 240

Ser Gln Asn Tyr Asp Gln Gly Lys Val Leu Asn Ser Ile Leu Ser Gln

245 250 255

Val Ser Asn Gln Glu Gln Gly Ser Ser Thr Thr Ile Ser Glu Lys Lys

260 265 270

Asn Leu Thr Ser Gly Ala Lys Ser Met Leu Lys Thr Ala Leu Ser Leu

275 280 285

Leu Arg Gly Asn Cys Ile Cys Gln Pro Glu Asn Asp Gly Asn Pro Asp

290 295 300

Asn Thr Pro Ile Arg Leu Gln Glu Thr Thr Asp Asp Asp Gln Asn Pro

305 310 315 320

Arg Lys Leu Glu Gln Leu Leu Ala Glu Lys Ser Tyr Ile Leu Leu Ile

325 330 335

Asp Asp Ile Trp Ser Ala Glu Thr Trp Glu Ser Ile Arg Ser Ile Leu

340 345 350

Pro Lys Asn Asn Lys Gly Gly Arg Ile Ile Val Thr Thr Arg Phe Gln

355 360 365

Ala Val Gly Ser Thr Cys Ser Pro Leu Glu Thr Asp Arg Leu His Thr

370 375 380

Val Asp Phe Leu Thr Asp Asp Glu Ser Gln Asn Leu Phe Asn Thr Ser

385 390 395 400

Ile Cys Glu Ser Lys Ile Arg Lys Asp Ser Asn Lys Val Asp Glu Gln

405 410 415

Val Pro Glu Glu Ile Trp Lys Ile Cys Gly Gly Leu Pro Leu Ala Ile

420 425 430

Val Thr Met Ala Gly Leu Val Ala Cys Asn Pro Arg Lys Ala Cys Cys

435 440 445

Asp Trp Ser Lys Leu Cys Lys Ser Leu Phe Pro Glu Gln Glu Thr Pro

450 455 460

Leu Thr Leu Asp Gly Val Thr Arg Ile Leu Asp Cys Cys Tyr Asn Asp

465 470 475 480

Leu Pro Ala Asp Leu Lys Thr Cys Leu Leu Tyr Leu Ser Ile Phe Pro

485 490 495

Lys Gly Trp Lys Ile Ser Arg Lys Arg Leu Ser Arg Arg Trp Ile Ala

500 505 510

Glu Gly Phe Ala Asn Glu Lys Gln Gly Leu Thr Gln Glu Arg Val Ala

515 520 525

Glu Ala Tyr Phe Asn Gln Leu Thr Arg Arg Asn Leu Val Arg Pro Met

530 535 540

Glu His Gly Ser Asn Gly Lys Val Lys Thr Phe Gln Val His Asp Met

545 550 555 560

Val Leu Glu Tyr Ile Met Ser Lys Ser Ile Glu Glu Asn Phe Ile Thr

565 570 575

Val Val Gly Gly His Trp Gln Met Thr Ala Pro Ser Asn Lys Val Arg

580 585 590

Arg Leu Ser Met Gln Ser Ser Gly Ser Asn Arg Gly Ser Ser Thr Lys

595 600 605

Gly Leu Asn Leu Ala Gln Val Arg Ser Leu Thr Val Phe Gly Asn Leu

610 615 620

Asn His Met Pro Phe His Ser Phe Asn Tyr Gly Ile Ile Gln Val Leu

625 630 635 640

Asp Leu Glu Asp Trp Lys Gly Leu Lys Glu Arg His Met Thr Glu Ile

645 650 655

Cys Gln Met Leu Leu Leu Lys Tyr Leu Ser Ile Arg Arg Thr Glu Ile

660 665 670

Ser Lys Ile Pro Ser Lys Ile Gln Lys Leu Glu Tyr Leu Glu Thr Leu

675 680 685

Asp Ile Arg Glu Thr Tyr Val Arg Asp Leu Pro Lys Ser Ile Val Gln

690 695 700

Leu Lys Arg Ile Ile Ser Ile Leu Gly Gly Asn Lys Asn Thr Arg Lys

705 710 715 720

Gly Leu Arg Leu Pro Gln Glu Lys Ser Lys Lys Pro Ile Lys Asn Pro

725 730 735

Ser Pro Gln Gly Lys Thr Lys Glu Pro Ala Lys Lys Gly Phe Leu Ser

740 745 750

Gln Glu Lys Gly Lys Gly Ala Met Lys Ala Leu Arg Val Leu Ser Gly

755 760 765

Ile Glu Ile Val Glu Glu Ser Ser Glu Val Ala Ala Gly Leu His Gln

770 775 780

Leu Thr Gly Leu Arg Lys Leu Ala Ile Tyr Lys Leu Asn Ile Thr Lys

785 790 795 800

Gly Gly Asp Thr Phe Lys Gln Leu Gln Ser Ser Ile Glu Tyr Leu Gly

805 810 815

Ser Cys Gly Leu Gln Thr Leu Ala Ile Asn Asp Glu Asn Ser Glu Phe

820 825 830

Ile Asn Ser Leu Gly Asp Met Pro Ala Pro Pro Arg Tyr Leu Val Ala

835 840 845

Leu Glu Leu Ser Gly Lys Leu Glu Lys Leu Pro Lys Trp Ile Thr Ser

850 855 860

Ile Thr Thr Leu Asn Lys Leu Thr Ile Ser Val Thr Val Leu Arg Thr

865 870 875 880

Glu Thr Leu Glu Ile Leu His Ile Leu Pro Ser Leu Phe Ser Leu Thr

885 890 895

Phe Ala Phe Ser Leu Ser Ala Ala Lys Gln Asp Gln Asp Ile Ile Lys

900 905 910

Asp Ile Leu Glu Asn Asn Lys Leu Asp Ser Asp Gly Glu Ile Val Ile

915 920 925

Pro Ala Glu Gly Phe Lys Ser Leu Lys Leu Leu Arg Phe Phe Ala Pro

930 935 940

Leu Val Pro Lys Leu Ser Phe Leu Asp Lys Asn Ala Met Pro Ala Leu

945 950 955 960

Glu Ile Ile Glu Met Arg Phe Lys Asp Phe Glu Gly Leu Phe Gly Ile

965 970 975

Glu Ile Leu Glu Asn Leu Arg Glu Val His Leu Lys Val Ser Asp Gly

980 985 990

Ala Glu Ala Ile Thr Lys Phe Leu Val Asn Asp Leu Lys Val Asn Thr

995 1000 1005

Glu Lys Pro Lys Val Phe Val Asp Gly Ile Val Thr Ala

1010 1015 1020

<210> 5

<211> 10321

<212> DNA

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<220>

<221> promoter

<222> (1)..(1220)

<220>

<221> 5'UTR

<222> (1221)..(1324)

<220>

<221> CDS

<222> (1325)..(1888), (2039)..(2607), (5380)..(7675)

<220>

<221> 3'UTR

<222> (7676)..(7865)

