CN101829056A - 一种藁本内酯脂肪乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种藁本内酯脂肪乳剂，每1000mL所述脂肪乳剂中含有：1g～300g藁本内酯；5g～50g乳化剂；20g～500g药学上可接受的油；5g～50g药学上可接受的稳定剂；0.5g～20g药学上可接受的抗氧剂；余量为药学上可接受的水；其中，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68。本发明还提供了一种藁本内酯脂肪乳剂的制备方法，包括：将藁本内酯和药学上可接受的抗氧剂溶于药学上可接受的油中，得到油相；将乳化剂和药学上可接受的稳定剂溶于药学上可接受的水中，得到水相，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68；将所述油相和水相混合后进行乳化，得到初乳；向所述初乳中加水后进行匀化，得到藁本内酯脂肪乳剂。

Description

一种藁本内酯脂肪乳剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种藁本内酯脂肪乳剂及其制备方法。

背景技术

藁本内酯(Ligustilide)是一种不溶于水的脂溶性物质，是中药材藁本、川芎、当归的主要有效成分之一，其结构如式(Ⅰ)所示：

研究表明，藁本内酯对心脑血管***、循环***及免疫***有较强的药理作用，如申请号为200310108859.6的中国专利文献公开报道了藁本内酯对动脉粥样硬化具有防治作用；申请号为200510021301.3的中国专利文献公开报道了藁本内酯能缩小小前脑及局灶性脑缺血梗死体积，可以用于防治缺血性脑梗塞；申请号为20051002130.9的中国专利文献公开了藁本内酯在痛经治疗中的应用。

现有技术也公开了多种化学合成或从中药中提取高纯度藁本内酯的方法，使藁本内酯能够大规模应用，如申请号为200510021261.2的中国专利文献公开了一种从当归和川芎中快速提取高纯度藁本内酯的方法；申请号为03123994.3的中国专利文献公开了一种顺式藁本内酯的提取方法；申请号为92111278.5的中国专利文献公开了一种化学合成藁本内酯的方法。但是，藁本内酯的化学结构为苯酞类，其3位上连有活泼的丁烯基，致使藁本内酯化学性质不稳定，在室温自然条件下放置即可发生脱氢、氧化、水解、降解等多种异构化反应，长时间放置会发生固化甚至分解消失，从而限制了藁本内酯的应用，尤其难以作为液体药物制剂用于静脉注射。

目前，现有技术已经公开了多种藁本内酯与植物油等稳定剂组成的组合物或制剂，如申请号为200510021303.2的中国专利文献公开了一种由环糊精包裹的藁本内酯口服制剂，因与外界隔绝，其中的藁本内酯较为稳定，但无法作为液体药物制剂用于静脉注射；申请号为200410043159.8的中国专利文献公开了一种至少包括藁本内酯和植物油的组合物，由胶材球或卵磷脂包裹后作为胶囊剂或乳剂口服使用，该组合物虽然可以制作成液体药物制剂，但是卵磷脂包裹的水包油型脂质微球脂肪乳形成的微球稳定性不好，无法满足静脉注射用制剂的要求；同时，微球的稳定性不好，直接导致微球内的藁本内酯稳定性不能得到保障。

发明内容

有鉴于此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种藁本内酯脂肪乳剂及其制备方法，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂较为稳定，长期放置不会发生凝聚和分层，满足静脉注射制剂的要求。

本发明提供了一种藁本内酯脂肪乳剂，每1000mL所述脂肪乳剂中含有：

1g～300g藁本内酯；

5g～50g乳化剂；

20g～500g药学上可接受的油；

5g～50g药学上可接受的稳定剂；

0.5g～20g药学上可接受的抗氧剂；

余量为药学上可接受的水；

其中，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68。

优选的，所述脂肪乳剂的pH值为7.1～8.4。

优选的，所述藁本内酯为顺式藁本内酯和反式藁本内酯的混合物或顺式藁本内酯。

优选的，所述药学上可接受的油为大豆油、蓖麻油、玉米油、橄榄油、花生油、棉籽油、油酸、亚油酸、单硬脂酸甘油酯或单油酸甘油酯。

优选的，所述药学上可接受的稳定剂为甘油、油酸、木糖醇、山梨醇、甘露醇或聚乙二醇。

优选的，所述药学上可接受的稳定剂为甘油。

优选的，所述药学上可接受的抗氧剂为维生素E。

优选的，每1000mL脂肪乳剂中含有50g～200g藁本内酯。

本发明还提供了一种藁本内酯脂肪乳剂的制备方法，包括：

将藁本内酯和药学上可接受的抗氧剂溶于药学上可接受的油中，得到油相；

将乳化剂和药学上可接受的稳定剂溶于药学上可接受的水中，得到水相，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68；

