CN101969965A

CN101969965A - 受精卵分离物及其用途

Info

Publication number: CN101969965A
Application number: CN2009801085894A
Authority: CN
Inventors: J·拜恩; H·陈; J·萨达维; A·D·怀斯曼
Original assignee: United Paragon Assoc Inc
Current assignee: United Paragon Assoc Inc
Priority date: 2008-01-11
Filing date: 2009-01-09
Publication date: 2011-02-09
Also published as: US20190105355A1; BRPI0906484A2; JP2011509262A; CA2749333C; KR20100136963A; EP2244716A4; EP2244716B1; RU2010133518A; JP2014224144A; RU2521348C2; WO2009086634A1; US20170056453A1; CA2749333A1; AU2009203874B2; JP6262096B2; ZA201005727B; NZ587273A; US20110020466A1; US11285178B2; AU2009203874A1

Abstract

受精卵分离物，用于制备所述受精卵分离物的方法及其用于治疗精神健康障碍以及以下疾病或病症的用途：由一种或多种谷氨酸受体介导的或者与一种或多种谷氨酸受体相关的疾病或病症，或者由神经激肽2(NK2)受体介导的病症或疾病。

Description

受精卵分离物及其用途

相关申请的交叉引用

本申请要求以2008年1月11日提交的美国临时申请No.61/020,541和2008年3月3日提交的美国临时申请No.61/033,184为优先权基础，所述临时申请通过引用的方式纳入本文。

技术领域

本发明涉及受精卵分离物及其用于治疗精神健康障碍的用途，所述受精卵分离物包括通过本说明书中列出的任一方法制备的受精卵分离物。

背景技术

重性抑郁症(也被称为重性抑郁、临床抑郁、单相抑郁和单相障碍)在一般人群中很普遍。最近在北美的数据显示成年人中有14.5％的终身患重性抑郁风险并显示8.1％的年患率(结果来自：the 2004NationalSurvey on Drug Use and Health：National findings；Revisions as of9/8/2005；Department of Health and Human Services.Substance Abuseand Mental Health Services Administration Office of Applied Studies)。

使用现代疗法时抑郁发作的平均持续时间为约16周，但一些数据显示了约6-8月的更长持续时间，但这远远短于抗抑郁药治疗之前时约18个月的持续时间(Kendler，McLeod，Patten)。

抗抑郁药对于抑郁的治疗以及对于减少患者痛苦有非常积极的影响。抑郁患者的机能通常受损，并经常具有其他不健康病症，如实际由于抑郁导致的药物滥用。抑郁会造成卫生机构的负担增加，并且可对社群结构和社会经济具有破坏性的影响。

抑郁的成因不完全清楚。单胺合成和活性的失调在过去数十年一直是抑郁的主要病因学理论，并且增强单胺活性的(特别是那些5-羟色胺能和/或去甲肾上腺素能的)药物疗法的有效性加强了对这一观点的支持。然而，任何给定的抗抑郁药均仅在一小群抑郁患者中有效，并且经常仅部分有效。在使用选定样本进行的研究性可控试验中所实施的现行疗法仅在约60％的患者中有效，并且他们之中仅约半数症状完全消失。这一点是重要的，因为残余症状的存在是复发的强预测因素。存在与抑郁相关的其他生理学变化，这些变化可表明病因学因素的更复杂的相互作用(包括第二信使介导膜结合和细胞内加工的功能)。这导致了对以下事件的研究：激素通路，例如：下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴(在20-40％居住于社区的抑郁患者中其活性升高)、甲状腺轴(5-10％的被评估患有抑郁的患者以前未检测到甲状腺功能障碍)、生长激素、促乳素；炎症过程及其标记物(如白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子)的功能。

大多数患有重性抑郁症的人会经历一定程度的症状反复，并且有20-30％呈现为慢过程(定义为抑郁症状严重度的综合征水平不少于2年(Treatment of Chronic Depression(Editorial)))。

所有抑郁的人都需要连续的药物治疗以防止复发并使其康复。大部分的抑郁患者需要保持药物治疗以防止复发并进一步巩固社会心理的康复。然而，虽然有效抗抑郁药治疗中的一个主要因素是在足够的持续时间对患者保持足够剂量的药物，但是这通常是困难的。由于真实的或幻想的躯体效应，许多患者害怕服用现有的抗抑郁药。一些患者宁可使用所谓的天然促健康物质以及非药理学介入措施。准备服用抗抑郁药的患者经常会面临大量的副作用，这些副作用会导致他们变得不顺从或者完全拒绝治疗。例如，选择性5-羟色胺重摄取抑制剂(SSRI)通常会导致胃肠不适、头痛、睡眠紊乱、显著的性功能受损等许多副作用。大多数的抗抑郁药都至少具有一些明显的副作用，这些副作用限制了临床医生有效治疗许多患者的能力。

抑郁可能与其他病症和/或综合征有关，包括焦虑如广泛性焦虑症、性功能障碍、季节性情感障碍、社交焦虑症(另称为社交恐怖症)、双相型障碍和痴呆。

人们普遍认为，有限的疗效、通常无法接受的副作用以及可诱发抑郁进程又或者影响抑郁进程的生理因素使得必须继续寻找具有新型药理学作用的新化合物，以解决抑郁这个主要的公共健康问题。

附图说明

本领域技术人员会理解下述附图只是出于图示说明的目的。所述附图不欲以任何方式限制本发明的范围。

图1是根据本发明的实施方案从卵中取出的胚胎的照片。

图2是根据本发明的实施方案的冷冻干燥的胚胎的照片。

图3是根据本发明的实施方案的冷冻干燥的胚胎的照片。

图4是根据本发明的实施方案的被粉碎的冷冻干燥胚胎的照片。

图5是根据本发明的实施方案的若干胚胎的浆体的照片。

图6示出了根据本发明的实施方案的受精卵分离物的HPLC色谱图。

图7示出了对根据本发明的实施方案的受精卵分离物的分析结果。

图8示出的曲线图为多种浓度的受精卵分离物样品#20上层分离物(μg/mL)对经放射标记的CGP 39653与NMDA谷氨酸受体的激动药位点(亲离子型)的结合(测量为特异性结合的百分数)的影响，以及NMDA和样品#20上层分离物的IC₅₀和K_i。

图9示出的曲线图为多种浓度的受精卵分离物样品#20上层分离物(μg/mL)对经放射标记的红藻氨酸与红藻氨酸谷氨酸受体的红藻氨酸位点(亲离子型)的结合(测量为特异性结合的百分数)的影响，以及红藻氨酸和样品#20上层分离物的IC₅₀和K_i。

图10示出的曲线图为多种浓度的受精卵分离物样品#20上层分离物(μg/mL)对经放射标记的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑-丙酸(AMPA)与AMPA受体的AMPA位点(亲离子型)的结合(测量为特异性结合的百分数)的影响，以及(+/-)AMPA HBr和样品#20上层分离物的IC₅₀和Ki。

图11示出的曲线图为多种浓度的受精卵分离物样品#20上层分离物(μg/mL)对经放射标记的MDL-105，519与NMDA谷氨酸受体的***(strychnine)不敏感的甘氨酸位点(亲离子型)的结合(测量为特异性结合的百分数)的影响，以及MBL-105，519和样品#20上层分离物的IC₅₀和K_i。

图12示出的曲线图为多种浓度的受精卵分离物样品#20上层分离物(μg/mL)对神经激肽A(NKA)与NK2受体的结合(测量为特异性结合的百分数)的影响，以及神经激肽A和样品#20上层分离物的IC₅₀和K_i。

具体实施方式

根据本发明，描述了受精卵分离物及其治疗精神健康病症的用途。

受精卵分离物-制备

根据本发明的一个方面，提供了一种用于制备至少一个胚胎的粉化样品或从一个受精卵的一部分或全部内含物制备粉化样品的方法。将至少一个受精卵从该卵受精之日起孵化约3-约15天，更优选地约3-约5天，或更优选地约6-约12天，再更优选地约7-约9天。一般说来，所述受精卵被孵化一段时间，这段时间可使血管发生开始和/或使胚胎发育成熟至肉眼可见。所述卵可来自多个来源，如鸟类、爬行动物类或产卵哺乳动物。一般说来，可从其中将胚胎或胚胎相连的血管取出的任何卵都适用。所述卵优选地为鸟类的卵，可得自任何经繁殖用于产卵的鸟类，如鸡、鹅、鸭等。鸡卵是优选的，原因包括其可被大规模生产的可行性和能力。孵育可在任何环境中进行，只要使卵在一个可使胚胎成熟的温度下保持较长一段时间即可。适合的孵育温度范围是约20-约60℃，更优选的范围是约25-约55℃，更优选的范围是约35-约45℃。一旦卵被孵育一段时间后，则可任选地通过任何合适的方式对其进行处理以减少外部微生物群或对其进行杀菌，所述方式如：用诸如乙醇(例如约50％-约95％的乙醇溶液)的溶剂清洗卵壳，然后使溶剂蒸发或干燥；或者将所述卵在紫外线(UV)光源下旋转一段合适的时间。优选地，在进一步处理卵之前将所有溶剂蒸发。然后打破卵以获得里面的内含物。可在无菌条件下手动或使用合适的机械设备将卵打破。此过程和/或所有或大部分上下文所述的过程可在冷却的气氛如约5℃的气氛中进行。

根据本发明的一个方面，所述卵的内含物被收集在一个容器如不锈钢容器中，所述容器优选地为经灭菌的和/或经冷冻的。取自所述容器或取自卵的内含物可任选地接受过滤处理，例如通过置于筛网上进行过滤。筛网孔为约0.5-约4mm，更优选地为约1mm。所述筛网优选地为无菌的。

