CN101909645A - 包含ipp和/或vpp的降血压组合 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种组合物,其包含是IPP和/或VPP的肽;和至少一种能够从天然来源提取或纯化的化合物,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
Description
发明领域
本发明涉及新颖的降血压组合物。
发明背景
高血压(Hypertension)(通常也称为“血压高(high blood pressure)”或HTN)是血压慢性升高的医学病症。虽然正式称谓是动脉高血压,但是不带限定词的词语“高血压”也通常表示动脉高血压。高血压可以被归类为基本型(原发)或继发型。基本型高血压表示不存在解释患者病症的特定的医学原因。继发型高血压表示血压高是另外的病症(继发)的结果,所述病症例如为肾病或某些肿瘤(特别是肾上腺)。持久型(Persistent)高血压是中风、心脏病、心力衰竭和动脉瘤的风险因子之一,并且是慢性肾衰竭的主导原因。即使动脉血压的中度提高也会导致预期寿命(life expectancy)缩短。在严重的高压下(意味着平均动脉压比均值高50%或更多),除非得到适当的治疗,否则预计此人生存不超过数年。(来源:http://en.wikipedia.org/wiki/Hypertension).
大部分教科书中提到,对涉及到的人群中多于90%而言,血压高的原因是未知的。遗传倾向(genetics disposition)被认为是相关的事实,但是目前所有血压高中的大部分通常与生活方式和饮食因素相关。在生活方式习惯中,例如喝咖啡、消耗酒精、缺乏锻炼和压力可对血压造成负面影响。饮食因素如含高饱和脂肪或含高盐的食物以及肥胖症同样起重要作用。
特别地,生活方式的改变可非常有助于降低大部分人的血压。在这一方面中,营养药物可以是健康饮食的部分,用于降低提高的血压。对这些人而言,目前存在被证明有帮助的许多合适的化合物。目前存在这样的趋势——使用选定的、有时已经是常规饮食的部分的化合物。通常,这些选定的化合物随即与常规食物摄入相比以提高的剂量被消耗。
另一方面,总是存在将添加用于影响我们生理状况的化合物的必须量最小化的需要。不仅因为浓缩和提取成本使生产成本非常高,而且公众感觉营养药物中例如活性化合物的量应当保持尽可能低。协同组合物能够满足这一要求,因此存在将活性化合物协同组合的需要,从而降低活性化合物的所述量。
进行的另一观察结果是抗高血压药(用于治疗高血压的化合物)仅对某一百分比的患有高血压的人具有积极影响。例如,发现ACE(血管紧张素转化酶)抑制肽对大约三分之二患有高血压的人有效,其量对应于许多处方药。
通常,需要降血压效应的人会将一种抗高血压药尝试约两个月,只有在两个月后无效果时才会尝试另一抗高血压药。有时在实践中,在发现降血压效应之前必须完成大量试验,并且在实践中,许多患者在获得有意义的降血压效应之前,需要用多种降血压药丸治疗。
因此存在对下述降血压组合物的需求,所述降血压组合物会对更大量的人有效,同时包含正常饮食中存在的那些化合物作为有效成分。
发明内容
本发明公开了新颖的降血压组合物,其至少对五分之四需要这类组合物的人有效。
本发明的组合物包含:
-具有ACE抑制效应的肽;和
-至少一种能够从天然来源提取或纯化的化合物,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂(Hawthorne)、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
优选的肽是IPP(Ile-Pro-Pro)和VPP(Val-Pro-Pro)。I或Ile是异亮氨酸。V或Val是缬氨酸。P或Pro是脯氨酸。
惊讶地发现,每种上述化合物与IPP和/或VPP的组合产生了协同的降血压效应,即组合的效应比每种个体化合物的降血压效应的总和更大。另外,惊讶地发现:本发明的组合物与每种有效成分相比对更大的人群有效。
本发明还涉及生产本发明的组合物的方法,所述方法将是IPP和/或VPP的肽和至少一种能够从天然来源中提取或纯化的化合物集合在一起来实现,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
另外,本发明涉及:
