CN101547698B - ***内***密封剂和使用该制剂降低或消除成熟干酪中视觉缺陷的方法 - Google Patents

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Abstract

描述了一种***内***密封剂和为了在动物干乳期间预防性治疗***疾病在非人动物的***管内形成物理屏障的相应方法。该方法包括向动物***管注入无铋的***密封制剂的步骤。该方法也防止由所治疗动物乳汁制成的乳制品中尤其是切达干酪中黑点缺陷的形成。

Description

***内***密封剂和使用该制剂降低或消除成熟干酪中视觉缺陷的方法
Scott A.Rankin，Ph.D.
联邦基金声明
本发明在如下机构给予的美国政府资助下完成：USDA/CSREES2005-35503-16328。美国具有本发明的某些权益。
相关申请的交叉参考
本发明要求2006年10月10日提交的临时申请序号60/850,572的优先权，该申请通过引用结合到本文中。
发明领域
本发明涉及无铋、含金属的***内***密封剂，用于防止干乳期奶牛的乳腺炎。***内***密封剂不会引起由被治疗动物乳汁制成的乳制品(尤其是干酪)中的视觉缺陷。本发明还涉及防止干酪中“黑点缺陷”(BSD)的方法。
发明背景
乳畜群中的乳腺炎是乳品生产商遇到的费用最大且最困难的疾病之一。旨在治愈临床乳腺炎的传统治疗包括***内抗微生物治疗。尽管商业上可购买很多***内抗微生物产品，但是临床乳腺炎的治愈率却令人费解地低：对于乳酸链球菌(Streptococcus spp.)乳腺炎为46％，对于葡萄球菌属(Staphylococcus spp.)乳腺炎为21％，对于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)乳腺炎仅为9％。见Wilson等(1996)National Mastitis Council Proceedings 164-165，和Crandall等(2005)NMC Annual Meeting Proceedings 215-216。因此，乳品生产商经常通过从他们的畜群剔出有乳腺炎倾向的动物而简单地处理该疾病。
由于在治疗乳腺炎中有困难，故预防新的***内感染是乳业中的主要焦点。与泌乳期间的新感染相比，干乳期间的新感染发生率非常高。(例如，一项研究显示所有新的革兰氏阴性菌***内感染中的61％发生在干乳期间。见Todhunter等，(1995)J.Dairy Sci.78：2366.)。紧随干乳后的三周和产犊前的两周为尤其容易发生新感染的时期。因此，在近年来乳品生产商已相当多的努力关注干乳期间奶牛的“预防护理”。
2003年4月，在美国市场引入了一种用于干乳期奶牛的内部(或“***内”)***密封剂(ITS)。该产品以“ORBESEAL”商标(美国商标登记号2,772,198和3,120,693)在美国销售，已在新泽西开发。被引入美国市场的”ORBESEAL”牌ITS包含分散于粘稠糊剂中的65％w/w碱式硝酸铋。ITS产品不包含任何抗生素，该产品也不包含任何活性抗微生物剂。使用管式给药注射器将ITS注射至***末端，其方式与应用干乳期奶牛抗生素的方式一致。ITS产品填充***管的裂沟和褶，因此对病原体形成物理屏障。见2001年7月3日颁布的美国专利第6,254,881号，其内容通过引用结合到本文中。
在新泽西的初期研究推断，在预防产犊期间新的***内感染中和预防泌乳的第一个五(5)个月期间乳腺炎的临床表现中，“ORBESEAL”牌产品产生与广谱长效***内抗生素一样的作用。见Woolford等(1998)New Zealand Veterinary Journal 46：1。美国的最近研究也推断该ITS产品改善已用苄星氯唑西林注射的奶牛的***健康。见Godden等(2003)J.Dairy Sci.86：3899-3911。因此，“ORBESEAL”牌ITS被证实在减少干乳期间乳牛乳腺炎新病例的数目方面是有效工具。尽管其引入美国市场相对时间短，但“ORBESEAL”牌产品已被市场广泛接受并且在美国乳畜群中广泛使用。简而言之，“ORBESEAL”牌产品对于预防乳腺炎的特定目的是非常有效的。