任选地，所述卵的内含物和/或部分或全部的破裂卵壳可被直接置于所述筛网上。使所述卵的内含物和/或部分或全部的破裂卵壳在所述筛网上过滤一段时间，直至基本不再有液滴通过所述筛网。破裂卵壳可在过滤过程之前、之中或之后从卵的内含物中除去。过滤后，固体或者固体和半固体保留物可包含胚胎、血管***、大部分或全部卵清、大部分或全部卵带和清囊(clear sac)。半固体保留物可包含固体物质及粘性物质，例如胶状物质如卵清。所述保留物或半固体保留物任选地可用合适的溶剂(如缓冲溶液、无菌去离子水或任何合适的盐水溶液)清洗至少一次。例如，可使用无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)。

可根据本文所述方法从一个卵中收集所述保留物然后对其进行冷冻干燥，或者可根据本文所述方法从一个或多个卵共同收集所述保留物，然后对其进行冷冻干燥。

根据本发明的另一方面，可将白蛋清部分和/或胚胎与其他卵内含物基本分离。可通过任何合适的方法(如倾出白蛋清部分)或通过抽吸将白蛋清部分与其他内含物基本分离。可手工或通过技术人员确定的其他合适方法将胚胎与白蛋清部分基本分离。图1显示了一个从卵中取出然后用缓冲液清洗的胚胎的实例。本领域技术人员会认识到可同时将胚胎与白蛋清部分和其他内含物基本分离。例如，可使用镊子或其他合适的工具手工将胚胎从白蛋清部分和其他内含物中取出。在某些情况下，可手工将胚胎从卵黄囊上剥离，卵黄囊形成其他内含物的一部分。

胚胎与卵的白蛋清部分和其他内含物基本分离后，任选地用合适的溶剂(如缓冲溶液、无菌去离子水或任何合适的盐水溶液)将所述胚胎清洗至少一次。例如，可使用无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)。

应理解，如果对卵的内含物进行过过滤处理，那么对于以下的方法而言，言及卵的内含物时实际上是指保留物。还应理解，可根据上述和下述的任何方法打破完整受精卵、除去卵壳以及冷冻和冻干整个去壳的卵，以产生本发明的受精卵分离物。另外，可根据上述和下述的任何方法打破多个完整的受精卵、除去壳、将所有去壳的受精卵合并并混合成浆体，然后冷冻和冻干。

卵的内含物或胚胎被置于至少一个可冷冻的容器中。所述容器可为例如试管、培养皿、烧杯、不锈钢托盘或塑料容器。优选地，所述内含物或胚胎在从壳中取出后很快被冷冻，如约2小时内，更优选地在约1小时内，甚至更优选地在约0.5小时内或尽可能快。根据所述内含物或胚胎即将冷冻的时间长短，冷冻温度范围可为约-50℃到约10℃，更优选地为约-40℃到约5℃，甚至更优选地为约-35℃到约-25℃。优选地，将所述内含物或胚胎冷冻至少约6小时，更优选地至少约12小时，甚至更优选地至少约24小时。冷冻的内含物或胚胎可在一段时间后被冷冻干燥或冻干。所述内含物或胚胎可在冷冻干燥/冻干步骤之前被完全冷冻。图2和3示出了冷冻干燥后的胚胎实例。

任选地，可将冷冻或未冷冻的内含物或胚胎合并于合适的容器中(例如烧杯或塑料容器)，并根据需要将其与合适的溶剂混和或混合，形成浆体。所述溶剂可具有合适的水分，以使混和的内含物或胚胎变湿，并且能够在标准的实验室冷冻机中冷冻。合适的溶剂包括水、水性缓冲物等。为了形成浆体，优选地将所述内含物和/或胚胎混合。可以用例如手持混合器或其他合适的工具将所述内含物或胚胎混合或匀浆。然后将所述浆体如上述冷冻并冷冻干燥。优选地，进行冷冻干燥的极限温度范围为约-80℃到约-10℃，更优选地为约-65℃到约-15℃，甚至更优选地为约-40℃到约-20℃，压力为约500毫托或技术人员可确定的其他合适压力。优选地，冷冻干燥过程维持在极限温度下的时间为约1-约6小时，更优选地为约2-约5小时，甚至更优选地为约3-约4小时。进行整个冷冻干燥过程的时间一般为约15-约45小时，更典型地为约25-约35小时，甚至更典型地为约28-约32小时。

根据本发明的另一方面，冷冻干燥的内含物、冷冻干燥的胚胎或冷冻干燥的浆体在需要时可被分散和/或粉碎以形成基本均一的粉末。分别或成小组进行冷冻干燥的内含物可在粉碎步骤之前或之后被合并在一起，形成基本均一的粉末。粉碎可例如使用合适的机器(如咖啡豆研磨机或锤式粉碎机)机械地完成，或使用合适的工具如玻璃棒手工完成。图4显示了粉碎的冷冻干燥胚胎的实例。所述粉末任选地在储存和/或使用之前被灭菌。合适的灭菌过程不应对某些冷冻干燥组分有不利影响。

根据本文所述的任何方法，在贮存粉剂或浓缩物前，可以将控制微生物生长的防腐剂混合于其中。防腐剂还可以在制造的另一阶段(包括在冷冻干燥或浓缩步骤前)加入，而不是加入到粉剂或浓缩物中或者同时加入到粉剂或浓缩物中。合适的防腐剂包括常见的食品防腐剂如0.5％w/w的苯甲酸钠和0.2％w/w的山梨酸钾。其他合适的防腐剂可由技术人员选择。

用本文所公开的方法生产的粉末可被储存在合适的、基本气密的容器中。合适的容器包括塑料袋、桶、塑料容器、瓶、它们的组合等。例如，所述粉末可在受控无菌条件下被包装至带有防损安全封的无菌聚乙烯/聚丙烯瓶中。所述粉末可在基本干燥的惰性气体如氮气中储存。所述粉末优选地存储在室温或更低温度下，例如约10℃到约25℃，更优选地约15℃到约-20℃。对于长期储存，所述粉末优选地存储在约-10℃或更低温度下，或者更优选地，约-20℃或更低温度下。所述粉末可在基本干燥气氛中存储一段时间。所述粉末也可被真空包装。

根据本发明的另一实施方案，如上述制备浆体或者可通过以下方式制备浆体：将至少一个受精卵的内含物或胚胎与卵壳分离，并将所分离的内含物或胚胎合并于合适的容器中。分离的内含物或胚胎可在此步骤中被冷却。例如，可将所述容器置于冰上以促进冷却。可以通过上述的方法混合所述内含物或胚胎以产生浆体。图5显示了胚胎浆体的容器的实例。所述浆体可如上述被冷冻干燥，或者如下文所述部分地或全部地用于提取步骤。

通过将所述浆体与水溶液混和一段时间以进行水相提取过程。所述水溶液可包括水、缓冲水溶液或任何其他水性溶剂。如果所述水溶液包含水，那么所述水优选地为蒸馏水，更优选地，还在使用前已去除离子。例如，可使用反渗透(R.O.)对所述水进行处理。所述浆体和水溶液可通过例如搅拌一段时间进行混和，所述时间的范围为约5-约60分钟，更优选的范围为约10-约45分钟，甚至更优选的范围为约15-约40分钟。理想地，所述水溶液与内含物浆体充分接触，从而使溶液中任何基本亲水的分子都溶解在所述水溶液中。使用的水溶液的体积可与浆体体积基本相等，但也可为浆体体积的1.5倍、2倍、甚或3倍。任选地，可在混和步骤中轻微加热所述混合物。混和后，可通过合适的方法(如离心或过滤)基本除去混合物中的任何固体部分，籍此使所述水溶液基本澄清。澄清的水相部分随后可根据本文所述方法被冷冻和冷冻干燥以产生粉末，对所述粉末任选地进行灭菌。

根据本发明的另一方面，通过任何上述方法产生的浆体可与基本疏水的溶剂相混和。基本疏水的溶剂优选地为经冷却的。合适的疏水溶剂包括例如醚、三氯甲烷、己烷、石油醚或乙腈。例如，可使用醚尤其是***。如上所述，将所述浆体与所述疏水溶剂混和一段时间。相关领域的技术人员可认识到，使用基本疏水溶剂的方法的任何步骤都应在通风橱或类似设备中进行，且所述溶剂应避开明火或热源。混和一段时间之后，可通过合适的方法(如离心或过滤)将所述混合物的固体部分从溶剂部分中基本除去。所述溶剂部分将主要包含疏水溶剂部分，也可能包含水相部分。所述溶剂部分可被转移到一个分液漏斗或基本相当的装置中以将水相部分与疏水溶剂部分分开。如果顶层是疏水溶剂部分，则可将它从顶部吸出，或在底部水层被移除后将其从分液漏斗中移出。或者，底部水相部分可被冷冻，从而使顶部醚层可被倒出。水相部分可用疏水溶剂多次提取，如提取约3次。疏水溶剂与水相部分的体积可基本相等，或可为水相溶剂体积的1.5倍、2倍、甚或3倍。其他比率也可能是合适的。

提取过程之后，可以合并所有疏水分离物并用合适的方法浓缩。浓缩的分离物可在低于室温的温度(如约5℃)下储存在基本气密的合适容器如密封的小瓶中。

根据本发明的另一方面，通过上述任何方法生产的浆体可在提取步骤前澄清。优选的澄清步骤包括过滤法，使用过滤器如滤网或者滤纸或滤垫。其他澄清步骤可包括离心法。可在进一步澄清之前向过滤步骤产生的滤液中加入助滤剂如Superflow DE^TM。部分所得到的滤液可在合适的容器中被冷冻以进行冷冻干燥。另外，部分所得到的滤液可与上述疏水溶剂混和从而形成水层和疏水层。各层可如本文所述被分离、浓缩和储存。