<400> 5

gggggggaca gcggcgcggt gggaagattg gggccttggg ggtgaggctt ttgggcggag 60

gccaataata ctgcactgca ttcgcagact cgttgactga ctcgtggtca tgccgtttct 120

ccctaatatt tcctccgtcc tttaatataa tattaaagtc tttaatatta tacttgtact 180

actccctcca ttataaaata taagtcataa ccacccctaa cccaaacacc aagaaaataa 240

ttattattat cttgtagttt agaacatcct aataaataca atgcatgcat ccaatagaat 300

cagagagcat gaataataat ttaataaaaa agaggtcata gttaattgcc tatatgcatg 360

catgccttat attatgaaac atctaagaaa agtggttgtg ccttatatta tggaatagag 420

ggagtcctat ttaaccattt atcttatttt aaaaaaatta tgcaaataat aaaaataaaa 480

agttgtgctt aaaagatttt agataataaa ataagtaaaa gaaaattaaa taataatttt 540

caaacttttt tttaataaaa cgaaggatcg tactccctcc attctaaatt gatctacgta 600

tttcataggt acaccaagac caagaaaaac taataactct ttcatattat atttactcta 660

acaacaaact caatgcatgc atcatcccca atatttccta gccaatagca aatcaagata 720

ttgcatgtgg gttataaata cttgtgtgca tggaagcatg catcaatgtc catttactcc 780

aatgcacaca aataacgaat agacttaata aatgaacaca aatatataga tcatttagga 840

ataacctaaa aaaactatat atagatcaat ttagaatgaa gggagtacaa agtaaaatgt 900

taaaatacct tatattagag aacaaacgaa ctaattatgt gaaagcagtt ctctaaccca 960

ttgcgagagg accgagaaaa ataccaccac tttaagagca gttacaatag caggctataa 1020

gccaactgca aacatatttt aaggagataa ataaggagag agaagggtag cgggctatag 1080

atttgtagcc aactgtagca cagactccaa gacacagtgt gtatgacagg tgggaccagg 1140

tattaatagt atagtacttg tatgaataag ctattagatt ggctataaat aaattgaagc 1200

tactacttgg ctgtactgtt aaccttgctc taattacact cggagtcgga gagtcaggag 1260

gtgagagagt agcactcaac gcaaaagggg atcggccgag ccgccgatcg aggcgcgagt 1320

agggatggag gcggctgcca tggccgtaac cgcagccacg ggggccttgg cgcccgtgct 1380

agtgaagctg gccgctttgc tggacgacgg ggagtgcaat cttctggagg ggagccggag 1440

cgacgcagag ttcatcagat ccgagctgga ggccgttcat tctctcctca ccccaaatat 1500

cttggggagg atgggggatg acgatgcggc gtgcaaggat ggcttgattg cggaggtccg 1560

ggagctgtcc tacgacctgg atgatgccgt cgacgacttc ttggagctca atttcgagca 1620

gcgaagaagc gcaagccctt tcggtgagct caaggcaaga gttgaggagc atgtctccaa 1680

tcgcttctct gactggaagc taccggcggc gagccttccg ccgtcgtcgg tacaccgccg 1740

agctggcttg ccgccaccag atgcagagct ggtggggatg gacaaacgta tggaagagct 1800

caccaaattg ctggaacaag ggagcaatga tgcttcacga tggcgcaagc gaaaaccgca 1860

tttcccgctc agaaaaacag ggctaaaggt acggttggat ctcgattctt cacaaatata 1920

gcttcctccg atagcagtgc caatgaattt gtttacttct ctcttgattc tttaatttgg 1980

aagtactgta taacaaacat ggagggatcg tcatttaact taattttttt tgttgcagca 2040

aaaaatcgtg atcaaggttg ccatggaggg caataattgc cgttcaaaag caatggcttt 2100

agttgcgagc actggaggag tggactcggt tgcgctcgta ggtgatctaa gagacaagat 2160

agaggtggtc ggttatggca ttgaccccat caagctgatc tccgcgctcc ggaagaaggt 2220

gggcgatgcg gagttgctgc aggtcagcca agcaaaaaaa gatgtgaagg agacgacgcc 2280

gatgcttgcg ccggtgaaat ccatatgtga atttcacaag gtcaaaacag tttgcatcct 2340

tggattgcca ggtggaggca aaacaacggt tgccagagaa ttatatgacg ccttgggaac 2400

gcacttccca tgccgggttt tcgtgtcagt ctctccaagt tctagtccca gtcccaatct 2460

cacaaagact cttgcagaca ttttcgctca agcacaacta ggagtaaccg atacacttag 2520

cacaccatat ggtgggagtg ggaccgggag agctcttcaa caacatctca tcgacaacat 2580

atcagctttc ctcctcaaca aaaagtaagc aatatcttat atctcttatc tagcttgtcc 2640

ttaatccggc ttcccaaatt aaagtgaaca ggctatatgt ccatataatg ttgggttttt 2700

ttttttctgt cctcgatgag gtatatatca agatatgcca aacttttttt aattagcgtt 2760

actttattct acctagtaaa tagatacaga aatggggcag gcccctcctt tgtgacaggc 2820

caatggtttt atgatgtgga aacaactccc ttatcactga agctcttgct attactcgtg 2880

atggtactga tcttgcaaag gcttgcagta tttgtaaatc cacagggagt ggtcatcttt 2940

ttttttttaa gataatgaat agaaatctgg cctctatata gaaagccaaa ggttacacaa 3000

gtgcatacac tccaaatctc aaagctgaga aacacgaaaa acaaacgacc aaaaagaaaa 3060

gacgataaga ttaagtttca agcttttcct ccttgcttca gaaaacaggg aaatgcagag 3120

ctagcccgct cttcccctgc catgccctct cactgccatt gcaactacca caaaagctcc 3180

cctgtttcgc cgtgagcgaa gggaggggat ggaactagtc tgctgctttg ttgtcgccaa 3240

gcactggttt catgctgccc aaacaaccta tgccccgcta gcgataacga gtctgttgcc 3300

gccatgctgt tgtcgctgga gagcacttgt cgctgctcag ctatgtgtta agtaagctac 3360

taacaatctc tccattctct tgtagactgc ttataaaaga ttgtacttca actttttatt 3420

aatgaaatag agttcctgcc ttacaacaac aagaacgaga gagagagaga gagccaatat 3480

cacgagttag cactgtgaag acttcctgac tgttatgtct tcaagaacag tataaaagca 3540