“ORBESEAL”牌ITS产品引入美国之后，在成熟的乳制品中开始出现视觉缺陷，最显著的是成熟的切达干酪。视觉缺陷为整个成熟干酪中出现小黑点(直径约0.5-5mm)的形式。斑点是纯粹的美学、视觉缺陷，降低受该问题影响的干酪的质量等级(以及因此导致的市场价值)。干酪中斑点并不伴随有任何感官缺陷。受黑点影响的干酪是适合销售的，尽管等级低于未受影响的干酪。该缺陷称为“黑点缺陷”(BSD)。
发明概述
本发明的第一种形式涉及为了在动物干乳期间预防性治疗***疾病在非人动物的***管内形成物理屏障，同时在由该动物乳汁制成的乳制品中防止BSD的方法。该方法包括向动物的***管内注入***密封制剂，其中***密封制剂是无铋的。该制剂以一定量给予，该量足以形成物理屏障以阻止微生物进入***，但不会在用该动物乳汁制成的乳制品中引起黑点缺陷。该方法的优选实施方案包含注入在凝胶基质中含有无铋、非毒性重金属盐的***密封制剂。优选，该***密封剂缺少抗感染剂(即该***密封剂优选不含抗生素或其它抗感染活性剂)。优选该方法包括注入***密封制剂，该制剂包含至少约30％重量的无铋、非毒性重金属盐，更优选包含约50％至约75％重量的无铋、非毒性重金属盐，还更优选包含约65％重量的无铋、非毒性重金属盐。该盐的目的主要是赋予组合物足够的密度，以便使ITS“停留”在***管内。在所述方法的一种形式中，非毒性重金属盐选自二氧化钛、氧化锌、硫酸钡和这些盐的组合。
凝胶基质可为任何合适的凝胶制剂，为制药领域中熟知的制剂基质。优选的凝胶基质包括硬脂酸铝和液态石蜡(如矿物油、白凡士林、黄凡士林等)。典型的凝胶基质包括蜡或某些类型的油以及盐如硬脂酸铝或硬脂酸镁。
本发明的另一种形式涉及***内***密封剂，该密封剂包含组合应用的凝胶基质和分散在凝胶基质中的非毒性重金属盐，其中重金属盐无铋。如早先说明的，***密封剂优选包含至少约30％重量，更优选约50％至约75％重量，还更优选约65％重量的重金属盐。重金属盐优选为二氧化钛、氧化锌、硫酸钡或其组合。凝胶基质优选包含硬脂酸铝和液态石蜡。
本发明的再一种形式为***内***密封剂的改进。尤其是，为了在动物干乳期间预防性治疗***疾病在非人动物的***管内形成物理屏障的方法中，其中该方法包括向动物***管中注入无抗感染药物的密封制剂的步骤，本发明的改进包括注入在凝胶基质中含无铋、非毒性重金属盐的***密封制剂。该改进防止在由所治疗动物乳汁制成的乳制品中形成黑点缺陷。
附图简述
图1A和1B为18kg成熟的白切达干酪团块中典型黑点缺陷的照片。图1A显示团块的表面，黑点缺陷可容易的见到。图1B为显示缺陷尺寸的放大图(有叠加的标尺)。此类点相等的分布在整个干酪中。
图2为黑点缺陷的电子显微照片，显示硫化铋(III)纳米棒的特征性发状或棒状结构。任何非BSD干酪或非BSD干酪测试区域中未出现这种结构。图2中显示的棒具有37.09nm至129.33nm的直径。
图3为黑点缺陷区域的单一棒状结构的电子显微照片。该棒显示直径为130.88nm，并显示平分棒长度的线。
图4A和4B为实验室诱导的黑点缺陷的图像。在图4A中，“ORBESEAL”牌***内***密封剂(ITS)的各种组分与干酪掺混，各黑点立即照相。图4B显示暴露于成熟切达干酪的挥发物或硫化氢气体之后照相的相同斑点。位点4和5分别含有碱式硝酸铋和完整的“ORBESEAL”牌ITS制剂。
发明详述
开始于2003年晚期，干酪制造者向威斯康星大学麦迪逊分校食品科学部门乳品研究中心(CDR)发出许多咨询，寻求关于成熟干酪尤其是成熟切达干酪中出现新“黑点缺陷”的信息。历史上，干酪中灰色至黑色污点是一些不同且相异的原因导致的，包括特定微生物(如某些环境丙酸菌属或霉菌)的生长或干酪被食品级润滑剂碎屑污染。然而，干酪制造者注意到的特定BSD并不适合细菌污染物或其他腐败菌的特性，似乎也不是已被发现其进入乳流方式的润滑剂碎屑或干酪制作过程期间引入的其他碎屑。
因此，第一步是确定黑点缺陷的化学结构。已开始大量工作去萃取BSD干酪的受影响区域。使用各种极性、疏水性等的广谱有机溶剂进行萃取，作为从干酪基质分离任何类型有机颜料物质的方法，萃取工作显示没有结果。尽管用有机溶剂萃取BSD未成功，但萃取工作确实给出有用数据。尤其是，由于颜料不溶于或分散于这些溶剂中，可推断(可能性很高)黑点颜料同样不溶于或分散于干酪基质本身中。
目测检查越来越多显示缺陷的干酪样品(从商业干酪制造商积蓄的样品)证实这个结论——黑点颜料充分地包含在干酪基质中，但显然没有扩散在其中。见图1A和1B，为18kg典型受BSD影响的成熟白切达干酪块的照片。图1A为干酪块外表面的照片。图1B为单一块斑点的放大图，带有叠加在图像上的标尺以显示斑点的尺寸。如图1A和1B所示的斑点一般均匀分布在整个干酪块，直径大小为＜1mm至约5mm。任何给定的18kg干酪块中出现斑点的频率宽范围的变化，从＜10个/块至大大超过100。