通过本文所述的多种方法制备的受精卵分离物可以通过反复和/或组合处理被制备来增加效力。例如，可以对同一样品反复进行水性和/或疏水溶剂提取，以浓缩活性化合物。

受精卵分离物-用途

通过本文所述方法或者通过基于本发明的教导对于本领域技术人员而言显而易见的类似方法制备的受精卵分离物可用于治疗患有精神健康障碍的患者，所述精神健康病症包括抑郁情感障碍，如重性抑郁症、心境恶劣障碍(dysthymic disorder)、双相型障碍的抑郁相、由一般医学病症引起的抑郁如与痴呆或情感***性精神障碍有关的抑郁、物质诱发型抑郁和季节性情感障碍、焦虑症如广泛性焦虑症、社交恐怖症和恐慌症以及性功能障碍。如相关领域技术人员应了解的，治疗抑郁或焦虑这类病症可以为一种治疗与它们相关的其他障碍和/或症状(例如上文列出的那些)的有用方法。在一个实施方案中，所述患者为人。

如本文中详述的，已经确定，本发明的受精卵分离物可拮抗一些配体与其受体的结合相互作用。具体而言，已经发现，本发明的受精卵分离物具有从4个主要的谷氨酸受体中置换出谷氨酸的能力。另外，所述受精卵分离物可以从神经递质神经激肽A(NKA)的受体——神经激肽2(NK2受体)中置换NKA的能力。据本发明人所知，这是首次发现这两组受体被单一物质拮抗。

谷氨酸(glutamate)是人脑中最有兴奋物质之一。已知许多疾病和病症受一种或多种谷氨酸受体介导或者与一种或多种谷氨酸受体的活化有关。这些疾病和病症包括抑郁(参见例如，Paul，Toro，Mathew 2005，Krystal，Sanacora 2003，Svenningsson，McNaIIy)、重性抑郁症(参见例如，Maeng，Chourbaji，Mathew 2008)、焦虑(参见例如，Rorick-Kehn)、阿尔茨海默氏病(参见例如，Walton，Koch，Hynd)、癫痫(参见例如，Kew，Vincent)、精神***症(参见例如，McCullumsmith，Lewis，MacDonald，Javitt)、中风/缺血后的脑细胞功能病损(参见例如，Ginsberg，Kew)、肌萎缩侧索硬化(葛雷克氏症(Lou Gehrig’s Disease))(参见例如，Mathew 2008，Miller)、山黧豆中毒(参见例如，Spencer，Ravindranath)、孤独症(参见例如，Chez)、精神发育迟缓(参见例如，Bowie)、认知紊乱(参见例如，Cheon)、双相型抑郁(参见例如，Mathew 2008)和躁狂症(参见例如，Krystal)。此外已表明，谷氨酸受体的拮抗物如***和利鲁唑(riluzole)可用于治疗抑郁(Mathew 2008)、重性抑郁症(Maeng，Mathew 2008，Zarate 2004，Sanacora 2007)、肌萎缩侧索硬化(Mathew 2008，Miller)和双相型抑郁(Mathew 2008，Zarate2005)。通过抑制谷氨酸结合于其受体而抑制一种或多种谷氨酸受体的活化，可减少或消除由一种或多种谷氨酸受体介导的或者与一种或多种谷氨酸受体相关的病症或疾病。如本文所述，由于已经确定本发明的受精卵分离物可结合于一种或多种谷氨酸受体，所以本发明的受精卵分离物可用于治疗与一种或多种谷氨酸受体相关的或者由一种或多种谷氨酸受体介导的病症或疾病。

因此，本发明另一方面的特征在于一种使用受精卵分离物治疗与谷氨酸受体相关的或者由谷氨酸受体介导的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。这类谷氨酸受体包括亲离子型谷氨酸受体，例如α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑-丙酸(AMPA)受体、红藻氨酸受体(kainatereceptor)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体。与谷氨酸受体相关的或者由谷氨酸受体介导的疾病或病症可包括抑郁、重性抑郁症、焦虑、阿尔茨海默氏病、癫痫、精神***症、中风/缺血后的脑细胞功能病损、肌萎缩侧索硬化(葛雷克氏症)、山黧豆中毒、孤独症、精神发育迟缓、认知紊乱、双相型抑郁或躁狂症。

还已知许多疾病和病症由NK2受体介导或者与NK2受体活化相关。这类疾病或病症包括抑郁(参见例如，Dableh，Ahlstedt，Michale，Louis，Steinberg，Salomé，Holmes，Steinberg，Husum)、焦虑(参见例如，Ahlstedt，Michale，Louis，Greibel，Steinberg，Stratton，Teixeira，Walsh，Salome，Holmes)、肠易激综合征与炎性肠综合征(参见例如，Ahlstedt，Lecci，Evangelista，Toulouse)、炎性气道疾病(参见例如，Bai)和尿失禁(参见例如，Ahlstedt，Rizzo)。此外已表明，NK2受体的拮抗物如沙瑞度坦(saredutant)(SR 48964)可用于在动物模型中促进抗抑郁药样作用(Salomé，Dableh，Steinberg，Michale，Louis)和抗焦虑作用(Teixeira，Salomé，Griebel，Michale，Louis)，并且已经进行了在人体中的研究。通过抑制NK2的一种或多种内源性配体来抑制NK2受体的活化(例如抑制NKA结合于其受体)，可减少或消除由NK2受体介导的或者与NK2受体相关的病症或疾病。如本文所述，由于已经确定本发明的受精卵分离物可结合于NK2受体，所以本发明的受精卵分离物可用于治疗与NK2受体相关的或者由NK2受体介导的疾病或病症。

因此，本发明另一方面的特征在于一种使用受精卵分离物治疗与NK2受体相关的或者由NK2受体介导的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。与NK2受体相关的或者由NK2受体介导的疾病或病症可包括抑郁、焦虑、肠易激综合征或尿失禁。

用于治疗与一种或多种谷氨酸受体和NK2受体相关的或者由一种或多种谷氨酸受体和NK2受体介导的疾病或病症的受精卵分离物可包括来自受精卵的经冷冻干燥的胚胎、卵清蛋白和清囊；或者它可以是以这样的方式生产的，即它不含来自受精卵的大量卵黄。受精卵分离物可依照本文描述的方法或者通过本领域技术人员已知的类似方法进行制备。在用于治疗与谷氨酸受体或NK2受体相关的或者由谷氨酸受体或NK2受体介导的疾病或病症的方法中，在所述治疗的同时可以对患者进行或者不进行心理治疗。

本发明的另一方面是治疗精神健康障碍的方法，包括将受精卵分离物给予需要其的患者，以及受精卵分离物用于这类目的的用途。

本文描述的受精卵分离物可配制为多种剂型以及以多种剂型给药，所述剂型例如那些适合于通过以下途径给药的剂型：口服途径(包括含服和舌下给药)、直肠途径、鼻内途径、局部(包括含服、舌下给药和经皮给药)、***途径、直肠途径或肠胃外途径(包括皮下途径、肌内途径、静脉内途径或真皮内途径)。特别优选的是适合于通过口服途径给药的剂型。其他优选的剂型包括那些适合于通过***或直肠途径给药的剂型，例如栓剂。

适合于口服的受精卵分离物制剂可呈现为离散单元，例如胶囊剂、片剂、微粒剂、粉剂、颗粒剂、水性液体或非水液体的溶液或悬液、可食用泡沫或搅打食品(whips)或者水包油乳剂或油包水乳剂。受精卵分离物可与合适的且口服无毒的可药用惰性载体结合。对于胶囊剂，合适的胶囊体(如明胶鞘)可用于将受精卵分离物单独或者与一种或多种合适的且无毒的可药用惰性载体组合装入胶囊。例如，对于片剂和胶囊剂，合适的载体可包括但不限于可食用碳水化合物如淀粉或甘露醇、调味剂、防腐剂、分散剂、结合剂和着色剂，并且可包括气相二氧化硅(fumed silica)。依照药物制剂领域技术人员已知的方法，还可制备所述制剂以延长或者维持受精卵分离物的释放。

用于治疗的有效剂量将取决于患者。有效剂量可以为约200-约6000mg/天、约500-约4000mg/天、约750mg/天-约3500mg/天、约800-约3000mg/天、约1000-约2500mg/天。例如，有效剂量可以为约2000mg/天。

术语“治疗”是指使正在服用本发明受精卵分离物的患者的疾病或病症好转。该术语包括改善所述疾病或病症，并且这类改善可使用本领域中已知的标准试验进行确定。所述术语还包括预防所述疾病或病症的发生或复发，例如在预防治疗或维持治疗中。

本发明另一方面的特征在于一种用于抑制谷氨酸受体的活性的方法，包括将所述谷氨酸受体与有效量的受精卵分离物相接触。该方法可使用亲离子型谷氨酸受体来进行，例如AMPA受体、红藻氨酸受体或NMDA受体。

另外，本发明的特征在于一种用于抑制NK2受体活性的方法，包括将所述NK2受体与有效量的受精卵分离物相接触。

谷氨酸受体或NK2受体的活性可以通过例如以下方式抑制：抑制所述受体与其一种或多种内源性配体(例如，对于谷氨酸受体，为谷氨酸；对于NK2受体，为NKA)或者可市购的外源性配体(例如，对于谷氨酸受体，为AMPA、NMDA、红藻氨酸、CGP 39653或MDL-105，509；并且对于NK2受体，为沙瑞度坦)的结合。用于抑制这类结合相互作用以及用于检测这类结合抑制的方法是本领域技术人员已知的，并且也被记载于本文中。谷氨酸受体或NK2受体的活性可被100％抑制或者不到100％(例如90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％或10％)抑制。用于抑制谷氨酸受体或NK2受体活性的方法可在体外(例如在细胞、细胞裂解物或含细胞的一部分(如仅所述相关受体)的样品中)或者在体内(例如在病人中)进行。