将所述油相和水相混合后进行乳化，得到初乳；

向所述初乳中加入药学上可接受的水后进行匀化，得到藁本内酯脂肪乳剂。

优选的，还包括：

向所述藁本内酯脂肪乳剂中加入NaOH溶液，调节pH值至7.1～8.4。

与现有技术相比，本发明提供了一种藁本内酯脂肪乳剂，其中，不溶于水的藁本内酯为发挥药理作用的活性物质，在乳化剂豆磷脂和普罗尼克F-68、药学上可接受的稳定剂的作用下形成水包油型的微粒，从而与外界隔绝。本发明以豆磷脂和普罗尼克F-68同时作为乳化剂，使得到的水包油型微粒较为稳定，不易聚集和分层，满足了静脉注射制剂的要求。进一步的，本发明将所述藁本内酯脂肪乳剂的pH值调整为7.1～8.4，使水包油型微粒在中性偏碱性的条件下存在，提高了微粒的稳定性。藁本内酯作为水包油结构微粒的核心，与外界隔绝，无法与空气、水等发生异构化反应而变质，也不会发生水解、降解等反应消失，稳定性得到了提高。同时，本发明在藁本内酯脂肪乳剂中添加了抗氧剂，进一步降低了藁本内酯因发生氧化反应而变质的可能性，提高了藁本内酯的稳定性。本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂中不含有机溶剂或增溶剂，不会对人体造成危害。此外，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂的制备工艺简单、成本较低，易于工业化生产。

附图说明

图1为本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的粒径分布图；

图2为本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的Zeta电位图。

具体实施方式

本发明提供了一种藁本内酯脂肪乳剂，每1000mL所述脂肪乳剂中含有：

1g～300g藁本内酯；

5g～50g乳化剂；

20g～500g药学上可接受的油；

5g～50g药学上可接受的稳定剂；

0.5g～20g药学上可接受的抗氧剂；

余量为药学上可接受的水；

其中，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68。

在本发明中，藁本内酯为发挥药理作用的活性成分，对心脑血管***、循环***及免疫***有较强的药理作用，如可以防治动脉粥样硬化、防治缺血性脑梗塞治疗痛经等。本发明中，藁本内酯在每1000mL所述脂肪乳剂中的含量为1g～300g，优选为50g～200g，更优选为50g～150g。

藁本内酯具有顺式和反式两种异构体，本发明中所述的藁本内酯优选为顺式藁本内酯和反式藁本内酯的混合物或顺式藁本内酯，更优选为顺式藁本内酯。为了使脂肪乳剂更为稳定，本发明优选使用纯度为90％～100％的藁本内酯。所述藁本内酯可以为从中药中提取的产物，也可以为利用化学方法合成的产物，还可以直接从市场上购买，本发明优选利用公开号为200510021261.2的中国专利文献公开的方法得到的藁本内酯。

在本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂中，乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68，两种乳化剂同时使用，发挥乳化剂和稳定剂的作用，使得到的水包油型微粒更稳定，从而使得到的脂肪乳剂也较为稳定。其中，豆磷脂也称大豆磷脂或大豆卵磷脂，具有降低胆固醇、预防动脉硬化等药用价值；普罗尼克F-68，英文名称为Pluronic F-68，又译为普流尼克F-68或普朗尼克F-68，主要成分为泊洛沙姆(poloxamer)。在每1000mL所述脂肪乳剂中，乳化剂的含量为5g～50g，优选为10g～50g，更优选为10g～45g。

本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂中包括药学上可接受的油，药学上可接受的油作为载体为脂肪乳剂的形成提供油相，利于最终形成水包油型的微粒。按照本发明，所述药学上可接受的油优选为大豆油、蓖麻油、玉米油、橄榄油、花生油、棉籽油、油酸、亚油酸、单硬脂酸甘油酯或单油酸甘油酯，更优选为大豆油。在每1000mL脂肪乳剂中，药学上可接受的油的含量为20g～500g，优选为20g～300g，更优选为50g～300g。