一些从干酪制造者那里得到的传闻报告中说，特定老化和贮藏策略可帮助溶解或分散斑点成小点，使它们不再明显可见。(因为该缺陷不伴随任何感官不足，“消褪”这些斑点会改善情况。)然而，这一结果极不可能给予在萃取工作中所使用有机溶剂的颜料稳定性。简而言之，由本发明发明人进行的萃取试验使用具有类似于乳酯疏水性的溶剂。如果黑点颜料溶解或分散至干酪基质本身(经老化或贮藏方案)，同样颜料应该迅速溶解或分散至具有类似于乳酯的物理特性的有机溶剂内。那样的结果不会在实验室中出现。而且，给定干酪内一般的pH/酸性环境，以及与大多数成熟切达型干酪相关的一般老化/货架期(0.5-2年)，传闻证明经老化或贮藏方案改善缺陷是没有价值的。
然而，一个实验显示了最大启发：黑点颜料快速溶解在硝酸中。这强烈提示颜料为无机盐。结合缺陷第一次出现的时间，制定了工作假设，即ITS为BSD的病原体之一(或至少与之相关)。黑点颜料容易地溶解在酸中的发现支持进一步的假设，颜料可能包含硫化铋III。因此，推断在美国含65％重量的含铋盐的“ORBESEAL”牌产品有可能被无意引入至乳流中。如上所述，“ORBESEAL”牌产品在商业上取得成功，因为它形成密封的物理屏障以阻止病原体进入***管中。然而，从所治疗动物中除去该产品需要剥离动物的***。在剥离之后似乎一些ITS保留在***中，并发现其进入干酪乳的方式。
依据硫化铋III实际为BSD的病原体的假设继续下一阶段的研究。碱式硝酸铋本身为白色，相对化学惰性。因此，在液体乳、莫泽雷勒干酪和酸乳酪中其痕量存在显然不会明显可见。然而，在高香味强度的成熟干酪中，黑点缺陷显著出现。因此，假定硫化铋III(黑色，相对不溶性盐)为碱式硝酸铋(来自ITS)与硫化氢之间的反应产物，硫化氢在成熟干酪中通过熟成微生物菌丛、酶和作用于干酪的蛋白质/氨基酸组分的某些辅因子的作用产生。
简而言之，假定由于在挤奶之前ITS没有完全被去除，碱式硝酸铋进入乳流。然后按照方程1，碱式硝酸铋与硫化氢反应，得到硫化铋III
4BiNO3(OH)2BiO(OH)+H2S→Bi2S3(不溶，黑色)(方程1)
产物硫化铋III(或简单硫化铋)为相对不溶性黑色盐。
除具有特定元素目标铋之外，假定在干酪基质中存在的条件或化学环境下，Bi2S3分子会形成结晶结构，文献中称为纳米棒或纳米针状单晶。见W.Zhang等(2001)Sol.State Comm.119：143-146和B.Zhang等(2006)J.Phys，Chem.110：8978-8985。因此，这些含铋的纳米棒将组成光衍射粒子，该粒子能够将灰色赋予在黑点缺陷中可见的黑色色调。
然后，努力集中于证实：1)黑点缺陷中铋元素的存在；和2)证实黑点缺陷中硫化铋III纳米棒结构的物理存在。
使用电感偶合等离子体质谱(ICPMS)，研究证实黑点中铋的存在。使用AOAC国际(分析化学师协会)方法993.14。为了确定可能有助于BSD的一些元素的存在，第一步工作筛选许多黑点。初步实验集中在在乳汁和干酪处理/运输设备中发现的那些典型金属盐/氧化物，和食品级加工中存在的其他残留金属衍生物。作为控制措施，进行干酪的组分分析。尤其是，分别使用AOAC第17版(版权2000，ISBN：0935584-67-6)的官方分析方法的方法2001.14、935.42和926.08，测定蛋白质、灰分和水分。依照AOAC第17版官方分析方法中所描述的方法测定脂肪。
按照以下方法进行透射电子显微镜(TEM)研究：向样品中加入约100μl双蒸馏水，并用玻璃棒将混合物研磨成悬浮液。使悬浮样品的约5μl等分试样沉积在聚乙烯醇-甲醛缩醛-涂布的300目铜TEM栅格(Ted Pella，Inc.，Redding，CA)。过量的样品用小部分滤纸吸去，室温下将剩余样品干燥至栅格表面。在一些情况下，在干燥样品上施加NANO-W-牌TEM阴性着色剂(Nanoprobes，Incorporated，Yaphank，NY)，以增强对比度和可见度。用Philips CM 120电子显微镜观察试样，并用MegaView 3数字照相机(来自SIS，Ringoes，NJ)收集图像。用已知长度的参照样品校准的SIS-***软件(Ringoes，NJ)进行测量。
ICPMS结果证明BSD区域中元素铬、铜、铁、镍和铋的存在。尽管已发现元素铬、铜、铁和镍的逐渐增加，但是BSD区域的铋浓度通常比非BSD区域测定的相同干酪的大三个数量级。这些结果显示铋是足够数量存在以参与产生颜料的反应的唯一元素。
