CN102038785B - 中药制剂小儿明目丸的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种中药制剂小儿明目丸的质量控制方法，步骤是：首先进行性状和显微鉴别；其次采用薄层色谱法，鉴别小儿明目丸处方中是否含有黄连、大黄、黄芩、栀子成分；最后采用高效液相法，以芍药苷为对照品，测定小儿明目丸处方中的赤芍含量。本发明的小儿明目丸在原标准基础上，增加了处方中黄芩、栀子、大黄、金银花和甘草的显微鉴别方法；同时增加了黄芩、栀子、大黄和黄连的薄层鉴别方法；以芍药苷为对照品，制定了赤芍的含量测定方法，修改后可更加准确地检验出假药和劣药，对中药现代化和中药走出国门具有重大意义。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种中药制剂小儿明目丸的质量控制方法。
背景技术
小儿明目丸由赤芍、黄芩、栀子、天花粉、大黄、金银花、菊花、车前子(盐制)、黄连、薄荷、甘草组成，其制备方法为：以上十一味，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜150～170g制成大蜜丸即得，小儿明目丸具有清热明目，散风止痒之功效，用于上焦热盛，两眼红肿，疼痒不安，二便不利。
目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中药的东南亚地区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标准以适应国际标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质量标准中多参考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。
小儿明目丸现有质量标准没有关于各个成分的具体鉴定方法，只是从显微结构加以描述，这样很不利于该药品的定性定量检测，给该药物的质量控制带来很大的困难，据检索，目前没有关于小儿明目丸的质量控制方法的相关专利，现有专利主要集中在小儿明目丸的重要配方和方法上。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的中药制剂小儿明目丸的质量控制方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种中药制剂小儿明目丸的质量控制方法，步骤是：
(1)性状和显微鉴别；
(2)以黄连和盐酸小檗碱为对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有黄连成分；
(3)以大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有大黄成分；
(4)以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有黄芩成分；
(5)以栀子苷对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有栀子成分；
(6)以芍药苷为对照品，高效液相法测定小儿明目丸处方中的赤芍含量。
而且，所述性状和显微鉴别步骤为：
①性状鉴别：本品为棕褐色至黑褐色的大蜜丸，味苦；
②置显微镜下观察：韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；种皮石细胞黄色或淡棕 色，多破碎，完整者长多角形、长方形或形状不规则，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色；草酸钙簇晶大，直径60-140μm；花粉粒类球形，直径约76μm，外壁有刺状雕纹，具3个萌发孔；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。
而且，所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的黄连的方法为：
取小儿明目丸样品4.5g，剪碎，加甲醇40ml，超声处理45分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液，再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～5μl、对照药材与对照品溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝7∶1∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有黄连成分。
而且，所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的大黄的方法为：
取黄连检测中的供试品溶液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，水浴上加热30分钟，用***分振摇提取3次，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，同法制成对照药材溶液；薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙酸乙酯∶甲酸＝6∶2∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有大黄成分。
而且，所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的黄芩的方法为：
取小儿明目丸样品2g，剪碎，加甲醇10ml，超声处理45分钟，滤过，滤液浓缩至约4ml，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，预平衡30分钟，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有黄芩成分。
而且，所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的栀子的方法为：
取小儿明目丸样品9g，切碎，加硅藻土3g，研匀，加***50ml，超声处理15分钟，滤过，弃去醚液，残渣加乙酸乙酯50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸∶水＝10∶6∶2∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有栀子成分。
而且，所述高效液相法测定小儿明目丸处方中的赤芍含量的方法是：
①色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢钾溶液∶醋酸∶异丙醇＝67∶173∶4∶4为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于5000；
②对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml含40μg的溶液，取续滤液，注入液相色谱仪；
③供试品溶液的制备：取小儿明目丸样品，剪碎，取1.2g，精密称定，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇再补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，注入液相色谱仪；