为了提高脂肪乳剂的稳定性，本发明提供的脂肪乳剂还包括药学上可接受的稳定剂，所述稳定剂优选为甘油、油酸、木糖醇、山梨醇、甘露醇或聚乙二醇，更优选为甘油。在每1000mL脂肪乳剂中，药学上可接受的稳定剂的含量为5g～50g，优选为10g～50g，更优选为10g～40g。

为了提高藁本内酯的稳定性，使其不易被氧化，本发明提供的脂肪乳剂中还包括药学上可接受的抗氧剂，所述抗氧剂包括但不限于丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、维生素E(Vit E)和丁基对苯二酚(TBHQ)等，优选为维生素E。在每1000mL脂肪乳剂中，药学上可接受的抗氧剂的含量为0.5g～20g，优选为1g～15g，更优选为2g～15g。

pH值也是影响本发明提供的脂肪乳剂的稳定性的重要因素，实验表明，在中性偏碱性的环境下，脂肪乳剂稳定性更好。本发明提供的脂肪乳剂的pH值优选为7.1～8.4。

本发明还提供了一种藁本内酯脂肪乳剂的制备方法，包括：

将藁本内酯和药学上可接受的抗氧剂溶于药学上可接受的油中，得到油相；

将乳化剂和药学上可接受的稳定剂溶于药学上可接受的水中，得到水相，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68；

将所述油相和水相混合后进行乳化，得到初乳；

向所述初乳中加入药学上可接受的水后进行匀化，得到藁本内酯脂肪乳剂。

本发明主要是利用乳化原理将藁本内酯制备成脂肪乳剂，改善其溶解性、增加其稳定性，从而用于静脉注射或口服。

为了使藁本内酯和药学上可接受的抗氧剂在药学上可接受的油中分散更均匀，本发明优选将药学上可接受的油预热，预热的温度优选为40℃～100℃，更优选为40℃～80℃。

为了使乳化剂和药学上可接受的稳定剂在药学上可接受的水中分散均匀，本发明优选将药学上可接受的水预热，预热的温度优选为40℃～100℃，更优选为40℃～80℃。

将所述油相和所述水相混合并进行乳化的方法可以为将水相转入乳化机中，搅拌的同时将油相缓慢滴加入水相中；也可以为将油相转入乳化机，搅拌的同时将水相滴加入油相中。

为了使油相和水相充分分散均匀，本发明优选在高速搅拌的条件下进行乳化，所述高速搅拌的速度优选为6000转/min～14000转/min，更优选为8000转/min～12000转/min。搅拌时间优选为3min～15min。

得到均匀分散的初乳后，向所述初乳中加入药学上可接受的水中进行匀化，得到藁本内酯脂肪乳剂。匀化的目的在于得到平均粒径较小的藁本内酯脂肪乳剂。本发明优选将初乳匀化为平均粒径在0.5μm以下的藁本内酯脂肪乳剂，然后经微孔膜过滤、灌装、充氩气、115℃灭菌30min后得到藁本内酯脂肪乳剂。

为了提高藁本内酯脂肪乳剂的稳定性，本发明优选在经微孔膜过滤前向藁本内酯脂肪乳剂中加入NaOH溶液，调节脂肪乳剂的pH值为7.1～8.4。

经过乳化及匀化后，得到的藁本内酯脂肪乳剂中微粒的粒径为0.05μm～1μm，平均粒径为0.2μm～0.4μm，属于亚微乳范畴。在亚微乳中，液滴的分散度较大，药物吸收和药效发挥较快，生物利用度较高；亚微乳用于静脉注射时，具有靶向性，可选择性在病变部位聚积，提高治疗效果，同时药物在正常部位分布较少，药物毒性作用和不良反应较少。因此，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂也具有亚微乳的优点，用于静脉注射效果良好。

按照中国药典提供的方法对本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂进行热原检查，结果表明受试家兔体温升高并未超过0.6℃，各家兔体温升高总数低于1.4℃，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂热原检查合格。

对本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂进行溶血、凝血、过敏、刺激性实验，发现不会引起溶血、凝血、过敏等现象，也无刺激性。

对本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂进行稳定性实验，将其分别于低温4℃放置12个月、高温40℃放置6个月、室温25℃放置6个月后，其外观、pH值、包封率及藁本内酯标示含量均无明显变化，可见，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂较为稳定，其中的藁本内酯也较稳定，达到国家新药研究技术指导原则中关于制剂稳定性的要求。