-具有ACE抑制效应的肽;和
-至少一种能够从天然来源中提取或纯化的化合物,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择,
在食物、饲料、营养药物或饮食补充物中的用途或用于制备食物、饲料、营养药物或饮食补充物的用途。
在该用途中,所述肽优选地为IPP或VPP。另外,该用途涉及ACE抑制效应或用于降血压。
根据本发明的一个方面,能够从天然来源中提取或纯化的肽和化合物一起对降血压具有协同效应。
本发明还涉及治疗需要降血压效应的人的方法,所述方法包括对所述人施用本发明的组合物。
具有ACE抑制效应的肽可以根据任何已知的方法生产。其可以从蛋白质来源分离,其可以通过化学或酶促水解蛋白质来制备,或者可以合成生产。优选地,所述肽通过水解合适的蛋白质生产,并且是水解产物的部分。水解产物可任选地被纯化,从而提高水解产物中的肽含量。酶促水解的底物包括全奶、脱脂奶、酸性酪蛋白、粗制凝乳酶酪蛋白、酸性乳清产物或乳酪乳清产物。用于酶促水解的其它底物是基于胶原的动物蛋白例如明胶,以及骨或鱼骨。另外,植物底物如小麦谷蛋白、研磨的大麦和从例如大豆、水稻或玉米获得的蛋白质级分是合适的底物。优选地使用奶或来自奶的蛋白质,例如酪蛋白或乳清。
从天然来源提取的化合物可以是:
·鱼油(EPA/DHA)
若干研究报道了EPA/DHA对血压的有利影响。EPA和DHA可调控信号转导的胞内Ca2+离子,这导致血管肌肉膨胀。其它推测的机制包括TxA2/TxA3平衡朝向TXA3的移位,并以血管收缩性TxA2为代价;改变***素合成;增强细胞膜流动性,导致改变的离子通道活性。
·绿茶(ECGC)
对EGCG而言,一些研究报道了对大鼠血压的有利影响,但是没有研究报道在人中的效应。
作用机制
对绿茶而言,推定的降血压应答下潜在的基本机制应当在于多酚的抗氧化作用。该抗氧化效应会改善内源血管扩张药一氧化氮(NO)的生物利用率。一些体外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用,但是这一效应尚未在人中证实。
·γ-氨基-丁酸(GABA)
GABA已在若干文章(见参考文献)中被描述为降低血压。所有四种研究具有不同的设计,并使用来自不同来源的GABA。所有四种研究均在日本进行。
因为以中度剂量施用的GABA不跨越血-脑屏障,所以其对血压的影响被认为是通过外周机制而发生。
基于在大鼠中的研究,最可能的机制似乎是通过阻断交感神经末梢或神经节点处的GABA6受体来减弱交感神经传递。然而,GABA与外周苯并二氮杂卓类受体的结合已被描述,并且同样可部分解释GABA的低血压效应。
1.lnoue K,Shirai T,Ochiai H,等,Blood-pressure-lowering effect of a novel fermented milk containing gamma-aminobutyric acid(GABA)in mild hypertensives.EUR J CLIN NUTR 57(3):490-495MAR 2003.
2.Kazami D,Ogura N,Fukuchi T,等,Antihypertensive effect of Japanese taste seasoning containing gamma-amino butyric acid on mildly hypertensive and high-normal blood pressure subjects and normal subjects.J JPN SOC FOOD SCI 49(6):409-4152002.
3.Watanabe等,J.Jap.Food Sci.Technol.(2003)50167-173:GABA-enriched Agaricus blazei mushrooms,mildly hypertensive subjects,placebo controlled double blind cross-over,14subjects,1week
4.Tsuchida T,等,J Jpn Soc Nutr Food Sci(2003)56 97-102:GABA-rich Chlorella in 60 subjects with high-normal BP and hypertension.