干酪样品BSD区域的几百张TEM图像得出一个一致结论。上述引用文献中报道的那些典型纳米棒独特地存在于BSD干酪区域中。这一图像的实例见图2所示。图2中显示的纳米棒结构太细小，以致于不易用光学显微镜检测。图2中显示的纳米棒直径为约69nm至约130nm。纳米棒对TEM的可能破坏条件非常稳定。棒看上去具有些微斑驳的表面，它们具有沿纳米棒长度连续的特征线。见图3，为单一纳米棒增大的放大图。这种结构的存在与干酪基质中存在的条件下形成的硫化铋纳米棒的存在一致。
为了证实碱式硝酸铋作为形成硫化铋III纳米棒中反应物的反应性，进行另外的试验以查看BSD是否可能在实验室有目的地再现。简而言之，用已知量的ITS组分制备干酪，并经历老化干酪产生的真实挥发性气体或直接暴露于假定的碱式硝酸铋共反应物——硫化氢气体。在这两种情形下，反应是始终相同的：当含有碱式硝酸铋的干酪样品或完整的ITS制剂暴露于真实的干酪挥发物或“化学标准”级H2S气体时，各自形成伴有纳米棒结构存在的相同黑色颜料淀积，进一步证实碱式硝酸铋是BSD中的原因。结果见图4中所示。当如此暴露时无其他ITS组分形成黑点。此外，当暴露于真实干酪的挥发物或硫化氢气体时，易受影响的位点形成同样的黑色颜料淀积，因此确定硫化氢气体是可疑的共反应物。
从干酪制作和老化或熟成观点来看，认为将作为控制BSD的方法消除硫化氢气体的产生作为目标是不合理的。硫化氢是非常芳香的活性化合物，是抵抗含硫氨基酸如半胱氨酸的微生物、酶和辅因子活性产物。见Arfi等，(2002)Appl.Microbiol.Biotechnol.58：503-510。有大量研究支持硫化氢气体是一般成熟切达干酪香味的必要和/或重要组分的主张。见Burbank & Qian(2005)J.Chrom.1066：149-157。即使设计方案以(通过阻断许多复杂的代谢途径)避免硫化氢的产生，所得最终产物有香味特征不为干酪分级师和消费者接受的风险。
因此，在本发明中，改变ITS的制剂以排除含铋的盐。如上述实验中所示，正是商业上购买的ITS中的碱式硝酸铋引起BSD。因此，使用ITS消除BSD，该ITS不含铋，也不含与硫化氢反应产生黑色不溶性颜料的任何其他重金属盐。
实施例
仅为了对本文中公开和要求保护的本发明提供更完全的描述而包括以下实施例。这些实施例不以任何方式限制本发明。
实施例1：
配制依照本发明的试验ITS。试验ITS与“ORBESEAL”牌制剂相同，不同之处在于它不含任何铋或含铋的盐。试验ITS含有氧化锌、二氧化钛、矿物油(30-40％)和硬脂酸铝。
为了制备一批ITS，将液态石蜡(例如矿物油)释放至配备有搅拌器的合适容器中。加入硬脂酸铝，搅拌该混合物，加热至约160℃直至均匀(约2小时)。然后搅拌下向该混合物中分批加入非毒性、不含铋的盐，直至已加入所需量的金属盐。然后搅拌该混合物，直至均匀。然后，将该产物转移至用于***内给药的传统注射器管中。
实施例2：
该实施例的目的是与“ORBESEAL”牌产品相比，比较本发明ITS在非泌乳期奶牛***中的保留。
该研究在德州威斯康星的威斯康星大学麦迪逊分校(UW)的Blaine牛奶场进行。在停奶的当天登记16只奶牛(n＝64个***)。要求所有登记的奶牛具有四个功能区，没有可见的乳腺炎迹象。所有奶牛停奶，依据标准UW乳畜群方案接受***内抗生素干乳期奶牛治疗(DCT)。记录各奶牛的经产状况和(干乳期)产乳量。开始登记后，根据***和过度角化的形状、长度、直径和程度对***进行记分。各奶牛中，分配两只***接受“ORBESEAL”牌ITS，分配两只***接受试验ITS。设计给药方案以确保在***位置中均匀给予各产品，八只***各自在每一位置(右后方、右前方、左后方、左前方)给予产品。在给药之前和之后称量密封管以确定给药的净体积。在接受DCT和内部***密封剂之前，使用单一70％异丙醇的醇擦拭物将***末端清洁，使用部分***技术减少引入***皮肤病原体的可能性。在给予内部密封剂之后，***用外部***消毒剂浸渍。
在第1、2、3、4、5、6、7、14、28、42天和产犊时观察***，以检测是否发红、肿胀和/或密封剂漏出。在第14、28、42天和产犊时，通过手工剥离从各奶牛的一只***除去密封剂(每天除去八只***的各密封剂)。收集除去的密封剂，初乳装入有刻度的50ml塑料小瓶中。将这些小瓶离心(3000rpm×5-7分钟)，冲洗上清液，称重回收的密封剂。比较在各时间试验ITS治疗的***和“ORBESEAL”牌ITS治疗的***之间回收的密封剂量。随后，使用同样的方法在产犊之后的第1天收集样品。在所有取样时期，除去密封剂之后用外部***消毒剂浸渍***。产犊之后，从所有区域无菌收集四份乳样品，并培养以鉴别***内感染。