tttgccacta taaaaatatg atagccctca agatcattaa aaatatgtca tgttctttta 3600

ccttcataac aaccagtatc acaaatatga aaacatttaa aggaaaatca gtatttgcca 3660

tttatgtaaa gaaaaactag actagaactc tgggctttta ttttagtgca cactgtatac 3720

atgtgtgttc tttgacgtat atacttgata ttttttcaaa aacttttggg ggcatatctg 3780

taacccatgc cccatgcatc caaagtagta gtgagacaac tttcgtatca atggacatgt 3840

ggcattaaat ttaatcccaa tatttgttct ctcgaagtcc tgaacatata attggacaaa 3900

attatataat ttaattaggc caattgagcc atatatacac acactataag aaacttctac 3960

aaaacaaaca ttcgctcctt ttaggttttg accagtctat acatgaacca gccaacggtg 4020

tgctggtctg actataaatg tttttttaga gagtaaaggc accttccagt acctctctcg 4080

aggacagtaa aaacacccat gctttaaggt tatgaacaac aaagcataga acaaccacaa 4140

gaaaaaaaaa aacaactaga acaagttctg gaactagtta gggattcggg aagccattgc 4200

ttgctggctt gggacaagct atgcctgcca ttggactatg gtggagactg ggcataaagg 4260

atctcaatct cttggagatt ggcctatgtc ctaggtggcc atggctgact gcaaggagat 4320

atatttcttg caacggaaat tttcattgca aaagctgaaa atcgttgcga tatgtaccta 4380

ttgtgacata attgaatcca ttgggagccg tagcaataaa tcccgtggta ataggctatt 4440

gcaatgattt tccgatggtt gcataaaaag gtgctattac aatggttttg cattgctatt 4500

gcaacaactt gatatgtcat aggtatttat tgcaacagtt tgtaccatgc tgcaataaga 4560

tttcgcaaca cagacctatt cattaaatag cctatttcca cacattcatt tttgtggcaa 4620

taattcagtg cgacaagcat gttctatagc tataacctga tgcaacgggt tagacttgtt 4680

gcagtaactt attagcacat ttaatttttt actaaattta tattgattca actatttcaa 4740

catcattcaa tacagtaaat actggaaaat gcaagcaatc tccaaaaatt caccaataag 4800

agaaacgaat taaatcatat acacaattat ttcacaccgt acagtgcact taagtgtagg 4860

aaatataatg ctatatacat ttccaaccct caatacaggt tctgtaaata atgaaaagaa 4920

acatcaattt gatttcttga ccggtccctc tgagacacac agtgctttcc tcagcaacat 4980

cgttgccgat ctatgtaact tgtaaactcc ttgtgcttaa taaattctgg ccagggttac 5040

ttcagcctgc atggcgaaaa aaaagaactt gttagggaga tcgcaaacaa atgttagctg 5100

ccccatttct tctctactga ccataaaagc tctaggatca ggtcatgaaa acaatgccgt 5160

cagaccggaa atactcaaga ttcagaacac gactcctagg aactgcaagt ttaaatttca 5220

acaaaagcaa aatacaacca gatgacaaac taatatatat cagctgactg ttcatctcaa 5280

gtggactcac atctgtgaaa ttgttagttc tatgcatata tgctaatgta atactaatat 5340

gctattgagg cttattactc ttctcgactt ttataggtat ctcattgtaa tcgatgacat 5400

ttggcattgg gaagaatggg aagtcatcag aaagtccatt cccaagaatg atctgggtgg 5460

tagaataatc atgactactc gtcttaattc aatagctgag aagtgccaca ctgatgacaa 5520

tgatgttttt gtctacgaag ttggggatct agataataat gatgctttgt cgttgtcttg 5580

ggggatagca acaaagtctg gggcaggcaa caggatcgga actggagagg ataatccatg 5640

ctatgatatt gtgaacatgt gttatggtat gcctttagca cttatttggc tgtcgtcagc 5700

attggttgga gagatagaag aattaggtgg tgctgaagtg aaaaaatgta gggatttgag 5760

acacatagag gatggtattt tggacatccc atccttacaa ccattggcgg agagtttatg 5820

ccttggttat aaccatcttc ctctttatct gaggactttg ttgttgtact gtagtgcata 5880

ccattggtct aacagaatcg aaaggggtcg tctggtcagg aggtggattg cggaaggatt 5940

tgtgtcggaa gagaaagaag cagaaggtta ctttggcgag cttattaaca gaggatggat 6000

tacgcagcac ggagacaaca acagttataa ttactatgag atccaccccg tgatgctggc 6060

cttcctgaga tgcaagtcca aggagtacaa ttttttaaca tgcttgggtc tgggatctga 6120

tactagtact agtgcatcct ccccaaggtt gattcgccgg ctgtctcttc agggggggta 6180

tccagtggac tgcttgtcaa gcatgagtat ggatgtgtca cacacttgca gccttgtcgt 6240

ccttggtgac gtggcgcgac ccaagggaat ccccttctat atgtttaagc gcttgcgagt 6300

gttggacctt gaagataata aggatataca ggattctcat ctgcagggca tatgtgaaca 6360

gttaagcctc agagtgaggt accttggtct caagggaacg cggatccgaa agctccctca 6420

ggagatgagg aagctgaagc atttggagat tttgtatgtg gggagcactc ggatcagtga 6480

acttccgcaa gagattggag agctgaagca tctgcggatt ctggacgtga gaaacacgga 6540

catcactgag ctcccactgc agatacggga gctgcagcat ctgcacactc tggacgtgag 6600

gaacactcca atcagtgagc tcccgccgca ggttggcaag ctgcagaatc tcaagattat 6660

gtgcgtgagg agcactgggg ttagggagct cccaaaggag attggggagc tgaatcatct 6720

acagactctg gacgtgagaa acacgagggt gagagagctg ccatggcaag ctggccagat 6780

ctcccaatcg ttgcgcgtgc ttgccggtga cagtggcgat ggcgtgcggt tgcccgaagg 6840

cgtctgcgaa gctctgatca acggtattcc aggggctacg cgtgcaaaat gcagggaggt 6900

tctgtccatc gcgatcatcg atcgtttcgg acctcccctt gttgggatat tcaaagttcc 6960

cggcagtcat atgcgtatcc cgaagatgat caaagaccac ttccgcgttc tttcttgcct 7020

