CN101766676A - 一种楹树提取物、其制备方法及其组合物与用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从楹树Albizia chinensis(Osbeck)Merr.在制备镇静催眠药物中的应用,以及楹树的提取物及其制备方法,含有这种提取物的药物组合物。本发明通过将楹树的茎皮干燥、粉碎、提取、浓缩和纯化,提取出具有镇静催眠作用的提取物。其有效成分包括儿茶素类类化合物,药理实验表明其有效剂量低,药物起效快,疗效显著,安全可靠的特点。
Description
技术领域
本发明涉及楹树Albizia chinensis(Osbeck)Merr.在制备镇静催眠药物中的应用,及楹树提取物,具体讲,涉及一种通过从楹树树皮中提取的具有镇静催眠作用的提取物,这种提取物的制备方法,含有这种提取物的药物组合物,以及这种提取物和其药物组合物作为药物的用途,尤其是制备镇静催眠药物的应用。
背景技术
失眠是临床上最常见的病症之一,发病率较高,统计资料显示,失眠症患病率约为30~35%,其中程度相当严重者在失眠患者中约占10~15%。失眠严重地影响人们的生活、工作以及身心健康。目前临床上应用较多的镇静催眠药主要为巴比妥酸盐、苯并二氮杂卓类和非苯二氮卓类药物,前两类药物虽然疗效明显,但其存在耐药性、依赖性和成瘾性等副作用,进而产生记忆力减退,工作效率低下,造成恶性循环。因此,人们开始寻找新的非苯二氮卓类药物,包括对天然产物活性成分或组分进行研究。
随着社会的发展,生活节奏加快,生活压力增大,失眠将是一个日益受到关注的问题,中草药经数百年应用,显示其具有安全性高、副作用小的特点,因此,从中草药中发掘具有镇静催眠作用的天然活性物质,具有广阔的应用前景。
楹树Albizia chinensis(Osbeck)Merr.为豆科合欢属(Albizia)植物。本种生长迅速,枝叶茂盛,适为行道树及荫蔽树(中国植物志,中国科学院中国植物志编辑委员会编,第39卷,1988年,PP67)。据记载其药用部位为树皮,树皮含鞣质。有固涩止泻、收敛生肌之功效,主治肠炎、腹泻、痢疾(全国中草药汇编,全国中草药汇编编写组编,第二版,下册,1986年,PP768)。另有记载楹树皮含三萜皂苷(又称合欢催产素),有收缩子宫的作用(中药大辞典,江苏新医学院编,1998年,上册,PP937)。迄今为止尚未见有关楹树皮其它化学成分及生物活性研究方面的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是,提供一类新的镇静催眠药物,即楹树Albiziachinensis(Osbeck)Merr.在制备镇静催眠药物中的应用。
本发明要解决的另一个技术问题是提供制备楹树提取物的方法以及这种方法获得的楹树提取物。
本发明要解决的又一个技术问题是提供一种药物组合物,包括作为活性成分的楹树提取物及制药领域中常用的载体。
本发明要解决的再一个技术问题是提供楹树提取物Albizia chinensis(Osbeck)Merr.在制备镇静催眠药物中的应用。
解决本发明的技术问题,本发明采取如下的技术方案:
本发明涉及一种可用于制备镇静催眠药物楹树提取物,其制备方法为:
(1)称量楹树原药材并用溶剂提取,提取液浓缩得楹树提取物。
优选的楹树原药材是楹树茎皮。楹树原药材经干燥并适当的粉碎,以利增大与溶剂的接触面积提高效率。
原药材的提取溶剂可以使用水或各种有机溶剂;优选的溶剂是醇类或水与醇类的混合物。
优选的醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇等,最优选的是乙醇,
乙醇浓度可以是体积比50-100%;优选的浓度为体积比60~95%,最优选的乙醇浓度为体积比65-75%。
提取时溶剂使用量是溶剂体积和原药重量的体积/重量比(单位:升/公斤)为4~14∶1,优选是6~12∶1,更优选是8~10∶1。
提取可以在静态或动态下进行,优选在动态条件下,例如搅拌。为了提高提取的效率,可以使用超声波等。
提取的温度是从室温(例如20℃)到溶剂回流温度的范围内,优选的温度是溶剂回流的温度下。
提取可连续或间歇进行,间歇提取时可重复1~5次,优选2-4次,最有选为3次;
提取时间是1-5小时,优选为1.5-4小时,最优选为2-3小时;
上步结束后,合并滤液,滤去药渣。滤液在动态状态下,在常压或减压加热浓缩成膏状,优选在减压条件下浓缩。
优选楹树提取物的制备方法如下:称量楹树茎皮,每公斤使用6-10升的65-75%乙醇回流2-4次,每次2-3小时;合并提取液,提取液经减压浓缩得浸膏为楹树提取物。
(2)为了提高药效,便于制剂和病人服用,楹树提取物可以进一步的提纯和精制。包括萃取纯化步骤和/或柱层析步骤。
优选进行萃取纯化,萃取纯化包括如下步骤:
上步提取步骤获得的楹树浸膏,悬浮于的水中,依次使用极性从小到大的有机溶剂萃取,并将各种有机溶剂的萃取液分别浓缩得到各有机溶剂的萃取物
例如极性从小到大的有机溶剂选自石油醚、乙酸乙酯、正丁醇;浓缩得到萃取物分别是石油醚的萃取物、乙酸乙酯的萃取物、正丁醇的萃取物、水的萃取物。
萃取时水的体积和楹树浸膏重量的体积/重量比(单位升/公斤,或毫升/克)为是1-3∶1,优选是1.5-2.5∶1,最优选是2∶1。
萃取时有机溶剂的体积和水的体积比为0.25-3∶1,优选是0.5-1.5∶1,最优选是1∶1。
萃取的次数可是是1-5次,优选是2-4次,最有选是3次。
浓缩可以使用本领域的常规技术,例如在常压或减压条件下加热浓缩,薄膜蒸发,优选在减压条件下浓缩。