根据本发明的又一实施方案，所述受精卵分离物可以与可用于治疗精神健康障碍的其他化合物一起配制。例如，所述受精卵分离物可以与可抑制5-羟色胺崩解的化合物(例如单胺氧化酶抑制物)一起配制。

本领域技术人员从具体实施方式会容易地明白本发明的其他目标和优点，所述具体实施方式中只简单地通过举例说明的方式描述了优选的实施方案。如可被认识到的，本发明能够以其他和不同的实施方案实施，且其若干细节可在多个明显的方面被修改，条件是这些都不偏离本发明。因此，下面的描述和实施例被认为事实上是用于示例性的而非限制性的。

实施例

实施例1

选择8-9日龄的受精鸡卵。用70％的乙醇对整个卵消毒并置于通风橱中以使70％的乙醇蒸发。打破所述卵并使内含物通过无菌的1.0mm筛网滴下。丢弃卵壳和滤出液。收集保留物——包括固体和液体——并在冰上冷冻。将所述保留物在5℃下匀浆。所述匀浆物(浆体)被倒入无菌不锈钢托盘中，冷冻并冷冻干燥。将该干燥的产物用研磨机研成粉末。将防腐剂0.5％w/w的苯甲酸钠和0.2％w/w的山梨酸钾加入所述粉末，并混合所述混合物。将最终的粉剂保存于2-8℃(短期)或-20℃(长期)。

实施例2

根据以下方法从受精鸡卵中收集8日龄的鸡胚：

(i)收集24枚褐色卵(brown egg)；

(ii)当被打破时，发现24枚卵中只有22枚受精且其中含有发育的胚胎(91.6％的受精率)；

(iii)将胚胎取出并在无菌PBS中简单清洗(两次)，然后立即在-20℃下分别冷冻在50mL(毫升)试管中；

(iv)然后将10个试管在冷冻干燥机中进行冷冻干燥(架温＝-40℃，冷凝器温度＝-52℃)；

(v)在此操作过程(cycle)结束时，将各个胚胎(仍在试管中)用无菌玻璃棒压碎，并包装得到的粉末(1.7g(克))；

(vi)将12枚剩余的胚胎收集在一个小烧杯中并用手持混合器将其与少量的水搅拌混合；

(vii)将所产生的浆体迅速冷冻，随后如上述将其冷冻干燥。

结果

干燥后，使用玻璃棒将所述粉末(1.7g)均匀分散，批号为A。每枚胚胎产生0.17g粉末。

使用玻璃棒将干燥的浆体(1.6g)均匀分散，批号为B。每枚胚胎产生0.14g粉末(湿度未知)。

实施例3

收集60枚受精卵(8日龄胚胎)。以下描述了水分离物和***分离物的制备。

所有卵都用70％(v/v)乙醇喷雾以对外表面进行灭菌，然后将所述卵置于层流通风橱中使乙醇蒸发。打破所述卵，再小心地将胚胎和相连的清囊及其清水样内含物与其余的卵黄和血管物质分离。然后，将所有物质即胚胎和清囊收集在一个在冰上预冷的烧杯中。收集后，借助手持混合器将所述物质混合形成浆体。

将得到的浆体(约200mL)分成相等的两份；一份用于用水提取，另一份用于用***提取。

水分离物

在100mL所述浆体中加入100mL反渗透水，再将所述物质在室温下搅拌30分钟。将所述物质通过离心使其澄清并收集水性上层(200mL 1.1％固体)。然后将水性上层冷冻，随后进行冷冻干燥。干粉重1.0g。

***分离物

将100mL预冷的***加入100mL所述浆体中。在室温下振摇该混合物，然后进行离心。在离心过程(15分钟，5℃)结束时，上面的水/***层被转移到分液漏斗中，并通过虹吸作用收集上面的***层，或通过在-20℃下——该温度会使下面浑浊的水层冻结，而上面的黄色澄清***层不冻结——冷冻一段时间之后倾出上面的***层来进行收集。

再用等体积的***如上所述提取下面的水层，将该过程重复三次。然后将***分离物在Rotavap^TM中浓缩并干燥至很小的体积(约1mL)。所述样品被置于5℃下。

实施例4

将420枚受精卵(8-9日龄胚胎)用70％(v/v)乙醇喷雾以尽可能地对外表面进行灭菌，然后将所述卵置于通风橱中使乙醇蒸发。

打破所述卵(发现420枚中有62枚未受精，受精率为85.2％)，小心地将胚胎和相连的清囊及其清水样内含物与其余的蛋黄和血管物质分离，再将所有物质即胚胎和清囊收集在一个在冰上预冷的烧杯中。将收集的物质(约2L)置于5℃下。

水分离物

收集后，用手持混合器将所述物质混合成浆体。使得到的浆体(约2L)通过一个金属滤网(20目)。用纸滤垫和DE 6000将滤液进一步澄清。丢弃留在滤垫上的滤饼。在滤液中加入Superflow DE^TM，然后通过使所述物质通过滤垫以使其进一步澄清。使用布氏漏斗(Buchner funnel)以实验室规模完成所有过滤。所得滤液的大部分(约1200-1300mL)被分离出并立即在托盘中冷冻用于冷冻干燥(1.9％固体)。剩余的500mL与等体积的预冷的***在1L的瓶中混和并置于5℃下直至分为两层。

***分离物

将500mL预冷的***加入500mL所述浆体中，在室温下振摇该混合物，然后进行离心。在离心过程(15分钟，5℃)结束时，上面的水/***层被转移到分液漏斗中，并通过虹吸作用收集上面的***层，或通过在-20℃下——该温度会使下面浑浊的水层冻结，而上面的黄色澄清***层不冻结——冷冻一段时间之后倾出上面的***层来进行收集。

再用300mL***如上所述提取下面的水层，然后将分离物收集在一个预冷的圆底烧瓶中。然后将所述***分离物在Rotavap^TM中浓缩并干燥至很小的体积。所述样品被保存在5℃下。

实施例5

受精卵分离物A

为了生产受精卵分离物A，将8-9日龄整个受精鸡卵用70％乙醇灭菌，然后置于通风橱中使溶剂蒸发。打破所述卵并使内含物在无菌1.0mm筛网上滴下，或者通过无菌1.0mm筛网。丢弃卵壳和滤出液。将保留物——包含胚胎、清囊以及全部或大部分的卵清蛋白，并由固体和半固体以及/或者液体部分组成——在冰上冷却，然后将其在5℃下匀浆。将所述匀浆物(浆体)注入无菌不锈钢托盘中，并冷冻干燥。将该干燥的产物用研磨机研成粉末，得到分离物A。向分离物A中加入防腐剂苯甲酸钠(0.5％w/w)和山梨酸钾(0.2％w/w)，并混合所述混合物。将最终的粉剂保存于2-8℃(短期)或-20℃(长期)下。

HPLC分析

包含受精卵分离物A的最终粉剂通过高效(高压)液相色谱(HPLC)进行分析。使用多波吸收检测仪定量所述结果。在215nm下读取吸收值。使用Pharmacia Superdex 20010/300GL尺寸排阻柱(10mm i.d.×300mm)用于分级分离。该柱的分离范围是10kDa-600kDa。以pH 7.5的20mM磷酸盐+0.3M NaCl平衡该柱。在0.5mL/min的流速下分析所述样品。代表性色谱图显示于图6。

分析的验证

还将含分离物A的最终粉剂经过标准的分析步骤分析，以测量纯度以及蛋白质、脂肪、灰分、水分和各种污染物的含量。代表性样品的结果显示于图7。

制剂A胶囊剂

为了制备制剂A的胶囊剂，使用几何稀释法将4000.0g(+/-2％)含分离物A的最终粉剂、苯甲酸钠(0.5％w/w)和山梨酸钾(0.2％w/w)与40g(+/-2％)气相二氧化硅混和。筛分所述混合物，并重复进行混和和筛分，形成制剂A。使用Mini-Cap 300#0白色胶囊包封所述制剂A混合物至505mg的目标填充重量，以产生制剂A胶囊剂。

实施例6

对制剂A用于治疗重性抑郁症(MDD)及其相关障碍/症状的研究

研究了固定剂量的制剂A用于治疗精神障碍(例如MDD及相关障碍和症状)的效力和安全性。该研究包括对制剂A减少焦虑症状、提高生命质量以及改善性功能障碍症状的作用进行评估。

评估技术的描述

Hamilton抑郁评定量表-17项-“HAM-D”或“HAM-D 17”

这是在北美使用的用于评估患者抑郁的最主要评定量表。总分值可解释如下：十分严重，＞23；严重，19-22；中度，14-18；轻微，8-13；和无抑郁，0-7。

Hamilton焦虑评定量表-14项-“HAM-A”

该评定量表可评估患者的焦虑水平。分值水平解释如下：＜17，轻微；18-24，轻微至中度；和25-30，中度至严重。

抑郁评定量表-“MADRS”

这是在北美使用的用于评估患者抑郁的最主要评定量表。根据研究，下述平均分值与总体严重性测量值相关联：十分严重，44；严重，31；中度，25；轻微，15；和康复，7。

Beck抑郁问卷-“BDI”

这是一种通常应用的抑郁症状量度，一般用作自我评估工具。该总分值是21项分值的简单和。一般而言，分值＜9表示无抑郁或极微抑郁，10-18表示轻微至中度抑郁，19-29表示中度至严重抑郁，＞30表示严重抑郁。然而，0-4的分值可表明可能没有抑郁，40-63的分值可表明可能夸大抑郁或者表演型人格障碍或边缘型人格障碍。

亚利桑那性体验量表-“ASEX”

这是一个定量***并评估性唤起水平、***润滑/******、达到高潮的能力和高潮满意度的5项评定量表。

可能的总分值范围是5-30，分值越高表示性功能障碍越大。

一般健康问卷打分-“GHQ”

