CN101923053A - 利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的装置及方法 - Google Patents
利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的装置及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101923053A CN101923053A CN 201010230276 CN201010230276A CN101923053A CN 101923053 A CN101923053 A CN 101923053A CN 201010230276 CN201010230276 CN 201010230276 CN 201010230276 A CN201010230276 A CN 201010230276A CN 101923053 A CN101923053 A CN 101923053A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sample
- cell
- sheath
- split tunnel
- sheath flow
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 85
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 26
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 21
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 19
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000005684 electric field Effects 0.000 claims description 13
- 238000013016 damping Methods 0.000 claims description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 238000001499 laser induced fluorescence spectroscopy Methods 0.000 claims description 6
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 12
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 abstract description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 abstract 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 52
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 9
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 7
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 6
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 5
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 2
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000426 Microplastic Polymers 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000011430 maximum method Methods 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- WMPJPAMWRAOQSU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-dicarbaldehyde Chemical compound C1=CC=CC2=C(C=O)C(C=O)=CC=C21 WMPJPAMWRAOQSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M rhodamine 123 Chemical compound [Cl-].COC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C(C=CC(N)=C2)C2=[O+]C2=C1C=CC(N)=C2 TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCS([O-])(=O)=O DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明提供了一种结构简单的连续高速分析单细胞内物质的微流控芯片和操作方法。本发明在十字型微流控芯片进样通道的二侧各加一条鞘流通道，通过调节储液池之间的静压力差，使细胞悬液和鞘流液同时从样品池和鞘流液池中流出，在鞘流的作用下，细胞悬液中的单细胞排成一行，依次从进样通道进入分离通道，并在运行过程中与溶膜剂接触、在分离通道入口处于快速溶膜，在分离通道二端所产生的电场力的作用下，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道被连续、高速地分离，激光诱导荧光检测。由于进入分离通道中的溶液是鞘流液和细胞悬液中生理盐水的混合溶液，本发明还可以大大降低进入分离通道中生理盐水的浓度，显著减少电泳时由焦耳热导致的谱带增宽。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种利用微流控芯片连续高速分析单细胞内物质的装置及方法，属于单细胞分析技术领域。