agacatcagg ctctgccaca agcttgagga tgatgaccaa aagttcctcg ccgagatgcc 7080

caacctgcag acgctcgtgc tgaggttcga ggccctacca agacaaccca taaccatcaa 7140

cggcacaggc ttccagatgc tggagagctt ccgtgtcgac agccgggtgc caaggatagc 7200

cttccatgaa gacgccatgc ccaacctcaa gcttctcgag ttcaagttct acgccggccc 7260

agcaagcaac gatgccatcg gcatcaccaa cctgaagagc ctccaaaagg tggtctttcg 7320

gtgctcgcca tggtacaaga gcgacgcccc tggcatcagc gccaccattg acgtcgtgaa 7380

gaaagaagcc gaggagcatc ccaaccggcc gatcaccctc ctcatcaatg ctgggtataa 7440

ggagatatca actgagtcac acgggagcag tgaaaacatt gcgggcagca gtgggatcga 7500

tactgagcct gcacaggcac agcatgataa tctccctgct gttcgagatg actacaaggg 7560

aaaagggatt cttcttgatg gcaggtgtcc tacctgcggc cgagcgacta aaattgaaga 7620

ggaaacccaa gatcgagtag cagatattga aattcaaaca gaaactacta gctagctagt 7680

accgctgtct aattttattt gtattaaata ctctccttca tgtaatactc taagtccccg 7740

ctcaattttt cttgcctccg caactctaca tgatactcaa aactgatttc ttacctccct 7800

ttgattgtag aaaaaacatg ggaagtttgg aggatttcaa tcctatgaaa aggactttga 7860

gaaacaaatt acggaatcct atcttttcct ttaaaagata tataatagaa aatcctatag 7920

agatttttat aggaaagtta acaaaagcct caatcttatg gagaattcct gtgtttattt 7980

gcatagagga aagtgagact cacctaatca ggggcggttc tagtgggtgg tccaggtgat 8040

ccctggacca ccctaaaatt tggcccatga gaaccgcccc ccccctcctc ctcccggggt 8100

tggtcgaaac cagaaaaaag gccactgagc taagctaggg ttagggagag gtgtagccat 8160

gaactagcca cagcagcacg catcgctggc tgccgcctcc gcctctgcgt cagcgccagc 8220

gtgccgtctc cccggctctc gactctgcct ccgcctccgc cttggcgccg atgcgtcgcc 8280

tcctcggctc ccgcttctac ctcagcgcca gcgtgccgcc tccgccttag cgccgcctcc 8340

tcgcctcctc ccttccccga ctcctccagt cccccactcc tgtcggttgc tatcgtcggc 8400

gggcggcgac caacgcctac aagccaacta cggctgcctg ggcaagccgg cggccacccc 8460

cgcccctgga aagggaaaac attgccattc cacaggcggc gccaggtccc ctttctctct 8520

agctttcttg ttgctcagca aagttcaaag gtcagtagac atttcttgtt ggttttttgc 8580

aatgttgccc tatgcagtag tgagtagtca gtactcagta gtagtgctag tgaaaaattt 8640

ctgccttgag tgtagtgaaa agcaagctga gaaatagcat gtgtgacaaa ttattaaatg 8700

atggtttaat cacatctatt gagcgggtta ttttctctca agttagcaaa gaagacatta 8760

tgcataattt catgtctata tatgaacgga gagtagaaaa gaagtagggt tttgtaatct 8820

tctacttatc tattataaga tatttgaatg attatgttct aactttcgta acttcaaatt 8880

tagatgttgg ttttaagcaa gttgtgatgt tgtgagatat attgctacat ttcaattata 8940

tttttattat ttttgacaca tttggcttga atttgtaaca atgtgacaat ttggagcatc 9000

aagtaggact acccgacgat tcatgaaacc aatgtgccga tatttagcgg ttcttaatca 9060

tactgaggta agaaggcaac attttgcaaa agtagaattt cttcatgaaa atcaggctta 9120

tagctttaat gttcacaaac tagctaagtt tccttgtacc ttagaggagg ggcatcatgt 9180

tcgattctca aatactcctt gtaatctaag taggaatgta aataatttgg ttgttaatga 9240

ataaaatgcc agaattttat tctaaaagaa tatgtaattc aaattaatat tattctagat 9300

gtatcttgaa tagcccatta gcactggacc agtctttcaa gttgggtcag tggtcggtac 9360

cattgcctgg cccatcatgg aacagaatgg ccatggtctg atcgcaatgg gccgaggcat 9420

gacgcgctgc gctttcgaaa tcacgggcct gagctgtcat gagggctatc ctgggccagg 9480

cccgcgagac aagagggtgt cggacaatgc aacaacaacg agaggcaata agcagagctt 9540

atgcattgca cgaccaacaa agttgtcact tacatccctt attattctca atcttaatac 9600

tatctccgtt caaaaaaaag tagactttta gatacgaatg tgaacaaacg tcctcatcaa 9660

tcttgcctgc tgataaagca accgcagcta ccacgcacta tgcagggatc gatcgatcga 9720

tggatggaca tattattact caacaaagta gaggcattaa tccgcttgca gactaatcag 9780

attcaggcga cagcacgcgg ctgctgattc atcagatggc attgcttcaa attgttcgct 9840

ttcaccatgc cctgcaccat gcatcattta gatatttatt ttactgtact catagtaatt 9900

aaccactgaa aattcactct aggaaatcgt gtgttaactg ttaacctggt agattttgat 9960

catgaattgg ttgatgtcgt cgagcgatat gacgccctcg tacgcggcgt tgaaacggta 10020

gctgtcgtca tcgcgtccag acgccaccag cagcggcggc gcaggcggca gctgctccac 10080

gcagctgtac tcgcactcgt cgtggcactc gccgtcgccg ccgccgccgc cgccgccgtt 10140

ctccgccgtg atcgccacct gcagcgtcag gtgcacctcc agcgtcacga acacgcccac 10200

caccttcgcc ggcgacccca tcgccgtcgg ccgctgcatc ttgtagctcg acatccacga 10260

gaatatgtac gccgccatcg acgacgagac gccgacgatg ttctgcttcc tcaggctgtt 10320

c 10321

<210> 6

<211> 8839

<212> DNA

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<220>

<221> promoter

<222> (1)..(1209)

<220>

<221> 5'UTR

<222> (1210)..(2441)

<220>

<221> CDS

<222> (2442)..(3433), (3598)..(5671)

<220>

<221> 3'UTR

<222> (5672)..(5915)