生命维度的质量可以以简表36(SF-36)评估。该问卷可评估诸如集中注意力的能力、焦虑感、自信心差、自我价值感差、忧愁和抑郁的这类问题。打分如下：

李克特量表(Likert scale)，从左至右，0、1、2、3。

12项，每项0-3。

分值范围0-36。

分值随研究的群体变化。分值一般为约11-12。

分值＞15，苦恼迹象。

分值＞20表明有严重的问题和心理应激。

精神障碍诊断与统计手册(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders)-第IV版-修订文本-“DSM-IV TR”

这在北美是精神健康专业人员的标准诊断手册，其对精神障碍进行了全面的分类，并基于现有最好的经验性证据提供诊断精神障碍的广泛接受标准。

测量的主要效应是重复测量的方差分析，并以HAM-D的分值为输出变量。第二效应量度包括CGI-S和CGI-I、MADRS、SF36、BDI、HAMA和ASEX。

研究的描述

在位于加拿大安大略省多伦多的西奈山医院(Mount SinaiHospital，MSH)进行了开放性研究。患者通过媒体广告、从MSH门诊病人计划以及其他临床中心转诊来招募。

该方案描述了一项开放性初步研究，以研究制剂A的潜在抗抑郁药活性。该初步研究的目标是为了证明制剂A具有这样的潜力，即使MDD有明显好转，高于在其他试验中得到认可的已知安慰剂效应的水平；并且是为了证明制剂A在该患者群中是可用的疗法。该初步研究的第二目标是为了评估制剂A减少焦虑症状和提高生命质量的作用。

使用DSM-IV TR标准和HAM-D对每名患者筛查MDD。他们一旦参与研究，就被安排到为期8周的开放性制剂A研究中。将所述患者通过整体测量、CGI严重度(GCI-S)量表和CGI改善(CGI-I)量表来进一步评定。副作用使用The Udvalg for Kliniske

(UKU)副作用评定量表(Lingjaerde)***地进行评估。抑郁症状的第二量度为Montgomery

抑郁评定量表(MADRS)和作为自我评估工具的Beck抑郁问卷(BDI)。生命维度的质量可以以简表36(SF-36)评估。焦虑使用14项HAM-A评估。

在固定剂量的开放试验中，基于标准的抑郁治疗方案治疗患者的抑郁。研究人员在基准时间以及在2、4、6和8周(W)复查时以所述评定量表确定抑郁的严重性。在介入的几周中，以简短临床评定(V)观察患者，以评估抑郁和药物耐受。

制剂A的剂量

制剂A的剂量为约2000mg/天(均约500mg的2个制剂A胶囊，每天口服两次)。

患者的加入标准

为了加入该研究，患者必须满足多个加入标准，包括如下所述的标准(i)-(vi)。

(i)达到DSM-IV TR重性抑郁症标准的临床诊断，单次发作或复发。

(ii)17项Hamilton抑郁评定量表(HAM-D 17项)，基准时间的总分值为18或更高。

(iii)18-65岁男性/女性，他们需要新的用于确诊的重性抑郁的药物治疗，或者需要对其已有的用于确诊的重性抑郁的药物治疗进行改变。治疗决定仅依据临床医师认定的适合于该患者的护理标准的判断作出。然而，在试验的8周过程中不允许增强策略。

(iv)英语读写能力。

(v)获得书面签名的知情同意书，

(vi)在筛选时妊娠试验为阴性。

排除标准

如果患者满足多个排除标准则将其从本研究中排除，所述排除标准包括下述标准(i)-(xiii)。

(i)任一其他DSM IV TR诊断，包括对除DSM-IV TR MDD之外的抑郁的临床诊断(排除单次发作/复发，例如慢性抑郁和/或难治性抑郁)。

(ii)经判断有重大***风险(HAMD***评分＞1)，或者有表明非常想自残的冲动(current potential)的历史。

(iii)制剂A之外的任意抗抑郁药治疗。

(iv)服用并且不能或不愿意停止用于抑郁的天然健康产品的受试者。

(v)怀孕、母乳喂养、在接下来的12个月计划怀孕或者避孕保护不充分的女性。

(vi)临床上显著的器官***疾病，例如心血管病、肝病、肾病、内分泌病、胃肠病、代谢病或其他***疾病。

(vii)处于观察期的电惊厥治疗(ECT)经历。

(viii)患有主要神经***病症(即帕金森病、亨廷顿病)、脑血管病(即中风)、代谢病症(即维生素B12缺乏病)、自身免疫病症(即***性红斑狼疮)、病毒或其他感染(即肝炎、单核细胞增多症、人免疫缺陷)或者癌症。

(ix)临床或亚临床甲状腺机能减退症/甲状腺功能亢进症(例如升高的TSH)。

(x)对家禽或卵起***反应。

(xi)已经在接受心理治疗或者在试验中开始心理治疗的受试者。

(xii)筛查血液和尿液分析中具有临床显著异常的实验室结果的受试者。

(xiii)在清除期(washout period)变得显著严重的受试者。

研究设计

这是一项在25名患者中进行的单点、开放性随机研究，设计该研究来验证制剂A单一疗法的效力和安全性。

该试验由8周评估期组成，如果需要，在之前还有2周的抗抑郁药清除期。

筛查

一旦医师和/或研究协调者充分地告知受试者所述研究、治疗的性质和他们的其他选项，并且所述受试者签署知情同意书文本，医师即进行临床的DSM IV TR诊断并实施HAM-D 17。然后对合格受试者进行医学、精神病史和同步疗法的审查，随后进行体检。另外，研究协调者进行了基准时间的实验室试验，包括尿(Routine &Microscopic)、CBC分类(CBC differential)和血小板、电解质、胆红素、BUN、肌酸酐、TSH、肝功试验、血清肌酸酐和ECG。通过hCG血液测试获得对女性患者的妊娠筛查。排除怀孕患者以及那些具有临床显著异常实验室试验的患者。

第0周

对患者重新进行基准时间的检查(第0周)并由医师安排到制剂A单一疗法组。将抑郁的并且正用抗抑郁药但无效果的患者换成制剂A。

接下来的几周

在最初评估和开始制剂A治疗(V1和V2)后，每周定期检查持续8周(W2-W8，V3-V6)。用其他抗抑郁药物并且选择参加该研究的患者进入1-2周的清除期，然后开始8周的活性药物试验。清除期由医师临床斟酌。在该期间，由精神科医师每周检查一次监测患者的清除情况，并且由研究协调者一周中期通过电话进一步监测。要承认的是，抑郁在清除期会恶化。然而，如果以前的药物是无效的或部分无效的，那么在该方案中，1-2周的延迟将显著引起抑郁加重(decline)的风险不会显著大于常规护理，条件是在该时间中仔细监测受试者并且根据需要进行合适的介入。如果制剂A对于具体患者来说不是有效抗抑郁药，那么该患者可能处于抑郁过度延长的风险中。然而，抑郁是一种慢性障碍症，该障碍症通常在被确诊或治疗之前已经存在数月，因此在进行仔细监测和给予制剂A(一种潜在有效的药剂)的情况下，另外的8周应与标准护理无本质差异。而且，已详述的标准护理仅在约60％的患者中有效，因此经常需要同样可能的再次评定和药物改变。

在V2(可以与V1(W0)相结合)至V6(W8)，由指导精神病医师(PI)和/或研究协调者进行如下步骤：

-体重

-身高

-生命体征

-Hamilton抑郁评定量表(17项)(HAM-D 17)(Hamilton1967)。

-临床总体印象(CGI-S，CGI-I)(Guy)

抑郁评定量表(MADRS)(Montgomery)

-Beck抑郁问卷(BDI)(10)

-生命质量(SF-36)(Ware)

-Hamilton焦虑评定量表(HAMA)(Hamilton1959)

-Udvalg for Kliniske Undersogelser(UKU)(Lingjaerde)(不良事件报告)(除了在V2)

-药物顺应性(除了在V2)

除了基准时间的检查可能花2小时之外，研究检查估计会花约1小时。

如果受试者在研究中变得更抑郁，那么由主研究者对他们进行评估，以确定最佳的临床方法。如果认为需要，停止制剂A以有利于另一抗抑郁药治疗。这是仅基于抑郁治疗的最佳实践和患者的最佳临床益处作出的临床决定。

允许医师和研究协调者与所述患者进行一般性帮助性接触，并且该接触通常局限于回答有关患者疾病过程和治疗的问题。不允许正式的心理治疗。

统计方法

使用重复测量的方差分析测试主要效应，并以HAM-D 17的分值作为输出变量。显著的时间效应可支持该假设。25名患者的总预计样本大小对于检测如下标准差0.65的HAM-D 17变化是足够大的(单样本双尾P＜0.05)。报告的HAM-D-17标准差范围是4.5-6.5。因此，该研究的设计有80％的可能(power)在该52分量表上检测小至4.3分的平均变化。按照加入标准，每名参与者均具有大于17的HAM-D 17分值。Franck减轻标准是HAM-D 17为9或以下。该研究使用7或以下的更加保守和公认的水平。4.3的效应量对于检测从分值大于17至分值小于10的临床改善是足够敏感的。阳性结果在统计学上是基于抑郁治疗试验中范围为30％-50％的预计安慰剂应答率。在该研究中，假定40％的安慰剂应答率。根据需要对应答者和好转者(remitter)进行一些分析。

结果

总共23名患者参加研究。这些受试者中的3名(#104、#105和#118)从未进行过治疗，因此他们的结果被认为是不可分析的。对于接受至少一个剂量制剂A的20名受试者，他们中的16名完成了8周的研究。剩下的4名受试者未完成8周的研究，但由于他们均接受至少一个剂量制剂A，他们的结果被认为是可分析的。这4名受试者未完成整个研究的原因包括对所述药剂无顺应性和/或不服从安排，对结果无耐心以及受试者出国。