组特征——***长度和体积：
研究中登记了共16头奶牛，总数共64只***；32只***接受试验ITS，32只***接受“ORBESEAL”牌ITS。试验群体***的长度和体积如表1中所示：
表1.由化合物导致的***长度和体积的均值、标准偏差和标准误差
Figure G2007800445499D00101
对于组A或组B中的***，***的长度或体积没有显著性差异(p＞0.36)。全部***长度为5.11cm，范围为3.3cm至7.3cm。组A中平均***长度为5.12cm，组B的为5.11cm；组A的范围为3.3cm至7.3cm，组B的为3.5cm至7.10cm。进行两个样品的配对t检验以检验两个治疗组中平均***长度没有差异的虚假设。在随机接受任一产品的***之间***长度没有显著性差异(p＝0.95)。
全部的***体积为24.66cm3，范围为12.47cm3至54.34cm3(标准偏差9.17cm3)。组A中平均***体积为23.6cm3，范围为12.54cm3至54.34cm3(标准偏差8.60cm3)。组B中平均***体积为25.71cm3，范围为12.47cm3至48.25cm3(标准偏差9.73cm3)。使用两个样品的配对t检验以检验两组中***的体积没有差异的虚假设。在随机接受任一产品的***之间***体积没有显著性差异(p＝0.95和p＝0.35；对数转换分析)。
过度角化：使用以下等级用过度角化对***末端的健康记分：无环(N)、平滑环(S)、粗糙(R)、非常粗糙(VR)。***记分分布为：N(n＝21；32.8％)、S(n＝31；48.4％)、R(n＝11；17.2％)和VR(n＝1；2％)。X2检验证实过度角化记分的分布与治疗组不相关(p＝0.13)。
表2.对过度角化的描述统计
Figure G2007800445499D00111
密封剂的给药量、回收量和损失量：使用配对t-检验进行统计分析以确定基于治疗组密封剂的给药量、回收量或损失量(未回收的)是否没有差异。
表3.用于给予、回收和损失的产品密封剂均值的两个样品配对t-检验
Figure G2007800445499D00121
其中每管4g中，密封剂给予的全部量为3.62g。在“ORBESEAL”牌ITS(3.46g)或试验ITS(3.62)的给药量中没有显著性差异(P＝0.12)。
总之，密封剂的回收量为0.82g，基于治疗上没有显著性差异(P＝0.89)。密封剂的损失总量为2.88g，与治疗组没有差异(P＝0.40)。密封剂的回收量倾向于与回收日期有关(P＝0.08)，与其他回收期比较第14天有更多的密封剂被回收(第14天，回收量＝1.6g；第28天回收量＝0.68g；第42天回收量＝0.65g；产犊期回收量＝0.33g)。
使用简单线性回归以确定给予的密封剂量与***体积之间没有显著性关系(p＝0.59，p＝0.53)。
对于回收的密封剂，进行简单线性回归检验以检验回收的密封剂量与***体积之间没有显著的线性关系的虚假设。***体积说明仅6％的回收密封剂(P＝0.05)。
给予的密封剂比例与***体积不显著性相关，而回收的密封剂与***体积显著性相关，但只是很小的比例(6％)。
使用单向ANOVA以确定给药量与回收密封剂以及***位置、产品、奶牛之间的单变量关系。
表4.给予与回收体积的单变量相关性表(P值)
                        给予体积        回收体积
                        (p)             (p)
***体积                0.53            0.13
***位置                0.56            0.52
产品                    0.19            0.88
天                      -               0.07
奶牛                    0.05            0.17

Claims (18)