本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂可以作为口服制剂使用，也可以作为静脉注射用制剂使用，尤其适于作为静脉注射用制剂使用，可以防治动脉粥样硬化、防治脑缺血性疾病、治疗痛经等。

与现有技术相比，本发明提供了一种藁本内酯脂肪乳剂，其中，不溶于水的藁本内酯为发挥药理作用的活性物质，在乳化剂豆磷脂和普罗尼克F-68、药学上可接受的稳定剂的作用下形成水包油型的微粒，从而与外界隔绝。本发明以豆磷脂和普罗尼克F-68同时作为乳化剂，使得到的水包油型微粒较为稳定，不易聚集和分层，满足了静脉注射制剂的要求。进一步的，本发明将所述藁本内酯脂肪乳剂的pH值调整为7.1～8.4，使水包油型微粒在中性偏碱性的条件下存在，提高了微粒的稳定性。藁本内酯作为水包油结构微粒的核心，与外界隔绝，无法与空气、水等发生异构化反应而变质，也不会发生水解、降解等反应消失，稳定性得到了提高。同时，本发明在藁本内酯脂肪乳剂中添加了抗氧剂，进一步降低了藁本内酯因发生氧化反应而变质的可能性，提高了藁本内酯的稳定性。本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂中不含有机溶剂或增溶剂，不会对人体造成危害。此外，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂的制备工艺简单、成本较低，易于工业化生产。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂及其制备方法进行详细描述。

实施例1

按照申请号为200510021261.2中国专利文献公开的方法获得藁本内酯，方法如下：

将20kg市售的当归生药切碎后，加入8倍量的95％乙醇于提取罐中浸泡过夜后，加热回流提取2小时，过滤；向得到的药渣中加入6倍量95％乙醇，加热回流提取2小时，过滤，收集第一滤液，得到第一药渣；向第一药渣中加入6倍量95％乙醇，加热回流提取2小时，收集第二滤液；将第一滤液和第二滤液合并，减压浓缩后得到800mL粗油；

向上述800mL粗油中加入0.6kg100目～200目的硅胶搅拌，得到拌样硅胶；取一直径为25cm的短柱，以便用水泵抽吸，以便加入6kg200目～300目的层析硅胶，使硅胶充分抽紧且顶端面凭证，硅胶面高30cm；然后将拌样硅胶上样于已经装好层析硅胶的短柱上，用水泵抽吸，先加总量为10L的石油醚冲洗，再加总量为85L的体积比为100∶5的石油醚和乙酸乙酯的混合液冲洗；半个柱体积收集一份洗脱液，用TLC(HF254板，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)展开)检测各份洗脱液，收集并合并在254nm和365nm下明显无其他杂质、Rf值最大显蓝色荧光的洗脱液，减压回收洗脱液，得到第一样品；

另将Rf值最大显蓝色荧光同时也含有其他杂质的洗脱液减压回收，按照上述硅胶减压层析方法继续在硅胶柱上层析分离3次，得到只含蓝色荧光的洗脱液，减压回收洗脱液，得到第二样品；

将第一样品和第二样品混合，高真空下减压除去残留的洗脱液，得到162g淡黄色液体样品，充二氧化碳气体后于-20℃的冰箱中保存备用；

用高效液相色谱法对所述淡黄色液体样品进行检测，其纯度为98.6％。

在以下各实施例中，藁本内酯均为使用前制备。

实施例2

2.1藁本内酯脂肪乳剂的制备

将市售的12g注射用大豆卵磷脂、5g市售的Pluronic F-68和22g市售的注射用甘油加入高速组织捣碎机，加100mL预热至80℃的注射用水，搅拌使卵磷脂分散均匀后得到水相；

将2.5g维生素E和50g实施例1制备的藁本内酯溶于150g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌3min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至1000mL，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至7.96，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

2.2粒径分布与Zeta电位的测定

取1mL实施例2.1中制备的藁本内酯脂肪乳剂，用英国马尔文公司的Malvern-3000型粒径及Zeta电位测定仪测定藁本内酯脂肪乳剂的粒径分布及Zeta电位，结果见图1和图2，图1为本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的粒径分布图；图2为本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的Zeta电位图；