<400> 6

ctactctctc acctcctgac tctccgactc cgagtgtaat tagagcaagg ttaacagtac 60

agccaagtag tagcttcaat ttatttatag ccaatctaat agcttattca tacaagtact 120

atactattaa tacctggtcc cacctgtcat acacactgtg tcttggagtc tgtgctacag 180

ttggctacaa atctatagcc cgctaccctt ctctctcctt atttatctcc ttaaaatatg 240

tttgcagttg gcttatagcc tgctattgta actgctctta aagtggtggt atttttctcg 300

gtcctctcgc aatgggttag agaactgctt tcacataatt agttcgtttg ttctctaata 360

taaggtattt taacatttta ctttgtactc ccttcattct aaattgatct atatatagtt 420

tttttaggtt attcctaaat gatctatata tttgtgttca tttattaagt ctattcgtta 480

tttgtgtgca ttggagtaaa tggacattga tgcatgcttc catgcacaca agtatttata 540

acccacatgc aatatcttga tttgctattg gctaggaaat attggggatg atgcatgcat 600

tgagtttgtt gttagagtaa atataatatg aaagagttat tagtttttct tggtcttggt 660

gtacctatga aatacgtaga tcaatttaga atggagggag tacgatcctt cgttttatta 720

aaaaaaagtt tgaaaattat tatttaattt tcttttactt attttattat ctaaaatctt 780

ttaagcacaa ctttttattt ttattatttg cataattttt ttaaaataag ataaatggtt 840

aaataggact ccctctattc cataatataa ggcacaacca cttttcttag atgtttcata 900

atataaggca tgcatgcata taggcaatta actatgacct cttttttatt aaattattat 960

tcatgctctc tgattctatt ggatgcatgc attgtattta ttaggatgtt ctaaactaca 1020

agataataat aattattttc ttggtgtttg ggttaggggt ggttatgact tatattttat 1080

aatggaggga gtagtacaag tataatatta aagactttaa tattatatta aaggacggag 1140

gaaatattag ggagaaacgg catgaccacg agtcagtcaa cgagtctgcg aatgcagtgc 1200

agtattattg gcctccgccc aaaagcctca cccccaaggc cccaatcttc ccaccgcgcc 1260

gctgtccccc cccccccccc cccccccaat cttctggcct ggccagctct ggtcggagga 1320

gggttcagtt ccatgggtgc gccccctgcc catccctcca cttctacttt cgtcttgaga 1380

tctcgccgtt tctgatctcc ttgccatggc aaccagttga tttggctgcc aagatcgtcc 1440

gtgctttgca aaggtgaaca atctttttct tcttgggctt tcactttgtt gtgttaatag 1500

actcagcgcc gtcgcaactt gcaaataaaa aggttcagat cggaaaatgg aaataccgta 1560

cacagtagtc tatagagaat cgactagtat ttcctgactg taagtaagga agttgtaggt 1620

accatgttct gatgattatc tttgaagctt ggagggggac aaaaagttgg gagagaaaca 1680

agaatgtatt tgttcacttg attgggggca gtaggtaaaa tctcagcgtt aggaatttgc 1740

acctctttat taagtttgac taaatttata gaaaaaaatt agcaacactt aaaacaccaa 1800

attagtttca ttgaatccaa cattgaatat attttgataa tatgtttact ttgtgttcaa 1860

aatgttacta tatttttcta taaatttgat caaatttcaa taagtttgac tagaaaaaaa 1920

agtcaaaccg acttataata tgaatataaa tggagggagt agattataaa ttatctttat 1980

tataatactt tgagtgtaca aacgaatgaa taaagtttac aaagttgaaa agttattttt 2040

aaatactatt ccgataaacc tgtatataga gaacttgtga aaaaaaacac cgtttgaaat 2100

gtgtctgtga taatctataa gaggaacggg gcctaaatat attccttttt tcctacgaaa 2160

atgcaagaag tattgcctaa tatattgata gagctgaagt tttaaagtaa aatgaaacat 2220

ttgcatgagg cagcactgga caaaaagcgc ttgtgaaaaa aatatgttcc aaatattatt 2280

aattcattca tggtatggtc tttattttca ttttcccccc ttatccatgg gcaggacacg 2340

gaaattctca gcaggttcgc gcttgatctg aactgtctgt ggctcatact ctcttgtgct 2400

tgcaacagct gaaagttgca gtgagaagta cagagaacaa gatggagttg gtggtaggtg 2460

cttccgaagc caccatgaaa tctctcttgg gcaagctggg caatcttcta gcccaggagt 2520

atgctctcat cagcggtatc cgtggtgaca tccagtacat caatgacgag cttgccagca 2580

tgcaggcctt cctccgtgat ctcagcaacg tgccagaggg tcacagtcat ggccaccgga 2640

tgaaggactg gatgaagcag atccgagaca tcgcctatga tgttgaggac tgtatcgatg 2700

actttgccca ccgcctccct caggattcca tcagcgatgc caaatggtcc ttcctactca 2760

caaaaatcta tgaactatgg acatggtggc cacgtcgtgt gattgcttcc aacattgccc 2820

aactcaaggt acgggcacaa cagatcgcag atcgacgtag tagatacgga gtgaacaacc 2880