1.***密封制剂在制备用于为了在非人动物干乳期间预防性治疗***疾病，通过向非人动物的***管内注入一定量的***密封制剂而在非人动物的***管内形成物理屏障的制剂中的用途，其中，所述的物理屏障在由该动物乳汁制成的乳制品中不引起黑点缺陷，其中所述***密封制剂包含无铋、非毒性的钛、锌、钡的金属盐、氧化物，或其组合，且其中所述量足以形成微生物进入***管的物理屏障，其中所述***密封制剂不会在由该动物乳汁制成的乳制品中引起黑点缺陷，
其中所述非毒性金属盐或氧化物选自二氧化钛、氧化锌、硫酸钡及其组合，并且
其中所述的***密封制剂包含凝胶基质。
2.权利要求1的用途，其中，所述的***密封制剂不含抗感染药物。
3.权利要求1的用途，其中，所述的***密封制剂含有至少30％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
4.权利要求1的用途，所述的***密封制剂含有50％至75％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
5.权利要求1的用途，所述的***密封制剂含有65％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
6.权利要求1的用途，其中所述凝胶基质包含硬脂酸铝。
7.权利要求1的用途，其中所述凝胶基质包含液态石蜡。
8.一种***内***密封剂，所述***密封剂包含组合应用的：
凝胶基质；和
分散在该凝胶基质中的非毒性金属盐或氧化物，其中所述金属盐或氧化物无铋且选自二氧化钛、氧化锌、硫酸钡及其组合，
其中所述***内***密封剂在非人动物的***管内形成物理屏障。
9.权利要求8的***内***密封剂，所述密封剂不含抗感染药物。
10.权利要求8的***内***密封剂，所述密封剂含有至少30％重量的金属盐或氧化物。
11.权利要求8的***内***密封剂，所述密封剂含有50％至75％重量的金属盐或氧化物。
12.权利要求8的***内***密封剂，所述密封剂含有65％重量的金属盐或氧化物。
13.权利要求8的***内***密封剂，其中所述凝胶基质含有硬脂酸铝。
14.权利要求8的***内***密封剂，其中所述凝胶基质含有液态石蜡。
15.密封制剂在制备用于为了在非人动物干乳期间预防性治疗***疾病，通过向非人动物的***管内注入一定量的***密封制剂而在非人动物的***管内形成物理屏障的制剂中的用途，其中，所述的密封制剂包含在凝胶基质中含有无铋、非毒性金属盐或氧化物的***密封制剂，其中所述非毒性金属盐或氧化物选自二氧化钛、氧化锌、硫酸钡及其组合。
16.权利要求15的用途，其中，所述的***密封制剂含有至少30％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
17.权利要求15的用途，其中，所述的***密封制剂含有50％至75％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
18.权利要求15的用途，其中，所述的***密封制剂含有65％重量无铋、非毒性金属盐或氧化物。
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0719273A2 (pt) 2006-10-10 2014-03-11 Wisconsin Alumni Res Found Formulação selante intramamária para tetas e método de usar tal formulação a fim de reduzir ou eliminar defeitos visuais em queijos envelhecidos
NZ571347A (en) * 2008-09-17 2010-04-30 Mastitis Res Ct Ltd Anti-infective formulation and methods of use
BRPI0921835A8 (pt) 2008-11-28 2017-12-12 Mastitis Res Centre Limited Formulação única para administrar ao canal de teta da glândula mamária de um animal e uso da formulação na manufatura de um medicamento.