④检测及结果测定：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各10μl，注入液相色谱仪，测定供试品中芍药苷的含量，进而经过计算得到赤芍的含量，参照《中国药典》2005年版一部赤芍项下含量限度计算，每丸含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.61mg。
本发明的优点和积极效果是：
1、本发明的检测方法在《***药品标准》中药成方制剂第二册原标准的基础上，增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法，制定了高效液相色谱法进行含量测定的方法，修订后的质量标准控制方法，提高了小儿明目丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
2、本发明的小儿明目丸在原标准基础上，增加了处方中黄芩、栀子、大黄、金银花和甘草的显微鉴别方法；同时增加了黄芩、栀子、大黄和黄连的薄层鉴别方法；以芍药苷为对照品，制定了赤芍的含量测定方法，修改后可更加准确地检验出假药和劣药，对中药现代化和中药走出国门具有重大意义。
附图说明
图1为本发明供试样品中黄连检测薄层色谱图在紫外光灯(365nm)检视图，其中条带从左至右依次为：1黄连对照药材；2样品1(批号：200601)；3样品2(批号：200602)；4样品3(批号：200603)；5盐酸小檗碱对照品；6阴性样品；
图2、图3分别为本发明供试样品中大黄检测色谱图在紫外光灯(365nm)和日光下检视图，其中图2与图3从左至右依次为：1阴性样品；2样品1(批号：200601)；3样品2(批号：200602)；4样品3(批号：200603)；5大黄对照药材；
图4为本发明供试样品中黄芩检测薄层色谱图在日光下的检视图，其中，其中条带从左至右依次为：1、阴性样品；2、样品1(批号：200601)；3、样品2(批号：200602)；4、样品3(批号：200603)；5、黄芩苷对照品
图5为本发明供试样品中栀子检测薄层色谱图在日光下检视，从左至右依次为1：栀子苷对照品；2阴性样品；3样品1(批号：200601)；4样品2(批号：200602)；5样品3(批号：200603)；
图6为本发明芍药苷对照品液相色谱图；
图7为本发明小儿明目丸样品液相色谱图；
图8为本发明芍药苷阴性样品液相色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
中药制剂小儿明目丸的质量控制方法，其方法的步骤是：
本供试药品中金银花来源：本品使用的品种为忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花，夏初花开放前采收，干燥。
(1)性状和显微鉴别：
①性状鉴别：原标准的颜色描述为黑褐色的大蜜丸，现三批样品实际颜色为棕褐色，鉴于蜜丸随时间推移外观颜色会加深，故在原标准基础上修订为：本品为棕褐色至黑褐色的大蜜丸；味苦。
②置显微镜下观察：韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整者长多角形、长方形或形状不规则，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色；草酸钙簇晶大，直径60-140μm；花粉粒类球形，直径约76μm，外壁有刺状雕纹，具3个萌发孔；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。
(2)采用薄层色谱法，以黄连和盐酸小檗碱为对照品，鉴别小儿明目丸处方中的黄连。
取小儿明目丸样品4.5g，剪碎，加甲醇40ml，超声处理45分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液，再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液2～5μl、对照药材与对照品溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝7∶1∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点，检测结果见图1
(3)采用薄层色谱法，以大黄为对照药材，鉴别小儿明目丸处方中大黄。
取步骤项(2)中的供试品溶液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，水浴上加热30分钟，用***分振摇提取3次，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶甲酸＝6∶2∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色，检测结果见图2、图3。
(4)采用薄层色谱法，以黄芩苷为对照品，鉴别小儿明目丸处方中黄芩。
取小儿明目丸样品2g，剪碎，加甲醇10ml，超声处理45分钟，滤过，滤液浓缩至约4ml， 作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，预平衡30分钟，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，检测结果见图4。
(5)采用薄层色谱法，以栀子苷为对照品，鉴别小儿明目丸处方中栀子。
取小儿明目丸样品9g，切碎，加硅藻土3g，研匀，加***50ml，超声处理15分钟，滤过，弃去醚液，残渣加乙酸乙酯50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸∶水＝10∶6∶2∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，检测结果见图5。
(6)采用高效液相法，以芍药苷为对照品，测定小儿明目丸处方中的赤芍含量。
①色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢钾溶液∶醋酸∶异丙醇＝67∶173∶4∶4为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于5000。
②对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml含40μg的溶液，取续滤液，注入液相色谱仪，结果见图6。
③供试品溶液的制备：取小儿明目丸样品，剪碎，取1.2g，精密称定，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率50W，频率50kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇再补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，注入液相色谱仪，检测结果见图7。
④阴性样品溶液的制备：按处方取除芍药的各味药味，按【制法】制得样品，再按②供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液。