优选的纯化方法包括如下步骤:将上步获得的浸膏悬浮于2倍(体积/重量,单位毫升/克)的水中,水的用量和浸膏的体积/重量比是1.5-2.5∶1;以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2-4次;石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的用量和水的体积比是0.5-1.5∶1;减压浓缩蒸干,分别得到石油醚的萃取物、乙酸乙酯的萃取物、正丁醇的萃取物、水的萃取物。
药理研究表明正丁醇的萃取物的药效是最好的。
(3)为提高增加单位剂量的药效,减少病人的使用量,便于产品质量控制;上步制备的提取物还可以进一步的精制纯化。
膏状物的进一步纯化可以通过柱层析,例如各类交换柱或吸附柱层析,得到的有效部位。
优选的吸附柱包括正、反相硅胶、氧化铝、纤维素、聚酰胺、活性碳柱。
优选的交换柱包括大孔树脂柱;优选的凝胶柱是葡聚糖凝胶柱。
其中优选的是大孔树脂柱和聚酰胺柱;
最有选的是聚酰胺柱。
吸附剂的用量为样品重量的10~200倍,优选30~80倍。
洗脱剂可以使用本领域各个常用的洗脱剂,例如水、有机溶剂、及其混合物。例如,水、醇类、水与醇类的混合物;常用有机溶剂包括石油醚、***、正己烷、环己烷、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮。优选的醇类选自甲醇、乙醇、异丙醇和丁醇中的至少一种。
洗脱溶用量和吸附剂的体积重量比(升/公斤)是优选3-20∶1;优选4-10∶1;更优选4-7∶1
提取物可经冷冻干燥或真空干燥成干粉,也可把浓缩液体直接喷雾干燥成干粉。或经膜技术进行精制浓缩后,再成浸膏或干粉。
优选的纯化步骤是将正丁醇的萃取物上聚酰胺柱分离。具体包括如下步骤:将正丁醇的萃取物溶于水,过滤后加到10~15倍重量的30~60目的聚酰胺柱上,依次用水、25~35%的乙醇、55~65%的乙醇进行梯度洗脱,水、25~35%的乙醇、55~65%的乙醇的用量和聚酰胺的体积重量比(升/公斤)是4~7∶1;优选是4.8~5.6∶1;各部分浓缩至干,分别得水提物、25~35%的醇提物、55~65%醇提物。药理研究表明55~65%醇提物的药效是最好的。
当然,提取液可以不经过萃取步骤,直接进行柱纯化,但是优选是先经过萃取步骤。
本发明涉及的楹树提取物包括上述方法获得的任意楹树提取物。本发明的楹树提取物有效成分包括儿茶素类化合物。提取物可经冷冻干燥或真空干燥成干粉,也可把浓缩液体直接喷雾干燥成干粉进行各种制剂成型。
本发明涉及了一种药物组合物,包括以本发明所述的方法提取的楹树提取物及药学上可接受的载体。
本发明还涉及含有作为活性成份的本发明提取物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1~95%重量的本发明提取物。
本发明还提供一种药物组合物,它包括药物有效剂量的,作为活性成分的如本发明方法提取的楹树提取物和/或楹树及药学上可接受的载体。
本发明提取物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时,如果需要,可将本发明提取物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合,制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
本发明提取物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药,给药途径可为肠道或非肠道,如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、***、直肠等,优选口服给药。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等。固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等;半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
本发明提取物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药***。
为了将单位给药剂型制成片剂,可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂,包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等;湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等;粘合剂可以是,淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、***胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯毗咯烷酮、聚乙二丙醇等;崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯毗咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与构椽酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠;润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片,例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片,或双层片和多层片。