(二)背景技术
单细胞分析对癌症等重大疾病早期诊断、治疗、药物筛选和细胞生理、病理过程的研究有重要意义。由于细胞微小(直径8μm～200μm，体积fL～nL)，样品量极少(zmol～fmol)，细胞内组分十分复杂，分析难度很大。毛细管电泳技术是目前进行单细胞多组分分析使用最多的方法。但毛细管电泳技术受毛细管一维结构的限制，单细胞进入毛细管电泳时需使用玻璃毛细管拉制成的直径为微米级的尖端吸住单个细胞，配合以精密的微动操作器，才能完成单细胞进样操作，因此复杂耗时，对操作人员要求很高。所以分析速度很慢。每天只能分析几十个细胞。
由于微流控芯片的网络结构和微米级的通道尺寸，以及芯片毛细管电泳高效分离的特性，单细胞的进样、溶膜以及胞内物质的分离分析可以在一块微流控芯片上实现。在十字和双T微流控芯片上，通过电控、液压结合电控或激光镊子，操纵单细胞从微流控分析芯片的进样通道进入分离通道，使细胞精确停留在分离通道中进样口管壁上，静态溶膜后，通过芯片毛细管电泳分离分析测定胞内物质的含量。但固定细胞在分离通道进口管壁上和静态溶膜的操作复杂，需要时间也较长，因此大大限制了单细胞分析的速率。这种方法分析单细胞的速度在每小时25个细胞以下。
至今为止，只有三篇文献报道了在微流控芯片上进行连续高速分析单细胞内物质含量的方法。但细胞连续进样时细胞悬浮液中的生理盐水和单细胞一起进入分离通道，导致电泳时焦耳热增加，分离性能变差。为了避免焦耳热的增加，需使用昂贵的脉冲交流电叠加直流电的特殊电源和微量注射泵等设备(Analytical Chemistry 2003，75，5646～5655)。由于这些原因，在微流控芯片上进行连续高速分析单细胞内物质的方法未得到广泛应用。
(三)发明内容
本发明提供一种结构简单能连续高速分析单细胞内物质的微流控芯片和操作方法。
本发明采用的技术方案是：
一种利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的装置，主要包括微流控芯片、高压直流电源和激光诱导荧光检测器，所述微流控芯片上设置有呈十字相交的进样通道和分离通道，在进样通道两侧，各设置有一条鞘流通道，两条鞘流通道与进样通道沿进样液流向相交于十字交叉点上游，与十字交叉点距离为10～1000微米，进样通道一端设置样品池、另一端设置样品废液池，分离通道一端设置缓冲液池、另一端设置缓冲液废液池，在两条鞘流通道另一端均设置有鞘流液池。通常，进样通道，鞘流通道宽度和深度需大于或等于和分离通道的宽度和深度。高压直流电源电压一般为500～10000V，正极与缓冲液池相连、负极与缓冲液废液池相连，在分离通道内形成直流电场。激光诱导荧光检测器的检测点一般设置在缓冲液废液池与十字交叉点之间的分离通道中，用于检测待测物质在激光诱导下发出荧光的光强度。
本发明通过在十字型微流控芯片进样通道的二侧各加一条鞘流通道，鞘流液由溶膜剂和电泳缓冲溶液混合配制，提供一种结构简单能连续高速分析单细胞内物质的微流控芯片和操作方法。通过调节样品废液池和其他储液池之间的液面差，使置于样品池中的细胞悬液和鞘流同时从样品池和鞘流液池流出。细胞悬液中的单细胞通过进样通道与鞘流通道的交叉点后，受到鞘流从二个侧面的挤压而自动排成一行，细胞在运行过程中与加在鞘流液中的溶膜剂接触并快速溶膜于分离通道入口处，在分离通道两端电场力作用下，溶膜后的细胞内容物从进样通道进入分离通道，流经设置于分离通道上的激光诱导荧光检测器，通过检测荧光强度对细胞内容物含量进行分析。在本发明中，进入微流控芯片分离通道中的溶液是鞘流液和细胞悬液中生理盐水的混合溶液。它既可以使单细胞在分离通道入口处快速溶膜，还可以使进入分离通道中细胞悬液的比例大大缩小，使电泳缓冲液中生理盐水的浓度大大降低，显著减少焦耳热导致的谱带增宽。
所述两条鞘流通道分别与进样通道沿进样液流向呈15～75°角相交。
参见图1和图2本发明提供的连续高速分析单细胞内物质的微流控芯片上有缓冲液池(B)、样品池(S)、样品废液池(SW)、二个鞘流液池(SF1和SF2)和缓冲液废液池(BW)以及进样通道、鞘流通道和分离通道。所述的样品储液池和样品废液池之间的通道为进样通道S-SW；在进样通道的二侧各有一条与鞘流液池相通的鞘流通道，所述的分离通道B-BW和进样通道垂直相交，进样通道与分离通道十字相交于O点，两条鞘流通道与进样通道相交于O点上游。激光点置于O点下游的分离通道下方，用于检测细胞内物质在激光诱导下发出荧光的光强度。
本发明还涉及一种利用所述装置连续高速分析单细胞内容物的方法，所述方法包括：在缓冲液池和缓冲液废液池中加入电泳缓冲液，鞘流液池加入溶有溶膜剂的电泳缓冲液即鞘流液，样品池中加入待测细胞悬液，使细胞悬液和鞘流液同时从样品池和鞘流液池流出，细胞悬液和鞘流液沿通道汇合后形成单细胞流，细胞在运行过程中与加在鞘流液中的溶膜剂接触并快速溶膜于分离通道入口处，在分离通道两端电场力作用下，溶膜后的细胞内容物全部从进样通道进入分离通道，流经设置于分离通道上的激光诱导荧光检测器，通过检测荧光强度对细胞内容物含量进行分析。通过改变溶膜剂的种类、浓度以及两条鞘流通道与进样通道沿进样液流向相交于十字交叉点上游的距离，可使细胞在与鞘流溶液接触50ms内快速溶膜于分离通道入口处，溶膜后的细胞内容物在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，全部进入分离通道。
本方法的关键在于利用含有溶膜剂的鞘流液对细胞悬液侧面进行挤压使之自动排成一行，并使之快速溶膜，具体溶膜剂及电泳缓冲液可按本领域常规方法进行选择，本领域普通技术人员可根据常识，依据待测细胞的不同选择不同的溶膜剂。通常，细胞浓度为0.5～10×105cells/mL，溶膜剂在缓冲液中浓度为0.1～10％(w/w)。
本发明中微流控芯片单细胞的分析步骤如下：
