CN102090341B - 一种金线莲的快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种金线莲的快繁方法,包括种苗消毒、芽诱导、芽增殖、幼苗培养、根诱导、试管苗移栽,所述芽增殖的培养基为:去除肌醇的MS+ZnSO4·7H2O6mg/L+KH2PO4180mg/L+6-BA4mg/L+NAA1mg/L+2%蔗糖。本发明以筛选金线莲诱导、增殖、幼苗培养和根诱导培养基为目的,达到优化培养、除去肌醇,节约成本的目的。同时突破传统的幼苗土培方式,采用流动循环式溶液培养,有利于金线莲生长发育,适合组培苗驯化移栽。
Description
技术领域
本发明涉及一种金线莲的快繁方法。
背景技术
金线莲(Anoectochilus. roxburghii (Wall.) Lindl.)自古以来就是民间使用的珍贵药材,对治疗小儿惊风、高热、百日咳等有奇效。现代医学研究认为:野生、栽培或组培的金线莲具有强心、止痛和降血糖等功效,对于高血压、肿瘤有一定的疗效。兼具赏叶、观花之功用,是观赏价值极高的花卉珍品。
金线莲为典型的阴性植物,生长在阴蔽的阔叶林下,肥沃腐殖土中,对空气、温度、光照、积温等生态条件要求严格。由于金线莲属的植物种子不具胚乳,无发芽能力,只有在与真菌共生条件下,才能促使其种子萌发生长,因此金线莲的种子发芽率很低。长期以来,对金线莲的有性繁殖均未取得突破性进展。近年来,随着金线莲赖以生存的自然环境发生了变化,野生资源锐减,加上人为的大量采挖,现已濒临灭绝。
由于组织培养具有环境因子可人工控制,繁殖周期短、速度快,可周年进行生产,节省生产材料,同时还具有保持植物原有优良性状等优势,所以被广泛采用于很多植物种苗的工厂化繁育,取得了巨大的的经济效益。经过多年的组织培养实践,金线莲组培快繁技术日趋成熟,但是在快繁过程中仍存在着一些影响快繁的突出问题:(1)金线莲丛生芽诱导、增殖、幼苗培养与生根所使用的基本培养基(MS)仍需进一步改良。(2)金线莲试管苗移植栽培技术仍然深受传统的人工栽培技术的影响。这势必给金线莲苗健壮生长、快速繁殖、简化栽培管理、降低生产成本等生产技术环节的改良、发展带来一定困难与局限性。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种金线莲的快繁方法。
本发明的金线莲的快繁方法,包括种苗消毒、芽诱导、芽增殖、幼苗培养、根诱导、试管苗移栽,其中所述芽增殖的培养基为:去除肌醇的MS+ ZnSO4·7H2O
6mg/L+KH2PO4180mg/L+6-BA4mg/L+ NAA1mg/L+2%蔗糖;所述幼苗培养的培养基为:去除肌醇的MS+ZnSO4·7H2O3mg/L +KH2PO4280mg/L+NAA 0.6mg/L+4%蔗糖,pH5-6;所述根诱导的培养基为:
MS+ ZnSO4·7H2O 3mg/L+KH2PO4 280mg/L+IBA0.6mg/L+4%蔗糖+0.2%活性碳;所述试管苗移栽采用流动循环式溶液培养。
所述流动循环式溶液培养的具体步骤如下:
(1)取茎段粗壮,高3~3.5cm的试管苗进行移栽;
(2)移栽前先打开瓶塞炼苗10d,然后将试管苗从培养瓶取出,洗净附着其上的固体培养基后,放入400倍多菌灵稀释液中,消毒5-7min;
(3)将上述消毒后的试管苗固定在泡沫板上,株间距8′8 cm;
(4)向培养槽中注入稀释4倍浓度的MS培养基,pH值5.4~6.5,初始水位达5-6 cm,根据每天蒸发情况,及时补充无菌水;
(5)将固定有试管苗的泡沫板置于培养槽中培养,培养条件:温度20~25℃,湿度75~85%,光照强度2600~800 lx;
(6)培养30天左右,叶面追施叶面肥,叶面喷雾,以叶面滴水为度,根据金线莲苗的生长情况,适时叶面追肥,时间每隔半个月一次。