为了将给药单元制成丸剂,可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是,例如稀释剂与吸收剂,如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、月桂酸聚乙二醇甘油酯、高岭土、滑石粉等;粘合剂,如***胶、黄菩胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等;崩解剂,如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
为了将给药单元制成栓剂,可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是,例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。
为了将给药单元制成胶囊,将有效成分本发明提取物与上述的各种载体混合,并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明提取物制成微囊剂,混悬于水性介质中形成混悬剂,亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
例如,将本发明提取物制成注射用制剂,如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂,这种制剂可以是含水或非水的,可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外,为了制备等渗注射液,可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油,此外,还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的。
此外,如需要,也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
为达到用药目的,增强治疗效果,本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明提取物药物组合物的给药剂量取决于许多因素,例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度,患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应,给药途径、给药次数、治疗目的,因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲,本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明提取物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量,加以适当的调整,以达到其治疗有效量的要求,完成本发明的预防或治疗目的。本发明提取物的每天的合适剂量范围本发明的提取物的用量为0.001~150mg/Kg体重,优选为0.1~100mg/Kg体重,更优选为1~60mg/Kg体重,最优选为2~50mg/Kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个,例如二、三或四个剂量形式给药这受限于给药医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。每一种治疗所需总剂量可分成多次或按一次剂量给药。本发明的提取物或组合物可单独服用,或与其他治疗药物或对症药物合并使用并调整剂量。
本发明具有的技术优势为:
1.为纯天然成份,无依赖性和成瘾性等副作用。
2.有效剂量低,药物起效快。
3.疗效显著,安全可靠。
4.药材易得,提取工艺简单,适合大规模工业化生产。
附图说明
图1、楹树提取物的制备实施例1的流程图。
具体实施方式
下面的实施例及药物活性实验用来进一步说明本发明,但这并不意味着对本发明的任何限制。
实施例1楹树提取物的制备方法
称量楹树茎皮2.5Kg,用8倍体积的70%乙醇回流三次,每次2.5小时;提取液经减压浓缩得浸膏475g(记做SJ1),悬浮于2倍的水中,以等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取三次,减压浓缩蒸干,分别得到石油醚的萃取物2.7g、乙酸乙酯的萃取物26.5g、正丁醇的萃取物104.5g(记做SJ2)、水的萃取物250g。将正丁醇的萃取物上聚酰胺柱分离;将正丁醇的萃取物溶于水,过滤后(约95.0g)加到1250g 30~60目的聚酰胺柱上,依次用6L的水、6L30%的乙醇、7L 60%的乙醇进行梯度洗脱,各部分浓缩至干,得水提物18.1g、30%的醇提物8.7g、60%的醇提物5.8g(记做SJ3)。提取纯化的流程图见附图1。
药理试验
试验例1:楹树皮提取物对阈下剂量的戊巴比妥钠诱导小鼠入睡的影响
实验动物:雄性昆明种小鼠,18~20g,
实验过程:将小鼠随机分为4组(10只/组),通过灌胃给药:对照组给生理盐水0.1mg/kg,其余3组给实施例1制备的SJ1、SJ2和SJ3;给药后30min,各组腹腔注射戊巴比妥钠睡眠最大阈下剂量23mg/kg,观察并记录15min内各组小鼠入睡只数。实验结果见表1。
表1 楹树皮提取物对阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠入睡的影响
与对照组比较,*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
结果显示,楹树皮提取物SJ1、SJ2、SJ3能明显增加小鼠入睡率,与对照组比较有显著性差异。
试验例2:楹树茎皮提取物对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响