由图1可知，本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的粒径分布均匀，呈正态分布；所述藁本内酯脂肪乳剂的平均粒径为266nm，分散指数(PDI)＝0.014；由图2可知，本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的Zeta电位为-26.6mV。结果表明，本发明实施例制备的藁本内酯脂肪乳剂的内分散相粒径分布范围为0.1μm～1μm，平均粒径为0.2μm～0.4μm，属于亚微乳范畴，符合静脉注射用制剂的相关要求。

2.3藁本内酯总含量的测定

参照文献《HPLC测定川芎中藁本内酯的含量》(汪程远等.HPLC测定川芎中藁本内酯的含量，中草药，2006，37(3)：447-449)中提供的高效液相色谱方法对实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂中藁本内酯的含量进行检测，测试条件如下：采用C18柱(4.6×150mm，5μm)，流动相为体积比为60∶40的甲醇和5％异丙醇的混合液，流速为1mL/min，紫外检测波长为280nm，柱温为室温。检测结果表明，平均回收率为99.2％，相对标准偏差RSD＝1.1(n＝6)，藁本内酯进样量在0.55μg～5.5μg时与峰面积呈良好线性关系，此时，线性系数达到0.997。

对实施例2.1制备的藁本内酯进行检测，利用外标法计算藁本内酯的含量为4.98％(n＝3)。

2.4包封率的测定

以40000r/min的速度将藁本内酯脂肪乳剂超速离心30min，取0.5mL下层清液用无水乙醇稀释后，用高效液相色谱法测定藁本内酯的含量为M₁，利用下式计算包封率：

Q＝M₁/M₀*100％

其中，Q为包封率；

M₀为实施例2.3测定的藁本内酯的总含量；

结果表明，实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂的包封率为97.65％。

2.5热原检测

按照2005版中国药典第二部附录XID提供的方法对所述藁本内酯脂肪乳剂进行热原检查，方法如下：

取3只购于重庆医科大学动物实验中心的大耳白家兔，体重2.5kg～2.8kg，在分别测定其正常体温后的15min内，于左耳缘静脉缓慢注射温热至38℃的实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂4mL/kg体重，然后每隔1h测量家兔的体温，连续测定3次，以3次体温中最高的一次减去正常体温为家兔的体温升高度数。结果表明，3只家兔的体温升高均低于0.6℃，且3只家兔体温升高总数低于1.4℃，本发明实施例提供的藁本内酯脂肪乳剂的热原检测合格。

2.6过敏性实验

将购于重庆医科大学动物实验中心、300g～400g的豚鼠按体重随机分成3组，每组6只；

第1组、第2组豚鼠分别间日一次、连续三次注射本发明实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂0.5mL/只致敏，然后于第一次注射后的第14天和第21天足趾静脉注射本发明实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂1.0mL/只激发，15分钟内观察过敏反应症状；

第3组豚鼠分别间日一次、连续三次腹腔注射20％鸡蛋清液0.5mL/只致敏，然后于第一次注射后的第14天足趾静脉注射20％鸡蛋清液1.0mL/只激发，15分钟内观察过敏反应症状；

结果表明，第1组和第2组各只豚鼠在两次原药液激发时均未发生过敏性反应；而第3组中各只豚鼠于激发后2min内出现呼吸困难、抽搐倒下的过敏症状，并均于注射后1min～3min死亡。由此可见，本发明实施例提供的藁本内酯脂肪乳剂无致敏作用。

2.7溶血性实验

取5只试管，分别加入0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂，然后分别用10％葡糖糖注射液稀释至2.5mL；取第6只试管，加入2.5mL10％葡糖糖注射液；取第7只试管，加入2.5mL蒸馏水；

分别向各试管内加入2.5mL2％兔红细胞悬液，轻轻摇匀，置于37℃水浴中，分别记录15min、30min、45min、1h、2h、3h和4h时各管内的溶血和血液凝集情况。结果表明，1～5号试管在4小时中红细胞大部分下沉，上层液体无色澄明，说明未发生溶血；分别将1～5号试管振摇，发现红细胞均匀分散开来，说明未发生凝集；而7号试管则得到澄明红色溶液，管底无细胞残留，说明发生了完全溶血。由此可见，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂对兔红细胞无溶血和凝集现象发生。

2.8刺激性实验

取3只购于重庆医科大学动物实验中心、体重为2.5kg～2.8kg的大耳白家兔，分别在其左耳缘静脉缓慢注射4mL/kg体重实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂，右耳缘静脉缓慢注射4mL/kg体重10％葡萄糖注射液，每天一次，连续注射3次，并每天观察注射部位有无水肿、红斑等，末次注射后24小时，从耳根处将耳朵剪下，置于10％甲醛溶液中固定，然后做病理切片检查。