在微流控芯片上缓冲液池B和缓冲液废液池BW中加入电泳缓冲液，鞘流液池SF1和SF2中加入含溶膜剂的电泳缓冲溶液，在样品池S中加入细胞悬液，样品废液池SW空置。在液面差导致的静压力的驱动下，样品池中的细胞悬液和鞘流同时从样品池和鞘流液池流出，细胞液流与鞘流通道会流后，细胞悬液中的单细胞受到鞘流的挤压排成一行继续运行，并在运行中与鞘流液中的溶膜剂接触，在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，每分钟可控制150个细胞连续、单个地从进样通道进入分离通道，并在分离通道入口处于50ms内快速溶膜，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道被芯片毛细管电压连续、高速地地分离检测。
本发明方法操作方便，通过调节样品废液池和其他储液池之间的液面差，可以使细胞悬液中的单细胞在鞘流挤压下自动排成一行，大大提高了单细胞的进样速率，避免了多个细胞同时从进样通道进入分离通道；通过将溶膜剂加在电泳缓冲液中作为鞘流液，可以使单细胞在分离通道入口处快速溶膜，并使溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道予以连续、高速地分离检测。由于进入微流控芯片分离通道中的溶液是鞘流液和细胞悬液中生理盐水的混合溶液，还可以使细胞连续进样时进入分离通道中生理盐水的浓度大大降低，显著减少焦耳热导致的谱带增宽。
(四)附图说明
图1为鞘流聚焦连续分析单细胞的微流控芯片示意图；
图2为鞘流聚焦连续分析单细胞的装置图；
图3为微流控芯片鞘流聚焦连续分析单细胞示意图；
图4为单细胞内容物电泳检测结果图。
(五)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例1：
参见图1，微流控芯片上有缓冲液池(B)、样品池(S)、样品废液池(SW)、二个鞘流储液池(SF1和SF2)和缓冲液废液池(BW)。进样通道为S-SW，长度为12mm、通道宽95μm，深35μm，通道S-O长度为6mm；分离通道为B-BW，长度为46mm，通道宽65μm，深20μm，通道B-O长度为6mm；进样通道与分离通道十字相交于O点。在进样通道的二侧各有一条鞘流通道，与进样通道相交于O点上方200nm处，鞘流通道宽95μm，深35μm，长度为6mm。在进样通道，分离通道和鞘流通道的端点处各打小孔，在小孔上用粘接剂粘合微量塑料储液池。
参见图2，将电泳缓冲液(如硼酸缓冲液、N-甘氨酰胺缓冲液等)100μL、100μL分别加入储液池B和BW中，将100μL用荧光试剂孵育过的细胞悬液(1.2×105cells/mL)加入样品池S。将含有溶膜剂(常规溶膜剂，如triton X-100，十二烷基磺酸钠、毛地黄皂苷等)的电泳缓冲液100μL，100μL分别加入鞘流储液池SF1和SF2，储液池SW中不加溶液。在分离通道二端的B和BW储液池中施加2000V直流电压。
参见图3，由于液面高度不同，细胞悬液中的细胞从储液池S流向SW。同时含有溶膜剂电泳缓冲液从鞘流液池SF1和SF2流出。细胞液流与鞘流通道会流后，鞘流从二个侧面的挤压细胞悬液中的细胞，使细胞排成一行。细胞在运行中与鞘流液中的溶膜剂接触，当细胞运行到进样通道与分离通道的交叉点O后，被施在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，使单细胞依次从进样通道拐弯进入分离通道并在在分离通道入口处快速溶膜，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道。通过调节样品废液池和其他储液池之间的液面差和细胞悬液中细胞的浓度，每分钟可控制150个细胞连续地单个地从进样通道进入分离通道，并在分离通道入口处于50ms内快速溶膜，溶膜后释放出的细胞内容物质被芯片毛细管电泳连续、高速地分离检测。
实施例2：单个血红细胞内谷胱甘肽和活性氧的测定
本实施例使用的微流控芯片与实施例1一致，样品为红细胞悬液。用萘二甲醛和双氢罗丹明123分别标记细胞中谷胱甘肽和活性氧，用生理盐水稀释配置密度为1.2×105cells/mL细胞悬液后，加入样品池；将20mmol硼酸缓冲溶液(pH 9.2)加入储液池B和BW中，将含有溶膜剂(tritonX-100，浓度1％，w/w)电泳缓冲液(20mmol硼酸缓冲溶液，pH 9.2)加入鞘流储液池SF1和SF2中，各储液池中的加液量与实施例1一致。在分离通道二端的B和BW储液池中施加2000V直流电压。
由于液面高度不同，红细胞悬液中的细胞从储液池S流向SW。同时含有溶膜剂电泳缓冲液从鞘流液池流出，通过进样通道与鞘流通道的交叉点后，使红细胞排成一行。细胞与添加在鞘流液中的溶膜剂triton X-100在运动中相接触。当细胞运行到进样通道与分离通道的交叉点O后，在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，单细胞依次从进样通道拐弯进入分离通道并在分离通道入口处快速溶膜，溶膜后的细胞内谷胱甘肽和活性氧全部进入分离通道。被芯片毛细管电泳连续、高速地分离检测。测定结果见图4。通过控制单细胞的进样速度和分离通道的长度，可以使同一个单细胞内谷胱甘肽和活性氧达到基线分离，且不同单细胞间的测定结果也不互相干扰。从图4可见，在19秒内测定了12个细胞中的谷胱甘肽和活性氧含量。
Claims (3)
1.一种利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的装置，主要包括微流控芯片、直流电源和激光诱导荧光检测器，所述微流控芯片上设置有呈十字相交的进样通道和分离通道，在进样通道两侧，各设置有一条鞘流通道，两条鞘流通道与进样通道沿进样液流向相交于十字交叉点上游，与十字交叉点距离为10～1000微米，进样通道一端设置样品池、另一端设置样品废液池，分离通道一端设置缓冲液池、另一端设置缓冲液废液池，两条鞘流通道另一端均设置有鞘流液池。