针对影响组培快繁中的突出问题,本发明以筛选金线莲诱导、增殖、幼苗培养和根诱导培养基为目的,把简化培养基的成分,优化激素的种类、配比和浓度做为研究的重点,运用正交试验设计和完全随机区组试验设计,达到优化培养、除去肌醇,节约成本的目的。同时突破传统的幼苗土培方式,采用流动循环式溶液培养,克服了土培金线莲土壤水分不易控制、根系不发达、缓苗时间长、幼苗生长慢的缺点,流动循环式溶液培养有利于金线莲生长发育,适合组培苗驯化移栽,其植株生长健壮,叶片较大生长旺盛且为墨绿色,有光泽,最大的叶片宽幅可达2.1cm。由于营养液流动,便于水气交流,营养均衡,特别能促进根部生长,单株平均鲜生高达2.29g,比同期土培重0.37g,从株高、新叶数、发根率、鲜质量等生物量指标来看,都明显优于传统土培栽培方式,而且易于进行人工操作管理。
附图说明
图1为不同栽培方式对移栽组培苗生长的影响。
具体实施方式
1、消毒
选择生长健壮的野生金线莲或人工栽培的金线莲植株,用流动水将植株洗净,去掉根、叶,再用小刀把叶鞘及顶芽外叶削掉,注意不要伤及腋芽,再用肥皂水振荡1-2min,洗去肥皂水后,用无菌水冲洗一遍,用70-75%乙醇浸泡1-2min,再放入1-2%氯化汞溶液中浸泡5-10min,之后用无菌水冲洗4~5遍备用。
2、接种
将消毒好的材料切成带1~2个腋芽的茎段,接到芽诱导培养基上1/2MS+6-BA 5mg/L + NAA 2mg/L+ZT 0.1mg/L +琼脂 0.65g/L+4%蔗糖,pH5-6。
3、培养
在金线莲的芽诱导培养过程中,培养温度控制在23-250C,光照度为500~600lx。
4、芽增殖
将诱导芽接种到芽增殖培养基上,进行暗培养,培养温度20-220C,所述芽增殖培养基为:MS(去除肌醇)+ZnSO4·7H2O3mg/L+KH2PO4180mg/L+6-BA2mg/L+ NAA1mg/L+4%蔗糖,pH5-6;接种20 d后侧芽开始萌动。在芽体器官分化的同时,继续大量增殖新芽,40 d后每个外植体大约可以分化出15-20个茎高1-2cm的新芽,扩繁迅速,生长密集。
5、幼苗培养
芽增殖培养3个月左右长出幼苗,选择有2-3个叶片、高约3-4cm的生长良好的小苗,接在幼苗培养基上,每个培养基上接2-3株,进行光培养,每天光照12h,光照强度为500-600 lx,温度控制在20-220C;所述幼苗培养基为:MS(去除肌醇)+ZnSO4·7H2O3mg/L +KH2PO4280mg/L+NAA 0.6mg/L+4%蔗糖,pH5-6。
6、根诱导
幼苗培养3个月左右可转入生根培养基(MS+ ZnSO4·7H2O 3mg/L+
KH2PO4 280mg/L+IBA0.6mg/L+4%蔗糖+0.2%活性碳),每天光照10-12 h,光照强度1200~1500lx,温度控制在20-220C;培养10 d后开始生根,根从靠近培养基的每个节长出1-2条,呈肉质状,根比较短且不分枝,其上有细密、乳白色的根毛,培养50 d左右,植株长至4-5cm,叶色暗绿,根系发育完好时可进行室外移栽。
7、金线莲流动循环式溶液培养
(1)取茎段粗壮,长势好,高约3~3.5cm,适宜移植的试管苗;
(2)移栽前先打开瓶塞炼苗10d,然后将试管苗从培养瓶取出,洗净附着其上的固体培养基后,放入400倍多菌灵稀释液中,消毒5-7min;
(3)将上述消毒后的试管苗用软性海绵固定在泡沫板(100′60 ′2.5cm )上,株间距(8′8 cm);
(4)向培养槽(105′65 ′10cm)中注入稀释4倍浓度的常用培养基MS,pH值5.4~6.5,初始水位达5-6 cm左右,根据每天蒸发情况,每天及时补充无菌水;
(5)将固定有试管苗的泡沫板置于培养槽中培养,培养条件:温度20~25℃,湿度75~85%,光照强度2600~800 lx;
(6)培养30天左右,叶面追施叶面肥(0.6%尿素(w/w)+0.2%磷酸二氢钾液(w/w)),叶面喷雾,以叶面滴水为度,根据金线莲苗的生长情况,适时叶面追肥,时间每隔半个月一次。
8、不同栽培方式对金线莲生长的影响
比较不同栽培方式对金线莲生长的影响,如表1和图1所示,采用本发明的金线莲快繁方法,其植株生长健壮,根系粗壮,叶片较大生长旺盛且为墨绿色,有光泽,最大的叶片宽幅可达2.1cm。由于营养液流动,便于水气交流,营养均衡,特别能促进根部生长,单株平均鲜生高达2.29g,比同期土培重0.37g,从株高、新叶数、发根率、鲜质量等生物量指标来看,都明显优于传统土培栽培方式,而且易于进行人工操作管理。