cagaacacct tgacagtagc agcagtgcca ggacccgtgc tgtcaattac gaaattgctg 2940

agtatcaggt cacaagccct cagatcattg gtataaagga gcctgtgggg atgaagacgg 3000

tcatggagga gcttgaggtt tggttaacta atcctcaagc tgaaaatggg caagctgttc 3060

tgtccatagt cggttttgga ggtgtgggaa agactaccat tgccacagca ttgtacagaa 3120

aagtcagtga taaatttcag tgccgggcat cagtagctgt gtctcagaac tatgaccaag 3180

gcaaagtcct caatagtatt ctgagtcaag tcagcaatca ggagcagggc agcagcacaa 3240

caattagtga gaaaaagaac ctcacctcag gcgctaagag catgttgaag acagccctgt 3300

cactgctcag aggtaattgt atatgtcagc cagaaaatga tggaaaccct gataatacac 3360

caatcaggct gcaggaaaca acggacgatg atcaaaaccc cagaaaactg gaacagctcc 3420

tggccgaaaa gaggtacctt tttttgtaaa taaaattgct ttgcttatct gtaaattaac 3480

ttactcatcc cactctaaat ctaatgttta tttccttcta tacacagcac aactccatct 3540

tttgaatggg ttttattttt ctcacttgtg ctcatttttt ttttatcatc tctgcagtta 3600

tatcctcttg attgatgaca tttggtctgc cgaaacatgg gagagtatca gatcgatttt 3660

gcctaaaaat aataaaggcg gtagaataat agtgactaca agatttcaag ctgttggttc 3720

aacatgctcc cctcttgaaa ctgatcgttt gcatacagtt gattttctca ccgatgacga 3780

gtcccaaaac ttattcaata caagtatttg tgaatcaaag ataagaaaag atagcaacaa 3840

agtagacgag caagtccctg aggaaatatg gaaaatatgt gggggattgc ctttggccat 3900

agtcaccatg gctggtcttg tcgcctgcaa cccaaggaaa gcctgctgcg attggagtaa 3960

actttgcaaa tcattatttc cagagcaaga aactcctctt accctcgatg gtgttacaag 4020

gatactggat tgttgttaca atgatttgcc tgcggatctg aagacttgct tattgtactt 4080

gagtatattt ccgaagggtt ggaaaattag taggaaacgt ttgtcccggc gatggatagc 4140

tgaaggtttt gctaatgaga agcaagggtt aacccaggaa agagttgcag aggcatactt 4200

taatcaactc acaagaagga acttagtacg tcccatggag catggcagca atgggaaggt 4260

aaaaacgttt caagttcatg acatggttct tgaatacatc atgtccaaat caatcgaaga 4320

gaattttatt actgtggttg gtggacactg gcagatgact gcaccaagca ataaagtccg 4380

tcgactgtcg atgcaaagca gtggatccaa tcgtggaagt tcaacaaaag gcctgaactt 4440

ggctcaagtg agatcactga cggtgtttgg gaacctgaac catatgccat tccattcatt 4500

caactatggg ataatacagg tgctggatct tgaggactgg aagggtttga aagagagaca 4560

tatgacggag atatgtcaaa tgcttttact caagtatttg agcatccgac gaacagaaat 4620

ttccaaaatt ccctccaaga ttcagaaact tgagtacttg gaaactcttg acataaggga 4680

gacatatgtc agggacctgc ctaagtcaat agtccagcta aaacggatca ttagcatact 4740

tggagggaat aaaaacacac ggaaggggct gaggttgcct caagaaaaaa gtaagaagcc 4800

aattaaaaac ccgtcgcctc aaggaaaaac aaaggagccc gcaaagaaag gattcttatc 4860

ccaagaaaaa ggtaaaggcg caatgaaagc actccgtgta ctgtcaggga ttgagattgt 4920

tgaggaatca tcagaagtag ctgcaggcct tcatcagttg acagggctaa ggaagcttgc 4980

catatacaag ctcaatataa caaagggtgg tgataccttc aaacaattac agtcctccat 5040

tgagtacctt ggcagctgtg gtctgcagac tctggccatc aatgatgaga attctgaatt 5100

tatcaactca ctgggcgaca tgcccgcgcc tccaagatat cttgtcgccc ttgagctgtc 5160

tggcaagttg gagaagctac ccaagtggat caccagcatc actactctca acaagctaac 5220

catatctgta acagttctta ggactgaaac tttggagatc ctccacattt taccttcatt 5280

gttttccctc accttcgcct tttcacttag tgcagcgaag caggatcagg acataataaa 5340

ggacatcctt gagaataata aattggacag tgatggggaa atcgtcattc cagctgaagg 5400

attcaagagt cttaagctgc ttcgcttctt tgcaccttta gtgccgaagc tcagcttttt 5460

ggacaagaat gcaatgccag cactcgaaat cattgaaatg cggtttaaag acttcgaagg 5520

tctatttggc atcgaaatcc ttgaaaatct ccgtgaggtg catctcaaag ttagtgatgg 5580

ggcagaagca ataaccaagt tccttgtaaa tgatttgaag gttaatactg agaaaccaaa 5640

agtatttgtt gatggcatcg tcactgcatg agaagtaaaa ttgctgcaaa tcggagaact 5700

taccaatcat ctgaggcttc ccctctatta ttactctctt agaatatatt gttattattg 5760