接受至少一个剂量制剂A的20名受试者的结果在下表中提供。

HAM-D的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	20	14		11	7	3
受试者#102	19	15	5		2	0
							受试者#103	22	7	3		5	0
受试者#106	21	4	8		10	12
							受试者#107	22	17	20
受试者#108	20	14	19
							受试者#109	25	16	17		20	24
受试者#110	21	10	17		8	4
							受试者#111	24	20	19	19	23	23
受试者#112	29	8	5		2	0

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#113	33	13	9	11	8
受试者#114	29	13	19		22	30
							受试者#115	32	8	13	5	6
受试者#116	19	17	24		17	24
							受试者#117	23	11	9	8
受试者#119	23	23	20		13	10
							受试者#120	23	5
受试者#121	23	11	8		6	3
							受试者#122	32	22	16	23	16
受试者#123	24	19	12		10	11

GHQ的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	15	27		14	11	3
受试者#102	22	11	3		0	0
							受试者#103	18	9	13		2	2
受试者#106	22	10	10		6	10
							受试者#107	27	12	9
受试者#108	27	19	17
							受试者#109	25	16	16		17	20
受试者#110	28	13	16		9	8
							受试者#111	26	15	20	21	21	20
受试者#112	30	15	9		4	0
							受试者#113	34	13	12		5	2
受试者#114	33	25	22		22	28
							受试者#115	31	2	7		5	8
受试者#116	32	26	25		25	24
							受试者#117	24	14	7		8
受试者#119	31	19	27		20	8
							受试者#120	23	8
受试者#121	35	7	1		1	1
							受试者#122	31	23	10		23	15
受试者#123	26	17	11		4	2

MADRS的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	34	24		28	10	6
受试者#102	30	18	10		0	2
							受试者#103	28	10	4		2	2
受试者#106	30	14	14		18	24

受试者#107	38	28	28
							受试者#108	20	18	22
受试者#109	28	23	20		28	26
							受试者#110	28	16	36	14	10
受试者#111	46	40	40	40	32	36

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#112	38	16	10	10	2
受试者#113	46	16	18		14	6
							受试者#114	42	26	38	38	44
受试者#115	32	12	12		10	10
							受试者#116	36	42	44	34	46
受试者#117	36	22	10		6
							受试者#119	38	34	34	18	10
受试者#120	32	6
							受试者#121	38	14	6	6	4
受试者#122	44	38	22		32	24
							受试者#123	30	28	22	14	16

BDI-21的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	27	25		27	17	10
受试者#102	25	13	6		0	1
							受试者#103	26	14	10		8	8
受试者#106	30	12	7		12	40
							受试者#107	33	28	26
受试者#108	32	14	20
							受试者#109	29	23	24		20	25

受试者#110	29	22	24	13	8
						受试者#111	32	28	27	33	27	27
受试者#112	37	21	10	9	1
						受试者#113	53	23	22		18	3
受试者#114	54	40	52	52	59
						受试者#115	39	13	16		3	4
受试者#116	38	37	37	42	40
						受试者#117	24	20	11		7
受试者#119	35	36	40	24	18
						受试者#120	26	1
受试者#121	43	10	4	3	3
						受试者#122	55	38	25		46	27
受试者#123	33	34	22	5	10

HAM-A的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	15	9		8	7	3
受试者#102	13	8	2		0	1
							受试者#103	8	7	2		0	2
受试者#106	21	5	5		5	10
							受试者#107	12	7	13
受试者#108	15	8	11
							受试者#109	17	12	13		18	14
受试者#110	14	8	9		2	5
							受试者#111	33	29	24	32	23	24
受试者#112	22	10	4		1	2
							受试者#113	35	22	14		4	3

受试者#114	24	10	18	21	21
						受试者#115	25	10	12	4	5
受试者#116	12	13	15	12	16
						受试者#117	21	10	8	7
受试者#119	13	19	15	13	6
						受试者#120	14	4
受试者#121	24	9	3	4	2
						受试者#122	43	31	21	32	22
受试者#123	23	27	14	8	10

ASEX的总分值表

筛查	第0周	第2周	第4周	第7次检查	第6周	第8周
							受试者#101	12	14		12	13	13
受试者#102	21	23	19		19	15
							受试者#103	12	12	17		17	13
受试者#106	10	9	7		7	10
							受试者#107	15	14	16
受试者#108	15	11	12
							受试者#109	17	15	17		19	19
受试者#110	26	25	28		28	27
							受试者#111	28	28	28	28	28	28
受试者#112	11	13	11		11	9
							受试者#113	28	28	28		28	9
受试者#114	28	28	28		30	30

受试者#115	19	17	17	11	15
						受试者#116	11	10	11	12	12
受试者#117	14	12	18	16
						受试者#119	30	30	28	30	30
受试者#120	19	15
						受试者#121	18	26	12	22	10
受试者#122	26	14	15	30	12
						受试者#123	22	20	20	16	20

应答率和应答强度

如下的定义被用于评定每名受试者对于制剂A治疗的应答情况。“应答者”或“持续应答者(ever-responder)”是指在研究中的任何时间与基准分值相比，Hamilton抑郁评定量表(HAM-D分值)改善至少50％的受试者。“临床应答者”是指符合“应答者”标准并且主研究者认为具有阳性临床结果的受试者。“研究结束应答者”是在研究结束(或者在最后一次观察)时符合应答者标准的受试者。“好转”是HAM-D分值减小至小于8。

以上的研究表明，对于接受至少一个剂量制剂A的20名受试者，他们中的15名(75％)为持续应答者，并且他们中的14名(70％)为临床应答者。另外，在完成8周研究的16名受试者中，持续应答者的数目为13/16(81.3％)并且临床应答者的数目为12/16(75％)。另外，在完成所述研究的16名受试者中，HAM-D分值(包括未应答者)的整体降低情况是显著的(56.08％)。完成8周研究的持续应答者中HAM-D分值降低较高(68.1％)，该数字大大高于持续应答所需的最低50％的降低率。

应注意，有两名受试者的应答受到周围环境影响。未被包括在临床应答者中的受试者#114到第2周时对制剂A是有应答的，这时她的HAM-D分值降低超过50％；但有外部因素的介入。她开始遇到医疗问题(与制剂A无关)并难以工作，这时她申请了失能保险。这些环境因素完全压倒了她对制剂A的良好情绪应答。

基于HAM-D分值降低50％的严格标准，受试者#106在第8周时不应被认为是应答者，这是因为此时她的分值为12，刚好不够从她参加时的分值21降低50％。然而，在整个8周试验中，受试者#106的确是作出了应答：分值在第2时为4，在第4周时为8，并且在第6周时为10。事实上，在研究过程中，受试者#106被PI认为是临床应答者，并参加了延时研究(Extension Study)(参见实施例7)，在这里记录到1、11、7和9的分值。在延时研究开始后，受试者#106面临相当大的家庭混乱，这破坏了她对制剂A的阳性应答。在混乱平息后，她继续保持对制剂A的应答。没有药物可以完全弥补周围环境的创伤效应。制剂A已经很好地改善了这些环境对受试者#106的情绪创伤。

好转率

不是所有持续应答者都出现好转，并且不是出现好转的每个人都会保持好转至8周研究结束。15名持续应答者中的9名(60％)在8周研究过程中的某时间点出现好转。好转的这9名患者中的7名(77.8％；或所有研究参与者的46.7％)到8周研究结束时一直处于好转状态。

下表描绘了所有出现好转的研究参与者以及所有保持好转的研究参与者。对号表示受试者出现好转或者一直处于好转状态，而X号表示受试者没有出现好转或者未保持好转至该研究的第8周。

另外，所有持续应答者除1名之外都出现另一个主要结果——焦虑减少。这些结果表明，制剂A在治疗重性抑郁症和焦虑中是有效的。再者，没有该药物造成的严重副作用。在参与研究的受试者中，无体重增加，也无性功能降低。

实施例7

实施例6中描述研究的积极功效和安全结果需要进行延时研究。来自实施例6中描述研究的10名受试者参加了延时研究。所述延时研究仅对那些实施例6中描述研究中的在8周研究结束时是临床应答者的受试者开放。如实施例6中所述给予制剂A，并且每月分析延时研究的受试者，持续10个月。如下的表格显示了延时研究的受试者的HAM-D分值。

w/d＝退出延时研究

10名受试者中的4名由于出现继续研究的排除判据而退出延时研究。该延时研究的结果表明，该研究中的所有受试者必然都制剂A的应答者。10名临床应答者中的6名(60％)在开始延时研究时就处于好转状态。10名受试者中8名(80％)在最后评定日处于好转状态。所述受试者中的2名在初期的8周研究中为临床应答者，但直至延时研究结束时也未出现好转。仅1名作为临床应答者参加延时研究的受试者(#113)在参加延时研究后旧病复发。实施例6和延时研究中的积极疗效和安全结果需要进一步的延时研究。

实施例8

如上述实施例所述，制剂A已被证明有治疗作用。已经进行研究来研究制剂A的作用机制。具体而言，进行研究，以确定制剂A对放射性配体与其受体的结合相互作用的抑制，或者对放射性标记的酶作用于它们相关的靶蛋白的抑制。确定了制剂A的抑制水平(测量为制剂A对与每种受体的特异性结合的抑制百分数)。以两个不同的制剂A浓度(1.0μg/mL和10.0μg/mL)测试对结合相互作用和酶活性的抑制，每个样品重复进行两次。制剂A的这些浓度可通过以下方式制备：将制剂A的胶囊内含物溶解于二甲亚砜中，随后将所述溶液稀释成1.0μg/mL或10.0μg/mL的制剂A。这些稀释的溶液称为分离物A。然后使用下表中列出的受体和酶进行放射性配体结合测定。确定每个分离物A的浓度对特异性结合的平均抑制百分数。该研究的结果显示于下表中。

