CN101537169A - 一种在畜禽上应用的转移因子溶液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
在畜禽上应用的转移因子溶液,将冷冻的猪脾脏用蒸馏水洗净后切成小块,加入无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,制成匀浆,以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,即为原液;去除病毒后配制加入烟酰胺作为稳定剂,用微孔滤膜除菌过滤;过滤后加入甘油作为耐热保护剂,直接分装。可在畜禽上应用,特点是直接用猪脾脏进行提取,节约人力和物力,提高了提取率。把耐热保护技术与转移因子相结合,实现了转移因子的常温保存。它可提高了机体抗病能力,解除免疫抑制和免疫耐受性,可产生紧急辅助治疗的作用,弥补了疫苗接种后抗体产生前的免疫空白。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域中一种用来提高畜禽免疫力的转移因子,特别涉及一种在畜禽上应用的转移因子溶液及其制备方法及在畜禽上的应用。
背景技术
随着现代化养殖规模化、集约化程度的不断提高,目前病毒性疾病已成为困扰养殖户的一大难题。现有的普遍的解决方法就是免疫,然而由于种种原因,有时难免会造成免疫失败,爆发非典型性传染病,给诊断和治疗带来一定困难在免疫失败后往往依赖抗生素治疗,造成了耐药菌株的增加和交叉感染的产生。转移因子作为一种细胞免疫增强剂,在防治疾病方面可发挥重要的作用,提高免疫后的免疫效果,有效提高机体的抗病能力。目前现有的转移因子溶液制备技术,通常是将动物的脾脏中的脂肪和大血管剔出后再提取,进行破壁冻融透析等一系列程序,此方法虽然简单,但是往往需要大量的人力和物力,且此种方法制备出的转移因子溶液只能在-15℃的条件下保存,给使用和运输都带来了很大的不便。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种在畜禽上应用的转移因子溶液及其制备方法。有效改善上述情况,巩固畜禽免疫后的免疫效果,使转移因子在畜牧业中得以广泛应用。为了提高转移因子溶液的产出率,本发明采用猪脾脏提取转移因子,并对传统转移因子的提取工艺进行比较优化,设计出出产率高生产成本低的转移因子制剂。
本发明的技术方案:
一种在畜禽上应用的转移因子溶液,其特征在于:是采用以下方法制备的:将冷冻的猪脾脏500g,用蒸馏水洗净后切成小块,加入1000ml无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,混匀后制成匀浆。以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,所得的滤液即为转移因子原液。将原液按照国家药品管理办法去除病毒后配制。配制时加入浓度范围为1.25%-2.5%的烟酰胺2ml作为稳定剂,用0.22μm微孔滤膜除菌过滤过滤后加入5g甘油作为耐热保护剂,直接分装,即得到转移因子溶液。
本发明在畜禽上应用的转移因子溶液的制备方法,其特征在于:将冷冻的猪脾脏500g,用蒸馏水洗净后切成小块,加入1000ml无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,混匀后制成匀浆。以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,所得的滤液即为转移因子原液。将原液按照国家药品管理办法去除病毒后配制。配制时加入浓度范围为1.25%-2.5%的烟酰胺2ml作为稳定剂,用0.22μm微孔滤膜除菌过滤过滤后加入5g甘油作为耐热保护剂,直接分装,即得到转移因子溶液。
本发明为在畜禽上应用的转移因子溶液,其特征在于:可与疫苗配合使用治疗细菌与病毒的混合性感染;用量:家禽:混饮,30日龄以下,0.1-0.2毫升/羽;30日龄以上,0.5毫升/羽。
本发明的有益效果:
本发明将现有的转移因子技术进行了改进,直接用猪脾脏进行提取,将脾脏采用组织捣碎机破壁后,通过高压均质机进行进一步的破壁,絮凝后离心,最后进行超滤,节约了大量的人力和物力,有效的提高了提取率同时把耐热保护技术与转移因子相结合,使转移因子的保存温度由-15℃提高到常温,实现了转移因子的常温保存,该技术既适应了畜牧业实际生产的需要,使转移因子溶液在运输和使用中再无须保持低温环境,同时转移因子溶液作为一种细胞免疫反应增强剂,提高了机体抗病能力,解除了机体的免疫抑制和免疫耐受性,对患病畜群可产生紧急辅助治疗的作用,也弥补了疫苗接种后抗体产生前的免疫空白。
具体实施方式:
本发明在畜禽上应用的转移因子溶液的制备方法,将冷冻的猪脾脏500g,用蒸馏水洗净后切成小块,加入1000ml无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,混匀后制成匀浆。以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,所得的滤液即为转移因子原液。将原液按照国家药品管理办法去除病毒后配制。配制时加入浓度范围为1.25%-2.5%的烟酰胺2ml作为稳定剂,用0.22μm微孔滤膜除菌过滤过滤后加入5g甘油作为耐热保护剂,直接分装,即得到转移因子溶液。
本转移因子溶液在畜禽上的应用:可与疫苗配合使用以巩固疫苗效果,弥补疫苗接种后抗体产生前的免疫空白;还可用于治疗畜禽细菌与病毒引起的混合感染性疾病。
Claims (3)
1、将冷冻的猪脾脏500g,用蒸馏水洗净后切成小块,加入1000ml无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,混匀后制成匀浆。以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,所得的滤液即为转移因子原液。将原液按照国家药品管理办法去除病毒后配制。配制时加入浓度范围为1.25%-2.5%的烟酰胺2ml作为稳定剂,用0.22μm微孔滤膜除菌过滤。过滤后加入5g甘油作为耐热保护剂,直接分装,即得到转移因子溶液。。
2、根据权利要求1所述的在畜禽上应用的转移因子溶液的制备方法,将冷冻的猪脾脏500g,用蒸馏水洗净后切成小块,加入1000ml无热源质蒸馏水,用组织捣碎机破碎细胞,混匀后制成匀浆。以60千帕的压力通过高压均质机后,加入絮凝剂进行絮凝。将絮凝后的匀浆离心,离心环境温度4℃,7000r/min,去除沉淀,留上清液备用。上清液用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为5000道尔顿超滤膜进行超滤,所得的滤液即为转移因子原液。将原液按照国家药品管理办法去除病毒后配制。配制时加入浓度范围为1.25%-2.5%的烟酰胺2ml作为稳定剂,用0.22μm微孔滤膜除菌过滤。过滤后加入5g甘油作为耐热保护剂,直接分装,即得到转移因子溶液。。
3、根据权利要求1所述的在畜禽上应用的转移因子溶液,其特征在于:可与疫苗配合使用以巩固疫苗效果,弥补疫苗接种后抗体产生前的免疫空白;还可用于治疗畜禽细菌与病毒引起的混合感染性疾病。。
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