ctcaccttgc aaaataaaat agggatggca tagcatattg ctacaacgta ccatggttcc 5820

atcatagttg atttcacttg tcattacagt gtctgttcag ttgtgttttc tattaataaa 5880

agggagatct ccgcaagaaa ccattattat acttatattc ggttattgaa ctctataaat 5940

gatgggattg ctatatttat ggtgccacaa tttccatgag tgcggtattt ttttttctag 6000

cagttggctg gtgttaagat ttgtgctgcc attgctcctc tattattggt gcccaaaatt 6060

acgctttgca ctatgttcac agttgtaaaa cttacctaaa tttcgtgtat tagtactgta 6120

atgttgtgat tttcgcgtcc agttatattt ttttctttgc cagaagtttg atttcaaggt 6180

atatctggta agcttcagcc ggattcgtta agtttttagt ttaatcagct aaacttttaa 6240

cagtatgcat gcactagttt ctcccgttat cttatccaat ataattaatg ggctaattgg 6300

atctatgcca ttacaaacat ggcaagattc agaaaaatgc tactacaatt tgtctattca 6360

tagctgtgct agtgaaattt tacaaaattg gaaccgtgct attgatatca cgttttccat 6420

ccatcttttc ttttttttcc ttttcttctt tatcccgtct tcttcccgca ccgacgagag 6480

gcgagtggcg gcgggaccgg caagcgatgg caggacctcg gcagctcagt ggtggcagcg 6540

gcaaaaggga aaggggaagg ggtaggagag aacctggccc gccgacgcaa gcatgttggt 6600

cgtcgtcttc cccgaggagc ttgagcagtg gcaatggtag aggaatccaa ggaggccgag 6660

gaggttgagc ggcactaatg gtagaggatg ccgaggaggt cgagcatcag cgagcttgcc 6720

ctgggtgggc gagtgaggga gagctctccc aagtgtctgc gaagctctca tcttcgtttt 6780

cctcatcccc actttgctcc tcttccacta ctgctgttga agctagcggc cctctctcac 6840

cagatctggg cggagctcaa gcgaggcgcc accaccgacg atggagcttc gcgtggaccc 6900

cacagcctca cccgattgcc atccctccta ccctcatcac tccatctcca agcccaaatc 6960

ccacctcccc caccggctcc tcctcctcag cccctgccgt ggcagccgag gccaccgatg 7020

ggccaaccct caacatcgtc tcgaagcagc tccgcgcact gtggaagaag cacaaccaaa 7080

tcctccagat ggaggagtcg ctcactggcg ggaggaagct gaacaaggag caggaggagg 7140

tgctccgatc caagcccatc gtcatcgcgc tcattgatga gctcgagcgg atgcgtgccc 7200

tgctcgccga cgccctcgcc gaggagctct cctcctgccc cgccccttcc ctatctgtca 7260

ctccctcctc ctccacctcc tccggcgctg atttgtccgt caaggatctc ctcacgctca 7320

tctacttcgg ctccctcttc gacgtcaagt cgcagatcga gttcgtcacc accatgctcg 7380

cacgctaagg agctagactg atgcatcacc tacgactatg tccgtccttg ccgcagcacg 7440

acttgctacg gtcccgcctc acgccccgtc gctcgccggt cccgccgcca cttgcttctc 7500

atcggtgcgg gaagaagatg ggagaaagaa ggaagaaaac gggaaaaaaa gagatggatg 7560

aaaaacgtga cagcaatagc acggttccaa tttcgtaaaa tttcaatggc accgctacga 7620

atagaagaat tgtagtagca tttttctgaa tcaacatatt tgtaatggca tggatccaat 7680

aaaccccaaa tttattttat gccaatacaa atattggcaa ctggtgtcat taacgtataa 7740

atgggtcgcc tacataaaac cttccgcgtc cttcttggtt gaacaggtaa ttaattgcaa 7800

ccattttctg aaaaaattga ctggaagtct gaaaccgtcc ctgctactcc ctgaatgctt 7860

tagttcaatc tctatgaagc tccatccaaa caaaatctcc agatgatatt tcattaaaaa 7920

catcatgtcc agaactgtcc agtatccaag aatggctatg atcttttctg aattctggac 7980

tcgggactta tattacatgt atcaaatcca gttattttct ggagctacac cagatgaaat 8040

caccaagtaa aacaattata taaggatggt gagttgttaa ttaattacag ctttgataga 8100

ccactctgtt tgttaatgcc tgacaagagt tcacaaagaa aaaaatacac aggattacaa 8160

aactttttag atactatctg atgtgtgtta attctctcaa atactatgta cctgaacaaa 8220

caagagagaa catgttgtga attgtgatct cctcatgcga gtgacctgaa actctctaca 8280

gggtcagact cctcaagcat cactgcagcc tggaaacaat cagcagcatc attgatcctc 8340

ccatcattcc tgtgaactct ccctaaatga agccaagcca tcctgttcgt aggctcaatt 8400

ctcagtgcat cagagaggaa gcatctcgct gcagggagat accttgaccc ttgcttgcag 8460

agaagtgcac caatggccac cttggatgga acatgctcta gctctatcga gaatgcgttg 8520

acgtaggcag ccagtgcctc cttgttctga tctcgcgcct cgagcatgaa acctgaactt 8580