通常而言，20％或更低的结合抑制或酶活性抑制表示给定的测试化合物对该具体的受体结合位点或靶蛋白是无活性的。高于20％的结合抑制或酶活性抑制表示所述测试化合物对该具体的受体结合位点或酶位点是有活性的。上述结合抑制研究表明，分离物A从谷氨酸的4个主要亲离子型受体置换出了谷氨酸。在存在分离物A(10μg/mL)的情况下，放射标记的AMPA与AMPA受体的结合被抑制了29.05％。在存在分离物A(10μg/mL)的情况下，放射标记的红藻氨酸与红藻氨酸受体的结合被抑制了22.38％。在存在分离物A(10μg/mL)的情况下，放射标记的CGP 39653与NMDA受体的激动剂位点的结合被抑制34.59％。在存在分离物A(10μg/mL)的情况下，放射标记的MDL-105，519与NMDA受体的***不敏感的甘氨酸位点的结合被抑制了27.45％。另外，在存在分离物A(10μg/mL)的情况下，神经激肽A与NK2受体的结合被抑制了32.15％。与5种上述受体中每种的结合抑制实验有关的其他细节在下表中提供。

将亲离子型谷氨酸受体、NK2受体和神经激肽1(NK1)受体用于另外的受体结合测定中。进行了一项一个浓度(one-concentration)受控的实验，以评定制剂A胶囊内含物的多种分离物拮抗多种谷氨酸受体和NK2受体的配体结合的能力。在该测定中研究了AMPA受体、红藻氨酸受体、NMDA受体的激动剂和甘氨酸(***不敏感的)结合位点和NK2受体。将制剂A胶囊的内含物使用多种溶剂溶解，并使用4种不同方法提取，如下文所详述的。这些提取步骤产生了多种受精卵分离物。这些分离物称为：样品#19上层分离物、样品#19下层分离物、样品#20上层分离物、样品#20下层分离物、级分X分离物和样品#2分离物。然后将这些分离物的每种在放射性配体结合测定中测试。

样品#19通过称取103mg制剂A胶囊的内含物进行制备。加入水(10.3mL)并将溶液涡旋1分钟。然后向溶液中加入30mL乙酸乙酯并将溶液再次涡旋1分钟。然后使用Beckman台式离心机离心样品。结果形成3个级分。分别收集上层级分(有机相)和下层级分(水相)，丢弃中间级分。使上层级分和下层级分均完全干燥。将下层级分(水相)重溶于2.06mL水中。样品不澄清，用微型离心机以10,000rpm将它离心10分钟。移出上清液，标记为样品085426-4(样品#19下层分离物)并用于受体结合研究中。将上层级分(有机相)重溶于1.245mL的20％乙腈水溶液中。样品不澄清，用微型离心机以10,000rpm将它离心10分钟。移出上清液，标记为样品085426-3(样品#19上层分离物)并用于受体结合研究中。还制备了样品#19的对照物。该对照物由20％的乙腈水溶液组成，并且在受体结合研究中标记为样品085426-5。

样品#20通过称出249.7mg制剂A胶囊的内含物进行制备。加入10mL的甲醇∶二氯甲烷(1∶1)并将溶液涡旋。然后向溶液中加入10mL二氯甲烷，并将溶液再次涡旋。然后使用Beckman台式离心机以3500rpm离心样品15分钟。结果形成3个级分。分别收集上层有机级分和下层有机级分。丢弃中间级分。使上层级分和下层级分均完全干燥，并且重溶于2.49mL甲醇水溶液(100％)中。上层甲醇级分半澄清，下层二氯甲烷级分是不溶的。用微型离心机以10,000rpm将两样品离心10分钟。取出每个样品的上清液。将上层甲醇级分的上清液标记为样品085426-6(样品#20上层分离物)并用于受体结合研究中。将下层二氯甲烷级分的上清液标记为样品085426-7(样品#20下层分离物)并用于受体结合研究中。还制备了样品#29的对照物。该对照物由10％的甲醇水溶液组成，并且在受体结合研究中标记为样品085426-9。

样品级分X按如下进行制备。称取121mg制剂A胶囊的内含物。然后加入10mL水。然后向所述溶液加入10mL二氯甲烷并将样品涡旋。将水性级分和有机级分均分别移出。通过以下方式重复溶剂分离：向水性级分中加入10mL二氯甲烷并将溶液涡旋。再次将水性级分和有机级分均分别移出。将两次分离得到的有机级分合并，并将两次分离得到的水性级分合并。将所述水性级分和有机级分完全干燥并称重。水性级分重116.4mg，有机级分重1.3mg。将有机部分重溶于1.3mL 10％的甲醇水溶液中(浓度为0.1mg/mL)，标记为样品085426-8(级分X分离物)并且用于结合研究中。还制备了样品级分X的对照物。该对照物由10％甲醇水溶液组成，并且在受体结合研究中标记为样品085426-9(注意这是与用于样品#20的相同对照物)。

样品#2按如下进行制备。称取一份制剂A胶囊的内含物(1.8mg)。然后加入添加0.25％土温80的40％PEG水溶液(3.6mL)(浓度为0.5mg/mL)并将样品涡旋。将该制品标记为样品085426-1(样品#2分离物)并在受体结合研究中测试。还制备了样品#2的对照物。该对照物由添加0.25％土温80的40％PEG水溶液组成，并且在受体结合研究中标记为样品085426-2。

受体结合研究的结果(获自每种分离物最大浓度的两份样品)显示于下表中。

黑体表示在测试浓度下抑制超过50％。

在存在样品#20上层分离物的情况下，放射标记的AMPA与AMPA受体的结合被抑制了97％。在存在样品#20上层分离物的情况下，放射标记的红藻氨酸与红藻氨酸受体的结合被抑制了101％。在存在样品#20上层分离物的情况下，放射标记的CGP 39653与NMDA受体的激动剂位点的结合被抑制了110％。在存在样品#20上层分离物的情况下，放射标记的MDL-105，519与NMDA受体的***不敏感的甘氨酸位点的结合被抑制了92％。另外，级分X分离物将神经激肽A与其NK2受体的结合抑制了55％。据本发明人所知，这是首次证明谷氨酸受体和NK2受体被单一物质拮抗。

为了进一步确认对上述谷氨酸受体的结合和活化以及对NK2受体的结合和活化被如上述制备的样品#20上层分离物拮抗，进行了量效研究。在存在如下浓度的#20上层分离物(基于提取前样品#20中所含的制剂A的量)的情况下评估对AMPA受体、红藻氨酸受体、NMDA受体的激动剂位点、NMDA受体的(***不敏感的)甘氨酸位点以及NK2受体的结合的抑制：0.1、0.3、1.0、3.0、10、30、100和300μg/mL。

图8显示了以NMDA受体的激动剂位点(亲离子型)进行的测定的结果。样品#20上层分离物以浓度依赖的方式抑制了CGP 39653结合NMDA受体的激动剂位点的能力，样品#20上层分离物的浓度越高则提供的结合抑制越大，浓度越低则提供的结合抑制越小。NMDA的IC₅₀确定为1.11×10^-5μg/mL，K_i确定为9.02×10^-6M。样品#20上层分离物的IC₅₀确定为5.78μg/mL，K_i确定为4.69M。

图9显示以红藻氨酸受体进行的测定的结果。样品#20上层分离物以浓度依赖的方式抑制了红藻氨酸结合红藻氨酸受体的能力，样品#20上层分离物的浓度越高则提供的结合抑制越大，浓度越低则提供的结合抑制越小。红藻氨酸的IC₅₀确定为1.77×10^-8μg/mL，K_i确定为1.08×10^-8M。样品#20上层分离物的IC₅₀确定为12.0μg/mL，K_i确定为7.32M。

图10显示了以AMPA受体进行的测定的结果。样品#20上层分离物以浓度依赖的方式抑制了AMPA结合AMPA受体的能力，样品#20上层分离物的浓度越高则提供的结合抑制越大，浓度越低则提供的结合抑制越小。(+/-)AMPA HBr的IC₅₀确定为3.54×10^-8μg/mL，K_i确定为3.00×10^-8M。样品#20上层分离物的IC₅₀确定为11.7μg/mL，K_i确定为9.91M。

图11显示了以NMDA受体的(***不敏感的)甘氨酸位点进行的测定的结果。样品#20上层分离物以浓度依赖的方式抑制了MDL-105，519结合NMDA受体的(***不敏感的)甘氨酸位点的能力，样品#20上层分离物的浓度越高则提供的结合抑制越大，浓度越低则提供的结合抑制越小。MDL-105，519的IC₅₀确定为2.8×10^-8μg/mL，K_i确定为2.36×10^-8M。样品#20上层分离物的IC₅₀确定为21.9μg/mL，K_i确定为18.4M。

图12显示了以NK2受体进行的测定的结果。样品#20上层分离物以浓度依赖的方式抑制了神经激肽A结合NK2受体的能力，样品#20上层分离物的浓度越高则提供的结合抑制越大，浓度越低则提供的结合抑制越小。神经激肽A的IC₅₀确定为6.84×10^-10μg/mL，K_i确定为5.76×10^-10M。样品#20上层分离物的IC₅₀确定为4.15×10²μg/mL，K_i确定为3.49×10²M。