⑤检测及结果测定：处方中赤芍占处方总量的9.68％，鉴于本品为生粉入药，按照国家药典委员会要求(生粉入药按80％转移率计算)，参照《中国药典》2005年版一部赤芍项下含量限度计算，每丸含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于0.61mg。
Claims (1)
1.一种中药制剂小儿明目丸的检测方法，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)性状和显微鉴别；
(2)以黄连和盐酸小檗碱为对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有黄连成分；
(3)以大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有大黄成分；
(4)以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有黄芩成分；
(5)以栀子苷对照品，薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中是否含有栀子成分；
(6)以芍药苷为对照品，高效液相法测定小儿明目丸处方中的赤芍含量；
所述性状和显微鉴别步骤为：
①性状鉴别：本品为棕褐色至黑褐色的大蜜丸，味苦；
②置显微镜下观察：韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整者长多角形、长方形或形状不规则，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色；草酸钙簇晶大，直径60-140μm；花粉粒类球形，直径约76μm，外壁有刺状雕纹，具3个萌发孔；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；
所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的黄连的方法为：
取小儿明目丸样品4.5g，剪碎，加甲醇40ml，超声处理45分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液，再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2～5μl、对照药材与对照品溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝7∶1∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有黄连成分；
所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的大黄的方法为：
取黄连检测中的供试品溶液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，水浴上加热30分钟，用***分振摇提取3次，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，同法制成对照药材溶液；薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙酸乙酯∶甲酸＝6∶2∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有大黄成分；
所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的黄芩的方法为：
取小儿明目丸样品2g，剪碎，加甲醇10ml，超声处理45分钟，滤过，滤液浓缩至4ml，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，预平衡30分钟，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有黄芩成分；
所述薄层色谱法鉴别小儿明目丸处方中的栀子的方法为：
取小儿明目丸样品9g，切碎，加硅藻土3g，研匀，加***50ml，超声处理15分钟，滤过，弃去醚液，残渣加乙酸乙酯50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸∶水＝10∶6∶2∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上是否相同斑点，以确定药品是否含有栀子成分；
所述高效液相法测定小儿明目丸处方中的赤芍含量的方法是：
①色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢钾溶液∶醋酸∶异丙醇＝67∶173∶4∶4为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于5000；
②对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml含40μg的溶液，取续滤液，注入液相色谱仪；
③供试品溶液的制备：取小儿明目丸样品，剪碎，取1.2g，精密称定，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇再补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，注入液相色谱仪；
④检测及结果测定：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各10μl，注入液相色谱仪，测定供试品中芍药苷的含量，进而经过计算得到赤芍的含量，参照《中国药典》2005版一部赤芍项下含量限度计算，每丸赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.61mg；
所述小儿明目丸由赤芍、黄芩、栀子、天花粉、大黄、金银花、菊花、盐制车前子、黄连、薄荷、甘草组成，其制备方法为：以上十一味，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜150～170g制成大蜜丸即得。
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| CN101485762A (zh) * | 2008-01-16 | 2009-07-22 | 韩勇 | 一种中药制剂的质量控制方法 |
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2009
- 2009-10-26 CN CN2009100709591A patent/CN102038785B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101485762A (zh) * | 2008-01-16 | 2009-07-22 | 韩勇 | 一种中药制剂的质量控制方法 |
| CN101408531A (zh) * | 2008-07-11 | 2009-04-15 | 包头中药有限责任公司 | 一种四季三黄丸的质量检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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