JP2012511010A (ja) 2008-12-04 2012-05-17 メリアル リミテッド ***内乳首シーラント
CN102802642A (zh) * 2009-04-08 2012-11-28 威斯康星旧生研究基金会 ***内***封闭剂制剂和用其减少或消除陈化奶酪中的视觉缺陷的方法
FR2986969B1 (fr) * 2012-02-22 2014-06-27 Solutio Lab Kit pour le traitement post-traite du trayon d’un mammifere lactifere
ES2830199T3 (es) 2015-10-29 2021-06-03 Zoetis Broomhill Ip Ltd Una formulación de sellado de pezones
ES2907686T3 (es) 2015-11-03 2022-04-26 Zoetis Services Llc Compuestos poliméricos sol-gel y sus usos
CN110536679B (zh) 2017-04-20 2023-03-31 硕腾服务有限责任公司 用于治疗乳腺炎的兽医用组合物和相关方法
CA3066243A1 (en) * 2017-06-09 2018-12-13 Zoetis Broomhill Ip Limited Intramammary veterinary composition
EP3513767A1 (en) * 2018-01-18 2019-07-24 Bimeda Research & Development Limited Internal teat sealants and their use in the prevention of bovine mastitis in the dry cow
CA3087822C (en) * 2018-01-18 2022-08-02 Zoetis Broomhill Ip Limited Internal teat sealants and their use in the prevention of bovine mastitis in the dry cow
GR1010072B (el) 2019-05-15 2021-09-15 Αριστοτελειο Πανεπιστημιο Θεσσαλονικης - Ειδικος Λογαριασμος Κονδυλιων Ερευνας Βρωσιμα κτηνιατρικα σκευασματα ενδομαστικης προστασιας θηλαστικων και μεθοδος για την παρασκευη τους

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998026759A1 (en) * 1996-12-18 1998-06-25 Bimeda Research & Development Limited Antiinfective free intramammary veterinary composition
WO2000028817A1 (en) * 1998-11-12 2000-05-25 Westfall Geoffrey J Teat disinfectant

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2249523A (en) 1939-03-31 1941-07-15 Eastman Kodak Co Medicament
US2713020A (en) 1953-10-21 1955-07-12 Bristol Lab Inc Repository bismuth subsalicylate
US2772198A (en) 1954-11-08 1956-11-27 Standard Oil Co Method of killing flies with composition comprising pyrethrins and p-aminoazobenzene
NL103467C (zh) 1959-05-12
US3137623A (en) 1960-08-02 1964-06-16 Geigy Chem Corp Dermatological preparations comprising a corticosteroid and crotonic acid-nu-ethyl-omicron-toluidide
US3252859A (en) 1962-10-24 1966-05-24 Masti Kure Company Inc Colloidal silica-oil composition and method of using same
US3210248A (en) 1963-09-04 1965-10-05 Merck & Co Inc Emollient gel comprising lanolin alcohol, microcrystalline wax and a liqquid fatty acid ester
US3253859A (en) * 1964-03-20 1966-05-31 Tom M Merriman Safety pad
US3326808A (en) 1965-08-25 1967-06-20 Pfizer & Co C Antiseptic detergent composition
US3535419A (en) 1965-12-15 1970-10-20 Syntex Corp Veterinary compositions and methods
US3535427A (en) 1969-02-19 1970-10-20 Frosst & Co Charles E Skin moisturizing concentrate containing lanolin derivatives
US3597415A (en) 1969-05-14 1971-08-03 Upjohn Co Erythromycin amides and process for preparing same
US3728449A (en) 1972-05-01 1973-04-17 West Laboratories Inc Germicidal iodine compositions for application to skin tissue including teats of milk animals
GB1441747A (en) 1972-10-18 1976-07-07 Lazonby B Veterinary compositions
GB1455296A (en) 1973-05-24 1976-11-10 Beecham Group Ltd Veterinary treatment
CA1052697A (en) 1974-03-29 1979-04-17 Upjohn Company (The) Composition for treating mastitis in animals
US4034099A (en) 1974-03-29 1977-07-05 The Upjohn Company Compositions and method for treating mastitis in milk animals
US4049830A (en) 1974-11-13 1977-09-20 Milmark Research, Inc. Bovine teat dip
US4011312A (en) 1975-06-25 1977-03-08 American Home Products Corporation Prolonged release drug form for the treatment of bovine mastitis
US4140766A (en) 1977-10-25 1979-02-20 Kalogris Theodore P Method and composition for therapy and control of bovine mastitis
US4199602A (en) 1978-02-23 1980-04-22 Economics Laboratory, Inc. Control of mastitis and compositions therefor
US4258056A (en) 1978-12-18 1981-03-24 Economics Laboratory, Inc. Control of mastitis and compositions therefor
US4308859A (en) * 1979-08-01 1982-01-05 Child Laboratories Inc. Method of inhibiting mastitis in bovine animals
US4344967A (en) 1979-08-07 1982-08-17 Devro, Inc. Film forming composition and uses thereof
EP0081325A3 (en) 1981-12-09 1984-05-23 Beecham Group Plc Antibacterial compounds