实验结果表明，在注射藁本内酯脂肪乳剂后，3只兔耳注射部位均未见水肿和红斑的出现；病理组织学观察发现，兔耳表皮结构正常，表皮下***层及网织层无炎细胞浸出、无出血，血管内无血栓形成，附件结构正常，说明藁本内酯脂肪乳剂无刺激性。

2.9稳定性实验

将实施例2.1制备的藁本内酯脂肪乳剂分别于低温4℃放置12个月、高温40℃放置6个月、室温25℃放置6个月后，检测其外观、pH值、包封率及藁本内酯标示含量，结果见表1，表1为本发明实施例1制备的藁本内酯脂肪乳剂稳定性考察结果，其中，包封率的检测参照实施例2.4提供的方法，藁本内酯标示含量的检测参照2.3提供的方法，按照下式计算：

W＝M/M₁*100％。

其中，W为藁本内酯标示含量；

M为每次测定的藁本内酯的含量；

M₁为实施例2.3测定的藁本内酯的总含量；

表1本发明实施例1制备的藁本内酯脂肪乳剂稳定性考察结果

由表1可知，本发明提供的藁本内酯脂肪乳剂于低温4℃放置12个月、室温25℃放置12个月、高温40℃放置6个月后，样品的外观、pH值、包封率及藁本内酯含量均无明显变化，由此可见，本发明制备的藁本内酯脂肪乳剂稳定性良好，能够达到国家新药研究技术指导原则中关于制剂稳定性的要求。

实施例3

按照实施例2.1的方法制备藁本内酯脂肪乳剂，其中，将2.5g维生素E替换为2.5g丁基羟基茴香醚(BHA)。

将得到的藁本内酯脂肪乳剂在高温40℃下放置一个月后，观察其外观，测定其pH值、包封率及藁本内酯标示含量，结果见表2，表2为本发明实施例及比较例提供的藁本内酯脂肪乳剂稳定性测试结果。

实施例4

按照实施例2.1的方法制备藁本内酯脂肪乳剂，其中，将2.5g维生素E替换为2.5g二丁基羟基甲苯(BHT)。

将得到的藁本内酯脂肪乳剂在高温40℃下放置一个月后，观察其外观，测定其pH值、包封率及藁本内酯标示含量，结果见表2，表2为本发明实施例及比较例提供的藁本内酯脂肪乳剂稳定性测试结果。

实施例5

按照实施例2.1的方法制备藁本内酯脂肪乳剂，其中，将2.5g维生素E替换为2.5g丁基对苯二酚(TBHQ)。

将得到的藁本内酯脂肪乳剂在高温40℃下放置一个月后，观察其外观，测定其pH值、包封率及藁本内酯标示含量，结果见表2，表2为本发明实施例及比较例提供的藁本内酯脂肪乳剂稳定性测试结果。

实施例6

将市售的15g注射用大豆卵磷脂、3g市售的Pluronic F-68和22g市售的注射用甘油分散于100mL预热至80℃的注射用水中，搅拌均匀后得到水相；

将8g维生素E和100g实施例1制备的藁本内酯溶于150g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌3min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至1000mL，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至8.01，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

对所述藁本内酯脂肪乳剂进行检测，其中藁本内酯含量为9.92％，包封率为97.54％，热原性实验、过敏性实验、溶血性实验、刺激性实验检查均合格。

实施例7

将市售的16g注射用大豆卵磷脂、2g市售的Pluronic F-68和22g市售的注射用甘油分散于100mL预热至80℃的注射用水中，搅拌均匀后得到水相；

将2.5g维生素E和50g实施例1制备的藁本内酯溶于200g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌3min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至1000mL，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至8.02，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

对所述藁本内酯脂肪乳剂进行检测，其中藁本内酯含量为4.96％，包封率为97.64％，热原性实验、过敏性实验、溶血性实验、刺激性实验检查均合格。

实施例8

将市售的18g注射用大豆卵磷脂、1.5g市售的Pluronic F-68和18g市售的注射用甘油分散于100mL预热至80℃的注射用水中，搅拌均匀后得到水相；

将8g维生素E和80g实施例1制备的藁本内酯溶于150g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌3min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至1000mL，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至7.91，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