实验动物:雄性昆明种小鼠,18~20g。
实验过程:将小鼠随机分为4组(10只/组),通过灌胃给药:对照组给生理盐水0.1mg/kg,其余3组给实施例1提纯出的SJ1、SJ2和SJ3;对照组灌胃给生理盐水0.1mg/kg,其余各组灌胃给受试物;给药后30min,各组腹腔注射戊巴比妥钠阈上睡眠剂量39mg/kg,观察并记录各组小鼠入睡潜伏期和睡眠持续时间。
实验结果:见表2。
表2楹树皮提取物对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响
结果显示,楹树茎皮提取物SJ1、SJ2、SJ3能显著缩短戊巴比妥钠诱导的入睡潜伏期,并延长睡眠持续时间。
试验例3:楹树皮提取物对小鼠再入睡的影响
实验动物:昆明种小鼠,雄性,18~20g,
实验过程:将小鼠随机分为4组(9只/组),通过灌胃给药:对照组给生理盐水0.1mg/kg,其余3组给实施例1提纯出的SJ1、SJ2和SJ3;各组腹腔注射戊巴比妥钠诱导睡眠的最小阈上剂量39mg/kg,小鼠醒后对照组立即腹腔注射0.3%丙二醇或生理盐水0.1mg/kg,其余各组立即按不同剂量腹腔注射给药。观察并记录15min内各组小鼠再入睡只数。
实验结果:见表3。
表3楹树皮提取物对小鼠再入睡的影响
结果显示,楹树皮提取物SJ1、SJ2、SJ3明显增加小鼠再入睡率,与对照组比较有显著性差异。
Claims (14)
1.一种楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:称量楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)原药材并用溶剂提取,提取液浓缩得楹树提取物。
2.根据权利要求1的制备方法,其特征在于,所述的溶剂选自醇类或水与醇类的混合物。
3.根据权利要求2的制备方法,其特征在于,所述的方法包括如下步骤:称量楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)茎皮,每公斤使用6-10升的65-75%乙醇回流2-4次,每次2-3小时;合并提取液,提取液经减压浓缩得浸膏为楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物。
4.根据权利要求1-3中任一制备方法,其特征在于,所述的方法还包括萃取纯化步骤和/或柱层析步骤。
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,所述的萃取纯化包括如下步骤:将权利要求1-3中任一获得的楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)浸膏,悬浮于的水中,依次使用极性从小到大的有机溶剂萃取,并将各种有机溶剂的萃取液浓缩分别得到各有机溶剂的萃取物。
6.根据权利要求5的制备方法,其特征在于,所述的极性从小到大的有机溶剂选自石油醚、乙酸乙酯、正丁醇;浓缩得到萃取物分别是石油醚的萃取物、乙酸乙酯的萃取物、正丁醇的萃取物、水的萃取物。
7.根据权利要求6的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:将权利要求1-3中任一获得的浸膏悬浮于水中,水的用量和浸膏的体积/重量比是1.5-2.5∶1;以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2-4次;石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的用量和水的体积比是0.5-1.5∶1;减压浓缩蒸干,分别得到石油醚的萃取物、乙酸乙酯的萃取物、正丁醇的萃取物、水的萃取物。
8.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,所述的柱层析选自正相硅胶住、反相硅胶柱、氧化铝柱、纤维素柱、活性碳柱、大孔树脂柱、聚酰胺柱、葡聚糖凝胶柱;洗脱剂选自水、醇类、石油醚、***、正己烷、环己烷、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮中至少一种。
9.根据权利要求8的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:将权利要求6或7中任一获得的正丁醇的萃取物溶于水,过滤后加到10-15倍重量的30~60目的聚酰胺柱上,依次用水、25-35%的乙醇、55-65%的乙醇进行梯度洗脱,水、25-35%的乙醇、55-65%的乙醇的用量和聚酰胺的体积重量比(升/公斤)是4-7∶1各部分浓缩至干,分别得水提物、25-35%的醇提物、55-65%醇提物。
10.权利要求1-9中任一制备的楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物。
11.根据权利要求10的楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物,其特征在于,所述的楹树的有效成分包括儿茶素类化合物。
12.一种药物组合物,其特征在于,含有作为有效成分的权利要求10或11中任一的楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物,及药学上可接受的载体。
13.楹树Albizia chinensis(Osbeck)Merr.在制备镇静催眠药物中的应用。
14.权利要求10或11中任一楹树(Albizia chinensis(Osbeck)Merr)提取物在制备镇静催眠药物中的应用。
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