2.如权利要求1所述的装置，其特征在于所述两条鞘流通道分别与进样通道沿进样液流向呈15～75°角相交。
3.一种利用权利要求1所述装置连续高速分析单细胞内容物的方法，所述方法包括：在缓冲液池和缓冲液废液池中加入电泳缓冲液，鞘流液池加入溶有溶膜剂的电泳缓冲液即鞘流液，样品池中加入待测细胞悬液，通过调节样品废液池和其他储液池之间的静压力差，使细胞悬液和鞘流液同时从样品池和鞘流液池流出，细胞悬液和鞘流液沿通道汇合后自动排成一行，形成单细胞流，细胞在运行过程中与加在鞘流液中的溶膜剂接触并快速溶膜于分离通道入口处，在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道被连续、高速地分离，分离后细胞内容物中各组份流经设置于分离通道上的激光诱导荧光检测器，通过检测荧光强度对细胞内容物中各组份的含量进行分析。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2010102302760A CN101923053B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2010102302760A CN101923053B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101923053A true CN101923053A (zh) | 2010-12-22 |
| CN101923053B CN101923053B (zh) | 2012-06-27 |
Family
ID=43338108
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2010102302760A Expired - Fee Related CN101923053B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101923053B (zh) |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102183504A (zh) * | 2011-01-25 | 2011-09-14 | 山东师范大学 | 一种微流控单细胞活性氧自动分析仪 |
| CN102680679A (zh) * | 2011-03-15 | 2012-09-19 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 检测单细胞特异性抗体分泌的细胞微孔芯片及其制备方法 |
| CN104388300A (zh) * | 2014-11-27 | 2015-03-04 | 山东师范大学 | 一种用于单细胞定量分析的微流控连续进样方法及装置 |
| CN104513785A (zh) * | 2014-12-17 | 2015-04-15 | 华中科技大学 | 一种细胞寻址微流控芯片、细胞分析装置及方法 |
| CN104646079A (zh) * | 2015-02-17 | 2015-05-27 | 方雪萍 | 一种用于毛细管电泳的离心式cd微流控芯片及毛细管凝胶电泳装置 |
| CN105136763A (zh) * | 2015-09-10 | 2015-12-09 | 大连海事大学 | 基于气液界面单细胞捕获及叶绿素荧光表征的单微藻细胞活性动态监测新方法与装置 |
| CN105413766A (zh) * | 2015-10-30 | 2016-03-23 | 杭州师范大学钱江学院 | 一种微流控芯片及电泳分离用分离通道 |
| CN105466992A (zh) * | 2015-09-24 | 2016-04-06 | 杭州师范大学 | 一种芯片电泳分离和等离子体质谱分析*** |
| CN105854967A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-08-17 | 广东工业大学 | 一种微流控芯片装置及其微流道结构 |
| CN106940305A (zh) * | 2016-01-05 | 2017-07-11 | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 | 基于微流控芯片的抗生素检测装置和检测方法 |
| CN107012220A (zh) * | 2017-04-10 | 2017-08-04 | 厦门大学 | 一种利用配对微流控芯片高通量分析单细胞内含物的方法 |
| CN107525765A (zh) * | 2016-06-15 | 2017-12-29 | 优志旺电机株式会社 | 微流路芯片及检体浓度测定装置 |
| CN107699485A (zh) * | 2017-11-06 | 2018-02-16 | 东南大学 | 微电极流控芯片及可调参数单细胞电穿孔装置 |
| CN110579527A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-12-17 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种带有离子在线富集装置的电泳微芯片及检测方法 |
| CN113275127A (zh) * | 2021-06-15 | 2021-08-20 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种固体颗粒静电分离装置和方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002022787A2 (en) * | 2000-09-18 | 2002-03-21 | President And Fellows Of Harvard College | Differential treatment of selected parts of a single cell with different fluid components |