atagcatcca cgagtcagat tttgatgttg aattcagttg aatgcagaga attgtcatgt 8640

tagtgttaca tagaagtggt gaaagttcaa gtttagttga gttgatcacc ttctgcatgc 8700

attgttgcag ccgagtagga ttttagggct ctagccttct gcagacatat ctcagcgtct 8760

ctccagattg agagactgga gtacaggttt gcaagtcctt gccatatttc aaactcactt 8820

acactgtcat tctgtccct 8839

<210> 7

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 7

ttttggcgcg ccggtgcggg aagaagacgg gataaaga 38

<210> 8

<211> 38

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 8

ttttggcgcg ccgccgacga tagcaaccga caggagtg 38

<210> 9

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 9

gaagctctga tcaacggtat tcc 23

<210> 10

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 10

tctttgatca tcttcgggat acg 23

<210> 11

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 11

tgaacttcca cgattggatc cac 23

<210> 12

<211> 25

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 12

acatggttct tgaatacatc atgtc 25

<210> 13

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 13

gcaggtcagc caagcaat 18

<210> 14

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 14

caaccgttgt tttgcctcc 19

<210> 15

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 15

cgtggaagtt caacaaaagg 20

<210> 16

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 16

cagcacctgt attatcccat 20

<210> 17

<211> 12

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 17

Gly Leu Pro Gly Gly Gly Lys Thr Thr Val Ala Arg

1 5 10

<210> 18

<211> 12

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 18

Asn Lys Lys Tyr Leu Ile Val Ile Asp Asp Ile Trp

1 5 10

<210> 19

<211> 15

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 19

Asp Leu Gly Gly Arg Ile Ile Met Thr Thr Arg Leu Asn Ser Ile

1 5 10 15

<210> 20

<211> 20

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 20

Glu Asp Ser Pro Cyc Tyr Asp Ile Val Asn Met Cys Tyr Gly Met Pro Leu Ala Leu

Ile

1 5 10 15

<210> 21

<211> 16

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 21

Val Leu Ser Ile Val Gly Phe Gly Gly Val Gly Lys Thr Thr Ile Ala

1 5 10 15

<210> 22

<211> 18

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 22

Leu Glu Gln Leu Leu Ala Glu Lys Ser Tyr Ile Leu Leu Ile Asp Asp Ile Trp

1 5 10 15

<210> 23

<211> 13

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 23

Gly Gly Arg Ile Ile Val Thr Thr Arg Phe Gln Ala Val

1 5 10

<210> 24

<211> 20

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 24

Glu Gln Val Pro Glu Glu Ile Trp Lys Ile Cys Gly Gly Leu Pro Leu Ala Ile Val

1 5 10 15

<210> 25

<211> 13

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 25

Cys Leu Leu Tyr Leu Ser Ile Phe Pro Lys Gly Trp Lys

1 5 10

<210> 26

<211> 13

<212> PRT

<213> 稻属水稻（Orysa sativa L.）

<400> 26

Lys Thr Phe Gln Val His Asp Met Val Leu Glu Tyr Ile

1 5 10

Claims

1.稻瘟病抗性基因Pi7，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的稻瘟病抗性基因Pi7，其特征在于其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

3.权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7的cDNA序列。

4.权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7编码的蛋白质。

5.由权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7或权利要求3所述cDNA序列与启动子构建的表达盒。

6.含有权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7或权利要求3所述cDNA序列的表达载体。

7.权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7、权利要求3所述cDNA序列、权利要求4所述蛋白质、权利要求5所述表达盒或权利要求6所述表达载体在制备转基因植物中的应用。

8.权利要求1或2所述稻瘟病抗性基因Pi7、权利要求3所述cDNA序列、权利要求4所述蛋白质、权利要求5所述表达盒或权利要求6所述表达载体在提高水稻抗稻瘟病抗性中的应用。