US4401666A (en) 1982-02-01 1983-08-30 Olin Corporation Use of metallic salts of pyridine-2-thione-N-oxide to treat or prevent bovine mastitis
DE3203479A1 (de) * 1982-02-03 1983-08-11 Röhm Pharma GmbH, 6100 Darmstadt Verfahren zur herstellung stabilisierter waessriger bariumsulfatsuspensionen
US4610993A (en) 1984-08-08 1986-09-09 Olin Corporation Use of selected pyridine-N-oxide disulfide compounds to treat or prevent bovine mastitis
GB8629481D0 (en) 1986-12-10 1987-01-21 Beecham Group Plc Veterinary treatment
JPS63203628A (ja) 1987-02-19 1988-08-23 Taiyo Kagaku Co Ltd 動物の***炎治療剤
US4804530A (en) 1987-07-17 1989-02-14 The Procter & Gamble Company Anaerobe-selective antibacterial compositions and methods
JPH01294609A (ja) * 1988-02-09 1989-11-28 Toyo Kagaku Kenkyusho:Kk 歯科用根管充填用シーラー
JPH0352691A (ja) * 1989-07-20 1991-03-06 Iwao Takano 酸含有水
AU5574294A (en) 1992-12-08 1994-07-04 Bimeda Research & Development Limited Aqueous antibiotic composition for veterinary use
DE4402544C2 (de) 1994-01-28 1996-01-18 Chevita Gmbh Veterinärmedizinische Verwendung von Calciumformiat in Gel- oder Pastenform
US6187800B1 (en) 1996-06-20 2001-02-13 Novartis Animal Health U.S., Inc. Method for the prevention and treatment of mastitis
US6433068B1 (en) * 1997-03-07 2002-08-13 David S. Morrison Hydrocarbon gels as suspending and dispersing agents and products
CA2225352C (en) 1998-01-30 2003-10-21 Nam Fong Han Vegetable derived petroleum jelly replacement
ES2247834T3 (es) * 1998-10-29 2006-03-01 Penreco Composiciones de gel.
WO2000026285A1 (en) * 1998-10-29 2000-05-11 Penreco Gel compositions
EP1341524B1 (en) 2000-12-07 2011-10-19 Nycomed GmbH Pharmaceutical preparation in the form of a paste comprising an acid-labile active ingredient
KR100474945B1 (ko) 2002-01-10 2005-03-10 알앤엘생명과학주식회사 젖소의 원유 중 체세포 감소용 및 유방염의 예방 또는치료용 조성물
AUPS080802A0 (en) 2002-02-27 2002-03-21 Advanced Powder Technology Pty Ltd A zinc oxide powder for use in a sunscreen composition
JP2004196758A (ja) * 2002-12-16 2004-07-15 Shinobu Ito 家畜、ペットの皮膚粘膜炎症の予防治療用外用組成物
US20040197422A1 (en) * 2002-12-20 2004-10-07 Pfizer Inc Veterinary compositions for treating mastitis
US7087190B2 (en) 2003-03-20 2006-08-08 Ecolab Inc. Composition for the production of chlorine dioxide using non-iodo interhalides or polyhalides and methods of making and using the same
US20050191270A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-01 Hydromer, Inc. Anti-infectious hydrogel compositions
US20060094777A1 (en) * 2004-11-01 2006-05-04 Westfall Geoffrey J Teat disinfectant having zinc EDTA, and methods
US20070027119A1 (en) 2005-07-29 2007-02-01 Ahmed Fahim U Antibacterial composition and method of use
NZ549249A (en) 2006-08-18 2009-10-30 Univ Massey Methods for reducing the incidence of mastitis by administration of keratin
BRPI0719273A2 (pt) 2006-10-10 2014-03-11 Wisconsin Alumni Res Found Formulação selante intramamária para tetas e método de usar tal formulação a fim de reduzir ou eliminar defeitos visuais em queijos envelhecidos
NZ571347A (en) 2008-09-17 2010-04-30 Mastitis Res Ct Ltd Anti-infective formulation and methods of use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998026759A1 (en) * 1996-12-18 1998-06-25 Bimeda Research & Development Limited Antiinfective free intramammary veterinary composition
WO2000028817A1 (en) * 1998-11-12 2000-05-25 Westfall Geoffrey J Teat disinfectant

Also Published As

Publication number Publication date
CN103735574A (zh) 2014-04-23
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AU2007307778A1 (en) 2008-04-17
AU2007307778B2 (en) 2013-04-18
EP2450045A1 (en) 2012-05-09
JP5318770B2 (ja) 2013-10-16
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US20110052721A1 (en) 2011-03-03
ZA200902544B (en) 2010-08-25
EP2079477B1 (en) 2017-07-26
HK1197038A1 (zh) 2015-01-02
US7906138B2 (en) 2011-03-15
ES2644940T3 (es) 2017-12-01
KR101409636B1 (ko) 2014-06-18
EP2079477A2 (en) 2009-07-22
BRPI0719273A2 (pt) 2014-03-11
US8795714B2 (en) 2014-08-05

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Swinkels et al. Postpartum excretion of internal teat sealant after selective dry cow treatment of dairy cows
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