·葡萄籽提取物(包括白藜芦醇)
来自University of California at Davis的Faseb Journal(The FASEB Journal.2007;21:750.33)的摘要报道,服用葡萄籽提取物(300mg)后,就收缩期和舒张期血压而言,患有前-高血压的受试者中血压降低8/6mmHg。
作用机制
对葡萄籽提取物而言,推定的降血压应答下潜在的基本作用机制应当在于多酚的抗氧化作用。该抗氧化效应会改善内源血管扩张药一氧化氮(NO)的生物利用率。一些体外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用,但是这一效应尚未在人中证实。
·西红柿提取物(番茄红素)
仅一项研究公开了西红柿提取物在人中降血压的特性,但是其似乎是具有强有力效应的精心设计的研究(安慰剂对照研究中-10mmHg降低。Egelhard,Am Heart J.2006)。
作用机制
对西红柿提取物而言,推定的降血压应答下潜在的基本作用机制应当在于多酚的抗氧化作用。该抗氧化效应会改善内源血管扩张药一氧化氮(NO)的生物利用率。一些体外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用,但是这一效应尚未在人中证实。
·橄榄提取物(羟基酪醇)
在同行评议的文献(peer-reviewed literature)中未报道效应。(注意对橄榄叶提取物而言存在一些证据)。
作用机制
对橄榄提取物而言,推定的降血压应答下潜在的基本作用机制应当在于多酚的抗氧化作用。该抗氧化效应会改善内源血管扩张药一氧化氮(NO)的生物利用率。一些体外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用,但是这一效应尚未在人中证实。
·维生素D
关于维生素D干预(1-20μg/天)对血压的影响出版了7项对人的研究(综述参阅Zitterman 2003;未报道更近期的研究),所述研究具有从无影响到有影响的不同结果。维生素D改善Ca2+代谢,并且提出Ca2+改善血压。或者,有指征指出维生素D及其代谢产物可抑制ACE。
·B类维生素
补充B类生物素来降低血压导致了混合的结果。一些文章描述了效应的缺乏。有限量的研究报道了对血压的较小的有益影响(Aybak,1995;Stehouwer,2001;Mangoni,2002)。应当注意,一项研究(Mangoni)中的受试者均为吸烟者,并且仅有一项研究与安慰剂组进行了正确的比较。
·山楂
在一个研究中,山楂显示有降低血压的趋势(Phytother Res.2002Feb;16(1):48-54.)
作用机制
对绿茶而言,推定的降血压应答下潜在的基本机制应当在于多酚的抗氧化作用。该抗氧化效应会改善内源血管扩张药一氧化氮(NO)的生物利用率。一些体外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用,但是这一效应尚未在人中证实。
·CoQ10或Q10
在2007年(Journal of Human Hypertension(2007)21,297-306)进行了对辅酶Q10的降血压潜能的荟萃分析(meta-analysis),所述分析进行了大量临床试验。结论是辅酶Q10在高血压患者中具有降低收缩期血压而无显著副作用的潜能。
如上文所讨论的,对本发明第二组分所进行的研究结果在大部分情况下是可疑的。因此,这些化合物在本发明的组合物中显示如此积极的影响是相当令人惊讶的。特别地,CoQ10、葡萄籽提取物和多酚是优选的第二化合物。蛋白质水解产物、水解产物或经水解的蛋白质表示所述产物通过蛋白质的酶促水解而形成,经富集的水解产物是例如富含选定的肽的蛋白质水解产物的级分,或者其中肽或多肽已从水解产物中去除。因此,富集的水解产物优选地是多种肽的混合物(或一种肽混合物)。因此,本发明的肽混合物是至少两种、优选地至少三种、更优选地至少四种肽的混合物。更优选地,混合物包含下述肽群体,其中多于50%,优选地甚至多于60%,最优选地多于75%的存在的肽具有低于500Da的分子量。本发明中使用的蛋白质水解产物具有7和50之间的DH、优选地10和40之间的DH、最优选地15和30之间的DH。
“肽”或“寡肽”在本文中被定义为通过肽键连接的至少两个氨基酸的链。术语“肽”和“寡肽”被认为是同义词(如普遍所认可的),并且每个术语可疑根据上下文的需要互换使用。“多肽”在本文中被定义为含有多于30个氨基酸残基的链。根据普遍实践,本文所有(寡)肽和多肽式或序列从左到右以从氨基端到羧基端的方向书写。在本文中使用时,蛋白质被定义为非水解的蛋白质。另外,特别是一般地讨论蛋白质时,蛋白质也可表示多肽、肽和游离氨基酸的总和。
“游离氨基酸”是不通过肽键与另一氨基酸连接的氨基酸。在该申请文件中,“氨基酸”可能在若干情况下使用时也表示“游离氨基酸”。优选地,本发明组合物中游离氨基酸的量少于总蛋白质的5wt%。
在本文中使用时,术语营养药物表示在营养和药物两种应用领域中的有用性。因此,包含本发明组合物的新颖的营养药物组合物可用作食物和饮料的补充物,或作为用于肠内或肠胃外应用的药物配制物或药物,其可以是固体配制物例如胶囊或片剂,或液体配制物例如溶液、悬浮液或乳液。
用于特定营养用途(Foods for Special Nutritional Uses)的食物的例子包括运动食物、瘦身食物、婴儿配方和临床食物的范畴。在本文中使用时,术语食物补充物表示由口摄取的产物,其含有旨在补充饮食的化合物或多种化合物的混合物。这些产物中的化合物或多种化合物的混合物可包含:维生素、矿物质、草药(herbs)或其它植物(botanicals)和氨基酸。饮食补充物也可以是提取物或浓缩物,并且可以许多形式存在,例如片剂、胶囊、软凝胶、凝胶胶囊(gelcaps)、液体或粉末。在本文中使用时,术语营养药物表示在营养和药物两种应用领域中的有用性。根据本发明的营养药物组合物可以是适合施用给动物体(包括人体)的任何形式,特别是常规用于口施用的任何形式,例如固体形式例如食物或饲料(添加剂/补充物)、食物或饲料预混物、片剂、丸剂、颗粒、锭剂、胶囊和泡腾配制物例如粉末和片剂,或者是液体形式例如溶液、乳液或悬浮液,例如饮料、糊剂和油性悬浮液。并入根据本发明的水解产物的受控(延迟)释放配制物也构成本发明的部分。另外,可以向本发明的营养药物组合物中添加多-维生素和矿物质补充物,获得适量的在一些饮食中缺失的必须营养物。多-维生素和矿物质补充物也可以用于疾病预防和生活方式导致的防止养分流式和缺乏。
如上文所述,食物或饮料被合适地用于施用本发明。可用于补充本发明的组合物的饮料可以是饮料(例如运动饮品、能量饮品或其它软饮)的形式,或任何其它合适的养分制备物的形式。
运动饮品是假设为运动员补水以及补充电解质、糖和其它养分的饮料。运动饮品通常是等渗的,表示它们含有与人体中存在的相同比例的养分。(来源:http://en.wikipedia.org/wiki/Sports_drink)
能量饮品是含有(法定的)兴奋药、维生素(特别是B类维生素)和矿物质的饮料,其目的是给予使用者能量的突然发作。常见的成分包括咖啡因、瓜拉那(guarana,来自瓜拉那植物的咖啡因)、牛磺酸、多种形式的人参、麦芽糖糊精、肌醇、肉毒碱、肌酸、葡糖醛酸内酯和银杏。一些可含有高水平的糖或葡萄糖。许多这类饮料是经过调味和/或着色的(来源:http://en.wikipedia.org/wiki/Energy_drink)
软饮是不含有酒精的饮品,与含有酒精的硬饮相对。通常,该术语仅用于冷饮料。热巧克力、茶和咖啡不被认为是软饮。该术语最初专门表示充二氧化碳的饮品,目前仍以这种方式广泛使用(http://en.wikipedia.org/wiki/Soft_drink)。
本文中使用的氨基酸的单字母和三字母代码是本领域普遍已知的,并且可在Sambrook,等,(Molecular Cloning:A Laboratory Manual,2nd,ed.Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY,1989)中找到。
内切蛋白酶在本文中被定义为以内切方式水解多肽中肽键并且属于EC 3.4类的酶。内切蛋白酶以催化机制为基础被分为亚-亚类。存在丝氨酸内切蛋白酶(EC 3.4.21)、半胱氨酸内切蛋白酶(EC 3.4.22)、天冬氨酸内切蛋白酶(EC 3.4.23)、金属内切蛋白酶(EC 3.4.24)和苏氨酸内切蛋白酶(EC3.4.25)的亚-亚类。外切蛋白酶在本文中被定义为水解与末端α-氨基相邻的肽键的酶(“氨肽酶”)或末端羧基和次末端氨基酸之间肽键的酶(“羧肽酶”)。
通常,根据本发明的组合物具有无刺激性(bland)或中性的口味和改善的在酸性条件下的溶解度,并且可以被用作其它饮料(例如运动饮品或软饮或健康饮品或发酵产物)的基础。术语本发明组合物或产物的无刺激性口味表示水样品中3wt%蛋白质的苦味水平,与溶于蒸馏水中15mg/升硫酸奎宁的水平相似或更低,所述口味是在14℃下品尝的。
实现期望的水解程度所需的酶量取决于使用的酶。然而,以下述方式优化酶剂量和温育条件,所述方式使得在典型地6到20个小时的温育期后大部分酪蛋白级分溶于反应的水相中。大部分表示在pH 4下,酪蛋白基本中存在的少于20%,优选地少于10%,更优选地少于5%的蛋白质在2000g离心10分钟后能够被沉淀。
可以在水解后使用的酶失活步骤可以是热处理,其包括在至少85℃的温度下加热至少10分钟。如果使用更高的温度或更极端的pH值,则更短的时期是可行的。这类热处理优选地在酸性pH值、优选地在3和7之间的pH值下进行。酶失活处理可以对两种级分单独地进行,或者可以在将所述级分混合形成本发明的组合物之后进行。
任选地,为了从最终产物中去除未溶的材料,优选倾析或在例如2000-4000g下低速离心,这能够以工业规模进行。任选地,可以使用超滤器、微滤器、硅藻土、玻璃纤维滤器或使用错流过滤来过滤每种水解产物或两种水解产物的混合物。可以通过染料-明胶测试验证酶的完全失活。
任选地,可以用失活的木炭或用纳米过滤、离子交换或电透析来处理经过滤的最终水解产物,以去除过剩的盐。可以将经过滤的水解产物巴氏消毒或灭菌,需要时通过干燥技术(例如政法、纳米过滤、喷雾干燥、流化床干燥或其组合)进一步浓缩。优选地,获得的产物是颗粒形式。
可以原样或优选地在离心后,将含有经水解的酪蛋白的级分浓缩并干燥。经干燥的产物可以再溶解于含经水解的乳清蛋白的级分中,以获得期望的蛋白质浓度和蛋白质比例,然后在需要时离心或过滤并巴氏消毒或灭菌,获得根据本发明的产物。
显然,可以对产物进行额外的酶处理(例如乳糖酶),或者可用不同类型的起始培养物发酵,或者可与所有种类的成分例如油、脂肪、乳化剂、碳水化合物、水果浓缩物、调味料、着色剂、酒精、二氧化碳、增稠剂、酸化剂、抗氧化剂、草药或草药提取物、促进健康的化合物例如维生素或原维生素或生物活性剂或含色氨酸的肽或氨基酸合并,配制符合市场需要的产物。
水解程度
使用快速OPA测试(Nielsen,P.M.;Petersen,D.;Dambmann,C.Improved method for determining food protein degree of hydrolysis.Journal of Food Science 2001,66,642-646),监测用多种水解混合物温育期间获得的水解程度(DH)。水解程度是通过酶促水解反应使肽键断裂的程度。
Claims (8)
1.组合物,其包含:
-肽,所述肽是IPP和/或VPP;和
-至少一种能够从天然来源中提取或纯化的化合物,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
2.包含权利要求1或2的组合物的食物、饲料、营养药物或饮食补充物。
3.权利要求1的组合物,其用作营养药物,优选地用作药物。
4.生产根据权利要求1到3中任一项的组合物的方法,所述方法将是IPP和/或VPP的肽和至少一种能够从天然来源中提取或纯化的化合物集合在一起来实现,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
5.是IPP和/或VPP的肽和至少一种能够从天然来源中提取或纯化的化合物在食物、饲料、营养药物或饮食补充物中的用途或用于制备食物、饲料、营养药物或饮食补充物的用途,所述化合物优选地选自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜芦醇、EGCG、维生素D、Pufa、GABA、番茄红素、山楂、羟基酪醇组成的组,或优选地根据葡萄籽提取物或分离物中存在的多酚的抗氧化作用而选择。
6.权利要求5的用途,其中含有所述肽和能够从天然来源提取或纯化的化合物的食物、饲料、营养药物或饮食补充物用于ACE抑制效应或用于降血压。
7.权利要求5到6中任一项的用途,其中所述肽IPP和/或VPP和能够从天然来源提取或纯化的化合物一起对降血压具有协同效应。
8.治疗需要降血压效应的人的方法,所述方法包括对所述人施用根据权利要求1到3中任一项的组合物。
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