| US7115230B2 (en) * | 2003-06-26 | 2006-10-03 | Intel Corporation | Hydrodynamic focusing devices |
| CN101393124A (zh) * | 2007-09-19 | 2009-03-25 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法 |
-
2010
- 2010-07-19 CN CN2010102302760A patent/CN101923053B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002022787A2 (en) * | 2000-09-18 | 2002-03-21 | President And Fellows Of Harvard College | Differential treatment of selected parts of a single cell with different fluid components |
| US7115230B2 (en) * | 2003-06-26 | 2006-10-03 | Intel Corporation | Hydrodynamic focusing devices |
| CN101393124A (zh) * | 2007-09-19 | 2009-03-25 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 《ANALYTICAL CHEMISTRY》 20031101 Maxine A. McClain, et al Microfluidic devices for the high-throughput chemical analysis of cells 5646-5655 1-2 第75卷, 第21期 2 * |
| 《PROCEEDINGS OF THE SOCIETY OF PHOTO-OPTICAL INSTRUMENTATION ENGINEERS-MICROFLUIDICS, BIOMEMS, AND MEDICAL MICROSYSTEMS》 20031231 Jung Kyung Kima, et al Single-cell manipulation and fluorescence detection in benchtop flow cytometry system with disposable plastic microfluidic chip SPIE 8-20 1-3 第4982卷, 1 * |
Cited By (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102183504A (zh) * | 2011-01-25 | 2011-09-14 | 山东师范大学 | 一种微流控单细胞活性氧自动分析仪 |
| CN102680679A (zh) * | 2011-03-15 | 2012-09-19 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 检测单细胞特异性抗体分泌的细胞微孔芯片及其制备方法 |
| CN102680679B (zh) * | 2011-03-15 | 2014-08-27 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 检测单细胞特异性抗体分泌的细胞微孔芯片及其制备方法 |
| CN104388300A (zh) * | 2014-11-27 | 2015-03-04 | 山东师范大学 | 一种用于单细胞定量分析的微流控连续进样方法及装置 |
| CN104513785A (zh) * | 2014-12-17 | 2015-04-15 | 华中科技大学 | 一种细胞寻址微流控芯片、细胞分析装置及方法 |
| CN104646079A (zh) * | 2015-02-17 | 2015-05-27 | 方雪萍 | 一种用于毛细管电泳的离心式cd微流控芯片及毛细管凝胶电泳装置 |
| CN105136763B (zh) * | 2015-09-10 | 2017-10-13 | 大连海事大学 | 基于气液界面单细胞捕获及叶绿素荧光表征的单微藻细胞活性动态监测新方法与装置 |
| CN105136763A (zh) * | 2015-09-10 | 2015-12-09 | 大连海事大学 | 基于气液界面单细胞捕获及叶绿素荧光表征的单微藻细胞活性动态监测新方法与装置 |
| CN105466992B (zh) * | 2015-09-24 | 2019-02-22 | 杭州师范大学 | 一种芯片电泳分离和等离子体质谱分析*** |
| CN105466992A (zh) * | 2015-09-24 | 2016-04-06 | 杭州师范大学 | 一种芯片电泳分离和等离子体质谱分析*** |
| CN105413766A (zh) * | 2015-10-30 | 2016-03-23 | 杭州师范大学钱江学院 | 一种微流控芯片及电泳分离用分离通道 |
| CN106940305A (zh) * | 2016-01-05 | 2017-07-11 | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 | 基于微流控芯片的抗生素检测装置和检测方法 |
| CN105854967A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-08-17 | 广东工业大学 | 一种微流控芯片装置及其微流道结构 |
| CN107525765A (zh) * | 2016-06-15 | 2017-12-29 | 优志旺电机株式会社 | 微流路芯片及检体浓度测定装置 |