对所述藁本内酯脂肪乳剂进行检测，其中藁本内酯含量为4.90％，包封率为97.64％，热原性实验、过敏性实验、溶血性实验、刺激性实验检查均合格。

实施例9

将市售的120g注射用大豆卵磷脂、50g市售的Pluronic F-68和220g市售的注射用甘油分散于1000mL预热至80℃的注射用水中，搅拌均匀后得到水相；

将25g维生素E和500g实施例1制备的藁本内酯溶于3000g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌5min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至10L，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至7.92，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

对所述藁本内酯脂肪乳剂进行检测，其中藁本内酯含量为4.96％，包封率为97.64％，热原性实验、过敏性实验、溶血性实验、刺激性实验检查均合格。

实施例10

将市售的200g注射用大豆卵磷脂、30g市售的Pluronic F-68和200g市售的注射用甘油分散于1000mL预热至80℃的注射用水中，搅拌均匀后得到水相；

将30g维生素E和600g实施例1制备的藁本内酯溶于150g预热的注射用油中，完全溶解后得到油相，调节油相温度为80℃；

将油相缓慢加入到水相中，以10000转/min的速度搅拌5min，使油相均匀分散在水相中，得到乳白色初乳；

向初乳中加注射用水至10L，然后在高压乳匀机中反复乳化3次，使初乳中颗粒粒径达0.5μm以下，然后加入NaOH溶液调节pH值至8.04，微孔滤膜过滤后，分装于2mL安瓿中，充氩气，灌装，115℃下灭菌30min，得到静脉注射用藁本内酯脂肪乳剂。

对所述藁本内酯脂肪乳剂进行检测，其中藁本内酯含量为4.85％，包封率为97.54％，热原性实验、过敏性实验、溶血性实验、刺激性实验检查均合格。

对比例1

按照实施例2.1的方法制备藁本内酯脂肪乳剂，其中，不添加任何抗氧剂。

将得到的藁本内酯脂肪乳剂在高温40℃下放置一个月后，观察其外观，测定其pH值、包封率及藁本内酯标示含量，结果见表2，表2为本发明实施例及比较例提供的藁本内酯脂肪乳剂稳定性测试结果。

表2本发明实施例及比较例提供的藁本内酯脂肪乳剂稳定性测试结果

由表2可知，加入抗氧剂的藁本内酯脂肪乳剂比不加抗氧剂的脂肪乳剂包封率更为稳定，其中的藁本内酯也更为稳定；而维生素E作为抗氧剂时，比BHA、BHT和TBHQ作为抗氧剂得到的乳剂更稳定，其中的藁本内酯也更稳定。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.一种藁本内酯脂肪乳剂，其特征在于，每1000mL所述脂肪乳剂中含有：

1g～300g藁本内酯；

5g～50g乳化剂；

20g～500g药学上可接受的油；

5g～50g药学上可接受的稳定剂；

0.5g～20g药学上可接受的抗氧剂；

余量为药学上可接受的水；

其中，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68。

2.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述脂肪乳剂的pH值为7.1～8.4。

3.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述藁本内酯为顺式藁本内酯和反式藁本内酯的混合物或顺式藁本内酯。

4.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述药学上可接受的油为大豆油、蓖麻油、玉米油、橄榄油、花生油、棉籽油、油酸、亚油酸、单硬脂酸甘油酯或单油酸甘油酯。

5.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述药学上可接受的稳定剂为甘油、油酸、木糖醇、山梨醇、甘露醇或聚乙二醇。

6.根据权利要求5所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述药学上可接受的稳定剂为甘油。

7.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，所述药学上可接受的抗氧剂为维生素E。

8.根据权利要求1所述的脂肪乳剂，其特征在于，每1000mL脂肪乳剂中含有50g～200g藁本内酯。

9.一种藁本内酯脂肪乳剂的制备方法，其特征在于，包括：

将藁本内酯和药学上可接受的抗氧剂溶于药学上可接受的油中，得到油相；

将乳化剂和药学上可接受的稳定剂溶于药学上可接受的水中，得到水相，所述乳化剂为豆磷脂和普罗尼克F-68；

将所述油相和水相混合后进行乳化，得到初乳；

向所述初乳中加入药学上可接受的水后进行匀化，得到藁本内酯脂肪乳剂。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，还包括：

向所述藁本内酯脂肪乳剂中加入NaOH溶液，调节pH值至7.1～8.4。

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