CN101518205A - 一种茅膏菜无菌播种繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明主要涉及一种茅膏菜无菌播种繁殖方法，包括如下步骤：培养基的配制、种子采集与灭菌、种子萌发、增殖培养、壮苗培养、生根培养、移栽。基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；种子萌发培养基：1/5MS～1/2MS；增殖培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；壮苗培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；生根培养基：1/5MS～1/2MS或1/5MS+NAA0.01～0.5mg/L。本发明的优点是：繁殖速度快，生产健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及植物组培快繁技术领域，尤其涉及一种茅膏菜无菌播种繁殖方法。
背景技术
茅膏菜(Drosera peltata)又称捕虫草，茅膏菜科茅膏菜属植物，是食虫植物种类最多分布最广的一个大族，也是株形奇特、人工栽培较为麻烦的一类。茅膏菜为多年生草本，10～20厘米，根茎短，圆球形，叶互生，叶片半圆形，边缘密生能分泌粘液的腺毛，当小虫停落叶面时，即被粘液胶着，逐渐被腺毛分泌的蛋白质分解酶所消化。茅膏菜喜温暖、湿润和充足阳光，栽培土壤以透气性好的泥炭土和苔藓的混和基质较好。生长适温为20～30℃，冬季不低于5℃。茅膏菜是一种观赏性较强的植物，可作为一种环保型的家庭小盆栽之一，也是我国市场上近几年来刚刚流行的奇特花卉之一。茅膏菜还可以药用。茅膏菜市场主要依靠进口，国内进行工厂化生产茅膏菜的企业很少，而且不能满足国内市场的需要。茅膏菜的自然繁殖以球茎行营养繁殖，虽然种子产量较大，但实生苗更新能力较低；生产上主要以分株和扦插繁殖，但栽培要求技术很高，成活率不高。因此，在一定程度上制约了茅膏菜的工厂化生产。
发明内容
本发明要解决上述现有技术的缺陷，提供一种茅膏菜无菌播种繁殖方法。
本发明目的通过以下技术方案来实现：这种茅膏菜无菌播种繁殖方法，按如下步骤进行：
1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基：1/5MS～1/2MS；
(3)增殖培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；
(4)壮苗培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/5MS～1/2MS或1/5MS+NAA 0.01～0.5mg/L；
2)、种子采集与灭菌：在茅膏菜果实成熟高峰期，采集种子，经表面灭菌处理后备用；
3)、种子萌发培养：将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；
4)、增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达2～3厘米；
6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达约3～5cm、苗基部长出5～10根细根；
7)、移栽：将生根组培苗移栽于苔藓基质中，培育1～2个月至成苗。
所述的培养基，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基：1/2MS；
(3)增殖培养基：1/3MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L；
(4)壮苗培养基：1/4MS+BA 0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/5MS或1/5MS+NAA 0.05mg/L。
所述的灭菌处理是种子进行预处理，种子采集后先在4℃的冰箱中冷藏7天，取出种子用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍。
所述的种子萌发培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，暗培养10天～15天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d。
所述的增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
本发明的有益效果是：
本发时所提供的茅膏菜无菌播种繁殖方法，繁殖速度快，生产健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化、生产化生产。
具体实施方式
通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1
这种茅膏菜无菌播种繁殖方法，按如下步骤进行：
1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基：1/2MS；
(3)增殖培养基：1/3MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L；
(4)壮苗培养基：1/4MS+BA 0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/5MS或1/5MS+NAA 0.05mg/L；
2)、种子采集与灭菌：在茅膏菜果实成熟高峰期，采集种子，经表面灭菌处理后备用；
3)、种子萌发培养：将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；
4)、增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达2～3厘米；
6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达约3～5cm、苗基部长出5～10根细根；
7)、移栽：将生根组培苗移栽于苔藓基质中，培育1～2个月至成苗。
所述的灭菌处理是种子进行预处理，种子采集后先在4℃的冰箱中冷藏7d，取出种子用75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍。
所述的种子萌发培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，暗培养10天～15天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d。
所述的增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
实施例2：
本例中，基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；诱导培养基：1/2MS；增殖培养基：1/3MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L；壮苗培养基：1/4MS+BA 0.1mg/L；生根培养基：1/5MS或1/5MS+NAA 0.05mg/L。
其余步骤，条件均同于实施例1。
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
Claims (5)
1、一种茅膏菜无菌播种繁殖方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：
1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基：1/5MS～1/2MS；
(3)增殖培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；
(4)壮苗培养基：1/5MS～1/2MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/5MS～1/2MS或1/5MS+NAA0.01～0.5mg/L；
2)、种子采集与灭菌：在茅膏菜果实成熟高峰期，采集种子，经表面灭菌处理后备用；
3)、种子萌发培养：将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；
4)、增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达2～3厘米；
6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗冠径生长达约3～5cm、苗基部长出5～10根细根；
7)、移栽：将生根组培苗移栽于苔藓基质中，培育1～2个月至成苗。
2、根据权利要求1所述的茅膏菜无菌播种繁殖方法，其特征在于：所述的培养基，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/5MS～1/2MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基：1/2MS；
(3)增殖培养基：1/3MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L；
(4)壮苗培养基：1/4MS+BA 0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/5MS或1/5MS+NAA0.05mg/L。
3、根据权利要求1所述的茅膏菜无菌播种繁殖方法，其特征在于：所述的灭菌处理是种子进行预处理，种子采集后先在4℃的冰箱中冷藏7d，取出种子用75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍。
4、根据权利要求1所述的茅膏菜无菌播种繁殖方法，其特征在于，所述的种子萌发培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，暗培养10天～15天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d。
5、根据权利要求1所述的茅膏菜无菌播种繁殖方法，其特征在于，所述的增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
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