| CN107012220A (zh) * | 2017-04-10 | 2017-08-04 | 厦门大学 | 一种利用配对微流控芯片高通量分析单细胞内含物的方法 |
| CN107699485A (zh) * | 2017-11-06 | 2018-02-16 | 东南大学 | 微电极流控芯片及可调参数单细胞电穿孔装置 |
| CN110579527A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-12-17 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种带有离子在线富集装置的电泳微芯片及检测方法 |
| CN110579527B (zh) * | 2019-08-28 | 2021-08-13 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种带有离子在线富集装置的电泳微芯片及检测方法 |
| CN113275127A (zh) * | 2021-06-15 | 2021-08-20 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种固体颗粒静电分离装置和方法 |
| CN113275127B (zh) * | 2021-06-15 | 2023-11-14 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种固体颗粒静电分离装置和方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101923053B (zh) | 2012-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101923053B (zh) | 利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的方法 | |
| ES2699679T3 (es) | Sistema multidimensional ex-vivo para la separación y el aislamiento de células, vesículas, nanopartículas y biomarcadores | |
| CN102296028B (zh) | 基于微孔微电极阵列的高通量细胞电融合微流控芯片装置 | |
| US8999129B2 (en) | Liquid and gel electrodes for transverse free flow electrophoresis | |
| JPWO2005121767A1 (ja) | マイクロ流体デバイス及びこれを用いる分析分取装置 | |
| Choi et al. | Recent advances in microscale electroporation | |
| US10983035B2 (en) | Simultaneous isolation and preconcentration of exosomes by ion concentration polarization method and apparatus | |
| CN209302785U (zh) | 微流控芯片、含有该微流控芯片的装置 | |
| JP4145938B2 (ja) | 細胞分離チップおよびこれを使用した細胞培養方法 | |
| CN105136763B (zh) | 基于气液界面单细胞捕获及叶绿素荧光表征的单微藻细胞活性动态监测新方法与装置 | |
| CN101718698B (zh) | Pcr-ce联用微流控芯片激光诱导荧光分析仪 | |
| CN104388300A (zh) | 一种用于单细胞定量分析的微流控连续进样方法及装置 | |
| CN101393124A (zh) | 一种基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法 | |
| CN101275926A (zh) | 一种专用微流控芯片及其单次加样连续分离电泳方法 | |
| CN1287145C (zh) | 微流控芯片单细胞的分析方法 | |
| CN103698382A (zh) | 一种用于微量液滴阵列的毛细管电泳分析装置及其使用方法 | |
| CN102139167A (zh) | 一种加电中空纤维膜萃取器 | |
| CN105510191B (zh) | 流式微粒检测方法 | |
| TWI291025B (en) | An integral micro-dialysis electrophoresis chip having on-line labeling function and the analysis method thereof | |
| CN209348659U (zh) | 微流控芯片及样本融合装置 | |
| Karacaoğlu et al. | Microfluidic systems as a novel approach for microalgal bioprocess | |
| CN101486964A (zh) | 一种基于微流控芯片的细胞电穿孔方法及专用芯片 | |
| CN1508261A (zh) | 一种基于微流控芯片的单细胞内涵物的分析方法 | |
| CN205774545U (zh) | 一种实现pcr的微流控芯片及实时pcr的细菌检测装置 | |
| CN1548546A (zh) | 一种基于微流控芯片平台的连续单细胞内涵物的分析方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120627 Termination date: 20150719 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |