CN101839856B - 一种***的特异性检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种***的特异性检测方法。67.8mg半胱氨酸在氮气保护条件下，加入150mL含有96.5mg Cd(AC)2的超纯水中；使用0.5M NaOH调节溶液pH值至11.0；分别加入223.5mg柠檬酸钠和17.9mg Na2TeO3；在吹入氮气的条件下，加入16.5mg NaBH4；最后，25mL上述溶液被转移到高压反应釜中，在160℃条件下反应获得不同粒径的CdTe量子点溶液；浓缩后的检测样品加入到量子点溶液中，反应2小时后，使用荧光分光光度计检测。该方法具有较高灵敏度和特异性；同时，检测时间短、样品处理简单，应用前景好。

Description

一种***的特异性检测方法
技术领域
本发明涉及一种基于量子点荧光淬灭原理实现对***的简便、快速、特异性检测新方法。
背景技术
***是一种烈性***，广泛应用于工厂、矿山开采。***属于高度危害毒物，可以通过吸入、食入、经皮吸收进入人体对人体造成包括中毒性肝损伤、中毒性白内障、贫血、皮炎、湿疹等严重损害。因此，实现对***简便、快速、特异性检测对于监测环境中***污染程度，研究它的生物毒性机理具有重要意义。目前主要使用高效液相色谱法、气相色谱法、酶联免疫分析法等方法来检测***。这些方法耗时、昂贵、样品前处理复杂、不利于实现对***的快速、简便的检测。本发明使用的方法实现了简便、快速、特异性检测***。
发明内容
本发明的目的是提供一种简便、快速的***的检测方法。
1、半胱氨酸修饰的水溶性CdTe量子点合成
67.8mg半胱氨酸在氮气保护条件下，加入150mL含有96.5mg Cd(AC)2的超纯水中；使用0.5M NaOH调节溶液pH值至11.0；分别加入223.5mg柠檬酸钠和17.9mg Na2TeO3；在吹入氮气的条件下，加入16.5mg NaBH4；最后，25mL上述溶液被转移到高压反应釜中，在160℃条件下反应20-60分钟，每隔10分钟取样一次；可以获得不同粒径的CdTe量子点；取其中任一种粒径的CdTe量子点溶液备用。
本发明方法所合成的量子点粒径均一，激发光谱宽呈连续分布，发射光谱的半峰宽窄呈对称分布；通过控制反应时间，合成了不同粒径大小的量子点具有极强的稳定性，在4℃条件下保存三个月以上，荧光强度减弱不超过5％。
因为***是典型的缺电子体，而半胱氨酸是典型的的富电子体。***与半胱氨酸之间可以形成迈森海姆复合物(Meisenheimer complex)。复合物的形成导致***靠近量子点，引起量子点荧光淬灭，从而通过检测量子点荧光改变来实现对***的检测(如图4所示)。不同浓度的***加入到量子点溶液中可引起量子点荧光发生改变(如图5所示)。
浓缩后的样品2μL加入到事先准备好的量子点溶液中，反应2小时后，使用LS45荧光分光光度计检测。检测条件为：激发波长为380nm，激发和发射狭缝为10nm。
2g待测样品与3mL乙腈在超声条件下混匀2小时；待测样品使用0.22μm过滤膜过滤除去沉淀后浓缩至乙腈挥发后待检测。
通过该方法，我们实现了对***的简便、快速、特异性检测。与传统方法相比，该方法具有较低检测限和较高灵敏度，通过该方法我们可以检测到低至1.1nM***；同时，通过对比二硝基苯酚、三硝基苯酚、硝基甲苯检测发现仅有***可以产生明显信号响应；此外，该方法检测时间短、样品处理简单，整个检测过程不超过2.5小时。综上，说明本发明方法是一种简便、快速、特异性检测***的新方法。
附图说明
图1为半胱氨酸修饰的量子点荧光激发和发射图谱；
图2为半胱氨酸修饰的量子点透射电子显微镜；
图3为半胱氨酸修饰的量子点红外表征图谱；
图4为本发明的原理示意图；
图5为不同浓度的***加入到量子点溶液中引起量子点荧光发生改变的曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明，而非限制本发明。
利用本发明方法发明人对湖南大学某处土壤中***的简便、快速、特异性检测。
1、67.8mg半胱氨酸(l-cysteine)在氮气保护条件下，加入150mL含有96.5mg Cd(AC)2的超纯水中；使用0.5M NaOH调节溶液pH值至11.0；分别加入223.5mg柠檬酸钠和17.9mgNa2TeO3；在吹入氮气的条件下，加入16.5mg NaBH4；最后，25mL上述溶液被转移到高压反应釜中，在160℃条件下反应不同时间获得不同粒径的CdTe量子点。
2、土壤中***的提取：2g取自湖南大学某处土壤与3mL乙腈在超声条件下混匀2小时；沉淀使用0.22μm过滤膜过滤后浓缩待检测。
3、土壤中***的检测：浓缩后的样品2μL加入到事先准备好的量子点溶液中，反应2小时后，使用LS45荧光分光光度计检测。检测条件为：激发波长为380nm，激发和发射狭缝为10nm。土壤中***浓度评估为0.37μg/g。

Claims (2)

1.一种***的特异性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)半胱氨酸修饰的水溶性CdTe量子点合成
67.8mg半胱氨酸在氮气保护条件下，加入150mL含有96.5mg Cd(AC)2的超纯水中；使用0.5M NaOH调节溶液pH值至11.0；分别加入223.5mg柠檬酸钠和17.9mg Na2TeO3；在吹入氮气的条件下，加入16.5mg NaBH4；最后，25mL上述溶液被转移到高压反应釜中，在160℃条件下反应20-60分钟，每隔10分钟取样一次；获得不同粒径的CdTe量子点溶液；取其中任一种粒径的CdTe量子点溶液备用；
(2)浓缩后的检测样品2μL加入到量子点溶液中，反应2小时后，使用荧光分光光度计检测；所述的检测样品的浓缩过程为：2g待测样品与3mL乙腈在超声条件下混匀2小时；待测样品使用0.22μm过滤膜过滤除去沉淀后，过滤液再浓缩至乙腈挥发后待检测。
2.根据权利要求1所述的***的特异性检测方法，其特征在于，步骤(2)荧光分光光度计中检测条件为：激发波长为380nm，激发和发射狭缝为10nm。
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