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Claims

1.一种生产受精卵分离物的方法，所述分离物包含胚胎和大部分的卵清蛋白和清囊，所述方法包括以下步骤：

(i)任选地对卵壳进行灭菌；

(ii)将胚胎、卵清蛋白和清囊与所述卵壳和其他卵内含物基本分离；以及

(iii)冷冻干燥所分离的胚胎、卵清蛋白和清囊。

2.权利要求1的方法，其中将所述胚胎、卵清蛋白和清囊与大量的卵黄分离。

3.权利要求1的方法，其中通过使所述受精卵的内含物经过过滤步骤而分离出所述胚胎、卵清蛋白和清囊。

4.权利要求3的方法，其中所述过滤步骤使用一个筛网。

5.权利要求4的方法，其中所述筛网为一个1mm的筛网。

6.根据权利要求1的方法制备的受精卵分离物。

7.一种受精卵分离物的组合物，所述组合物包含根据权利要求3生产的受精卵分离物和可药用载体。

8.权利要求7的组合物，其中所述载体为气相二氧化硅。

9.权利要求7的组合物，还包含一种或多种防腐剂。

10.权利要求9的组合物，其中所述一种或多种防腐剂选自苯甲酸钠和山梨酸钾。

11.一种包含权利要求6的受精卵分离物的剂型。

12.权利要求11的剂型，其中所述剂型为片剂或胶囊剂。

13.一种包含权利要求6的受精卵分离物的胶囊剂。

14.一种使用受精卵分离物治疗抑郁的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

15.权利要求14的方法，其中所述受精卵分离物包含来自受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

16.权利要求15的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

17.权利要求14的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

18.权利要求14的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

19.一种使用权利要求6生产的受精卵分离物治疗抑郁的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

20.一种使用受精卵分离物治疗重性抑郁症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

21.根据权利要求20的方法，其中所述受精卵分离物包含来自所述受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

22.根据权利要求21的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

23.根据权利要求20的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

24.根据权利要求20的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

25.一种使用权利要求6生产的受精卵分离物治疗重性抑郁症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

26.一种使用受精卵分离物治疗焦虑的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

27.权利要求26的方法，其中所述受精卵分离物包含来自受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

28.权利要求27的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

29.权利要求26的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

30.权利要求26的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

31.一种使用根据权利要求6生产的受精卵分离物治疗焦虑的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

32.一种使用受精卵分离物治疗性功能障碍的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

33.权利要求32的方法，其中所述受精卵分离物包含来自所述受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

34.权利要求33的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

35.权利要求32的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

36.权利要求32的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

37.一种使用根据权利要求6生产的受精卵分离物治疗性功能障碍的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

38.一种使用受精卵分离物治疗障碍的方法，所述障碍选自抑郁情感障碍和焦虑症，所述方法包括下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

39.权利要求38的方法，其中所述受精卵分离物包含来自所述受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

40.权利要求39的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

41.权利要求38的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

42.权利要求38的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

43.一种使用根据权利要求6生产的受精卵分离物治疗障碍的方法，所述障碍选自抑郁情感障碍和焦虑症，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

44.一种使用受精卵水性分离物治疗抑郁的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵水性分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与水性溶液混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的水性溶液；(vii)将所述水性溶液与所述固体物质分离；(viii)冷冻所述水性溶液；并且(ix)冷冻干燥所述水性溶液以产生所述受精卵分离物。

45.一种使用受精卵水性分离物治疗焦虑的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵水性分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与水性溶液混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的水性溶液；(vii)将所述水性溶液与所述固体物质分离；(viii)冷冻所述水性溶液；并且(ix)冷冻干燥所述水性溶液以产生所述受精卵分离物。

46.一种使用受精卵水性分离物治疗性功能障碍的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵水性分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与水性溶液混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的水性溶液；(vii)将所述水性溶液与所述固体物质分离；(viii)冷冻所述水性溶液；并且(ix)冷冻干燥所述水性溶液以产生所述受精卵水性分离物。

47.一种使用受精卵水性分离物治疗障碍的方法，所述障碍选自抑郁情感障碍和焦虑症，并且所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵水性分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与水性溶液混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的水性溶液；(vii)将所述水性溶液与所述固体物质分离；(viii)冷冻所述水性溶液；并且(ix)冷冻干燥所述水性溶液以产生所述受精卵水性分离物。

48.一种使用受精卵溶剂分离物治疗抑郁的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵溶剂分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与疏水溶剂混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的溶液；(vii)将所述溶液与所述固体物质分离；(viii)将所述疏水溶剂部分与任何水性溶剂部分分离；并且(ix)浓缩所述疏水溶剂部分以产生受精卵溶剂分离物。

49.一种使用受精卵溶剂分离物治疗焦虑的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵溶剂分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与疏水溶剂混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的溶液；(vii)将所述溶液与所述固体物质分离；(viii)将所述疏水溶剂部分与任何水性溶剂部分分离；并且(ix)浓缩所述疏水溶剂部分以产生受精卵溶剂分离物。

50.一种使用受精卵溶剂分离物治疗性功能障碍的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵溶剂分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与疏水溶剂混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的溶液；(vii)将所述溶液与所述固体物质分离；(viii)将所述疏水溶剂部分与任何水性溶剂部分分离；并且(ix)浓缩所述疏水溶剂部分以产生受精卵溶剂分离物。

51.一种使用受精卵溶剂分离物治疗障碍的方法，所述障碍选自抑郁情感障碍和焦虑症，并且所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵溶剂分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)将至少一个受精卵的内含物与卵壳基本分离；(ii)任选地过滤所述内含物以产生保留物；(iii)将所述内含物或保留物在容器中合并；(iv)任选地加入溶剂，混合所述内含物或保留物以产生浆体；(v)将所述浆体与疏水溶剂混和一段时间；(vi)使所述混合物澄清以产生基本无固体物质的溶液；(vii)将所述溶液与所述固体物质分离；(viii)将所述疏水溶剂部分与任何水性溶剂部分分离；并且(ix)浓缩所述疏水溶剂部分以产生受精卵溶剂分离物。

52.一种使用受精卵分离物治疗抑郁的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)从至少一个受精卵中基本分离出至少一个胚胎；(ii)任选地洗涤所述至少一个胚胎；(iii)冷冻所述至少一个胚胎；(iv)冷冻干燥所述至少一个经冷冻的胚胎；并且(v)将所述至少一个冷冻干燥的胚胎粉碎以形成受精卵分离物。

53.一种使用受精卵分离物治疗焦虑的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)从至少一个受精卵中基本分离出至少一个胚胎；(ii)任选地洗涤所述至少一个胚胎；(iii)冷冻所述至少一个胚胎；(iv)冷冻干燥所述至少一个经冷冻的胚胎；并且(v)将所述至少一个冷冻干燥的胚胎粉碎以形成受精卵分离物。

54.一种使用受精卵分离物治疗性功能障碍的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)从至少一个受精卵中基本分离出至少一个胚胎；(ii)任选地洗涤所述至少一个胚胎；(iii)冷冻所述至少一个胚胎；(iv)冷冻干燥所述至少一个经冷冻的胚胎；并且(v)将所述至少一个冷冻干燥的胚胎粉碎以形成受精卵分离物。

55.一种使用受精卵分离物治疗障碍的方法，所述障碍选自抑郁情感障碍和焦虑症，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者，所述受精卵分离物通过包括以下步骤的方法生产：(i)从至少一个受精卵中基本分离出至少一个胚胎；(ii)任选地洗涤所述至少一个胚胎；(iii)冷冻所述至少一个胚胎；(iv)冷冻干燥所述至少一个经冷冻的胚胎；并且(v)将所述至少一个冷冻干燥的胚胎粉碎以形成受精卵分离物。

56.一种使用受精卵分离物治疗与谷氨酸受体相关的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

57.权利要求56的方法，其中所述谷氨酸受体为AMPA受体、红藻氨酸受体或NMDA受体。

58.权利要求56的方法，其中所述与所述谷氨酸受体相关的疾病或病症为抑郁、重性抑郁症、焦虑、阿尔茨海默氏病、癫痫、精神***症、中风/缺血后的脑细胞功能病损、肌萎缩侧索硬化(葛雷克氏症)、山黧豆中毒、孤独症、精神发育迟缓、认知紊乱、双相型抑郁或躁狂症。

59.权利要求56的方法，其中所述受精卵分离物包含来自所述受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

60.权利要求59的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

61.权利要求56的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

62.权利要求56的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

63.一种使用根据权利要求6生产的受精卵分离物治疗与谷氨酸受体相关的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

64.一种使用受精卵分离物治疗与神经激肽2(NK2)受体相关的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

65.权利要求64的方法，其中所述与所述NK2受体相关的疾病或病症为抑郁、焦虑、肠易激综合征、炎性肠综合征、炎性气道疾病或尿失禁。

66.权利要求64的方法，其中所述受精卵分离物包含来自所述受精卵的冷冻干燥胚胎、卵清蛋白和清囊。

67.权利要求66的方法，其中所述受精卵分离物不含来自所述受精卵的大量卵黄。

68.权利要求64的方法，其中未以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

69.权利要求64的方法，其中以心理疗法与所述治疗同时治疗所述患者。

70.一种使用根据权利要求6生产的受精卵分离物治疗与NK2受体相关的疾病或病症的方法，所述方法包括以下步骤：将治疗有效量的所述受精卵分离物给予需要其的患者。

71.一种抑制谷氨酸受体活性的方法，包括将所述谷氨酸受体与有效量的受精卵分离物相接触。

72.权利要求71的方法，其中所述谷氨酸受体为AMPA受体、红藻氨酸受体或NMDA受体。

73.权利要求71的方法，其中所述方法是体外方法。

74.权利要求71的方法，其中所述方法是体内方法。

75.权利要求71的方法，其中所述受精卵分离物是通过权利要求6的方法生产的。

76.一种抑制NK2受体活性的方法，包括将所述NK2受体与有效量的受精卵分离物相接触。

77.权利要求76的方法，其中所述方法为体外方法。

78.权利要求76的方法，其中所述方法为体内方法。

79.权利要求76的方法，其中所述受精卵分离物是通过权利要求6的方法生产的。