表1不同栽培方式对金线莲生长的影响
Claims (3)
1.一种金线莲的快繁方法,包括种苗消毒、芽诱导、芽增殖、幼苗培养、根诱导、试管苗移栽,其特征在于:所述芽诱导培养基为:1/2MS+6-BA 5mg/L + NAA 2mg/L+ZT 0.1mg/L +琼脂 0.65g/L+4%蔗糖,pH5-6;所述芽增殖的培养基为:去除肌醇的MS+ ZnSO4·7H2O
6mg/L+KH2PO4180mg/L+6-BA4mg/L+ NAA1mg/L+2%蔗糖;
所述幼苗培养的培养基为:去除肌醇的MS+ZnSO4·7H2O3mg/L +KH2PO4280mg/L+NAA 0.6mg/L+4%蔗糖,pH5-6;
所述根诱导的培养基为:
MS+ ZnSO4·7H2O 3mg/L+KH2PO4 280mg/L+IBA0.6mg/L+4%蔗糖+0.2%活性碳。
2.根据权利要求1所述的金线莲的快繁方法,其特征在于:所述试管苗移栽采用流动循环式溶液培养。
3.根据权利要求2所述的金线莲的快繁方法,其特征在于:所述流动循环式溶液培养的具体步骤如下:
(1)取茎段粗壮,高3-3.5cm的试管苗进行移栽;
(2)移栽前先打开瓶塞炼苗10d,然后将试管苗从培养瓶取出,洗净附着其上的固体培养基后,放入400倍多菌灵稀释液中,消毒5-7min;
(3)将上述消毒后的试管苗固定在泡沫板上,株间距8×8 cm;
(4)向培养槽中注入稀释4倍浓度的MS培养基,pH值5.4~6.5,初始水位达5-6 cm,根据每天蒸发情况,及时补充无菌水;
(5)将固定有试管苗的泡沫板置于培养槽中培养,培养条件:温度20-25℃,湿度75-85%,光照强度2600-800 lx;
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CN103461118A (zh) * | 2013-07-31 | 2013-12-25 | 湖州市农业科学研究院 | 一种金线莲种苗的工厂化生产方法 |
CN105660401B (zh) * | 2016-01-27 | 2018-02-13 | 漳州市萌得尔农业科技有限公司 | 一种组培金线莲培养基及其制备方法和应用 |
CN108207622B (zh) * | 2016-12-21 | 2021-06-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 一种诱导元红、中国石竹和五彩石竹植物开花的方法 |
CN107864865A (zh) * | 2017-12-26 | 2018-04-03 | 丽江市古城区秋成种养殖有限公司 | 一种红果参组培苗的高效炼苗技术及驯化栽培方法 |
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN101124890A (zh) * | 2006-08-18 | 2008-02-20 | 上海雷允上科技发展有限公司 | 金线莲组培苗培养方法 |
CN101213942A (zh) * | 2008-01-10 | 2008-07-09 | 浙江省中药研究所有限公司 | 一种药用金线莲组织培养一步成苗快速繁殖方法 |
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CN101213942A (zh) * | 2008-01-10 | 2008-07-09 | 浙江省中药研究所有限公司 | 一种药用金线莲组织培养一步成苗快速繁殖方法 |
CN101828509A (zh) * | 2010-05-14 | 2010-09-15 | 福建农林大学 | 一种金线莲水培技术 |
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